ALBUMINA (1)
ALBUMINA (1)
ALBUMINA (1)
Intención de uso 14
Para la determinación cuantitativa de albúmina en el suero. Recolección y almacenamiento de muestras
1. El suero es la muestra de análisis.
Historia del Método 2. Evitar la hemólisis excesiva, ya que cada 100 mg/dl de hemoglobina
La determinación de la albúmina sérica se hace generalmente con una corresponde a alrededor de 100 mg/dl de albúmina.
ultracentrifugación, fraccionamiento de la sal por el método de 3. Albúmina en suero es estable por una semana a temperatura
electroforesis o por fijación del tinte. Los procedimiento de fijación del ambiente (18 - 30 °C) y aproximadamente un mes cuando se
Tinte son los más sencillos de realizar, y se prestan para altos almacena en el refrigerador (2-8 °C) protegido contra la evaporación.
volúmenes de pruebas y automatización. También son los
procedimientos más utilizados en combinación con las Interferencias
determinaciones de proteína total para producir una proporción de 1. Ver Young et al 15 para una lista de sustancias que interfieren.
A/G.1, 2 2. La ampicilina se ha encontrado que interfiere seriamente con los
En 1953, el uso de naranja de metilo3 para la determinación directa se métodos BCG.16
describió.
Este método sufría de una característica de unión no específica.4, 5 El Materiales suministrados
uso de un colorante HABA6 se introdujo en 1954. Este método fue Reactivo de albúmina.
específico para la albúmina pero la sensibilidad se muestra pobre,
pobre correlación con los métodos de electroforesis y la interferencia
Materiales necesarios pero no suministrados
significativa de la bilirrubina, lípidos, los salicilatos, la penicilina y
1. Pipetas precisas
sulfonamidas.7
2. Tubos de ensayo / rack
Un verde de bromocresol (BCG) procedimiento de tinte de unión fue
3. Temporizador
propuesto por primera vez en 1964.8 Este procedimiento mostró mayor
4. Espectrofotómetro capaz de leer a 630nm.
sensibilidad y mucho menor susceptibilidad a las sustancias que
interfieren. El método original ha sido optimizados para mejorar la
correlación con los métodos de electroforesis.9 El presente Procedimiento (automatizado)
procedimiento sigue una modificación del original procedimiento del Vea instrucciones de aplicación del instrumento.
colorante BCG de unión.
Varias publicaciones de finales de 1970 10,11,12,13 reportaron que Procedimiento (Manual)
proteínas anormales se unen con BCG después del primer minuto. 1. Etiquete los tubos blanco, estándar, control, paciente, etc.
Los procedimientos actuales incluyen un tiempo de medición reducido 2. Pipetear 1.0 ml de reactivo en cada tubo.*
para eliminar la interferencia de globulina anormal 3. Transferir 0.01 ml (10ul) de muestra a los tubos respectivos y mezcle.
y ofrece linealidad de 8.0 g/dl. 4. Incubar todos los tubos a temperatura ambiente durante un minuto.
5. Cero el espectrofotómetro con el blanco a 630nm.
Principio 6. Lea la absorbancia de todos los tubos.
La albúmina es obligada por el colorante BCG a proceder un aumento * Para espectrofotómetros que requieren más de 1.0 ml a leer, 3.0 ml de
en el color azul-verde medido a 630nm. El aumento de color es reactivo y 20 ul de suero deben ser utilizados.
proporcional a la concentración de albúmina presente.
Limitaciones
Reactivos 1. Las propiedades colorantes de la albúmina, que no sea humana,
Bromocresol verde (BCG) 0.15 g/L, Buffer, pH 4.66 ± 0.1, surfactante, difieren entre las species.17
ingredientes no reactivos y estabilizadores. 2. Las muestras con valores por encima de 8.0 g/dl se deben diluir con
solución salina al 0.9% 1:1, volver a ejecutar, y los resultados se
Preparación de los reactivos multiplica por 2. Las muestras con resultados por debajo de 0.5 g/dl se
Reactivo se encuentra en una estado “listo para usar". debe hacer por electroforesis.
3. Sueros severamente lipémicas debe tener un blanco de suero.
A. Añada 0.01 ml (10 ul) de muestra a 1.0 ml D-Agua y leer
Reactivo de almacenamiento absorbancia frente a D-agua a 630nm.
Almacenar el reactivo a temperatura ambiente. B. Restar la absorbancia del blanco de suero de la absorbencia
de prueba y use la absorbancia corregida en los cálculos.
El deterioro del reactivo
El reactivo debe ser claro, solución de color verde amarillo. La turbidez Calibración
o la precipitación hacen el reactivo insatisfactorio y debe ser Use un patrón acuoso de albúmina (4.0g/dl) o un calibrador de suero
desechado. apropiado.
Precauciones
1. Este reactivo es para uso diagnóstico in vitro solamente.
2. Evitar la ingestión. Cálculo
3. Evite el contacto. El reactivo es una solución ácida. Enjuague con Abs. = Absorbancia
agua cuando se produce el contacto.
4. El reactivo contiene azida de sodio como conservador. Esto Abs. de desconocido x Conc. de = Albúmina (g / dl)
puede reaccionar con tuberías de cobre o puede formar azidas Abs. de estandar. Estandar.
metálicas explosivas. Al desecharlo, enjuague con grandes
cantidades de agua para evitar la acumulación de azida.
Albúmina (Liquida)
Control de calidad
La validez de la reacción debe ser monitoreada por el uso del suero
control normal y anormal con concentraciones conocidas de albúmina.
1 Manufactured by Pointe Scientific, Inc.
Valores Esperados 5449 Research Drive, Canton, MI 48188
3.5 a 5.3 g/dl
Es muy recomendable que cada laboratorio establezca su propio
rango normal.
European Authorized Representative:
Rendimiento Obelis s.a.
Boulevard Général Wahis 53
1. Linealidad: 0.5 – 8.0 g/dl
1030 Brussels, BELGIUM
2. Comparación: Un estudio comparativo realizado entre este método
y otro método BCG resultó en un coeficiente de correlación de 0.998 Tel: (32)2.732.59.54 Fax:(32)2.732.60.03 email: mail@obelis.net
con una ecuación de regresión de y = 0.95x-0.11.
3. Precisión:
Referencias
1. Tietz, N., Fundamentos de Química Clínica, Filadelfia, WB
Saunders, pp 335-337 (1976).
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Laboratorio de
DISTRIBUIDO POR:
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