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    In Situ PCR

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    Jose Francisco Pinedo Garcia
    La PCR in-situ permite la amplificación de secuencias de ADN dentro de células individuales manteniendo la morfología del tejido, lo que la hace ideal para investigar la distribución y localización de secuencias genéticas. La técnica implica la reacción en cadena de la polimerasa dentro de la célula para amplificar el ADN, cuyos productos pueden luego visualizarse en el mismo sitio mediante hibridación con sondas marcadas o detección inmunohistoquímica. La PCR in-situ tiene aplicaciones

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    In Situ PCR

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    Jose Francisco Pinedo Garcia
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    La PCR in-situ permite la amplificación de secuencias de ADN dentro de células individuales manteniendo la morfología del tejido, lo que la hace ideal para investigar la distribución y localización de secuencias genéticas. La técnica implica la reacción en cadena de la polimerasa dentro de la célula para amplificar el ADN, cuyos productos pueden luego visualizarse en el mismo sitio mediante hibridación con sondas marcadas o detección inmunohistoquímica. La PCR in-situ tiene aplicaciones

    Descripción original:

    Descripción, fundamento, aplicación y diferencia

    Título original

    In-situ-PCR.pptx

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    La PCR in-situ permite la amplificación de secuencias de ADN dentro de células individuales manteniendo la morfología del tejido, lo que la hace ideal para investigar la distribución y localización de secuencias genéticas. La técnica implica la reacción en cadena de la polimerasa dentro de la célula para amplificar el ADN, cuyos productos pueden luego visualizarse en el mismo sitio mediante hibridación con sondas marcadas o detección inmunohistoquímica. La PCR in-situ tiene aplicaciones

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    La PCR in-situ permite la amplificación de secuencias de ADN dentro de células individuales manteniendo la morfología del tejido, lo que la hace ideal para investigar la distribución y localización de secuencias genéticas. La técnica implica la reacción en cadena de la polimerasa dentro de la célula para amplificar el ADN, cuyos productos pueden luego visualizarse en el mismo sitio mediante hibridación con sondas marcadas o detección inmunohistoquímica. La PCR in-situ tiene aplicaciones

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    In-situ PCR

    Definicin

    La PCR in-situ es un mtodo en el cual la reaccin en cadena


    de la polimerasa, toma lugar en un sitio de la clula, y el
    producto puede ser visualizado de la misma forma que en el
    mtodo tradicional
    Es realizada sobre preparaciones fijas en un portaobjetos.
    Tiene la sensibilidad de la PCR y la resolucin espacial de
    hibridacin in situ.

    Fundamento de PCR In situ.


    Reaccin de PCR en secciones histolgicas o clulas.
    Los productos pueden visualizarse en el sitio de
    amplificacin.

    Se realiza sobre preparaciones fijas en un


    portaobjetos.

    Pueden detectarse cantidades pequeas de


    genoma.

    Esta tecnologa es de gran alcance en la capacidad


    de amplificar especficamente una poblacin de
    secuencias de menor representacin.

    Aplicaciones

    Estudiar la evolucin de las secuencias de un


    gen y los efectos de variabilidad de la
    secuencia en la funcin del cromosoma.
    Amplificar e identificar las secuencias blanco
    in situ.
    Pre diagnostico de enfermedades
    Diagnostico de enfermedades
    Amplificacin de regiones ipervariables

    Ventajas

    La principal ventaja de esta tcnica se basa en la especificidad


    por clulas individuales manteniendo la morfologa del tejido.
    Lo cual la convierte en un procedimiento ideal para investigacin
    la HIS de ADN aporta informacin acerca de la organizacin,
    localizacin, distribucin, nmero de copias, cambios evolutivos
    y mezclas con otras secuencias de cidos nucleicos.

    Desventajas

    La HIS es una prueba mucho ms sensible que otras.

    Sin embargo, es una tcnica costosa que requiere de


    espacio,
    trabajo

    infraestructura
    con

    biologa

    equipos

    molecular,

    el

    adecuados
    personal

    para
    debe

    el
    ser

    capacitado y entrenado para realizar esta tcnica y el


    tiempo de estandarizacin puede ser prolongado.

    Diferencias

    Descripcin: Amplificacin
    intracelular de PCR y deteccin
    de secuencias por hibridacin
    de una sonda marcada o
    deteccin inmunohistoqumica
    de nucletidos marcados.
    Puede llevarse acabo con
    clulas o tejidos fijados en
    solucin.
    Permite la deteccin de ADN
    en el mismo lugar de la
    muestra, sin tener que

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