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    Acide Urique

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    Ce document décrit la méthode de dosage de l'acide urique dans le plasma, le sérum ou les urines humains à l'aide d'un test enzymatique. Il fournit les détails sur les réactifs, le protocole, les performances, les interférences et les valeurs de référence.

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    acide urique

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    acide urique

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    ACIDE URIQUE

    REACTIFS BIOLABO
    www.biolabo.fr

    Mthode Uricase

    FABRICANT :
    BIOLABO SA,

    Ractif pour le dosage quantitatif de lacide urique


    dans le plasma et le srum humains, ou les urines.

    02160, Maizy, France


    REF 80351

    R1 6 x 30 mL R2 6 x 30 mL R3 1 x 5 mL

    REF 80001

    R1 2 x 100 mL R2 2 x 100 mL R3 1 x 5 mL

    REF 87601

    R1 6 x 200 mL R2 6 x 200 mL R3 1 x 10 mL

    CODE CNQ: M2
    SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES
    Tel : (33) 03 23 25 15 50

    IVD USAGE IN VITRO

    Fax : (33) 03 23 256 256

    INTERET CLINIQUE (1) (2)

    PREPARATION DES REACTIFS

    Chez lhumain, lacide urique est le produit principal du catabolisme des


    nuclosides puriques, adnosine et guanosine.
    Les principales causes dhyperuricmie sont la goutte primaire
    (hyperproduction mtabolique des purines ou trouble de luricolimination rnale), ou la goutte secondaire dont la cause peut tre une
    maladie rnale ou ladministration de mdicaments (diurtiques,
    chimiothrapie) Lhyperuricmie peut aussi tre attribue une
    dfectuosit dune des enzymes impliques dans le mtabolisme de
    purines ou une hmopathie.
    Lhypouricmie est beaucoup moins courante que lhyperuricmie.

    Flacon R1 : Utiliser un objet non coupant pour enlever la capsule


    aluminium.
    Verser sans dlai le contenu du flacon R1 (Enzymes) dans le flacon R2
    (Tampon). Agiter doucement jusqu' complte dissolution avant
    dutiliser le ractif (environ 2 minutes).

    PRINCIPE (1) (3)


    Luricase agit sur lacide urique pour produire de lallantoine, du dioxyde
    de carbone et du proxyde d'hydrogne. En prsence de proxydase, le
    proxyde dhydrogne ragit avec un chromogne (dichlorohydroxybenzne sulfonate et amino-antipyrine) pour former une
    quinonimine, complexe de couleur rouge. Labsorbance mesure
    520 nm (490-530), est proportionnelle la quantit dacide urique dans
    le spcimen.

    REACTIFS
    flacon R1

    flacon R3

    6mol/L
    U/L
    mmol/L
    U/L

    TAMPON

    Dichlorohydroxybenzne sulfonate
    Tris pH 8,0 25C
    Conservateur

    Stocker 2-8C dans le flacon dorigine bien rebouch et labri de


    la lumire.
    Etalon (flacon R3) : Transvaser la quantit ncessaire, bien reboucher
    et stocker 2-8C.
    Le ractif R1 (avant ouverture) et les ractifs R2 et R3, sont stables
    jusqu' la date de premption indique sur ltiquette du coffret sils
    sont utiliss et conservs dans les conditions prconises.
    Aprs reconstitution, le ractif de travail est stable au moins 1 mois en
    labsence de contamination.
    Ne pas utiliser le ractif de travail sil est trouble ou si labsorbance
    520 nm > 0,100.
    Ne pas utiliser le ractif de travail aprs la date de premption
    indique sur ltiquette du coffret.

    PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN (4)

    ENZYMES

    Hexacyanoferrate (II) de potassium


    42
    Proxydase
    > 450
    Amino-antipyrine
    0,150
    Uricase
    > 120
    flacon R2

    STABILITE ET CONSERVATION

    2 mmol/L
    50 mmol/L

    ETALON

    Acide Urique 100 mg/L (595 6mol/L)

    PRECAUTIONS
    Les ractifs BIOLABO sont destins du personnel qualifi, pour un
    usage in vitro.
    Vrifier lintgrit des ractifs avant leur utilisation.
    Utiliser des quipements de protection (blouse, gants, lunettes).
    Ne pas pipetter avec la bouche.
    En cas de contact avec la peau ou les yeux, rincer abondamment
    leau et consulter un mdecin.
    Les ractifs contiennent de lazide de sodium (concentration < 0,1%)
    qui peut ragir avec les mtaux tel que le cuivre ou le plomb des
    canalisations . Rincer abondamment.
    La fiche de donnes de scurit peut tre obtenue sur simple
    demande.
    Elimination des dchets : respecter la lgislation en vigueur.
    Par mesure de scurit, traiter tout spcimen comme potentiellement
    infectieux. Respecter la lgislation en vigueur.

    Srum non hmolys, plasma prlev sur hparine ou EDTA.


    Urines dilues (1+9) dans leau distille avant dosage.
    Lacide urique est stable dans le spcimen :
    3 jours temprature ambiante.
    une semaine 2-8C.
    jusqu 6 mois congel 20C.
    Ajouter NaOH pour maintenir les urines alcalines et prvenir la
    prcipitation de lacide urique.

    INTERFERENCES (3) (5)


    Un taux lev de bilirubine et/ou dacide ascorbique interfre
    ngativement avec le dosage. Les rsultats peuvent tre survalus en
    cas de lipmie leve ou dhmolyse du spcimen.
    Patient trait la vitamine C : linterfrence due lacide ascorbique
    peut tre rduite en laissant le spcimen 2 heures temprature
    ambiante avant deffectuer le dosage.
    Young D.S. a publi une liste des substances interfrant avec le
    dosage.

    REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES


    1. Equipement de base du laboratoire danalyses mdicales.
    2. Srums de contrle normaux et pathologiques.
    Version : FT 80001 28 08 2008

    CALIBRATION

    MODE OPERATOIRE (TECHNIQUE MANUELLE)

    Etalon du coffret (flacon R3) ou BIOLABO-Multicalibrator REF 95015.


    Ou tout calibrant raccord sur une mthode ou un matriau de
    rfrence.
    La frquence de calibration dpend des performances de lanalyseur et
    des conditions de conservation du ractif.
    Il est recommand de calibrer nouveau dans les cas suivants :
    1. Changement du lot de ractif.
    2. Aprs oprations de maintenance sur lanalyseur.
    3. Les valeurs de contrle obtenues sortent des limites de confiance,
    mme aprs utilisation dun deuxime flacon de srum de contrle
    frachement reconstitu.

    Ramener les ractifs et spcimens temprature ambiante.

    CONTRLE DE QUALITE

    CODE CNQ: M2

    BIOLABO EXATROL-N (taux I) REF 95010.

    BIOLABO EXATROL-P (taux II) REF 95011.


    Tout autre srum de contrle titr pour cette mthode.
    Programme externe de contrle de la qualit.
    Il est recommand de contrler dans les cas suivants :
    Au moins un contrle par srie.
    Au moins un contrle par 24 heures.
    Changement de flacon de ractif.
    Aprs oprations de maintenance sur lanalyseur.
    Lorsquune valeur de contrle se trouve en dehors des limites de
    confiance indiques, appliquer les actions suivantes :
    1. Rpter le test en utilisant le mme contrle.
    2. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, prparer un srum
    de contrle fraichement reconstitu et rpter le test.
    3. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, utiliser un autre
    calibrant ou un calibrant fraichement reconstitu et rpter le test.
    4. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, calibrer nouveau
    en utilisant un autre flacon de ractif et rpter le test.
    5. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, contacter le service
    technique BIOLABO ou le revendeur local.

