APUNTES de UROANALISIS Vicente de Maria y Campos

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UROANÁLISIS Vicente de Mária y Campos Otegui vicdemaria@yahoo.com.

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UROANÁLISIS Vicente de Mária y Campos Otegui vicdemaria@yahoo.com.mx

Página TÍTULO
3 INTRODUCCIÓN
5 Historia
6 Mitología
6 Herramientas
10 FASE PREANALÍTICA
20 FASE ANALÍTICA
20 Examen Macroscópico
22 Examen Químico
24 Examen Macroscópico
28 IDENIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICROSCÓPICAS
30 Reconocimiento de Células
36 CÉLULAS EPITELIALES
37 Epitelio Plano Estratificado
41 Epitelio Transicional
44 Epitelio Cilíndrico
46 Epitelio Cúbico
47 CÉLULAS SANGUÍNEAS
48 Leucocitos
54 Eritrocitos
62 CRISTALURIA
85 TINCIONES
92 Control Interno de la Calidad
102 INFORME DE RESULTADOS
106 TIRA REACTIVA

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INTRODUCCIÓN

El tracto urinario es una oportunidad muy especial para el pleno desarrollo de los
conocimientos y las habilidades del Laboratorio Clínico al emitir en forma
(normalmente) espontanea la Orina, interesante producto final en la regulación de
la composición del líquido extracelular que proporciona a los tejidos un medio
ambiente en el que las células que los conforman pueden mantener su integridad
osmótica y desarrollar sus funciones, valiéndose de la excreción regulada de
cantidades variables de agua y electrolitos y, junto con ella la eliminación de
sustancias de desecho metabólico y contaminantes exógenos que pudieran alterar
las funciones del organismo; la Orina constituye todo un informe líquido con
múltiples aplicaciones:

En la perspectiva del organismo en general nos habla de:


 El estado de hidratación general
 Emergencias metabólicas
 Control ácido-base
 Trastornos hemolíticos

En relación con el Tracto digestivo:


 Trastornos hepáticos con presencia de Bilirrubina
 Hemorragias pre-gástricas (como várices esofágicas) y gástricas con la
aparición de cristales de Leucina

La presencia de deficiencias metabólicas Genéticas, Congénitas y pasajeras


adquiridas con:
 Cristales de Cistina
 Cristales de 2, 8 di-hidroxiadenina
 Cristales de Ácido Úrico
 Cristales de Oxalato de Calcio

El estado general del Tracto Urinario:


 La capacidad de concentración mediante la densidad
 La aparición de cantidades detectables de Proteínas
 Estados emergentes graves de disfuncionalidad con la presencia de
Cristales de Colesterol
 Estados de deterioro con Eritrocitos Dismórficos y/o Cilindros

La presencia de agentes infecciosos:


 Con la demostración directa, por observación o cultivo
 Por la observación de alteraciones citológicas patognomónicas
 Por la presentación de Muerte Celular orientadora
 Con la presencia de Fosfato Cálcico-Magnésico, por bacterias ureolíticas

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En la Salud o Alteración Celular de los tejidos que lo componen:


 La medición de marcadores Químicos para monitorear las funciones
renales
 La medición de Marcadores Tumorales de importancia en la detección de
neoplasia local
 La detección de Alteraciones Genéticas de importancia pronóstica en el
tracto urinario mediante la Biología Molecular
 Con la observación directa del barrido de Células recopiladas a lo largo del
camino recorrido por la Orina tanto de origen hematopoyético como Epitelial

Para satisfacer tales objetivos requiere del cumplimento de dos condiciones


generales:
a) La adecuada obtención de una muestra, proveniente de un paciente con una
indicación médica bien dirigida para la realización del examen. Las indicaciones
para la realización del Uroanálisis son las siguientes:

Sospecha o seguimiento de síntomas que sugieran infección del tracto urinario


Sospecha o seguimiento de enfermedad renal no infecciosa, primaria o
secundaria a enfermedad crónica (reumática, hipertensión, toxemia por
embarazo, efectos adversos a medicamentos)
Sospecha o seguimiento de enfermedad post-renal no infecciosa
Detección de glucosuria
Seguimiento de pacientes con diabetes
Detección o seguimiento de estados metabólicos como: vómito o diarrea,
acidosis/ alcalosis, cetosis o litiasis

b) Un Uroanálisis con procedimientos estandarizados y bien realizados. La Norma


Mexicana NMX-EC-15189-IMNC-2006 que incluye los Requisitos Particulares
para la Calidad y la Competencia de los Laboratorios Clínicos, indispensable
para la Acreditación del Laboratorio en la República Mexicana, enuncia en su
introducción: “ Los servicios del Laboratorio Clínico son esenciales para la
atención al paciente y por tanto deben estar disponibles para cumplir con las
necesidades de todos los pacientes y el personal clínico responsable de la
salud humana. Esto incluye requisición, preparación del paciente, recolección
de muestras, identificación, transporte, almacenamiento, procesamiento y
examen de muestras clínicas con la subsiguiente validación, interpretación e
informe, así como la seguridad y la ética del trabajo del laboratorio”.

El objetivo del presente documento es el de proporcionar una guía práctica para


la estandarización del procesamiento y examen de las muestras de orina, en
donde la experiencia en el área analítica, de enseñanza y de evaluación externa
de la calidad me han demostrado una necesidad de atención especial en el
Uroanálisis.

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HISTORIA

La Uroscopía es tan antigua como la medicina misma. El Examen de la Orina


puede ser rastreado 6000 años atrás en textos Sumerios y Babilonios. Desde
aquella época hasta el siglo 19 podemos llamarlo “la Antigüedad”; la era
moderna se inició junto con la posibilidad de observar microscópicamente y
analizar químicamente a la orina. El mayor desarrollo comprende los siglos 19
y 20 y el siguiente cambio significativo en la actualidad va de la mano de la
Biología Molecular.

En los libros de medicina y Laboratorio se puede seguir un sinnúmero de


episodios en el paso de los años, dentro de los cuales puede considerarse
significativa la mención de la “albuminuria” a finales del siglo dieciocho. Fué
hasta llegar al Siglo Diecinueve cuando se inició el verdadero desarrolló del
Examen Microscópico de la Orina y la composición de los líquidos orgánicos con
los avances en la Química Orgánica y la aparición de microscopios de suficiente
poder.

El Examen Microscópico de la Orina se estableció como una práctica clínica


rutinaria en 1837 por el trabajo de dos Nefrólogos franceses: Pierre Francoise
Olive Rayer y Eugene Napoleón Vigla.

Alfred Francoise Donne (1801 – 1870), bacteriólogo francés, quien descubrió las
Trichomonas vaginalis y la Leucemia e inventó el Microscopio Foto-eléctrico en
colaboración con Foucault, fue el primero en dar cursos de microscopía para
Médicos y para el público en general. En 1845 presentó las primeras fotografías
de preparaciones microscópicas utilizando la técnica de Luis Daguerre.

En 1918 Quensel utilizó su técnica de tinción supravital de cadmio-azul de


metileno-Sudán III en un artículo educativo donde presentó 13 casos de
carcinoma de vejiga, 12 casos de papiloma, 9 casos de hipernefromas, 1 fibroma
y un endotelioma del riñón de un total de 284 pacientes. (brief chronicle)

A partir de entonces se puede notar un importante punto de división en el camino


del diagnóstico a partir del Análisis de la Orina:
 Tras el arranque del Uroanálisis actual, los pioneros del Siglo 19, los
Nefrólogos, continúan con un énfasis en la diversidad de partículas
microscópicas y marcadores solubles importantes en el diagnóstico de las
Nefropatías y con una clara disminución en la atención al diagnóstico
celular, dejándolo en manos de la creciente especialidad:
 La Citología Exfoliativa que, una vez aceptada y difundida ha caminado
de la mano de los avances en la profundidad de la Ciencia Biológica,
asignando significado diagnóstico a la morfología celular y reclasificándola
en Sistemas de Informe de Resultados. La tendencia en las últimas 4
décadas apunta a dividir las lesiones celulares en: Bajo Grado y Alto

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Grado, dependiendo del comportamiento esperado según su fundamento


molecular y el pronóstico en la sobrevida del paciente, y
 El Laboratorio Clínico, alejado de ambos y dedicado insistentemente a la
Estandarización en las mediciones químicas y las cuantificaciones de
partículas microscópicas, actualizando técnicas y sistemas automatizados
para obtener cuentas de leucocitos y eritrocitos como protagonistas junto
con los cristales, acompañados de constantes e imperecederos errores en
la identificación celular.

MITOLOGÍA.
El Laboratorio Clínico como un área de la salud, fundamental en la llamada
“medicina basada en evidencias” exige profundas bases científicas para la
comprensión de los factores que afectan los procesos para la obtención de
resultados adecuados y la interpretación de las desviaciones cuando no se
confirma una sospecha diagnóstica (o las cosas no salen como se esperaba). Las
bases teóricas se adquieren en intensos años de preparación académica, pero
tratándose de un área de investigación clínica eminentemente práctica, el
profesional del laboratorio culmina su preparación y se perfecciona en el campo
de trabajo. Aquí es donde debemos recordar:
 La Mente es como el Paracaídas: Si no se abre, No Sirve; luego
 El ajuste micrométrico enfoca los objetos en el microscopio, el Sentido
Común enfoca las ideas y las imágenes en la mente, y
 Muchas veces nos cuentan solo parte de la historia

La “experiencia” es un concepto activo, tanto física como mentalmente, buscando


respuestas en la investigación y promoviendo la evolución de la profesión.

Una costumbre arraigada en el Laboratorio Clínico para transmitir el conocimiento


teórico ha sido la tradición oral, llena de mitología que se transmite en
apasionantes narraciones acompañadas de un café caliente, reunidos alrededor
de la llama de un mechero, donde la falta de información actual puede convencer
al analista de borrar los cilindros del resultado de una muestra por no presentar
proteínas en la medición con tira reactiva o siempre bajar el condensador del
microscopio para observar muestras líquidas o sin colorante.

Este y otros mitos acompañan a la práctica del uroanálisis y aunque, como


cualquier mito, pueden haber tenido una base de realidad en el pasado, los que
se refieren al método de trabajo deben ser revisados para lograr resultados
reproducibles y con un valor clínico.

HERRAMIENTAS

Química Urinaria.
La herramienta por excelencia en el uroanálisis es la Tira Reactiva para el examen
químico. Siglo XX: en 1947, las compañías de seguros comienzan a incorporar el
Examen General de Orina a sus exámenes médicos, lo que incrementa

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enormemente el número de exámenes realizados. En 1941 Walter Ames Compton


desarrolla una tableta reactiva para determinar azúcares reductores en orina de
forma mucho más rápida y simple que la prueba de Benedict que se utilizaba
hasta entonces. En 1950, la compañía Boehringer Mannheim fabricó las tirillas
reactivas por vez primera a nivel industrial.
Con un amplio desarrollo en la segunda mitad del siglo XX hasta su
comercialización en la década de 1950, es el avance de la tecnología que dio el
impulso inicial a la posibilidad de analizar un elevado número de muestras de
orina en un corto tiempo. Su facilidad de uso, alta sensibilidad y especificidad, y la
rapidez con el que se obtienen resultados semicuantitativos de 10 parámetros, da
importante información sobre el metabolismo de carbohidratos, función hepática y
renal, balance ácido-base e infecciones de las vías urinarias.

Los mejores resultados que se pueden obtener con las tiras reactivas requieren
una serie de condiciones que se deben controlar y que dependen en su mayoría
del desempeño del analista y son las más importantes:
 Diferentes condiciones de alumbrado en el sitio de trabajo
 Capacidad de discernimiento de colores interindividual por los diferentes
analistas
 Una intensa coloración propia de la orina
 Cansancio y disminución de la capacidad de concentrarse en grandes
series de muestras
 Exactitud en la medición del tiempo de reacción para la lectura de la tira

Por estas razones se ha desarrollado la siguiente herramienta que ha mejorado


significativamente el análisis químico de la orina, los equipos lectores de tiras
reactivas. Son fotómetros de reflexión en los que se emite un haz de luz de
determinada longitud de onda dirigido a cada una de las zonas reactivas de la
tira, se mide la luz reflejada, se procesa y se convierte en un resultado de
concentración por un procesador.

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Los sistemas destinados al análisis químico de la orina se dividen en tres


categorías:

 Equipos para medición individual. Solamente se introduce una tira


reactiva en cada ciclo de lectura. La tira se coloca en un canal estrecho,
con dimensiones exactas para albergar una tira. Se da una señal de inicio
y la tira es introducida al fotómetro para su lectura con un adecuado control
del tiempo de reacción. A continuación se debe retirar la tira manualmente.
Presenta ventajas significativas sobre la lectura visual de la tira reactiva,
pero se debe tener en cuenta un adecuado manejo, ya que el disparo del
cronómetro que mide el tiempo de reacción depende del analista. Otro
cuidado primordial para el funcionamiento de este tipo de equipo es la
limpieza del canal de introducción de la tira, ya que por sus dimensiones
facilita el arrastre entre muestras.

 Sistemas de análisis semiautomáticos. Se introducen las tiras


manualmente pero en forma continua en intervalos breves. El transporte, la
medición y eliminación de las tiras se realizan automáticamente. Los
resultados de la medición son memorizados y producidos
automáticamente. Este nivel de equipo mejora el riesgo de arrastre que
presenta el nivel anterior y acelera el proceso.

 Sistemas de análisis totalmente automatizados. En este tipo de sistema


se introduce una alícuota de la muestra de orina en un tubo de ensayo en
un dispositivo de posición (”rack”). El reconocimiento de la muestra, la
inmersión de la tira en la orina, la incubación, conducción y lectura de la
tira son completamente automatizadas. Un sistema de medición con estas
características estandariza todo el proceso del examen químico con la tira
reactiva y solamente requiere de los cuidados comunes a cualquier
sistema automatizado con que se cuente en el laboratorio y deben
consultarse en el manual de operación del fabricante.

Desde la utilización manual de la tira reactiva hasta la sistematización con un


analizador automatizado deben vigilarse mediante un sistema de Control de
Calidad que permita evaluar tanto la reproducibilidad como la exactitud de los
resultados, en lo que prestaremos especial atención en un capítulo posterior, ya
que la aparente sencillez en el uso de las tiras reactivas y los equipos lectores,
los hace susceptibles de la presentación de errores aleatorios y sistemáticos que
requieren demostrarse para corregirse y prevenirse.

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Análisis Microscópico.
La herramienta más sencilla y la primera que apareció en el mercado es el
sistema Kova para estandarización de la cuenta microscópica de partículas en el
sedimento urinario. Es un equipo de material plástico desechable y estandarizado
para controlar el volumen en el tubo, resuspender el sedimento en un volumen fijo
y contar las partículas microscópicas en una cámara de cuenta estandarizada (se
describe con detalle más adelante).

Más recientemente la automatización ha alcanzado al análisis microscópico de la


orina desarrollando equipos para la cuenta e identificación de partículas
microscópicas con dos tecnologías:

 Citometría de flujo combinando cuenta de partículas y medición de


volúmenes con impedancia eléctrica y un análisis óptico con laser.
 Análisis de imágenes en un equipo que fotografía un flujo de muestra de
orina para cuantificar las partículas que identifica por comparación con un
amplio archivo de imágenes. Se obtienen imágenes individuales de cada
partícula identificada por los algoritmos del software.
 Microscopía de campo claro o contraste de fases con opción automatizada
y manual en sedimento urinario preparado con citocentrifugación en una
cámara de calidad óptica.

La primera no dio resultados satisfactorios como la Citometría Hemática, en la


que la diferencia en el tamaño y la forma de la partícula más pequeña a la más
grande no es tan notoria como en el sedimento urinario, además de las
diferencias tan radicales en la forma de las partículas analizadas.

La segunda mejoró radicalmente las expectativas obteniendo imágenes reales


pero separadas en pantallas dedicadas a cada partícula (una pantalla con
leucocitos, una con eritrocitos etc.).

La última y de más reciente desarrollo es la más satisfactoria. Difícil de fallar por


su sencillez, recrea los pasos originales de un uroanálisis manual obteniendo
imágenes reales del campo microscópico evitando las pérdidas propias de la
centrifugación tradicional en tubos de ensayo.

Para tranquilidad de los analistas apasionados de la microscopía, los equipos


automatizados requieren de un analista experto para validar los resultados y
completar la identificación con mayor frecuencia y dependencia que los
analizadores de hematología, sobre todo en la identificación y tipificación de
células epiteliales.

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ETAPA PREANALÍTICA.

OBTENCIÓN DE MUESTRA

Todo un punto de discusión y una oportunidad de cambiar el valor diagnóstico del


Examen de la Orina.

Los riñones mantienen estable y adecuada la composición del líquido extracelular


en los tejidos del organismo para proporcionar nutrientes y retirar desechos
metabólicos asegurando el volumen y la viabilidad celular.

Tan importante tarea se realiza filtrando la sangre circulante, con lo que


inicialmente pasan agua, desechos y sustancias propias de la fisiología normal,
nutrición y comunicación celular y las sacan con el filtrado.

Enseguida se recuperan agua y sustancias de las funciones fisiológicas. La


cantidad de agua y electrolitos recuperados o excretados van a depender de las
necesidades momentáneas del organismo, influidas por:
 Actividad física
 La actividad metabólica que depende de ella y ambas de la
 Hora del día, de la
 Ingesta de nutrientes y absorción de los mismos
 Ingesta de líquidos y
 Temperatura ambiente

El agua proveniente del filtrado renal, que lleva disueltas las sustancias de
desecho y que el balance de pH y electrolitos requerido para el funcionamiento de
las células en los tejidos elimina, se llama Orina. Para evitar una severa y continua
pérdida de agua, la mayoría se reabsorbe (más del 90% del agua filtrada).

La orina se cumula en la Vejiga por periodos de tiempo variables según la


velocidad de formación, dependiente de los factores enlistados y finalmente se
expulsa fuera del organismo por la uretra.

La Formación, Transporte por el tracto urinario, Acumulación y Eliminación de la


Orina produce efectos importantes y detectables en su composición:

Formación:
1. Origen: Al componerse de sustancias filtrables por tamaño y carga eléctrica
solubles en el plasma circulante, contiene cualquier sustancia que eleve su
concentración en sangre o se concentre en el filtrado por alguna de estas
opciones:

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 Es una sustancia de desecho producida en exceso como consecuencia de


un cambio eventual o permanente como la Bilirrubina y se elimina en su
totalidad, con una proporción de reabsorción mínima o nula.

 Un producto final o intermedio de una ruta metabólica producido en exceso


por una deficiencia enzimática hereditaria, como 2, 8-dihidroxiadenina,
ácido úrico u oxalato de calcio.

 Alguna sustancia de la cual es posible reabsorber una cantidad limitada por


el mecanismo de reabsorción (umbral renal), a partir de la cual van a
presentarse pérdidas en la orina, como Glucosa o Leucina.

2. Filtración: por un cambio en la integridad o la funcionalidad del sistema de


filtración pueden aparecer:

 Proteínas que por tamaño y/o carga eléctrica se retienen normalmente

 Gotas de lípidos reabsorbidas por las células tubulares renales

 Cristales de colesterol provenientes de lipoproteínas circulantes para


compensar osmolaridad en pérdidas masivas de albúmina por glomérulos
dañados

 Eritrocitos Dismórficos, llamados así por los cambios morfológicos que


causa el paso forzado los eritrocitos por una membrana glomerular dañada,
donde la intensa carga eléctrica de las proteínas constituyentes de esta
capa de filtración desprenden y deforman la arquitectura de las proteínas
del citoesqueleto del eritrocito.

Transporte por el tracto urinario:


Proporciona sustancias químicas y células:

 Sustancias Químicas: la Glucoproteína de Tamm-Horsfall proveniente de


los tubos renales en la nefrona y los Glucosaminoglucanos y la Mucina de
la Vejiga.

 Células: todas las estructuras tubulares como los tubos contorneados


renales, los uréteres y la uretra, y las estaciones temporales como la pelvis
renal y la vejiga están cubiertas por epitelios que van a aportar células en
mayor o menor cantidad dependiendo de su naturaleza, funciones y estado
de salud.

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Acumulación en la Vejiga:

Puede ser el factor más perjudicial en el camino natural de la orina del riñón al
frasco de muestra. Tradicionalmente se ha preferido en muchos Laboratorios de
Análisis Clínicos recibir la primera orina de la mañana por llevar más tiempo
acumulada en la vejiga y con ello más concentración de sustancias y partículas
microscópicas. El problema con esta presentación de orina es el efecto que el
tiempo va a ejercer y que puede causar:

 Crecimiento de los cristales provenientes de las vías urinarias altas y


aparición de nuevos

 Deterioro de las Células Epiteliales al permanecer por horas en un


ambiente de elevada osmolaridad, sin aporte de nutrientes y sin suministro
de oxígeno.

 Deterioro o desaparición de los cilindros.

 Bacterias: para las especies que no forman parte del microbioma de la


vejiga es variable, a algunas las multiplica y a otras las daña y dificulta su
cultivo.

Dentro de las ventajas encontramos las consecuencias de un periodo previo de


ayuno que por absorción intestinal de ácido estomacal mantiene una orina ácida,
de modo que la aparición de un pH elevado facilita el diagnóstico de infección
bacteriana.

Eliminación por la Uretra:

Femenina: por su corta longitud, su forma recta y su vecindad externa con flora
bacteriana vaginal y cierta cercanía con flora intestinal, puede aportar células,
leucocitos y bacterias ajenas al tracto urinario, del cual forma parte,

Masculina: Es menos susceptible de conducir bacterias casuales a la vejiga pero


es más compleja que la femenina en su histología y por su función compartida con
los órganos de la reproducción puede aportar mayor variedad de Células
Epiteliales.

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MUESTRA DE ORINA

Históricamente se ha preferido la obtención del Chorro Medio para evitar la


contaminación con bacterias de la uretra con el objetivo de obtener e identificar al
patógeno responsable de la pielonefritis. El interés depositado en el diagnóstico de
una infección que compromete el parénquima renal y con ello su capacidad de
mantener la homeostasis es muy obvio, sin embargo los sacrificios que ha
causado no parecen estar justificados según los resultados logrados, es decir, los
fines no justifican los medios.

Bien, la muestra de chorro medio está escrita en piedra desde hace más de un
siglo como estándar para el Análisis Bacteriológico o Urocultivo. Dos hechos
científicos recientes deberían considerarse para un probable cambio:
 La Vejiga posee un Microbioma demostrado por Biología Molecular,
Rosalind Maskell en 1979 alertó sobre la presencia de especies de lento
crecimiento que han sido demostradas en fechas recientes.
 La obtención de muestras de orina sin eliminar el primer chorro y las de
chorro medio rinden el mismo porcentaje de falsos positivos.

Pero, aún hay algo más importante que considerar: el Examen General de Orina o
Uroanálisis es un procedimiento distinto del Urocultivo y requiere una muestra
distinta y NO excluyente de la obtención de la muestra estándar para el cultivo
(chorro medio) por el paciente el mismo día de su cita al laboratorio.

EL PRIMER CHORRO.

Es difícil averiguar en qué momento del camino se confundió la muestra para uno
y otro examen, pero la práctica de obtención del chorro medio está eliminando del
tracto urinario a La Uretra, a la cual debemos incluir por motivos como los
siguientes:

 Las infecciones relacionadas con la actividad sexual en los pacientes de


Sexo Masculino, como Chlamydia trachomatis, Virus del papiloma Humano
y Trichomonas vaginalis se encuentran en la uretra.
 La uretritis causada por este tipo
de agentes infecciosos o de otro origen
causa síntomas
 La Uretra femenina tiene una
longitud que hace difícil definir el volumen
que representa la eliminación del primer
chorro para evitar las bacterias y la
contaminación con células y bacterias de
los genitales externos

¿CONTAMINACIÓN?

