ESPECTROMETRÍA ULTRAVIOLETA Y VISIBLE,

ESPECTROFLUORIMETRÍA, INFRARROJA,
ABSORCIÓN ATÓMICA Y DE MASAS.

Julieth Ximena Bonilla Rodríguez 02200171022

Jesús David Bonilla Ortiz
Elfar Tellez Moreno 0200171033

Toxicología Y Farmacología
Febrero 21 Del 2023ª
 CONTENIDO
ESPECTROMETRÍA ULTRAVIOLETA Y VISIBLE

ESPECTROFLUORIMETRÍA

INFRARROJA

ABSORCIÓN ATÓMICA Y DE MASAS

ESPECTOMETRÍA
ULTRAVIOLETA Y VISIBLE
La espectroscopia UV-Vis es una técnica analítica que mide la cantidad de longitudes de onda
discretas de luz UV o visible que son absorbidas o transmitidas a través de una muestra en
comparación con una muestra de referencia o en blanco.

La luz ultravioleta tiene longitudes de onda más cortas que las de la luz visible hasta
aproximadamente 100 nm. Por lo tanto, la luz se puede describir por su longitud de onda, lo
que puede ser útil en la espectroscopia UV-Vis para analizar o identificar diferentes sustancias
localizando las longitudes de onda específicas correspondientes a la máxima absorbancia.

En la espectroscopia UV-Vis, se elige para el análisis la longitud de onda correspondiente a la

absorbancia máxima de la sustancia objetivo. Esta elección garantiza la máxima sensibilidad
porque la mayor respuesta se obtiene para una determinada concentración de analito.
COMPONENTES Y FUNCIONAMIENTO
Esquema simplificado de los componentes
principales de un espectrofotómetro UV-Vis.
Crédito: Dr. Justin Tom.
APLICACIONES

• El análisis cualitativo y cuantitativo del

espectrofotómetro UV visible se utiliza para
analizar el nivel de compuestos que están
presentes en el medicamento. Esto ayuda a
cuantificar y calificar los compuestos farmacéuticos y
garantiza la seguridad del compuesto
• La aplicación de la en el análisis de drogas farmacéutico para la salud humana.
en fluidos biológicos es analizada y adaptada
en especial para la toxicología clínica. Es un • La propiedad de absorción de cada compuesto
proceso rápido, adecuado para análisis de difiere de forma única. El espectrofotómetro UV
emergencia. visible mide la intensidad de la luz que pasa a
través de la muestra.
 VENTAJAS
• La técnica no es destructiva , lo que
permite reutilizar la muestra o proceder a su
posterior procesamiento o análisis.
• Las mediciones se pueden realizar
rápidamente , lo que permite una fácil
integración en los protocolos experimentales.
• Los instrumentos son fáciles de usar y
requieren poca capacitación del usuario antes
de usarlos.
• El análisis de datos generalmente requiere un
procesamiento mínimo , lo que
nuevamente significa que se requiere poca
capacitación del usuario.
• El instrumento es generalmente económico
de adquirir y operar, lo que lo hace accesible
para muchos laboratorios.
ESPECTROFLUORIMETRÍA
La espectroscopia de fluorescencia se ocupa principalmente
de la electrónica (estado fundamental y estado excitado) y
vibracional estados.

Espectroscopia de fluorescencia o fluorimetría o

espectrofluorimetría. Es una técnica para detectar y
analizar la fluorescencia en la muestra.

La fluorescencia es la emisión de luz por un sustancia (flúor) que ha

absorbido luz u otra radiación electromagnética. En este fenómeno de
emisión, un haz de luz (generalmente luz ultravioleta) excita el electrón en una
molécula que pasa del estado fundamental al estado excitado de
mayor energía; cuando el electrón vuelve al estado fundamental, emite
fluorescencia.
 COMPONENTES
• Fuente de luz, el selector de onda, la celda para la
muestra, un segundo selector de onda para aislar la
fluorescencia emitida y el detector.

1. La fuente de la luz debe de producir una salida

de fotones constantes a todas las longitudes de
onda.
2. El monocromador debe de pasar fotones de
todas las longitudes de onda con la misma
eficiencia.
3. La eficiencia del monocromador debe de ser
independiente de la polarización.
4. El detector (tubo fotomultiplicador) debe de
detectar los fotones de todas las longitudes de onda
con la misma eficiencia.
FUNCIONAMIENTO
APLICACIONES
Investigación de la fotoquímica de sistemas biológicos
(clorofila fluorescente).

