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E. E. S. T.
Nº 4 DE GRAL SAN MARTIN
ING. EMILIO MITRE “Desde 1926 formando técnicos comprometidos con el país”
Tecnologías de las Energías Renovables
TP Laboratorio: Cromatografía
AÑO Y DIVISION: 6º5º AÑO LECTIVO: 2024 .
ALUMNOS: Agüero, Álvarez, D'Amore, Duarte . PROFESORA: Rodríguez Virginia . E.E.S.T. Nº 4 de SAN MARTIN TP: ING. EMILIO MITRE Cromatografí Alumnos: Agüero, Álvarez, D'Amore, Duarte a
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Página 3 de 6 E.E.S.T. Nº 4 de SAN MARTIN TP: ING. EMILIO MITRE Cromatografí Alumnos: Agüero, Álvarez, D'Amore, Duarte Objetivos: a Separar pigmentos vegetales con cromatografía en papel. Fundamentación: Los pigmentos son sustancias que absorben ciertas frecuencias de la luz visible y reflejan otras, de manera tal que transmiten un color especifico y concreto. Hay diferentes tipos de pigmentos, pero los que adquieren relevancia en esta experiencia son los pigmentos vegetales, específicamente los fotosintéticos.
Los pigmentos fotosintéticos son los encargados de transformar la energía lumínica del sol en energía química y están ubicados en los cloroplastos (orgánulo de las células vegetales), en forma de complejos pigmento-proteínas llamados fotosistemas. El pigmento fotosintético mas importante es la clorofila-a, ya que es la encargada del proceso de fotosíntesis, hay otros pigmentos accesorios que absorben otros tipos de ondas complementando el proceso metabólico como la clorofila-b, los carotenoides, flavonoides, xantofilas, antocianinas o quinonas. (Acosta, 2021) (Salviati, 2012) (Subirats, 2011) (innoplant, 2021)
La cromatografía en papel es un mecanismo de separación de mezclas utilizada de manera
pedagógica mas no de manera analítica para ver las diferentes sustancias presentes en una mezcla homogénea. Funciona gracias a que en el proceso hay una fase movil liquida (compuesta por agua o etanol y los componentes a analizar) la cual es adsorbida por una fase estacionaria (el papel de cromatografía). Los elementos diluidos en la fase estacionaria tienen comportamientos físicos diferentes con el papel, siendo los que “se agarran más” al papel tienen una mayor adsorción por ende un mayor tiempo en la fase estacionaria. Este comportamiento da como resultado que los elementos disueltos en el solvente se “acomoden” en el papel en forma de estratos, permitiendo analizar que compuestos se encuentran en la solución. (barcelona) (ruiz, 2019)
Materiales: Hojas de diversas plantas (Lechuga, Espinaca, Repollo colorado y tradescantia pallida) Arena Alcohol etílico Mortero y pilón Soporte universal equipado con un aro de embudo con nuez Embudos Filtro de papel Recipientes de vidrio Papel secante
Página 4 de 6 E.E.S.T. Nº 4 de SAN MARTIN TP: ING. EMILIO MITRE Cromatografí Alumnos: Agüero, Álvarez, D'Amore, Duarte Procedimientos a 1) Lavar una hoja de cada muestra y cortar en pequeños trozos sacando las nervaduras 2) Machacar en un portero con una cucharadita de arena y una pequeña cantidad (ml) de alcohol etílico 3) Colocar otra cantidad (ml) de alcohol etílico y filtrar 4) Colocar el filtrado en un frasco (a una altura de 1,5cm aproximadamente) 5) Colocar una tira de papel secante de 2cm de ancho tocando la muestra. 6) Dejar 30/45 minutos y observar (Aclaración: A continuación, se inserta una tabla con la cantidad de alcohol utilizada en cada muestra) Muestra Cantidad de alcohol Cantidad de alcohol utilizado en el paso 2 utilizado en el paso 3 Lechuga 5ml 20ml Espinaca 8ml 20ml Repollo colorado 10ml 20ml tradescantia pallida 10ml 15ml
Conclusiones: Página 5 de 6 E.E.S.T. Nº 4 de SAN MARTIN TP: ING. EMILIO MITRE Cromatografí Alumnos: Agüero, Álvarez, D'Amore, Duarte 1) Los estratos adsorbidos por el papel a corresponden a diferentes pigmentos fotosintéticos, a continuación, un análisis cualitativo de cada muestra:
Lechuga: Se puede observar nítidamente la diferencia entre la clorofila-a y la clorofila-b
y luego una gradiente de xantofilas y carotenos. La extracción de pigmentos fue mediocre. Espinaca: Se observa una diferencia difusa entre la clorofila-a y la clorofila-b, luego las xantofilas y una gradiente entre carotenos y antocianinas. Se aprecia una buena extracción. Repollo colorado: Solamente se puede apreciar una gradiente de antocianinas. La extracción fue deficiente. Tradescantia pallida: Se nota una diferenciación entre las clorofilas a y b y una separación nítida de una alta concentración de xantofilas y una leve concentración de carotenos. Se obtuvo una buena extracción. 2) El análisis cromatográfico de las muestras permite comprender la proporción de la cantidad de los diferentes pigmentos en cada hoja, brindando información que permite realizar hipótesis acerca del comportamiento metabólico de la planta.
Bibliografía Acosta, M. B. (6 de 5 de 2021). Ecologiaverde.com. Obtenido de https://www.ecologiaverde.com/pigmentos- fotosinteticos-que-son-tipos-y-ejemplos-3299.html barcelona, u. d. (-). Obtenido de https://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia_fonament.html innoplant. (27 de 7 de 2021). innoplant.es. Obtenido de https://innoplant.es/2021/09/27/la-importancia-del- estudio-de-los-pigmentos-fotosinteticos/ ruiz, B. (1 de 3 de 2019). wordpress. Obtenido de https://biologiageologiaiessantaclarabelenruiz.files.wordpress.com/2019/03/4-pracc81ctica.- separaciocc81n-de-pigmentos-fotosintecc81ticos..pdf Salviati, D. (8 de 8 de 2012). Slideshare. Obtenido de https://es.slideshare.net/danielsalviati/el-color-y-los- pigmentos-biolgicos Subirats, F. (26 de 7 de 2011). Sobre colores. Obtenido de https://sobrecolores.blogspot.com/2011/09/el-color- y-los-pigmentos-biologicos.html
