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Ensayo de Quimioluminiscencia

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ENSAYO DE

QUIMIOLUMINISCENCIA
Reactivos quimioluminiscentes:
Requerimientos:
Fenmeno cuando una reaccin - Luminol
qumica produce una especie - Especie quimioluminiscente
- Lucigenina
excitada electrnicamente o - Oxidante o catalizador enzimtico
transfiere energa - Oxalatos
- Antioxidante o extracto
- Pirogalol

Fundamento: Caractersticas
Basado en la competicin entre los Actividad antioxidante - Sensitivo
antioxidantes y el luminol por el expresada en EC50 - Econmico
perxido de hidrgeno - Robusto
Se emplea una disolucin de En la ltima reaccin se produce el
luminol amortiguada a pH 10, que radical hidrxido (HO ), que reacciona
contiene iones Co(II) con la molcula de luminol,
acomplejados con el ion producindose el anin aminoftalato en
etilendiaminotetraacetato (EDTA). su estado electrnicamente excitado.

Cuando esta molcula excitada regresa a


Esta disolucin se mezcla con otra su estado fundamental produce la
de perborato de sodio a fin de dar emisin de radiacin QL, la cual es
origen a la siguiente secuencia de registrada por el sistema de deteccin.
reacciones:
Si en el medio de reaccin existe,
adems, un compuesto capaz de
reaccionar ms rpidamente con los
radicales HO , debe producirse una
disminucin en la emisin, debido a que
se forma un nmero menor de molculas
de aminoftalato
Existen diferentes rutas de
accin por medio de las
cuales los antioxidantes
pueden inhibir la emisin
QL del luminol.

1. Desactivacin de los
radicales hidroxilos.

2. Los compuestos
antioxidantes tambin
pueden actuar sobre
otras especies reactivas
de oxgeno, evitando la
formacin del
endoperxido, que es
un producto intermedio
necesario para obtener
al aminoftalato
excitado.

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