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    Este documento describe el medio de cultivo EMB Agar, el cual se utiliza para el aislamiento selectivo de bacterias Gram negativas como las enterobacterias. El medio contiene peptona, lactosa, sacarosa, fosfato dipotásico, eosina y azul de metileno como indicadores. Las bacterias que fermentan la lactosa y/o sacarosa forman colonias de color negro azulado, mientras que las que no las fermentan forman colonias incoloras. El medio permite un buen crecimiento de especies como E. coli,

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    Este documento describe el medio de cultivo EMB Agar, el cual se utiliza para el aislamiento selectivo de bacterias Gram negativas como las enterobacterias. El medio contiene peptona, lactosa, sacarosa, fosfato dipotásico, eosina y azul de metileno como indicadores. Las bacterias que fermentan la lactosa y/o sacarosa forman colonias de color negro azulado, mientras que las que no las fermentan forman colonias incoloras. El medio permite un buen crecimiento de especies como E. coli,

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    B0210106

    B0210105

    E.M.B. Agar (con Eosina y Azul


    de Metileno)
    Uso FóRmULa (en gramos por litro)
    Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aisla- PEPTonA ............................................................................10.0
    miento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y LACToSA ................................................................................... 5.0
    escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las SACAroSA ............................................................................5.0
    especies de la familia Enterobacteriaceae. FoSFATo diPoTáSiCo................................................................ 2.0
    EoSinA ....................................................................................... 0.4.
    FUndamento AzuL dE METiLEno ......................................................... 0.065
    El medio de cultivo combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con AGAr ................................................................................. 13.5
    la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aisla- miento pH FinAL: 7.2 ± 0.2
    selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram
    negativos. instRUCCiones
    Es nutritivo por la presencia de peptona que favorece el desarrollo Suspender 36 g del polvo en 1 litro de agua purificada. reposar 5
    microbiano. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición hasta
    la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está su disolución total. Esterilizar en autoclave 121°C durante 15 minu-
    dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejer- cen tos. distribuir en placas de Petri estériles.
    un efecto inhibitorio sobre una amplia variedad de bacterias Gram
    positivas. El agar es el agente solidificante. CaRaCteRístiCas deL pRodUCto
    Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un Medio de cultivo deshidratado: color púrpura, homogéneo, libre
    característico brillo metálico. Las cepas que utilizan la lactosa po- deslizamiento.
    seen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las Medio de cultivo preparado: color púrpura vinoso.
    que no lo hacen son incoloras. nota: La esterilización del medio de cultivo reduce el azul de meti-
    También, pueden crecer especies de Candida y se observan como leno al color naranja. El color púrpura se restaura por agitación. La
    colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite presencia de un precipitado en el medio esterilizado es normal y no
    el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. debe ser removido, ya que es parte esencial del mismo.
    crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes,
    mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas se aLmaCenamiento
    observan como colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
    aunque las cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa al Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
    0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a sus
    membranas. En este medio se obtiene además, un buen desarrollo pRoCedimiento
    de especies de Salmonella y Shigella. siembra:
    En superficie, por estriado directo a partir de la muestra.
    Contenido y ComposiCión En profundidad, para favorecer el desarrollo de clamidosporas.
    Código B0210105: envase x 100 g.
    Código B0210106: envase x 500 g.

    HoJA 1 dE 2
    E.M.B. Agar (con Eosina y Azul de Metileno)

    incubación: - Para la identificación de género o especie microbiana se deben


    En aerobiosis, a 35-37 °C durante 18-24. horas. realizar pruebas bioquímicas adicionales.
    - Algunas cepas de Salmonella y Shigella no crecerán en EMB
    inteRpRetaCión de Los ResULtados Agar.
    microorganismos fermentadores de lactosa y / o sacarosa: - durante la esterilización el azul de metileno puede precipitar. Es
    colonias de color negro azulado o amarronado. Pueden tener centro importante resuspender el precipitado mientras se distribuye en
    oscuro y brillo metálico. placas de Petri estériles el medio preparado.
    microorganismos no fermentadores de lactosa y sacarosa: - Conservar el medio preparado en placas a 2-8 ºC y protegido de la
    colonias del color del medio, incoloras. luz ya que los indicadores presentes son fotosensibles y pueden
    inhibir el desarrollo de algunas especies de Proteus si no se con-
    ContRoL de CaLidad servan apropiadamente.

    MiCroorGAniSMoS CrECiMiEnTo CArACTEríSTiCAS mateRiaLes neCesaRios no pRovistos

    dE LAS CoLoniAS Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de

    Escherichia coli Satisfactorio negro azuladas con brillo calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
    ATCC 25922 metálico miento.
    Escherichia coli Satisfactorio negro azuladas con brillo
    ATCC 8739 metálico pReCaUCiones
    Klebsiella pneumoniae Satisfactorio Mucosas confluentes, con - Solamente para uso diagnóstico in vitro. uso profesional exclu-
    ATCC 700603 centro oscuro sivo.
    Proteus mirabilis Satisfactorio incoloras - no utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
    ATCC 4.3071 ñado.
    Salmonella typhimurium Satisfactorio incoloras - no utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
    ATCC 14.028 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
    Shigella flexneri Satisfactorio incoloras - utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
    ATCC 12022 to.
    Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio incoloras - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
    ATCC 27853 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
    Enterococcus faecalis inhibición parcial incoloras puntiformes establecidas por el laboratorio.
    ATCC 29212 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
    Candida albicans inhibición parcial rosadas puntiformes va apropiadamente.
    ATCC 10231 - descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
    Staphylococcus aureus inhibido --- mismo según reglamentaciones vigentes.
    ATCC 25923
    ReFeRenCias
    - Holt-Harris and Teague. 1916. J. infect. dis. 18:596.

    ConTroL dE ESTEriLidAd rESuLTAdo - Levine. 1918. J. infect. dis. 23:4.3.


    Medio sin inocular Sin cambios - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
    maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
    LimitaCiones timore, Md.
    - En el caso de los microorganismos fermentadores, no se puede
    diferenciar el carbohidrato metabolizado. indiCaCiones aL ConsUmidoR
    - Este medio de cultivo es moderadamente inhibitorio ya que las utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
    cepas de enterococo y candida pueden desarrollar en el mismo, Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
    observándose como colonias de tamaño puntiforme.
    11/2015 - rEV .01

    símBoLos UtiLiZados

    diAGnÓSTiCo CÓdiGo nº ELABorAdor ESTÉriL nº dE LoTE nº FECHA dE LíMiTE dE inSTruCCionES HoJA 2 dE 2


    in ViTro dETErMinACiÓnES VEnCiMiEnTo TEMPErATurA dE uSo
    LABORATORIOS BRITANIA S.A.
    LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
    CABA - ARGENTINA
    TEL/FAX 54 11 4306 0041

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