REPUBLIQUE DU CAMEROUN REPUBLIC OF CAMEROON

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PAIX – TRAVAIL – PATRIE PEACE – WORK – FATHERLAND
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MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT MINISTRY OF HIGHER EDUCATION
SUPERIEUR ****
**** THE UNIVERSITY OF
UNIVERSITE DE NGAOUNDERE NGAOUNDERE
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RECTORAT RECTORATE
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FACULTE DES SCIENCES FACULTY OF SCIENCES
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DEPARTEMENT DE CHIMIE DEPARTMENT OF CHEMISTRY

Parcours : Chimie

Niveau : Master 1

Travaux Dirigés

METHODES DE SEPARATION
EN CHIMIE

Dr. FADIMATOU
Année académique: 2024-2025

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Exercice 1
On étudie la sédimentation d'un globule rouge dans le sang, sous l'effet de la pesanteur.
1. Faire le bilan et le schéma de toutes les forces qui s'exercent sur le globule rouge (poids, poussée
d'Archimède, force de frottement).
2. Le mouvement du globule devient rapidement rectiligne uniforme. Calculer alors sa vitesse v de
sédimentation dans le sang.
3. Quelle est la durée t nécessaire pour que le globule rouge se déplace de 10 cm quand son
mouvement est rectiligne uniforme ?
4. Quelle technique peut-on utiliser afin de réduire notablement cette durée?
Exercice 2
L'aspirine ou acide acétylsalicylique est peu soluble dans l'eau ; à 25 ° C, sa solubilité n'y est que de 3,4
g / L.
Elle est en revanche très soluble dans l'éthanol (d = 0,79) ou dans l'éther éthylique (d = 0,71), solvant.
L'eau et l'éthanol sont miscibles en toutes proportions, alors que l'éther et l'eau sont non miscibles.
1. Une solution d'aspirine de volume V = 200 mL contient une masse m = 0,52 g d'aspirine. Est-elle
saturée ? (Une solution est saturée dès que le solvant ne peut dissoudre la totalité du soluté. En filtrant
cet ensemble au travers d'un papier filtre, on obtient, d'une part, la solution saturée parfaitement limpide
et, d'autre part, le résidu solide.)
2. On souhaite extraire cette aspirine soit avec de l'éthanol soit avec de l'éther éthylique. On dispose du
matériel suivant : ampoule à décanter, entonnoir, béchers, supports divers, noix de fixation, éprouvettes
graduées, évaporateur à solvant.
a. Lequel de ces deux solvants convient-il d'utiliser ? Justifier la réponse.
b. Proposer un protocole permettant de réaliser cette extraction.
Exercice 3 : Choix du solvant pour extraire diiode
On veut extraire le diiode (I2) d’une solution d’eau iodée. La solubilité du diiode est donnée en gramme
par litre (g/L) dans différents solvants :
Solvant Eau Ether Benzène
Solubilité 0,3 250 140
1- Quel solvant vaut-il mieux choisir pour extraire l’iode de l’eau iodée ?
2- Décrire le protocole d’extraction en faisant un schéma.
3- On verse m = 400g de l’iode solide dans un volume V = 0,5 L d’alcool, quelle masse m’de diiode reste
sous forme solide ? Pourquoi ?
Exercice 4 : Extraction du limonène contenue dans l’écorce de l’orange
Le limonène est, température ambiante, un liquide incolore, à odeur d’orange. Sa formule chimique est
C10H16. Il est utilisé dans l’industrie agroalimentaire et dans l’industrie pharmaceutique pour parfumer
les médicaments. Sa solubilité dans l’eau est nulle, sa solubilité dans le cyclohexane est importante.
On souhaite extraire les espèces odorantes, dont le limonène, contenue dans l’écorce d’orange. Pour cela
on pèle finement quelques oranges et on broie les fragments, ou zestes, ainsi obtenus. On place cette
purée de zestes dans un erlenmeyer. On y ajoute du cyclohexane et laisse macérer pendant 30 minutes en
agitant de temps en temps. On filtre le mélange ; le filtrat contient les composants odorants extraits du
zeste d’orange.
1- Le limonène est-il un corps pur ?
2- L’extraction réalisée est-elle une extraction liquide-liquide ou solide-liquide ?
3- Justifier le choix du solvant extracteur ?
4- Quelle étape constitue l’extraction ?
5- Quelle étape constitue la séparation ?
6- Réaliser un schéma légendé de cette dernière opération.
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Exercice 5
Un protocole expérimental consiste à extraire et à analyser les pigments contenus dans les feuilles
d’une plante. On dispose du matériel végétal (feuilles) d’un mortier, d’un pilon, de l’hexane, de
l’acétone, de l’eau distillée, d’une ampoule à décanter, d’une colonne chromatographique, de l’alumine,
de la laine de verre, d’un bécher, des éprouvettes graduées de 2 mL. (L’acétone est miscible à l’eau)
a) Les différentes techniques de séparation qui peuvent être mises en jeu dans ce protocole :
b) Proposer un protocole expérimental qui permet d’extraire le mélange de pigments des feuilles.
c) Proposer un protocole expérimental pour la séparation de ces pigments.
d) Quel est le rôle de l’alumine, de l’hexane, de l’acétone et de la colonne chromatographique ?
e) Quelle technique peut-elle être utilisée pour analyser les pigments séparés ?
Exercice 6
I)- L’arôme de vanille vendu dans le commerce est composé essentiellement de 3 espèces
chimiques : la vanilline, l’acide vanillique et l’acide p-hydroxybenzoïque.
1) L’arôme de vanille est-il une espèce chimique pure ou un mélange ?
II- La vanilline extraite de la gousse de vanille est utilisée en parfumerie et surtout en pâtisserie. Le
protocole expérimental de l’extraction est le suivant :
- L’extrait de vanille est dilué dans l’eau puis versé dans une ampoule à décanter.
- Du chloroforme est ensuite versé dans l’ampoule à décanter. Après agitation vigoureuse
et dégazage, on procède à la séparation des phases.
On donne les indications suivantes :
- La vanille est très soluble dans le chloroforme et peu soluble dans l’eau.
- L’acide vanillique et l’acide p-hydroxybenzoïque sont solubles dans l’eau. La densité du
chloroforme est supérieure à 1.
2) À l’aide des indications ci-dessus, faire un schéma de l’ampoule à décanter et préciser le
contenu de chaque phase.
3) De quel type d’extraction s’agit-il ? Quel est le rôle du chloroforme ?
4) Quelles sont les opérations à effectuer après la séparation des phases contenues dans l’ampoule
pour isoler la vanilline pure ?

