Agar Bilis Rojo Violeta (Vrba)

AGAR BILIS Y ROJO
VIOLETA (VRBA)
Ananthi Angelica Contreras Vivanco
María Fernanda Capilla Hernández
Nadia Ramírez Cortes
Erick Xavier Escobar Hernández
Eduardo Hernández Rugerio
AGAR BILIS Y ROJO VIOLETA (VRBA)
• Es un medio de cultivo, tanto del tipo
selectivo como diferencial.
• Es utilizado en uno de los procedimientos

para llevar a cabo la detección,
enumeración e identificación presuntiva de
microorganismos coliformes en productos
alimenticios y en lácteos.
AGAR BILIS Y ROJO VIOLETA (VRBA)
• En este medio las colonias de coliformes presentan
una morfología típica que permite su identificación
presuntiva y que debe ser confirmada mediante
reacciones bioquímicas.
• El grupo de bacterias coliformes incluye bacilos

Gram negativos aerobios y anaerobios facultativos
no esporulados, que fermentan la lactosa.
COLIFORMES
• Se caracterizan por ser barras anaerobias
gramnegativas que no forman esporas.
• Definidas por su capacidad para fermentar la lactosa
para producir ácido y / o dióxido de carbono gaseoso.
• Ejemplos de géneros considerados como coliformes
incluyen:
 Citrobacter, Enterobacter, Escherichia y Klebsiella.
• La prueba de Coliformes ofrece una visión más amplia de
los organismos en los ingredientes, los productos
terminados y el entorno de producción en general.
• Los coliformes sirven como "organismos indicadores", y
las pruebas de su presencia en general en lugar de un género
o especie individual pueden significar que existen
condiciones antihigiénicas que pueden albergar organismos
patógenos.
• Si un área de muestra está bajo control, el número de estos
organismos indicadores estaría contenido en cantidades
relativamente pequeñas.
• Algunos Coliformes se han referido históricamente
como Coliformes fecales.
• Pero la terminología más apropiada y actual es la de los

Coliformes termo tolerantes debido a su tendencia a
crecer y fermentar la lactosa a una temperatura
elevada.
• Las pruebas de Coliformes termo tolerantes se

utilizaron una vez para estimar el número de E. coli en
una muestra, algunas E. coli patógenas (especialmente
E. coli O157: H7) no crecen bien a estas temperaturas
elevadas.
COLIFORMES EN AGAR BILIS ROJO-
VIOLETA
• Está formado por cierto número de componentes que
favorecen el crecimiento bacteriano, y por otros componentes
que dotan a este medio de sus características diferenciales y
selectivas.
• Componentes que favorecen el crecimiento bacteriano:
Lactosa (fuente de carbono)
Extracto de levadura (fuente de vitamina B)
Peptona (fuente de nitrógeno y en menor medida de
carbohidrato y vitamina.)
ELEMENTOS SELECTIVOS DEL
MEDIO
• Sales biliares y cristal violeta (ambos
compuestos inhiben en buena medida el
crecimiento de bacterias Gram + ,de modo
que solo se selecciona el crecimiento de
Gram-, grupo bacteriano en el cual se
encuentran las bacterias coliformes, que son las
que se quieren seleccionar en este medio para
su identificación,observación,aislamiento o
recuento.)
ELEMENTOS DIFERENCIALES
DEL MEDIO
• Indicador de pH rojo neutro, cuyo modo de funcionamiento
es el siguiente:
• Las bacterias coliformes son fermentadoras de lactosa, al
crecer en VRBA y fermentar lactosa reducen el PH del
medio de modo que el indicador rojo neutro vira a
rojo/rosado intenso.
• Así ,de las colonias Gram - que han crecido en la placa, las
coliformes, pueden ser diferenciadas de otras colonias Gram
-.
INGREDIENTES
PRECAUSIONES
• Solamente para uso diagnóstico in vitro.
• Utilizar guantes y ropa protectora cuando se
manipula el producto.
• Es una sustancia irritante.
• Solo en el laboratorio puede ser usado. (Uso
profesional).
FUNCIÓN DE LA PEPTONA Y EXTRACTO DE LEVADURA
EN EL AGAR ROJO VIOLETA
En este medio..
• la peptona provee la fuente de carbono y nitrógeno
necesaria para el desarrollo de los microorganismos.
• El extracto de levadura provee vitaminas del complejo
B para estimular el crecimiento bacteriano.
Esquema de crecimiento de
microorganismos coliformes (Lac+) y
no coliformes (Lac-) en VRBA.
• Las sales biliares y el cristal violeta actúan como inhibidores de microorganismos Gram positivos.
• La lactosa es la fuente de carbohidratos y el rojo neutro actúa como indicador para evidenciar el cambio de pH
como consecuencia de la fermentación de la lactosa.
• El agar actúa como agente solidificante.
• Las peptonas son polipéptidos formados durante la degradación enzimática de proteínas.
• Son la principal fuente de nitrógeno en el medio orgánico para el cultivo de bacterias.
• Contienen aminoácidos libres y cadenas cortas de péptidos, y a veces carbohidratos.
• Es soluble en agua e insoluble en etanol y éter.
• El Extracto de levadura es un extracto soluble en agua formado por el
autolisado de células de levaduras.
• Es un producto rico en vitaminas especialmente del complejo B, aminoácidos y
otros factores de crecimiento.
 Es utilizado en microbiología en la preparación de una amplia variedad de

medios de cultivo como excelente fuente de nutrientes.
 También se obtiene como producto residual de la elaboración de la cerveza,
empleándose en la industria de la alimentación frecuentemente como aditivo.
RESULTADOS
• Enterobacter aerogenes.
• Escherichia coli
• Salmonella entérica serotipo Typhimurium
• Proteus mirabilis
• Kiebsiella neumonie
RESULTADOS
• Enterococcus faecalis
• Staphylococcus aureus
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Después de 24h – 48h a 35°C
No. De Colonias Interpretación

0 Ausencia de crecimiento
1 - 10 Contaminación escasa
11 – 20 Contaminación leve
21 – 100 Contaminación fuerte
>100 Contaminación muy fuerte
REFERENCIAS
• Marshall, R. T. (ed.). 1993. Standard methods for the examination of
dairy products, 16th ed. American Public Health
Association,Washington, D.C.
• Vanderzant, C., and D. F. Splittstoesser (eds.). 1992. Compendium of
methods for the microbiological examination of foods, 3 rd ed.
American Public Health Association, Washington, D.C.
• http://www.mcdlab.net/Fichas%20Tecnicas/Agar%20Bilis%20y%20R
ojo%20Violeta.pdf
• https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a298e
3cf31f4.pdf
• www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/Bacteriologi
calAnalyticalmanualBAM/default.htm
.

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• El grupo de bacterias coliformes incluye bacilos

• Pero la terminología más apropiada y actual es la de los

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 Es utilizado en microbiología en la preparación de una amplia variedad de

No. De Colonias Interpretación

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