Hrana I Ishrana 55 2
Hrana I Ishrana 55 2
Hrana I Ishrana 55 2
55
FOOD AND NUTRITION ПИЩА И ПИТАНИЕ LES ALIMENTS ET L’ALIMENTATION NAHRUNG UND ERNÄHRUNG
VOL. 55 BEOGRAD 2014. BROJ 2
UDK:613.2 CODENHRIS-A ISSN 0018-68727
Vlasnik i izdavač/
Owner and Publisher: SADRŽAJ / CONTENTS
Društvo za ishranu Srbije
11000 Beograd, Savska 9/II
NAUČNI RADOVI / ORIGINAL SCIENTIFIC PAPERS
Izdavački savet/ Milica Pojić, Miroslav Hadnađev, Tamara Dapčević Hadnađev, Aleksandra
Editorial Committee: Mišan, Marijana Sakač, Bojana Šarić
Slavica Šiler-Marinković, • Testenina obogaćena konopljinim brašnom: Novi testeničarski proizvod .......... 37
Milan Mirić, Ivanka Miletić, Pasta enriched with hemp flour: New pasta product
Olivera Bunčić, Draga Plećaš,
Nedeljko Radlović, Marijana Carić, Sonja Veljović, Mile Veljović, Saša Despotović, Bojana Ivković, Ida Leskošek-
Desanka Božidarević, Čukalović, Miomir Nikšić, Ninoslav Nikićević
• Uticaj plodonosnog tela gljive Ganoderma lucidum na antioksidativni
Dragojlo Obradović, kapacitet lozovih rakija ................................................................. 43
Petrica Ružić, Budimka Novaković, The effect of Ganoderma lucidum fruit body on antioxidant capacity of
Slavica Suzić, Ilija Vuković grape brandies
Grafička obrada:
Mirjana Lolić
Saradnik za UDK:
Bojana Veselinović
Uredništvo i administracija:
11000 Beograd, Savska 9/II
Tel: 011/ 2109-589
p. fah: 333
ČASOPIS IZLAZI
DVA PUTA GODIŠNJE
У ТРОШКОВИМА ШТАМПАЊА
ЧАСОПИСА УЧЕСТВУЈЕ
МИНИСТАРСТВО ПРОСВЕТЕ,
НАУКЕ И ТЕХНОЛОШКОГ
РАЗВОЈА РЕПУБЛИКЕ СРБИЈЕ
Štampa:
Pekograf,
Zemun, Vojni put 258d
tel: 011 314 91 66
Poštovani čitaoci, Dear readers,
Milica Pojić1, Kratak sadržaj: U ovom radu je opisan postupak dobijanja obogaćene
Miroslav Hadnađev1, testenine supstitucijom 5% pšenične durum krupice konopljinim brašnom,
Tamara Dapčević Hadnađev1, kojim se sporedni proizvod uljarske prerade industrijske konoplje
Aleksandra Mišan1, – konopljino brašno, vraća u novi ciklus proizvodnje prehrambenih
Marijana Sakač1, proizvoda kao pomoćna sirovina u proizvodnji testenine. Na ovaj način
Bojana Šarić1 se poboljšava nutritivni profil testenine u pogledu povećanja sadržaja
¹Naučni institut za prehrambene tehnologije,
Univerzitet u Novom Sadu, Bulevar cara Lazara 1,
proteina, masti i sirovih vlakana, a s obzirom na to kakav je hemijski
21000 Novi Sad, Srbija sastav konopljinog brašna poboljšavaju se i funkcionalna svojstva
testenine u pogledu antioksidativne aktivnosti, povećanog sadržaja
Rad primljen: 19.09.2014.
makro i mikroelemenata i povećanog sadržaja fenolnih jedinjenja. Na
nivou supstitucije od 5%, ne dolazi do narušavanja kvaliteta testenine pri
kuvanju i senzorskih svojstava testenine. Naprotiv, testenina obogaćena
Kontakt adresa:
M. Pojić, Naučni institut za prehrambene konopljinim brašnom se manje raskuvava i okarakterisana je manjom
tehnologije, Univerzitet u Novom Sadu površinskom lepljivošću, što se pripisuje proteinima konoplje koji se sa
Bulevar cara Lazara 1, 21000 Novi Sad, Srbija,
Tel.: +381 21 485 3782,
pomoćnom sirovinom unose u formulaciju proizvoda.
E-mail: milica.pojic@fins.uns.ac.rs
Ključne reči: konopljino brašno, testenina, funkcionalni proizvod,
kvalitet.
Testenina obogaćena
Durum testenina
konopljinim brašnom
Sadržaj vode, % 10,01±0,01a 9,95±0,04a
Sadržaj sirovih proteina, % u s.m. 12,59±0,10a 14,00±0,25b
Sadržaj masti, % u s.m. 1,81±0,02a 2,89±0,05b
Sadržaj skroba, % u s.m. 73,11±0,30a 71,15±0,15b
Sadržaj šećera, % u s.m. 4,00±0,02a 3,46±0,08b
Sadržaj sirove celuloze, % u s.m. 0,04±0,01a 0,65±0,03b
Vrednosti hemijskih parametara su date kao srednje vrednosti tri merenja ± standardna devijacija.
Vrednosti označene istim malim slovom u istom redu nisu statistički značajno različite (p>0,05) (LSD test).
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 37-42, 2014.
Milica Pojić, Miroslav Hadnađev et all: Testenina obogaćena konopljinim brašnom: Novi testeničarski proizvod 39
svojstava konopljinog brašna [9], supstitucijom prihvatljivost od strane potrošača [1]. Boja sušene i
dela durum krupice ovom nekonvencionalnom kuvane testenine obogaćene konopljinim brašnom je
testeničarskom sirovinom povećava se nutritivna prikazana u Tabeli 2.
i funkcionalna vrednost ovog testeničarskog Sušena testenina obogaćena konopljinim
proizvoda, koji uz redovnu konzumaciju može brašnom je tamnija u odnosu na pšeničnu durum
ostvariti pozitivan efekat na zdravlje populacije testeninu, sa većim udelom zelenog tona (negativna
[15,16]. Danas na domaćem tržištu ne postoji vrednost parametra a*), dok razlike u prisustvu žutog
testenina obogaćena konopljinim brašnom, pa bi, tona nisu uočene (pozitivna vrednost parametra b*).
stoga, proizvodnja ovakvog proizvoda predstavljala Izračunavanjem ukupne razlike u boji kvantifikovana
svojevrsnu novinu u smislu formulacije, nutritivnog je razlika u boji između sušene testenine obogaćene
kvaliteta i funkcionalnosti finalnog proizvoda. konopljinim brašnom i durum testenine, pri čemu je
utvrđeno je da je ona očigledna i uočljiva ljudskim
Karakterizacija testenine sa konopljinim okom (ΔE>3) [11]. I nakon kuvanja, testenina
brašnom obogaćena konopljinim brašnom je bila tamnija u
Nutritivni sastav testenine odnosu na pšeničnu durum testeninu. Testenina
Nutritivni sastav testenine obogaćene obogaćena konopljinim brašnom je bila manje žuta
konopljinim brašnom je prikazan u Tabeli 1 uporedo (pozitivna vrednost parametra b*), dok je kuvana
sa nutritivnim sastavom obične testenine izrađene od testenina okarakterisana malim udelom crvenog
100% durum krupice. tona (pozitivna vrednost parametra a*), nasuprot
U proizvodnji testenine dodavanje drugih durum testenini kod koje je uočeno prisustvo zelenog
sastojaka kao što su jaja, povrće, soja, proteinski tona (negativna vrednost parametra a*). Razlika u
koncentrati i izolati, individualni nutrijenti, i sl. boji između kuvane testenine obogaćene konopljinim
doprinosi značajnim poboljšanjima nutritivne brašnom i kuvane durum testenine je očigledna
vrednosti testenine [1]. U okviru ovog rada je i uočljiva ljudskim okom (ΔE>3) [11]. Kuvanjem,
pokazano da se supstitucijom samo 5% pšenične testenina postaje svetlija i manje žuta što se pripisuje
durum krupice konopljinim brašnom dobija finalni izluživanju i termalnoj degradaciji pigmenata [17].
proizvod koji u odnosu na konvencionalnu durum
testeninu ima značajno veći sadržaj proteina, veći Kvalitet testenine pri kuvanju
sadržaj sirove celuloze i masti, kao i značajno niži Dobar kvalitet testenine pri kuvanju smatra
sadržaj svarljivih ugljenih hidrata (p<0,05), čime se najvažnijim kvalitetnim zahtevom za testeninu
se demonstrira potencijal ove sirovine u proizvodnji [1]. Parametri kvaliteta na osnovu kojih se određuje
specijalnih vrsta dijetetskih testenina, a naročito kvalitet testenine pri kuvanju su dati u Tabeli 3.
bezglutenskih s obzirom na to da industrijska konoplja Supstitucijom dela pšenične durum krupice
ne sadrži gluten. konopljinim brašnom neznatno se smanjuje
optimalno vreme kuvanja testenine, kao i smanjenje
Boja testenine procenta raskuvavanja testenine. Kvalitet testenine
Boja testenine je jedan od najvažnijih kriterijuma pri kuvanju zavisi uglavnom od vrste sirovina i uslova
za ocenu komercijalnog kvaliteta testenine i proizvodnje. Naime, prilikom sušenja testenine dolazi
Tabela 2. Parametri boje testenine obogaćene konopljinim brašnom u odnosu na pšeničnu durum testeninu
Vrednosti parametara boje su date kao srednje vrednosti tri merenja standardna devijacija.
Vrednosti označene istim malim slovom u istom redu nisu statistički značajno različite (p>0,05) (LSD test).
L* - koordinata svetloće boje (gde 0 označava crno, a 100 belo), a* - crveno-zelena koordinata (gde a*+ označava udeo crvene i
a*- udeo zelene boje) i b* - žuto-plava koordinata (gde b*+ označava udeo žute i b* udeo plave boje), ΔE - ukupna razlika boje.
Testenina obogaćena
Durum testenina
konopljinim brašnom
Optimalno vreme kuvanja, min 6,30 5,30
Procenat raskuvavanja testenine, % 6,32 5,60
Povećanje zapremine testenine pri kuvanju 2,75 2,50
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 37-42, 2014.
40 Milica Pojić, Miroslav Hadnađev et all: Testenina obogaćena konopljinim brašnom: Novi testeničarski proizvod
do polimerizacije proteina, dok su skrobne granule Razlike između čiste durum testenine i testenine
ugrađene u polimerizovani proteinski matriks, što obogaćene konopljinim brašnom se uočavaju samo
kao posledicu ima poboljšanje kvaliteta testenine u svojstvima površine, koja je kod čiste durum
pri kuvanju. Kako je kvalitet testenine pri kuvanju testenine ocenjena kao delimično lepljiva, za razliku
određen fizičkim nadmetanjem između koagulacije od testenine sa konopljinim brašnom čija površina
proteina unutar kontinualne proteinske mreže i nije bila lepljiva (Slika 3). Naime, kod čiste durum
bubrenja i želatinizacije skroba tokom kuvanja, u testenine prilikom kuvanja je preovladao fenomen
ovom slučaju preovladava koagulacija proteina što bubrenja i želatinizacije skroba nasuprot koagulaciji
zadržava skrobne granule unutar mreže i dovodi proteina, što je za rezultat imalo veću površinsku
do slabijeg omekšavanja testenine tokom kuvanja i lepljivost testenine. Sa druge strane, proteinska
njene manje površinske lepljivosti [18]. mreža testenine obogaćene konopljinim brašnom,
zbog dodatno prisutnih proteina konoplje nije
Senzorska svojstva sušene i kuvane testenine dozvolila da efekat bubrenja i želatinizacije skroba
Aroma, ukus, a ponekad i uniformnost oblika i prilikom kuvanja nadjača efekat koagulacije proteina,
boje i otpornost sušene testenine na lom su važni što je rezultiralo manjom površinskom lepljivošću
za potrošača, iako se oni mogu tumačiti u skladu sa testenine [18].
individualnim ukusom i navikama potrošača. Takođe, 5
Boja
Izgled preseka
2
Oblik Testenina sa konopljinim brašnom je u pogledu
1 adhezivnosti prilikom žvakanja, kao i izraženosti
0 ukusa bolje ocenjena u odnosu na čistu durum
testeninu (Slika 4).
