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Erythrocytes
(morphologie, physiologie, métabolisme et données
quantitatives) introduction • GR issu de l’érythropoiese • Duré de vie de 120 jours • Cellules annuclée • Transport O2/CO2 introduction • Pour être fonctionnel • Membrane intacte et déformable dans la microcirculation • Hémoglobine fonctionnel • Source d’énergie (ATP) assuré par des enzymes • Protection des composants contre l’oxydation Métabolisme du GR • GR qui est une cellule simplifiée ou n’existe ni noyau, ni ribosome (pas de néo synthèse protéique) ni de mitochondrie (pas de chaine respiratoire pour la synthèse d’ATP). L’hématie est donc dans une situation paradoxale : riche en oxygène mais incapable de l’utiliser directement. • Le métabolisme érythrocytaire, est un ensemble de réactions cataboliques, catalysées par différentes enzymes qui agissent en cascade à l’intérieur du GR • L’apport d’ATP assuré par un système producteur d’énergie dégradant principalement le glucose selon la voie d’Embden-Meyerhof et le shunt de Rappoport lubering. • Le maintient d’Hb sous forme réduite fonctionnelle est assuré par un système de réduction Métabolisme du GR • GR qui est une cellule simplifiée ou n’existe ni noyau, ni ribosome (pas de néo synthèse protéique) ni de mitochondrie (pas de chaine respiratoire pour la synthèse d’ATP). L’hématie est donc dans une situation paradoxale : riche en oxygène mais incapable de l’utiliser directement. • Dépourvu de respiration cellulaire, le GR mûr a comme métabolisme énergétique essentiel celui représenté par la dégradation anaérobie du glucose. • 2 voies métaboliques sont branchées en dérivation sur la chaîne de réactions d'Embden-Meyerhof : le shunt des pentoses (ou des hexoses monophosphates) et le cycle 2,3-diphosphoglycérate de Rapoport et Luebering. • Le maintient d’Hb sous forme réduite fonctionnelle est assuré par un système de réduction Métabolisme du GR Voie d'Embden-Meyerhof • Elle produit l'essentiel de l'ATP érythrocytaire. • Celui-ci a dans l'hématie plusieurs rôles : 1. il est nécessaire à la glycolyse anaérobie pour la phosphorylation du glucose et du fructose 6-phosphate. 2. il est le substrat des ATPases réglant les transferts de cations. 3. il intervient dans les échanges des lipides membranaires : il est impliqué dans la synthèse des purine et pyrimidine nucléotidiques 4. il est inhibiteur de la pyruvate kinase et de la phosphofructokinase, et de ce fait règle le débit de la glycolyse anaérobie. Métabolisme du GR Voie d'Embden-Meyerhof La voie d'Embden-Meyerhof produit le NADH sous l'action de la glycéraldéhyde 3-phosphate déshydrogénase. • Le NADH est utilisé d'une part pour la réduction du pyruvate en lactate par la lacticodéshydrogénase. • D'autre part, comme coenzyme de la méthémoglobine réductase physiologique. • il sert enfin de coenzyme accessoire à la glutathion réductase Métabolisme du GR Voie d'Embden-Meyerhof • Bilan énergétique de la voie d’embden Meyerhof : • Chaque molécule de de glucose consomme deux molécules d’ATP et en produit quatre ce qui aboutit au gain de deux molécules d’ATP. • Une molécule de coenzyme NAD+ est réduite et une molécule de NADH oxydée. Métabolisme du GR • Voie d'Embden-Meyerhof Métabolisme du GR Shunt de Rapoport- Luebering • Ce cycle branché sur la voie de la glycolyse anaérobie au niveau du diphosphoglycérate. • Dérivation de la voie métabolique principale, située entre le 1,3 diphosphoglycérate et le 3 phosphoglycérate, rôle capital dans la formation du 2,3 diphosphoglycérate, Fonction mutase : synthèse du 2,3-DPG à partir du 1,3 DPG. Fonction phosphatase : dégradation du 2,3-DPG en 3- phosphoglycérate. Métabolisme du GR Shunt de Rapoport- Luebering Rôle du 2,3 DPG : • Se lie fortement à l’Hb désoxygénée et très peu à l’Hb oxygénée. • Dans la structure T (Tense), la cavité centrale de l’Hb abrite le 2,3 DPG. • Dans la structure R (Relax), les