Resumo - (Cromatografia - Cromatografia em Papel)

Nome: Paulo Ricardo
Curso: Tec em química/ Lic. Química

Instagram: Pauloricardor27
CROMATOGRAFIA
INTRODUÇÂO
“Método físico de separação no qual os componentes a serem separados se distribuem entre
duas fases, uma das quais estacionária, enquanto a outra se movimenta numa direção definida”
(IUPAC, 1993).
de vidro, sob pressão

MÉTODO atmosférica.
➢ Consiste na separação de
misturas utilizando método físico- ➢ Cromatografia supercrítica
químico
“Vapor pressurizado, acima da
➢ Todos métodos cromatográficos temperatura crítica “.
apresentam em comum o uso de
❖ Tratando-se de fase estacionária:
uma fase estacionária e de uma
fase móvel.
➢ Sólidas
Fase estacionária: É imobilizada ➢ Liquidas: pode estar sendo

em uma coluna ou sobre uma superfície adsorvido sobre um suporte
plana. sólido ou imobilizado sobre ele.
Na maioria das vezes utiliza-se sílica em
gel (POLAR).
Modo de Separação
➢ Absorção/Partição: FM interage
FASE MÓVEL: Movimenta-se através com a FE.
da fase estacionária transportando a
mistura dos analitos. ➢ Troca iônica: Separação por
íons.
A fase móvel pode ser um gás, um
líquido ou um fluido supercrítico. ➢ Bioafinidade: Separa moléculas
específicas.
Tipos
➢ Exclusão: Por tamanho das
❖ Tratando-se de fase móvel: substâncias. Os menores são
capazes de penetrar facilmente
• Cromatografia gasosa (CG): em todos os poros da fase
fase móvel é um gás inerte. estacionária, enquanto as
maiores são excluídas,
• Cromatografia líquida (CLS): acompanhando a FM que fica
fora dos poros.
fase móvel é um líquido.
• Cromatografia líquida
“Clássica”: Feita em colunas Veja a seguir uma imagem ilustrativa:
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CROMATOGRAFIA
necessário a utilização de um revelador
(utilizado para visualizar melhor os
resultados).
Princípio da Cromatografia
em papel
Cromatografia em papel ➢ Os métodos químicos de

revelação são destrutivos.
➢ O princípio desse método ➢ Os métodos físicos não são
envolve a cromatografia de destrutivos
partição líquido-líquido.
- Na cromatografia de partição as Não pode esquecer que:

substâncias são distribuídas entre as ➢ É uma técnica simples
fases líquidas, sendo que as duas fases
são a água retida nos poros do papel ➢ Utiliza pequena quantidade da
de filtro e a outra fase é uma fase móvel amostra.
que passa através do papel
(geralmente um solvente). ➢ Tem boa capacidade de
resolução.
- Quando essa fase móvel se
movimenta, a separação da mistura
ocorre e os compostos da mistura se Cromatografia ascendente:
separam com base nas diferenças de Por capilaridade, a fase móvel se
afinidade com os solventes das fases movimenta em fluxo ascendente, no
estacionária e, móvel sob a ação início rapidamente, diminuindo de
capilar dos poros no papel. Nessa hora, modo gradativo e podendo até parar
ocorreu a cromatografia de adsorção por completo quando a força
entre as fases sólida e líquida, em que a ascendente de capilaridade for
superfície sólida do papel é a fase neutralizada pela ação da gravidade.
estacionária e, a fase líquida é a fase
móvel.
- Pode ocorrer de não ser visualizado