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El trígono vesical Femenino formado por la superficie interior de la vejiga


delimitada por el orificio de los uréteres y la uretra, de superficie lisa y sin pliegues,
está cubierto por Epitelio Plano Estratificado que responde a la acción de las
hormonas estrógenos y progesterona (Este cambio se utiliza para realizar el
urocitograma hormonal). Es morfológicamente indistinguible del epitelio presente
en el canal vaginal y comparten Lactobacilos como microbiota normal.

Los Uréteres recorren la pared posterior de la Vejiga


y se insertan en la parte inferior, formando el Trígono
junto con la uretra. Las partículas microscópicas de
mayor importancia diagnóstica: Células, Grupos
celulares, Cristales, Cilindros, Comunidades
Bacterianas y sus combinaciones se depositan en la
parte baja del Trígono y permanecen por su mayor
peso.

La vejiga se llena de orina de abajo hacia arriba y las


partículas más ligeras flotan en el volumen de orina:
bacterias, levaduras, leucocitos y mucina.

La primer porción de orina eliminada en la micción


incluye todas las partículas diagnósticas depositadas
provenientes de: Riñon, Pelvis Renal, Uréteres, Vejiga y
Uretra.

La segunda porción incluye partículas ligeras que se


mantienen flotantes: bacterias planctónicas, leucocitos y
mucina que los microbiólogos consideran de
importancia y que excluyen la visualización de bacterias
adheridas a células epiteliales importantes como: cocos

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en células escamosas y bacilos en células transicionales que no se van a


reproducir en los medios sintéticos de cultivo. También se puede perder las
formaciones de Biofilm con lo que se resta importancia y sensibilidad al
diagnóstico microbiológico.

Lineamientos del tema, elaborados por grupos de especialistas multidisciplinarios,


como el Sistema Paris para el Informe de la Citología Urinaria o Los
Requerimientos Preanalíticos para el Uroanálisis en Bélgica mencionan
claramente las ventajas del Primer Chorro como:
 Mayor contenido de partículas importantes como células epiteliales,
leucocitos y eritrocitos
 Existe una percepción equivocada de que las células en los líquidos
corporals son solutos en una dispersión homogenea y en relaidad la orina
incluye una mexcla heterogénea de parículas insolubles: cristales,
microorganismos, detritos celulares, células y cilindros. Es heterogénea
porque las partículas no se distribuyen unifórmemente através del volumen.
Las partículas más densas se depositan y puede haber una seria pérdida
de la utilidad diagnostica de la orina si solo se analiza el sobrenadante que
es acelular o escaso cuando la primera porción de la orina no fué
capturada en el frasco contenedor.

Por todos los motivos expuestos la muestra más útil para el Examen General de
Orina es EL PRIMER CHORRO.

PRIMER ORINA DE LA MAÑANA.

Según la tradición en la bibliografía se prefiere la primer orina de la mañana


porque acumula más concentración y partículas microscópicas, pero
deterioradas.

La mejor muestra es definitivamente la de más cercana obtención antes de


entregarla para su análisis. Los puntos importantes para obtener el mayor valor
diagnóstico de una muestra que no es la primera de la mañana son:

 Una ingesta moderada de líquido previo a la obtención de la muestra. La


segunda muestra de la mañana equivale a la primera con una ingesta de
200 a 300 mL de líquidos por la noche
 Es recomendable conservar la indicación de la limpieza externa

La mayor parte de las muestras son obtenidas por el propio paciente y existen
algunos casos con la asistencia de un profesional de la salud u otra persona.

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El éxito inicia con unas instrucciones claras y concretas en un lenguaje


comprensible por el paciente, en forma oral, escrita y de preferencia acompañadas
por dibujos demostrativos.

Se recomienda que las instrucciones que se proporcionan al paciente ambulatorio


incluyan los siguientes puntos como mínimo:
Para paciente masculino:
 Lave sus manos con agua y jabón antes de obtener la muestra
 Retraiga la piel del pene y lave la salida de la uretra con una toalla
mojada (con pura agua)
 Limpie y seque con una toalla seca
 Deje salir el primer chorro directo al frasco
 Elimine el resto en la taza del baño
 Tape el frasco evitando tocar el interior y entregarlo en el laboratorio lo
antes posible

Para paciente femenino:


 Lave sus manos con agua y jabón antes de obtener la muestra
 Separe sus labios
 Limpie sus genitales externos, de adelante hacia atrás, con tres toallas
húmedas
 Seque con una toalla seca
 Deje salir el primer chorro directo al frasco
 Elimine el resto en la taza del baño
 Tape el frasco evitando tocar el interior y entregarlo en el laboratorio lo
antes posible

MÉTODO DE RECOLECCIÓN.

Orina Espontánea. Es aquella muestra de orina que el paciente puede emitir sin
necesidad de ninguna asistencia ni dispositivo externo.

Orina por Sonda. Se obtiene con una sonda introducida por la uretra hasta la
vejiga. La muestra por sonda es útil en pacientes que se encuentren inhabilitados
para obtener una muestra espontánea. Es una muestra limpia de contaminación
por los genitales externos y la uretra, pero debe ser colectada en una bolsa nueva
y de preferencia con una sonda nueva, para evitar la contaminación de la muestra.

Punción Suprapúbica. Se obtiene por punción de la pared abdominal directo a


una vejiga distendida (llena). La ventaja sobre la muestra por sonda es que en la
punción no hay riesgo de introducir bacterias a la vejiga y es la muestra de
elección para la decisión final sobre la sospecha de infección. La desventaja es la
necesidad de material especial y la complejidad de la técnica.

Muestra de Neonatos. La muestra de orina en neonatos y bebes que todavía no


pueden obtener una muestra espontánea se obtiene con el uso de bolsas

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especiales. Para obtener buenos resultados se deben cuidar los siguientes


detalles:
 Requiere una completa limpieza a los genitales externos y la piel
circundante con abundante agua estéril. No se recomienda el uso de
jabones para evitar la contaminación de la muestra, ya que afecta los
resultados del examen químico y la viabilidad de las bacterias en caso de
un cultivo.
 La permanencia de la bolsa debe ser de una a dos horas máximo, una
permanencia mayor provoca contaminación de la muestra con flora
bacteriana de la piel.
 En el retiro de la bolsa una vez colectada la muestra se realiza por dos
adultos para evitar la pérdida de muestra, que puede ser muy escasa y
valiosa. Mientras un adulto suspende al neonato del tórax, mirando al otro
adulto, éste retira la bolsa cuidadosamente para no lastimar la piel del niño
con el adhesivo de la bolsa y para no perder muestra.

TIPOS DE MUESTRA:

Ocasional (al azar). Es una muestra obtenida en cualquier momento del día o la
noche, en una sola emisión y sin preparación previa del paciente. Es la muestra
que se va a obtener inevitablemente en casos de urgencias médicas. Es una
muestra que puede resultar muy valiosa pero debe interpretarse con especial
cuidado, por un analista experto y debe acompañarse de datos completos y
precisos.

Para una adecuada interpretación de los datos obtenidos debe tomarse en cuenta
que si la muestra está muy diluida (evidente en color, aspecto y gravedad específica),
la identidad de elementos patológicos puede indicar patología aunque se
encuentren escasos. Será importante tomar en cuenta las siguientes
consideraciones:

 Infección del tracto urinario. En cistitis esperamos encontrar mayor


cuenta de leucocitos (normales o desvitalizados) acompañados de células
del epitelio Transicional que pueden presentar alteraciones inflamatorias.
En pielonefritis o cualquier otra inflamación túbulo-intersticial puede ser que
se eliminen menos leucocitos, pero será importante la búsqueda
intencionada de piocitos (células de Schilling, de Strenheimer-Malbin o
leucocitos centelleantes), células renales y cilindros, principalmente
epiteliales, leucocitarios o granulosos. También es importante la presencia
de bacterias, ya que es una muestra que por la urgencia se procesa
inmediatamente y no se espera que hayan proliferado después de la
emisión.
 Litiasis. El simple movimiento de un cálculo, uno que se haya atorado en
los uréteres o la vejiga, o la salida de arenillas en forma masiva puede
desencadenar el cólico y no siempre se encuentran cristales en la orina. La
presencia de eritrocitos eumórficos es lo más común y se pueden

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presentar células del epitelio transicional. Para el paciente que ha sufrido un


episodio de los aquí mencionados es muy importante conocer la naturaleza
química de su problema, por lo que se puede considerar válido refrigerar un
par de horas la orina para propiciar la formación de cristales para su
identificación.
 Papilomatosis. Si se presenta en la vejiga o la uretra puede causar
obstrucción e impedir la salida de orina y el paciente (de cualquier edad) se
presenta por esta razón al servicio de urgencias. El paso de la sonda va a
destapar el conducto arrancando los papilomas (ver identificación de
células más adelante) y es probable que no sangre. Se debe aprovechar
esa primera muestra para preparar laminillas y enviarlas al citólogo para su
tipificación, ya que pueden desaparecer de una segunda muestra.

CONTENEDORES PARA MUESTRA DE ORINA.


Son frascos con capacidad para contener 50 a 100 mL de orina. Deben tener boca
ancha, de 4 a 5 cm de diámetro para poder depositar la muestra directo dentro del
frasco. El material de su construcción de be ser transparente, inerte a los
componentes de la orina para evitar interferencias y se debe utilizar estéril. La
tapa debe tener rosca fácil y debe sellar herméticamente para evitar derrame
accidental.

CRITERIOS DE RECHAZO DE MUESTRAS.


 Muestras obtenidas después de una ingesta exagerada de líquidos (ej:
preparación para estudio de ultrasonografía)
 Muestras con más de 2 horas de haber sido emitidas, conservadas o
transportadas a temperatura ambiente. * En caso de incontinencia se recomienda la
segunda orina de la mañana con una ingesta de 200 mL de agua desde la noche anterior
 Muestras sin etiquetar o mal etiquetadas (etiquetar en el frasco, NO en la tapa)
 Muestras visiblemente contaminadas, mal tapadas o sin tapa.
 Las muestras que contengan contaminación fecal (fibras de alimento,
pigmentos, etc.) no deben descartarse sin consultar al médico por la posibilidad de
presentarse una fístula.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA.
El uroanálisis debe realizarse dentro de las primeras cuatro horas de emitida la
muestra. Después de las dos horas el deterioro que experimenta la muestra de
orina incluye: destrucción de leucocitos y eritrocitos, proliferación de bacterias,

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degradación bacteriana de la glucosa, aumento del pH por formación de amoníaco


como resultado de la degradación bacteriana de la urea, y oxidación de la
bilirrubina y del urobilinógeno.

HOMOGENEIZACIÓN DE LA MUESTRA.
La orina es una suspensión coloide en la que las partículas suspendidas no están
distribuidas uniformemente. En el tiempo que pasa entre la recolección de la
muestra y su análisis, los elementos más pesados (cilindros, células, cristales etc.)
se depositan en el fondo del frasco, por lo que la homogeneización es un paso de
vital importancia para la representatividad de la alícuota que se separa para su
análisis.

La muestra se homogeneiza por inversión del frasco. Se invierte lenta y


cuidadosamente, de tres a cinco veces para lograr una buena mezcla sin formar
espuma.

** Girar el frasco origina remolinos que resultan en el


depósito de los elementos formes pesados en el fondo
del frasco.

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SEPARACIÓN DE ALÍCUOTA EN TUBO DE ENSAYO.


El volumen de la alícuota que se separa en el tubo de ensayo es determinante en
el resultado que se va a obtener en la cuenta microscópica de partículas, por los
que es uno de los puntos más importante para estandarizarse.

La opción que presenta más ventajas de estandarizar el volumen de la alícuota es


el uso de tubos especiales para uroanálisis que se encuentran en el mercado
como parte de los equipos para cuenta microscópica. Este tipo de tubos tienen
graduación para llenarse siempre al mismo volumen.

Si no se cuenta con tubos estandarizados se debe marcar el volumen en los tubos


de ensayo. Los volúmenes más recomendados por las guías para la
estandarización del uroanálisis son 10 y 12 mL. Es importante adaptarse a estos
volúmenes, con los cuales están determinados los intervalos de referencia a los
que todos estamos acostumbrados, tanto los laboratorios como los médicos que
interpretan los resultados para el cuidado de la salud de los pacientes.

Para trabajar con volumen de 10 o 12 mL en tubos convencionales de vidrio, se


deben utilizar tubos de 15 x 100 mm, ya que en los de 13 x 100 mm solo se
pueden depositar de 7 a 7.5 mL, que causa un error hasta de un 30% en la cuenta
microscópica.

FASE ANALÍTICA.
EXAMEN
MACROSCÓPICO.
Es la fase del examen
que evalúa las
características del
espécimen que se
pueden captar por medio
de los sentidos, como
son el color y el aspecto.
Se realiza comúnmente
por la observación
directa de la muestra de
orina. Es recomendable
que se tomen en cuenta
algunos cuidados para
una correcta realización
como observar la
muestra en un tubo de
ensayo limpio y sin
raspaduras, además de
contar con iluminación
suficiente de color blanco (o frío).

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El COLOR se observa en el tubo de alícuota con un fondo blanco y se registra en


forma descriptiva y sin ningún tipo de clasificación.

El ASPECTO se observa con un fondo negro opaco y con incidencia angular del
rayo de luz, esto permite iluminar y contrastar los elementos disueltos o
suspendidos que confieran turbidez a la muestra.
Valores normales: - color: de paja a amarillo, pálido a oscuro.
- aspecto: transparente o ligeramente turbio.

Trascendencia clínica:
El color de la orina se puede desviar del normal por concentración de la misma,
ya sea por deshidratación, falta de ingestión de agua o por aumento en el índice
metabólico (fiebre o hipertiroidismo). También puede contener cromógenos por
ingesta de determinados alimentos o medicamentos, en casos normales o, puede
contener pigmentos como bilirrubina o hemoglobina en casos patológicos.

El aspecto se puede alterar en casos normales por la precipitación de fosfatos,


uratos u oxalato al enfriarse la orina al ser emitida o por la presencia de
abundantes células epiteliales. En casos patológicos puede contener eritrocitos,
leucocitos, bacterias o grasa.

Es importante considerar que las alícuotas de orina en el tubo de ensayo deben


estar homogéneas al momento de la observación macroscópica y el examen
químico. Si no se cuenta con equipo estandarizado, que incluye tubos con tapón
para homogeneizar en cada paso, se recomienda vaciar y analizar un número
limitado de muestra de orina o contar con papel parafinado para tapar y mezclar
por inversión suave antes de cada paso.

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EXAMEN QUÍMICO

Comprende la determinación
cuantitativa y semicuantitativa
de diversos parámetros y
sustancias excretadas por la
orina.

Se realiza mediante
reacciones químicas y
enzimáticas de química seca,
en la cual se impregna una
fase sólida con los reactivos
respectivos a cada
determinación.

Las zonas reactivas se


presentan en una pequeña
tira de material plástico de
fácil manejo que sirve como
vehículo para la impregnación
simultánea de las zonas
reactivas respectivas a los 10
parámetros con orina del
paciente. Cuando pasa el
tiempo necesario para que se completen las reacciones químicas y enzimáticas en
cada zona reactiva se desarrollan colores característicos por la presencia de
reactivos cromógenos.

El color desarrollado y su intensidad son representativos de la presencia y la


concentración de diversas sustancias químicas contenidas en la orina. La
interpretación de los colores y su intensidad se puede realizar de dos formas:
 Por comparación de los colores desarrollados en las zonas reactivas de la
tira de medición con una carta de colores, en la que se presentan los
posibles tonos dentro de los límites del rango de medición, junto con la
concentración equivalente.
 En un lector automatizado. Es un fotómetro de reflexión en el que se emite
un haz de luz de determinada longitud de onda dirigido a cada una de las
zonas reactivas de la tira, se mide la luz reflejada, se procesa y se convierte
en un resultado de concentración por un procesador (ver “Herramientas”).
Es el método recomendado para estandarizar la lectura de la tira reactiva.

El procesamiento manual de la tira reactiva incluyendo la comparación visual de


colores presenta una serie de desventajas que afectan la reproducibilidad y la
exactitud de los resultados.

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Para optimizar el uso manual de las tiras reactivas se recomienda tomar en cuenta
las siguientes precauciones:
 Mojar adecuadamente las zonas reactivas: las recomendaciones del
fabricante para el tiempo de inmersión de la tira en la orina se incluyen
comúnmente en el inserto de instrucciones del fabricante. ** Una
recomendación al respecto es observar la tira reactiva al introducirla en la orina y
retirarla cuando se formen burbujas del aire desplazado de la zona reactiva, lo que
asegura que se ha mojado por completo. Secar el exceso de orina de la tira
reactiva: de lo contrario se puede correr el color de una zona reactiva a
otra, modificando los colores correctos para la interpretación de la prueba.
Se recomienda secar la tira en una toalla de papel desechable en tres
movimientos: uno por la parte baja, los otros dos por los flancos de la tira.
 Cuidar el tiempo de reacción de la tira reactiva: si las reacciones son
incompletas la concentración obtenida será menor a la normal y se
registrará como un falso negativo. En el caso contrario hay zonas reactivas
que desarrollan color pasado el tiempo adecuado de lectura generando
falsos positivos (ejemplo: proteínas).
 Buena iluminación para la lectura de la tira: se recomienda luz blanca o
fría.
 Conservar la integridad de la carta de colores: si se acercan demasiado
las tiras a la carta de colores y esta se contamina con orina, se deslavan los
colores y se modifican imposibilitando su uso posterior. Para evitarlo se
recomienda retirar cuidadosamente la etiqueta de un frasco de tiras
reactivas, pegarla en una hoja de papel y enmicarla (o plastificarla). Con
esto se facilita la comparación de los colores. Para discernir entre dos
colores cuando la concentración parece encontrarse intermedia, una
distancia de unos 5 cm entre la carta y la tira ayuda a tomar la decisión.
Además si se moja la mica, se puede limpiar sin problemas. ** Se debe
cambiar la carta al cambiar de lote de tiras reactivas, ya que habrá cambios sutiles
de coloración.

Valores normales: Las tiras reactivas cuentan actualmente con 10 parámetros,


con los siguientes valores normales:
 densidad 1.005 a 1.025
 pH 5.0 a 7.0
 proteínas negativas
 glucosa negativa
 cuerpos cetónicos negativos
 bilirrubina negativa
 urobilinógeno 0 a 0.2 mg/dl
 hemoglobina negativa
 nitritos negativos
 leucocitos negativos

Interpretar los resultados de la tira reactiva y extrapolarlos al estado de salud del


paciente requiere ciertos cuidados y experiencia. Cualquier resultado positivo debe
comprobarse por algún método definitivo o al menos, uno más exacto, ya que es

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inevitable la presencia de falsos positivos para que la prueba sirva como filtro
(tamiz o criba), como ejemplo: una proteinuria patológica baja, 0.4 /día, en un
paciente que orinó 2 L / día, se puede confundir con una proteinuria fisiológica en
un sujeto sano que orinó 0.5 L / día, en ambos casos la tira “ve” 0.2 g/ L.

Normalmente no conocemos el flujo de orina del paciente pero la gravedad


específica nos puede dar una buena pauta a cerca del flujo urinario del paciente.
En este punto es importante mencionar que de los métodos para medirla que son
el Higrómetro, la tira reactiva y el refractómetro, es este último el ideal,
recomendado por los lineamientos, por ser el único cuyo fundamento de medición
realmente se basa en la cantidad de partículas disueltas y por consiguiente refleja
la capacidad de concentración renal.

EXAMEN MICROSCÓPICO.

En esta la fase del uroanálisis se identifican y cuentan las diversas partículas


insolubles que arrastra la orina en su paso por las vías de formación y excreción
de la misma.

El examen microscópico de la orina es una prueba de laboratorio que ha


alcanzado niveles de avance tecnológico sorprendentes en los últimos años, con
equipos automatizados que cuentan las partículas suspendidas en la muestra y las
identifican, sin embargo, su distribución en los laboratorios clínicos no es
comparable a la de otros equipos para análisis clínicos como los de química
clínica o hematología. Las causas son una mezcla de la influencia de los costos
(justificable), con la falta de información en los laboratorios en general sobre la

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necesidad de estandarización, tanto de la cuenta microscópica como de la


identificación de elementos formes en la orina (injustificable).

La opción para estandarizar la cuenta microscópica como parte del examen


microscópico de la orina, que en realidad fue la primera que apareció en el
mercado hacia la mitad del siglo pasado, es el sistema Kova. Existen varias
marcas comerciales con el mismo sistema que consta de:
 Un tubo de fondo cónico, graduado para manejar volúmenes uniformes
 Una pipeta de material flexible con un cono invertido en la parte inferior
 Cámara de cuenta con volumen conocido y cuadrícula

El proceso es el siguiente:
1. Se llena el tubo con orina homogeneizada hasta la marca superior
del tubo (estandariza el volumen en la alícuota)
2. Se trabaja con la tira reactiva
3. Se tapa el tubo y pasa a la centrífuga, donde se debe cuidar la
fuerza centrífuga y el tiempo, que dependen del analista y sin los
cuales el equipo puede perder su propósito
4. Se introduce la pipeta para sellar el fondo cónico del tubo y se
decanta el resto de orina sobrenadante. De esta forma el sedimento
queda resuspendido en un mL de orina, homogeneizándolo con la
pipeta (estandariza el volumen en el que se resuspende el sedimento
y por tanto el factor de concentración de los elementos suspendidos
en la orina nativa)
5. Finalmente se toma sedimento con la pipeta y se llena la cámara de
cuenta para realizar la cuenta microscópica (la cuenta de partículas
se informa por unidad de volumen)

EXAMEN MICROSCÓPICO SIN EQUIPO ESTANDARIZADO.


Existen todavía en este tiempo muchos laboratorios que no cuentan con ninguna
de las opciones de estandarización para el examen microscópico que existen en el
mercado. Cuando se trabaja con procedimientos basados en la “tradición oral y la
mitología” se pueden obtener resultados, sobre todo en la cuenta de partículas,
verdaderamente caóticos, especialmente en cuanto a la reproducibilidad. Se
recomienda que la cuenta se informe por unidad de volumen para estandarizarla.
Si además de seguir informando por campo microscópico, el volumen de orina
contenido en los campos es variable, también será variable el resultado obtenido,
incluso con la misma muestra.

LO QUE NO SE DEBE DE HACER


Existen algunos vicios en el procedimiento que deben corregirse para mejorar los
resultados, como los siguientes:
 El volumen de orina que se puede trabajar en tubos de ensayo de medida
13 x 100 mm es un 30% menor que el recomendado de 10 mL, con el que
se han obtenido los intervalos de referencia

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 Además de la capacidad reducida en los tubos de 13 x 100, es común que


no se controle el volumen de orina al llenarlos
 La fuerza y el tiempo de centrifugación descontrolados
 El volumen en que se resuspende el sedimento
 La resuspensión del sedimento raspando el tubo de ensayo en la gradilla
 Vaciar más sedimento para contar con una gota pequeña y que no se
derrame al colocar el cubreobjetos
 Observar el sedimento únicamente en objetivo de 40 x, un área muy
reducida de la preparación

PROCEDIMIENTO PARA ESTANDARIZAR LA CUENTA MICROSCÓPICA SIN


EQUIPO COMERCIAL.
El siguiente procedimiento está basado en la estandarización internacional, según
las recomendaciones incluidas en la “Guía Europea para el Uroanálisis” publicada
por el Grupo Europeo para el Uroanálisis y la segunda edición de “Uroanálisis y
Colección, Transporte y Conservación de las Muestras de Orina; Lineamientos
Aprobados” editados por (entonces NCCLS) CLSI en Estados Unidos de
Norteamérica y los Lineamientos Japoneses para el Uroanálisis.

