Manual de Prácticas

MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
Laboratorio de Bioquímica
Manual de prácticas
M.C Leticia Zúñiga Orozco

Carrera: MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
Materias que fortalece:
FISIOLOGÍA, NUTRICIÓN, BROMATOLOGÍA, METABOLISMO
ANIMAL
IDENTIFICACIÓN DE LA PRÁCTICA
Tipo Nombre:
X
Lab. Clín. Tall. Obs. Apl.
IDENTIFICACIÓN DE
Interna Externa
No. Práctica. 1 CONSTITUYENTES DE
Tiempo estimado: 2 hr COMPUESTOS ORGÁNICOS
Número de sesiones 1
OBJETIVO:
El alumno experimentar y probara que los constituyentes básicos de los
compuestos orgánicos son CHON y S, mediante análisis químicos a muestras
orgánicas
TEMAS Y SUBTEMAS QUE FORTALECE:

I.BIIQUIMICA
1.1 Composición química de organismos vivos
1.2 Estructura de biomoléculas
MATERIAL Y/O EQUIPO A UTILIZAR:

Albúmina de huevo pulverizada
Sacarosa (Azúcar de caña)
2 tiras de papel tornasol rojo
4 cuadros de papel filtro
Solución de acetato de plomo al 10% en agua destilada
4 tubos de ensaye de 13x100
Mechero
Pinzas para tubo de ensaye
2 pipetas de 1 ml
PUNTOS DE CONTROL:
Leer la etiqueta antes de tomar la sustancia de su envase.
Al calentar sustancias en tubos cuidar que la boca de los mismos no este
dirigido hacia sí mismo o algún compañero para evitar accidentes por
proyecciones.
No utilizar la misma pipeta (en caso de líquidos), o espátula (sólidos) para
tomar sustancias diferentes a fin de evitar contaminaciones.
Utilizar perilla de seguridad para pipetear (nunca con la boca).
Medir o pesar las sustancias con la mayor precisión posible.
Al final de la práctica asear el área de trabajo, material y equipo.
Lavar muy bien las manos al terminar.
PROCEDIMIENTO:
Experimento A:
1) Colocar una pequeña cantidad de albúmina en un tubo de ensaye
(perfectamente limpio y seco).
2) Humedecer con agua destilada (no empapar) la tira de papel tornasol e
introducirlo en el interior del tubo sujetándolo en el borde sin que toque la
sustancia.
3) Tapar la boca del tubo con el papel filtro impregnado (y seco) con acetato
de plomo.
4) Calentar el fondo del tubo sobre la llama del mechero para quemar la
albúmina (no calentar en forma excesiva).
5) Observar los cambios producidos.
6) Repetir el procedimiento con la sacarosa.
Experimento B
1) Colocar una pequeña cantidad de sacarosa en un tubo de ensaye (limpio y
seco).
2) Tapar la boca del tubo con un pedazo de papel filtro.
3) Calentar el fondo hasta quemar el azúcar.
4) Observar los cambios producidos.
5) Repetir el procedimiento con la albúmina.
PRODUCTOS DE APRENDIZAJE
Elaborar reporte que debe constar de:
Número y nombre de la práctica.
Hacer investigación bibliográfica para profundizar la introducción.
Objetivos alcanzados.
Material utilizado.
INTRODUCCIÓN
Procedimiento.
Observaciones.
La composición química de los seres vivos es cualitativamente muy diferente
Reporte
de la delde resultados.
entorno físico en que viven. La mayor parte de los componentes
Bibliografía consultada.
químicos de los organismos son compuestos orgánicos de carbono en los
cuales este elemento se encuentra relativamente reducido o hidrogeMuchas
Resolver el siguiente
biomoléculas orgánicascuestionario:
contienen también nitrógeno. Por el contrario, los
1.- ¿Cuáles
elementos elementos
nitrógeno químicos
y carbono se encuentran
no son abundantes en mayor
en la cantidad
materia inerte yen
se las
e
moléculas orgánicas.
2.- ¿Cómo detecta los constituyentes de la albúmina? (Reacciones).
3.- ¿Cómo comprueba que sólo hay C,H,O en los glúcidos?
CRITERIOS DE EVALUACIÓN
Investigación bibliográfica 20%

Objetivos alcanzados 10%
Material y Procedimiento 10%
Observaciones 20%
Reporte de Resultados 30%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
Consultar la propuesta al final del manual de prácticas
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
FISIOLOGÍA, NUTRICIÓN, BROMATOLOGÍA,
METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X
Interna Externa
PROPIEDADES DE
No. Práctica. 2 GLÚCIDOS
Tiempo estimado: 2 hr
OBJETIVO:
El aluno observara la solubilidad e identificación de distinto glúcidos, y la
hidrólisis del enlace de un disacárido, por reacciones específicas para
azucares
TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRÁCTICA
I Composición química, función bioquímica de los carbohidratos

Y estructura de glucidos y su enlace
MATERIALES,
TEMAS Y SUBTEMAS
EQUIPO, A INSTRUMENTOS,
QUE SE REFIERE SUSTANCIAS
LA PRÁCTICA
I Composición
Muestras de glúcidos:
química y función bioquímica de los carbohidratos
1.1Reacciones de identificación de mono y disacáridos
Glucosa
Maltosa
Lactosa
Sacarosa
Almidón
Fructuosa
Xilosa
Soluciones de los azúcares al 1%
Reactivo de Fehling A y Fehling B
Lugol
HCl diluido al 10%
Agua destilada
NaOH 5%
Etanol
Cloroformo
Bicarbonato de sodio
Tubos de ensayo, gradilla, vaso para calentar, matraz erlenmeyer de 50ml y
mechero.
PUNTOS CRÍTICOS DE CONTROL:
Leer cuidadosamente la práctica para saber lo que va a hacer.
Al calentar sustancias en tubos cuidar que la boca de los mismos no esté
proyecciones.
Cuando se trabaja con sustancias volátiles, nunca prender mechero utilizar
parrilla eléctrica.
PROCEDIMIENTO
Experimento A
Solubilidad
Colocar (una pequeña cantidad (aproximadamente 15 mg) de cada uno de los
carbohidratos proporcionados en tubos etiquetados y examinar su solubilidad
en agua, álcali diluido, ácido diluido, etanol y cloroformo añadiendo 2ml de
solvente.
Observar y anotar resultados
NOTA: NO PRENDER MECHERO HASTA QUE TODOS HAYAN