parois de la cavité se rapprochent et expulsent le 2,3 DPG de la cavité centrale. • Le 2,3 DPG stabilise l’état T et diminue l’affinité de l’Hb pour l’O2 inversement l’O2 diminue l’affinité de l’Hb pour le 2,3 DPG. Métabolisme du GR Voie d’oxydo réduction a- Cycle des pentoses : Voie accessoire de la glycolyse, 10% de glucose est catabolisé en aérobiose par cette voie • C'est la voie de production du NADPH (nicotinamide-dinucléotide phosphate réduit). • La glucose 6-phosphate déshydrogénase (G6PD) est une enzyme importante non seulement en physiologie mais aussi en pathologie érythrocytaire. Métabolisme du GR Voie d’oxydo réduction a- Cycle des pentoses : Bilan • Production de deux molécules de NADPH, source de ribose, une molécule de CO2 . Rôle : intérêt double • Maintenir une concentration en NADPH dont les rôles sont : • Réaction de biosynthèse (Réduction). • Réduction du glutathion oxydé. • Stabilisation de la catalase autre voie de détoxification de H2O2. • Source de ribose qui rentre dans voie des acides nucléiques. Métabolisme du GR Voie d’oxydo réduction b- Système d'oxydoréduction du glutathion: • Il est essentiellement destiné à la détoxication des peroxydes, qui dans le GR entraînent la formation de dérivés oxydés de la globine et de peroxydes lipidiques dont l'accumulation provoque la destruction de la membrane. • l'enzyme clé de la détoxication des peroxydes est la glutathion peroxydase, dont les substrats sont les peroxydes (H2O2) et la coenzyme réductrice le glutathion réduit (GSH) (formation de glutathion oxydé GSSG et d’H2O). • Le GSH est régénéré sous l'action de la glutathion réductase Métabolisme du GR Voie d’oxydo réduction c - Système de réduction de la methémoglobine (forme oxydée de l'hémoglobine): • La présence de substances oxydatives des GR entraine la formation de méthémoglobine • = Forme oxydée de l’Hb, inefficace pour le transport de l’O2. • Il est donc nécessaire qu’un système permette sa réduction Méthémoglobine réductase ou NADH diaphorase.= NADH cytochrome b5 réductase. Métabolisme du GR Métabolisme des purines et des pyrimidines : Trois enzymes du métabolisme nucléotidique: 1/Adénylate kinase : transforme réversiblement l’ADP en ATP et AMP, participant ainsi à la régulation de la concentration de ces nucléotides. 2/Pyrimidine 5’ nucléotidase : uridine 5' monophosphate hydrolase : « UMPH »: catalyse la déphosphorylation des pyrimidines 5’ monophosphates (UMP, CMP) en leurs nucléotides correspondants. permet la dégradation de l’ARN ribosomique. 3/Adénosine désaminase : désamination de l’adénosine en inosine Métabolisme du GR Anhydrase carbonique : • Il en existe plusieurs iso enzymes. catalyse la réaction : • CO2 + H2O HCO3 - + H+ • Transforme le CO2 en acide carbonique le rendant ainsi plus soluble ce qui permet son passage à travers la membrane. • Le métabolisme érythrocytaire même réduit joue un rôle très important • Tout déficit en l’une des enzymes assurant les voies métaboliques entraine la perte de l’intégrité du GR d’où raccourcissement de sa durée de vie et installation d’une anémie hémolytique Étude morphologique des GR Morphologie des GR • L’observation des GR est particulièrement utile lors d’une anémie car certaines anomalies peuvent être diagnostiquées ou aider à la compréhension du mécanisme de cette anémie. • Les éléments analysés sont la taille, la coloration, la forme et la recherche des inclusions intraerythrocytaires. Préparation des frottis sanguins • Il s’agit de préparé un étalement mince d’une goutte de sang sur une lame de verre; après une coloration appropriée, le frottis est observé au microscope avec l’objectif à immersion • Déposer une goutte de sang sur le bord d’une lame dégraissé • Mettre une lame d’étalement à 45° • Étaler la goutte sur toute la longueur de la lame • Un frottis non coloré Coloration du frottis MGG • le May-Grunwald (éosine-bleu de méthylène) fixe les frottis par son alcool