1. Se trabaja con tubos de ensayo de 15 x 100 mm. Se mide un volumen de 10


mL con pipeta volumétrica y con esa medida se marcan los tubos con algún
medio permanente, como lápiz diamante
2. Se homogeneiza la muestra y se vacía la alícuota en el tubo de ensayo
aforando a la marca de 10 mL
3. Observar color y aspecto, color con fondo blanco y aspecto con fondo negro

4. Se procesa el examen Químico: se introduce la tira reactiva hasta que


desprenda pequeñas burbujas de las zonas reactivas y se toma el tiempo; se
seca por la espalda y por ambos flancos para eliminar el exceso de orina y
se espera el tiempo de reacción
5. Se toma la lectura de la tira reactiva y se registran los resultados
6. Se centrífuga la muestra: 500 g ó 2000 rpm durante 5 minutos en una
centrífuga en la que los tubos queden horizontales al girar. No se debe
frenar por que se forman remolinos que resuspenden el sedimento
7. Se saca de la centrífuga con cuidado y se extraen 200 µL de la parte superior
de la orina sobrenadante y se conserva en la pipeta
8. Se decanta el resto del sobrenadante cuidadosamente, llegando la
inclinación del tubo solo a una posición horizontal
9. Se coloca el tubo en posición vertical nuevamente y se le regresa el volumen
extraído de orina para resuspender el sedimento en un volumen constante de
la misma orina para evitar alteraciones en la composición
10. Para resuspender el sedimento es suficiente una agitación manual
11. Se agregan dos gotas de colorante para sedimento urinario en el tubo de
ensayo
12. Se aspiran 18 microlitros de sedimento teñido, se transfieren a un
portaobjetos y se cubren con un cubreobjetos de 18 x 18

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13. Se observa en el microscopio.

La recomendación en algunos lineamientos es utilizar microscopio con contraste


de fases, que permite contrastar las estructuras microscópicas sin ningún tipo de
interferencia por las características químicas de la muestra. Si no se cuenta con la
técnica se puede recurrir al uso de colorante para sedimento urinario. El contraste
de las estructuras por cualquiera de las dos técnicas permite tipificar las células
sanguíneas y epiteliales, observar el contenido de los cilindros y observar
panorámicamente las preparaciones con un menor esfuerzo y mejor sensibilidad y
especificidad.

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Identificación de Estructuras
Microscópicas

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IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICROSCÓPICAS.

El examen microscópico se basa en la observación e identificación de la forma de


los elementos microscópicos, sus alteraciones, sus relaciones y su significado
fisiológico y patológico.

En este aspecto, se presentó un grave rezago en el siglo XX con un deterioro en la


identificación morfológica, principalmente en la descripción de las Células
Epiteliales y un divorcio o amnesia total de los autores dedicados al Uroanálisis
respecto de la bibliografía dedicada a la Histología como prueba irrefutable de la
morfología tisular y celular. Dicho divorcio o aislamiento científico ocurrió en la
misma centuria en que pioneros como el Dr. Aurel Babes en Rumanía y el Dr.
George Papanicolaou en los Estados Unidos dedicaban su vida a la demostración
de la utilidad del diagnóstico de muy diversos estados fisiológicos y patologías
mediante la observación de células y fragmentos tisulares descamados u
obtenidos mediante frote directo o aspiración de células con aguja. En los años
recientes la Estandarización ha alcanzado a la Citología Exfoliativa por la
necesidad de unificar los criterios morfológicos correlacionándolos con el nivel de
comprensión de los mecanismos celulares que el avance de la ciencia va
permitiendo en cada década que avanza, comenzando hace cerca de medio siglo
con la demostración de ácidos nucleicos del Virus del Papiloma Humano en
bloques de tejido de carcinomas epidermoides cérvicouterinos, hasta nuestros
días en que en el Sistema Paris para informar la Citología Urinaria incluye las
mutaciones genéticas que se presentan en las lesiones de mayor y menor riesgo
para los pacientes y su evolución. Los sistemas de Informe de Resultados tienen
su inicio en el Sistema Bethesda en 1988, a partir del cual se enfoca la
investigación en la detección y clasificación de lesiones en Bajo Grado y Alto
Grado según el pronóstico al que se enfrentan los pacientes y los procedimientos
de tratamiento adecuados. En este camino a la clasificación de las lesiones ¡ya
neoplásicas! presentes en los pacientes en el que incluso los libros dedicados a la
enseñanza de la Citología Exfoliativa se han concentrado, que sumado a la
limitación legal de los libros dirigidos al personal del Laboratorio en los países
europeos para incluir la descripción de las células anormales, ha creado un
desierto en el que se desarrollan los cambios celulares desde la inflamación hasta
la neoplasia y en el que los pacientes están abandonados. El Sistema Paris
incluye un algoritmo en el que se describe la aceptabilidad de las muestras
relacionando: método de obtención – celularidad – volumen y hallazgos
citomorfológicos. Si la muestra presenta “hallazgos citomorfológicos” útiles al
diagnóstico, entonces desprecia los otros tres. Prefiere muestras de orina
obtenidas con instrumentación como por ejemplo lavados vesicales, utilizando
citología de base líquida y eliminando muestras de orina con “elementos no-
uroteliales que oscurecen el diagnóstico citologco urotelial”, y es este el terreno en
el que normalmente nos movemos en el Laboratorio Clínico. En el Laboratorio
tenemos todos la capacidad técnica de realizar una cuenta diferencial de
leucocitos en un frotis de sangre periférica, conocemos perfectamente las células
sanguíneas normales, si encontramos células inmaduras o con cambios en su
morfología tenemos la responsabilidad de informarlo y remitir la preparación a un

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especialista para su diagnóstico. Los elementos microscópicos observables en


cualquier muestra biológica proceden de un tejido que es un sistema biológico en
el que coexisten: células y fibras de sostén (tejido conjuntivo) que además de
conducir el suministro de nutrientes en minúsculas arteriolas, los distribuyen en el
líquido extracelular llevándolos hasta las superficies en donde bien pueden, solo
lubricar o además crear un microambiente propicio para el desarrollo de las
relaciones ecológicas entre células de cobertura (epitelios), microorganismos
habitantes naturales (microbioma), células y moléculas del sistema inmune
encargadas de mantener el orden y el equilibrio entre especies comensales,
oportunistas y patógenos con la funcionalidad e integridad del tejido. Los objetivos
de describir las partículas suspendidas en la orina son:

1. Conocer la correcta identidad y forma de los elementos:


 Celulares:
o Epiteliales: normales y reactivos
o Cambios celulares por microorganismos patógenos
o Hematopoyéticos: normales y variaciones
o Cambios inflamatorios y preneoplásicos
o Cambios neoplásicos: de bajo y alto riesgo

 Microorganismos:
o Comensales de localizaciones y superficies contiguas
o Patógenos típicos observables
o Patógenos erráticos
 Cristales:
o De procedencia fisiológica: permanentes o anormales
o De procedencia no-fisiológica: inducidos o secundarios
o Características morfológicas normales y alteraciones
o Método para diferenciar cristales similares

2. Sus variantes, sus relaciones y su significado fisiológico y patológico


respecto:
o Sexo del paciente
o Edad de presentación
o Correlación con el diagnóstico
o Interrelación de todos los elementos observables

RECONOCIMIENTO DE CÉLULAS

Debemos empezar por recordar que todos los organismos pluricelulares, formados
por una infinidad de células, de unos 200 tipos diferentes, con funciones, tamaños
y estructuras tan diferentes entre sí, empezaron su existencia en una sola célula
huevo. Inicialmente esa célula solo tiene la capacidad de dividirse y su morfología
al paso de la multiplicación se mantiene con un núcleo prominente y una banda
estrecha de citoplasma basófilo que lo rodea.

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Más adelante comienzan a diferenciarse desarrollando citoplasmas diferentes a


partir del mensaje genético en el DNA: información para formar secuencias de
aminoácidos, proteínas que van a dar estructura al citoesqueleto y a adquirir
funciones enzimáticas. Estas enzimas van a sintetizar otras moléculas orgánicas y
a desarrollar los organelos que necesite la célula en conjunto para “aprender”
alguna función cooperativa con más células semejantes y formar así un tejido.

Lo importante en este punto es la Diferenciación. Es la especialización de la


célula para realizar determinadas funciones que cooperen a la fisiología del
organismo en general. De las múltiples funciones que lleva a cabo la célula como:
sintetizar una secreción, ya sea lubricante o una hormona, sintetizar fibras
musculares en su citoesqueleto, llenar su citoplasma de hemoglobina, o
desarrollar prolongaciones en su citoplasma para contactar células vecinas y
transmitir impulsos nerviosos, tienen su origen en el núcleo que codifica el
mensaje para que después el citoplásma lleve a cabo la función.
Entonces, según la diferenciación podemos observar las siguientes
características:

 Las células jóvenes o indiferenciadas tienen una morfología en común:


núcleo con cromatina activa (no condensado), y citoplasma escaso,
condensado y basófilo.

 Núcleo: en células con una fisiología activa en la que se requiere mantener


un núcleo funcional, encontramos núcleos de tamaño mediano, de cromatina
activa. En células con renovación continua, con un periodo corto de vida y
funciones localizadas en un citoplasma que no necesita más la presencia del
núcleo, este involuciona y se hace “picnótico” o llega a desaparecer como en
el eritrocito.

Características Citológicas.

Las características que nos van a permitir reconocer células de cualquier tipo y en
cualquier parte del organismo, incluyendo a las células sanguíneas son:

La relación del tamaño Núcleo / Citoplásma: se refiere al área que ocupa el


Núcleo respecto del Citoplasma. Se puede tomar también trazando un diámetro y
comparando en el la longitud de uno y otro.

Comúnmente las células diferenciadas que llevan a cabo alguna función en un


tejido, órgano o para el organismo en general tienen un citoplasma más
desarrollado para realizar sus funciones, ya sea sintetizar una secreción, resistir
tensiones o abrasión en la superficie de un epitelio o contraer un citoplasma con
citoesqueleto especializado, como las células musculares

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La Forma y Tamaño del Núcleo se describe en términos sencillos y


geométricos.

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Membrana Nuclear: En ocasiones se puede observar dónde acaba el núcleo y


comienza el Citoplasma pero no se nota una línea que lo delimita, en este caso
los textos lo llamarían membrana delgada o no lo especifican, si por el contrario
se puede observar una membrana gruesa alrededor del núcleo, lo llaman
membrana gruesa o reforzada, a base de heterocromatina.

Cromatina: el contenido del Núcleo, constituida por DNA y proteínas Histonas


principalmente. Se observa lisa o compacta en células de poca actividad de
síntesis y grumosa con partículas pequeñas o grumos gruesos en células con
mayor actividad se síntesis.

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El Nucléolo: es un lugar de síntesis de RNA intranuclear obviamente observable


en células con actividad de síntesis.

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CÉLULAS EPITELIALES

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1. EPITELIO PLANO ESTRATIFICADO


Es un epitelio dedicado a la protección de los tejidos contra la abrasión o
rozamiento, el impacto y la flexión o estiramiento de las superficies que cubre
(piel, esófago, vagina, uretra). Para tales objetivos dispone de una gran
cantidad de capas de células que al completar su maduración se aplanan y
extienden adquiriendo una estructura rígida y una superficie celular resistente e
impermeable. Se pueden distinguir tres capas principales que son: basales,
intermedias y superficiales.

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LO AFECTA:

 El estado hormonal
 La demanda funcional del tejido u órgano
 Procesos inflamatorios infecciosos y no infecciosos

a. Estado Hormonal: en el ciclo hormonal de la vida reproductiva femenina: los


estrógenos de la primera parte del ciclo promueven la maduración y se llena de
todas sus capas.
En la segunda
fase, la
progestacional
disminuye a la
capa intermedia y
al final del ciclo e
inicio del siguiente
ciclo se presentan
células de la base
por descamación
total del epitelio

b. Cambios Inflamatorios Reactivos: El más leve e inespecífico es la aparición


de halos perinucleares, una zona clara alrededor del núcleo, bien definida y
pequeña, en células intermedias y superficiales. Se observa comúnmente en
infecciones por: Candida, Gardnerella y Trichomonas.

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c. Inmadurez del núcleo (núcleos grandes): se presenta por una actividad


aumentada del núcleo por los mecanismos adaptativos de la célula a alguna
agresión externa. Se observa como núcleos grandes y en su avance tiende al
engrosamiento de la membrana nuclear y la aparición de nucléolo.

d. Cambios Inflamatorios que sugieren Lesión Intraepitelial Escamosa: se pierde la


consistencia normal del contenido nuclear, aclarándose u oscureciéndose,
acompañado de irregularidad en el borde del núcleo

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2. EPITELIO TRANSICIONAL

Es un epitelio especializado y único en el organismo que soporta la


osmolaridad elevada de la orina durante varias horas y la distensión y cambio
de volumen de la vejiga mientras se llena. Además cuenta con mecanismos
para evitar la colonización e infección por microorganismos procedentes de la
uretra. Cuenta con varias capas de células morfológicamente reconocibles
como basales y superficiales en Pelvis renal y Uréteres y basal, intermedia y
superficial en Vejiga, donde dos células intermedias fusionan sus citoplasmas
para formar una célula superficial binucleada.

Las características morfológicas principales para el reconocimiento del epitelio


transicional son:
 Núcleo: Con membrana gruesa, contenido granular y nucléolo visible. La
forma del núcleo en las basales es ovalado por el tamaño y forma del citoplasma.
En intermedias y superficiales es circular
 Citoplasma: la forma del citoplasma en las células intermedias y
superficiales es hexagonal, extenso, de un grosor medio. En las basales escaso,
rodeando apenas al núcleo y con una prolongación caudal que lo une a la
membrana basal

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Cambios Inflamatorios.
 Leves: comienzan con la fusión de varias células superficiales para formar
células extensas con tres o más núcleos y con leves agrandamientos nucleares

 Al avance de los cambios


inflamatorios Moderados crece el núcleo,
aumenta el grosor de la membrana nuclear,
de los gránulos del contenido nuclear y del
nucléolo y se presenta en células de capas
más bajas y pueden aparecer
vacuolizaciones en el citoplasma

 En los Cambios Inflamatorios Severos comienza a perderse la


diferenciación y se desarrollan células de tamaño medio a grande pero con
citoplasmas de forma esférica con un acomodo desordenado del tejido

NE

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OPLASIA

Se desarrolla a partir de:


 crecimientos en forma de racimos de uvas (hiperplasia), son los más
frecuentes pero los de mejor pronóstico.

 A partir de una displasia en lesiones planas con núcleos hipercromáticos,


deformes y con pérdida de las dimensiones del citoplasma: Son los de peor
pronóstico y los más invasivos

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EPITELIO CILÍNDRICO

Como su nombre lo describe está formado por células con citoplasma de forma
cilíndrica. Comúnmente se encuentra en epitelios dedicados a la absorción, el
transporte de partículas o la secreción de sustancias. Se presenta como epitelio
simple (con una capa de células) o como pseudoestratifcado, en el que todas las
células están ancladas a la misma base.

Características principales:
 Tamaño de pequeño a mediano
 Núcleo redondo u ovalado, de membrana reforzada, cromatina granular y
nucléolo ocasional
 Citoplasma alargado o triangular en la porción superior (sobre el núcleo) y
con una base de anclaje bajo el núcleo, que puede tener diferentes
longitudes dependiendo del mecanismo de descamación.
 El borde superior del citoplasma puede estar: reforzado (marcado con una
línea), ciliado o vacuolado si es una célula secretora

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EPITELIO CÚBICO

Es un epitelio comúnmente de dicado a la absorción y secreción. En los túbulos


renales combina ambas funciones en la reabsorción y secreción del filtrado
glomerular. En los conductos anexos al aparato reproductor masculino se dedican
principalmente a la secreción. Sus características distintivas son:

 Núcleo redondo con membrana reforzada, cromatina granular y nucléolo


visible
 Citoplasma esférico de contenido granular
 El núcleo siempre se encuentra en posición excéntrica y en relación 1:1 con
el citoplasma.
 Tamaño: en el tubo proximal son menores que las del distal (18 a 25 µm)
 Las de la glándula Próstata tienen unos 8 a 12 µm.

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CÉLULAS SANGUÍNEAS

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LEUCOCITOS

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LEUCOCITOS

En el Sedimento Urinario encontramos una mínima cantidad de leucocitos en


forma normal. La presencia de leucocitos en un tejido o superficie forma parte de
un complejo sistema que nos relaciona con al ambiente que nos rodea.

Los epitelios de revestimiento constituyen la frontera que marca los límites entre
nuestro organismo y el mundo exterior. Esta primera barrera contra la invasión de
microorganismos se acompaña de mecanismos defensivos físicos, químicos y
microbiológicos:

 Mecanismos físicos:
-Efecto de barrera de los epitelios. Las uniones intercelulares entre las
células epiteliales impiden la existencia de huecos entre ellas.
-Efecto de barrido de los cilios de la mucosa respiratoria.

 Mecanismos químicos:
-Las glándulas sebáceas producen ácidos grasos insaturados de cadena
larga que poseen acción bactericida y fungicida.
-La enzima lisozima, presente en la saliva, las lágrimas y la mucosidad
nasal, rompe la pared de las bacterias Gram positivas.
-El pH ácido del jugo gástrico o de la vagina.
-Cerumen del oído y espermina del esperma, ambos de acción bactericida.

 Mecanismos microbiológicos:
-Los componentes de la flora bacteriana normal compiten con los
microorganismos patógenos (espacio y nutrientes) y pueden producir
sustancias antibacterianas. La flora microbiana supera en número al de las
células somáticas en varias decenas de veces.

Mecanismos Inmunológicos:
Los epitelios además de constituir una capa protectora, poseen otras
características que lo hace inmunológicamente importante, tales como: la síntesis
de péptidos antibióticos, subpoblaciones de linfocitos intraepiteliales y células
dendríticas.

Los Linfocitos T intraepiteliales son una subespecie de linfocitos T y por lo tanto


debería ser considerado como parte de la inmunidad adaptativa.
Las Células Dendríticas son fagocitos presentadores de antígeno con capacidad
de activar Linfocitos T. Su nombre hace referencia a proyecciones citoplásmicas
que se desarrollan en un cierto punto de su maduración, similares a
las dendritas de las neuronas. Su función es ir buscando constantemente
patógenos al medio que las rodea.
La Inmunoglobulina A (IgA) es la primera línea de defensa frente a la infección,
mediante la inhibición de la adhesión bacteriana y viral a las células epiteliales y
la neutralización de las toxinas bacterianas y víricas, tanto intra- como

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extracelulares. La IgA también elimina patógenos o antígenos a través de la vía


excretora mediada por IgA, donde los complejos inmunitarios formados con IgA
son transportados a través de un proceso mediado por receptores poli-
inmunoglobulina.

La inmunoglobulina A secretora tiene un importante papel en la


respuesta adaptativa específica humoral, en las superficies mucosas del tracto
gastrointestinal, respiratorio y urogenital. Las superficies mucosas son el portal de
entrada de muchos patógenos, por lo que la IgA es producida en grandes
cantidades por los linfocitos subepiteliales y transportada a la superficie por las
células epiteliales.

La Inflamación
Es la respuesta del tejido a cualquier agresión del medio ambiente externo o
interno que pueda dañar las células y su objetivo es detener o limitar la acción del
agresor y la extensión del daño que se pueda producir y finalmente reparar el
tejido.
Implica la activación de la Respuesta Inmune Innata inicialmente. La inmunidad
innata comprende las células y los mecanismos que defienden al ser vivo, de la

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infección por otros organismos, de forma inespecífica, mediante la acción de las


sustancias químicas de comunicación intercelular necesarias para:
 reclutar leucocitos polimorfonucleares: fagocitan microorganismos y
liberan el contenido de sus gránulos citoplásmicos para un ataque
inespécífico
 reclutar histiocitos y fagocitar restos celulares
 Dilatar la circulación sanguínea local para facilitar la salida de ambos
 Proporcionar sustrato plasmático para la delimitación del área con fibrina en
caso necesario
Las características de la Inflamación Aguda, con la actuación de la Respuesta
Inmune Innata o Inespecífica son:
 La acumulación de líquido proveniente del plasma sanguíneo por la
dilatación vascular, necesaria para el reclutamiento de células del sistema
inmune (leucocitos)
 La infiltración del tejido por abundantes Leucocitos Polimorfonucleares
 La presencia de restos celulares de: leucocitos, células locales,
microorganismos y fibras de tejido conjuntivo
 Destrucción celular general (detritos) y cambios inflamatorios celulares
relacionados con la acción de bacterias y necrosis
La Inflamación Tipo Crónico, Adaptativa o Celular implica el reconocimiento del
agente agresor y la elaboración de moléculas inmunes específicas dirigidas contra
el mismo y la generación de memoria celular para un rápido reconocimiento
posterior y una respuesta dirigida inmediata. La presentación de este tipo de
respuesta depende del tipo de microorganismo y del tiempo de desarrollo.
Esperamos encontrar:
 Menor cantidad de infiltrado inflamatorio
 Leucocitos Mononucleares
 Cambios morfológicos celulares relacionados con la adaptación celular,
controlada o distorsionada

EN SEDIMENTO URINARIO
El hallazgo normal en sedimento urinario va de la ausencia de leucocitos en
algunos campos microscópicos a los cinco por campo microscópico de 400
aumentos en la orina de un sujeto normal. La observación más común es de
leucocitos polimrfonucleares muertos. Se tiñen bien con cualquier tinción que se
aplique al sedimento y es característico que las lobulaciones de sus núcleos se

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observen más redondeadas que en un frotis de sangre periférica. Pueden


encontrarse piurias de dos o tres mililitros de sedimentación en un tubo de alícuota
de 10 mililitros de capacidad.
PIOCITOS
Son Leucocitos Vivos, productores de irritación entre autores de libros y
maestros de Uroanálisis, con discusiones influidas en unas ocasiones por las
diferencias en la nacionalidad de los debatientes y en otras por el nivel de apertura
mental y la experiencia de los mismos. Se les puede encontrar en Sedimento
Urinario, Líquidos de Derrame Seroso y Sangre Periférica.
Se les reconoce por:
 Mayor volumen celular sobre los leucocitos convencionales (muertos), ya
que al estar vivos tienen mayor contenido acuoso
 No captan los colorantes vitales y supravitales porque están vivos
 La primer estructura celular que se tiñe en los piocitos es el núcleo
 Se les puede observar con pseudópodos, protuberancias citoplásmicas con
las que se estaban desplazando en el tejido antes de pasar a la orina y ser
expulsados, y la más importante característica
 Se observa un movimiento Browniano en el las granulaciones del
citoplasma
Significan: Un proceso inflamatorio agudo en alguna parte del tracto Urinario. Se
les ha encontrado una cierta relación con procesos inflamatorios de las vías
urinarias altas, sin una seguridad claramente demostrable, pero bastante útil.
No tiene sentido informarlos en porcentaje porque no existe una correlación
clínica con diferentes intervalos o porcentajes, se les incluye en la cuenta
microscópica total de leucocitos y se les menciona en apreciación como: escasos,
moderados o abundantes.
Se les puede encontrar acompañando bacterias, hongos y protozoarios, dentro de
cilindros o vesículas citoplásmicas en procesos de entosis. En presentación
individual o en agregados incontables.

MACRÓFAGOS
Son células del sistema inmunitario que se localizan en los tejidos. Proceden de
la médula ósea como monocitos con una vida media en circulación sanguínea de
unas 70 horas, que tras atravesar el epitelio de los capilares y penetrar en el tejido
conjuntivo se convierten en macrófagos. Pueden ingerir y destruir bacterias,
células dañadas y eritrocitos gastados.