TERMINADO ESTA PRUEBA
Experimento B
Reacción del Lugol (disolución de yodo-yoduro)

Esta prueba se usa para identificar el polisacárido almidón (alfa amilosa)
1.- Poner en un tubo de ensayo 2 ml de los glúcidos a investigar.
2.- Añadir unas gotas de lugol.
Observar. Si la disolución del tubo de ensayo se torna de color azul-violeta, la
reacción es positiva.
Experimento C
Azúcares reductores (Reacción de Fehling):
1. Colocar 3 ml de cada una de las muestras en tubos de ensayo separados
2. Añadir 0.5 ml de reactivo de Fehling A y 0.5 ml de Fehling B. Mezclar y el
líquido del tubo de ensayo adquirirá un fuerte color azul.
3. Calentar el tubo al baño de agua hirviente.
4. Observar resultados
La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo.
La reacción será negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-
verdoso.
Fundamento: Se basa en el carácter reductor de los monosacáridos y de la

mayoría de los disacáridos (excepto la sacarosa). Si el glúcido que se investiga
es reductor, se oxidará dando lugar a la reducción del hidróxido de cobre (II),
de color azul, a óxido de cobre (I), de color rojo-anaranjado.
Experimento D
Investigación de azúcares no reductores
Como se vio en la experiencia anterior la sacarosa daba la reacción de
Fehling negativa, por no presentar grupos hemiacetálicos libres.
Ahora bien, en presencia del ácido clorhídrico (HCl) y en caliente, la sacarosa
se hidroliza descomponiéndose en los dos monosacáridos que la forman
(glucosa y fructosa).
1.- Colocar una muestra de sacarosa, 3 ml en un matraz erlenmeyer

2.- Añadir unas 10 gotas de ácido clorhídrico al 10%.
3.- Calentar a la llama del mechero durante un par de minutos.
4.- Neutralizar con un poco de bicarbonato
5.- Dejar enfriar y realizar la Prueba de Fehling.
Observar el resultado. La reacción positiva nos dice que hemos conseguido

romper el enlace O-glucosídico de la sacarosa. (Se recomienda antes de
aplicar la reacción de Fehling, neutralizar con bicarbonato, Fehling se realiza
mejor en un medio que no sea ácido.)
PRODUCTOS DE APRENDIZAJE:
Material utilizado.
Procedimiento.
Observaciones.
Reporte de resultados.
Contestar el siguiente cuestionario:

1.- Investigar la reacción de Fehling
2.- ¿Por qué la sacarosa no es azúcar reductor?

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X
Lab. Clín. Tall. Obs. Apl. IDENTIFICACIÓN E
Interna Externa HIDRÓLISIS DE
No. Práctica. 3 POLISACÁRIDOS
OBJETIVO
El alumno Identificara la presencia de almidón en maíz y papa mediante
reacciones específicas.
Comprobara el efecto de los ácidos y bases fuertes sobre el almidón por
reacciones químicas.
I Composición química y función bioquímica de los carbohidratos

1.1 Estructura de polisacáridos
MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS
Elote tierno
Papa
Solución de almidón al 1%
Ácido clorhídrico HCL 3N
Hidróxido de sodio NaOH 2.5N
Solución de Lugol
Reactivo de Fehling
Carbonato de sodio
Solución de glucosa al 1%
Vidrio de reloj
Placa de porcelana horadada
Pipetas de 5 y 10 ml
Tubos de ensaye de 15x125
Gradilla
Vaso de precipitado (Baño María)
Soporte completo
PUNTOS CRITICOS DE CONTROL

Al calentar sustancias en tubos cuidar que la boca de los mismos no esté dirigido
hacia sí mismo o algún compañero para evitar accidentes por proyecciones.
No utilizar la misma pipeta (en caso de líquidos), o espátula (sólidos) para tomar
sustancias diferentes a fin de evitar contaminaciones.
PROCEDIMIENTO
Experimento A:
1) Colocar trozos de papa y granos de elote sobre el vidrio de reloj y agregarles
unas gotas de lugol (yodo) y observar la coloración.
Experimento B:
1) Colocar 10 ml de la solución de almidón en tres tubos de ensaye y numerarlos.
2) Marcar para cada tubo una pipeta con el número correspondiente.
3) Agregar 1 ml de HCl al tubo 1.
4) Agregar 1 ml de NaOH al tubo 2.
5) Agregar 1 ml de agua destilada al tubo 3.
6) Mezclar perfectamente.
7) En este momento se inicia la hidrólisis y los resultados serán diferentes.
8) Colocar en tres orificios de la placa de porcelana una gota de solución de lugol
y tres gotas de HCl.
9) Tomar una gota de cada uno de los tubos con sus respectivas pipetas
(cuidando de no confundirlas porque varían los resultados) y colocarla en los
orificios de la placa preparada previamente.
10) Mezclar con movimiento de vaivén o con un palillo y anotar la coloración
obtenida.
11) Colocar los tubos en el agua hirviendo y tomar una gota de los tubos cada 15
minutos y repetir desde el paso 8.
12) Cuando la muestra ácida (tubo 1) ya no sufra ningún cambio en la coloración en
la placa de porcelana enfriar los tubos y añadirle al tubo 1 poco a poco
Carbonato de Sodio hasta que ya no se aprecie efervescencia y realizar Prueba
de Benedict.
Prueba de Benedict.
En tres tubos de ensaye colocar en uno 0.5 ml de la mezcla del tubo 1, en el
segundo 0.5 ml de la mezcla del tubo 2 y en el otro 0.5 ml de glucosa.
Añadir 2 ml de Reactivo de Benedict a cada uno y colocarlos en baño de agua
hirviendo durante 5 minutos. Dejarlos enfriar y observar los cambios
aca de porcelana enfriar los tubos y añadirle al tubo 1