Estudio de cinética de reacciones.

Estudio de interacciones lípidos-proteínas.

• Análisis de sustancias químicas en muestras de sustancias ilícitas,

como drogas de abuso, para determinar su pureza y composición.
• Análisis de sustancias químicas en muestras de tejidos o fluidos
corporales para determinar la causa de la muerte o para identificar
drogas o sustancias tóxicas en el cuerpo.
 INFRARROJA
La espectroscopia IR se ocupa de la región infrarroja
del espectro electromagnético, es decir, la luz que
tiene una longitud de onda más larga y una frecuencia
más baja que la luz visible.

El principal uso de la espectroscopia infrarroja es Esta técnica permite la identificación

determinar los grupos funcionales de las moléculas, de los grupos funcionales de un
relevantes tanto para la química orgánica como para compuesto. Esto debido a que cuando
la inorgánica. una molécula absorbe radiación infrarroja,
la vibración intramolecular con frecuencia
igual a la de la radiación, aumenta en
El concepto de espectroscopia IR generalmente se intensidad, lo que genera señales con
puede analizar de tres maneras: midiendo la reflexión, frecuencias que corresponden a la
la emisión y la absorción. vibración de un enlace específico
 COMPONENTES
• Las moléculas absorben la luz en la
región infrarroja del espectro
electromagnético, convirtiéndola en
vibración molecular. Esta absorción es
característica de la naturaleza de los
enlaces químicos presentes en una
muestra.
• La espectrofotometría infrarroja es un
método de medida de la absorción de la
radiación en un rango de longitudes de
onda, cuando ésta pasa a través de una
capa delgada de sustancia.
El espectrómetro de IR permite la obtención de espectros de
forma rápida, precisa y con relaciones Señal/Ruido (S/N)
elevadas.
Con el fin de hacer medidas en una muestra, se transmite
un rayo monocromo de luz infrarroja a través de la
muestra, y se registra la cantidad de energía absorbida.
FUNCIONAMIENTO
APLICACIONES
– Explosivos
• El análisis de las muestras en muchos de los casos
– Drogas ilícitas puede realizarse por medios no destructivos / sin
apenas manipulación.
– Huellas digitales • Permite tanto ensayos de identificación como
análisis cuantitativo.
– Materiales biológicos • Análisis a nivel macroscópico como microscópico

Es una de las técnicas espectroscópicas más

versátiles y de mayor aplicación en la
caracterización e identificación de materiales,
análisis de productos farmacéuticos y de
síntesis, análisis de contaminantes, ciencia
forense, biomedicina, agricultura, alimentos,
adhesivos y polímeros entre otros.
ABSORCIÓN ATÓMICA Y DE MASAS
La espectometría de absorción atómica analiza los Su uso se basa principalmente en la
electrones de los átomos en el atomizador, los determinación de elementos metálicos en una
cuales son promovidos a orbitales más altos por un muestra y se puede aplicar a más de 62 metales
instante, mediante la absorción de luz de una distintos en una misma solución de muestra.
determinada longitud de onda.

La técnica está basada en el hecho de que los átomos en estado

fundamental de un determinado elemento absorben la energía
emitida por una fuente de excitación del mismo elemento.

Los átomos del analito presentes en una solución son

convertidos a su estado atómico mediante el uso de una llama,
horno de grafito o manta calefactora.
COMPONENTES
Fuente • Es una lámpara de cátodo hueco, que consiste en un cilindro relleno
con un gas inerte dentro del cual se encuentra un cátodo (construido
radiante del metal a analizar) y un ánodo.
• Al aplicar un cierto potencial a través de los electrodos esta fuente emite el
espectro atómico del metal del cual está construido el cátodo.
Atomizador Compuesto por un nebulizador y un quemador, donde la muestra se
convierte en un fino aerosol y después en la llama se evapora permitiendo
producir átomos libres en su estado fundamental. Se utilizan
atomizadores con y sin llama.
Monocromador Aísla la longitud de onda de luz correspondiente al elemento.