    Mesurer dans des tubes


    essais bien identifis :

    Blanc

    Etalon

    Dosage

    Ractif de travail

    1 mL

    1 mL

    1 mL
    25 6L

    Spcimen (Rq 1)
    25 6L

    Etalon
    25 6L

    Eau dminralise

    Mlanger. Laisser reposer 5 minutes 25C.


    Lire les absorbances 520 nm (490-530) contre le blanc ractif.
    La coloration est stable 30 minutes.

    Remarques :
    1. Srum, plasma, ou urines dilues (1 + 9) dans leau dminralise.
    2. Des procdures spcifiques sont disponibles pour les analyseurs
    automatiques. Contacter le service technique BIOLABO.
    3. Le volume spcimen peut tre rduit 20 6L (linarit accrue, lgre
    baisse de sensibilit).

    CALCUL
    Le rsultat est dtermin daprs la formule suivante :
    Srum et plasma :
    Rsultat =

    Abs (Dosage)
    Abs (Etalon)

    x concentration de lEtalon

    Urines dilues (1 + 9) : Multiplier le rsultat ci dessus par 10 (facteur de dilution)

    REFERENCES
    INTERVALLES DE REFERENCE (4)

    (1)
    (2)

    ACIDE URIQUE

    Srum ou plasma
    mg/L

    [Cmol/L]

    Enfant(*)

    20-55

    [119-327]

    Homme

    35-72

    [208-428]

    Femme(**)

    26-60

    [155-357]

    250-750 mg/24h

    Urines

    (3)

    (4)
    (5)

    TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R. Ashwood,
    W.B. Saunders (1999) p. 1245-1250.
    BERNARD S. Biochimie clinique-Instruments et techniques de laboratoirecd
    Diagnostiques mdicaux chirurgicaux.2 d.1989 p153-156 Ed. MALOINE
    PARIS.
    FOSSATI, P., PRENCIPE L., and BERTI G., Use of 3.5-dichloro-2Hydroxybenzene sulfonic acid / 4 Amino phenazone chromogenic system in
    direct enzymatic assays of uric acid in serum and urine. Clin. Chem. :
    26(227-231) 1980
    rd
    Clinical Guide to Laboratory Test, 3 Ed., N.W. TIETZ (1995) p. 624-626.
    th
    YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4 Ed. (1995)
    p. 3-609 3-622

    [1,48-4,43 mmol/24 h]

    (*) Taux plus lev chez lenfant nouveau n.


    (**) Taux plus faible durant la grossesse.
    Il est recommand chaque laboratoire de dfinir ses propres valeurs
    de rfrence pour la population concerne.

    Made in France
    Version : FT 80001 28 08 2008

    PERFORMANCES
    Intra-srie
    N = 20

    Taux
    normal

    Taux
    lev

    Inter-srie
    N = 20

    Taux
    normal

    Taux
    lev

    Moyenne mg/L

    53,2

    89,7

    Moyenne mg/L

    52,6

    90,2

    S.D. mg/L

    0,49

    0,49

    S.D.mg/L

    1,2

    1,2

    C.V. %

    0,9

    0.55

    C.V. %

    2,2

    1,3

    Limite de dtection : environ 3 mg/L


    Sensibilit pour 100 mg/L : 0,370 Abs. 520 nm.
    Comparaison avec ractif du commerce:
    y = 0,9953 x 0,2539

    r = 0,9923

    LIMITE DE LINEARITE
    La raction est linaire jusqu 200 mg/L (1190 6mol/L).
    Au del, diluer le spcimen avec une solution NaCl 9 g/L et refaire le
    dosage en tenant compte de la dilution dans le calcul du rsultat. La
    limite de linarit dpend du rapport de dilution spcimen/ractif.

    Fabricant

    Date de premption

    IVD

    Usage in vitro

    Temprature de conservation

    REF

    Rfrence du produit

    Consulter la notice

    LOT

    Numro de lot

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