Exercice 7
Un mélange hétérogène est constitué de 4 corps purs solide A, B, C et D. En vous
aidant des informations ci-dessous choisissez les différentes méthodes pour séparer les
4 constituants de ce mélange.
Indiquez dans l’ordre
a) les méthodes de séparation que vous appliquez successivement.
b) le type de mélange que vous avez avant d’appliquer chaque méthode séparation
c) le ou les corps purs isolés après avoir appliqué chaque méthode de séparation.
- A sublime à 100°C.
- B et D sont insolubles dans l’eau.
- B est ferromagnétique.
- A et C sont des poudres fines blanches et sont parfaitement solubles dans l’eau.
Exercice 8
1. Dans la théorie des plateaux, comment appelle-t'on le paramètre N ? Dans cette même théorie,
ainsi que dans l'équation de van Deemter, comment appelle-t'on le paramètre H ? Quelle relation
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 relie ces deux paramètres ?
2. Quelle va être l'efficacité d'une séparation chromatographique en fonction de la valeur de H ?
3. Le technique "Headspace", développée en CPG depuis quelques années, permet d'effectuer
l'analyse de composés volatils s'échappant d'une substance liquide ou solide. Lors de l'application
de cette technique à l'analyse d'un morceau de gâteau, le chromatogramme obtenu révèle la
présence de limonène (arôme du citron, pic 1) et de vanilline (arôme de vanille, pic 2).