Miris
5
Sjaj 4
3
Adhezivnost Ukus
2
DT TKB 1
Slika 1 – Senzorska svojstva sušene testenine određene 0
vizuelno (DT – durum testenina; TKB – testenina obogaćena
konopljinim brašnom) Žvakljivost Izraženost ukusa
da nivo supstitucije od 5% nije značajno narušio quality of common cereal products. J Cereal
senzorska svojstva testenine. Naprotiv, testenina Sci 2013; 58: 216-227.
obogaćena konopljinim brašnom je ocenjena kao 14. Foschia M, Peressini D, Sensidoni A, Brennan
sjajnija, boljih svojstava površine i bolje izraženosti MA, Brennan CS, How combinations of
ukusa u odnosu na konvencionalnu durum testeninu. dietary fibres can affect physicochemical
characteristics of pasta. LWT - Food Sci
Technol 2015; 61: 41-46.
ZAHVALNICA / ACKNOWLEDGMENTS 15. Callaway JC, Hempseed as a nutritional
resource: An overview. Euphytica2004; 140:
Istraživanje prezentovano u okviru ovog 65-72.
rada je podržano od strane Ministarstva prosvete, 16. Schwab US, Callaway JC, Erkkilä AT, Gynther J,
nauke i tehnološkog razvoja Republike Srbije u ok- Uusitupa MIJ, Jarvinen T, Effects of hempseed
viru projekta TR31007. and flaxseed oils on the profile of serum lipids,
serum total and lipoprotein lipid concentrations
and haemostatic factors. Eur J Nutr2006; 45:
470-477.
LITERATURA 17. Petitot M, Boyer L, Minier C, Micard V,
Fortification of pasta with split pea and faba
1. Cubadda R, Carcea M, Pasta and macaroni/ bean flours: Pasta processing and quality
Methods of manufacture. In: Caballero B,Trugo evaluation. Food Res Int2010; 43: 634–641.
L, Finglas P eds. Encyclopedia of Food Sciences 18. Maningat CC, Seib PA, Bassi SD, Woo KS,
and Nutrition Vol 1-10; Academic Press, 2003, LasaterGD, Wheat starch: Production,
4374-4378. properties, modification and uses. In: BeMiller
2. Stephenson C, World’s best pasta. Macaroni J, Whistler R eds. Starch: Chemistryand
J1983; 65: 4-8. Technology (Third Edition); Academic Press,
3. Heger J, Frydrich Z, Optimum amino acid Burlington, 2009, 441-510.
supplementation of a high-protein wheat: 19. Wang Y-Y, Norajit K, Ryu G-H, Influence of
sulfur-containing amino acids and tryptophan. extruded hemp-rice flour addition on the
Nutr Rep Int 1987; 36: 1105-1112. physical properties of wheat bread. J Food Sci
4. Bahnassey Y, Khan K, Harrold R, Fortification Nutr 2011; 16: 62-66.
of spaghetti with edible legumes: 20. Wang Y-Y, Norajit K, Kim M-H, Kim Y-H, Ryu
Physicochemical, anti-nutritional, amino acid G-H, Influence of extrusion condition and
and mineral composition. Cereal Chem 1986; hemp addition on wheat dough and bread
63: 210-215. properties. Food Sci Biotechnol2013; 22: 89-
5. Rayas-Duarte P, Mock CM, Satterlee LD, Quality 97.
of spaghetti containing buckwheat, amaranth,
and lupin flours. Cereal Chem 1996; 73: 381-
387.
6. Brennan CS, Kuri V, Tudorica CM, Inulin-
enriched pasta: effects on textural properties
and starch degradation. Food Chem2004; 86:
189-193.
7. Zhao YH, Manthey FA, Chang SKC, Hou HJ,
Yuan SH, Quality characteristics of spaghetti
as affected by green and yellow pea, lentil,
and chickpea flours. JFood Sci2005; 70:
S371-S376.
8. Shogren RL, Hareland GA, Wu YV, Sensory
evaluation and composition of spaghetti
fortified with soy flour, J Food Sci 2006; 71:
428-432.
9. Pojić M, Mišan A, Sakač M, Dapčević Hadnađev
T, Šarić B, Milovanović I, Hadnađev M,
Characterization of by-products originating
from hemp oil processing. J Agr Food Chem
2014; 62: 12436−12442.
10. Official Methods of Analysis of AOAC
International, 17th Edition, Association of
Official Analytical Chemists, 2000.
11. Francis FJ, Clydesdale FM, Food Colorimetry:
Theory and Applications. The Avi Publishing
Company INC, Wesport, Connecticut,
USA1975.
12. Pravilnik o metodama fizičkih i hemijskih analiza
za kontrolukvaliteta žita, mlinskih i pekarskih
proizvoda,testenina i brzo smrznutih testa,
Službeni list SFRJ 1988; 74.
13. Foschia M, Peressini D, Sensidoni A, Brennan
CS, The effects of dietary fibre addition on the
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 37-42, 2014.
42 Milica Pojić, Miroslav Hadnađev et all: Testenina obogaćena konopljinim brašnom: Novi testeničarski proizvod
U Kini i zemljama Orijenta, mnoge lekovite vezan germanijum [2]. Najznačajnije komponente
biljke i gljive se koriste kao tradicionalni lekovi. Ling Zhi sa bioaktivnim dejstvom su fenolna
Medicinske gljive se veoma retko koriste u sirovom jedinjenja, triterpeni, polisaharidi i peptidoglukani [
stanju, a najčešće se pripremaju u obliku ekstrakata 4, 5, 6].
u vrućoj vodi, koncentrata, rastvora i praha koji se Medicinska upotreba Ganoderma u drevnim
dalje upotrebljavaju za proizvodnju tonika, tinktura, zemljama Dalekog istoka uključivala je lečenje
čajeva, supa i biljnih formula [1]. Na tržištu postoji neurastenije, iznemoglosti nakon dugih bolesti,
veliki broj tečnih farmakoloških preparata na bazi insomnije, anoreksije, vrtoglavice, hroničnog
bilja i gljiva u kojima se etanol koristi kao rastvarač (i hepatitisa, hiperholesterolemije, koronarnih bolesti
do 80%), koji se koriste kako za prevenciju tako i za srca, hipertenzije, bronhijalnog kašlja, čira, ali se
lečenje pojedinih bolesti. koristila i kao protivotrov (antidot) kod trovanja otrovnim
Ganoderma lucidum - hrastova sjajnica je gljivama. Tokom poslednje decenije, istraživanja
jedna od najznačajnih medicinskih gljiva koja se kineskih naučnika su bila fokusirana uglavnom na
upotrebljava za proizvodnju preparata koji se u ispitivanje već poznatih dejstava gljive: produžavanje
Kini i Japanu u poslednjih 4000 godina koriste kao životnog veka, ishemija mozga (reperfuzija povreda),
lek, pomoćno lekovito sredstvo ili eliksir [2]. O hronični viralni hepatitis, disfunkcija muškog polnog
važnosti gljive G. lucidum govori i podatak da je organa, hiperholesterolemija, poboljšanje imunog
zauzela počasno mesto u najstarijoj kineskoj Materia sistema kod starijih osoba, antikancerogena aktivnost,
medica-i, pisanoj oko 200 godine nove ere, gde je imunostimulacija itd. [1].
na karakterističan kineski način 365 medicinskih U zemljama dalekog Istoka gljiva Ganodrema
sastojaka podeljeno u tri stepena: superiorni, srednji lucidum je važan dodatak raznim alkoholnim
i slab [1]. Na superiornom stupnju, Ganoderma pićima zbog svog gorkog ukusa i lekovitog dejstva.
zauzima prvo mesto, odmah ispred ginsenga. Da Maceracijom u alkoholnim pićima se postiže efikasnija
bi neki sastojak mogao da bude na superiornom kompozicija i povećava rastvaranje biološki aktivnih
stupnju, morao je da ima izuzetno velike medicinske materija u poređenju sa ekstrakcijom u vodenom
kvalitete, kao i da ne uzrokuje sporedna neželjena rastvoru. Takođe, alkoholna pića poboljšavaju
dejstva prilikom korišćenja u dužem vemenskom cirkulaciju krvi i pospešuju kurativni efekat [7].
periodu [3]. Zbog specifičnih senzornih karakteristika i povećanja
Ganoderma lucidum (Ling Zhi) je gljiva izuzetno funcionalnosti, poslednjih godina se Ganodema
bogata bioaktivnim komponentama, koje pospešuju lucidum koristi kao interesantan dodatak alkoholnim
zdravstvenu otpornost organizma čoveka. Plodonosno pićima [8, 9, 10].
telo ove gljive obiluje bioaktivnim komponentama: Danas se može naći veliki broj patenata za
polisaharidima, terpenoidima, amino kiselinama, dok proizvodnju jakih pića za čiju proizvodnju je korišćena
u manjim količinama sadrži proteine, steroide, lipide, gljiva, najveći broj njih odnosi se na proizvodnju
alkaloide, adenozin, riboflavin, askorbinsku kiselinu, piva. Pivu se može dodavati jedinjenje hloran steroid
neorganske jone (Mg, Ca, Zn, Mn, Fe, C) i organski izolovan iz G. lucidum, koji se koristi kao zamena za
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 43-47, 2014.
44 Sonja Veljović, Mile Veljović et al.: Uticaj plodonosnog tela gljive Ganoderma lucidum na antioksidativni kapacitet lozovih rakija
gorke materije hmelja [11] ili se gljiva može dodavati promešana i ostavljena u mraku 5 minuta. Nakon
u obliku ekstrakta, koji se koristi za aromatizaciju toga, u epruvetu je dodato 2 ml rastvora Na2CO3 (75
standardnog piva [9, 10]. U proizvodnji japanskog g/L), a zatim je promešana i ostavljena u mraku 2
pića sakea, koristi se za aromatizaciju u obliku arome sata. Nakon inkubacije merena je apsorbanca smeše
ili ekstrakta [12]. Dodatkom gljive, ne samo da se na 760 nm. Za slepu probu korišćena je destilovana
menjaju njene senzorne karakteristike (boja, miris voda (0.5 ml). Sadržaj ukupnih fenola određen je
i ukus), nego se povećavaju i funkionalna svojstva, korišćenjem standardne krive za čiju su konstukciju
jer se estrahuju biološki aktivne komponente gljive upotrebljeni rastvori galne kiseline koncentracija 10-
u alkoholno vodenoj smeši. Poslednjih decenija sve 80 mg/l. Rezultati su izraženi u ekvivalentima galne
je veći broj patenata za proizvodnju rakija kojima kiseline (mg/l GAE). Kod uzoraka koji su pre analize
se dodaje G.lucidum, bilo sama ili kao komponenta razblaženi, rezultat očitan sa standardne krive
biljnih mešavina, kojima se pripisuju lekovita množen je sa odgovarajućim stepenom razblaženja.
dejstva. Iako postoji veliki broj patenata, napisan je
mali broj radova u kojima se ispituje efekat gljive na Određivanje antioksidativne aktivnosti
karakteristike jakih pića.
U jednom od malobrojnih naučnih radova, Kim DPPH metoda
i saradnici [13] ispitivali su efekat gljive Ganodema Određivanje antioksidativnog kapaciteta
lucidum na kvalitet i funcionalne karakteristike obavljeno je pomoću metode DPPH, koju su
tradicionale pirinčane rakije, Yakje. Sa povećanjem ustanovili Kaneda i saradnici [16]. Analizirani uzorci
količine dodate gljive yakji povećavao se intenzitet su razblaženi u različitom odnosu sa 96% etanolom.
gorčine i travnate arome, a smanjivao se intenzitet Uzorku (0.2 ml) dodavano je 2.8 ml radnog rastvora
arome na alkohol. Vukosavljević i saradnici [14] su DPPH, koji je napravljen mešanjem 1,86 x 10-4
ispitivali antioksidativnu aktivnost biljnog likera Biter mol/L rastvora DPPH u etanolu sa 0.1 M rastvorom
54, kojima je dodavan ekstrakt G. lucidum kao 55. acetatnog pufera u odnosu 2:1 (v/v). Apsorbanca
sastojak. Upoređivanjem antioksidativnog kapaciteta je merena na λ=525 nm posle inkubacije od 90
Bitera 55 i komercijalnog farmaceutskog ekstrakta minuta u mraku na sobnoj temperaturi. Za slepu
(EC50 = 1,055 μl/μg DPPH) i komercijalnog likera probu korišćen je etanol i rastvor DPPH. Merenje
EC50 = 2,236 μl/μg DPPH), možemo zaključiti da je antiradikalske aktivnosti je vršeno sa standardne
antioksidativnost Bitter 55 (EC50 = 0,387 μl/μg DPPH) krive koje izražava zavisnost procenta inhibicije DPPH
značajno veća. radikala u funkciji koncentracije rastvora Trolox-a.