Detector Se emplea un fotomultiplicador que traduce la información en corriente

eléctrica. Esta es proporcional a la intensidad de la línea aislada por el
monocromador.
Amplificador Amplifica la señal pasando luego a un dispositivo de lectura que puede ser
un voltímetro digital o un registrador u otros.
FUNCIONAMIE
NTO
 VENTAJAS/
APLICACIONES DESVENTAJAS
Ventajas
Bajo costo por análisis
Analizar trazas de muestras
Fácil de operar
geológicas, biológicas, Alta sensibilidad detección de hasta ppb
metalúrgicas, vítreas, Alta precisión
cementos, aceites para Mayormente libre de interferencia entre elementos
maquinaria, sedimentos Desventajas
marinos, farmacéuticas y El equipo nuevo es bastante caro
atmosféricas. Más orientado al análisis de líquidos
La muestra se destruye

No se pueden detectar no metales

 ESPECTROMETRÍA DE MASAS POR
PULVERIZACIÓN DE PAPEL

PS-MS es una alternativa viable a la cromatografía • Cuantificación de drogas de abuso

para el análisis rápido de drogas de abuso en orina, • Toxicología forense
demostrando suficiente sensibilidad, precisión y
exactitud para ser de relevancia clínica y forense.

PS-MS utiliza pequeños volúmenes de muestreo (<10 μL)

depositados directamente en una tira de papel. Directamente
frente a la entrada del espectrómetro de masas, se aplica
solvente al papel para extraer analitos y se aplica alto voltaje
para ionizarlos. Se recopila un cronograma de la corriente de
iones durante un período breve (generalmente <1 min) y se
integra para cuantificar el analito.

La ionización por pulverización de papel junto con la

espectrometría de masas de triple cuadrupolo permite
realizar mediciones cuantitativas rápidas y sensibles en
una variedad de muestras complejas, como sangre y
orina.
REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
(BIBLIOTECA)
 REFERENCIAS
1. Pérez G. Espectrometría infrarroja [Internet]. Espectrometria.com. Disponible
en: https://www.espectrometria.com/espectrometra_infrarroja
2. Absorción atómica [Internet]. Argentina.gob.ar. Disponible en: https://www.argentina.gob.ar/quimica/absorcion-atomica
3. Atomic Absorption Spectroscopy (AAS) [Internet]. Obsnap Group of Companies | Equipment Supplier & Manufacturer. 2019.
Disponible en: https://www.obsnap.com/atomic-absorption-spectroscopy-aas/.
4. Espectroscopía de Infrarrojo/ATR [Internet]. Uaemex.mx. Disponible en:
http://www.cciqs.uaemex.mx/index.php?option=com_content&view=article&id=113&Itemid=86
5. Infrared Spectroscopy [Internet]. Chemistry LibreTexts. Libretexts; Disponible en:
https://chem.libretexts.org/Bookshelves/Physical_and_Theoretical_Chemistry_Textbook_Maps/Supplemental_Modules_(Physic
al_and_Theoretical_Chemistry)/Spectroscopy/Vibrational_Spectroscopy/Infrared_Spectroscopy

6. Brajovic F. Todo sobre la Espectometría de absorción atómica [Internet]. Cromtek. 2020. Disponible en:
https://www.cromtek.cl/2020/11/02/todo-sobre-la-espectometria-de-absorcion-atomica/
7. Fluorescencia.
8. Pérez G. Espectrometría de fluorescencia [Internet]. Espectrometria.com. Disponible en:
https://www.espectrometria.com/espectrometra_de_fluorescencia
9. Guialab. Cuantificación de drogas de abuso y sus metabolitos en orina utilizando espectrometría de masas en tándem PaperSpray
para investigación clínica y toxicología forense – Guíalab [Internet]. Com.ar. Disponible en:
https://www.guialab.com.ar/notas-tecnicas/cuantificacion-de-drogas-de-abuso-y-sus-metabolitos-en-orina-utilizando-espectromet
ria-de-masas-en-tandem-paperspray-para-investigacion-clinica-y-toxicologia-forense/

10. Xtec.cat. [citado el 21 de febrero de 2023]. Disponible en:

http://www.xtec.cat/~gjimene2/llicencia/students/bscw.gmd.de_bscw_bscw.cgi_d328171163_______AAS_final.html