méthylique et colore les éléments acidophiles et les granulations spécifiques des leucocytes. • Giemsa (azur-éosine) colore surtout les noyaux et les parties azurophiles. Morphologie du GR • Normalement les GR ont la même forme, même coloration et même diamètre. Toute modification de ces données traduit un état pathologique. Morphologie du GR • Un GR normal est un disque biconcave au microscope optique il a la forme d’un disque anucléé rose orangé avec une dépression centrale claire. • Sa taille est de 7 à 9ù de diamètre Anomalies morphologiques de GR • Anomalies de taille • Anomalies de formes • Anomalies de couleur • Présences d’inclusions • Il est possibles d’avoir des anomalies multiples (ex anomalies de taille et de forme) Anomalies de taille • GR de grande taille: macrocytose. • GR de petite taille: microcytose. • GR de tailles variables: anisocytose. microcytose macrocytose anisocytose Anomalies de forme • Suite a des modifications ou des anomalies de la structure du GR • Perte de la forme du disque biconcave • Présence de plusieurs anomalies de forme: poikylocytose drépanocytes • Hématies en forme de faucille • Caractérise l’hémoglobine S (drepanocytose) drépanocytes elliptocytes • Hématies en forme d’éllipse • Retrouvés dans les anomalies de la membrane, carences en fer et les anomalies de l’hémoglobine (thalassémies) elliptocytes stomatocytes • Hématies ou la dépression centrale a une forme de bouche • Retrouvés dans les cirrhoses hépatiques, anomalies de la membrane et de l’hémoglobine. stomatocytes sphérocytes • Disparition de la dépression centrale et perte de la forme biconcave, l’hématie sera sphérique et rigide. • Retrouvés dans les anémies hémolytiques et anomalies de la membrane (sphérocytose) sphérocytes schizocytes • Fragments de GR • Retrouvés dans les hémolyses mécaniques schizocytes acanthocytes • Hématies avec des spicules • Anomalie de membrane acanthocytes dacryocytes • GR en forme de poire • Signe de fibrose medullaire dacryocytes Anomalies de couleur • Lors des états anémiques ou anomalies de l’erythropoiese le manque d’hémoglobine dans le GR peut être vu sur le microscope. hypochromie • GR pales avec une dépression centrale très grande • Se retrouve surtout dans les anémies ferriprives et les thalassémies hypochromie polychromatophilie • GR avec un contenu non homogène (des zones acidophiles et des basophiles) • Retrouvés dans les anémies régénératives et les carences vitaminiques polychromatophilie Cellules cibles • GR ou la dépression centrale contient un point (aspect d’une cible) • Retrouvés dans l’hémoglobinose C, carence en fer et thalassémies Cellules cibles Les inclusions intraerythrocytaires Corps d’Howell Jolly • Fragments nucléaires sous forme de granules violacées (fragment nucléaire) • Retrouvés après splénectomie et dans les dyserythropoiese Corps d’Howell Jolly Corps de Heinz • petite protubérance qui déforme le GR • correspondent à de l‘hémoglobine précipitée • Se retrouvent dans les hémoglobinopathies et déficits en G6PD Corps de Heinz Anneaux de cabot • Fibres rouges en rond ou en 8 (fuseau mitotique) • Signe de dyserythropoiese Anneaux de cabot Ponctuations basophiles • Granulations dispersées dans le cytoplasme (agrégats de ribosomes) • Retrouvés dans les dyserythropoiese et dans le saturnisme (intoxication par le plomb) Ponctuations basophiles Inclusions parasitaires (paludisme) Inclusions parasitaires (babesiose) Données quantitatives des GR Paramètres étudiées: • Taux d’hémoglobine gr/dl (anémie) • Taux de GR/mm3 • L’hématocrite • Volume globulaire moyen VGM=Ht/GR • Concentration moyenne en Hb CCMH=Hb/Ht • Teneur moyenne en Hb TCMH=Hb/GR Données quantitatives des GR Homme Femme Enfants NNé GR 106/µl 4,5-5,5 4-5 3,6-5,2 5-6 Hb g/dl 13-17 12-16 11,5-15,5 13,5-19,5 Ht % 40-50 36-47 37-45 44-62 VGM fl 80-100 µ3 80-100 µ3 75-98 95-120 TCMH pg 27,5-33,2 27,5-33,2 24-30 34 CCMH % 32-36 32-36 32 36 32-36