UNIVERSITE MOULOUD MAMMERI DE TIZI-OUZOU

FACULTE DE MEDECINE-DEPARTEMENT DE PHARMACIE

MODULE D’HEMOBIOLOGIE : 2019-2020

HEMOGLOBINE
STRUCTURE ET FONCTION

I-INTRODUCTION
Le terme d’hémoglobine a été donné par Hoppe-Seyler pour désigner le pigment
respiratoire transporteur d’O2 contenu dans le globule rouge.
Chez l’homme plusieurs hémoglobines se succèdent au cours de la vie, il en
existe plusieurs simultanément.
Le sang contient 13 à 18g /dl d’Hb chez l’homme.
et 12 à 16g/dl d’Hb chez la femme.
L’Hb renferme 65% du Fer de l’organisme cad 2,5 à 3g.
Intérêt d’étude
Hb : modèle pour la connaissance de la structure d’autres protéines.
Fréquence élevée des pathologies de l’Hb en particulier dans le pourtour
méditerranéen ( Algérie)

II-STRUCTURE DE L’HEMOGLOBINE
La molécule d’Hb est un tétramère de PM =67000 DA ; constitué de 4 sous-
unités identiques 2 à 2.
Chaque s /u contient : -une chaine polypeptidique=Globine
-un groupement prosthétique=Hème
1-Structure de l’Hème
L’hème est une protoporphyrine au centre de laquelle il y’a un atome de Fer.
La protoporphyrine est formée de 4 noyaux pyroles avec 4 atomes d’azote
Les 4 noyaux sont liés par l’intermédiaire de ponts méthényles (-CH=)
Les 4 noyaux sont substitués par des groupements méthyl-propionate et vinyl.
L’O2 ne peut se lier à l’hème que s’il est à l’état ferreux ; lorsque le Fer est à
l’état ferrique , la méthémoglobine ainsi formée est incapable de fixer l’O2.
Dans l’oxyHb, le fer possède 6 liaisons de coordinence :
04 reliant le fer avec les atomes d’azote N des noyaux pyroles
01 amarre l’hème à la globine au niveau de l’histidine proximale (F8)
01 pour la fixation d’1 molécule d’O2(histidine distale = E7)

2-Structure de la globine
C’est un ensemble de 4 chaines polypeptidiques avec pour chaque molécule
d’hémoglobine 4 chaines identiques 2 à 2 ( 2α et 2 non α )

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2-1-Organisation chromosomique des gènes de globine
Les gènes de la globine sont séparés en deux familles situés sur deux
chromosomes différents
Les gènes de type alpha sont regroupés sur un chromosome (le chromosome
numéro 16), les gènes de type bêta sur un autre(le chromosome numéro 11) . 

 Dans le groupe alpha, le gène qui code pour la chaîne embryonnaire zêta ξ
précède les deux gènes des chaînes α qui sont des composants des
hémoglobines foetales et des hémoglobines adultes. 
 Dans le groupe bêta, le gène de la chaîne embryonnaire epsilon Ɛ est suivi
par les deux gènes des chaînes foetales puis par les deux gènes des
chaînes adultes β et δ. 

La séquence des gènes de la globine humaine le long des chromosomes

correspond à l'ordre dans lequel ils sont exprimés au cours du développement. 

Les gènes des globines forment une famille multigénique

2-2-Evolution ontogénique des Hb humaines

Différentes formes d’Hb se succèdent et se chevauchent au cours de la vie,
Shéma :
Chez l’homme , il existe 2 switch :
-de la vie embryonnaire à la vie fœtale
-de la vie fœtale à la vie adulte
a-Les Hb embryonnaires : -Hb Gower1(ξ2 Ɛ2 )
-Hb Gower2(α2 Ɛ2 )
-Hb Porthland(ξ2 ȣ2 )
- 2 types de chaines α : ξ puis α

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- 2 types de chaines non α :Ɛ (spécifique de cette période) et ȣ (fœtale)

b- Hb fœtale : Hb F (α2 ȣ2 ), détectable à partir du 37e jour, apparait dès les

premiers stades de gestation, max 8e et 10e semaine
peu avant la naissance ( 32-36 semaine ), remplacement progressif par la chaine
β.

c-Hb Adulte : HbA(α2 β2 )

A partir de 6 mois( parfois jusqu’à 1 an) :
Le profil : HbA˃95% ; HbA2≈3% ; HbF=traces(<1%)