Rezultati su izraženi kao mM Trolox ekvivalenta po
CILJ RADA litaru uzorka (mM TE). Procenat od inhibicije DPPH
U radu je ispitivan uticaj koncentracije dodate reagensa se izračunava iz obrazaca:
gljive i vremena ekstrakcija na sadržaj fenolnih
jedinjenja i antioksidativni kapacitet (DPPH, FRAP % DPPH inhibicije = [ (A-As)/A] × 100%
i TEAC metodama) specijalnih lozovih rakija sa
dodatkom G. lucidum. Gde su: As - apsorbanca slepe probe, A - apsorbanca
analize.
MATERIJAL I METODE
FRAP metoda
Materijal Analiza uzoraka je vršena prema metodi koju
U istraživanju je korišćeno suvo plodonosno su ustanovili Benzie i Strain [17]. FRAP rastvor je
telo gljive Ganoderma lucidum GL-I iz kolekcije napravljen mešanjem acetatnog pufera (pH=3.6),
za tehnološku mikrobiologiju Poljoprivrednog TPTZ (10 ml rastvora TPTZ se rastava u 40 ml HCl)
fakulteta u Beogradu. Ova gljiva je izolovana u i FeCl3× 6H2O u zapreminskom odnosu 10:1:1. Pre
okolini Beograda. Plodonosna tela su proizvedena analizi svi reagensi i uzorci su inkubirani na 37°C.
na supstratu od hrastove strugotine i pšeničnih U 0.1 ml razblaženog uzorka dodato 3 ml FRAP
mekinja u poluindustrijskim uslovima, zatim su reagensa, nakon čega su kivete inkubirane na 37°C.
sušena do sadržaja vlage manje od 12%. Za Apsorbanca je očitana nakon inkubacije od 40 minuta
proizvodnju pića sa dodatkom gljive korišćena je na 593 nm. Za slepu probu korišćena je voda. Za
lozova prepečenica proizvedena na oglednom dobru određivanje vrednosti konstruisana je standardna
Radmilovac Poljoprivrednog fakulteta, Univerziteta u kriva korišćenjem serije razblaženja matičnog
Beogradu. Ekstrakcija sastojaka gljive obavljena je Trolox rastvora (1 mM). FRAP vrednost je izražena
u alkoholnom medijumu sa sadržajem etanola 45% korišćenjem obrasca:
vol u staklenim posudama na sobnoj temperaturi.
Ekstrakcija je vršena tokom: 7, 21 i 60 dana sa FRAP = mM Trolox ekvivalenta × 2
količinom seckanog tela gljive sa 1%, 2.5% i 4%
konstantnim mešanjem na magnetnoj mešalici. TEAC metoda
Svi uzorci su filtrirani i skladišteni u zelene boce Antioksidativni kapacitet je određivan i
na tamnom na sobnoj temperaturi (16 – 20°C) do korišćenjem TEAC metode, koja je vršena prema
analize. Svi uzorci su urađeni u triplikatu. modifikovanoj proceduri Re i saradnika [18]. Osnovni
rastor ABTS*+ je proizveden mešanjem jednakih
Određivanje fenolnih jedinjenja zapremina 14 mM ABTS i 4.9 mM K2S2O8, koji su
Sadržaj ukupnih fenola u uzorcima ekstrakta rastvoreni u fosfatnom puferu pH=7.4. Dobijeni
i pića sa dodatkom gljive G. lucidum određivan je tamnoplavo-zeleni rastvor je ostavljen na tamnom
metodom po Folin-Ciocalteu [15]. U 0.5 ml razblaženog mestu na sobnoj temperaturi 12-14 h pre upotrebe.
uzorka dodato je 2.5 ml rastvora po Folin-Ciocalteu, Radni ABTS*+ rastvor je pripreman razblaživanjem
nakon čega je epruveta sa reakcionom mešavinom osnovnog rastvora (oko 80 puta) sa fosfatnim
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 43-47, 2014.
Sonja Veljović, Mile Veljović et al.: Uticaj plodonosnog tela gljive Ganoderma lucidum na antioksidativni kapacitet lozovih rakija 45
puferom, tako da asporbanca rastvora na 734 nm (ANOVE), a Tuckey’s test je korišćen za određivanje
iznosi 0.70 ± 0.02 AU. Konstruiše se standardna razlike između sredina. Na osnovu rezultata
kriva pripremanjem serije razblaženja osnovnog sadržaja ukupnih fenolnih jedinjenja analiziranih
rastvora koncentracija 2.5, 1.25, 0.625, 0.3125 i uzoraka utvđeno je da faktori (vreme ekstrakcije
0.15625 mM. U 30 µl različitih razblaženja uzorka i koncentracija gljive), kao i njihova međusobna
doda se 3 ml radnog ABTS*+ rastvora, inkubira se interakcija imaju značajan efekat.
kiveta na 30°C 6 minuta, a zatim meri absorbanca Uzorak L1 nakon 7 dana ekstrahovao je 34.3
na λ=734 nm. Pored standardne krive, konstruiše se mg/l GAE fenolnih jedinjenja. Sa povećenjem
i kriva koja definiše procenat inhibicije u zavisnosti vremena ekstrakcije na 21 dan sadržaj fenolnih
od koncentracije uzorka. Za slepu probu se koristi jedinjenja kod uzorka L2 (27.6 mg/l GAE) statistički
fosfatni pufer. Kriva se konstuiše prema formuli: značajno se smanjuje, usled dekompozicije fenolnih
jedinjenja, dok kod uzorka L3 ekstrahovanog tokom
I (%) = (As-A)/As × 100 60 dana, dolazi do povećanja sadržaja fenolnih
jedinjenja. Možemo zaključiti da i nakon 60 dana
gde su: As - apsorbanca slepe probe A – apsorbanca. ekstrakcija fenolnih jedinjenja se još uvek odigrava.
TEAC vrednost se izračunava: Kod uzoraka lozovih specijalnih rakija
napravljenih sa 1% gljive antioksidativna aktivnost
TEAC (mM) = (koeficijent pravca krive uzorka)/(koeficijent (AO) određena DPPH i TEAC metodama se
pravca krive standarda) vremenom statistički značajno smanjuje. Ekstrakcija
komponenti koje utiču na AO se završava nakon 7
Statistička obrada podataka dana, a vremenom dolazi do statistički značajnog
Sva merenja su urađena u triplikatu i podaci smanjenja AO. Karakteristično je da L1>L3>L2, pa
su izraženi kao srednja vrednost ± standardna možemo zaključiti da se i nakon 21 dana ekstrahuju
devijacija (SD). Dobijeni rezultati su obrađeni fenolne komponente. AO uzoraka određenih FRAP
analizom varijanse (ANOVA) dvofaktorijalnog ogleda metodom imaju isti trend, dolazi do statistički
kod kojih je određivan uticaj vremena ekstrakcije, neznačajnog pada antioksidativnosti nakon 21
količine dodate gljive i njihove međusobne interakcije dana, i do statistički značajnog povećanja nakon
na antioksidativne karakteristike, a razlika između 60 dana, što je u korelaciji sa rezultatima sadržaja
uzoraka ispitivana je Tuckey’s testom. ukupnih fenolnih jedinjenja. Fenolne komponente
Korelacija između sadržaja ukupnih fenolnih ekstrahovane nakon 21 dana kod uzorka L3 imaju
jedinjenja i antioksidatnog kapaciteta određenih veći uticaj na antioksidativni kapacitet određen FRAP
DPPH, FRAP i TEAC metodom izražena je pomoću metodom u odnosu na DPPH i TEAC metodu.
programa STAT12 [19]. Kod uzoraka specijalnih lozovih prepečenica
kojima je dodavano 2.5% gljive vrednosti sadržaja
REZULTATI ukupnih fenolnih jedinjenja možemo rangirati
L6>L4>L5. Kao i kod uzoraka sa 1% gljive nakon 7
Rezultati sadržaja ukupnih fenolnih jedinjenja i dana dolazi do porasta sadržaja ukupnih fenolnih
antioksidativnog kapaciteta uzoraka specijalnih rakija jedinjenja, a zatim do pada sadržaja ukupnih
sa G. lucidum za čiju proizvodnju je korišćena lozova fenolnih jedinjenja uzoraka kod kojih je vreme
prepečenica prikazani se u tabeli 1. Rezultatima ekstrakcije 21 dan. Sadržaj ukupnih fenolnih
dvofaktorijanog ogleda izvršena je analiza varijanse jedinjenja se statistički značajno povećava nakon
Tabela 1. Sadržaj fenolnih jedinjenja i antioksidativnost uzoraka specijalnih lozovih prepečenica sa dodatkom G.lucidum
Rezultati
TPC DPPH FRAP TEAC
Uzorci
(mg/L GAE)a (mmol TE)b (FRAP jedinice) (mM TE)b
L1 34.30±2.15 0.163±0.008a 0.253±0.004a 2.497±0.045
L2 27.60±1.80 0.102±0.009 0.212±0.009 a
1.977±0.025a
L3 43.83±0.80 0.147±0.008a 0.401±0.016 2.067±0.076a
L4 80.27±1.79 0.281±0.005 0.830±0.008 2.920±0.026b
L5 59.40±1.42 0.225±0.008 0.675±0.010 2.777±0.075c
Različitim slovima u istoj koloni označeni su uzorci, koji se ne razlikuju statistički značajni prema Tukey’s test, sa značajnošću
p<0.01; L- lozova prepečenica.
a
Sadržaj ukupnih polifenola, izražen kao miligram ekvivalenta galne kiseline na litar uzorka
b
Ukupni antioksidativni kapacitet izražen kao mmol Trolox
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 43-47, 2014.
46 Sonja Veljović, Mile Veljović et al.: Uticaj plodonosnog tela gljive Ganoderma lucidum na antioksidativni kapacitet lozovih rakija
Tabela 2. Korelacija rezultata sadržaja fenolnih jedinjenja i antioksidativnog kapaciteta lozovih prepečenica sa dodatkom gljive
G.lucidum
14. Vukosavljević P, Novaković M, Bukvić B, Nikšić M, 18. Re R, Pellegrini N, Proteggente A, Pannala A, Yang
Stanisavljević I, Klaus A, Antioxidant activities of M, Rice-Evans C, Antioxidant activity applying
herbs, fruit and medicinal mushroom Ganoderma an improved ABTS radical cationde colorization
lucidum extracts produced by microfiltration assay. Free Radical Biol. Med. 1999; 26(9-10),
process. J. Agric. Sci. 2009; 54, 24-28. 1231-1237.
15. Singleton VL, Rossi JA, Colorimetry of total 19. STATISTICA (Data Analysis Software System),
phenolics with phosphor molybdic-phospho v.12, Stat-Soft, Inc., USA (2013).
tungstic acid reagents. Am. J. Enol. Vitic.1965; 20. Pecić S, Nikićević N, Veljović M, Despotović
16,144-158. S, Leskošek-Cukalović I, Tešević V, Nikšić M,
16. Kaneda H, Kobayashi N, Furusho S, Sahara H, Special plum brandy with Ganoderma lucidum,
Koshino S, Reducing activity and flavor stability 18th Congress of The International Society
of beer. Tech. Q. Master Brew. Assoc. Am. 1995; for Mushroom Science, Peking, Kina. Book of
32, 90-94. Abstracts, 146-147.
17. Benzie IFF, Strain JJ, The ferric reducing ability
of plasma (FRAP) as a measure of ”antioxidant
power”: The FRAP assay. Anal. Biochem. 1996;
239(1), 70-76.