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Una vez los monocitos salen de los capilares sanguíneos y se localizan en los
tejidos se transforman en macrófagos. Esta diferenciación de monocito a Histiocito
afecta a gran cantidad de cambios como que la célula aumenta su tamaño de 5 a
10 veces, sus orgánulos incrementan tanto su número como su complejidad,
adquiere capacidad fagocítica, produce altas concentraciones de enzimas líticas y
empieza a secretar gran variedad de sustancias solubles que realizan diferentes
funciones.
Los Histiocitos están habitualmente en estado de reposo, pueden ser activados
por gran variedad de estímulos durante la respuesta inmune.
La fagocitosis de antígenos sirve como estímulo inicial, sin embargo, los
macrófagos y su actividad pueden aumentarse por citocinas secretadas
por linfocitos T colaboradores, o mediante el contacto con los mismos. Uno de los
más potentes activadores de macrófagos es el interferón gamma. También son
capaces de reconocer patrones moleculares asociados a patógenos.

MECANISMOS DE DEFENSA DE LA VEJIGA

En resumen de los párrafos anteriores los epitelios a lo largo del sistema urinario
se defienden de microorganismos y condiciones físicas y químicas adversas
mediante capas protectoras que mantienen la humectación de la superficie por la
solvatación de polímeros de carbohidratos solos y unidos a proteínas, como la
Glucoproteína de Tamm-Horsfall o Uromodulina, sintetizada en las células del
epitelio tubular renal en la rama ascendente del asa de Henle y el tubo distal.
Mantiene la humectación de la superficie de las células tubulares y evita la
adherencia de bacterias, principalmente Escherichia coli uropatógena.

También encontramos Glucosaminoglucanos recubriendo el epitelio transicional


a partir de la pelvis renal y hasta la uretra distal. Su discontinuidad en la pelvis
renal es un factor desencadenante del desarrollo de litiasis por oxalato de calcio
monohidratado. Respecto de las infecciones, la carga negativa intensa de los
glucosaminoglucanos ejerce repulsión a las fimbrias de las bacterias.

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La Uromodulina suspendida en la Orina también circula por todo el tracto y se


acumula en la vejiga tienen una gran semejanza con las uroplaquinas, proteínas
de la superficie de las células sombrilla de la superficie del epitelio transicional de
la vejiga. Por la semejanza, las bacterias se adhieren a la uromodulina y son
eliminadas al momento de la micción.

En los últimos años existen suficientes informes científicos basados en la Biología


Molecular que describen el microbioma (o flora normal) de la vejiga y la relación
de su disminución con la aparición de infecciones.

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ERITROCITOS

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ERITROCITOS

Cuando encontramos eritrocitos en el sedimento urinario es porque abandonaron


el torrente sanguíneo, particularmente en la orina es importante establecer si
salieron de los capilares en el interior del Glomérulo o de cualquier otro sitio en el
tracto urinario. A los provenientes del glomérulo los llamamos Renales y a los
demás Postrenales, en el entendimiento de que la función del tracto urinario inicia
en la filtración del plasma en el glomérulo dentro del Riñón y después el filtrado y
la orina así formada recorren el resto del tracto.

POSTRENALES
Las causas fuera del glomérulo son muchas, desde un proceso inflamatorio con
escape de eritrocitos por los capilares dilatados en el tejido conjuntivo; de un
uréter rasgado por arenillas de cristales o un lito sólido, de una ulceración en la
vejiga o una cistitis hemorrágica, hasta los capilares malformados en una
tumoración neoplásica. Para inferir el origen de los eritrocitos postrenales es
necesario observar de cuáles partículas microscópicas se acompañan:

Las Células Epiteliales, normales a inflamatorias, nos pueden dar una pista del
órgano o nivel del que provienen:
 El Epitelio Transicional se encuentra en la pelvis renal, los uréteres y la
vejiga principalmente y puede haber una pequeña porción en la uretra
proximal. Las células basales y superficiales en la pelvis renal y los uréteres
son indistinguibles en las tres localizaciones, las únicas distinguibles son las
células superficiales en la vejiga o “Células Sombrilla”, su presencia habla
de abrasión vesical y su ausencia nos orienta al tracto urinario alto.
 El Epitelio Cilíndrico está presente en los Conductos de Bellini que son la
salida de los tubos colectores de nefronas hacia la pelvis renal, también en
la uretra, principalmente en la masculina, y en las glándulas y conductos
provenientes del aparato reproductor masculino.

Los Fibroblastos que hablan de un daño a la profundidad del tejido conjuntivo


subepitelial.

Abundantes Leucocitos con o sin presencia de algún Microorganismo causal


orientan a proceso inflamatorio.

Si se encuentran Células Epiteliales con rasgos morfológicos anormales pueden


estar acompañadas de eritrocitos eumórficos, desde una formación hiperplásica
de células benignas o de bajo grado, hasta células malignas de alto grado
acompañadas de fibroblastos, detritos e infiltrado inflamatorio en casos más
graves.

Los Cristales junto con las células epiteliales hacen una idea bastante clara del
origen de la hemorragia. Cuando se observan Cilindros con cristales en su
interior, acompañados de células cilíndricas, renales o transicionales ubican como
origen un serio riesgo de litiasis renal, aun en presencia de cristales pequeños.

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RENALES

La filtración glomerular permite el


paso de moléculas pequeñas y
medianas, con un tamaño máximo
semejante al de la albúmina sérica,
misma que es rechazada de los
poros de filtración por su carga
eléctrica neta negativa y la muy
intensa carga de la membrana basal
glomerular, gruesa capa proteica
que sostiene por un lado al endotelio
que recubre el interior de los
capilares y por el otro lado a los
podocitos.

Un daño menor en las capas de la


filtración glomerular permite la salida
de proteínas, pero si el daño es
mayor, el impulso de la presión
sanguínea en el interior de los
capilares glomerulares provoca que
los eritrocitos salgan forzados hacia
el espacio glomerular (en la cápsula
de Bowman) y, al pasar por la pared
de filtración, la presencia de la
intensa carga eléctrica de la
membrana basal atrae y desarticula
proteínas del citoesqueleto y
deforma los eritrocitos.

Los Eritrocitos que alteran su forma


y estructura en por este mecanismo
se llaman Dismórficos.

Las morfologías específicas de los eritrocitos que han salido forzados en un


glomérulo dañado han sido bien establecidos y son los siguientes:

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Es un eritrocito con una perforación central que


pasa de lado a lado el citoplasma y se puede
observar la luz del microscopio a través.

En el mismo camino la perforación crece y se


observa como un anillo

En el Espicular se proyectan proteínas del


citoesqueléto hacia el exterior, levantando
pequeñas espículas.

El Diverticular presenta protuberancias


redondeadas mayores. Con un solo divertículo
causa sospecha pero con dos o más significa
daño glomerular más severo

Por Acantocito se ha aceptado la presentación


de más de una dismorfia en el mismo eritrocito,
ya sea vacio-espiculado, anular-diverticular,
anular-espiculado o vacío-diverticular.

La presencia de eritrocitos dismórficos depende de un cierto tamaño de


perforación den la membrana de filtración, si el tamaño es mayor, los eritrocitos
pueden salir libremente y no presentar deformaciones. Normalmente se
encuentran junto con una concentración media de proteínas en la tira reactiva, tal
vez de 30 o 100 mg/dL. Es muy probable que se requiera observar la muestra en
objetivo de 100x del microscopio para la confirmación de la dismorfia,
especialmente en el caso de los espiculados.

OSMOLARIDAD y Eritrocitos
Las mezclas de sustancias que cotidianamente llamamos soluciones,
comúnmente sólidos disueltos en líquidos, son en realidad Dispersiones, mezclas
homogéneas de sustancias en las que la que se encuentra en mayor cantidad o
Fase Dispersante es el Disolvente y el que se encuentra en menor cantidad o
Fase Dispersa es el Soluto. Tal como lo expresa el nombre
de ambas fases, debe haber una afinidad entre ambas para
dispersar o separar el soluto en el disolvente. En las
soluciones acuosas la afinidad es a partir de cargas
eléctricas del soluto que son atraídas por las cargas
eléctricas de la molécula del agua, que por la diferencia de
tamaño y número de protones (cargas positivas en el
núcleo) del Oxígeno (que posee 8) y el del Hidrógeno (con
solo1), la nube de electrones se desplaza hacia el oxígeno
causando una carga parcial negativa y una carga positiva
hacia los hidrógenos.

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Un sólido cristalino está formado por una red


tridimensional de partículas colocadas en
posiciones ordenadas y a distancias y ángulos
fijos.

Si se sumerge en agua y las moléculas del


líquido ejercen una atracción mayor que la de
las partículas entre sí, se van a separar del
sólido.

Al separase o Dispersarse las moléculas del


soluto se van a rodear de moléculas del
disolvente que son atraídas eléctricamente.

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ÓSMOSIS

Tenemos un recipiente con


disolvente, por ejemplo agua,
dividido por una membrana
semipermeable, la que permite el
paso del disolvente, pero no del
soluto, y un soluto con afinidad
por el disolvente por presentar
carga eléctrica que va a atraer las
moléculas bipolares del agua.

Al vaciar el soluto en el
disolvente las moléculas del
agua van a ser atraídas
eléctricamente por las del soluto,
las van a rodear y a separar o
dispersar.

Dependiendo de la cantidad de
moléculas de agua necesarias
para solvatar (envolver) al soluto
y del volumen de agua presente,
se puede disolver una cantidad
de soluto.

Si agregamos moléculas del


soluto, se va a requerir más
moléculas del disolvente para
disolverlas.

Las moléculas del soluto atraen


eléctricamente a las del
disolvente, si las del mismo lado
de la membrana son insuficientes
se atraerán las del otro lado.

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Al pasar las moléculas de


agua del lado izquierdo al
derecho por atracción
eléctrica del soluto, lo
envuelven y dispersan.

Según la cantidad de
moléculas de agua
requeridas y transportadas
(flechas negras), el volumen
del recipiente va a disminuir
en el lado del disolvente y a
aumentar en el lado del
soluto (flechas azules).

La Ósmosis es el paso del disolvente por una membrana semipermeable hasta


lograr la dispersión del soluto o los solutos contenidos en ambos lados de la
membrana.

Los Eritrocitos son células flexibles con una


forma básica de disco bicóncavo, por depresión
central en ambos lados.

El tamaño y la forma de los eritrocitos postglomerulares depende de la cantidad de


partículas osmóticamente activas dispersas en la orina, en relación con las
mismas en el interior del eritrocito.

Cuando la orina se encuentra más diluida que el interior de


los eritrocitos, las partículas disueltas en el líquido
intracelular del mismo van a atraer el agua del exterior y el
eritrocito se va a llenar de agua cambiando su forma
externa por la de una esfera.

Si la orina está más concentrada que el interior del


eritrocito, el agua va a salir y la membrana del eritrocito se
va a contraer y a deformar presentando protuberancias
como espículas en todas direcciones.

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El índice de refracción de los eritrocitos varía con su contenido de hemoglobina,


cuando es bajo por causa prerenal o han perdido su contenido por escape en el
seno de la propia orina escasamente se llega a observar su contorno con
iluminación de campo claro y se les conoce comúnmente como “Eritrocitos
Fantasma”.

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CRISTALURIA

La formación de cristales en los túbulos renales es el paso obligatorio inicial en el


desarrollo de cálculos. La Cristaluria, la presencia de cristales en la orina, es un fenómeno
natural resultante de la sobresaturación de una sustancia y puede reflejar temporalmente
un volumen urinario disminuido o una eliminación aumentada de soluto.

La sobresaturación urinaria puede venir de sustancias derivadas de desórdenes


metabólicos, enfermedades hereditarias o medicamentos.

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La búsqueda de cristales y el análisis de sus características es de interés en la evaluación


de laboratorio de un paciente formador de cálculos en varias formas:

La cristaluria es un hallazgo frecuente en sujetos sanos y en pacientes que sufren de


litiasis de diferentes orígenes. Su estudio es útil para:
 El diagnóstico de enfermedades litógenas heredadas, como hiperoxaluria o
cistinuria
 La identificación de cristales de medicamentos que pueden causar daño renal o la
formación de cálculos
 La investigación de desórdenes metabólicos asociados a la formación de cálculos
 El monitoreo de la tendencia a la recurrencia en pacientes formadores de cálculos
(Daudon)

BASES TEÓRICAS

Un Cristal es una porción homogénea de materia con una estructura atómica ordenada y
definida y con forma externa limitada por superficies planas y uniformes simétricamente
dispuestas.

En la cristalización, las partículas, sean iones o moléculas que se encuentran dispersos


en un disolvente en fase líquida, van unirse formando una red ordenada y periódica,
separándose de la capa de moléculas del disolvente que las rodea para formar una
nueva fase sólida con tendencia a depositarse por gravedad.

Las partículas en el cristal se colocan ordenada y periódicamente dispuestas a distancias


uniformes y en ángulos fijos y definidos.

DISPERSIONES

Una dispersión es una mezcla homogénea de dos sustancias que conservan sus
propiedades, en la cual existe una en mayor proporción, la fase dispersante, comúnmente
llamada disolvente, y la fase dispersa, el soluto.

A las dispersiones se les conoce también por Disoluciones. Se forma una disolución
cuando se ponen en contacto el disolvente y el soluto. Es posible lograr una mezcla
homogénea si las sustancias involucradas son compatibles en su naturaleza y
composición química, por ejemplo dos sustancias polares o dos no-polares. El Agua es
un disolvente muy eficiente para muchas sustancias en la naturaleza por la bipolaridad de
su molécula.

Cuando una sustancia, sea sólida, líquida o gaseosa se sumerge en el agua, se disuelve
por que las moléculas de agua atraen, separan y rodean a las del soluto formando una
capa llamada: capa de solvatación. El siguiente fenómeno es el de la difusión: el soluto va
a desplazarse del área de mayor concentración a la de menor concentración.

Si se continúa agregando soluto, se va a dispersar tanto como las moléculas del


disolvente puedan rodear y mantener separadas. Si se agregan más, las fuerzas de
atracción del soluto vana vencer a las del disolvente y se van a unir, formando Celdas.

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La Disolución o Cristalización va a depender


de la fuerza que predomine: la del disolvente
hacia las moléculas o la de las moléculas
entre sí.

NUCLEACIÓN DEL CRISTAL

Una Dispersión llega a la sobresaturación cuando las moléculas de soluto superan la


cantidad de moléculas de disolvente necesarias para separarlas, rodearlas y mantenerlas
en solución (solvatarlas). Si la cantidad de moléculas de soluto aumenta, la cantidad de
moléculas de disolvente disminuye o determinadas condiciones como el pH y la
temperatura permiten la atracción, las moléculas o iones del soluto comienzan a reunirse
formando pequeños racimos que aumentan la concentración local del soluto formando
partículas cristalinas mínimas.

En el seno de la disolución, las micropartículas se atraen y se agregan de manera que


aquellos agregados de tamaño inferior a cierto valor crítico son inestables y se
desintegran, en cambio aquellos de tamaño superior al crítico son estables y precipitan,
formándose así la partícula mínima capaz de seguir creciendo llamada núcleo o semilla.

La nucleación puede ser básicamente de dos tipos: homogénea y heterogénea. Cuando


un cristal se forma a partir de un núcleo o semilla hasta crecer a un tamaño y forma
estables se llama Monocristal. Si se forma a partir de dos o más fragmentos en
crecimiento y posteriormente completa su estructura se llama Policristal. A cada una de
los núcleos que se unen para formar un cristal se le conoce como Grano, y a la superficie
de contacto t unión entre ellos se le llama Borde o Límite de grano.

El crecimiento de los cristales en una sola secuencia o un posterior crecimiento de un


cristal ya formado va a depender de la concentración o disponibilidad del soluto
constituyente, así como de las demás condiciones como pH y temperatura y se va a
realizar en un orden de aumento de celdas que dependerá de la estructura geométrica de
las celdas, la geometría de la posición de sus partículas constituyentes.

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En el material cristalino los átomos se


estructuran en redes basadas en la
repetición tridimensional de sus
componentes. La estructura repetitiva se
denomina celda unitaria. Los cristales se
clasifican según las propiedades de simetría
de la celda unitaria.

Errores en la Formación de los Cristales.

En la formación de un cristal puede haber incidentes o errores que deformen al


cristal al ensamblarse las celdas y pueden ocurrir en un punto, línea o área:

Puntuales:
 De vacancia. Faltante de una partícula en un punto

 De sustitución: se adhiere una partícula ajena:

 Autointersticial: una partícula de la misma sustancia en un lugar entre


partículas

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Defectos de Área:

El defecto de área más importante para el estudio de las cristalurias es la


maclación. Cuando varias partículas se unen para formar un Policristal y su unión
obedece a una disposición ordenada de las celdas según la geometría el cristal va
a crecer en su forma original.

Macla. Es un es un tipo especial de límite de grano en el cual los átomos de un


lado del límite están localizados en una posición que es la imagen especular
de los átomos del otro lado.

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IMPORTANCIA DE LOS CRISTALES EN LA ORINA

La presencia de una cantidad elevada de una sustancia en la Orina, aunada a


condiciones de pH puede favorecer la formación de cristales, en algunas
sustancias condición determinante como en el ácido úrico, y en otros
insignificante, como en el oxalato de calcio y la 2,8-dihidroxiadenina.

En el tiempo que permanece la Orina en el interior del paciente se pueden llegar a


formar cristales, en su mayoría microscópicos y en algunas ocasiones
macroscópicos. La presencia de los cristales y su recorrido el tracto urinario en la
mayoría de las personas pasa desapercibida, pero el hallazgo de algunos es en sí
un problema o un riesgo para la salud.

CRISTALES: ORÍGEN y SIGNIFICADO CLÍNICO

La presencia de Cristales en el Sedimento Urinario puede revelar orígenes y


condiciones clínicas como las siguientes:

 Leucina: Su presencia, común en el interior de cilindros, revela la presencia


de un sangrado del tubo digestivo alto,
ya sea de várices esofágicas, comunes en
pacientes con cirrosis hepática o por una
úlcera gástrica, situaciones en las que se
digiere una cantidad suficiente de sangre
en el estómago. La Leucina es el
aminoácido más abundante en las cadenas
proteicas de la Hemoglobina, tras su
posterior absorción en el duodeno se
excreta por la orina y se cristaliza.

 Colesterol: Se considera Síndrome Nefrótico cuando la pérdida de


proteínas es de 3.5 g/24h o más.
En esas condiciones la pérdida
continua de Albúmina por los
glomérulos dañados causa
Hipoalbuminemia y lleva al paciente
a un edema generalizado. Ante la
imposibilidad de restituir la
osmolaridad por la albúmina, el
Hígado pone en circulación
Lipoproteínas que transportan
Colesterol que liberan en la orina y
lo encontramos cristalizados en
sedimento.

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 Bilirrubina: Se encuentra en la orina de pacientes con inflamación


hepática u obstrucción posthepática. Pueden presentarse concentraciones
elevadas causando cambios inflamatorios severos y descamación
abundante en todos los epitelios del tracto urinario y formación de cilindros
o en cantidades mínimas que se reabsorben en células tubulares renales
sin ser detectables por la tira reactiva.

 Por la presencia de una Deficiencia Metabólica Hereditaria con


cristalización causante de Insuficiencia Renal, como cristaluria por 2,8-
dihidroxiadenina o Ácido Úrico.

2,8-dihidroxiadenina y abundantes eritrocitos dismórficos

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Ácido Úrico y células renales


 Por la presencia de una Deficiencia Metabólica Hereditaria con
cristalización causante de Litiasis, como en: Cistina o Ácido Úrico.
Cistina Ácido Úrico

 Por infección con bacterias ureolíticas: Fosfato cálcico-magnésico o por


la elevación de pH se cristaliza Carbonato de Calcio

 Por sustancias con actividad farmacéutica, sean principios activos o


metabolitos de presentaciones farmacéuticas:
Omeprazol o Antibióticos

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La naturaleza física de los cristales de las diferentes sustancias determina


aparentemente unas condiciones necesarias para la cristalización muy estrechas
dentro de las cuales la concentración y el pH son las más populares en el
laboratorio Clínico y a su vez las más desconcertantes en la vida real y la causa es
que la orina en formación y eliminación es un sistema complejo en el que
participan primeramente complejos mecanismos de filtración y reabsorción tubular
de diferentes electrolitos y la modificación de condiciones de osmolaridad y pH al
paso por el tracto urinario. En condiciones normales, encontrando concentraciones
aparentemente suficientes para la sobresaturación de alguna de las especies
químicas participan en oposición a la cristalización los inhibidores, que pueden ser
moléculas de bajo peso molecular (citrato, pirofosfato, magnesio, zinc, etc.) o
macromoléculas de gran complejidad química (Glucosaminoglucanos, proteína de
Tamm-Horsfall, nefrocalcina, uropontina).

Además de la presencia y el equilibrio entre promotores e inhibidores de la


cristalización, la dependencia del pH de las especies cristalinas es variable. En el
siguiente cuadro se muestran: el pH óptimo y el intervalo de cristalización, así
como la dependencia que presentan la mayoría de especies de interés clínico en
la orina.

CRECIMIENTO CRISTALINO
Una vez formado el núcleo, este se convierte en un punto de convergencia de
moléculas del soluto que se van agregando en capas sucesivas a una velocidad y
hasta un tamaño definidos por la sobresaturación del soluto.

El proceso de crecimiento cristalino tiene lugar como resultado de la interacción


entre dos fases: disolución y sólida. En el crecimiento de los cristales concurren
tres procesos cinéticos, que son:

1. Transporte de materia (de unidades constructivas) desde el volumen de la


disolución sobresaturada hacia el cristal por difusión.

2. Incorporación de dichas unidades al cristal, proceso denominado reacción


superficial.

3. Evacuación del calor de cristalización desde el cristal hasta el seno de la


disolución.

La estructura de la superficie del cristal para distintas caras del mismo es


diferente. Su estructura es bastante complicada, pero se considera que el cristal
está formado por pequeños cubos con una longitud de arista igual al parámetro de
red. (ángulos y distancias entre átomos, iones o moléculas). Así, las unidades de
crecimiento ocupan posiciones regulares en la celda cristalina.

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Michele Daudon

RIESGO LITÓGENO

Algunos de los cristales que se observan en la orina tienen la probabilidad de


formar litos o cálculos antes de abandonar el tracto urinario. La Urolitiasis es la
precipitación, agregación y toma de consistencia más o menos dura de solutos,
fisiológicos o no, contenidos en la orina en cualquier parte del aparato urinario. Es
una enfermedad que se caracteriza por una elevada tasa de recurrencia y se cree
que la causa es la resultante de uno o varias anormalidades en la composición de
la orina, flujo urinario o morfología y función de las células tubulares.

AGREGACIÓN

Un cristal ya formado y presente en una dispersión saturada de la sustancia que lo


forma puede actuar como una enorme y potente semilla o núcleo que atrae
fuertemente las moléculas disueltas y provocar así la formación de una nueva red
cristalina a partir de alguna de sus paredes, por lo que se va a producir el
crecimiento de un nuevo cristal adherido al original y probablemente identificable
por su forma externa incompleta. Este tipo de Agregación se llama Primaria y su
facilidad depende del tipo de red cristalina que aunada a otras condiciones como:
 Disponibilidad suficiente de soluto por una dismetabolia

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 pH adecuado
 Deficiencia en la función o concentración de inhibidores

Este tipo de agregación llevándose a cabo multidireccionalmente y en una cadena


dependiente de las condiciones mencionadas, es una forma obvia de propagación
del crecimiento cristalino y un riesgo litógeno elevado.