Material utilizado.
Procedimiento.
Observaciones.
Resolver el siguiente cuestionario:

1- Definición de polisacárido y su clasificación.
2- ¿En qué semillas y tubérculos se encuentra en mayor cantidad el
almidón.
3- ¿Cómo se produce la hidrólisis por ácido y cual es su producto final?
4- ¿Qué coloración se observó al hacer la prueba de Fehling y qué
reacción ocurre?

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X
PROPIEDADES DE LOS LIPIDOS
Interna Externa
No. Práctica. 4
OBJETIVO
El alumno observara y comprobara algunas de las propiedades de los lípidos
por reacciones químicas específicas.
Composición química y funciones de los lípidos.

Aceite vegetal (de olivo, coco, etc.)
Grasa animal (manteca de cerdo)
KOH al 20 % solución alcohólica
NaOH al 20 % solución alcohólica
Éter
Cloroformo
Alcohol etílico
Agua destilada
Solución alcohólica de Sudán III en frasco gotero
Tinta roja en frasco gotero
Hiel de pollo
Detergente
Tubos de ensaye de 15x125 mm
Pipetas de 5 y 10 ml
Espátulas
Mechero
Pinzas para tubos de ensaye
Vasos de precipitado de 50 ml
Placa caliente

proyecciones.
Cuando se trabaja con sustancias volátiles, nunca prender mechero
utilizar parrilla eléctrica.
PROCEDIMIENTO
Experimento A:
Prueba de emulsificación.
Cuando un aceite es mezclado con el agua, el primero se separa en
porciones más pequeñas dando como resultado la formación de una
emulsión.
1) En un tubo de ensaye poner 5 ml de agua y 10 gotas de aceite vegetal,
mezclar perfectamente y observar cuánto tiempo dura la emulsión.
2) En otro tubo de ensaye colocar 2 gotas de bilis y 10 gotas de aceite
vegetal, mezclar perfectamente y observar cuánto dura la emulsión.
3) En un tercer tubo colocar 2 gotas de detergente diluido y agregar 10
gotas de aceite, mezclar perfectamente y observar cuánto dura la
emulsión.
Experimento B:
Prueba de solubilidad.
Todas las grasas son insolubles en agua, pero solubles en solventes
orgánicos.
1) Tomar 4 tubos de ensaye y colocar en cada uno de ellos 2 ml de los

diferentes solventes.
2) Agregar 10 gotas de aceite vegetal a cada uno de los tubos, agitar
perfectamente y observar el resultado.
3) Repetir la operación con una pequeña cantidad de grasa animal
4) Anote cuáles son los mejores solventes y si existe alguna diferencia
entre las grasas.
Experimento C:
Determinación de grasas por coloración

Las grasas se colorean en rojo naranja por el colorante denominado Sudan
III.
1) Colocar 2 ml de aceite en dos tubos de ensayo
2) Añadir a uno, 4 o 5 gotas de solución alcohólica de Sudán III.
3) Al otro tubo añadir 4-5 gotas de tinta roja.
4) Agitar ambos tubos y dejar reposar.
Se observará en el tubo al que se le añadió Sudán, que todo el aceite
aparece teñido.
En cambio en el frasco al que se añadió tinta roja, la tinta se habrá ido al
fondo y el aceite aparecerá sin teñir.
Experimento D:
Prueba de saponificación.
1) Colocar en un tubo de ensayo 2 ml de aceite vegetal y 2 ml de una
solución de hidróxido sódico al 20%.
2) Agitar enérgicamente y colocar el tubo al baño María de 20 a 30
minutos.
3) Repetir con grasa animal
Transcurrido este tiempo, se puede observar en los tubo tres capas: la
inferior clara, que contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina
formada; la superior amarilla de aceite no utilizado, y la intermedia, de
aspecto grumoso, que es el jabón formado
4) Cuando ya se ha visto como se forma el jabón, se puede ir poniendo
en un vaso de precipitado el contenido de los tubos de ensayo, se
remueve bien y se deja calentar en placa caliente hasta que se haga
un buen trozo de jabón

Material utilizado.
Procedimiento.
Observaciones.

1) Se dice que las grasas son sustancias no polares ¿Qué significa esto?
¿A qué se debe?
2) ¿Qué efecto tiene la adición de la bilis sobre la solución de los lípidos?
3) ¿Cuáles jabones se forman en el organismo en la digestión de las
[ grasas?
4) ¿Cuál es la clasificación de los lípidos según Bloor?
5) En al saponificación ¿Qué tipo de observaciones hiciste?

