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    Tras el desarrollo de la práctica y los datos obtenidos a través de el proceso de

    espectrofotometría a 580 nm de cada uno de los tubos, en especial del 0 al 5 que son los que
    contienen la proteína patrón, se clasifica la siguiente información:
    Tabla 1.
    Resultados de tubos preparados con proteína patrón

    Tubo Absorbancias
    0 0
    1 0.243
    2 0.475
    3 0.613
    4 0.759
    5 0,856

    Con las concentraciones dadas en la base de datos, se obtiene el factor de dilución para los
    tubos0, 1, 2, 3, 4 y 5 utilizando la fórmula a continuación:
    Fórmula 1:
    Alb ú mina
    Tubo x=
    Alb ú mina+ Agua+ Reactivo C + Reactivo de Fol∈¿ ¿
    0
    Tubo 0=
    0+ 400+200+ 20 00
    g
    ¿0
    ul

    30
    Tubo 1=
    30+370+200+ 200 0
    ¿ 0.01153

    60
    Tubo 2=
    60+340+ 200+200 0
    ¿ 0.02307
    90
    Tubo 3=
    90+ 310+200+200 0
    ¿ 0.03461

    120
    Tubo 4=
    120+28 0+200+ 2000
    ¿ 0.04615

    15 0
    Tubo 5=
    1 5 0+250+ 200+2 00 0
    ¿ 0.05769

    Posteriormente, se realizan los debidos cálculos para obtener la concentración de cada tubo,
    usando la fórmula 2, en donde C2= Concentración 2, C1= Concentración 1, F.D= Factor de
    dilución
    Tubo x=C 2=C 1∗F . D

    Tubo 0
    g g
    C 2=2 ∗0 =0.000
    µl µl
    Tubo 1
    g g
    C 2=2 ∗0.01153 =0.023
    µl µl
    Tubo 2
    g g
    C 2=2 ∗0.02307 =0.046
    µl µl
    Tubo 3
    g g
    C 2=2 ∗0.03461 =0.069
    µl µl
    Tubo 4
    g g
    C 2=2 ∗0.04615 =0.092
    µl µl
    Tubo 5
    g g
    C 2=2 ∗0.05769 =0.115
    µl µl

    .
    Tabla 1. Disoluciones para la curva de calibración de Albumina. Tubo 0 a 5

    Tubo Patrón de Agua Factor de Concentración Absorbancias


    albumina dilución g/ µƖ obtenidas
    0 0 µƖ 400 µƖ 0 0 0
    1 30 µƖ 370 µƖ 0.01153 0.023 0.253
    2 60 µƖ 340 µƖ 0.02307 0.046 0.464
    3 90 µƖ 310 µƖ 0.03461 0.069 0.613
    4 120 µƖ 280 µƖ 0.04615 0.092 0.759
    5 150 µƖ 250 µƖ 0.05769 0.115 0.876

    Grafica 1.
    Absorbancia vs Concentración

    y = Absorbancia
    CON PATRÓN ALBÚMINA
    1
    0.9
    f(x) = 7.51180124223602 x + 0.0622380952380952
    0.8 R² = 0.979463964002776
    0.7
    0.6
    0.5
    0.4
    0.3
    0.2
    0.1
    0
    0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14
    x = Concentración

    Grafica 2.

    Absorbancia vs Concentración sin la muestra de control


    y = Absorbancia
    SIN MUESTRA DE CONTROL
    1
    0.9
    f(x) = 6.7 x + 0.1307
    0.8
    R² = 0.988272725002705
    0.7
    0.6
    0.5
    0.4
    0.3
    0.2
    0.1
    0
    0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14
    x = Concentración

    Para calcular la concentración de los tubos 6 al 11. Se realiza los mismos cálculos repitiendo
    desde el factor de dilución en base a las cantidades de la muestra problema tanto A como B.
    120
    Tubo 6=
    120+ 280+ 200+2 00 0
    ¿ 0.04615

    200
    Tubo 7=
    200+ 200+200+2 0 00
    ¿ 0.0769 2

    120
    Tubo 8=
    120+ 28 0+ 200+2 00 0
    ¿ 0.04615

    200
    Tubo 9=
    200+ 200+200+200 0
    ¿ 0.07692
    4 00
    Tubo 10=
    4 00+0+ 200+200 0
    ¿ 0. 15 384

    4 00
    Tubo 1 1=
    4 00+ 0+200+200 0
    ¿ 0. 15384

    Con la absorbancia obtenida de los tubos 6 al 11 podemos despejar x que representa la


    concentración de la ecuación de la recta de la gráfica 2 que es sin muestra de control.
    y=6.7 x +0.13 07
    y−0.13 07
    x=
    6.7

    Tubo 6
    0.278−0.13 07
    =0.023
    6.7
    Tubo 7
    0. 478−0.13 07
    =0. 051
    6.7
    Tubo 8
    0.359−0.13 07
    =0.034
    6.7
    Tubo 9
    0.566−0.13 07
    =0.0 6 4
    6.7
    Tubo 10
    0 ,759−0.13 07
    =0.0 93
    6.7
    Tubo 11
    0.763−0.13 07
    =0.994
    6.7

    Tabla 2
    Datos en relación a

    Tubo Muestra Agua Factor Concentración Absorbancia


    problema Dilución g/ µƖ 580nm
    6 120 µƖ 280 µƖ 0.04615 0.023 0.278
    muestra A
    7 200 µƖ 200 µƖ 0.07692 0.051 0.478
    muestra A
    8 120 µƖ 280 µƖ 0.04615 0.034 0.359
    muestra B
    9 200 µƖ 200 µƖ 0.07692 0.064 0.566
    muestra B
    10 400 µƖ 0 µƖ 0.15384 0.093 0.759
    muestra A
    11 400 µƖ 0 µƖ 0.15384 0.994 0.863
    muestra A

    Grafica 2.
    Absorbancia vs Concentración

    La concentración de las proteínas de las muestras de partida son:


    - MUESTRA A: 0.02 g/ µƖ
    - MUESTRA B: 0.034 g/ µƖ

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