UDK: 615.356:577.16
615.279
Izvori ALA su namernice životinjskog porekla povećanja niva glutationa u ćelijskim kulturama
(crveno meso, jetra, bubrezi), dok je u manjem inkubiranih sa ALA, kao i kod životinja koje su
procentu zastupljena u zelenom voću i povrću [10]. bile hranjene ovim antioksidansom [23]. Smatra
Egzogena forma ALA iz hrane se može aktivirati uz se da je mehanizam povećanja sinteze glutationa
učešće lipoat-aktivirajućih enzima [11]. Još uvek zapravo posledica uticaja ALA na ekspresiju gama-
nema dovoljno dokaza koje govore o uticaju ALA iz glutamilcisetin ligaze, enzima neophodnog za
hrane na povećanje slobodne koncentracije ovog sintezu glutationa [24].
antioksidansa u plazmi ili ćelijama [12]. Sa druge ALA učestvuje u važnim procesima modulacije
strane, oralna primena visokih doza ALA dovodi signalne transdukcije uključujući insulinsku
do značajnog ali kratkotrajnog povećanja njene signalizaciju, PKB/Akt-zavisnu signalizaciju i redoks-
koncentracije u plazmi ili ćelijama. Sprovedena osetljive transkripcione faktore. Istraživanje pokazuju
farmakokinetička istraživanja na zdravim da ALA aktivira insulinsku signalu kaskadu u kuluri
dobrovoljcima pokazuju da se 30-40% oralnu unete ćelija [25], da dovodi do povećane translokacije
doze resorbuje Takođe, dokazano je da se ALA GLUT4 na nivou ćelijskih membrane, što rezultira
bolje resorbuje na prazan stomak, jer uzimanje povećanjem nivoa glukoze u adipoznim i mišićnim
sa hranom može dovesti do smanjenja plazma ćelijama [26]. Pored učešća u insulinskoj signalizaciji
koncentracije ove kiseline za 20%. Konzumiranje ALA može aktivirati protein kinazu B (PKB/Akt) u in
hrane u isto vreme može da uspori prolazak alfa- vitro i in vivo uslovima [27], da inhibira apoptozu
lipoinske kiseline u sistemsku cirkulaciju, zato se hepatocita [28] i poveća preživljavanje neurona
savetuje primena 30 minuta pre prvog dnevnog inkubiranih ovom kiselinom [29].
obroka ili doručka [13]. S obzirom na to da ALA Oksidativni stres je u pozitivnoj korelaciji
nije esencijani nutritient, trenutno, nema zvaničnih sa aktivacijom transkripcionog faktora NF-κB
vrednosti za preporučeni dijetarni ili referentni i posledičnom ekspresijom velikog broja gena
dijetarni unos ovog moćnog antioksidansa. uključenih u procese inflamacije i endotelne
Primećene su razlike u bioraspoloživosti R migracije ćelija [30]. Zabeleženi su pozitivni efekti
i S enantiomera alfa-lipoinske kiseline. Nakon ALA na inhibiciju NF-κB kod velikog broja ćelijskih
oralne primene R-ALA zabeležene su do 50% tipova [31], dok inicijalni uticaji inhibicije NF-κB
više plazma koncentracije u odnosu na primenu pomoću ALA mogu imati prednosti u procesima
S-enantiomera, verovatno zbog bolje resorpcije koji su praćeni disregulacijom aktivnosti redoks-
R-ALA. Nakon oralne primene oba enantiomera se osetljivih transkripcionih faktora. Antiinflamatorne
brzo metabolišu i izlučuju, a maksimalne plazma karakteristike ALA baziraju se na antioksidativnim
koncentracije postižu se jedan sat nakon primene karakteristikama ovog potencijalnog hemopreve-
[15]. R-ALA je ključni kofaktor za nekoliko važnih ntivnog agensa [32]. Literaturni podaci pokazuju
mitohondrijalnih enzimskih kompleksa, koji da ALA deluje kao anti-apoptotički agens u
učestvuju u katabolizmu alfa-keto kiselina i amino različitim ćelijskim kulturama, prevenirajuci
kiselina [16]. oksidantima indukovanu ćelijsku smrt [33], dok
indukuje apoptozu u ćelijama karcinoma kolona i
Antioksidativne karakteristike alfa- cerviksa [34].
lipoinske kiseline
Alfa-lipoinska kiselina se karakteriše Farmakoterapijski aspekti primene alfa-
jedinstvenim antioksidativnim sposobnostima lipoinske kiseline
jer i endogeno sintetisana i egzogeni oblik Farmakoterapijski aspekti ALA baziraju
aktivno učestvuju u hvatanju slobodnih radikala se na učešću ovog antioksidansa u različitim
u oksidovanoj i/ili redukovanoj formi. ALA je antiinflamatornim signalnim putevima, zato ALA
rastvorljiva i u vodi i u mastima pa zato može pronalazi svoja indikaciona područja u terapiji
obavljati antioksidativnu ulogu na nivou citozola, kardiovaskularnih, kognitivnih i neuromuskularnih
plazma membrane, serumskih i lipoproteina [17]. defekata. Potencijalna biohemijska i terapijska
Poznato je da ALA štiti mitohondrije od oksidativnog uloga ALA unete oralnim putem uslovljena je
stresa i da povećavaju životni vek, funkcionalne stepenom bioraspoloživosti, akumulacije u tkivima
genomske karakteristike kao i strukturni integritet i metaboličkim procesima kojima podleže [35, 36].
mitohondrija [18]. ALA i njen redukovani oblik, Preporučene terapijske doze alfa-lipoinske kiseline
DHALA, mogu direktno neutralisati reaktivne su od 300 -1800 mg dnevno [37].
kiseonične i/ili azotne radikale u in vitro uslovima. U Tabeli 1. prikazani su najzastupljeniji
Međutm, još uvek nije u potpunosti razjašnjen registrovani proizvodi na bazi alfa-lipoinske kiseline
antioksidativni mehanizam ALA u in vivo uslovima u Srbiji i zemljama Evrope. Prema anatomsko
[19]. terapijskoj klasifikaciji alfa-lipoinska kiselina je
Dihidoliponska kiselina je moćno redukciono svrstana u grupu proizvoda koji deluju na bolesti
sredstvo sa kapacitetom da regeneriše i smanji digestivnog trakta i metabolizma (ATC, A16AX01),
oksidovane oblike nekoliko važnih antioksidanta, sa osnovnom primenom u terapiji dijabetesne
uklučujući vitamin C, glutation i koenzim Q10 [20]. polineuropatije [38].
Slobodno gvožđe i bakar su važni redoks-aktivni
metalni joni koji mogu dovesti do oksidativnog Tabela 1. Registrovani proizvodi na bazi alfa-
oštećenja. Istraživanja pokazuju da ALA i DHALA lipoinske kiseline u Srbiji i zemljama Evrope
inhibiraju oksidativna oštećenje izazvana jonima
gvožđa ili bakra u in vitro uslovima i na animalnim Većina komercijano dostupnih proizvoda
modelima [21, 22]. sa alfa-lipoinskom kiselinom sadrži racemsku
Glutation je važan intraćelijski antioksidans mešavinu R i S enantiomera. Iako se oba
koji ima potentnu ulogu u detoksikaciji i eliminaciji enatiomera nakon oralne primene brzo metabolišu
toksina. Istraživanja upućuju da ALA dovodi do i izlučuju, prednost u terapijskom pogledu, na
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 48-53, 2014.
50 Damnjanović Ivana, Stojanović Dušica et al.: Farmakoterapijski aspekti primene alfa-lipoinske kiseline kao antioksidansa
isolated from patients with type 1 diabetes. 46. Marracci GH, McKeon GP, Marquardt WE, Winter
Diabetes Care 1998; 21(8): 1310–6. RW, Riscoe MK, Bourdette DN. Alpha lipoic acid
31. Feuerecker B, Pirsig S, Seidl C, Aichler M, inhibits human T-cell migration: implications for
Feuchtinger A, Bruchelt G, et al. Lipoic acid multiple sclerosis. J Neurosci Res 2004;78(3):362-
inhibits cell proliferation of tumor cells in vitro 70.
and in vivo. Cancer Biol Ther 2012; 13(14): 1425- 47. Vidović B, Milovanović S, Dorđević B, Kotur-
1435. Stevuljević J, Stefanović A, Ivanišević J, et al.
32. Shay KP, Moreau RF, Smith EJ, Smith AR, Hagen Effect of alpha-lipoic acid supplementation
TM. Alpha-lipoic acid as a dietary supplement: on oxidative stress markers and antioxidative
molecular mechanisms and therapeutic potential. defense in patients with schizophrenia. Psychiatr
Biochim Biophys Acta 2009; 790(10): 1149-60. Danub 2014 ;26(3):205-13..
33. Simbula G, Columbano A, Ledda-Columbano GM, 48. Packer L, Witt EH, Tritschler HJ. Alpha-lipoic acid
Sanna L, Deidda M, Diana A, et al. Increased ROS as a biological antioxidant. Free Radic Biol Med
generation and p53 activation in alpha-lipoic acid- 1995;19(2):227-50.
induced apoptosis of hepatoma cells. Apoptosis 49. Elangovan S,Tze-chen H. Regulation of cell cycle
2007; 12(1): 113–23. transition and induction of apoptosis in HL-
34. Damnjanovic I, Kocic G, Najman S, Stojanovic S, 60 leukemia cells by lipoic acid: role in cancer
Stojanovic D, Veljkovic A, et al. Chemopreventive prevention and Therapy. J Hematol Oncol
potential of alpha lipoic acid in the treatment 2008;1:4.
of culture of colon and cervix cancer cell lines. 50. Ziegler D, Low PA, Litchy WJ, Boulton AJ, Vinik
Bratisl Lek Listy 2014; 115(10):611–616. AI, Freeman R, et al. Efficacy and safety of
35. Scott BC, Aruoma OI, Evans PJ, O’Neill C, Van der antioxidant treatment with α-lipoic acid over 4
Vliet A, Cross CE, et al. Lipoic and dihydrolipoic years in diabetic polyneuropathy: the NATHAN 1
acids as antioxidants. A critical evaluation. Free trial. Diabetes Care 2011;34(9):2054–2060.
Radic Res 1994; 20(2): 119–33.
36. Liu J, Head E, Gharib AM, Yuan W, Ingersoll
RT, Hagen TM, et al. Memory loss in old rats is
associated with brain mitochondrial decay and
RNA/DNA oxidation: partial reversal by feeding
acetyl-L-carnitine and/or R-alpha -lipoic acid.
Proc Natl Acad Sci U S A 2002; 99(4): 2356–61.
37. Lekovi u prometu: priručnik o lekovima i njihovoj
primeni: ATC klasifikacija. Milan Stanulović, 15.
izd., Novi Sad: Ortomedics, 2006.
38. Suzuki YJ, Aggarwal BB, Packer L. Alpha-lipoic
acid is a potent inhibitor of NF-kappa B activation
in human T cells. Biochem Biophys Res Commun
1992; 189 (3): 1709–15.
39. Castro MC, Francini F, Gagliardino JJ, Massa ML.
Lipoic acid prevents fructose-induced changes in
liver carbohydrate metabolism: role of oxidative
stress. Biochim Biophys Acta 2014;1840(3):1145-
51.
40. Koriyama Y, Nakayama Y, Matsugo S, Kato S.
Protective effect of lipoic acid against oxidative
stress is mediated by Keap1/Nrf2-dependent
heme oxygenase-1 induction in the RGC-5
cellline. Brain Res 2013;1499:145-57.
41. Xu J, Yang W, Deng Q, Huang Q, Yang J, Huang
F. Flaxseed oil and α-lipoic acid combination
reduces atherosclerosis risk factors in rats fed a
high-fat diet. Lipids Health Dis 2012;11:148.
42. Ali AM, Awad TG, Al-Adl NM. Efficacy of combined
topiramate/thioctic acid therapy in migraine
prophylaxis. Saudi Pharm J 2010;18(4):239-43.
43. Connell BJ, Saleh M, Khan BV, Saleh TM. Lipoic
acid protects against reperfusion injury in the
early stages of cerebral ischemia. Brain Res
2011;1375:128-36.
44. Panigrahi M, Sadguna Y, Shivakumar BR, Kolluri
SV, Roy S, Packer L, et al. alpha-Lipoic acid
protects against reperfusion injury following
cerebral ischemia in rats. Brain Res 1996;717(1-
2):184-8.
45. Holmquist L, Stuchbury G, Berbaum K, Muscat
S, Young S, Hager K, et al. Lipoic acid as a novel
treatment for Alzheimer’s disease and related
dementias. Pharmacol Ther 2007;113(1):154-64.
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 48-53, 2014.