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X
PRINCIPIOS BÁSICOS DE LA
Interna Externa
No. Práctica. 5 CROMATOGRAFÍA.
Tiempo estimado: 2 hr SEPARACIÓN DE COLORES.
OBJETIVO
Comprobar los principios básicos de una cromatografía por medio de la
separación de colores en un gis.
PRINCIPIOS DE CROMATOGRAFÍA
Gis blanco poroso (no compacto)

Alcohol etílico
Pipeta de 5 ml
Jarra de Koplin
Papel Filtro
Plumones de agua de diferentes colores excepto negro
Lápiz

Al calentar sustancias en tubos cuidar que la boca de los mismos no este dirigido
PROCEDIMIENTO
1) Tomar un gis y sobre la superficie aproximadamente de un centímetro de la

base marcarle una línea alrededor con lápiz (sin ranurarlo), este será el origen.
2) Sobre la marca anterior delinear con los plumones una línea sobre otra de dos o
tres colores diferentes.
3) Forrar las paredes laterales de la Jarra o cámara con tiras de papel filtro.
4) Impregnar la cámara con alcohol para mantener el ambiente saturado.
5) Colocar el gis dentro de la cámara cuidando de que el alcohol no rebase la línea
de origen de los colores.
6) Tapar y dejar que los colores asciendan.
7) Suspender el experimento cuando el alcohol haya ascendido y este
aproximadamente a dos o tres centímetros del borde superior.
8) Medir la distancia que recorre cada color desde el origen hasta el centro de la
mancha.

Material utilizado.
Procedimiento.
Observaciones.
Calcular la resistencia al flujo para cada color.

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
FISIOLOGÍA, NUTRICIÓN, BROMATOLOGÍA, METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X COMPROBACION DE LA
Lab. Clín. Tall. Obs. Apl. PRESENCIA DE ÁCIDOS
Interna Externa
No. Práctica. 6
GRASOS NO SATURADOS POR
Tiempo estimado: 2 hr MEDIO DE LA PRUEBA DE
Número de sesiones 1 ABSORCIÓN DE YODO.
OBJETIVO
El aluno comprobara la absorción de yodo, para comprobar la presencia de
dobles ligaduras en los ácidos grasos con reacciones químicas especificas

Composición química, propiedades y funciones de los lípidos.
Aceite de olivo
Almidón 1 %
Solución de yodo Lugol
Metanol
1 tubos de ensaye de 15x125
Pipetas de 5 ml
Matraz 150 ml
Bureta
KOH 0.1 N
Fenolftaleina
Al calentar sustancias en tubos cuidar que la boca de los mismos no esté dirigido
Índice de acidez
Pese exactamente una muestra entre 10 y 15 gramos de aceite de maíz sobre un
vaso de precipitado o matraz previamente pesado. Agregue 50 ml de metanol
neutralizado. Introduzca el matraz en un baño de agua mantenido a 60 °C y titule,
sin dejar de calentar, agregado 10 gotas de fenolftaleína y poniendo en la bureta
KOH 0.1 N el cual se agrega hasta obtener color rosa permanente. Aplicando la
formula calcule el índice de acidez.
Ac oleico = I. A. = V x N x M
10 x P
Dónde :
V = Mililitros de KOH gastados
N = Concentración de KOH como normalidad
M = Peso molecular de ácido oleico = 282
P = Peso en gramos de muestra utilizada
% Ácido oleico = (ml gastados KOH x N KOH x 0.0282 100)

Peso de la muestra
Absorción de yodo por ácidos grasos insaturados

Ponga en un tubo de ensaye 2 ml de aceite de oliva o de ácido oleico. Agregue 5
gotas de lugol y agite, esta mezcla debe ser rojiza como la disolución de yodo.
Caliente a la llama y observe que el color va cambiando. Cuando el color inicial ha
desaparecido totalmente, deje enfriar y agregue dos gotas de disolución de
almidón, se observara que no hay formación de coloración azul lo cual indica que
no hay yodo libre en la mezcla. Si se agregó lugol en exceso, aparecerá el color
azul, por haber sido incompleta la absorción.

Material utilizado.
Procedimiento.
Anotar resultados obtenidos y conclusiones.

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X
CORMATOGRAFÍA DE LÍPIDOS
Interna Externa
No. Práctica. 7 EN CAPA FINA.
OBJETIVO
El alumno aprenderá hacer uso de la técnica de cromatografía en capa fina
para constatar la separación de lípidos, por métodos cromatograficos
Composición química, propiedades y funciones de los lípidos.
Extracto de lípidos.
Aceite vegetal
Jeringa de insulina
Huevo de gallina
Cloroformo
Metanol
Ácido acético glacial
Ninhidrina
Cloruro de potasio
Azul de bromotimol
Papel filtro
Embudo de separación
Embudo de talle corto
Matraz de 250 ml
Placa caliente
Jarra de Coplin
Placa de cromatografía
Agua destilada
PROCEDIMIENTO
1- Extracto de lípidos. Separar la yema de huevo y mezclarla con 100 ml de

Cloroformo-Metanol (2:1, V/V) para extraer fosfolípidos y lípidos neutros.
Agitar 20 minutos y filtrar. Agitar el filtrado claro con 20 ml de Cloruro de
potasio al 0.1 M y centrifugar 10 minutos a 2000 r.p.m. para separar las dos
fases. Desechar la fase acuosa superior y utilizar la fase orgánica inferior para
la cromatografía de lípidos.
2- A un centímetro del extremo de la placa, trace con lápiz la línea de partida
(origen). Haga lo mismo en la otra placa.
3- Marque dos señales, una para cada muestra, sobre la línea de origen a un
centímetro de los bordes y a un centímetro una de la otra.
4- Tome con la jeringa una muestra y deposite una pequeña gota en la placa
sobre la marca hecha previamente. Haga lo mismo con la otra muestra.
5- Repita la misma operación en otra placa.
6- Una vez secas las manchas coloque las placas en la cámara cromatográfica,
con el borde de partida en el fondo.
7- Cuando el solvente llegue a 2 centímetros más o menos del borde superior
saque la placa y marque con lápiz la altura que alcanzó el solvente y deje
secar.
8- Revele una placa con reactivo de Azul de bromotimol, seque al aire y luego
pásela por vapores de Hidróxido de Amonio (para detectar lípidos en general).
9- Revele la otra placa con reactivo de Ninhidrina, seque al aire y colóquela sobre
la placa caliente (para revelar aminolípidos).
SOLVENTE:
MEZCLA DE CLOROFORMO: METANOL: AC. ACETICO: AGUA
(65; 25; 8; 2) en volumen.