2-3-Structure des chaines de globine

a-Structure Iaire
Chaine linéaire variable par le nombre et par la séquence des acides aminés
La chaine α =141 Aa aminés
La chaine non α =146 Aa(β, δ, ȣ )

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b-Structure IIaire :
Structure hélicoïdale( 75% de la globine )
Liaisons hydrogène de faible énergie entre les groupes CO et NH des liaisons
peptidiques
De l’extrémité (NH2-) à la (- COOH), on distingue 8 segments hélicoïdaux
désignés par les lettres de A→H

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 Les premier et dernier acides aminés sont notés AA1 et AAn,
GH désigne le segment de liaison entre les hélices G et H. 

b- Structure IIIaire :
08 hélices sont repliées de façon identique réalisant une structure globulaire
compacte ménageant au voisinage de sa surface une poche hydrophobe dans
laquelle est enfuie la molécule d’hème.
Les sous-unités d’Hb ont une surface externe tapissée par des résidus
hydrophiles en contact avec le milieu aqueux ambiant , les régions internes
quant à elles sont essentiellement occupées par des résidus hydrophobes.

c-Structure IVaire :
est représentée par l’assemblage des s/u identiques 2 à 2 , les 4 s/u s’associent
selon une symétrie tétraédrale pour former une molécule d’Hb.

d-Aires de contact du tétramère : la s/u α1 est en contact avec la s/u β2 et la s/u

α2 avec β1, donc il existe des rapports très intriqués entre s/u non homologues et
aussi un contact entre s/u identiques.
-contacts entre s/u d’un même dimère( α1 β1 ou α2 β2 ) : il s’agit d’un contact
rigide impliquant 34résidus et plus d’une centaine d’atomes. Lors de la
transition entre les configurations oxygénée et désoxygénée, cette région n’est
pratiquement pas modifiée.
-contacts entre chaine non homologues de deux dimères différents(α 1β 2 ou α 2 β
1). Au niveau de cette zone, s’effectuent les mouvement de glissement et de
rotation puis modification de conformation de l’Hb lors de l’oxygénation.

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e- Liaisons hème-globine
elles se font  :
-d’une part entre les acides propioniques de la molécule d’hème et certains
acides aminés de la chaine de globine.
-d’autre part par l’atome de Fer relié
→à l’histidine proximale par liaison forte
→à l’histidine distale par liaison labile par l’intermédiaire de l’O2

III-Synthèse de l’Hb

1-Synthèse de l’hème
Elle se fait dans les mitochondries des érythroblastes .

2-Synthèse de la globine
Protéine résultant de l’expression de gènes, elle se fait au niveau des
érythroblastes, dans les ribosomes et le réticulum endoplasmique .
Il existe une synchronisation entre la synthèse de l’hème et celle de la globine.

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IV-FONCTION DE L’HEMOGLOBINE
1-transport de l’oxygène
Des poumons vers les tissus ; chaque molécule d’Hb fixe 4 molécules d’O2 →
oxy Hb ;
L’affinité de l’Hb pour l’O2 dépend de la pression partielle en O2 : PO2
-PO2 forte→ affinité Hb pour O2 ↑
-PO2 faible → affinité Hb pour O2 ↓
La particularité de la relation hémoglobine-oxygène est que la fixation par
l’hémoglobine n’est pas une relation linéaire mais une courbe sigmoïde. Cette
fixation est favorisée par une pression partielle en O2 (PO2) élevée. Dans les
zones où la PO2 est plus basse, au niveau des tissus, elles libèrent l’oxygène.
Ainsi, les hémoglobines parviennent à fournir l’oxygène nécessaire au
métabolisme cellulaire.

La fonction de transport de l’ O2 par l'hémoglobine est influencée par d'autres

facteurs comme la température, le pH ou le 2,3 diphosphoglycérate (2,3 DPG).

 1-1-Courbe de dissociation de l’oxy Hb

Courbe de dissociation de la myoglobine et de l'hémoglobine.