Figura. Agregación primaria

La Agregación Secundaria ocurre cuando por contacto directo se relacionan


físicamente las redes cristalinas de dos cristales ya formados y se unen
aumentando así la masa cristalina que puede llegar a niveles críticos para la
continuidad a un tamaño macroscópico

NUCLEACIÓN
Los cálculos son conglomerados de policristales compuestos por minerales
(aproximadamente en un 95%) y una matriz orgánica. La matriz, compuesta
principalmente por mucoproteínas con pequeñas cantidades de
mucopolisacáridos, se presenta en todos los cálculos como láminas concéntricas,
estriaciones radiales o pequeñas esferas. El papel de la matriz en la
calculogénesis es incierto. Es posible que suponga un nido para el 9 crecimiento
de los cristales, un coprecipitado inerte de cristales minerales o un indicador de la
localización en la pirámide o el cáliz donde se inició la formación del cálculo.

En algunos casos, determinado tipo de cristal se puede depositar sobre la


superficie de otro tipo de cristal de características similares. Este fenómeno,

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conocido como epitaxia, es importante en el depósito de cristales de oxalato


cálcico sobre un núcleo de ácido úrico. En la formación de cálculos de ácido
úrico, fosfato amónico magnésico y cistina, la sobresaturación y el pH
representan un papel esencial. El pH de la orina determina los niveles de
concentración a los que se produce la cristalización. Los cálculos de ácido úrico y
cistina se forman en la orina ácida y pueden disolverse si se alcaliniza la orina
durante un periodo de tiempo. La alcalinidad de la orina favorece la formación de
cálculos de fosfato amoniaco magnésico y algunos cálculos de fosfato cálcico.

Además de un entorno de altas concentraciones iónicas o moleculares, la


formación de cálculos requiere un determinado lugar en el que se inicia la
calculogénesis. Se han propuesto varios lugares para la formación de cálculos:
las placas de Randall, que son pequeñas estructuras caliciales submucosas
cargadas de cristales que se forman como consecuencia de la pérdida de la capa
protectora de Glucosaminoglucanos, por daño tisular postinfeccioso, agentes
tóxicos o isquemia; las zonas de menor movimiento urodinámico en las la pelvis
renal los orificios de los conductos colectores en los que retienen piedras
diminutas y los conductos colectores.

CÁLCULO DEL RIESGO LITOGENO DE UNA CRISTALURIA

Desde finales de la década de los ochenta varios grupos de investigadores han ido
perfilando distintas propiedades de los cristales que puedan orientar al analista y
al clínico acerca de la validez y significado real de los cristales. Estas
características sirven además para definir en todas las cristalurias su participación
en un proceso litógeno o para controlar un tratamiento farmacológico. La
valoración patológica de cristales siempre significativos no tiene mayor dificultad

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que su identificación. En cambio, aquellos elementos que son potencialmente


significativos (en especial los Oxalatos, Ácido úrico), cuya presencia puede ser
fisiológica, dietética o patológica presenta casi siempre dificultades en su
interpretación. El oxalato calcico dihidratado (OCD) es la cristaluria más frecuente,
pero en un Ambulatorio más del 70% de los casos no significa nada y carecen por
tanto de interés patológico. Paradójicamente los cálculos más frecuentes 11 son
de OCD. La idea es utilizar un análisis, el sedimento urinario, que es un método
económico y nada invasivo, para que aporte nuevos datos para una más segura
valoración de la significación patológica de los elementos observados.

En su momento (hace tres décadas) se invocaron cuatro parámetros


morfocristalográficos para valorar una cristaluria: tamaño del cristal, espesor,
número por campo microscópico y la determinación de las tasas de maclacion y
agregación cristalina presentes. El uso de estos parámetros que se determinan
durante el examen del sedimento urinario sin un especial utillaje ha permitido una
muy segura aproximación sobre el significado clínico de una cristaluria. La
experiencia ha demostrado que no solamente se podían deducir las alteraciones
metabólicas del enfermo a través del tamaño y espesor, sino que además se
podía aventurar con bastante eficacia mediante los parámetros de maclacion y
agregación un pronóstico de su riesgo litogeno.

ACTUALIDAD

El paso más reciente en la determinación del Riesgo Litógeno es un nuevo


parámetro de valoración por el Dr. Michel Daudon, denominado VOLUMEN
CRISTALINO GLOBAL (VCG) que integra el número de cristales, su tamaño y el
espesor o facies cristalina en una cifra numérica que además de aumentar la
seguridad en la predicción del riesgo litógeno del enfermo, facilita el entendimiento
a los clínicos y el seguimiento de las medidas farmacoterapeuticas establecidas.
El VCG se expresa en µ3 (micras cúbicas de volumen de los cristales) por mm3
(milímetro cúbico de orina), cifra que se calcula mediante la aplicación de fórmulas
matemáticas desarrolladas después de un exhaustivo estudio de poblaciones
normales (sin historia de litiasis), sujetos con litiasis actual y sujetos con historia de
litiasis pero actualmente sin litiasis. Además, según el autor, limita la práctica de
costosos estudios metabólicos porque las alteraciones son fácilmente predecibles
según el VCG obtenido del enfermo en el momento de la visita.

Presencia de Maclas /Agregados


La presencia de maclas/agregados es muy importante porque certifica de manera
muy específica la posibilidad de una recidiva litiásica. El cálculo del VCG se ve
dificultado por la gran diversidad de formas y tamaños. Por otro lado, su presencia
indica en todos los casos un potencial de elevado riesgo litogeno que debe ser
valorado con el mayor cuidado. El valor del VCG mac/agre obtenido debe sumarse
al hallado para los cristales aislados (si los hay), dando lugar a un VCG total. La
observación de maclas/agregados incrementa muy significativamente el valor de
VCG, dando cifras muy elevadas que indican un riesgo extremo de litiasis actual o
de próxima aparición.

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MÉTODO:

1. Se debe Identificar la identidad de la o las Especies Cristalinas


presentes
2. Si se encuentran diferentes presentaciones, formas o facies de la misma
sustancia deben identificarse
3. Se cuenta el número de cristales por Microlitro de cada especie
cristalina o facies de la misma especie
4. Se resuelven las fórmulas para obtener el VCG de cada una de las
especies o presentaciones de cristales
5. Se suman los valores de VCG obtenidos de las fórmulas individuales de
cada especie cristalina (o sustancia cristalizada) o cada presentación de la
misma especie, para obtener un VCG total.

Explicación desarrollada del método

En algunas muestras de orina podemos encontrar cristales de una sola especie


cristalina, pero con diferentes formas, tamaños y en representación individual o en
agregados o maclas:

También podemosencontrar diferentes sustancias cristalizadas o Especies


cristalinas:

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Deben entonces contarse por separado: cristales de una forma, ejemplo Oxalato
de Calcio dihidratado Octaedrico, dodecaedrico y agregados o maclas de cada
uno de ellos. Una vez contados se debe identificar las fórmulas a sustituir y
obtener los Volúmenes Cristalinos de cada especie o presentación y sumar los
resultados para obtener un VCG total que puede significar un riesgo mucho mayor
que una especie considerada individualmente.

A continuación vamos a incluir el ejemplo de cálculos con el Oxalato de Calcio.

Oxalato Cálcico Dihidratado (OCD)


Se distinguen dos presentaciones morfológicas o facies principales: la octaédrica
(Facies 1) y la dodecaedrica (Facies 2). Esta última a su vez se subdivide en tres
clases Facies 2A, 2B y 2C que tiene en cuenta el grosor del prisma tetragonal de
base neoformado.

OCD Facies 1
Se trata del cristal de OCD clásico y corresponde a la cristalización octaédrica, es
decir, a una bipiramide tetragonal con ocho caras. Es la presentación más común
y la que plantea más problemas a la hora de decidir cuál es el papel patológico
que desempeña. Como se trata de una figura cristalina cuya base de unión
bipiramidal es un cuadrado, se toma en varios cristales la longitud media de su
caral (D) se eleva al cubo (volumen) y se multiplica por el número (N) de cristales
por µL y un factor de corrección predeterminado que siempre es el mismo para
cada facies.

VCG = N x D3 x 0,1

OCD Facies 2
El crecimiento del prisma de unión entre las dos pirámides dando una figura
geométrica cristalina de doce caras (dodecaédrica) es de gran valor clínico.
Incluso dependiendo de su longitud se establecen tres subtipos con factores de
corrección cada vez mayores según su grosor.

Facies 2A: VCG = N x D³ x 0,17

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Facies 2C: VCG = N x D³ x 0,50

FÓRMULAS PARA EL VOLUMEN CRISTALINO GLOBAL

OXALATOS

Oxalato cálcico dihidratado octaedrico (OCD)

Facies 1 : VCG = N x D³ x 0,10 µ³/ mm³

Oxalato cálcico dihidratado dodecaedrico

Facies 2A : VCG = N x D³ x 0,17 µ³ / mm³

Facies 2B : VCG = N x D³ x 0,25 µ³ / mm³

Facies 2C : VCG = N x D³ x 0,50 µ³ / mm³

OCD y OCM agregados: VCG = N x L x A x E µ³ / mm³

Oxalato cálcico monohidratado (OCM)

VCG = N x L3 x 0,19 µ 3 / mm3

Maclas / Agregados de corte Esféricos: VCG = N x 4,2 r 3 x f µ 3 / mm

CISTINA

1- Cristales Laminares: VCG = N x D2 x 0,65 µ³ / mm³

2 - Cristales gruesos (Prismas) : VCG = N x D2 x E x 0,65 µ³ / mm³

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ORTOFOSFATO CÁLCICO (BRUSHITA)

Unidades aisladas: VCG = N x L x A x E µ³ / mm³

Maclas VCG = N x 4/3 π r3 x f = N x r3 x 4,19 x f µ³ / mm³

f = varia de <0,10 a 0,75 dependiendo de la densidad de la esfera

ACIDO URICO

Facies 1: Cristales Laminares

1 a Rombos regulares: VCG = N x a x b x 0,50 µ³ / mm³

1 b Rombos irregulares: VCG = N x a x b x 0,50 µ³ / mm³

Facies 2: Cristales Gruesos

2 a Prismas rómbicos: VCG = N x a x b x E x 0,50 µ³ / mm³

2 b Formas paralelepipedicas: VCG = N x a x b x E x 0,50 µ³ / mm³

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VCGmaclas/agregados tipo esferico = 4/3 π r3 x N x f = 4,2 3 x N x f µ³ / mm³

VCGmaclas/agregados tipo plano o cuasi plano = A x L x H x N µ³ / mm³

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VALORES LÍMITE DE RIESGO LITÓGENO NULO

* Páginas 76 a 80 extraídas de los apuntes del Diplomado de Sedimento


Urinario por el Dr. Fernando Dalet Escribá

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LO QUE ESCAPA A LOS SISITEMAS DE DETERMINACIÓN DEL RIESGO


LITÓGENO

Existen características que se pueden tomar en cuenta para estimar el riesgo en el


que se encuentra el paciente sin incluir clasificaciones ni determinaciones
numéricas y que resultan compatibles con todas las clasificaciones y
determinaciones como el Riesgo Litógeno 1 al 5 o el Volumen Cristalino Global,
pero que también incluyen observaciones que se pueden encontrar en el
Sedimento Urinario con frecuencia. El aumento del riesgo sube de peldaño en la
escalera en el siguiente orden.

1. Cristalización. Primeramente aparecen cristales de alguna especie


química

Los cristales pequeños de la mayoría de las


especies son de bajo riesgo, salvo en el caso que
se expondrá más adelante.

2. Crecimiento de los cristales. El tamaño en cristales individuales o


agregados/maclas es quizá el más importante factor de riesgo.
3. Maclación. La presencia de Maclas y la complejidad de las mismas es el
siguiente dato

4. Agregados de Cristales o Maclas. Es, comenzando a escapar de las


clasificaciones numéricas, el riesgo más grave y con simple entendimiento,
si una masa cristalina formada por cristales unidos o maclas aparentemente

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adheridas sigue creciendo a un tamaño que incluso no se pueda observar


en un campo microscópico, va a llegar a una dimensión observable a
simple vista y a una piedra o lito.

Más aún si están agregadas más de una


especie cristalina, ya que la frecuencia de
cálculos heterogéneos es mayor que de
homogéneos.

5. Núcleos de Cálculo. Se puede observar la presencia de las formaciones


que pueden actuar como núcleos en el caso de detenerse en el interior del
tracto urinario, ya que siendo la cristalización un fenómeno físico de
atracción eléctrica de partículas de soluto, la semilla que dispare la
agregación de cristales de una o más especies cristalinas puede estar
constituida por materia orgánica: fragmentos de tubo renal, mucina, biofilm
bacteriano, cilindros o células epiteliales; materia inorgánica: hilo de
sutura, grapas quirúrgicas, un fragmento de lito previo, un agregado
cristalino etc. Los de materia orgánica son más frecuentes por su origen
endógeno.

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6. Cilindros Cristalinos. El hallazgo de cristales en el interior de cilindros


implica una cristalización al interior de los tubos renales con un elevado
riesgo de la formación de una nucleación en el parénquima renal, con el
consecuente daño y pérdida de función además de la posibilidad de la
formación de un cálculo macroscópico.

7. La incrustación de Células de los Conductos de Bellini a cilindros


cristalinos, grupos o agregados cristalinos implica también la
cristalización en el sistema colector renal y un elevado riesgo de la
nucleación, ampliamente documentada en investigación de litiasis de inicio
Piramidal. Se observan células de Epitelio Cilíndrico alargadas por el
desprendimiento mecánico de su membrana basal por efecto de los
cristales incrustados y el flujo urinario que los impulsa.

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CILINDROS

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TINCIONES.
En el Microscopio Óptico tenemos una
fuente de iluminación o foco que va a
emitir luz, en el Condensador se va a
concentrar y dirigir hacia el objeto a
observar.

Después de atravesar el objeto


colocado en la platina va a incidir en un
juego de lentes que van a provocar el
aumento de tamaño en la imagen.

Observamos objetos que desvían el haz


luminoso, es decir que presentan
refracción. La refracción es el cambio
de dirección que experimenta la luz al
pasar de un medio a otro. Ocurre por el cambio de velocidad de la luz en uno y
otro medio (índice de refracción).

Las partículas transparentes e incoloras


no se observan si no se aumenta el
contraste por algún medio.

Cerrando el Diafragma de Iris situado


bajo el condensador se puede lograr un
cierto nivel de contrastación que ayude
a hacer visibles las estructuras
incoloras con un índice de refracción
semejante al de la orina.

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El siguiente nivel de contraste que se puede experimentar en la mayoría de los


Microscopios Ópticos se puede lograr bloqueando un lado de la iluminación de la
superficie de la muestra, sombreando así el lado de los objetos que no reciben luz
para obtener una imagen superficial en relieve. A continuación se presenta el
diagrama de la iluminación normal de un microscopio óptico.

El método consiste en colocar un objeto circular bajo el condensador y regular la


distancia hacia el interior para obstruir el haz de luz por un lado hasta permitir que
uno de los dos extremos incida en la superficie superior de la muestra y permita
resaltar la topografía superior de los objetos.

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Célula sin contraste

Célula contrastada con el Diafragma

Célula contrastada con relieve

TINCIONES
La opción más antigua para distinguir las partículas presentes en una muestra
biológica es la de colorearlas. Se han utilizado tinciones simples o
monocromáticas y tinciones policromáticas.

Las tinciones para sedimento urinario que se han utilizado dentro del Uroanálisis
han sido tinciones aplicadas a muestra en estado líquido, aplicándolas al
sedimento en el tubo de ensayo o a una gota de muestra en el portaobjetos.

La más difundida en nuestro continente es la de Sternheimer-Malbin, que desde


1954 fue dada a conocer en la revista JAMA como “Un Nuevo Método de
Reconocer Pielonefritis”, tinción supravital que tiñe células muertas y no tiñe
células vivas, por lo que permite visualizar fácilmente a los piocitos, leucocitos
vivos a los que encontraron estrecha relación con la presentación de abscesos

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renales los autores del informe. Sé obtiene una tinción prácticamente


monocromática roja por la Safranina, colorante mayoritario de la mezcla, junto con
una cantidad muy reducida de Cristal Violeta.

Se ha utilizado también Azul de Metileno y una versión de Sternheimer solo,


ésta aumenta las posibilidades de tonos con núcleos ligeramente morados

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Por el lado del diagnóstico Citológico el Dr. George Papanicolaou desarrolló una
tinción policromática que permitiera una excelente diferenciación de núcleo y
citoplasma, con transparencia para poder observar células encimadas en
preparaciones a base de células sueltas en frotis sobre el vidrio del portaobjetos,
preparadas a partir de raspados cérvicovaginales, expectoraciones, orina o
cualquier otro líquido, fijado y adherido, en estado seco. El desarrollo de la técnica
y la selección y preparación final de los colorantes tomó décadas (1917 a 1942).

El método para lograr imágenes como las que muestra la bibliografía es necesario
contar con citocentrífuga o citología de base líquida.

La tinción de Papanicolaou en la mayoría de los lineamientos para el Uroanálisis


es la de referencia para el diagnóstico de las alteraciones celulares, sin embargo
al migrar las imágenes de una tinción rutinaria en muestra líquida a la muestra
seca y fija en el portaobjetos, se pierden muchas ventajas de observar las
partículas en tres dimensiones y en su estado real, además de perder el
movimiento en protozoarios o bacterias.

En el paso de los años y el desarrollo del Uroanálisis en el Laboratorio hemos


encontrado diferencias con el enfoque profesional de los Citólogos y Patólogos,
principalmente dedicados a la observación de las características morfológicas de
las células y a la discriminación de la presencia de malignidad. Por tal enfoque
prefieren muestras de orina procesadas en tecnología para Citología en Base
Líquida para eliminar todos las partículas microscópicas menores que “oscurecen
el diagnóstico citológico” (The Paris System for Reporting Urinary Cytology).

Tinción Policromática para Sedimento Urinario


Ante la necesidad de cubrir las necesidades diagnósticas de los pacientes en la
rutina del Laboratorio y su posterior canalización al Nefrólogo, el Urólogo, el
Patólogo o el Infectólogo, o en mucho mejor caso al Médico Familiar y a la
tranquilidad de su hogar, se requiere diversificar la metodología y el enfoque del
Laboratorio Clínico.

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Una opción de Tinción que permita simultáneamente:

El tiempo de procesamiento de cualquiera del as tinciones previas utilizadas en la


rutina del Laboratorio Clínico (máximo 3 minutos)

La imagen celular de la tinción de Papanicolaou


para referencia citológica, captura de imágenes
para referencia o diagnóstico directo por el
patólogo o consulta por el laboratorio en un atlas
adecuado

Diferenciación entre los cilindros en tonos de


verde, azul y morado y la mucina en color rojo

La preservación de la morfología, el tamaño y la


disposición tridimensional de los Cristales, más
una excelente transparencia en cristales y células

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La morfología bacteriana y su
ubicación en la superficie de las
células, el biofilm, emergiendo
vivas de una comunidad
intracelular o móviles en vida
planctónica

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CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD


La calidad en los exámenes de laboratorio es importante, por razones de salud:
 Nuestra salud está en juego
 Con ellos se confirman impresiones diagnósticas o se reorientan
 Con ello se toman importantes decisiones terapéuticas
. . . económicas:
 Disminuimos los costos directos de los exámenes (evitando repeticiones)
 Los de los recursos terapéuticos (hospitalización, rehabilitación etc.)
 Los de la pérdida en la vida productiva del paciente
. . . y además:
 Mantenemos la confianza de médicos y pacientes
 Mantenemos el prestigio del laboratorio
 Conservamos el empleo
De entre las diversas definiciones de “calidad” que existen en la bibliografía del
tema podemos hacer referencia a la que se refiere a la satisfacción de las
necesidades que generaron un producto o servicio y recordar brevemente las
indicaciones médicas para el uroanálisis y los parámetros involucrados:

a) infección del tracto urinario


PARÁMETROS INVOLUCRADOS ETAPA DEL UROANÁLISIS
cuenta de leucocitos cuenta microscópica
leucocitos en la tira reactiva examen químico
nitritos examen químico
celularidad y cilindros identificación microscópica
Identificación de “piocitos” identificación microscópica

b) enfermedad renal no infecciosa


PARÁMETROS INVOLUCRADOS ETAPA DEL UROANÁLISIS
cuenta de eritrocitos cuenta microscópica
morfología de eritrocitos identificación microscópica
celularidad y cilindros identificación microscópica
proteínas examen químico
sangre en tira reactiva examen químico

c) detección de glucosuria
PARÁMETROS INVOLUCRADOS ETAPA DEL UROANÁLISIS
glucosa en orina examen químico

d) seguimiento de pacientes con diabetes


PARÁMETROS INVOLUCRADOS ETAPA DEL UROANÁLISIS
glucosuria examen químico
cetonuria examen químico
proteínas examen químico
sedimento urinario identificación microscópica

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e) estados metabólicos (vómito o diarrea, acidosis/ alcalosis, cetosis o litiasis)


PARÁMETROS
evento ETAPA DEL UROANÁLISIS
INVOLUCRADOS
vómito o diarrea Densidad, cetonas examen químico
acidosis / alcalosis pH examen químico
cetosis cetonas examen químico
litiasis pH, sedimento urinario identificación microscópica

Hasta este punto hemos dedicado el presente documento a la descripción de los


procesos que forman parte del Uroanálisis con el propósito de estandarizarlos,
es decir uniformarlos para obtener resultados comparables, basados en
lineamientos y guías de reconocimiento y aceptación internacional y bibliografía
científica seria. Ahora corresponde monitorear o vigilar las diferentes etapas y
detalles del proceso para ver que tal están saliendo las cosas y asegurar una
calidad que cumpla con los propósitos de un uroanálisis bien dirigido.

Como podemos ver en las tablas anteriores cualquier necesidad diagnóstica en


que esté implicado el uroanálisis requiere resultados confiables en cada una de
sus etapas y por consiguiente será importante diseñar y establecer programas
diseñados a la vigilancia y evaluación de cada una de las acciones en el
examen.

El programa de control de calidad incluye la vigilancia continua de todas las


fases del proceso para asegurar los mayores estándares de calidad para el
cuidado del paciente.

FASE PREANALÍTICA.
Para asegurar la plausibilidad del examen, la muestra de orina debe cumplir con
estándares de calidad que aseguren congruencia al resto del proceso. Para ello
debemos empezar por involucrar al paciente y el primer paso en el momento de
recibir la muestra es preguntar al paciente cómo obtuvo la muestra y a que
hora, a partir de su respuesta se verifican los siguientes datos:
 Concordancia de la información con la solicitud y el recipiente
 Aceptabilidad del tiempo de emisión de la muestra y la recepción de la
misma
 Inspección del tipo de recipiente, el adecuado cierre y ausencia de derrames
 Adecuado volumen y ausencia de contaminantes visibles

FASE ANALÍTICA

Examen Macroscópico.
Se recomienda que los exámenes que dependen enteramente de la apreciación
del analista se verifiquen utilizando muestras pareadas ciegas. El analista debe
estar enterado de la posibilidad de recibirlas. Se deben escoger muestras de
volumen suficiente para dividirse en dos frascos y rotularse con diferentes

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nombres o números de registro para verificar la variabilidad intrapersonal e


interpersonal. Debe llevarse un registro cuidadoso de la identidad de la muestra
y de los resultados obtenidos.

Examen Químico.
a) Tira Reactiva. Existe orina control, de origen humano y de origen sintético, de
nivel normal y patológico para la realización del control de calidad interno de
la medición de la química urinaria con la tira reactiva. La elección de orina de
origen humano para eliminar desviaciones por el efecto de matriz es
recomendable, la ventaja de la orina sintética está basada en el costo.