Observaciones.

1- ¿Qué diferencia existe entre la cromatografía en capa fina y en papel?
2- Anotar los resultados obtenidos y sus conclusiones.
3- ¿A que se debe que el colesterol se estudie entre los lípidos?
4- Explique la isomería CIS-TRANS de los ácidos grasos.
5- En su absorción los lípidos se integran como quilomicrones ¿Cómo están
constituidos?

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X
CROMATOGRAFÍA DE
Interna Externa
No. Práctica. 8 AZÚCARES Y AMINOÁCIDOS.
OBJETIVO
El alumno utilizar la técnica de cromatografía en papel y capa fina como
medios para la separación e identificación de compuestos orgánicos
Composición química y función bioquímica de los carbohidratos

Composición química, propiedades y funciones de proteínas
Glucosa, solución al 1%.

Glicina, solución al 1%.
Solución problema.
Reactivo de Ninhidrina
Reactivo de anilina o ácido sulfúrico diluido
Solvente (1) Isopropanol:agua 80:20
Jeringas de insulina
Atomizadores
Pinzas de disección
Solvente (2) Cloroformo:metanol:acido acetico:agua 65:25:8:2
Papel para cromatografía
Placa de sílica gel

Jarra de Coplin
Regla y tijeras
Placa caliente.

proyecciones.
PROCEDIMIENTO
1. Tomar la placa de sílica por los bordes y sobre su superficie trazar

cuidadosamente una línea a 1 centímetro de distancia de uno de los
extremos, a la que se llamará origen.
2. Marque dos señales sobre la línea de partida a 1 centímetro
aproximadamente de cada uno de los bordes.
3. Deposite una muestra (glucosa) con una micro pipeta de tal manera que se
forme una pequeña mancha de no más de 0.3 cm y rotule en la parte
superior. Coloque una mezcla de sustancias problemas en la otra marca.
4. Tomar el papel filtro de cromatografía y hacer lo mismo desde el paso 1
hasta el 3, solo que ahora se utilizará la glicina y una mezcla problema.
5. Introduzca la placa de sílica en una cámara con el solvente (1) y el papel en
la cámara que contiene el solvente (2) y espere a que asciendan los
solventes.
6. Cuando el solvente esté más o menos a 2 cm del borde superior, retírelos
de las cámaras y marque con un lápiz hasta donde llegó el solvente.
7. Permita que se sequen.
8. Una vez secos rocíelos con el agente revelador cromógeno respectivo:
Aminoácidos con ninhidrina; glúcidos con anilina o ácido sulfúrico dil. Cuide
que el rociado sea uniforme.
9. Seque al aire y caliente un poco y caliente el cromatograma en la placa
caliente hasta que se lleve a cabo la reacción de coloración.
10. Medir la distancia recorrida por el solvente desde el origen y las distancias
recorridas por las sustancias hasta el centro de cada una de las manchas.

Observaciones.
Calcular el Rf de cada una de las muestras y la mezcla.

1- ¿En qué consisten los fenómenos fisicoquímicos que intervienen en la
cromatografía?
2- ¿Qué diferencias fundamentales existen entre la cromatografía de papel
y la de capa fina?
3- Explique en forma general en que se basa la cromatografía de
intercambio iónico.
4- ¿Para que sirve el Rf una vez calculado?

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X
Lab. Clín. Tall. Obs. Apl. REACCIONES DE COLORACIÓN
Interna Externa
No. Práctica. 9
DE LAS PROTEÍNAS
OBJETIVO
El aluno comprobar la presencia de proteína en la solución proporcionada por
medio de reacciones de coloración específicas para ciertos aminoácidos o
grupos funcionales en las proteínas.

Solución de albúmina al 1%
NaOH al 10%
HNO3 concentrado
H2SO4 concentrado
CuSO4 al 5%
NaOH saturado
Reactivo de Millón
Reactivo de ninhidrina
Pipetas de 10 ml
Gradilla para tubos
Mechero
Pinzas para tubo de ensaye.

PROCEDIMIENTO
Prueba de Biuret.
1- Tome un tubo limpio y agréguele 2 ml de solución de albúmina.
2- Agregue 2 ml de solución de NaOH al 10% y mezcle perfectamente
(agite el tubo con cuidado).
3- Adicione solución de sulfato de cobre gota a gota hasta que aparezca
una coloración azul violeta o púrpura.
Reacción Xantoprotéica:
1- En un tubo de ensaye coloque 2 ml de solución de albúmina.
2- Agregue 1 ml de HNO3 concentrado.
3- Caliente el tubo de ensaye con mucho cuidado sobre la llama directa
(observe el cambio de color y lo que sucede al precipitado).
4- Enfríe el tubo bajo el chorro de agua y agregue lentamente y con
mucho cuidado NaOH saturado, gota a gota hasta que la coloración se
torne anaranjada.
Reacción de Millón:
1- En un tubo de ensaye coloque 2 ml de solución de albúmina.
2- Adicione 3 o 4 gotas de reactivo de Millón.
3- Mezcle perfectamente y caliente con cuidado sobre la llama pequeña
del mechero (el calentamiento debe hacerse hasta ebullición).
4- Observar la formación de precipitado y como ésta va cambiando de
coloración con el calentamiento.
Reacción de Ninhidrina.
1- Tome con una pipeta 2 ml de solución de albúmina colóquela en un
tubo de ensaye.
2- Agregue 1 ml de solución de ninhidrina y mezcle bien.
3- Coloque el tubo de ensaye en un baño de agua hirviendo durante 10
minutos.
4- Después de este tiempo saque el tubo y enfríe al chorro del agua.
5- Observe ahora el cambio de coloración que tiene lugar
Reacción de los aminoácidos azufrados
1- Colocar en un tubo de ensayo de 2 a 3 ml de albúmina
2- Agregar 2 ml de solución de NaOH al 20%
3- Añadir 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5%.
4-Calentar el tubo hasta ebullición.
Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha
formado sulfuro de plomo, utilizándose el azufre de los aminoácidos, lo
que nos sirve para identificar proteínas que tienen en su composición
aminoácidos con azufre.
Se pone de manifiesto por la formación de un precipitado negruzco de
sulfuro de plomo. Se basa esta reacción en la separación mediante un
álcali, del azufre de los aminoácidos, el cual al reaccionar con una
solución de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.

