Especificación Medio líquido para el enriquecimiento selectivo de Salmonella de alimentos y otros materiales, según las normas ISO y FIL-IDF. Presentación 20 Tubos Encajado Caducidad Almacenamiento Tubo 16 x 113 mm 1 caja de 20 tubos de vidrio de 16x113 mm , 10 meses 8-25 ºC con: 10 ± 0.3 ml rotulados y con tapón metálico- no pinchable .
Composición Composición (g/l): Peptona de soja.............................. 4,500 Cloruro sódico................................. 7,200 Fosfato monopotásico.....................1,260 Fosfato dipotásico........................... 0,180 Cloruro magnésico anhidro............. 13,400 Verde de malaquita......................... 0,036 Descripción/Técnica Descripción: Este medio de cultivo es una modificación del caldo R10 para enriquecimiento de salmonelas de Rappaport, o del caldo RV de Vassiliadis et al. (1976), realizada por Schothort y Renaud en 1983. Las modificaciones afectan a la concentración del cloruro magnésico y al tamponamiento del medio. Muestra una gran selectividad hacia Salmonella y produce mejores rendimientos que otros medios, especialmente tras un enriquecimiento previo y una incubación a 41 ± 0,5ºC. El medio Rappaport-Vassiliadis cumple las especificaciones de la APHA para el examen de alimentos. El verde de malaquita y el cloruro de magnesio inhiben gran parte de los microorganismos que se suelen encontrar en el intestino, pero no afectan a la proliferación de la mayoría de las salmonelas. El verde de malaquita inhibe el crecimiento de Shigella. La peptona de soja mejora el crecimiento de Salmonella y el bajo pH aumenta la selectividad.
Técnica: 1. Preparar un cultivo inicial de la muestra en agua de peptona tamponada con una proporción 1/10 (m/V) 2. Transferir 0.1 ml de cultivo inicial no selectivo de 18 ± 2 h. 3. Incubar a 41 ± 0,5 º C durante 24 ± 3 h. 4. Resembrar con asa de platino sobre medio de cultivo sólido selectivo (XLD, BPLS,...) para obtener colonias aisladas 5. Incubar los medios selectivos a 37 ºC durante 24 ± 3 h. Enumerar y confirmar aquellas colonias características de Salmonella (según el medio sólido selectivo utilizado).
Control de Calidad Control Físico/Químico Color : Azul turquesa pH: 5,2 ± 0,2 a 25ºC Control de Fertilidad Inocular: rango práctico 100 ± 20 UFC; Min. 50 UFC (Productividad) /104-106 (Selectividad)
Control microbiológico según normativa ISO 11133:2014/ A1:2018.
Metodología analítica acorde con ISO 11133:2014/A1:2018; A2:2020.
Aerobiosis. Incubacion 41,5±1 ºC. Lectura 24h ± 3h. Confirmar en XLD (Pr) y TSA (Select.) Microorganismo Desarrollo Enterococcus faecalis ATCC® 29212, WDCM 00087 Inhibido. Confirmado en TSA a 37ºC±1 lectura 24 ± 3h. Escherichia coli ATCC® 25922, WDCM 00013 Inhibición parcial. Confirmado en TSA a 37ºC±1 lectura 24 ± 3h. S. typhimurium (14028) + E. coli (8739) + Ps. (27853) Coln. caract. de Salmonella in XLD (37ºC±1 / 24 ± 3h) ≥ 10 UFC. Control de Esterilidad Incubación 48 h a 30-35ºC y 48 h a 20-25 ºC: SIN CRECIMIENTO Verificación a 7 días tras incubación en las mismas condiciones.
Bibliografia · ATLAS, R.M., L.C. PARKS (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press, Inc. London. · DOWNES, F.P. & K. ITO (2001) Compendium of Methods for the Examination of Foods. 4 th ed. APHA. Washington. USA. · FDA (Food and Drug Adminstrations) US (1998) Bacteriological Analytical Manual. 8th ed. Revision A. AOAC Internacional. Gaithersburg. MD. USA. · FIL-IDF 93:2001 Standard. Milk and Milk Products. Detection of Salmonella. Brussels. · HORWITZ, W. (2000) Oficial Methods of Analysis of AOAC International. Gaithersburg. MD. USA. · ISO Standard 6579-1 (2017) Microbiology of food chain - Horizontal method for the detection, enumeration and serotyping of Salmonella - Part 1 : Detection of Salmonella spp. · ISO 6785:2001 Standard. Milk and Milk Products. Detection of Salmonella. . ISO 11133:2014/ Adm 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media. · RAPPAPORT, F., N. KONFORTI & B. NAVON (1956) A new enrichment medium for certain salmonellae. J. Clin. Pathol. 9:261-266. · VAN SCHOTHORST, M. & A.M. RENAUD (1983) Dynamics of Salmonella isolation with modified Rappaport's Medium (R10). J. appl. Bact. 54:209-215. · VASSILIADIS, P. (1983) The Rappaport Vassiliadis (RV) enrichment medium for the isolation of salmonellas: An overview. J. Appl. Bact. 54:69-76. · VASSILIADIS, P., PATERAKI, EPAPAICONOMOU, N., PAPADAKIS, J.A.A., TICHOPOULOS, D. (1976) Noveau procédé d'enrichissement de Salmonella. Ann. Microbiol. (Inst. Pasteur) 127B (195-200).