3.1 – En admettant que le limonène n'est pas retenu par la phase stationnaire, à l'inverse de la vanilline,
indiquer sur ce chromatogramme les grandeurs caractéristiques suivantes :
- le temps mort tM de la colonne,
- le temps de rétention tR de la vanilline,
- le temps de rétention réduit t'R de la vanilline.
3.2 - En négligeant les volumes morts de l'injecteur et du détecteur, et en considérant qu'à débit D
constant, on peut passer de la grandeur "temps" (t) à la grandeur "volume" (V) par la relation V = t x D :
- Comment peut-on déterminer, en s'aidant du chromatogramme, le volume de phase stationnaire
dans la colonne ?
- Comment peut-on, d'après ce chromatogramme, calculer le facteur de rétention k de la vanilline
sur cette colonne ?
- De quoi k est-il révélateur ? En règle générale, préfère-t'on avoir une valeur de k élevée ou faible ?
Pourquoi ?
Exercice 9
Deux jeunes chimistes débutants, dont les initiales sont CD et MP, ont réalisé des CCM d’un mélange
de deux composés. Pour effectuer le dépôt du mélange sur la plaque CCM, CD a préparé une solution
dans l’éther diéthylique tandis que MP a opté pour un dépôt du produit non dilué. Les CCM obtenues
après élution sont représentées ci-après.

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 1. A votre avis, quelle est la meilleure des deux CCM ? Pourquoi ?
2. Sur la plaque CCM de MP, les tâches sont déformées et les Rf des deux produits sont plus
grands que sur celle de CD. Expliquer pourquoi de façon simple et par analogie avec ce qui
vous a été présenté en cours à propos des pics chromatographiques.
3. Nos deux chimistes souhaitent maintenant injecter le mélange en CGP. Pour cela, ils disposent
d’un chromatographe en phase gazeuse équipé notamment d’in injecteur split – spliless, d’une
colonne HP-5 et d’un détecteur à ionisation de flamme (FID). A leur place, en tenant compte
notamment de l’allure des courbes de Van Deemter ci-dessous, quel gaz utiliseriez-vous ?

Exercice 10

On considère le (±)-1-phényléthane-1,2-diol A dont la structure est représentée ci-dessous :

A - Chromatographie en phase gazeuse (CPG)

1 - Comment appelle-t'on le paramètre H ? Rappeler brièvement sa signification vis-à-vis d'une
séparation chromatographique.
2 - Dans le cas de l'utilisation d'une colonne CPG capillaire, quel est le principal type d'injecteur utilisé ?
3 - Un utilisateur inexpérimenté a injecté une quantité trop importante du composé A ci-dessus dans un
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chromatographe en phase gazeuse. Quelle sera l'allure du pic obtenu par rapport à un pic idéal qui serait
parfaitement Gaussien ? Justifier en quelques lignes en expliquant de façon qualitative ce qui se passe
alors dans la colonne.

Le (±)-1-phényléthane-1,2-diol est utilisé comme groupement protecteur de fonctions carbonyle.

B - Chromatographie liquide-solide
On dépose le brut réactionnel précédent en haut d'une colonne de chromatographie sur silice.
4 - En utilisant l'équation de van Deemter rappelée ci-avant, expliquer pourquoi il ne faut pas tarder à
éluer le mélange une fois qu'il a été déposé en tête de colonne (on considèrera que dans le cas d'une
chromatographie sur colonne de silice, la vitesse moyenne u de la phase mobile est relativement faible).
Exercice 11
Le (±)-1-phényléthane-1,2-diol A peut être synthétisé sous sa forme optiquement active (NB : on ne vous
demande pas de donner le mode d'obtention de ce composé). Une analyse HPLC est effectuée
pour en déterminer la pureté optique.
On dispose d'une colonne HPLC chirale de type Chiralcel OB :

Un rapide bilan des solvants de qualité HPLC disponibles au laboratoire donne : hexane, eau,
acétonitrile et isopropanol.
1 - Quel type d'éluant faut-il utiliser avec ce type de phase ?
2 - Donner les interactions qui seront mises en jeu dans la séparation des deux énantiomères du 1-
phényléthane-1,2-diol.
3 - Comment procéderiez-vous améliorer la séparation suivante (indiquer brièvement les
facteurs sur lesquels on peut influer).
4 - Calculer le facteur de résolution R entre les deux pics du chromatogramme précédent.
A partir de quelle valeur de R peut-on considérer que deux pics sont parfaitement séparés ?
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5 - On considère un 1,3-dioxolane de type C.
Peut-on séparer les différents isomères sur une colonne de type Chiralcel OB ? Combien
peut-on attendre de pics au maximum ?
Exercice 12

Exercice 13
Un mélange de six iodures d’alkyle est séparé par chromatographie gazeuse à l’aide d’une colonne
remplie de poudre de brique réfractaire enrobée d’huile de silicone (longueur L = 365 cm). La colonne

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est chauffée de telle sorte que sa température croisse linéairement durant toute l’opération. Le tableau
donne les résultats relevés.