Damnjanović Ivana, Stojanović Dušica et al.: Farmakoterapijski aspekti primene alfa-lipoinske kiseline kao antioksidansa 53
UDK: 616.13-004.6-084/-085
613.2
Mogući
Određeni sastojak
Primeri Izvori vaskuloprotektivni
hrane
efekti
Rastvorljiva dijetalna ovas, ječam, kvasac,
Glukan, pektin ↓TC, ↓TG, ↓LDL-C
vlakna voće, povrće, žito
Sitosterol, stigmasterol, ricinusovo ulje, sojino ↓TC , ↓LDL-C ↓apsorpciju
Biljni steroli
kampesterol ulje holesterola
↓TC, supresija
srčanih aritmija, ↓TA,
ω3 PMK DHA, EPA Riba, riblje ulje
↓agregaciju trombocita,
↓angiogenezu
TC, Ukupni holesterol; TG, trigliceridi; LDL, lipoproteini male gustine; PMK, polinezasićene masne kiseline; DHA,
dokozaheksaenska kiselina; EPA, eikozapentaenska kiselina; TA, krvni pritisak.
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 54-58, 2014.
Olivera Ninković Mrđenovački: Uticaj određenih sastojaka hrane na proces ateroskleroze 55
ukupnih masti, zasićenih i trans masnih kiselina, Studija je pokazala da se sa dnevnim unosom od
holesterola, animalnih proteina i rafiniranih ugljenih 2.059mg snižava LDL za 8,9% [18] što je saglasno
hidrata uz povećanu potrošnju kuhinjske soli i rezultatima meta analize 84 kliničke studije u
alkohola, sa nedovoljnim unosom kompleksnih uzimanju fitosterola u dnevnoj dozi od 2.150mg i
ugljenih hidrata, biljnih dijetnih vlakana, nezasićenih postignutoj redukciji koncentracije LDL od 8,8%
masnih kiselina i biljne hrane koja sadrži brojne [19].
bioaktivne sastojake kao što su polifenoli, karoteni, Utvrđeno je da ako bi se obezbedio dnevni unos
fitosteroli i drugi neesencijalni sastojci, doprinosi fitosterola od 2gr mogao bi efektivno da snizi TC i
ubrzanju procesa ateroskleroze i nastanku LDL holesterol za 7-10% sa malim ili beznačajnim
kardiovaskularnih bolesti [6]. efektom na serumski lipoprotein visoke gustine
Istraživanja in vitro, na celularnim i animalnim (HDL) [20].
modelima, epidemiološke i kliničke studije koje
su proučavale efekte određenih sastojaka hrane Dijetna vlakna
kao što su mono i polinezasićene masne kiseline, Istraživanja su pokazala da dijetna vlakna
brojna polifenolna jedinjenja sa antioksidantnim prisutna u voću, zelenom lisnatom povrću,
svojstvima, dijetna vlakna i fitosteroli na proces leguminozama, celim zrnima žitarica imaju direktan
ateroskleroze su pokazala dozno zavisan povoljan hipoholesterolemijski efekat [21], a dijetna vlakna
uticaj ovih sastojaka hrane na snižavanje nivoa rastvorljiva u vodi iz mekinja ovsa i semena bokvice
lipida u krvi i njihove moguće vaskuloprotektivne snižavaju TC i LDL [22].
efekte. Dosadašnja ispitivanja su otvorila i ostavila Opservacione studije su pokazale da su osobe
mogućnosti za nova istraživanja njihove primene koje su konzumirale relativno veliku količinu dijetnih
u ovoj oblasti, a tabela 1 prikazuje moguće vlakana, više od 15 gr dnevno, imale statistički
vaskuloprotektivne efekte određenih sastojaka značajno niži rizik oboljevanja od ishemijske bolesti
hrane [7]. srca (IBS-a) [23], moždanog udara [24] i oboljenja
Navedeni sastojci hrane prirodno se nalaze u perifernih krvnih sudova [25].
voću i povrću, fitoplanktonu kojim se hrane ribe. Rezultati prospektivne kohortne studije koja je
Savremeni način ishrane, koji je prisutan i u većini trajala 8,6 godina i obuhvatila populaciju od 3.588
razvijenih zemalja i zemalja u razvoju, uključujući i osoba starijih od 65 godina je pokazala obrnutu
stanovništvo Republike Srbije, odlikuje nedovoljan povezanost unosa cerealnih vlakana u kasnijem
unos biljne hrane i morske ribe [8,9,10,11], te se životnom dobu sa rizikom od moždanog udara i
savremena prehrambena tehnologija i fitofarmacija ishemijske bolesti srca (IBS-a) [26].
u saradnji sa medicinskim stručnjacima sve više bave U cilju postizanja, održavanja i poboljšavanja
proučavanjem uticaja pojedinih sastojaka hrane na zdravlja ljudi preporučuje se dnevni unos dijetnih
faktore rizika za razvoj ateroskleroze s ciljem da se vlakana u količini od 25-30 gr. Ovaj nivo unosa
putem obogaćivanja pojedinih namirnica i upotrebe se teško realizuje konzumiranjem hrane prirodno
suplemenata poveća njihov unos [12]. bogate vlaknima i zato se preporučuje upotreba
prehrambenih proizvoda obogaćenih vlaknima [27].
Fitosteroli
Fitosteroli su prirodni biljni steroli koji su Nezasićene masne kiseline
strukturno veoma slični holesterolu i kompeticijom Antinflamatorni i antiaterogeni potencijal
sa njim redukuju intestinalnu apsorpciju i ω3 masnih kiselina široko je ispitivan in vitro, na
koncentraciju serumskog lipoproteina niske gustine životinjama i u kliničkim studijama na ljudima.
(LDL), a tako smanjuju i nivo ukupnog holesterola Za razliku od celularnih modela koji su pokazali
(TC) [13]. zaštitnu ulogu ribljeg ulja u nastanku ateroskleroze,
Fitosteroli se poslednjih godina dodaju u rezultati studija na životinjama (primati, svinje,
prehrambene proizvode (margarini, maslac, ulje za zečevi i miševi) iako u većini ukazuju na postojanje
kuvanje, jogurt i drugu hranu) jer se u namirnicama antiaterogenog efekta, u manjem broju pokazuju
prirodno nalaze u veoma malim količinama. neslaganje [28,29].
Istraživanja su pokazala da je serumska vrednost Rezultati meta analize koja je obuhvatila
LDL-a značajno smanjena kada su biljni steroli 60 kontrolisanih studija u periodu od 1970. do
dodati u mleko 15,9% i jogurt 8,6%, ali manje kada 1998. pokazuju pozitivne efekte dijeta sa visokim
su dodati u hleb 6,5% i cerealije 5,4% [14]. procentom mononezasićenih masnih kiselina (MMK)
Kao deo optimalne dijetoterapije u primarnoj na nivo lipida i stepen oksidacije LDL holesterola u
i sekundarnoj prevenciji bolesti KVS-a preporučuje krvi [30].
se fitosterolom obogaćena hrana [15]. Dodatak hrani 2-3gr dnevno ribljeg ulja
Američka asocijacija za srce (America heart (bogatog ω3 masnim kiselina) može da redukuje
association - AHA) [16] i evropski vodič za ishranu nivo triglicerida (TG) za 20-30% i kod osoba su
(European Current Dietary Guidelines) [17] normalnim i sa povišenim lipidima. Polinezasićene
podržavaju upotrebu biljnih sterola kao dopune ω3 masne kiseline u dozi većoj od 3gr dnevno
ishrani kod stanja sa povišenim holesterolom. mogu povećati vrednosti LDL za 5% kod pacijenata
Efekti unosa fitosterola na LDL su zavisni od sa povišenim trigleceridima [31]. Ispitivanje
primenjene doze. U studiji u kojoj je testirana dozna na 4.837 pacijenata posle preležanog infarkta
zavisnost efekata unosa fitosterola na metabolizam miokarda pokazalo je da dnevne doze od 400mg
holesterola u grupi koja je primala dnevno 59mg, polinezasićenih masnih kiselina (PMK) ne mogu
459mg ili 2.059mg fitosterola, značajni rezulati značajno redukovati nivo triglicerida [32].
su postignuti u srednjoj i u grupi koja je primala Američka asocijacija za srce (AHA) preporučuje
najveću dozu. Kod navedene grupe ispitanika da kod pacijenata sa hipertrigliceridemijom većom
uočen je značajan porast izlučivanja holesterola od 5,6 mmol/l, efektivna doza iznosi od 2 do 4gr
kao i redukcija intestinalne apsorpcije holesterola. eikozapentaenske kiseline (EPA) i dokozaheksaenske
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 54-58, 2014.
56 Olivera Ninković Mrđenovački: Uticaj određenih sastojaka hrane na proces ateroskleroze
kiseline (DHA) dnevno zbog sniženja vrednosti in vitro, na celularnim i životinjskim modelima,
triglicerida za 20-40% [2]. epidemioloških, randomiziranih i interventnih
kliničkih ispitivanja može se zaključiti da je postignut
Polifenoli napredak u poslednje dve decenije u definisanju
Ispitivanja efekata unošenja polifenola kroz uticaja određenih sastojaka hrane kao što su
ishranu na čovekov organizam su se značajno razvila fitosteroli, polifenoli, dijetna vlakna i nezasićene
poslednjih 15 godina. Prirodni izvori polifenola su masne kiseline na proces ateroskleroze. Rezultati
povrće, voće, voćni sokovi, kakao, crveno vino i, u istraživanja koji su navedeni u ovom pregledu
manjoj količini, cerealije. Hidroksitirosol i resveratrol daju trenutno razumevanje bioloških efekata
su dva antioksidanta fenola koje sadrži i crveno vino ovih sastojaka na proces ateroskleroze i njihovog
i maslinovo ulje. pozitivnog značaja za zdravlje ljudi.
In vivo studije pokazuju da polifenoli povoljno
deluju u ranim stadijumima razvoja ateroskleroze,
poboljšavaju endotelnu funkciju i povećavaju
oslobađanje nitritnih oksida, moduliraju zapaljenje LITERATURA
i metabolizam lipida (hipolipidemijski efekat),
poboljšavaju antioksidacioni status i štite od 1. World Health Organization. The World health
aterotrombogenih epizoda uključujući agregaciju statistics report 2012. [Internet] [Cited May
trombocita i miokardnu ishemiju. Utvrđeno je da 22 2014]. Available from:http://www.who.
umerena konzumacija crvenog vina prevenira int/mediacentre/news/releases/2012/world_
akutna oštećenja endotelne funkcije izazvane health_ statistics_20120516/en/index.html.
pušenjem cigareta ili konzumacijom veoma masnih 2. De Caterina R.n3 fatty acids in Cardiovascular
obroka [33]. Disease. N. Engl. J. Med.2011;364:2439-450.
Studija na pacijentima sa IBS je pokazala 3. Institut za javno zdravlje Srbije “Dr Milan Jovanović
da je pored crvenog vina konzumacija soka od Batut”. Kalendar zdravlja za 2015. godinu.
nara u trajanju od 18 do 36 meseci usporila [Internet] [cited Sep 27 2015]. Available from:
progresiju ateroskleroze jakim antioksidantnim http://www.batut.org.rs/index.php?content=1274
karakteristikama polifenola iz nara [34]. 4. Milenković S, Borzanović M, Jovanović D.
