Ejemplo LABORATORIO - DE - BIOLOGIA
Ejemplo LABORATORIO - DE - BIOLOGIA
Ejemplo LABORATORIO - DE - BIOLOGIA
Josefinos de Murialdo
2022-2023
PRÁCTICA DE LABORATORIO #7
NOMBRE:
DOCENTE: Ing. Andrea Izquierdo Cortez
ASIGNATURA: Biología CURSO: Tercero PARALELO:
FECHA: PARCIAL: Primer QUIMESTRE:
Segundo
ACTIVIDAD 1
TEMA: Microbiología
ACTIVIDAD 2
OBJETIVOS: Realizar una tinción simple de bacterias procedentes del yogurt y del sarro dental permitiendo
identificar su morfología y clasificación.
MATERIALES:
Portaobjetos
Cubreobjetos
Caja Petri
Gotero
Mechero de alcohol
Pinza
Palillos de madera
Papel adsorbente (servilleta)
Guantes/Mascarilla
Microscopio
Yogurt natural
Azul de metileno
Alcohol 96%
Agua
MARCO TEÓRICO:
La tinción es una técnica que permite observar microorganismos en función de la capacidad de los mismos para
retener o no determinadas sustancias colorantes, lo que depende de la carga de la célula y del colorante.
Los colorantes pueden ser de distintos tipos:
Catiónicos. Son sustancias que tienen carga positiva. Penetran en el interior de las células y las tiñen.
Ejemplos: azul de metileno, cristal violeta, safranina.
Aniónicos. Con carga negativa. No penetran en el interior celular, de modo que no tiñen las células, sino el
entorno. En este caso se habla de tinción negativa. Ejemplos: eosina, nigrosina.
Liposolubles. Se mezclan con los lípidos celulares y los tiñen. Ejemplo: negro sudán.
¡Hacer el bien, pero hacerlo bien!
San Leonardo Murialdo
Las tinciones pueden ser:
Simples. Utilizan un solo colorante. Se basan en el hecho de que las células tienen una composición
química diferente a la de su entorno, de modo que ambos se comportan de forma diferente frente a un
colorante. El colorante tiñe las células (azul de metileno, safranina) o no (nigrosina).
Diferenciales. Se basan en el hecho de que distintos tipos de células tienen distinta composición química, y
por lo tanto reaccionan de forma diferente frente a una tinción, lo que permite clasificar los
microorganismos en diferentes grupos, según su capacidad de tinción. En este apartado están dos tinciones
de importancia taxonómica y médica: la tinción de Gram y la de ácido-alcohol resistencia (de Ziehl-
Neelsen). Estas tinciones utilizan más de un colorante.
Selectivas. Se basan en el hecho de que distintas estructuras celulares tienen distinta composición química,
de modo que se tiñen selectivamente con ciertos colorantes. Ej; tinción de esporas, de flagelos, de paredes
celulares, de corpúsculos metacromáticos. Pueden utilizarse uno o más colorantes.
PROCEDIMIENTO 1:
Colocar en el portaobjeto una muestra de yogurt con la ayuda del palillo (procurar tomar la muestra de la parte
superior).
Diluir la muestra de yogurt con una gota de agua.
Con la ayuda del palillo extender la muestra por el portaobjeto (frotis)
Tomar el portaobjeto con la pinza y pasarlo rapidamente unas 3 veces por encima de la llama del mechero de tal
modo que no se caliente (fijación por calor) hasta que la muestra se seque. Con este procedimiento las bacterias
mueren y se vuelven más permeables.
Colocar la preparación sobre la caja petri y agregar un par de gotas de alcohol, procurando que se reparta
uniformemente y dejarlo secar. Este procedimiento permite eliminar la grasa de la muestra.
Teñir la preparación con unas gotas de azul de metileno y dejarlo actuar por 5 minutos, transcurrido el tiempo lavar
la muestra con agua.
Colocar el cubreobjetos y secar bien el portaobjetos con el papel absorbente.
Observar la muestra en el microscopio.
OBSERVACIONES:
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GRÁFICOS:
PROCEDIMIENTO 2:
Con un palillo de dientes tomar una pequeña porción de sarro dental y disolverla en una gota de agua sobre
el portaobjetos.
Tomar el portaobjeto con la pinza y pasarlo rapidamente unas 3 veces por encima de la llama del mechero de tal
modo que no se caliente (fijación por calor) hasta que la muestra se seque. Con este procedimiento las bacterias
mueren y se vuelven más permeables.
Teñir la preparación con unas gotas de azul de metileno y dejarlo actuar por 2-3 minutos, transcurrido el tiempo
lavar la muestra con agua.
Colocar el cubreobjetos y secar bien el portaobjetos con el papel absorbente.
Observar la muestra en el microscopio
OBSERVACIONES:
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GRÁFICOS:
Elaborado por: