suspension de globulos rojos

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Suspension de globulos rojos

Introducción

Los glóbulos rojos o eritrocitos o hematíes son el tipo de célula más numerosa de la sangre ya
que constituyen el 99% de los elementos formes de la sangre. Su principal función es la de
transportar la hemoglobina y, en consecuencia, llevar oxígeno (O2) desde los pulmones a los
tejidos y dióxido de carbono (CO2) desde los tejidos a los pulmones.

Los antígenos y anticuerpos son componentes clave en la suspensión de globulos rojos: Los
antígenos son moléculas o estructuras que pueden inducir una respuesta inmune. En el contexto
de los glóbulos rojos, son generalmente proteínas o carbohidratos presentes en la super cie de
estas células. Su presencia o ausencia determina el grupo sanguíneo y es crucial para
transfusiones de sangre. Un ejemplo puede ser que una persona tenga antígenos A (grupo A),
antígenos B (grupo B), ambos (grupo AB) o ninguno (grupo O).

Por otra parte los anticuerpos son proteínas producidas por el sistema inmunológico en respuesta
a la presencia de antígenos. Los individuos tienen anticuerpos contra los antígenos que no
poseen. Por ejemplo, un individuo con grupo A tiene anticuerpos anti-B.

Para esta tecnica es utilizada la aglutinación. La aglutinación en la suspensión de glóbulos rojos


es un fenómeno inmunológico que ocurre cuando los anticuerpos se unen a los antígenos
presentes en la super cie de los glóbulos rojos, formando grupos o "aglutinados"
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1. Pasos para realizar la Suspensión de Glóbulos Rojos

La suspensión de glóbulos rojos se realiza siguiendo un procedimiento específico para asegurar


que la concentración y la calidad de la muestra sean adecuadas para las pruebas de laboratorio,
como la tipificación sanguínea o pruebas de aglutinación.

1. Recolección de la Muestra:

- Toma una muestra de sangre del paciente mediante venopunción utilizando un tubo de
recolección adecuado (generalmente un tubo con anticoagulante).

2. Centrifugación:

- Centrifuga la muestra a una velocidad y tiempo específicos (por ejemplo, 3000 rpm durante
5-10 minutos) para separar los glóbulos rojos del plasma y otros componentes.

- Después de la centrifugación, se observarán tres capas: el plasma en la parte superior, el buffy


coat (capa de leucocitos y plaquetas) en el medio y los glóbulos rojos en el fondo.

3. . Recolección de Glóbulos Rojos:

- Con una pipeta, recoge cuidadosamente la capa de glóbulos rojos, evitando contaminar el
plasma y el buffy coat.

4. Dilución:

- Suspende los glóbulos rojos en una solución salina o en un medio adecuado (como solución
salina isotónica) para obtener una concentración específica. La dilución típica es de 1:10 a 1:20,
dependiendo de la prueba.

- Mezcla suavemente para asegurar que los glóbulos rojos estén bien dispersos en la solución.

6. Adición del suero:

En este paso, se añaden gotas de sueros específicos que contienen anticuerpos. Por ejemplo:

• Suero anti-A (para detectar antígeno A).

• Suero anti-B (para detectar antígeno B).


Esta adición se realiza en diferentes pocillos o áreas de la placa, donde cada área puede tener un
suero diferente.

7. Incubación

La mezcla se incuba durante un tiempo específico a temperatura ambiente o en un incubador.


Esto permite que los anticuerpos se unan a los antígenos presentes en los glóbulos rojos.

8. Observación de la aglutinación

Después de la incubación, se observa si ha ocurrido aglutinación. Si los glóbulos rojos se


aglutinan, indica que el antígeno correspondiente está presente en la muestra.

2. Utilidad e importancia en el uso de controles

A. Control positivo: Es una muestra que se sabe que dará un resultado positivo en la prueba.
Contiene los antígenos específicos que se están buscando. Su propósito es el siguiente:

• Validación de la Prueba: Asegura que el procedimiento y los reactivos están funcionando


correctamente. Si el control positivo no muestra aglutinación, indica que hay un problema en la
técnica o en los reactivos.

• Confirmación de Especificidad: Verifica que los anticuerpos en el suero reaccionan


adecuadamente con los antígenos presentes en la muestra.

B. Control negativo: Un control negativo es una muestra que no contiene los antígenos
específicos que se están buscando. No debe mostrar aglutinación. Su propósito es el
siguiente:

• Detección de Resultados Falsos Positivos: Asegura que cualquier aglutinación observada en la


muestra del paciente no es un resultado falso positivo. Si el control negativo muestra
aglutinación, indica un problema.

• Confirmación de Ausencia de Reacción: Verifica que los reactivos no están reaccionando de


manera inespecífica con otros componentes de la muestra.
C. Importancia de usar controles:

• Calidad y Fiabilidad: El uso de estos controles garantiza la calidad y fiabilidad de los


resultados obtenidos en las pruebas.

• Seguridad del Paciente: Asegura que los resultados son precisos, lo cual es crítico para la
seguridad en transfusiones sanguíneas y otros procedimientos médicos.

• Mejora Continua: Permite a los laboratorios identificar problemas en sus protocolos y mejorar
continuamente la calidad de sus pruebas.

3. Factores para evitar errores :

A. Toma de la muestra:

• Condición de la Muestra: La sangre debe ser fresca y no estar hemolizada o coagulada.


B. Preparación de la Muestra

• Dilución Adecuada: Diluir correctamente la muestra en solución salina o el medio


adecuado para obtener una concentración óptima de glóbulos rojos.
• Homogeneidad: Mezclar bien la muestra antes de realizar la suspensión para asegurar la
uniformidad.
C. Uso de Reactivos

• Calidad de Reactivos: Utiliza reactivos de alta calidad y dentro de su fecha de caducidad.


• Especificidad: Asegúrate de que los reactivos sean específicos para los antígenos que se
están buscando.
D. Condiciones Ambientales
• Temperatura: Mantén la temperatura adecuada durante la preparación y almacenamiento
de la muestra y los reactivos.
• Higiene: Trabaja en un ambiente limpio y sigue las normas de bioseguridad para evitar
contaminación.
D. Técnica de Manejo

• Uso de Controles: Siempre incluye controles positivos y negativos para validar los
resultados.
• Protocolos Estándar: Sigue estrictamente los protocolos establecidos para evitar errores
técnicos.
E. Equipamiento

• Calibración de Equipos: Asegúrate de que todos los equipos utilizados estén bien
calibrados y funcionando correctamente.
• Uso de Material Estéril: Utiliza pipetas, tubos y otros materiales estériles para evitar
contaminación.

4. Ventajas y desventajas de la técnica

A. Ventajas :

• Simplicidad y Rapidez: La técnica es relativamente sencilla de realizar y puede llevarse a cabo


en un corto período de tiempo, lo que permite obtener resultados rápidamente.

• Bajo Costo: Los reactivos y materiales necesarios para la prueba son generalmente
económicos, lo que hace que la técnica sea accesible para muchos laboratorios.

• Visualización Directa: La aglutinación es un fenómeno visible a simple vista, lo que facilita la


interpretación de resultados sin necesidad de equipo especializado.

• Eficacia en la Detección: La técnica es muy efectiva para identificar grupos sanguíneos y


detectar anticuerpos, lo que es crucial para transfusiones seguras.

• Uso de Controles: La inclusión de controles positivos y negativos permite validar la precisión


de los resultados y detectar errores en la técnica.

B. Desventajas:

• Falsos Positivos y Negativos: Pueden ocurrir reacciones inespecíficas que lleven a falsos
positivos, así como la posibilidad de no detectar ciertos anticuerpos, resultando en falsos
negativos.
• Limitaciones en la Identificación: La técnica puede no ser suficiente para identificar todos los
subgrupos o variantes raras de grupos sanguíneos, lo que puede requerir métodos más
avanzados.
• Condiciones Ambientales Sensibles: La aglutinación puede verse afectada por factores como la
temperatura y el pH, lo que puede comprometer la fiabilidad de los resultados si no se
controlan adecuadamente.
• No Detecta Anticuerpos Débiles: La técnica puede no ser sensible a anticuerpos en bajas
concentraciones, lo que podría llevar a la omisión de reacciones importantes.

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