Ispitivanja na životinjama su pokazala Hiperlipidemija kao faktor rizika ishemijske
antiaterogeni efekat resveratrola iz crvenog vina bolesti srca. Zbornik radova ‘’IX jugoslovensko-
[35,36]. Rezultati u studijama na ćelijskim modelima ruski dani’’, Sarajevo 1988;93.
se slažu u protektivnoj ulozi polifenolnih jedinjenja 5. Badimon L, Vilahur G, Padro T. Lipoproteins,
kao što su hidroksitirosol i resveratrol. I resveratrol platelets and atherothrombosis. Rev Esp
i hidroksitirosol inhibiraju peroksidaciju lipida, kao i Cardiol. 2009;62:1161-78.
agregaciju trombocita, redukuju ekspresiju VCAM- 6. Padwal R, Hemmelgarn B, McAlister F, McKay
1 (vaskularni ćelijski adhezioni molekul – 1) gena D, Grover S, WilsonKhan T i sar. The 2007
u endotelnim ćelijama koji stimuliše inflamaciju i Canadian Hypertension Education Program
aterogenezu [37,38,39]. recommendations for the management of
Istraživanje koje je sprovedeno u Holandiji hypertension, Part 2: Therapy. Can J Cardiol.
na miševima koji su hranjeni antiimflamatronom 2007 15;23(7):539-50.
mešanom dijetom (AIMD) koja se sastojala od 7. Massaro M, Scoditti E, Carluccio AM, De Caterina R.
resveratrola, likopena, katehina, vitamina E, C i ribljeg Nutraceuticals and prevention of Atherosclerosis:
ulja je pokazalo smanjenje imflamatornih riziko- Focus on ω3 Polyunsaturated Fatty Acids and
faktora proaterogenih lipida. AIMD je redukovala Mediterranean Diet Polyphenols.Cardiovascular
citokine-indukovane humanim C-reaktivnim Therapeutics. 2010; 28:e13-e19.
proteinom (CRP) i ekspresiju fibrinogena. AIMD 8. WHO. Diet, nutrition and chronical diseases.
je izrazito snizila nivo holesterola, triglicerida i Tecnical report series. No 916. Geneva: WHO;
amiloida A u plazmi. AIMD je redukovala razvoj 2003.
ateroskleroze za 96% u odnosu na placebo. Efekti 9. Ministarstvo zdravlja Republike Srbije i Institut za
na ateroskelrozu su se ispoljili u redukciji ekspresije javno zdravlje Srbije “Dr Milan Jovanovic Batut”.
vaskularnih zapaljenskih markera [40]. Rezultati istraživanja zdravlja stanovništva
Studije su pokazale vaskuloprotektivnu ulogu Srbije u 2013.godini. Beograd, 2014.
polifenola snižavanjem nivoa holesterola, triglicerida 10. Zečev V, Bjelanović J, Bjelica A. Navike u ishrani
i redukovanjem ekspresije gena koji kontrolišu kod radnoaktivnog stanovništva različitih
sintezu zapaljenskih markera. Zdravstveni efekti zanimanja. Hrana i ishrana. 2014;55(1):31-35.
polifenola zavise od konzumirane količine i njihove 11. Đorđević M, Trajković Pavlović Lj. Značaj stanja
bioraspoloživosti. Unos polifenola kao najbogatijih uhranjenosti, kvaliteta ishrane i nivoa fizičke
antioksidanata dnevno bi mogao biti i veći od 1g aktivnosti studentkinja u proceni rizika za razvoj
[41]. osteoporoze. Hrana i ishrana. 2012;53(2):83-
88.
Zaključak 12. Bioactive components in plants. Benefits and
risk for men and animals. Proceedings from
Uloga pojedinih sastojaka hrane kao što su symposium held at the Norwegian Academy
fitosteroli, polifenoli, dijetna vlakna i nezasićene of Science and Letters. Oslo13-14 November
masne kiseline na zdravlje ljudi je i dalje oblast za 2008. Oslo: Novus forlag; 2010.
istraživanja. Iako su određeni biološki efekti ovih 13. Ostlund RE Jr. Phytosterols in human nutrition.
sastojaka naučno objašnjeni, mehanizmi delovanja Annu Rev Nutr. 2002;22:533–49.
na proces ateroskleroze nisu potpuno rasvetljeni. 14. Clifton PM, Noakes M, Sullivan D, Erichsen N,
Na osnovu uvida u dosadašnja istraživanja Ross D, Annison G, et al. Cholesterol-lowering
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 54-58, 2014.
Olivera Ninković Mrđenovački: Uticaj određenih sastojaka hrane na proces ateroskleroze 57
effects of plant sterol esters differ in milk, atherosclerotic lesions in ApoE-deficient mice.
yoghurt, bread and cereal. Eur J Clin Nutr. Atherosclerosis. 2008;197:524–533.
2004;58:503–509. 29. Zampolli A, Bysted A, Leth T, Mortensen A,
15. Executive summary of the third report of De Caterina R, Falk E. Contrasting effect of
the National Cholesterol Education Program fish oil supplementation on the development
(NCEP) Expert panel on detection, evaluation, of atherosclerosis in murine models.
and treatment of high blood cholesterol in Atherosclerosis. 2006;184:78–85.
adults (adult treatment panel III). JAMA. 30. Mensink RP, Zock PL, Kester AD, Katan MB.
2001;285:2486–2497. Effects of dietary fatty acids and carbohydrates
16. Lichtenstein AH, Appel LJ, Brands M, Carnethon on the ratio of serum total to HDL cholesterol
M, Daniels S, Franch HA i sar. Summary of and on serum lipids and apolipoproteins: A
American Heart Association diet and lifestyle meta-analysis of 60 controlled trials. Am J Clin
recommendations revision 2006. Arterioscler Nutr 2003;77:1146–1155.
Thromb Vasc Biol. 2006;26:2186–2191. 31. Liu S, Manson JE, Stampfer MJ, Holmes M, Hu
17. European Commission. General view of the FB, Hankinson SE i sar. Dietary glycemic load
scientificcommittee on food on the long- assessed by food-frequency questionnaire in
term effects of the intake of elevated levels relation to plasma high density-lipoprotein
of phytosterols from multiple dietary sources, cholesterol and fasting plasma triacylglycerols
with particular attention to the effects of beta- in postmenopausal women. Am J Clin Nutr.
carotene, 2002.[Internet] [cited May 20 2015] 2001;73:560–566.
Available from: http://europa.eu.int/comm/ 32. Kromhout D, Giltay EJ, Geleijnse JM for the
food/fs/sc/scf/index en.html . Alpha Omega Trial Group. ω3 Fatty acids
18. Racette SB, Lin X, Lefevre M, Spearie CA, Most and cardiovascular events after myocardial
MM, Ma L i sar.Dose effects of dietary phytosterols infarction. N Engl J Med. 2010;363:2015–26.
on cholesterol metabolism: a controlled feeding 33. Papamichael C, Karatzis E, Karatzi K, Aznaouridis
study. Am J Clin Nutr. 2010;91:32-8. K, Papaioannou T, Protogerou A i sar. Red wine’s
19. Demonty I, Ras R, Van der Knaap H, Duchateau antioxidants counteract acute endothelial
G, Meijer L, Zock P i sar. Continuous Dose- dysfunction caused by cigarette smoking in
Response Relationship of the LDL-Cholesterol- healthy nonsmokers. Am Heart J. 2004;147:E5.
Lowering Effect of Phytosterol Intake. J Nutr. 34. Davidson MH, Maki KC, Dicklin MR, Feinstein SB,
2009;139:271–84. Witchger M, Bell M i sar. Effects of consumption
20. Abumweis SS, Barake R, Jones PJ. Plant sterols/ of pomegranate juice on carotid intima-media
stanols as cholesterol lowering agents: a meta- thickness in men and women at moderate
analysis of randomized controlled trials. Food risk for coronary heart disease. Am J Cardiol.
Nutr Res. 2008;52, doi:10.3402/fnr.v52io.1811. 2009;104:936–942.
21. Brown L, Rosner B, Willet W, Sacks SM. 35. Wang Z, Zou J, Cao K, Hsieh TC, Huang Y, Wu
Cholesterol-lowering effects of dietary fiber: a JM i sar. Dealcoholized red wine containing
meta-analysis. Am J Clin Nutr. 1999;69:30–42. known amounts of resveratrol suppresses
22. Rideout TC, Harding SV, Jones PJ, Fan MZ. atherosclerosis in hypercholesterolemic rabbits
Guar gum and similar soluble fibers in the without affecting plasma lipid levels [Effects of
regulation of cholesterol metabolism: current dry red wine on experimental atherosclerosis in
understandings and future research priorities. rabbits]. Int J Mol Med. 2005;16:533–540.
Vasc Health Risk Manag. 2008;4:1023–33. 36. Do GM, Kwon EY, Kim HJ, Jeon SM, Ha TY,
23. Liu S, Buring JE, Sesso HD, Rimm EB, Willett Park T i sar. Long-term effects of resveratrol
WC,Manson JE. A prospective study of dietary supplementation on suppression of atherogenic
fiber intake and risk of cardiovascular disease lesion formation and cholesterol synthesis in
among women. J Am Coll Cardiol. 2002;39:49– apo E-deficient mice. Biochem Biophys Res
56. Commun. 2008;374:55–59.
24. Oh K, Hu FB, Cho E, Rexrode KM, Stampfer MJ, 37. Berrougui H, Grenier G, Loued S, Drouin G,
Manson JE i sar. Carbohydrate intake, glycemic Khalil A. A new insight into resveratrol as an
index, glycemic load, and dietary fiber inrelation atheroprotective compound: Inhibition of lipid
to risk of stroke in women. Am J Epidemiol. peroxidation and enhancement of cholesterol
2005;161:161–169. efflux. Atherosclerosis. 2009;207:420–427.
25. Merchant AT, Hu FB, Spiegelman D, Willett WC, 38. Covas MI, de la Torre K, Farre-Albaladejo M,
Rimm EB, Ascherio A. Dietary fiber reduces Kaikkonen J, Fito M, Lopez- Sabater C i sar.
peripheral arterial disease risk in men. J Nutr. Postprandial LDL phenolic content and LDL
2003;133:3658–3663. oxidation are modulated by olive oil phenolic
26. Mozaffarian D, Kumanyika SK, Lemaitre RN, compounds in humans. Free Radic Biol Med.
Olson JL, Burke GL, Siscovick DS. Cereal, 2006;40:608–616.
fruit and vegetable fiber intake and the risk of 39. Correa JA, Lopez-Villodres JA, Asensi R,
cardiovascular disease in elderly individuals. Espartero JL, Rodriguez-Gutierez G, De La Cruz
JAMA. 2003;289(13):1659-1666. doi: 10.1001/ JP. Virgin olive oil polyphenol hydroxytyrosol
jama.289.13.1659. acetate inhibits in vitro platelet aggregation
27. Filipović J, Košutić M, Filipović V, Pezo L. in human whole blood: Comparison with
Testenina sa prehrambenim vlaknima.Hrana i hydroxytyrosol and acetylsalicylic acid. Br J
ishrana. 2014;55(1):27-30. Nutr. 2009;101:1157–64.
28. Matsumoto M, Sata M, Fukuda D, Tanaka K, 40. Verschuren L, Wielinga P.Y, Duyvevoorde W,
Soma M, Hirata Y i sar. Orally administered Tijani S, Toet K, Ommen B i sar. A dietary
eicosapentaenoic acid reduces and stabilizes
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 54-58, 2014.
58 Olivera Ninković Mrđenovački: Uticaj određenih sastojaka hrane na proces ateroskleroze
UVOD
CILJ RADA
Način ishrane značajno utiče na zdravstveno
je bio ispitivanje zastupljenosti voća i povrća u
stanje, mentalnu i fizičku sposobnost studenata, kao
ishrani studenata u Nišu i poređenje sa usvojenim
i radnu sposobnost i kvalitet života. Ukoliko dođe
stručnim preporukama.
do narušavanja ravnoteže potrebnih supstanci u
organizmu, menjaju se određeni metabolički procesi
MATERIJAL I METODE
i ako takvo stanje potraje duže vreme, mogu nastati
bolesti ili stanja koja bitno oštećuju organizam. To
Epidemiološko ispitivanje sprovedeno je u
se u početku manifestuje funkcionalnim, a kasnije i
periodu od septembra do decembra 2011. godine
organskim poremećajima ćelija, tkiva i organa [1].
na Medicinskom fakultetu u Nišu. Istraživanjem su
Ispitivanje kvaliteta društvene ishrane studenata u
obuhvaćeni studenti IV godine farmacije (N=76),
Nišu ima dugu tradiciju [2], dok je porodična ishrana
ali su 7 ispitanika isključena iz studije zbog
ređe ispitivana.
nekompletnosti podataka.
Sadržaj vitamina i minerala u ishrani ima
Pre ispitivanja studenti su bili upoznati sa
poseban značaj, a najvažniji izvori su voće i povrće.
ciljevima i metodologijom ispitivanja i dobijena je
Unos voća i povrća je naročito važan u prevenciji
njihova saglasnost za istraživanje.
masovnih nezaraznih bolesti [3-10], koje su najčešći
Anketiranje studenata je sprovedeno anonimno
razlog umiranja i obolevanja našeg stanovništva.
uz pomoć 24-h upitnika po sećanju [12]. Takođe, na
Nedovoljan unos voća i povrća u detinjstvu i
isti način analizirane su i obrađene istovetne vrste
mladosti nepovoljno utiče na fizički rast i razvoj,
anketa (N=209), koje su sakupljane za potrebe
imunitet, fizičku kondiciju i radnu sposobnost, ali i
drugog ispitivanja sprovedenog 2002.god [13].
na mentalnu kondiciju i mogućnost učenja, što je od
Podaci su međusobno upoređeni, a za statističku
posebnog značaja za učenike i studente [1,11].
analizu upotrebljen je program Excell.
