1. CONCEPTO DE BIOCATALIZADOR.

Los enzimas o biocatalizadores son proteínas globulares que actúan

como catalizadores aumentando la velocidad de aquellas reacciones
que son energéticamente posibles.

Un catalizador es una sustancia que acelera una reacción química hasta

convertirla en instantánea o casi instantánea, actuando a muy bajas
concentraciones y sin sufrir ninguna alteración.

El hecho de que aceleren las reacciones es para saber si son reversibles

o irreversibles o si son espontáneas o no. Esto está determinado por las
leyes de la termodinámica.

Las reacciones químicas espontáneas tienden a ocurrir, a mayor o menor

velocidad, hasta alcanzar un estado nal de equilibrio caracterizado por
ser un estado de mínima energía libre y máximo desorden (entropía).

Las principales características de los enzimas son:

• Son solubles en agua.
• Pueden actuar a nivel intra o extracelular.
• Tienen una alta especi cidad.
• Tienen un alto poder catalítico.
• No cambian durante la reacción: se recuperan intactos una vez terminada.
• Actúan en soluciones diluidas y a pHs y temperaturas suaves.
• Se necesitan en muy poca cantidad, porque no se consumen en la reacción.
• No desplazan la constante de equilibrio de la reacción para que se obtenga más producto, sólo
favorecen que se obtenga la misma cantidad de producto en menos tiempo.

2. MECANISMO DE ACCIÓN DE LOS ENZIMAS.

En una transformación dada S → P, S representa las moléculas que reaccionan (sustratos) que
constituyen el estado inicial y P representa los productos.

La reacción química S → P es un proceso posible si la energía de los productos es menor que la

de los sustratos. Pero hay una barrera de energía que los separa, llamada energía de activación.
De no ser por ella, los sustratos no existirían ya que no serían estables y se transformarían
inmediatamente en productos.
Esto debe a que la transformación de sustratos en productos no sucede directamente, se
necesita un paso intermedio en el que se activan los sustratos, de modo que sus enlaces se
debilitan y se favorece su ruptura. Este paso intermedio se llama estado activado (S∗) y para
conseguirlo se requiere un aporte energético: la energía libre de activación.

Cuanto mayor sea la energía de activación, más lenta

será la reacción, porque será más difícil para el (los)
sustrato (s) alcanzar el estado de transición.

El aumento de temperatura aumenta la velocidad de

las reacciones porque hace que los enlaces se vuelvan
inestables y porque produce un aumento en el
movimiento de los reactivos con los que es más
probable que colisionen y reaccionen.

Los enzimas aceleran las reacciones al disminuir la

energía de activación, haciendo que el sustrato
alcancen el estado activado antes. Esta disminución
de la energía de activación se logra mediante la unión
del enzima al sustrato(s) para formar un complejo
enzima-sustrato (E-S).
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 La reacción enzimática tiene lugar en dos pasos: primero el sustrato se une al enzima a través de
enlaces débiles y luego el producto se separa del enzima, que se recupera sin cambios.

S + E — ES — E-P — P+E

La unión del enzima al sustrato tiene el mismo efecto que el aumento de temperatura. Por un
lado, permite que el enzima actúe sobre el/los sustrato/s debilitando sus enlaces y favoreciendo
su ruptura; por otro lado, favorece el choque entre sustratos porque se adhieren a su super cie y
esto les permite reaccionar entre sí.

3. ESTRUCTURA DE LOS ENZIMAS

En la cadena polipeptídica de un enzima se pueden distinguir 3 tipos de aminoácidos:
• Aminoácidos estructurales: sin función dinámica, mantienen la estructura tridimensional del
enzima.
• Aminoácidos de jación: encargados de establecer enlaces débiles con el sustrato.
Constituyen el centro de jación del enzima.
• Aminoácidos catalizadores: intervienen en la catálisis. Constituyen el centro catalítico del
enzima.

Los centros de jación y catalítico forman el centro activo del enzima, que es el responsable de
su especi cidad.