Las presentaciones que se encuentran en el mercado son:


 Frascos de orina liofilizada para reconstituir con 60 mL de agua
 Frascos con 12 mL de orina lista para usarse
 Frascos goteros con 5 mL listos para usarse por goteo sobre la tira
reactiva

La ventaja de las presentaciones de 60 y 12 mL es la presencia de partículas


microscópicas de latex que imitan leucocitos y eritrocitos y se utilizan para el
control de la cuenta microscópica de partículas. Dentro de ellas, el material
para control que requiere manipulación, como la reconstitución puede agregar
variables al sistema que deberán controlarse, como la calidad del agua, la
exactitud del volumen y la técnica de reconstitución.

La ventaja del frasco gotero es el bajo costo en comparación con las otras
dos.

El costo en el control de calidad es un tema digno de atención, ya que en


muchos laboratorios imposibilita la implementación de un programa de control
interno en el área de Uroanálisis. En la bibliografía del tema encontramos
referencias que tocan dos aspectos:
 La frecuencia en que se debe practicar la medición del material control.
Al respecto, los lineamientos de NCCLS (ahora CLSI) Provider-Performed
Microscopy Testing; Aprproved Guideline HS2-A, 2003, recomiendan que se
practique según la productividad del laboratorio:
o en un laboratorio que consume un frasco de tiras reactivas por mes, medir
la orina control una vez por semana,
o en un laboratorio que consume mas de un frasco por semana, medir una
vez al día
o en un laboratorio que consume varios frascos por día, medir la orina
control en sus dos niveles una vez por cada frasco
 El manejo del material control. En este tema se proponen dos opciones:
o Optimizar el volumen de orina control en el que se introduce la tira
reactiva, se propone dividirlo en alícuotas de 4mL y utilizar cada una por
un máximo de tres días.
o Humedecer la tira reactiva por goteo de la orina control en las zonas
reactivas. Es un método muy estable, mantiene la orina en su recipiente

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original, evitando la evaporación, no “contamina” la orina con reactivos de


la tira, en su mayoría enzimas que pueden consumir sustrato, y prolonga
la vida del control hasta por una semana, la decisión entonces será
influida por el control de la cuenta microscópica.

No existe un consenso general para tomar como una pauta única, la


recomendación es que se haga control interno con una frecuencia que
permita detectar desviaciones antes de que repercutan en las decisiones
médicas y la salud de los pacientes. Al respecto existen reportes
bibliográficos que proponen que se haga control interno antes del regreso del
paciente a repetir el estudio por un desacuerdo con la observación clínica del
médico, caso en el cual, si perdura el error, se confirmaría el resultado
erróneo y se podría tomar una decisión terapéutica equivocada.

En cuanto al manejo del material control es vital que cada laboratorio


valide el método por el cual va a optimizar el uso de su material control
para mantener costos sostenibles por la organización a la que
pertenece, equilibrado con una frecuencia adecuada.

Es también indispensable contar con capacitación dirigida y un manual


de procedimientos para el uso correcto del material control, como
ocurre en cualquier especialidad del laboratorio.

¿Qué espero de los resultados?


Recordemos, estamos midiendo los parámetros incluidos en una tira reactiva
para Uroanálisis. En esta tira de plástico con reactivos impregnados en una
fase sólida que comparamos con una carta de colores o medimos en un
fotómetro de reflexión, vamos a obtener resultados con pocas variaciones,
especialmente en las orinas de nivel normal, en las que la mayoría de los
parámetros son negativos.

Análisis estadístico.
El Uroanálisis enfrenta una serie de problemas cuando se trata de definir
formalmente su calidad. Mientras la trazabilidad y la medida de la
incertidumbre están establecidas para la química clínica y la hematología,
para las mediciones semicuantitativas y las escalas ordinales en el
uroanálisis son conceptos prematuros.

La definición de las metas analíticas, o el error que estamos dispuestos a


tolerar, también es materia de estudio, ya que como las escalas de valores
varían según la marca de la tira reactiva, no es posible ajustar los valores de
la orina control a un resultado elegido en la tira reactiva (es decir, si se produce
un lote de orina con 100 mg/dL de glucosa, hay otra marca de tiras que no tiene opción
de 100, sino de 150 ó 200). Esto obliga a los fabricantes de orina control a incluir
límites demasiado amplios en el inserto de sus productos, y por este motivo
se deben establecer límites aceptables en cada laboratorio.

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Para establecer los límites se mide una fase inicial abierta (sin límites
definidos) para contar con suficientes datos y hacer los cálculos estadísticos.

Cálculos estadísticos para la tira reactiva.


La estadística nos sirve para analizar y sacar conclusiones útiles a partir de
un grupo de datos. La estadística descriptiva nos ayuda a caracterizar una
serie de eventos repetidos, semejantes entre sí y nos permite conocer cual es
la categoría, el valor o el evento hacia el que se acercaron mas
frecuentemente: la medida de tendencia central. También nos ayuda a
medir cuanto se alejaron o dispersaron los datos que no cayeron en esa
tendencia central y nos da: las medidas de dispersión.

Comúnmente estamos acostumbrados en el laboratorio clínico a calcular y


caracterizar grupos de datos obtenidos de mediciones de química clínica,
hematología, cuantificación de hormonas, electrolitos, etcétera. Los cálculos
estadísticos que se aplican en este tipo de mediciones es la Estadística
Paramétrica; esta se aplica a variables continuas (ejemplo: glucosa sanguínea
de 90, 91, 92 ó 93 mg / dL) con una distribución normal o cercana, pero en el
caso de la tira reactiva obtenemos resultados discontinuos con distribuciones
diferentes a la normal (ejemplo: proteínas de 30, 100, 300 ó 2000 mg / dL, pero no
valores intermedios). En este caso se aplican cálculos de Estadística No
Paramétrica.

En la Estadística Paramétrica tenemos:


 Medidas de tendencia central: media aritmética. Se calcula
sumando todos los datos y dividiéndolos por el número de datos.
 Medidas de dispersión: desviación estándar. Es un promedio de
los errores estándar. El error estándar es la distancia que existe entre el
promedio o valor esperado y un valor observado, expresado en
porcentaje del valor esperado.

En la Estadística No Paramétrica:
 Medidas de tendencia central: la moda. Es el valor mas repetido
en el grupo de resultados
 Medidas de dispersión: el intercuartil. Es el porcentaje del rango
de resultados observado (el resultado mayor menos el resultado
menor), que está ocupado por el 50% central de resultados (tercer
cuartil menos primer cuartil) al enlistarlos en forma progresiva.

Es importante tener en cuenta el tipo de estadística por que si pretendemos fijar


un valor esperado en la tira reactiva utilizando la media aritmética, podríamos
encontrar, como ejemplo, una glucosa de 175 mg/dL, que no existe en la carta de
colores de la tira reactiva, por tanto debe ser la moda el valor elegido.

Para el intervalo aceptable, el siguiente caso puede resultar ilustrativo:


Es una orina control con una concentración real de proteínas de 43 mg/dL, los
posibles resultados en la tira son: 0, 30, 100, 300 y 1000. La opción mas cercana

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en la tira reactiva es 30 mg/dL, por tanto la moda va a resultar de 30, sin embargo,
puede haber algunas lecturas que se perciban de 100 mg/dL, que aunque está
mas lejos de la concentración real, puede ocurrir, especialmente en lectura visual.
En los lineamientos de CLSI se recomienda que en uroanálisis la variabilidad no
vaya mas allá de una categoría alrededor del valor esperado, por ser mediciones
ordinales, pero en este caso se ilustra que elegir un valor por arriba y un valor por
debajo de la moda, puede resultar incorrecto en algunas concentraciones de
algunos parámetros, ya que, un resultado negativo, que sería un valor por debajo
de la media en el ejemplo (cero o negativo), es clínicamente muy distinto de 100
mg/dL y estaría haciendo aceptable un error analítico.

Entonces, la recomendación es que se tome en cuenta el significado clínico


además de los datos de frecuencia cuando se determine el intervalo aceptable de
resultados en el control interno y se considere que es posible establecer intervalos
asimétricos.

Registro. Los resultados de la medición de la orina control deben registrarse y,


como en todos los controles en el laboratorio clínico, es recomendable graficarlo
para su mejor comprensión. Al respecto comparto una forma de graficar que ha
resultado útil, muy demostrativa y con el menor esfuerzo en mi experiencia en la
rutina del Laboratorio. Se trata de colocar en una tabla: los posibles valores de la
tira reactiva que estamos utilizando, de cada uno de los 10 parámetros en
columnas; y filas o renglones para los días del mes. Se hace la medición de la
orina control y se ilumina la opción que se obtuvo, de un color elegido por ustedes
cada nivel del control y se registra la fecha en la primer columna de la tabla.

Tiene la comodidad de no escribir listas de resultados y después graficarlos y la


virtud de concentrar en una sola hoja los dos niveles de control, si así lo desea, y
si no es así, puede elaborar una hoja para cada nivel.

Una sana recomendación: la uniformidad natural de los resultados puede


provocar que el más honesto analista se vea influido por la gráfica de valores
diarios y, en el caso de presentarse una variación, dude de registrarla
espontáneamente y prefiera rectificarla, por lo que es mejor registrar los resultados
en la libreta de registro de resultados de pacientes y después se ilumine en la
gráfica.

El siguiente paso importante es participar en un Programa de Evaluación Externa


de la Calidad (Comparación Entre Laboratorios o Ensayo de Proeficiencia), para
verificar la exactitud de las mediciones que estamos realizando con una muestra
“ciega”. Podemos obtener resultado satisfactorios, pero cuando no sucede así, es
necesario tomar acciones al respecto.

Una vez que se hace la verificación básica:


 Lote de tiras reactivas utilizado en la medición y vigencia (caducidad)
 Manejo del material control

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 Procedimiento de medición: el equipo lector y su mantenimiento y


calibración, o el manejo de la tira reactiva en lectura visual
 Estado del Control Interno en el momento de la prueba de proeficiencia

Si todo parece haber estado bien, es necesario verificar mas profundamente el


sistema de medición, si se tratara de una prueba de Química Clínica se podría
calibrar un nuevo frasco de reactivo, o verificar las cubetas o la lámpara del
fotómetro. En el uroanálisis vamos a llegar finalmente a la verificación del
desempeño de la tira reactiva.

Las mediciones en escalas ordinales (semicuantitativas) se expresan como datos


categorizados (discontinuos). Se pueden determinar las fracciones máximas de
Falsos Positivos y Falsos Negativos aceptables con base en un método de
comparación aceptado. Métodos de referencia estrictamente no se encuentran
disponibles a la mayoría de laboratorios en varios de los parámetros.

Se clasifican los datos obtenidos de las mediciones con fines de evaluación en dos
límites: El Límite de Detección (Ld), la mínima concentración que puede detectar
la tira reactiva declarada en la información técnica del fabricante (el inserto), por
debajo de la cual deberían encontrarse resultados negativos. El límite de
Confirmación (Lc), por encima del cual la medición debe ser positiva. En medio de
los dos se delinea la Zona Gris, en donde debe darse un gradual cambio de
negativos a positivos. La relación de concentraciones de Lc/Ld se recomienda
que sea de 5.

Las fórmulas para calcular las fracciones de falsos positivos y negativos son las
siguientes:

Método de comparación
Tira Reactiva negativo zona gris positivo total
Negativo a c e
Positivo b d f
total
Límites Ld Ld

 Fracción de Falsos Positivos en el Límite de Detección:

FPd = b / (a + b)

 Fracción de Falsos Negativos en la Zona Gris:

FNg = c / (c + d)

 Fracción de Falsos Negativos en el Límite de Confirmación:

FNc = e / (e + f)

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Especificaciones de Calidad Analítica recomendada para las Tiras Reactivas

DESEMPEÑO FPd = b / (a + b) FNg = c / (c + d) FNc = e / (e + f)


Óptimo < 10% < 30% < 5%
Mínimo < 20% < 50% < 10%

Se proponen los siguientes Límites de Detección y de Confirmación para las tiras


reactivas en general:

PARÁMETRO Método de comparación Ld Lc


Leucocitos Cuenta en cámara 20 100
Eritrocitos Cuenta en cámara 10 50
Inmunoquímica 0.1 0.5
Proteínas
Unión a colorante 0.2 1
Nitritos Nitrito de sodio 0.5 2.5
Glucosa Hexocinasa 3 15
Cetonas Acetoacetato de Litio 1 5
pH potenciómetro + 1 unidad
Gravedad Específica Refractómetro + 0.005
Urobilinógeno No disponible común 20 100
Bilirrubina Solución de bilirrubina 10 50

Comparación Interlaboratorios de Control interno.


Ante la complejidad en la medición del desempeño de la tira reactiva,
especialmente por la poca disponibilidad de métodos de comparación
cuantitativos, una excelente opción es la de participar en un programa de
comparación de control interno interlaboratorios. En este tipo de programa se
recopilan los datos de control interno de todo el mes en un grupo de laboratorios
que comparten características (grupo par), en este caso, marca y modelo de tira
reactiva y sistema o método de medición. En este tipo de programa se evalúa la
reproducibilidad, pero también se verifica el desempeño del laboratorio en cuanto
a la exactitud ya que se compara con el consenso del grupo par.

Existen programas proporcionados por los fabricantes de tiras reactivas y sistemas


de medición y programas de tercera opinión. Para la selección de uno de ellos es
importante tomar en cuenta que entre mayor es el número de laboratorios
participantes se obtiene información de mayor validez, especialmente ene cuanto
a la exactitud por el consenso.

Reproducibilidad.
La evaluación de la reproducibilidad de las escalas ordinales responde a una
distribución binomial. A continuación se presenta una tabla de distribución binomial
en donde nos muestra:
a. La Proporción obtenida de resultados dentro de la categoría de
concentración más frecuente (opción en la carta de colores) estimando el
nivel de un parámetro en una orina control.
b. Número de mediciones usado de la tira reactiva para la estimación

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**Tomado de la Guía Europea Para el Uroanálisis

Aquí podemos ver que con 82 resultados exitosos de 100 (o sea un 80% de
resultados) obtenemos el 95% de confianza deseado, eso implica 24
resultados de la misma concentración en un mes de 30 días. Será importante
además que se tome en cuenta el significado clínico en la variación
observada en los 6 resultados restantes.

EXAMEN MICROSCÓPICO.

a) Cuenta Microscópica. Dada la importancia diagnóstica de la cuenta


microscópica de leucocitos y eritrocitos, es vital llevar un control del
desempeño del laboratorio en la cuenta microscópica. Existen
muestras control que contienen partículas microscópicas estables para
establecer un programa de control de cuenta microscópica. La
frecuencia de la aplicación del programa está comúnmente influida por
el costo del material control.

La cuenta microscópica de partículas sigue una distribución estadística


de Poisson. Las fórmulas para los cálculos son las siguientes:

s = desviación estándar
n = número de unidades de volumen o área contadas (μL o campo
microscópico)
T = total de partículas contadas en la preparación o cámara de cuenta
m = T/s cuenta promedio de todos los campos o unidades de volumen
CVm = coeficiente de variación de la cuenta promedio
CVt = coeficiente de variación de la cuenta total
s=√m

CVm (%) = 100% / √ m = 100% / √ T/ m

CVt = 100% / √ T

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A cuentas bajas, la imprecisión de la cuenta total se vuelve crítica, por


lo que el volumen contado es muy importante como podemos ver en la
siguiente tabla:
Para 1 microlitro, con cuenta de 3 part/ microL.:
CVT = 60%
Para 5 microlitros:
CVT = 26%
Para 10 microlitros:
CVT = 18%

La variación de la cuenta de leucocitos en un sujeto normal y una


infección urinaria suele variar con un factor de 10, de 5 / μL a 50 / μL,
para una cuenta normal la diuresis puede causar variaciones del
100%, de 2 a 4 leucocitos/μL de un día a otro.

El máximo permisible recomendado de falsos negativos en la cuenta


de eritrocitos y leucocitos se enumera en la siguiente tabla:

En cuentas por campo se recomienda informar por intervalos


clínicamente significativos y mantener la variabilidad dentro de la
misma categoría.

El método recomendado de comparación es la cuenta en cámara


calibrada en muestra fresca y sin centrifugar, para evitar los errores
que se pueden generar en la centrifugación y resuspensión del
sedimento.

Como en el resto del Uroanálisis y cualquier otro examen de


laboratorio es necesario (en algunos países obligatorio) inscribirse en
un programa de Proeficiencia o Evaluación Externa de La Calidad.

b. EXAMEN MICROSCÓPICO

Para el control de calidad interno se recomienda el análisis de muestra


pareadas ciegas. Si se detecta una discrepancia en la identidad de las
partículas debe repetirse con conocimiento de la identidad de las muestras
y resolverse con capacitación continua.

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Existen Programas de Evaluación Externa de la Calidad en los que se


presentan imágenes de Sedimento Urinario para identificarse por los
participantes. Tienen la ventaja de representar una forma de capacitación
continua.

INFORME DE RESULATDOS.
El informe de resultados del Uroanálisis debe tener la capacidad de reunir todos
los detalles que se pueden detectar en las diferentes fases del examen, en un
formato compacto, claro y fácil de detectar e interpretar.

Examen Macroscópico.
 Color: El informe es descriptivo, sin clasificaciones.
 Aspecto: Se informa como: transparente, ligeramente turbio o turbio.

Examen Químico.
Los equipos analizadores de tiras reactivas cuentan con impresoras de resultados
e incluso son capaces de conectarse a interfases para transmitir la información por
vía electrónica.

Si se trabaja con método manual y lectura visual, el formato debe contar con
suficiente espacio para escribir los resultados en forma legible y clara. El
Laboratorio puede elegir la opción de un formato que incluya las opciones de
resultados de la tira reactiva y señalar el que se observó.

Es recomendable informar los parámetros semicuantitativos en unidades de


concentración. El informe en cruces puede resultar confuso, ya que en las
diferentes marcas de tira reactiva las escalas, y con ello el valor de las cruces,
pueden variar significativamente. En la siguiente tabla se presentan valores reales
de varias marcas de tira reactiva reales en la carta de colores para cetonas, en
mg/dL.

1+ 2+ 3+ 4+ 5+
Tira 1 5 15 40 80 160
Tira 2 5 15 50 150
Tira 3 16 53 156
Tira 4 0.5 1.5 4 8 16

EXAMEN MICROSCÓPICO.

Acerca del aumento en el microscopio:

El tamaño, la consistencia, la presencia de detalles morfológicos y las relaciones


entre las partículas observables en el sedimento urinario, incluyendo el aspecto

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del fondo de la preparación, nos exige el acercarnos más o menos de los objetos
presentes para los objetivos siguientes:

 Reconocimiento
 Cuantificación y
 Relación entre elementos presentes

 Leucocitos: el informe de la cuenta microscópica se recomienda en número


de leucocitos por unidad de volumen. Además de la cuenta, la Guía Europea
para el Uroanálisis recomienda informar la morfología predominante:
mononucleares, polimorfonucleares; y la presencia de eosinófilos y de
leucocitos centelleantes o “piocitos” por apreciación, como escasos, moderados
o abundantes
 Eritrocitos: también se recomienda informar la cuenta en número de
eritrocitos por unidad de volumen. Los eritrocitos se clasifican en:
o eumórficos: eritrocitos íntegros, con morfología totalmente normal en una
orina con una osmolaridad semejante a la del plasma sanguíneo, crenocitos
en una orina hipertónica, y en una orina hipotónica, esferocitos y
“fantasmas” que son membranas celulares de eritrocito que han perdido su
contenido. En este caso se recomienda informar simplemente: “orina
hipotónica” u “orina hipertónica”
o dismórficos: son eritrocitos con cambios morfológicos ya definidos y
estudiados adquiridos en el paso por un glomérulo dañado, forzados por la
presión sanguínea. Pueden informarse en porcentaje o solamente su
presencia.

Una recomendación importante y útil en el informe de la cuenta de leucocitos y


eritrocitos cuando se trabaja sin un método cuantitativo definitivo, como análisis
mediante equipos automatizados o el uso de cámaras calibradas, es informar la
cuenta por campo en intervalos con un significado clínico. El informe en intervalos
arbitrarios (ejemplo: 0 a 2 , 4 a 6, 10 a 12, 4 a 8, etcétera) implica incomodidades y
esfuerzo innecesario para el analista y el clínico que lee el informe.
Una propuesta para considerarse y comentarse con el equipo médico,
(recientemente apoyada y complementada por los Lineamientos Japoneses) es
informar en intervalos basados con significado clínico gradual y uniforme como
los siguientes:
 menos de 1 por campo
 1 a 5
 6 a 10
 11 a 20
 21 a 30
 31 a 40
 41 a 50
 Se puede incluir el intervalo de 50 a 100 y finalmente
 INCONTABLES

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 Células epiteliales: la simple leyenda de “células epiteliales: escasas,


moderadas o abundantes” NO da información útil, es insuficiente. Es necesario
especificar de cuál epitelio provienen las células presentes en la muestra.
En este punto es muy necesario modificar la forma de informar de la mayoría de
los laboratorios, para lo cual recomiendo el siguiente modelo:

Celularidad: escasa ( ) moderada ( ) abundante ( )

De epitelio: escamoso: transicional: renal:________


(uretra) (vejiga, uréteres, pelvis renal) (túbulos renales)

Observaciones:_________________________________________________

instrucciones:
1. Se hace un barrido panorámico de la preparación en objetivo de 10x y se
marca con una cruz en el paréntesis la opción, según se encuentre la
cantidad general de células en la preparación
2. Se identifica si se presenta un solo tipo de epitelio, si es así se marca con
una cruz en la línea que le corresponde
3. Si se identifican células de más de un epitelio, se indica en la línea de cada
epitelio si es escaso, moderado, abundante o “predomina”
4. Se anota en el renglón de observaciones cualquier anomalía que se presente
en la morfología o la asociación y presentación de las células

Explicación y ventajas. Se cambia: “células epiteliales” por Celularidad para que


inicialmente se dé un panorama de cómo se encuentra semicuantitativamente la
presencia de células en la muestra. En el segundo renglón se especifica si hay un
tipo celular o más y da la oportunidad de presentar el panorama real de la muestra
con solo colocar una cruz, o dos o tres palabras en que se exprese si hay uno de
ellos abundante y otro escaso, o alguno de los epitelios predomina,
independientemente de cómo se encuentre en abundancia la celularidad total de
la muestra. Ejempos:
1. Celularidad: escasa ( ) moderada ( ) abundante ( X )

De epitelio: escamoso: abundante transicional: escaso renal:________


(uretra) (vejiga, uréteres, pelvis renal) (túbulos renales)

Observaciones:_________________________________________________

2. Celularidad: escasa ( X ) moderada ( ) abundante ( )

De epitelio: escamoso: transicional: predomina renal: escaso_


(uretra) (vejiga, uréteres, pelvis renal) (túbulos renales)

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Observaciones:_hiperplasia papilar en células transicionales


 Cilindros: se informa su cuenta por unidad de volumen o por campo y se
debe distinguir su contenido. Para favorecer el significado clínico se sugiere la
siguiente forma de reportarlos:
o Hialino: transparente de bordes bien definidos, no contiene nada
o Leucocítico: contiene leucocitos
o Epitelial: contiene células de los túbulos renales
o Eritrocítico: contiene eritrocitos
o Bacteriano: con bacterias
o Cristalino: con cristales o sales amorfas precipitadas
o De bilirrubina
o Granuloso: resulta de la degeneración y destrucción de alguna de las
células, epiteliales, leucocitos o eritrocitos
o Céreo: al continuar la degeneración del material celular

 Cristales: se informan en apreciación como escasos, moderados o


abundantes.
o Si son cristales “siempre significativos” (2,8-Dihidroxi-adenina, cistina,
tirosina, leucina, estruvita o “fosfato triple”, urato amónico, xantina,
carbonato cálcico) su simple presencia es significativa.
o Si son potencialmente litógenos (oxalatos, ácido úrico y sus sales, fosfato
cálcico, apatitas y sulfamidas), se debe informar si presentan los parámetros
que los hacen litógenos:
 Tamaño
 Espesor
 Número
 Maclas
 Agregados

 Microorganismos: se identifican y se informan.