Funkcije vitamina i minerala koji se nalaze
Antropometrijska procena stanja ishranjenosti
u voću i povrću, u organizmu su višestruke: u
ispitanika rađena je na osnovu određivanja indeksa
procesu oslobađanja energije iz makronutrijenata
telesne mase koji je dobijen izračunavanjem nakon
(ugljenih hidrata, masti i proteina), u procesu
merenja telesne mase i telesne visine standardnim
biomineralizacije, kao aktivni delovi metalo-proteina
postupcima. Ispitanici sa indeksom telesne mase
(oko 30% enzima), za funkcionisanje ćelijskih
jednakim ili iznad 30 kg/m2 smatrani su gojaznim, a
membrana, regulisanje ravnoteže tečnosti u telu,
iznad 25 kg/m2 predgojaznim.
sprovođenje nervnih impulsa, kontrakciju mišića itd.
Povećane potrebe za mineralima i vitaminima
REZULTATI
prisutne su kod studenata, posebno u vreme ispita
i pojačanog stresa. Motiv za ovo istraživanja bio je
Ukupno je ispitano 69 studenata, a među
unapređenje studentske ishrane, kroz odgovarajući
ispitanicima su dominirale pripadnice ženskog pola
unos voća, povrća i njihovih proizvoda.
(n=62). Analizirani su podaci studenata starosne
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 59-64, 2014.
60 Prof. dr Maja Nikolić, Martina Nikolić et al.: Unos voća i povrća kod studenata farmacije u Nišu
Muškarci Devojke
Statistika
n=7 n=62
Uzrast (god) 22.43±1.18 22.19±0.69 0.805* ( p>0.05)
Telesna masa (kg) 80.57±9.27 59.05±8.18 6.515* (P<0.001)
Telesna visina (m) 179.57±9.27 166.87±7.34 4.228* (P<0.001)
Indeks telesne mase
23.68±5.31 21.2±2.69 2.060* ( P<0.05)
(kg/m2)
Pušači 1 (14.26%) 9 (14.52%) 0.74** (p>0.05)
2002.god* 2011.god
Statistika
n=209 n=62
Uzrast (god) 25.16±1.05 22.2±0.76 21.610 ( P<0.001)
Telesna masa (kg) 66.3±14.2 61.16±10.56 2.763 (P<0.01)
Telesna visina (m) 171.59±9.32 168.16±8.06 2.737(P<0.01)
Indeks telesne mase
22.33±3.15 21.59±2.91 1.723 (p>0.05)
(kg/m2)
Pušači 29 (42.02%) 10 (14.49%) 0.2# ( p>0.05)
jabuka, kruška, banana, 2 kivija)., odnosno ½ šolje Razlika u unosu voća i povrća kod studenata u
(125 ml) kuvanog ili seckanog povrća [15]. odnosu na tip ishrane prikazana je grafički (grafikon
3, grafikon 4). Rezultati istraživanja pokazuju nešto
veći unos voća u porodičnoj ishrani u odnosu na
2002.godina 2011.godina društvenu, što ukazuje na povoljne porodične
navike. Dostupnost zdravih namirnica u porodici i
70% porodični obrazac ishrane, utiču na svakodnevnu
ishranu mladih. Odvajanjem mladih od porodičnog
60% okruženja dolazi do promena u pogledu izbora hrane.
50% Novi obrazac ishrane često karakteriše korišćenje
hrane pripremljene van kuće, a to podrazumeva
40% i nizak unos voća i povrća, što se može zaključiti
30% i u ovoj studiji. Kod studenata koji se samostalno
hrane zapaža se veći unos prerađevina od voća, pre
20% svega sokova, a smanjeni unos svežeg voća.
10%
0%
vo
proizvodi proizvodi proizvodi proizvodi
Plodovito i korenasto
80,3±53,4 96,7±60,54 -1,38 (p>0.05)
povrće
Prerađevine od
80,95±70,3 17,2±36,9 3,19 (p<0,001)
povrća
Tabela 4. Razlika u unosu voća i povrća (u gramima) kod studenata pušača i nepušača
Nepušači Pušači
p
n=59 n=10
Lisnato zeljasto
123,8±50,9 75,0±7,1 1,31 (p>0,05)
povrće
Plodovito i korenasto
104,6±68,1 70,0±43,2 0,98 (p>0,05)
povrće
Prerađevine od
57,5±27,6 48,0±30,3 0,58 (p>0,05)
povrća
HRANA I ISHRANA (BEOGRAD), VOL. 55. No. 2., 59-64, 2014.
Prof. dr Maja Nikolić, Martina Nikolić et al.: Unos voća i povrća kod studenata farmacije u Nišu 63
The 12th FENS European Nutrition Conference 2015 ECO2015, the 22nd European Congress on Obesity, will
take place in Prague, Czech Republic from 6-9 May
will be organized around 5 major topics presented 2015. The ECO will be hosted by EASO and the Czech
in parallel scientific sessions (rooms>300 seats) and Society for the Study of Obesity (CSSO). Further
specific debates (rooms<120 seats). These will be information will be available in due course.
conducted by various organizers, reaching from the
scientific committee of the FENS Conference and the We are pleased to announce that the 22nd European
National Nutrition Societies to a range of another Congress on Obesity (ECO2015) has been granted
nutrition related organizations and expert groups. 21 European CME credits (ECMEC) by the European
Accreditation Council for Continuing Medical Education
http://www.fensberlin2015.org/ (EACCME).
http://eco2015.easo.org/
This conference provides opportunities for the The 12th International Congress on Engineering
delegates to exchange new ideas and application and Food (ICEF12) will be held in Québec City at
experiences face to face, to establish business or the Québec City Convention Centre, Canada, from
research relations and to find global partners for June 14-18, 2015.
future collaboration. Submitted conference papers
will be reviewed by technical committees of the The goal of ICEF12 is to exchange new scientific
Conference. knowledge of food engineering and to promote the
interaction between professionals from academia,
http://www.icfsn.org/ industry and government. The Congress will explore
new paths for innovations in a rapidly changing
food sector.
http://www.waset.org/conference/2015/07/
zurich/ICNFS
UPUTSTVO AUTORIMA INSTRUCTIONS TO AUTHORS
Saradnici se mole da detaljno i pažljivo pročitaju Contributors are strongly encouraged to read the
predložena uputstva za pripremu radova pre predaje instructions carefully before preparing the manuscript
rukopisa za štampanje. Izuzetno je važno da sarad- for submission and to check the manuscript for com-
nici/autori pripreme radove prema ustanovljenim pliance with the terms before submitting it for publica-
principima jer je to izuzetno značajno za klasifikaciju tion. It is essential for the authors to prepare the man-
naučnih časopisa. uscripts according to the established specifications.
“Hrana i ishrana” je časopis Društva za ishranu Food and Nutrition is the Journal of the Serbian Nu-
Srbije osnovanog 1956. godine, u kome se objavlju- trition Society founded in 1956. Articles
ju radovi članova Društva za ishranu Srbije i članova supplied by the members of the Serbian Nutrition
društava drugih srodnih struka. Objavljuju se origi- Society are published, as well as articles by members
nalni radovi, saopštenja, pregledni radovi, izveštaji of other associations in the field of Public Health Nutri-
sa kongresa i stručnih sastanaka, stručne vesti, tion (PHN) and related fields. The Journal publishes
prilozi, prikazi knjiga, pisma uredništvu i dopisi “U original articles, communications, case reports, review
spomen”. Uz rukopis članka treba priložiti potvrdu s articles, congress and scientific meeting reports, pro-
potpisima svih autora da članak nije objavljen, kao i fessional news, book reviews, obituaries, as well as
da nije u toku razmatranje za objavljivanje. Prispeli comments and letters to the Editorial Board in relation
članak Uređivački odbor upućuje recenzentima radi to the published papers.
stručne recenzije (2 recenzenta). Ako recenzenti The manuscript should be accompanied by signed
predlože izmene ili dopune, kopija recenzije, bez confirmation of all contributors that the paper has not
imena recenzenata, dostavlja se autoru radi njegove been previously published and not submitted for pub-
konačne odluke. Radovi se ne honorišu. Rukopisi se lication elsewhere.
ne vraćaju. The papers are forwarded to the expert evaluation
Rukopis, u dva primerka slati poštom preporučeno and an anonymous copy of the evaluation containing
na adresu: Uredništvo “Hrane i ishrane”, Savska 9/ suggested changes is mailed to the authors for their
II, 11000 Beograd. Neophodno je da se celokup- final consent.
ni materijal (rad) pošalje i elektronskom poštom The authors are not rewarded and the manuscripts
glavnom uredniku na e-mail: petrica @eunet.rs . are not returned.
The manuscripts should be forwarded to the follow-
Opšta pravila ing address: Uredništvo “Hrane i ishrane” Savska 9/
Rukopis članka i svi prilozi treba da budu jasni i II 11000 Beograd, Serbia in duplicate. All papers also
napisani na engleskom ili srpskom jeziku, a za iz- have to be submitted to the Editor-in- Chief as an elec-
radu rada koristiti isključivo tekst-procesor Microsoft tronic version: petrica @eunet.rs
Word. Rukopis treba da je pripremljen na formatu
A4. Sve margine treba da budu 2,5 cm. Stranice je General demands on manuscripts
potrebno numerisati. Koristiti tip slova (font) Times Manuscripts should be written in clear concise Ser-
New Roman, veličine 12. Radove treba kucati pro- bian or English language, using MS WinWord program
redom 1,5. in short and clear sentences. Manuscripts should be
U rukopisu članka obeležiti mesta za slike, sh- on A4 format, all margins 2.5 cm, pages numbered.
eme, grafikone, tabele i ne ostavljati prazan prostor Recommended font is Tames New Roman 12. Papers
u tekstu. Literaturni podaci u tekstu se označavaju should be typed 1,5 spaced. The author(s) should in-
arapskih brojevima u zagradama redosledom kojim dicate in the text where figures and tables fit in. All
se pojavljuju u tekstu, na primer [1,2]. references should be numbered in sequence as they
Skraćenice upotrebljavati samo izuzetno, i to appear in the text and indicated with Arabic numbers in
u slučajevima kada se navode veoma duga imena parentheses - example [1, 2].
hemijskih supstancija ili veoma poznate skraćenice Abbreviations should be avoided, only to be used
(npr., DNK) ali je preporučljivo dati objašnjenje. if appropriate, for very long names of chemical com-
Merne jedinice: dužina, visina, težina i zapremina pounds, or as well-known abbreviations (such as DNA).
označavaju se u metričkim jedinicama (metar - m; Units of measure: Length, height, weight and vol-
kilogram - kg; litar -l) ili podjedinice. Temperatura se ume should be expressed in metric units (meter - m,
izražava u stepenima Celzijusa (°C), koncentracije u kilogram - kg, and liter -l) or their sub-units. Tempera-
molima; uređaji se označavaju trgovačkim nazivima, ture should be given in Celsius degrees (°C). Concen-
a naziv i mesto proizvođača su u zagradama. Svi re- trations are given in moles, proprietary names of instru-
zultati kliničkih i biohemijskih istraživanja izražavaju ments with factory name and place of manufacture in
se u jedinicama međunarodnog sistema mera - SI. parenthesis. All results of clinical and biochemical mea-
Autorstvo. Svi autori treba da budu odgovorni za surements should be expressed in the metric system
autorstvo. Svaki autor treba da aktivno učestvuje u according to the International System of Units – SI.
pisanju članka da bi bio odgovoran za rad u celosti.