Observaciones.
1- ¿Qué es un enlace amídico?. Esquematice la formación del enlace a amida

entre dos ácidos aminados como el ácido glutámico y la lisina.
2- ¿En que consiste la desnaturalización de las proteínas?
3- ¿Cuántas clases de aminas existen? ¿En qué se diferencian?.
4- El cobre es un ion que puede funcionar con distintas valencias ¿Cuáles son?.
5- Anote sus observaciones y explique qué ocurre en cada reacción.

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X DETERMINACIÓN DE
Lab. Clín. Tall. Obs. Apl. PROTEÍNAS, LÍPIDOS Y
Interna Externa
No. Práctica. 10
CARBOHIDRATOS EN LECHE DE
Tiempo estimado: 2 hr BOVINOS.
OBJETIVO
El alumno comprobara la presencia de tres de los grupos importantes de
compuestos orgánicos en la leche, por medio de reacciones químicas
específicas de separación e identificación

Composición química y funciones de los lípidos.
Leche de vaca sin hervir.

Ácido acético glacial al 10%
Reactivo de Millón
Reactivo de Molich
Ácido sulfúrico concentrado
Mezcla de alcohol-ácido (1:1)
Gradilla
Embudo pequeño
Termómetro
Papel filtro
Pipetas de 2 ml
Matraz Erlenmeyer de 250 ml
Probeta graduada de 100 ml
Pipetas Pasteur
Tapón de hule para tubo de 13x100

PROCEDIMIENTO
Experimento 1
Glúcidos: reacción del alfa naftol o de Molich.
1. Coloque en un tubo de ensaye 3 ml de leche.

2. Agregue 3 gotas de reactivo de Molich y mezcle bien.
3. Incline el tubo y deje resbalar por las paredes 3 ml de ácido sulfúrico
concentrado.
4. Deje en reposo 4 minutos y espere la aparición de un anillo color violáceo rojizo
en la unión entre ambos líquidos.
Experimento 2
Proteínas: reacción de Millón.
1. Coloque 10 ml de leche en un matraz Erlenmeyer.

2. Añada 90 ml de agua destilada y 1.5 ml de ácido acético al 10%.
3. Caliente la mezcla a 60°C durante 10 a 15 minutos hasta que se forme un
precipitado.
4. Filtre el precipitado y consérvelo.
5. Tome una porción del precipitado y colóquelo sobre un papel filtro.
6. Agregue 2 gotas de reactivo de Millón y espere 4 minutos hasta la aparición de
un color rosa.
Experimento 3
Lípidos
1. Coloque en un tubo de ensaye de 13x100 2 ml de leche. Añada 1 ml de

ácido sulfúrico concentrado.
2. Coloque un tapón de hule y mezcle por inversión para obtener una solución
homogénea.
3. Agregue 1 ml de la solución alcohol-ácido.
4. Centrifugue la muestra durante 2 minutos a 2500 r.p.m.
5. Con una pipeta Pasteur tome unas gotas de líquido sobrenadante y
colóquelas sobre un papel filtro.
6. Observe la apariencia translúcida del papel

Material utilizado.
Procedimiento.
Observaciones.
1. ¿Cómo se define la leche de acuerdo con el Reglamento Oficial Mexicano?

2. ¿Qué es el calostro?
3. ¿Cuál es la diferencia entre calostro y leche?
4. ¿Cuáles son las principales proteínas de la leche y su clasificación?
5. Investigue el fundamento de cada una de las reacciones y que se identifica.

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X
RECONOCIMIENTO DE SALES
Interna Externa
No. Práctica. 11 MINERALES
OBJETIVO
El alumno comprobara que en la composición de la materia viva entran a
formar parte las sales minerales, por medio de reacciones químicas de
coloración.
Las biomoléculas
Las moléculas inorgánicas
Vaso de precipitado
Matraz o probeta
Embudos con papel de filtro
Gradilla con tubos de ensayo de 15x125
Pinzas para calentar tubos
Mechero
Leche
Ácido acético
Ácido nítrico
Solución molibdato amónico al 1%
Solución de nitrato de plata al 1%.
Solución de oxalato amónico al 1%.

PROCEDIMIENTO
Para obtener suero de leche. Colocar en un vaso de precipitado unos 250 ml. de
leche.
Añadir unas gotas de ácido acético y esperar unos minutos.
Al producirse el "cuajado" filtrar por papel, para obtener el suero.
Recoger el filtrado en un matraz o probeta.
Numerar 3 tubos de ensayo como 1, 2 y 3.
En cada tubo de ensayo poner 3 ml. de suero de leche.
Al tubo de ensayo número 1, añadir 1 ml. de solución de nitrato de plata.
Al tubo de ensayo número 2, añadir 2ml de solución de molibdato amónico al

1%, tratado con ácido nítrico concentrado en cantidad suficiente para que el ácido
molíbdico que se forma se re disuelva. Calentar el tubo al baño María.
Al tubo de ensayo número 3 agregar unas 10 gotas de solución de oxalato

amónico al 1%.
RESULTADOS OBTENIDOS.
La reacción en el tubo de ensayo número 1 nos sirve para identificar los cloruros.
La explicación es la siguiente:
Los cloruros en contacto con una solución de nitrato de plata forman cloruro de
plata, que da lugar a un precipitado blanco de aspecto lechoso.
La reacción en el tubo de ensayo número 2 nos va a permitir identificar la

presencia de fosfatos.
La explicación es la siguiente:
Los fosfatos en presencia de molibdato amónico, forman un precipitado amarillo de
fosfomolibdato amónico.
La reacción en el tubo de ensayo número 3 nos sirve para identificar el calcio.