Les globines isolées ont une grande affinité pour l’oxygène. C'est ce
que l'on observe pour la myoglobine du muscle.
La courbe de dissociation de l'oxygène de l'hémoglobine a un aspect
sigmoïde (en S). Quand la pression partielle en oxygène est basse, la
pente de la courbe est faible, l'hémoglobine est peu "disposée" à
prendre en charge la molécule d'oxygène. Elle est plutôt désoxygénée.
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 Au niveau des tissus, la perte des premières molécules favorise la
libération des autres. Au contraire, au niveau alvéolaire, la fixation
d'une molécule de dioxygène sur une sous-unité favorise sa fixation sur
des autres sous-unités.

    La P50, c’est la pression partielle en oxygène correspondant à une saturation

de l’hémoglobine de 50%. Elle est égale à 26mm Hg en situation
physiologique.

-Certaines situations physiopathologiques modifient l’affinité de l’hémoglobine

pour l’oxygène, rapprochant la courbe d’un modèle linéaire (déviation à droite)
ou l’en éloignant (déviation à gauche).

Déplacement de la courbe à droite

      La déviation de la courbe de dissociation de l’hémoglobine à droite signifie
un rapprochement du modèle linéaire, et donc une affinité pour l’oxygène moins
importante. cela se traduit par :
- une augmentation de la P50
- une augmentation de la quantité d’oxygène délivrée aux tissus (baisse
d’affinité)

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Causes d’une déviation à droite de la courbe de dissociation :
- augmentation de la PCO2: effet Bohr
- baisse du pH : effet Bohr
- augmentation de température (Exemple : exercice physique)
- augmentation de production du 2,3 DPG (Exemple : haute altitude)

Remarques :
Le 2,3 diphosphoglycérate (2,3 DPG) est un dérivé de la glycolyse. Il fait
baisser l’affinité de l’hémoglobine pour l’oxygène en se fixant sur la forme
désoxygènée.
L’effet Bohr est un effet constaté en 1904 par Bohr, Hasselbach et Krogh:
l’affinité de l’hémoglobine pour l’oxygène varie avec le pH et la PCO2.

Déplacement de la courbe de dissociation à gauche :

La déviation à gauche de la courbe de dissociation signifie au contraire une
augmentation de l’affinité de l’hémoglobine pour l’oxygène. Les
conséquences sont :
- une baisse de la P50
- une baisse de la délivrance tissulaire d’oxygène

Les causes de déviation à gauche de la courbe de dissociation :

- Effet Bohr : baisse de la PCO2, augmentation du pH
- Baisse de température
- Baisse de production du 2,3 DPG
- Présence d’hémoglobine F (fœtale), ayant une plus forte affinité pour
l’oxygène par rapport à l’Hb A. 

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 Baisse de la capacité de fixation de l’hémoglobine

  En situation physiologique, la capacité de fixation de l’hémoglobine (pour un
taux à 15 g / dl) est 20.1 ml d’O2. Certaines situations abaissent cette capacité de
fixation.
- anémie
- méthémoglobinémie
- hémoglobinose S (drépanocytose)
- Intoxication au CO  

2-Transport du CO2 :
-des tissus vers le poumon ; le CO2 ne se fixe pas sur le Fer héminique, il se fixe
sur les groupements aminés de la globine pour former la
carbaminohémoglobine.

3-Effet Tampon
-L’Hb possède un certain nombre de sites spécifiques des ions H⁺ grâce
auxquelles elle exerce un effet tampon ;
-Le PH physiologique ne varie que de 0,01 durant le cycle respiratoire ;

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V-METHODES D’ETUDE DE L’Hb
1-NFS : numération sanguine avec taux d’Hb.

2-Etude électrophorètique :

a-électrophorèse sur acétate de cellulose à PH = 8,5

b-électrophorèse sur gel d’agarose à PH acide
c-isoélectrofocalisation sur gel d’agarose(séparation en gel selon un gradient
de PH ; il y a migration des fractions d’Hb jusqu’au PH i )
d-Eléctrophorèse capillaire :

3-Etude chromatographique :
-CLHP(chromatographie liquide haute performance) ; méthode de choix pour le
dosage des différentes fractions d’Hb normales et anormales
-Chromatographie sur microcolonnes( dosage de l’Hb A2)

3-Etude fonctionnelle :
-test de stabilité thermique : l’Hb normale est stable pendant 1 heure à 50°c
-test de solubilité : l’Hb S est insoluble en milieu réducteur et va précipiter
-test de falciformation : HbS

4-Etude par biologie moléculaire

-PCR.
-RFLP : polymorphisme de taille des fragments de restriction.
-séquençage : caractérisation des lésions moléculaires.

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