Autorstvo se bazira samo na višeslojnom spoju kon- Authorship
cepcije rada, dobijenih rezultata/analize kao i inter- All individuals listed as authors should be qualified
pretacije dobijenih rezultata. Konačna verzija nakon for authorship. Every author should have participated
stručne obrade priprema se za štampu. sufficiently in writing the article in order to take re-
sponsibility for the whole article and results presented
Sastav/struktura rukopisa in the text. Authorship is based only on crucial contri-
Rukopisi treba da sadrže sledeća poglavlja: bution to the article conception, obtaining of results or
naslov, autore, ustanove, kratak sadržaj na srpskom analysis and interpretation of results, and final revision
jeziku sa ključnim rečima, uvod, eksperimentalni of the manuscript being prepared for publication.
deo (materijal, metode), rezultate, diskusiju, zah-
valnica, literaturu i kratak sadržaj (Abstract) na en- Structure of the manuscripts
gleskom jeziku takođe sa ključnim rečima. Pregled- The manuscript has to be arranged as follows: The
ni članak sadrži sledeća poglavlja: uvod, pregled title, Authors, Institutions, Abstract, Introduction, Ex-
slučaja, zaključak i literaturu. Pregledni članak mora perimental part, Results, Discussion, Acknowledge-
da sadrži u literaturi navedena najmanje 4 autocitata ments, and References.
autora. Review articles include Introduction, correspond-
Sva poglavlja se pišu velikim slovima koristeći ing section heading, Conclusions and References. The
oznaku ”bold”. review article may be published only by authors who
Naslov rada. Na posebnoj stranici navesti naslov may cite at least four auto-citations (references in
članka, bez skraćenica, velikim slovima, a ispod naslo- which they are either authors or co-authors).
va navesti imena autora indeksirana brojkama koje od- Title page The title should be short, clear and with-
govaraju onima pod kojima se nalaze nazivi i adrese out abbreviations, typed on the separate sheet. Names
ustanova u kojima autori rade. Pri dnu ove stranice and family names of authors should be written under
otkucati ime i prezime autora odgovornog za dalji kon- the title, as well as full names of their institutions indi-
takt, punu adresu, broj telefona, faksa ili e-mail adresu. cated by corresponding Arabic numbers if there is more
Kratak sadržaj. Uz originalni rad, saopštenje ili than one institution. The address of corresponding au-
pregled iz literature treba priložiti na posebnoj strani- thor, with the telephone, fax number and e-mail ad-
ci kratak sadržaj, koji sadrži naslov rada, prezimena, dress should be added at the bottom of this page.
inicijale imena autora, nazive ustanova i mesta (iz kojih Abstract.Original articles, communications, case
su autori), zatim sadržaj članaka u ne više od 200 do reports, review articles and book reviews; the abstract
300 reči. Za naslove kratkog sadržaja koriste se oznake not exceeding 200 - 300 words should be typed on a
italic i bold, a za tekst sadržaja samo italic. separate sheet of paper. (Srp. Arh) The abstract should
Kratak sadržaj ne treba da sadrži literaturne po- not contain any references.
datke. U njemu se navode, bez opisivanja, bitne Key words. Key words - four to eight, relevant
činjenice, kratak prikaz problema i osnovni zaključak. for rapid identification should be typed below the ab-
U originalnom članku kratak sadržaj treba da sadrži stract in English. In original articles the abstract should
sledeća poglavlja: uvod, cilj, metod rada i zaključak. U have the following structure: introduction, objective,
saopštenju/pregledu kratak sadržaj sadrži sledeća po- method, results and conclusion. In case reports the
glavlja: uvod, pregled slučaja i zaključak. abstract should consist of the following: introduction,
Radovi na engleskom jeziku moraju da sadrže case outline and conclusion.
Kratak sadržaj i Ključne reči na srpskom, sa svim nave- Introduction should be clear, concise, pointing to
denim elementima. the essence of the problem and with the purpose of the
Ključne reči. Na kraju apstrakta/kratkog sadržaja study. References related to the problem should be cited.
dodaju se ključne reči ne više od 8, koje su bitne za The Experimental part should include description
brzu identifikaciju i klasifikaciju sadržaja članka. of materials (subjects) and methods used. If methods
Uvod rada se piše jasno, sažeto, uz navođenje are widely known and described in the literature, only
suštine materije i radova koji su u vezi sa problema- reference(s) should be cited. New or modified meth-
tikom, kao i ciljem istraživanja. odologies should be fully described. Methods used for
Eksperimentalni deo opisuje materijale i metode, parameters calculation and statistical analyses should
bez posebnih detalja ako su već opisani u literaturi be indicated. All abbreviations have to be explained in
(navesti literaturni podatak), a detaljno opisati ako je the manuscript when used for the first time.
metodologija nova ili modifikovana. Potrebno je navesti Results should be clear and precise, with corre-
metode izračunavanja parametara i statističke analize re- sponding statistical analysis.
zultata. Ukoliko se upotrebljavaju skraćenice, pri prvom Discussion encompasses interpretation of the re-
navođenju u tekstu treba napisati i njihov pun naziv. sults and their comparison to the references data. The
Rezultate prikazati jasno i pregledno, sa last two parts can be given together as Results and
odgovarajućom statističkom obradom. Discussion.
Diskusija obuhvata interpretaciju dobijenih rezul- At the end of this part conclusions obtained from
tata i njihovo upoređenje sa literaturnim podacima. Re- the research should be reported.
zultati i diskusija mogu se objediniti. All section headings should be in capital letters us-
Zaključak se daje na kraju teksta jasno i koncizno ing bold lettering.
kao rezultat istraživanja u vidu opšteg zaključka ili više Original articles shall have the following section
pojedinačnih označenih numerički (arapskim brojevima). headings: Introduction, Objective, Method, Results,
Originalni članci sadrže sledeća poglavlja: uvod, cilj Discussion, Conclusion and References
rada, metod, rezultate, diskusiju, zaključak i literaturu. Case reports should consist of introduction, case
Kratak sadržaj (Abstract) na engleskom jeziku tre- outline, discussion, references.
ba da bude otkucan na posebnoj stranici i treba da sadrži
sve elemente kao i kratak sadržaj na srpskom jeziku. Length of the manuscripts
The entire text of the manuscript: title page, ab-
Obim rukopisa stract, the whole text, list of references and captions to
Ceo tekst rukopisa: naslovna strana, kratak sadržaj, figures and tables should have maximum 5 000 words
uvod, eksperimentalni deo (materijal, metode), rezul- for original articles, 2 000 words for communications
tati, diskusija, zahvalnost, literatura uključujući leg- and review articles, 1 500 words for case reports and
ende (tabele, fotografije, grafikone, sheme itd.) mogu up to 1 000words in the section ‘’other’’.
imati 5.000 reči za originalne članke; za saopštenja The total number of figures and tables should not
i pregledne radove 2.000 reči; za stručne izveštaje exceed the half of the number of typed pages of the
1.500 reči a za ostale preglede 1.000 reči. manuscript.
Broj tabela, slika, shema, crteža, grafikona (zajed-
no) može biti najviše do polovine broja kucanih stranica Tables, figures (graphs, charts, pho-
rukopisa. tographs, and illustrations)
Tables are typed on a separate sheet of paper 1,5
Tabele, slike, crteži, sheme, grafikoni spaced, including title, subtitle, headings of lines and
Svaka tabela se kuca na posebnoj stranici prore- columns. They must be identified by Arabic number
dom 1,5, uključujući naslov, zaglavlje kolone i retka. in order or appearance with a shot description of the
Tabele se označavaju arapskim brojevima po redosledu title, abbreviation should be explained. Photographs
navođenja u tekstu. Naslov tabele prikazuje sadržaj ta- should be explained. Photographs should be black and
bele. Upotrebu skraćenica u tabeli obavezno objasniti white and good sharpness. First author’s name, title of
u legendi tabele. Fotografije moraju biti isključivo the manuscript, number of the illustration and arrow
crno-bele, oštrih kontura. Tekst (opis) slike kuca indicating the top of the figure are given on the back
se na posebnom listu hartije. Crteže (sheme i with lead pencil. The legends are given on separate
grafikone) priložiti na posebnom listu (sa precizno sheet. Drawings (schematic drawing and graphs) are
unetim vrednostima na apscisi i ordinati). supplied on separate sheets with lead precise identifi-
Zahvalnica se kuca na kraju teksta a sadrži cation of abscissa and ordinate.
podatke ili izraze zahvalnosti autora na pomoći: Acknowledgements (sources of funding, conflict of
naučnoj, stručnoj, tehničkoj ili finansijskoj. interest declaration, and authorship responsibilities):
this should be included at the end of the text.
Literatura
Literatura se kuca na posebnim stranicama jed- References
nostrukim proredom, a dvostrukim između poje- References should be supplied on a separate sheet,
dinih referenci, s rednim arapskim brojevima prema single spaced, with double space between each refer-
redosledu navođenja u tekstu. ence, Arabic numbers indicating the sequence of ap-
Broj referenci u literaturi ne prelazi 30, osim za pearance.
pregled iz literature gde je prihvatljivo i do 50 jedi- The number of references should not exceed 30,
nica. Reference se navode po ugledu na Vancouver except in literature reviews with maximum 50 is ac-
sistem, koji se zasniva na principima ceptable. References are cited according to the so-
National Library of Medicine i Index Medicus (Srp called Vancouver style, based on formats being used
Arh Celok Lek). Citiranje literature uz poštovanje by the National Library of Medicine and Index Medicus.
određenih standarda izuzetno je značajno za klasifi- (Srp Arh Celok Lek)
kaciju naučnih časopisa. In citation of references the defined standards
should be strictly followed because it is the essential
Za članke u časopisu: factor of indexing and classification of scientific journals.
1.Josselson J, Kyser BA, Weir MR, Sadler JH.
Hepatitis B surface antigenemia in a chronic hemo- The following rules should be applied:
dialysis program: lack of influence on morbidity and Journals:
mortality. Am J Kidney Dis 1987; 9(6):456-61. 1.Josselson J, Kyser BA, Weir MR, Sadler JH. Hepa-
(U zagradama je naveden broj sveske, a ispred titis B surface antigenemia in a chronic hemodialysis
je broj volumena). Navode se imena najviše šest au- program: lack of influence on morbidity and mortality.
tora; ako ih je više, iza šestog se dodaje: i sar. Am J Kidney Dis 1987; 9(6):456-61. (The number of
the volume is given in parentheses, the preceding num-
Knjige: ber indicating the issue). Only up to six names of the
2.Weinstein L, Swartz MN. Pathologic properties authors are quoted, if more than six “et al “ is added.
of invading microorganisms. Philadelphia: Saun-
ders; 1974; 457-72. Books and contributions to books:
2.Weinstein L, Swartz MN. Pathologic properties
Poglavlja u knjigama: of invading microorganisms. Philadelphia: Saunders,
3.Clayton D, Gill C. Covariate measurement er- 1974; 457-72.
rors in nutritional epidemiology: effects and rem-
edies. In: Margetts BM, Nelson M, eds. Design Con- Book chapter:
cepts in Nutritional Epidemiology. Oxford: Oxford 3.Clayton D, Gill C. Covariate measurement errors
University Press, second edition 1997: 87-106. in nutritional epidemiology: effects and remedies. In:
Margetts BM, Nelson M, eds. Design Concepts in Nutri-
Za članke sa kongresa ili sastanaka: tional Epidemiology. Oxford: Oxford University Press,
4.Marković P, Živković L. Uticaj zračenja na po- second edition 1997: 87-106.
javu recidiva. Zbornik radova “II kongres lekara”,
Vrnjačka Banja 1975;315-6. Congress articles:
4.Marković P, Živković L. Uticaj zračenja na pojavu
Stručna izdanja: recidiva. Zbornik radova “II kongres lekara”, Vrnjačka
5.Medical Assessment of Nutritional Status. Banja 1975; 315-6.
WHO. Tech Rep Ser 1993:298.
Other:
Javni/državni izveštaji (zakoni, pravilnici, 5.Medical Assessment of Nutritional Status. WHO.
direktive, izjave): Tech. Rep. Ser. 1993:298.
6.Pravilnik o normativu društvene ishrane dece u
ustanovama za decu. Službeni glasnik RS, Beograd Legislation:
1994;50:1643-9. 6.Pravilnik o normativu društvene ishrane dece u
ustanovama za decu. Službeni glasnik RS, Beograd
Citat internet stranice: 1994; 50: 1643-9.
7.Complementary/Integrative Medicine [Internet].
Houston: University of Texas, M. D. Anderson Cancer Standard citation of links:
Center; c2007 [cited 2007 Feb 21]. Available from: 7.Complementary/Integrative Medicine [Internet].
http://www.mdanderson.org/departments/CIMER/. Houston: University of Texas, M. D. Anderson Cancer
Center; c2007 [cited 2007 Feb 21]. Available from:
Citat internet stranice sa autorima: http://www.mdanderson.org/departments/CIMER/.
8.Hooper JF. Psychiatry & the Law: Forensic Psy-
chiatric Resource Page [Internet]. Tuscaloosa (AL): Links with author(s):
University of Alabama, Department of Psychiatry 8.Hooper JF. Psychiatry & the Law: Forensic Psy-
and Neurology; 1999 Jan 1 [updated 2006 Jul 8; chiatric Resource Page [Internet]. Tuscaloosa (AL):
cited 2007 Feb 23]. Available from: http://bama. University of Alabama, Department of Psychiatry
ua.edu/~jhooper/. and Neurology; 1999 Jan 1 [updated 2006 Jul 8;
cited 2007 Feb 23]. Available from: http://bama.
ua.edu/~jhooper/.