Algunos enzimas para realizar su función necesitan la colaboración de otros compuestos que se
denominan cofactores.
Los cofactores orgánicos se denominan coenzimas, de los cuales algunos ejemplos de gran
importancia son: ATP (moneda energética), y coenzima A (CoA) (transportador de grupos acilo).

4. PROPIEDADES DE LOS ENZIMAS. ESPECIFICIDAD.

La característica más destacada de los enzimas es su alta especi cidad que consiste en la
capacidad de los enzimas de catalizar un solo tipo de reacción química o un número reducido de
estas.
Esta propiedad se debe a que para realizar su función deben unirse al sustrato y formar un
complejo enzima-sustrato, para lo que el enzima debe tener una conformación espacial que
permita que el sustrato encaje perfectamente en su centro activo.

Hay dos modelos que tratan de explicar esta unión:

• Modelo de llave y cerradura, postulado por Fischer en 1894. Propone que el sustrato encaja
en el centro activo de la enzima como lo hace una llave
en su cerradura. Es el modelo clásico.

• Modelo de ajuste inducido o del guante y la mano,

postulado por Koshland en 1958 al observar que los
centros activos de algunos enzimas cambian su forma
tridimensional en respuesta a la presencia del sustrato
hasta que encajan. Así, el sustrato induce la forma del
enzima para que se produzca el ajuste.

5. NOMENCLATURA.
Muchos enzimas tienen nombres especí cos que se conservan debido a su uso tradicional, la
nomenclatura más común se basa en el criterio de especi cidad.

Cada enzima se nombra con un nombre compuesto por el nombre del sustrato, por el
nombre de la acción o por ambos y el su jo -asa. Por ejemplo: lipasa (hidroliza lípidos)
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 6 CINÉTICA ENZIMÁTICA.

La cinética enzimática estudia las variaciones de velocidad de las

reacciones catalizadas enzimáticamente en diferentes condiciones
experimentales. Leonor Michaelis y Maud Menten, postularon la
formación de un complejo enzima-sustrato mediante la unión del
sustrato al centro activo de la enzima como paso intermedio para
la formación del producto.

Michaelis y Menten encontraron que, para una concentración de

enzima ja, la velocidad inicial de una reacción catalizada
enzimáticamente seguía una función como la representada en la
siguiente grá ca:

En la grá ca se observa que la velocidad inicial (V0) depende de la concentración de sustrato

([S]), pero no linealmente sino hiperbólicamente. En el grá co se pueden distinguir tres regiones
con diferentes características:

1. A [S] bajas (zona 1 de la curva) la velocidad depende casi linealmente de la [S] (la curva es
una línea recta). Esto se debe a que a bajas [S], cuanto mayor sea esta concentración más
probable es que S encuentre con el enzima (E) para formar el complejo ES y, por lo tanto, más
rápida será la transformación de S en P.

2. A [S] mayores (zona 2 de la curva) la función ya no es una línea recta, sino una curva con
pendiente cada vez menor, es decir, que cada incremento de [S] produce cada vez menor
incremento de la velocidad inicial.

Este comportamiento se debe a que parte de las moléculas del enzima ya se encuentran unidas
al sustrato, por lo que aunque aumente la concentración de este, no hay mayor probabilidad de
encontrar enzima libre con la que unirse para formar el complejo ES.

3. Finalmente, a partir de cierto valor de [S], zona 3 de la curva, no se vuelve a incrementar la V0,
es decir, se llega a una velocidad máxima (VMáxima) que ya no depende de la [S].

Esto ocurre porque a una [S] alta todas las moléculas de enzima están unidas a moléculas de
sustrato. Para que nuevos sustratos se puedan unir al enzima tienen
que esperar a que quede libre. La Vmáxima depende entonces de la
velocidad de disociación del complejo ES para liberar el producto y
regenerar el enzima.

Ecuación de Michaelis-Menten que establece la relación cuantitativa

entre la velocidad inicial (v0), la velocidad máxima (Vmáx), la concentración de sustrato ([S]), y
una constante, llamada constante de Michaelis-Menten (KM), característica de cada enzima.

• Constante de Michaelis-Menten (KM): es constante y tiene un valor determinado para cada

enzima y da una idea de la a nidad del enzima por el sustrato.