 Otros: como espermatozoides, gotas de grasa etcétera.

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Información seleccionada del documento: ANÁLISIS DE LAS MUESTRAS DE


ORINA

Editor: LABCAM (Asociación Castellano-Manchega de Análisis Clínicos)

Coordinadores: Daniel Pineda Tenor, Ángeles Cabezas Martínez, Guadalupe


Ruiz Martín

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Distribuye: LABCAM, AEBM, AEFA y SEQC.

Copyright 2011

ANÁLISIS QUÍMICO DE LA ORINA MEDIANTE TIRA REACTIVA

Una tira multiparamétrica o multirreactiva consiste, en esencia, en una banda de


plástico que tiene adheridos una serie de pequeños cuadrados de material poroso.
Cada uno de estos cuadrados (zona reactiva) está impregnado de los reactivos,
tampones y demás componentes de la reacción a que está destinado, todo ello
desecado y con una coloración previa, diferente en cada área reactiva, que
cambia al producirse la reacción.
Mientras la tira reactiva se conserva dentro de su envase con un desecante en su
tapón para evitar la humedad, los reactivos permanecen, hasta más allá de la
fecha de caducidad, inalterados impregnando el área reactiva. Al humedecer la tira
reactiva con la orina, se originan una serie de reacciones en cada área reactiva,
de forma simultánea o sucesiva, que se traducen en cambios en las coloraciones
de las mismas.
La extensión y velocidad con que ocurren dichas reacciones, iniciadas por el
mojado de la tira reactiva con la orina, dependen de la concentración de las
distintas sustancias para cuya detección está diseñada además de las
características de la orina, principalmente su pH, fuerza iónica, osmolalidad,
temperatura, presencia de inhibidores y activadores, fármacos y/o drogas, etc.
Los cambios de color que ocurren tras el contacto de la tira reactiva con la orina
pueden isualizarse o ser medidos fotométricamente siempre dentro de los
períodos de tiempo especificados en cada caso. El manejo, tiempo de reacción,
condiciones de lectura, conservación y características de las tiras reactivas deben
ser explicadas de forma detallada por el fabricante en las instrucciones de uso que
acompañan a cada caja de tiras y siempre tienen que ser tenidos en cuenta para
obtener resultados exactos y fiables.

Los actuales instrumentos para la lectura automática de tiras reactivas se basan


en una medida colorimétrica mediante la metodología de fotometría de
reflectancia, lo que ha supuesto un avance importante no sólo para evitar los
errores de subjetividad, iluminación, tiempos de lectura, etc., consustanciales al
procedimiento de comparación visual de la tira humedecida con una escala de
color, sino por haber permitido realizar la lectura de las tiras reactivas de forma
secuencial y automática, con rapidez, fiabilidad, objetividad y reproducibilidad de
los resultados, manteniendo los tiempos de lectura de cada reacción.
Otro aspecto a resaltar, junto a las ventajas metodológicas mencionadas, es que
la lectura utomática permite el registro automático de datos y la posibilidad de
disponer de un resultado impreso. La posibilidad de conectar on line los lectores
de tiras a los sistemas informáticos de laboratorio ha permitido el manejo de los
resultados, la emisión de informes, el control estadístico y otras ventajas
inherentes a la introducción de la informática aplicada en la gestión del laboratorio.

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Densidad relativa (Peso específico)


Principio de la prueba
La prueba, mediante reacción con un formador de complejos y detección de los
protones liberados, mide las concentraciones iónicas en orina. Como resultado de
las reacciones se producen cambios cromáticos, que el analista mediante una
tabla de comparación puede leer o el lector de tiras detectar. Dependiendo de la
marca de tiras utilizadas, se determina o no los componentes no iónicos de la
orina, tales como la glucosa o la urea.

Interpretación de la prueba
Valores de referencia: 1.016 a 1.022. A diferencia de la osmolaridad, que depende
sólo del número de partículas en la orina, la gravedad específica depende tanto
del peso como del número de ellas. Es así como sustancias de alto peso
molecular pueden aumentar significativamente la gravedad específica sin mayor
modificación de la osmolaridad..

Desde el punto de vista de los valores de la gravedad específica de la orina, hay


términos que se definen con ella: isostenuria cuando constantemente está en
1.010 e hipostenuria cuando está por debajo de este valor; en tanto que el término
de hiperstenuria no se utiliza. En estado normal, la gravedad específica de la orina
puede oscilar entre 1.003 y 1.030, pero en la práctica, un valor menor de 1.010
indica una relativa hidratación y un valor mayor de 1.020 sugiere una relativa
deshidratación.

Utilidad clínica de la prueba


Como parámetro de laboratorio, la gravedad específica ofrece al médico
información importante sobre el estado de hidratación y de la capacidad de
concentración de los riñones de un paciente. La gravedad específica de la orina se
aumenta en presencia de glucosuria, en el síndrome de secreción inapropiada de
la hormona antidiurética y puede estar disminuida por el uso de diuréticos, en la
diabetes insípida, en el hiperaldosteronismo, en la insuficiencia suprarrenal y
cuando hay daño de la función renal. En la mayoría de los pacientes con
enfermedad renal parenquimatosa, el margen de variación de la gravedad
específica se estrecha con el tiempo, hasta que finalmente el filtrado glomerular no
se altera en su paso por la nefrona en donde se fija en 1.010 o menos. En el
paciente con oliguria, la densidad específica puede ayudar a distinguir entre
insuficiencia renal aguda, en la que hay isostenuria y la oliguria por deshidratación,
en la cual se encuentra elevada. Ejemplos de hipostenuria persistente son la
diabetes insípida, la ingestión compulsiva de agua, la hipopotasemia grave, la
hipercalcemia, enfermedades renales parenquimatosas fundamentalmente del tipo
de túbulo intersticial, la insuficiencia renal aguda y los defectos tubulares renales.
Además, la gravedad especifica puede ser de utilidad para evaluar la calidad de la
muestra en estudios antidopaje y consumo de drogas de abuso ya que cuando
está por debajo de 1.005 es altamente sospechosa de estar diluida

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Resultados falsos positivos o negativos


La gravedad específica tiende a estar falsamente elevada en orinas con pH por
debajo de 6 y falsamente disminuida en orinas con pH por encima de 7. Cuando
en la orina hay pequeñas cantidades de proteínas (100 a 500 mg/día) o cetonuria,
la gravedad específica usualmente arroja valores un poco más altos que los
reales.
Limitaciones de la prueba
La gravedad específica de la orina depende del estado de hidratación, la cual
puede estar modificada, intencional o accidentalmente, la transpiración, la
temperatura medioambiental y el uso de diuréticos, incluido el café. Cuando la
densidad especifica está por debajo de1.010 tiene significación analítica por
cuanto en dicha orina, cuando hay eritrocitos y/o leucocitos, éstos se destruyen
rápidamente dando como resultado un sedimento urinario negativo (falso negativo)
mientras que la reacción para eritrocitos y leucocitos es positiva en la tira
(verdadero positivo).
Interferencia con medicamentos
Los medicamentos, y cualquier otro tipo de sustancias, que modifican la diuresis
pueden dar resultados falsamente bajos o altos, con valores que pueden oscilar
entre 1.000 y1.040, incluso en personas sanas.

pH urinario
Principio de la prueba
La prueba se basa en la combinación de tres indicadores: el rojo de metilo, el azul
de bromotimol y la fenolftaleína, que reaccionan con los iones de hidrógeno,
presentes en la muestra de orina. Las reacciones producen cambios cromáticos,
que van del naranja al verde amarillo y al azul.

Antes de interpretar el pH de la orina vale la pena recordar que los riñones


normales producen orina con pH de 4,6 a 8,0, usualmente éste se encuentra
alrededor de 5,5 a 6,5. La orina se torna más alcalina después de las comidas;
debido a la secreción de ácido por la mucosa gástrica su pH es más bajo en
estados de ayuno. Las proteínas causan disminución del pH y los cítricos lo
aumentan. Además, en los niños usualmente es alcalina, relacionado con el
consumo de leche.
Interpretación de la prueba
Valores de referencia: 4,8 a 7,4 a lo largo del día y 5,5 a 6,5 en la orina de la
primera muestra de la mañana.
Una de las principales funciones del riñón es mantener el equilibrio ácido-base del
organismo, de tal manera que el pH sanguíneo se mantenga estable. En términos
generales, a excepción de los pacientes con acidosis tubular renal, el pH de la
orina refleja el pH sérico. La incapacidad para acidificar la orina a un pH menor de
5.5, a pesar de un ayuno prolongado y de la administración de una carga de ácido,
es considerado como el sello característico de la acidosis tubular renal.

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En la acidosis tubular renal tipo I (distal), el pH sérico es ácido pero la orina es


alcalina, esto es secundario a la incapacidad de secretar los protones en la orina.
La acidosis tubular renal tipo II (proximal) se caracteriza por una incapacidad en la
absorción del bicarbonato. Esta situación produce la orina alcalina inicialmente,
pero como la carga de filtración de bicarbonato disminuye, la orina se torna más
ácida
Utilidad clínica
El pH de la orina es útil en la evaluación del estado ácido-básico de un
determinado paciente, por ejemplo: Pacientes pH < 7 debido a una acidosis
metabólica por ayuno prolongado, acidosis diabética, insuficiencia renal, acidosis
tubular renal, algunas sustancias químicas y medicamentos (salicilatos,
etilenglicol, alcohol, biguanidas, anfotericina, espironolactona, AINES) o a una
acidosis respiratoria por retención de CO2, como puede ocurrir en pacientes con
enfisema. Pacientes con pH > 7 debido a alcalosis metabólica por deficiencia
grave de potasio, ingestión excesiva de álcalis, diuréticos y vómito o a alcalosis
respiratoria por hiperventilación. El pH de la orina también es de utilidad en el
diagnóstico y manejo de las infecciones y cálculos del tracto urinario. La orina
alcalina en un paciente con infección del tracto urinario sugiere la presencia de un
organismo que degrada la urea, la cual puede estar asociada con cristales de
fosfato de amonio y magnesio que pueden formar cálculos coraliformes. Los
valores de pH reiteradamente alcalinos evidencian una infección del tracto
urogenital, a pesar de la disminución de la vida de los leucocitos. Los cálculos de
ácido úrico están asociados con la acidificación de la orina.
Resultados falsos positivos o negativos
Si la muestra no se procesa en el tiempo adecuado, la orina puede tornarse
alcalina como consecuencia de la descomposición bacteriana de la urea y en este
caso la determinación del pH carecería de valor diagnóstico.
Limitaciones de la prueba
El pH urinario puede modificarse según los hábitos nutricionales del individuo: las
proteínas animales y las frutas ácidas acidifican la orina y las dietas vegetarianas y
ricas en citrato la alcalizan. Cuando el pH urinario se encuentra en extremos, alto
o bajo, puede haber destrucción prematura de leucocitos y eritrocitos, lo que
explica la combinación de resultados negativos en el sedimento con una reacción
positiva para alguna de estas células en la tira.

Leucocitos
Principio de la prueba
La tira tiene una zona que contiene un éster de indoxilo que es disociado por la
esterasa leucocitaria. El indoxilo libre reacciona con una sal de diazonio para
formar una tinción violeta, que el lector de tiras detecta. En la Figura 2 se
esquematiza el principio sobre el cual se basa la prueba:

Interpretación de la prueba
Valores de referencia: negativo (menos de10 leucocitos por µL).

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Los leucocitos excretados en la orina son casi exclusivamente granulocitos


(polimorfonucleares neutrófilos y eosinófilos) y la tira reactiva detecta su presencia
mediante la actividad de la esterasa que poseen. La prueba de esterasa detecta la
presencia de leucocitos a niveles tan bajos como 5 células por campo de alta
resolución, tanto íntegras como lisadas, situación que explica por qué un resultado
positivo en la tira puede ser negativo para leucocitos en el sedimento.

Utilidad clínica
La leucocituria puede deberse a causas infecciosas y/o inflamatorias como
cálculos, tumores, enfermedades sistémicas, malformaciones, medicamentos y
trastornos irritativos adyacentes
La prueba de estearasa leucocitaria cuando se compara con el microscopio tiene
una sensibilidad y especificidad de 80% y 70% respectivamente.

Los microorganismos como Chlamydia y Ureaplasma urealyticum se deben


considerar en pacientes con piuria y con cultivos negativos. Dentro de las causas
de piuria estéril se incluyen la balanitis, la uretritis, la tuberculosis, los tumores de
vejiga, las infecciones virales, la nefrolitiasis, los cuerpos extraños, el ejercicio, la
glomerulonefritis y el uso de corticoesteroides y de ciclofosfamida.

Resultados falsos positivos


Se pueden presentar por contaminación de la muestra con secreciones vaginales
o uretrales.
Resultados falsos negativos
Cuando en la muestra de orina hay grandes cantidades de albúmina, ácido
ascórbico y glucosa, así como cuando la gravedad específica está muy elevada.
También puede presentarse en pacientes con neutropenia.

Interferencia con medicamentos


Se pueden dar resultados falsos negativos en pacientes que consumen cefalexina,
cefalotina, nitrofurantoina, gentamicina, tetraciclinas y ácido oxálico
(especialmente en tomadores de «té helado»). Medicamentos como imipenem,
meropenem y ácido clavulánico pueden inducir resultados falsos positivos. Las
bacterias, las trichomonas o los eritrocitos presentes en la orina no afectan la
reacción de forma significativa.
Limitaciones de la prueba
Aún con piuria al microscopio, la esterasa leucocitaria es un mal predictor de
urocultivo positivo.

Nitritos
Principio de la prueba
La prueba se basa en el principio del ensayo de Griess y es específica para el
nitrito. La reacción revela la presencia de nitrito y por lo tanto, indirectamente, la
existencia de bacterias formadoras del mismo en la orina, coloreando el tampón
de la prueba de color rosa rojizo, que el analista mediante una tabla de
comparación puede leer o el lector de tiras detectar para determinar la presencia

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de nitritos en la orina. En la Figura 3 se esquematiza el principio sobre el cual se


basa la prueba.

Interpretación de la prueba
Valores de referencia: negativo. Los nitritos normalmente no se encuentran en la
orina, se producen cuando las bacterias reducen los nitratos urinarios a nitritos. La
mayoría de los organismos Gram negativos y algunos Gram positivos son capaces
de realizar esta conversión, por lo que un resultado positivo indica que estos
microorganismos están presentes en una cantidad considerable (más de 10.000
por mL)

Utilidad clínica de la prueba


La prueba es muy específica pero poco sensible, por lo que un resultado positivo
es útil, pero un resultado negativo no descarta una infección del tracto urinario. La
detección de nitrito es específica de la presencia de bacteriuria y en todos los
casos debe ser confirmada por un cultivo. Un resultado de nitrito negativo no
excluye una infección del tracto urinario porque el recuento bacteriano y el
contenido de nitratos pueden variar ampliamente, o la bacteria presente en la orina
puede no contener la enzima reductasa, que convierte el nitrato a nitrito16.

Resultados falsos negativos


La prueba puede dar un resultado falso negativo por una de las siguientes
circunstancias:
(1) Presencia de microorganismos que no reducen los nitratos, como puede ocurrir
con Streptococcus faecalis y otros cocos Gram negativos, Neisseria gonorrhoeae
y Mycobacterium tuberculosis.
(2) Bajo nivel de nitrato en la orina como resultado de una dieta baja en nitratos.
(3) Inadecuada retención de orina en la vejiga. Se necesita que la orina
permanezca por más de 4 horas para que el nitrato se convierta en nitrito, motivo
más para preferir la primera orina de la mañana.
(4) Almacenamiento prolongado de la muestra a temperatura ambiente en el
laboratorio clínico, situación que puede llevar a degradar los nitritos presentes
originalmente en la muestra de orina.
(5) Cuando hay aumento de la diuresis con evacuación frecuente de orina de tal
manera que no se da tiempo para que se produzca la reacción, cuando la dieta es
pobre en vegetales, cuando se está en ayunas y el estudio se hace en una
muestra diferente a la primera de la mañana o cuando se está recibiendo
alimentación parenteral.
(6) La presencia de altos niveles de ácido ascórbico en la orina que puedan inhibir
la conversión de nitratos en nitritos.
(7) Cuando se está recibiendo tratamiento con antibióticos que pueden reducir
significativamente la carga de bacterias hasta niveles no detectables.
Resultados falsos positivos

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Los nitritos pueden tener resultados falsos positivos cuando hay contaminación
bacteriana, si se realiza varias horas después de tomada la muestra o el paciente
recibe tratamiento con medicamentos que contienen fenazopiridina.

Limitaciones de la prueba
El reactivo para nitritos es sensible al contacto con el aire, por lo que los
recipientes se deben cerrar inmediatamente se retire una tira de uroanálisis.
Después de una semana de exposición, una tercera parte de las tiras pueden dar
resultados falsos positivos y después de dos semanas, las tres cuartas partes,
circunstancia que frecuentemente pasa inadvertida en laboratorios clínicos con
baja carga de trabajo.

Proteínas
Principio de la prueba
La prueba se basa en el denominado error de proteína de los indicadores de pH.
En la zona de reacción de la tira hay una mezcla tampón y un indicador que
cambia de color amarillo a verde en presencia de proteínas en la orina, aunque el
pH se mantenga constante. Estos cambios cromáticos pueden ser detectados por
el lector de tiras para determinar la presencia de proteínas en la orina. La reacción
es particularmente sensible a la albúmina, siendo positiva a partir de
concentraciones de albúmina mayores de 6 mg/dL. En la Figura 4 se esquematiza
el principio sobre el cual se basa la prueba:

Interpretación de la prueba
Valores de referencia: negativo (< 10 mg/dL).

En personas sanas, la pared capilar glomerular es permeable sólo a sustancias


con un peso molecular menor de 20.000 daltons. Una vez filtradas, las proteínas
de bajo peso molecular son hidrolizadas, reabsorbidas y metabolizadas por las
células tubulares proximales. Entre las proteínas urinarias normales se incluyen la
albúmina, las globulinas séricas y las proteínas secretadas por los túbulos renales.
El uroanálisis por tira presenta una sensibilidad y especificidad mayor del 99%
para detectar la albuminuria 20. La proteinuria, uno de los aspectos más
característicos de la enfermedad renal, es definida como la excreción urinaria de
proteínas mayor de 150 mg por día. La microalbuminuria se define como la
excreción de 30 a 150 mg de proteína por día y es un signo de enfermedad renal
temprana, particularmente en los pacientes diabéticos. En todos los casos en
donde la tira es positiva para proteínas se debe realizar proteinuria de 24 horas.
Desde el punto de vista práctico, la proteinuria detectada por la tira reactiva
cualitativamente, en cruces, se correlaciona cuantitativamente en la siguiente
escala: 1+ (una cruz) corresponde aproximadamente a 30 mg/dL de proteína, ++
corresponden a 100 mg/dL,+++ a 300 mg/dL y ++++ a 1.000 mg/dL14.

Causas más frecuentes de proteinuria

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Proteinuria normal Albúmina 35mg/24 horas


Proteína de Tamm-Horsfall 50mg/24 horas
ProteinuriaPrerrenal
Insuficiencia cardiaca congestiva transitoria, asociada con estados febriles,
cirugía, anemia, hipertiroidismo, evento cerebrovascular, ejercicio ó convulsiones
Proteinuria de Bence Jones asociada con mieloma, macroglobulinemia de
Waldenström, amiloidosis (proteinuria de cadenas ligeras)
Proteinuria ortostática
Lisozima asociada con leucemia mielocítica
Proteinuria renal Hipertensión renovascular
Hipertensión maligna de cualquier causa
Proteinuria glomerular >3,5 g/24 horas usualmente refleja una lesión glomerular
(en niños >1g/m2/día)
Nefropatía membranosa y glomerulonefritis proliferativa
Pielonefritis crónica, Poliquistosis renal , Nefropatía diabética
Amiloidosis, Lupus eritematoso, Síndrome de Goodpasture
Trombosis de las venas renales, Nefropatía de cambios Mínimos,
Glomeruloesclerosis focal segmentaria, Nefropatía por VIH, Síndrome de Alport,
Preeclampsia, Proteinuria de alto peso molecular Tubular, usualmente <1g/24
horas
Síndrome de Fanconi, Enfermedad de Wilson, Acidosis tubular renal, Intoxicación
por metales pesados,
Galactosemia, Proteinuria de bajo peso molecular, Beta2- microglobulinemia
Intersticial Pielonefritis bacteriana, Depósitos de ácido úrico, uratos o calcio,
Reacción idiosincrásica a drogas,
Enfermedad intersticial (manifestada generalmente como defectos tubulares o
enfermedad tubular mixta)
Proteinuria Posrrenal
Tumores de la vejiga o la pelvis renal < 1g/24 horas, excreción de IgM, la cantidad
de la proteinuria se relaciona con el tamaño y la extensión del tumor
Cistitis severa

Utilidad clínica
Es importante aclarar que la presencia de proteínas en orina no constituye una
prueba de nefropatía, ni su ausencia la excluye. En todos los casos en que se
encuentre en la orina, o se sospeche clínicamente, se deberán realizar los
estudios complementarios y establecer un diagnóstico diferencial adecuado,
considerando las siguientes posibilidades: proteinuria benigna, proteinuria
extrarrenal, proteinuria renal y proteinuria posrenal, como se analiza en la lista
anterior.

Proteinuria transitoria
La proteinuria transitoria, mal llamada benigna, constituyen el 90% de las
proteinurias detectadas en personas menores de 30 años. Las proteinurias
benignas se manifiestan de forma intermitente.

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Mientras que en la orina matinal la excreción de proteína es normal (tira negativa),


pueden observarse valores que alcanzan los 500 mg/dL a lo largo del día.
Basándose en esta característica, la proteinuria benigna se distingue fácilmente de
la forma patológica repitiendo el análisis de la orina de la primera hora de la
mañana. Si la proteinuria es benigna, los resultados de otros análisis de la orina
para detectar nitritos, sangre y leucocitos en la orina, y la medición de la presión
sanguínea, serán normales. Sin embargo, si se diagnostica una proteinuria
benigna, es prudente establecer un control periódico a fin de detectar a tiempo el
posible desarrollo de una neuropatía.

Proteinuria renal
El aumento de la permeabilidad de los capilares glomerulares debido a procesos
patológicos provoca proteinuria renal. Por lo general, las proteinurias de origen
renal son persistentes y se observan tanto en la orina nocturna como en la diurna
y, en general, el nivel supera los 25 mg/dL. Las proteinurias más pronunciadas se
detectan en pacientes con síndrome nefrótico. En la glomerulonefritis, la excreción
de proteína suele ser de 200 a 300 mg/dL,
pero puede haber valores inferiores en el caso de glomerulonefritis asociada con
pocos síntomas. La proteinuria tubular puede estar relacionada con lesiones de las
células tubulares y/o a trastornos de la absorción tubular de las proteínas del
filtrado glomerular.
Proteinuria posrenal
La proteinuria posrenal puede manifestarse como consecuencia de una
inflamación de la vejiga o de la próstata y en hemorragias en el tracto urinario.