Esto es debido a:
El calcio al reaccionar con el oxalato amónico forma un precipitado blanco
cristalino de oxalato amónico.

Observaciones.

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X
COAGULACIÓN DE PROTEÍNAS
Interna Externa
No. Práctica. 12
OBJETIVO
COMPROBAR LA DESNATURALIZACIÒN DE PROTEINAS POR CALOR
Clara de huevo diluida 1:1 con solución salina

5 huevos enteros
1 lata de leche condensada
750 ml de leche
2 o 3 mazapanes o café o polvo de chocolate
3 cucharadas de azúcar granulada
1 molde con tapa
Batidora
Autoclave

PROCEDIMIENTO
A) Colocar en un tubo de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo

diluida.
Añadir 5 gotas de ácido acético y calentar el tubo a la llama del mechero.
Observar la FORMACIÓN DE COAGULOS
B) Calentar el molde con el azúcar fundiéndola y con cuidado haciendo que

se bañe el fondo del mismo. Enfriar el molde poniéndolo sobre agua.
Con la batidora mezclar todos los reactivos (leches, huevos y
saborizantes).
Vaciar sobre el molde con el azúcar fundido.
Meter en autoclave por 20 minutos a 15 libras de presión.
Dejar enfriar y colocar en refrigeración
Vaciar el molde, observar el efecto de la temperatura sobre las
proteínas del huevo y la leche.
Disfrutarlo.

Observaciones.

¿Qué ocurre en el proceso de desnaturalización?
¿Qué otro tipo de desnaturalizantes existen

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X
PRESENCIA Y ACTIVIDAD DE
Interna Externa
No. Práctica. 13 ENZIMAS.
OBJETIVO
Comprobar la presencia y actividad de la enzima catalasa en tejidos animales y
vegetales, así como la acción de la ptialina sobre almidones.

Composición química, propiedades y funciones de las enzimas.
Solución de almidón al 1% previamente calentada

Reactivo de Benedict o Fehling
Agua oxigenada al 3%
Lugol
Hígado crudo en trocitos
Papa cruda y papa cocida en cuadritos
HCl concentrado
Gradilla
Baño de agua hirviendo
Pipetas de 5 ml
7 Tubos de ensaye de 15x125 mm

PROCEDIMIENTO
Actividad de la ptialina.
1. Tome 3 tubos de ensaye y agregue a cada uno 2 ml de solución de almidón.
2. Agregue al tubo 1 unas gotas de lugol.
3. Agregue al tubo 2, 2 ml de reactivo de Benedict y caliente en baño de agua
hirviendo durante 5 minutos.
4. Agregue al tubo 3, un poco de saliva, mezcle. Después de 15 minutos agregue
2 ml de reactivo de Benedict y caliente en baño de agua hirviendo durante 5
minutos.
5. Anote y compare resultados de los tubos 2 y 3, así como lo que ocurre en el
tubo1.
Actividad de la catalasa.
1. Tome 4 tubos de ensaye, numérelos y agregue 2 ml de agua oxigenada a cada
uno.
2. Agregue al tubo 4 un trocito de hígado.
3. Agregue al tubo 5 1 ml de HCl más un trocito de hígado.
4. Agregue al tubo 6 un trocito de papa cruda.
5. Agregue al tubo 7 un trocito de papa cocida
6. Anote los resultados obtenidos en todos los tubos.

Observaciones.

1. ¿Qué tipo de moléculas son las enzimas, y cuál es su actividad?
2. ¿Qué tipo de reacciones catalizan las enzimas?
3. ¿Por qué se dice que son específicas?
4. ¿Sobre que sustrato actúa la ptialina y con qué otro nombre se le conoce?
5. ¿Sobre que sustrato actúa la catalasa?
6. ¿Analice las observaciones de sus tubos y señale a qué se deben los
resultados?
7. ¿De los tubos 4 al 7 señale en cuál hubo mayor actividad?

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
Materia: BIOQUIMICA
Clave: 05LMV208
METABOLISMO ANIMAL
Tipo Nombre:
X
OBTENCIÓN DE DNA
Interna Externa
No. Práctica. 14
OBJETIVO
Obtención de DNA de células de hígado de pollo y de células de epitelio de
humano
TEMAS Y SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRACTICA
Composición química y función de los nucleótidos
Vaso de precipitado de 50 ml
Varilla de agitación de vidrio o plástico
Solución de desoxicolato de sodio (l gr en 60 ml de agua destilada
Colorante de anaranjado de acridina
Alcohol etílico al 95%
500 ml de agua destilada con una cucharada sopera de sal
Microscopio
Portaobjetos y cubreobjetos
Pipeta
Hígado de pollo o ternera
Cuchillo o bisturí
Mortero
Arena fina lavada
Agua destilada
Matraz de 250 ml
Probeta de 50 ml