Cuanto menor sea KM mayor a nidad y mayor la velocidad de la reacción.

El valor de KM se puede determinar experimentalmente ya que coincide con la [S] en la que la
velocidad de reacción es la mitad de la velocidad máxima.

• Velocidad máxima (vmáx): también es constante y

característica de cada enzima. Se alcanza cuando
todo el enzima está saturado y, por tanto, depende
de la velocidad a la que se disocia el complejo ES
liberando el producto y el enzima intacto.

7. FACTORES QUE AFECTAN A LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA.

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 Debido a su naturaleza proteica, los enzimas se ven afectados en su actividad y estructura por
los mismos factores que afectan a otras proteínas, principalmente el pH y la temperatura, pero
también por otros factores especí cos. Son principalmente:

• pH. Su efecto depende de si se mantiene o no la conformación tridimensional del enzima y, por

tanto, su actividad.
◦ A pHs extremos, las proteínas se desnaturalizan y pierden actividad.
◦Dentro de los límites en los que el enzima mantiene estable su conformación, el pH
condicionará la facilidad de unión del enzima al sustrato y las condiciones físico-químicas del
centro activo, por tanto, afectará a su actividad.

• Temperatura. El aumento de temperatura produce un aumento de la

actividad enzimática, siempre que no se supere la temperatura a la que
se desnaturaliza el enzima.

• Concentración de sustrato. la velocidad de acción depende de la

concentración del sustrato. Dado que la mayoría de los enzimas y
sustratos se encuentran en las células en concentraciones muy bajas, se
han adoptado varias estrategias para aumentar esa concentración.

• Compartimentación celular. Muchas de las reacciones tienen lugar dentro de pequeños

orgánulos donde es posible concentrar enzimas y sustratos. De esta forma, además, no es
necesario tener todos los enzimas y todos los sustratos en todas las partes de la célula.

• Complejos multienzimáticos. Son grupos de enzimas que intervienen en una secuencia de

reacciones que tienen lugar consecutivamente, de modo que el producto resultante de una
reacción es el sustrato de la siguiente y así sucesivamente. Esto asegura que los productos no
se diluyen. En muchos casos, los complejos multienzimáticos están anclados en las
membranas de los orgánulos, lo que optimiza aún más su acción.

• Cofactores. son sustancias que se combinan con el enzima y potencian su actividad. Suelen
ser cationes metálicos como cobre, magnesio, hierro o zinc. Cuando son de naturaleza
orgánica, se denominan coenzimas.

8. INHIBICIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA.

Los inhibidores son sustancias especí cas que disminuyen parcial o totalmente la actividad de
una enzima. La inhibición es muy importante porque constituye un mecanismo de regulación de
la actividad enzimática. Puede ser fundamentalmente de dos tipos:

• Inhibición irreversible o envenenamiento del enzima. El inhibidor es una molécula que se

une fuerte y permanentemente al enzima, generalmente en su centro activo, alterando su
estructura e inutilizándolo, por lo que el enzima ya no recupera su actividad catalítica.

• Inhibición reversible. El inhibidor se une al enzima formando un complejo E-I no permanente,

por lo que se disocia fácilmente y el enzima se recupera para actuar de nuevo. Existen dos
tipos que se diferencian fácilmente estudiando su comportamiento cinético.

Competitiva: el inhibidor compite con el sustrato por el sitio activo. Como el inhibidor (I) ocupa
el sitio activo evita que el sustrato se una al enzima. Los inhibidores competitivos tienen una
estructura similar a la del sustrato y se combinan con el enzima para formar un complejo E-I

El efecto del inhibidor se puede anular o disminuir simplemente aumentando la concentración de

sustrato, por lo que la reacción con inhibidor alcanza la misma velocidad máxima que sin
inhibidor.

No competitiva: el inhibidor se une al enzima en un lugar distinto del centro activo,

modi cando la conformación tridimensional del enzima. Algunos solo alteran la capacidad
catalítica del enzima y otros también afectan la unión del sustrato al sitio activo. Este tipo de
inhibidores impide que se alcance la misma velocidad máxima que en la reacción sin inhibidor.
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