facilmente os resultados da
cromatografia, portanto pode ser
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CROMATOGRAFIA
Quando a fase móvel atingir a linha de ➢ Rf: Fator de retardamento
chegada, retira-se o papel da cuba e (retenção) é o quociente entre a
seca-se, ao ar livre ou com secador. distâncias percorridas
simultaneamente desde o ponto
➢ Suporte: Papel sobre o qual fica de partida, até o centro de
retida a fase estacionária (FE), maior concentração da
água. mancha do soluto e até a frente
da fase móvel.
➢ Revelador ou agente
cromogênico: Agente físico (UV, ➢ Saturação da cuba: Distribuição
p.e.) ou químico (p.e: Vapores uniforme no interior da cuba da
de Iodo) que tornam visíveis as fase vapor da FM após
substâncias separadas pela CP. alcançado o equilíbrio.
➢ Fase móvel (FM): Líquido ou ➢ Cromatograma: Papel com as

mistura que fluem através do suas substâncias separadas.
papel arrastando os solutos.
➢ Câmara ou cuba
Como calcular o (RF)
cromatográfica: Recipiente de
vidro com tampa fechada
hermeticamente, não deixando
escapar vapores da FM e onde
se coloca o papel
cromatográfico.
➢ Desenvolvimento: É o movimento
diferencial dos componentes de
uma amostra, ao serem
deslocados pela FM. Pode ser
ascendente, descendente,
horizontal ou circular. Algumas considerações:
➢ Aplicação: Colocação da ➢ A temperatura vai depender da

solução da amostra ( mistura das amostra analisada, tal como o
substâncias) no ponto de partida papel e a FM que serão
sobre o papel cromatográfico. utilizados.
➢ Frente da FM: Linha de chegada ➢ Temperaturas acima da

da FM, visível quando se retira o ambiente: Melhora o tempo de
papel da cuba cromatográfica. análise, mas pode prejudicar a
resolução.
➢ Distância percorrida: Distância
percorrida pela FM, desde o ➢ Temperaturas abaixo da
ponto de partida, até a linha de ambiente: pode melhorar a
chegada ou a do componente. resolução mas prejudicar o
tempo de análise.
Nome: Paulo Ricardo
CROMATOGRAFIA
Cromatografia de fase
A série Eluotrópica é de suma
importância, tanto para as práticas em reversa :
lab tanto para a realização das provas!!!
FE apolar (ou menos polar) e FM polar.
O papel é tratado com a FE apolar.
➢ FE não-aquosa: o papel é
tratado com substâncias
hidrófobas (parafina líquida,
óleo, silicone) dissolvidos em
solventes orgânicos como éter
de petróleo, hexano e benzeno.
- Utilizada para separar substâncias

hidrófobas.
Cromatografia de fase
Métodos de detecção
normal :
Normalmente as substâncias
separadas são incolores ou invisíveis
FE polar e FM apolar (ou menos polar).
à luz ordinária.
O papel é tratado com a FE polar.
Como visualizar a separação?
➢ FE aquosa: O papel é saturado
com vapor de água ou com
Métodos químicos: A solução
vapor de água e outro solvente
reveladora é borrifada sobre o
no interior de uma cuba papel, agentes cromogênicos.
cromatográfica,
hermeticamente fechada, antes
Métodos físicos: O papel quando
de iniciar-se o desenvolvimento
tratado com solução de
cromatográfico.
fluoresceína, frequentemente,
destaca as manchas tornando-as
➢ FE não-aquosa: o papel é
amarelo- esverdeadas, brancas ou
embebido em solução de
azuis. Usar lâmpada UV.
acetona e dimetilformamida,
por 10 a 15 minutos, e depois
Métodos biológicos e enzimáticos:
deixar secar.
Para localizar antibióticos, pela
inibição do crescimento de certos
- Utilizada para separar substâncias
microorganismos ou para localizar
hidrófilas. enzimas ou seus substratos.

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Fase estacionária: É imobilizada ➢ Liquidas: pode estar sendo

Cromatografia em papel ➢ Os métodos químicos de

- Na cromatografia de partição as Não pode esquecer que:

- Pode ocorrer de não ser visualizado

➢ Fase móvel (FM): Líquido ou ➢ Cromatograma: Papel com as

➢ Aplicação: Colocação da ➢ A temperatura vai depender da

➢ Frente da FM: Linha de chegada ➢ Temperaturas acima da

- Utilizada para separar substâncias

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