PROCEDIMIENTO
A)
1.- Corte un pedazo de hígado de aproximadamente 2 centímetros por lado y corte
éste en pedazos tan pequeños como le sea posible.
2.- Páselos a un mortero y agregue de 2 a 3 ml de agua y algunos granos de arena
lavada.
3.- Muela el material hasta que todo el hígado aparezca como una masa homogénea
y semilíquida. Deje reposar la mezcla.
4.- Cuando la arena se sedimente, decante la fase líquida al vaso de precipitado.
5.- Agregue 20 ml de desoxicolato de sodio, agitando la mezcla suavemente, con
una varilla de vidrio, con movimiento lento. Observe cuidadosamente lo que sucede.
6.- Agregue 20 ml de etanol frío de 95% y continúe agitando en forma rotatoria.
Observe que unos filamentos blanquecinos quedan adheridos a la varilla de vidrio.
Son filamentos de DNA.
7.- Con la misma varilla de vidrio pase algunos de estos filamentos a un portaobjetos
limpio y agregue una gota de colorante. Coloque un cubreobjetos y observe la
preparación a seco débil (10X) y posteriormente a seco fuerte (40X). Describa la
apariencia del material observado.
B)
1.- Pasar 3 cucharadas de la solución de sal a l vaso y con ellas enjuagar la boca
(enérgicamente). Luego devuelva el enjuague al vaso.
2.- Con un popote, añadir un par de gotas de detergente líquido y remueva
suavemente. Sólo lo estrictamente necesario para facilitar la mezcla, NO FORMAR
ESPUMA.
3.- Se prepara alcohol etílico al 95% o alcohol isopropílico al 70% con unas gotas de
colorante para alimentos para apreciar mejor la capa.
4.- En seguida añadir del alcohol preparado anteriormente con una pipeta. Con el
vaso inclinado, para que el alcohol resbale por la pared hasta formar sobre el agua
una capa de unos 2 centímetros. Las finas hebras que aparecen en la interface son
ADN.
C)
Cortar una cebolla mediana en trozos grandes
Moler 10 segundos en licuadora con 200 ml de agua fría y 3 grs sal
Filtrar y agregar 30 ml de jabón (dos cucharadas grandes), revolver sin hacer espuma, reposar 10
minutos
Poner en tubo de ensaye 2 ml de esta mezcla y agrega lentamente resbalando por las paredes 2 ml
de alcohol frio, el ADN se precipita en la interface por ser insoluble en alcohol, frio

Material utilizado.
Procedimiento.
Observaciones.
Compare los resultados obtenidos con los de sus compañeros.
Concluya.

Observaciones 20%
Bibliografía 10%
BIBLIOGRAFIA:
BIBLIOGRAFIA
1.- BIOQUÍMICA DE HARPER

Murray Robert K. Y col.
Ed. El Manual Moderno S.A. de C.V.
18 Ed.
México, 2001
2.- CONCEPTOS DE BIOQUÍMICA.

Boyer Rodney
International Thomson Editores
México, 2000.
3.- BIOQUÍMICA.
Lehninger A. L.
Editora Interamericana Omega, Segunda edición, Reimpresión 1993
Barcelona, España.
4.- NUTRICIÓN ANIMAL.

Maynard Leonard A y col.
Editorial Mc Graw Hill, Séptima edición.
México 1983.
5.-BIOQUÍMICA
La base molecular de la vida (tercera ed.)
McKee Trudy
Editorial McGraw-Hill-Interamericana
Colombia 2003
6.-BIOQUÍMICA
Harvey Richard A. y Champe Pamela C
Editorial McGraw-Hill
México 2003

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MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

M.C Leticia Zúñiga Orozco

TEMAS Y SUBTEMAS QUE FORTALECE:

MATERIAL Y/O EQUIPO A UTILIZAR:

Investigación bibliográfica 20%

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRÁCTICA

I Composición química, función bioquímica de los carbohidratos

NOTA: NO PRENDER MECHERO HASTA QUE TODOS HAYAN

Reacción del Lugol (disolución de yodo-yoduro)

Fundamento: Se basa en el carácter reductor de los monosacáridos y de la

1.- Colocar una muestra de sacarosa, 3 ml en un matraz erlenmeyer

Observar el resultado. La reacción positiva nos dice que hemos conseguido

Contestar el siguiente cuestionario:

Investigación bibliográfica 20%

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRÁCTICA

I Composición química y función bioquímica de los carbohidratos

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS

Leer cuidadosamente la práctica para saber lo que va a hacer.

aca de porcelana enfriar los tubos y añadirle al tubo 1

Elaborar reporte que debe constar de:

Resolver el siguiente cuestionario:

Investigación bibliográfica 20%

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRÁCTICA

Composición química y funciones de los lípidos.

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS

Leer cuidadosamente la práctica para saber lo que va a hacer.

1) Tomar 4 tubos de ensaye y colocar en cada uno de ellos 2 ml de los

Determinación de grasas por coloración

Elaborar reporte que debe constar de:

Resolver el siguiente cuestionario:

Investigación bibliográfica 20%

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRÁCTICA

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS

Gis blanco poroso (no compacto)

Leer cuidadosamente la práctica para saber lo que va a hacer.

1) Tomar un gis y sobre la superficie aproximadamente de un centímetro de la

Elaborar reporte que debe constar de:

Investigación bibliográfica 20%

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRÁCTICA

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS

% Ácido oleico = (ml gastados KOH x N KOH x 0.0282 100)

Absorción de yodo por ácidos grasos insaturados

Elaborar reporte que debe constar de:

Investigación bibliográfica 20%

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRÁCTICA

Composición química, propiedades y funciones de los lípidos.

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS

1- Extracto de lípidos. Separar la yema de huevo y mezclarla con 100 ml de

Elaborar reporte que debe constar de:

Resolver el siguiente cuestionario:

Investigación bibliográfica 20%

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRÁCTICA

Composición química y función bioquímica de los carbohidratos

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS

Glucosa, solución al 1%.

Placa de sílica gel

Leer cuidadosamente la práctica para saber lo que va a hacer.

1. Tomar la placa de sílica por los bordes y sobre su superficie trazar

Elaborar reporte que debe constar de:

Resolver el siguiente cuestionario: