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Prac.08-Bq-Ifa-Díaz Dávila Milagros Nicolle.

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Este documento presenta los objetivos, materiales y procedimientos de un experimento de biología ambiental sobre la anatomía foliar, pigmentos fotosintéticos y cromatografía. Se realizaron cortes de hojas de maíz, tuna y clavel para observar su anatomía, y se extrajeron pigmentos de espinaca y alfalfa para determinar su contenido y fluorescencia mediante cromatografía.

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Título original

PRAC.08-BQ-IFA-DÍAZ DÁVILA MILAGROS NICOLLE.

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Este documento presenta los objetivos, materiales y procedimientos de un experimento de biología ambiental sobre la anatomía foliar, pigmentos fotosintéticos y cromatografía. Se realizaron cortes de hojas de maíz, tuna y clavel para observar su anatomía, y se extrajeron pigmentos de espinaca y alfalfa para determinar su contenido y fluorescencia mediante cromatografía.

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÈN

INGENERIA FORESTAL Y
AMBIENTAL

DOCENTE:

MARTINEZ SOVERO GUSTAVO ADOLFO

CURSO:

BIOQUIMICA AMBIENTAL

ALUMNA:

DIAZ DAVILA MILAGROS NICOLLE


I. INTRODUCCION

II. OBJETIVOS

- Reconocer las adaptaciones estructurales de las hojas para realizar


fotosíntesis.
- Identificar pigmentos fotosintéticos y vacuolares que se encuentran
comúnmente en la célula vegetal.
- Observar el fenómeno de fluorescencia.
- Observar y analizar la técnica de cromatografía.

III. MARCO TEÓRICO


A. MATERIALES
B. DE LABORATORIO:

o Mortero y pilón.
o Matraz de 250 ml.
o Embudos.
o Vaso de precipitación de 250 ml.
o Ganchos de plástico
o Papel filtro.
o Microscopio.
o Láminas porta objetos y laminillas cubre objeto.
o Navaja
o Foco rojo y azul
o Socate, enchufe y cable

C. BIOLÓGIGO:

 Hojas de espinaca, alfalfa, maíz, clavel y cladiolo de tuna.

IV. EXPERIENCIAS

a) Experiencia N°01: Observación de la anatomía foliar C3, C4 y


Kranz

- Realizar cortes transversales finos en el limbo de maíz, clavel y cladiolo


de tuna.
- Seleccionar los cortes más delgados y colocar sobre placas de tinción,
adicionar safranina tal forma que cubra los cortes durante cinco
minutos, eliminar el exceso de colorante y realizar dos enjuagues con
etanol al 70%.
- Agregar una mezcla de glicerina: agua (1:3) por cinco minutos.
- Realizar el montaje de los cortes sobre láminas en que se tenga
dispuesta una gota de glicerina y cubrir con laminilla cubreobjetos,
- Llevar al microscopio y observar a 40 y 100X.
Analizar y compara con las otras muestras.
b) Experiencia N°02: Extracción y determinación del contenido de
clorofilas a, b y total, y carotenoides en tejido foliar, mediante la
técnica de cromatografía en papel.

- Escoger y lavar hojas frescas de espinaca y acelga, eliminar las venas


mayores y cortar en pedazos pequeños.
- En un mortero colocar los pedazos de hojas por separado (un grupo
trabaja con acelga y otro con espinaca), agregar alcohol al 95% y frotar
hasta obtener 100 ml de extracto previo filtrado.
- En un vaso de precipitación colocar los 100 ml y embeber el papel filtro
por 30 minutos.
Observar y analizar.
Calcular el Rf de cada color por especie.

c) Experiencia N°03: Determinación del fenómeno de fluorescencia en


clorofila.

- Escoger y lavar hojas frescas de espinaca y acelga, eliminar las venas


mayores y cortar en pedazos pequeños.
- En un mortero colocar los pedazos de hojas por separado (un grupo
trabaja con acelga y otro con espinaca), agregar alcohol al 95% y frotar
hasta obtener 100 ml de extracto previo filtrado.
- Someter el filtrado a luz roja y luz azul.
Observar y analizar.

V. RESULTADOS

40x 100x

Figura 1. Tuna, color rojo: tejido esponjoso CO2 y color verde: tejido empalizado
Tejido esponjoso Tejido empalizado

Figura 2. Anatomía foliar del maíz

Figura 3. Extracción de las hojas de espinaca y colado en el papel filtro.


Figura 4. Extracción de las hojas de alfalfa y colado en el papel filtro.

ESPINACA ALFALFA

Figura 5. Proceso de cromatografía de la espinaca y alfalfa.


ESPINACA ALFALFA

Carotenos

Santofilas

Clorofila B

Clorofila A

Figura 6. Cromatografía de la espinaca y alfalfa. Todos los pigmentos


observados tienen como función captar todas las longitudes de ondas.
Figura 7. La clorofila presente en las hojas absorbe la
energía de la luz azul y la emite en forma de luz con un color
diferente.
Figura 8. La clorofila presente en las hojas absorbe la
energía de la luz roja y la emite en forma de luz con un color
diferente.

VI. CONCLUSIONES
VII. CUESTIONARIO
VIII. BIBLIOGRAFÍA

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