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    TP Frottis Sanguin 2024-Étudiants

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    Univsité Badji Mokhtar – Annaba

    Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C)

    TP n°01 : Observation d’un frottis sanguin


    par microscope optique.
    Objectifs :
    - Préparer un frottis sanguin.
    - Observation de la morphologie des constituants du sang
    - Observer un frottis sanguin coloré au grossissement x40, et repérer sur ce frottis les différentes cellules
    sanguines

     Principe :
    1- La préparation d’un frottis sanguin :
    Le frottis sanguin sert à évaluer la taille et la morphologie des différents constituants du sang « la taille
    et la forme des érythrocytes, l’aspect et la différenciation des leucocytes
    2- Observation par microscope

     Protocole

    Frottis sur lame :

     Déposer une goutte de sang de taille moyenne à 01 cm de l'extrémité d'une lame dégraissé.
     Placer sur la goutte au contact de l’arête d’une lame ou une lamelle inclinée à 45° de façon à ce que
    le sang s'étale par capillarité.
     Pousser rapidement la deuxième lame maintenue à 45° le long de la lame pour étaler uniformément la
    goutte (frottis)
     Si la taille de la goutte est convenable, le frottis doit se terminer à 01 cm environ de l’autre extrémité
    de la lame

    TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2023/2024) Page 1


    Univsité Badji Mokhtar – Annaba
    Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C)

    Coloration de May Grünwald- Giemsa :C’est une association de deux types de colorants :

    May Grünwald Giemsa

    Une solution d’éosine et bleu de méthylène Une solution d’éosine et de dérivé bleu de
    dans le méthanol. méthylène (azur de méthylène) dans le
    méthanol et le glycérol.

     Mode opératoire

    Etapes Manipulations Durées d’action


    - Placer la lame du frottis sur les barrettes de
    1 - Coloration au May - support horizontal d’un bac de coloration. 3 minutes
    Grünwald - Recouvrir le frottis de 15 gouttes de
    colorant.
    2 - Coloration au May – - Ajouter 15 gouttes d’eau distillée.
    2 minutes
    Grünwald (suite)
    - Eliminer le May – Grünwald sous un
    faible courant d’eau distillée.
    3 - Coloration au Giemsa 10 minutes
    - Déposer 2 gouttes de Giemsa puis 20
    gouttes d’eau distillée
    - Rincer par un faible jet d’eau distillée.
    Séchage - Laisser sécher la lame à l’air, en position Au moins 5minutes
    inclinée, après avoir essuyé la face inférieure
    avec du papier essuie-tout.
     Observation au microscope :
    On procède à l’observation microscopique du frottis avec l’objectif x40.

    EQUIPE MSTEV : DJEDIOUI-DERRADJ-BOUALI-LAOUAR-DJEGHADER-DERBA-SEHILI-TAZIR.

    TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2023/2024) Page 2


    Univsité Badji Mokhtar – Annaba
    Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C)

    Compte rendu TP N°01 MSTEV

    OBSERVATION MICRSCOPIQUE
    D’UN FROTTIS SANGUIN

    NOM –PRENOM N°POSTE GROUPE NOM DE L’ENSEIGNANT

    TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2023/2024) Page 3


    Univsité Badji Mokhtar – Annaba
    Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C)
    La description des différentes parties du microscope à lumière :

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    Univsité Badji Mokhtar – Annaba
    Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C)
    Les constituants du sang

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    Univsité Badji Mokhtar – Annaba
    Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C)
    Résultats
    Observation microscopique réelle du frottis(TP)

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