Limitaciones de la prueba
Resultados falsos positivos
La prueba de tira aún frente a pequeñas cantidades de proteínas puede dar
resultados falsos positivos con concentraciones tan bajas como 5 ó 10 mg/dL (más
bajo que el umbral límite para la proteinuria clínicamente significativa). Además,
puede haber un resultado falso positivo tras la infusión de polivinilpirrolidona
(sustituto de la sangre), ciertos antibióticos como quinolonas y derivados de
quinina 17,18 y en presencia de desinfectantes que contengan grupos de amonio
cuaternario o clorhexidina, en los recipientes utilizados para tomar o manejar la
muestra.
Resultados falsos negativos
Los reactivos de la mayoría de las pruebas de tira son sensibles a la albúmina
pero no detectan bajas concentraciones de gammaglobulinas ni de proteína de
Bence-Jones.

Interferencia con medicamentos


La fenazopiridina puede dar un resultado falso positivo. La quinina, la quinidina, la
cloroquina, la tolbutamida, las sulfonamidas y la penicilina pueden afectar
ligeramente la reacción y falsearla dando origen a resultados falsos positivos o
falsos negativos.

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Glucosa
Principio de la prueba
La detección de la glucosa se basa en una reacción específica de la glucosa
oxidasa/peroxidasa (método GOD/POD), en la cual la D-glucosa se oxida
enzimáticamente por el oxígeno del aire y se convierte en Dgluconolactona.
El peróxido de hidrógeno resultante oxida, bajo la catálisis de la peroxidasa, al
indicador (TMB: tetra-metil-bencidina) para dar una coloración azul-verdosa sobre
el papel amarillo reactivo de la tira. La reacción es específica para glucosa y no
depende del pH ni de la gravedad específica de la orina, ni se ve afectado
significativamente por la presencia de cuerpos cetónicos. En la Figura 5 se
esquematiza el principio sobre el cual se basa la prueba.

Interpretación de la prueba
Valores de referencia: negativa (< 30 mg/dL). Normalmente la glucosa es filtrada por el glomérulo,
pero ésta es reabsorbida casi completamente en el túbulo proximal. La glucosuria ocurre cuando la
carga de glucosa filtrada excede la capacidad de reabsorción del túbulo, es decir 180 mg/dL .

Utilidad clínica
Entre las diferentes causas de glucosuria están la diabetes mellitus, el síndrome
de Cushing, la enfermedad pancreática, las enfermedades hepáticas y el síndrome
de Fanconi. La ausencia de glucosuria no excluye un trastorno del metabolismo de
la glucosa y sobretodo, no excluye el diagnóstico de diabetes mellitus.

Glucosuria renal
Si el umbral renal se ha reducido notablemente debido a una disminución de la
reabsorción de glucosa a nivel de los túbulos renales, se observará un aumento de
la excreción de glucosa por la orina, aunque la glucosa en sangre sea normal. La
glucosuria que se observa frecuentemente durante el embarazo (en el 5% a 10%
de los casos) también se debe, por lo general, a una reducción del umbral renal.
Este tipo de glucosuria desaparece tras el parto. La glucosuria renal sintomática
se produce cuando la función renal se reduce a un 30% o menos. Este tipo de
diabetes mellitus se observa también en la insuficiencia renal aguda.

Glucosuria alimentaria
Puede ocurrir por una ingestión excesiva de hidratos de carbono, en ausencia de
diabetes mellitus o de algún tipo de daño renal.

Limitaciones de la prueba
La medición de rutina de la glucosuria con las tiras convencionales puede ser
mejorada con el uso de tiras especialmente diseñadas para controlar la glucosa en
la orina de pacientes diabéticos (Diabur-test 5000 y Keto- Diabur-test 5000), con
intervalos de medición del campo de la glucosa más amplio si se le compara con
el de las tiras convencionales, permitiendo una exacta diferenciación del contenido
mínimo de glucosa en la orina.

Resultados falsos positivos

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La presencia de restos de detergentes que contengan peróxido de hidrógeno u


otros oxidantes fuertes en los recipientes utilizados para tomar o manejar la
muestra, puede inducir resultados falsos positivos.
Resultados falsos negativos
Las primeras tiras daban resultados falsos negativos por interferencia con vitamina
C (ácido ascórbico) en la orina, situación que en las tiras reactivas disponibles en
la actualidad está completamente controlada.

Interferencia con medicamentos


La prueba puede ser influenciada, aunque levemente, por productos de
degradación de los salicilatos

Cuerpos Cetónicos
Principio de la prueba
La prueba se basa en el principio de la prueba de Legal. El ácido acetoacético y la
acetona reaccionan con nitroprusiato sódico y glicina en un medio alcalino para
formar un complejo color violeta, que el lector de tiras detecta para determinar la
presencia de cetonas en la orina. La reacción es específica para el ácido
acetoacético y la acetona. No es interferida por el ácido betahidroxibutírico ni por
la presencia de glucosa, proteínas y ácido ascórbico en la muestra.

Interpretación de la prueba
Valores de referencia: negativo (< 5 mg/dL). Las cetonas (ácido acetoacético,
beta-hidroxibutírico y acetona) aparecen en la orina cuando en el organismo se
produce un aumento de la degradación de las grasas por un aporte energético
insuficiente de hidratos de carbono. El predominio de la lipólisis sobre la
lipogénesis produce un aumento de los niveles de ácidos grasos libres en el suero
y, por su descomposición en el hígado, se forma más acetilcoenzima A, que puede
ser utilizada por otros procesos metabólicos como el ciclo del ácido tricarboxílico.
Este exceso se convierte en ácido acetoacético, que a su vez se transforma
parcialmente en ácido betahidroxibutírico y acetona.

Utilidad clínica
Desde el punto de vista clínico, la detección de cetonuria, sin ser exclusiva, es
particularmente útil en los pacientes con diabetes mellitus. La cetonuria se
encuentra muy asociada a la diabetes descompensada, pero también puede
ocurrir durante el embarazo, debido a dietas libres de carbohidratos, a
deshidratación, ayuno, inflamación intestinal e hiperémesis.

Cetonuria en la diabetes mellitus


La detección de las cetonas en la orina (ácido acetoacético y acetona) es
especialmente importante en la diabetes mellitus para comprobar la
descompensación metabólica. Los estados precomatosos y comatosos en la
diabetes, a excepción del coma hiperosmolar, casi siempre van acompañados de
cetoacidosis. La carencia relativa o total de insulina reduce el consumo de glucosa

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de las células grasas y musculares, provocando un aumento de la lipólisis. Las


cetonas resultantes, en combinación con otros cambios fisiopatológicos de la
descompensación metabólica (como la deshidratación y el desplazamiento de
electrólitos), pueden contribuir al coma diabético. El coma diabético es un estado
de riesgo para la vida y la cetonuria es un signo precoz del desequilibrio
metabólico. Los diabéticos deben estar en capacidad de comprobar los cuerpos
cetónicos de su orina de forma regular. En la diabetes insulinodependiente y en la
juvenil, en las que el coma puede manifestarse en pocas horas, la comprobación
de los cuerpos cetónicos en la orina debería formar parte del autocontrol, por el
paciente, junto con la comprobación de la glucosuria.

Cetonuria de origen no diabético


La presencia de cetonas en la orina no es exclusivo de la diabetes mellitus.
También se puede encontrar en los siguientes casos:
(1) Estados de carencia de alimentos (ayuno prolongado), en dietas de
adelgazamiento bajas en hidratos de carbono o por una alimentación rica en
proteínas.
(2) Pacientes que llevan dietas de ayuno total. Sin embargo el equilibrio
ácido/base sigue totalmente compensado si se garantiza una buena función renal
con suficiente ingestión de líquidos. En estos casos, la comprobación de las
cetonas también sirve para controlar el cumplimiento de la dieta.
(3) Niños pequeños con vómitos acetonémicos.
(4) Pacientes con fiebre, especialmente en presencia de enfermedades
infecciosas.
(5) Pacientes con vómitos incoercibles del embarazo (hiperémesis gravídica).
(6) Pacientes con algunas alteraciones metabólicas congénitas (síndrome de
Fanconi).
Interferencia con medicamentos.
El captopril, la mesna (sal sódica del ácido 2-mercaptoetanosulfónico) y otras
sustancias con grupos sulfhidrilo pueden producir resultados falsos positivos.

Urobilinógeno
Principio de la prueba
Una sal de diazonio estable, p-metoxibenceno diazoniofluoborato presente en la
tira reactiva, reacciona casi inmediatamente con el urobilinógeno, dando lugar a la
formación de un colorante azoico rojo.

Interpretación de la prueba
Valores de referencia: negativo (<1 mg/dL). Normalmente la orina contiene sólo
pequeñas cantidades de urobilinógeno, producto final de la bilirrubina conjugada
luego de haber sido excretada por los conductos biliares y metabolizada en el
intestino por la acción de las bacterias allí presentes.
El urobilinógeno es reabsorbido a la circulación portal y eventualmente una
pequeña cantidad es filtrada por el glomérulo. La prueba de tira es específica para
el urobilinógeno y no se afecta por los factores interferentes como ocurre en la
prueba de Ehrlich.

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Utilidad clínica
El urobilinógeno se encuentra aumentado en la orina de pacientes con
enfermedades hepatocelulares y en las anemias hemolíticas. La presencia de
urobilinógeno en orina es un indicador temprano de daño del parénquima
hepático, usualmente antes de que se presenten manifestaciones clínicas. Es
importante reconocer que la excreción del urobilinógeno tiene variación diurna,
una razón más para estandarizar la muestra a la primera de la mañana.
Resultados falsos negativos
Se pueden presentar resultados falsos negativos cuando el paciente recibe
antibióticos por vía oral, debido a que éstos disminuyen significativamente el
número de bacterias que degradarían la bilirrubina en la luz intestinal, cuando hay
suspensión de la colepoyesis (estimulación de la producción de bilis) en el hígado
por ejemplo en hepatitis viral severa y lesiones hepatotóxicas graves o cuando hay
una obstrucción de los conductos biliares, debido a que en este caso la bilirrubina
no pasaría al tracto digestivo.
También se presentan resultados falsos negativos cuando la muestra se procesa
más allá del tiempo óptimo, debido a la oxidación del urobilinógeno expuesto a la
luz y cuando la orina es conservada con formaldehído a una concentración mayor
de 200 mg/dL12.

Resultados falsos positivos


El pH alcalino de la orina aumenta la depuración del urobilinógeno y aumenta la
cantidad del urocromo en la orina.

Interferencia con medicamentos


La presencia en orina de sulfonamidas, PABA (ácido para-amino benzoíco) y/o
ácido para-aminosalicílico puede dar resultados falsos positivos para
urobilinógeno. Otros fármacos como la fenazopiridina, por interferencia
colorimétrica por teñir la orina de color rojo o ser de color rojo en el medio ácido
donde se desarrolla la prueba, pueden dar resultados falsos positivos.

Bilirrubina
Principio de la prueba
La prueba se basa en la unión de la bilirrubina con una sal de diazonio estable ( el
2,6-diclorobencenodiazoniofluoborato) en medio ácido del papel reactivo. La más
leve coloración rosada indica un resultado positivo, que el analista mediante una
tabla de comparación puede leer o el lector de tiras detectar.

Interpretación de la prueba y utilidad clínica


Valores de referencia: negativo (< 0,2 mg/dL).

Las reacciones que se presentan en la tira son muy sensibles y pueden detectar
cantidades tan pequeñas como 0,05 mg/dL de bilirrubina en la orina. La bilirrubina
conjugada es soluble en agua y en consecuencia puede encontrarse en la orina de
pacientes con ictericia obstructiva, daño hepático y cáncer de páncreas o de
conductos biliares, en tanto que la bilirrubina no conjugada, la que resulta de

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procesos hemolíticos, es insoluble en agua y no pasa a través del glomérulo y por


lo tanto no aparece en la orina. Por consiguiente, en ictericias hereditarias, como
en la enfermedad de Dubin-Johnson y en el síndrome de Rotor es positiva y es
negativa en el síndrome de Gilbert y en la enfermedad de Crigler-Najjar. Además
de lo anterior, al momento de interpretar una prueba de bilirrubina en la orina es
importante tener en cuenta que la prueba, como tamizaje, tiene una especificidad
del 79% al 89% y un valor predictivo positivo del 89%, en pacientes con falla renal
grave la excreción renal de la bilirrubina aumenta y en todos los casos en donde la
bilirrubina en orina sea detectada por las tiras reactivas ésta debe confirmarse con
medición en suero.

Resultados falsos negativos


Se pueden presentar frente a grandes cantidades de ácido ascórbico y nitritos en
la orina. También por la inestabilidad del analito, cuando la orina se procesa
después de varias horas de exposición a la luz en las mesas del laboratorio.
Resultados falsos positivos
En caso de que la orina se contamine con materia fecal puede obtenerse un
resultado falso positivo. Además, por medicamentos que tiñen la orina o que se
tornan rojos en contacto con un medio ácido, como la fenazopiridina.

Interferencia con medicamentos


Algunos medicamentos como el ácido mefamánico, la clorpromacina, la
rifampicina y el etodolaco reaccionan con los sustratos de la prueba y otros como
la fenazopiridina (Pyridium), el hidrocloruro de etoxasene y algunos metabolitos de
anestésicos locales cambian el color de la orina, dando origen a resultados falsos
positivos para la bilirrubina.

Sangre
Principio de la prueba
La prueba detecta sangre completa (eritrocitos), sangre lisada (hemoglobina) y
mioglobina. Para lograr el objetivo, la prueba se basa en la acción peroxidativa de
la hemoglobina o la mioglobina (actividad pseudoperoxidasa) que cataliza la
oxidación del indicador cromático (TMB: tetra-metil-bencidina) mediante un
hidroperóxido orgánico, el 2,5-dimetilhexano-2,5-dihidroperóxido, para producir un
color azul verdoso sobre el papel amarillo de la tira, que el lector de tiras detecta
para determinar la presencia de hemoglobina (en forma de eritrocitos o
hemoglobina libre) o mioglobina en la orina. En las zonas de reacción, de acuerdo
al patrón de coloración es posible distinguir eritrocitos intactos de hemolisados.
Los eritrocitos intactos se hemolisan sobre el papel reactivo y la hemoglobina
liberada inicia la reacción de color, formando puntos verdes visibles y por el
contrario, la hemoglobina disuelta en la orina (eritrocitos lisados), o la mioglobina,
origina un color verde uniforme.

Esta actividad desaparece en pocos días y es sensible a varios conservantes.


La sensibilidad de la prueba (70-80%) se consigue mejorar añadiendo un activador
al reactivo. En algunas de las marcas disponibles comercialmente, se ha eliminado
el riesgo de interferencia con ácido ascórbico mediante una malla impregnada con

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yodato que cubre el papel reactivo oxidado por el ácido ascórbico presente en la
muestra. Otras tiras que no tienen este recurso, usualmente incorporan un
compartimiento adicional que reacciona con el ácido ascórbico.

Interpretación de la prueba
Valores de referencia: negativo (0 a 3 eritrocitos por mL). La prueba de la tira
detecta la actividad peroxidasa de los eritrocitos. Sin embargo, la mioglobina y la
hemoglobina también pueden catalizar esta reacción, por lo que un resultado
positivo de la prueba puede indicar hematuria, hemoglobinuria o mioglobinuria.

Utilidad clínica
De acuerdo con la Asociación Americana de Urología, se acepta como definición
de hematuria la presencia de tres o más eritrocitos por campo de alto poder en
dos o tres muestras de orina. La visualización de eritrocitos intactos en el examen
microscópico del sedimento urinario puede diferenciar la hematuria de otras
condiciones.
El examen microscópico también puede detectar cilindros eritrocitarios o eritrocitos
dismórficos5. De acuerdo con el origen, la hematuria se subdivide en glomerular,
renal o no glomerular y de etiología urológica. Desde el punto de vista clínico, la
hematuria puede presentarse por una de estas tres situaciones: por daño
glomerular (hematuria glomerular), por daño renal no glomerular (hematuria renal)
o por sangrado en otras zonas del tracto urinario diferentes al riñón (hematuria
urológica) o en condiciones fisiológicas como la menstruación o el ejercicio
extenuante5. En la siguiente tabla (Tabla 8) se apuntan, las diferentes causas de
hematuria y cómo el uroanálisis permite sospechar su origen.

Causas de hematuria
Daño glomerular
La hematuria glomerular típicamente está asociada con proteinuria significativa,
cilindros eritrocitarios y eritrocitos dismórficos. Sin embargo, hasta el 20% de los
pacientes con glomerulonefritis Diagnosticsada por biopsia se presentan sólo con
hematuria.

Daño renal no glomerular


La hematuria no glomerular es secundaria a trastornos tubulointersticiales,
renovasculares o metabólicos. Similar a la hematuria glomerular, ésta
frecuentemente se encuentra asociada con proteinuria significativa; sin embargo,
no está asociada con eritrocitos dismórficos o cilindros eritrocitarios. Esta indicada
la evaluación más amplia de los pacientes con hematuria glomerular y no
glomerular determinando la proteinuria en orina de 24 horas o la relación de
albúmina y creatinina.

Urológica
Las causas urológicas de hematuria incluyen los tumores, los cálculos y las
infecciones. La hematuria urológica se diferencia de otras hematurias por la
ausencia de proteinuria significativa, eritrocitos dismórficos y cilindros eritrocitarios.
Aún en hematurias significativas, la concentración de proteínas se elevará solo

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hasta 2 ó 3 cruces en la prueba de la tira. Hasta el 20% de los pacientes con


hematuria franca tienen malignidad del tracto urinario, por lo que esta indicado en
estos pacientes el solicitar cistoscopia y prueba de imagen del tracto urinario
superior.

Entre los pacientes con hematuria microscópica asintomática (sin proteinuria o


piuria), del 5% al 22% tendrán una enfermedad urológica seria y del 0,5% al 5%
tendrán una enfermedad maligna del tracto genitourinario. La hematuria inducida
por el ejercicio es relativamente común, esta es una condición benigna que
frecuentemente está asociada con ejercicios de largas distancias. Los resultados
de uroanálisis repetidos 48 a 72 horas después de los iniciales, deben ser
negativos en los pacientes con esta condición

mioglobinuria
Como se ha expresado, además de los eritrocitos la prueba detecta hemoglobina
libre (hemoglobinuria) y mioglobina (mioglobinuria) en la orina. Cuando hay
hemoglobinuria la tira es reactiva, usualmente con una coloración verde uniforme,
y en el sedimento no se observan eritrocitos. Las tiras reactivas detectan la
presencia de hemoglobina libre en la orina a partir de 100 mg/dL y de mioglobina a
partir de 15 a 20 mg/dL. La hemoglobinuria o mioglobinuria se presentan en
anemia hemolítica severa, intoxicaciones graves, enfermedades infecciosas
graves, uemaduras extensas, ejercicio físico intenso, lesiones musculares y
enfermedades musculares progresivas. También se puede presentar mioglobinuria
en pacientes con rabdomiolisis (por medicamentos como las estatinas, alcohol,
abuso de cocaína ó en el síndrome neuroléptico maligno), necrosis muscular
(síndrome de Crush) ó con polimiositis. En la tabla se resumen las principales
causas de hemoglobinuria

Resultados falsos positivos


Cuando en la orina hay restos de detergentes procedentes de los recipientes
utilizados para la recolección de la muestra.

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CRISTALURIA

La cristaluria es un marcador de sobresaturación urinaria con sustancias derivadas de


desórdenes metabólicos, enfermedades hereditarias o medicamentos. El protocolo para la
investigación de una cristaluria incluye primeramente una muestra de orina adecuada, una
medición adecuada del pH, un análisis e interpretación bien comprendido de las especies
cristalinas presentes, su morfología, su cantidad y su tamaño.

La cristaluria es un hallazgo frecuente en sujetos sanos y en pacientes que sufren de


litiasis de diferentes orígenes. Su estudio es útil para:
 El diagnóstico de enfermedades litógenas heredadas, como hiperoxaluria o
cistinuria
 La identificación de cristales de medicamentos que pueden causar daño renal o la
formación de cálculos
 La investigación de desórdenes metabólicos asociados a la formación de cálculos
 El monitoreo de la tendencia a la recurrencia en pacientes formadores de cálculos
(Daudon)

BASES TEÓRICAS

Un Cristal es una porción homogénea de materia con una estructura atómica ordenada y
definida y con forma externa limitada por superficies planas y uniformes simétricamente
dispuestas.

En la cristalización, las partículas, sean iones o moléculas que se encuentran dispersos


en un disolvente en fase líquida, van unirse formando una red ordenada y periódica,
separándose de la capa de moléculas del disolvente que las rodea para formar una
nueva fase sólida con tendencia a depositarse por gravedad.

Las partículas en el cristal se colocan ordenada y periódicamente dispuestas a distancias


uniformes, (a las distancias se les llama “traslaciones”) y en ángulos fijos y definidos.

SIMETRÍA

Muchas de las formas geométricas que aparecen en el estado cristalino es ser

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La relación de las distancias y ángulos entre las partículas puede definir las siguientes
redes en dos dimensiones:

Si se toma en cuenta la tercera dimensión para obtener las posibles relaciones entre
distancias y ángulos se obtienen 6 Sistemas Cristalinos, caracterizados por la posición y
la longitud de sus ejes, que son líneas que pasan por el centro e intersectan todas sus
caras:

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NUCLEACIÓN

La nucleación implica la formación de una masa cristalina mínima capaz de seguir


creciendo (núcleo) y es, sin duda, la etapa inicial y la más importante en el proceso de
cristalización.

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Una Dispersión llega a la sobresaturación cuando las moléculas de soluto superan la


cantidad de moléculas de disolvente necesarias para separarlas, rodearlas y mantenerlas
en solución (solvatarlas). Si la cantidad de moléculas de soluto aumenta, o la cantidad de
moléculas de disolvente disminuye o determinadas condiciones como el pH y la
temperatura permiten la atracción, las moléculas o iones del soluto comienzan a reunirse
formando pequeños racimos que aumentan la concentración local del soluto formando
partículas cristalinas mínimas llamadas gérmenes.

En el seno de la disolución, las micropartículas chocan entre ellas y se agregan de


manera que aquellos agregados de tamaño inferior a cierto valor crítico son inestables y
se desintegran, en cambio aquellos de tamaño superior al crítico son estables y
precipitan, formándose así, la partícula mínima capaz de seguir creciendo. La nucleación
puede ser básicamente de dos tipos: homogénea y heterogénea.

NUCLEACIÓN HOMOGÉNEA

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En la nucleación homogénea, la partícula mínima está constituida por las mismas


especies que van a constituir el futuro cristal. Este tipo de nucleación es un proceso difícil
y poco probable que necesita una sobresaturación muy elevada.

NUCLEACIÓN HETEROGÉNEA
La nucleación heterogénea es mucho más sencilla que la homogénea, ya que exige
únicamente la presencia de partículas sólidas que sean capaces de atraer y retener en su
superficie las especies que van a constituir el futuro cristal. En este caso, el núcleo
presenta una composición diferente a la del resto del cristal.

CRECIMIENTO CRISTALINO
El crecimiento cristalino supone la incorporación gradual de las unidades que van a
constituir el futuro cristal sobre las caras del mismo en lugares especialmente favorecidos.

AGREGACIÓN
La agregación puede ser de dos tipos: primaria y secundaria.
AGREGACIÓN PRIMARIA

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La agregación primaria implica la formación de nuevos cristales (cristales hijos) sobre las
caras de los ya existentes (cristales padres). Este tipo de agregación se da con más o
menos facilidad en función de la naturaleza de los cristales de manera que en el caso del
oxalato cálcico éste es un proceso muy favorable.

AGREGACIÓN SECUNDARIA
La agregación secundaria consiste en la unión de cristales ya formados mediante enlaces
débiles. En ocasiones existen sustancias que actúan como puente de unión entre cristal y
cristal favoreciendo dicha unión. La agregación secundaria tiene un papel importante en
aquellos medios donde existe una gran cantidad de cristales (p.e., la litiasis infecciosa o
de fosfatos cálcicos).

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