Température Surface
Pic Identité tR (min) ω (min)
(°C) (cm2)
1 Air tM = 0,5 Petite 55 Petite
2 CH3I 6,60 0,55 100 13,0
3 C2H5I 9,82 1,00 127 12,0
4 Iso-C3H7I 11,90 1,04 139 10,0
5 n-C3H7I 13,04 1,08 148 7,2
6 CH2I2 19,10 1,60 193 2,0

(a) Calculer la résolution entre les pics 2-3, 3-4, 4-5, 5-6 ?
(b) la séparation vous convient-elle ?
(c) Quelle longueur de colonne aurait-il fallu pour que la résolution des pics 4 et 5 ait été de R’ = 1,5 ?

Exercice 14
Le chromatogramme suivant a été obtenu pour un mélange de chaînes droites d’hydrocarbures : CnH2n+2.
Le pic M est dû à un corps non absorbé ; le pic A est celui de C3H8 ; le pic F est celui de C20H42. La
colonne mesure 120 cm de longueur et est utilisée à température constante avec un débit de gaz de 50,0
cm3/min. On trouve les données concernant les temps de rétention et la largeur des pics dans le tableau
12-2.

ω (s)

(a) Trouver le nombre de plateaux théoriques NA en se basant sur le pic A ?

(b) Calculer la résolution entre les pics B-C, D-E ?
(c) Quelle longueur de colonne aurait il fallu pour que la résolution des pics B et C ait été de R’ =
1,5 ?
(d) En déduire la nouvelle résolution des pics D et E ?
(e) Déterminer le tR de F sur une colonne de longueur déterminée au (d) et conclure ?

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 Exercice 15
Un mélange d’alkyles de bromes est séparé par CPG. Les paramètres de la colonne sont : L = 150
cm, T = 140°C, gaz vecteur He, débit = 20 cm3/min, détection FID. Le chromatogramme a été obtenu
avec un mélange de composition inconnue, néanmoins, on sait que le pic F est dû à du n-C5H11Br. Le
tableau résume les données pour les différents pics.

ω (s)

(a) Quelle peut être la longueur de la colonne minimale pour que les pics D et E puissent être résolus
avec moins de 1% de recouvrement ?
(b) Déterminer le nombre de plateaux théoriques N, pour les pics B, C, D, E et F ?
(c) Commenter la valeur de NC ?

Exercice 16

Une séparation 5 sucres a été obtenue en HPLC analytique dans les conditions suivantes :
Conditions
Colonne: SUPELCOSIL LC-NH2, 25cm x 4.6mm ID, particules de 5µm
Phase mobile: acétonitrile/éthanol/eau (75/8/17) (v/v/v)
Débit: 2mL/min. Temp: 30°C. Det.: réfractomètre
Échantillon: 20µL

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Les temps de rétention suivants ont été mesurés :

N° pic 1 2 3 4 5
tr (min) 3,43 3,80 4,15 7,02 9,27

Le temps mort est 1,20 mn.

Cette séparation est-elle possible sur une colonne HPLC préparative de 2500 plateaux théoriques et en
maintenant une résolution égale à 1 ?
Les 2 colonnes ont des phases stationnaires et mobiles identiques, une étude préliminaire a montré que
les facteurs de rétention sont approximativement les mêmes pour les deux colonnes
Exercice 17
On considère l’acide 2-phenylbutanoique pur et son chromatogramme ci-dessous.

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 Exercice 18
La patuline est une substance cancérigène qui se développe sur les pommes pourries, sa détection et son
dosage sont obligatoires pour tous les produits finis à base pomme (jus, cidre…).
Le chromatogramme ci-dessous démontre la présence de patuline dans du cidre. Il a été obtenu sur une
colonne analytique A où NA = 6000 pt. La résolution minimum entre la patuline et son impureté la plus
proche est de RA=3.

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On décide d’isoler la patuline sur une colonne préparative P avec NP = 1100 pt.
Ces 2 colonnes ont des phases stationnaires et mobiles identiques. De plus des tests préliminaires ont
montré que les produits ont les mêmes facteurs de rétention sur les 2 colonnes.
Pour obtenir une séparation correcte, la résolution sur la colonne préparative doit être au moins égale à
RP = 1,25.
Pourra t’on isoler la patuline à l’aide la colonne P ?

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