Practica 1 Micro 2016

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DESARROLLO DE LA PRCTICA PREPARACIN DE

MEDIOS DE ENREQUECIMIENTO Y SELECTIVOS

LOGO DE LA
UNIVERSIDAD

Nombre de la asignatura: Microbiologa General


Nombre de la Unidad de
Aprendizaje:

Nutricin, formulacin de medios de cultivo, crecimiento, esterilizacin

Nombre de la prctica o
proyecto:

Preparacin de medios de enriquecimiento y selectivos

Nmero:

1/1

Duracin (horas) : 4 horas

* Elegir y preparar medios de cultivo comerciales de acuerdo al tipo de


microorganismos que desea multiplicar, aislar o conservar
Resultado de
* Formular medios de cultivo de acuerdo a los nutrientes disponibles y los
aprendizaje:
requerimientos del microorganismo a cultivar
* Determinar el tipo de esterilizacin a emplear de acuerdo a las
necesidades del proceso biotecnolgico que est siguiendo
Material
Medio agar nutritivo:
7 tubos de cultivo de 16 x 150 mm Peptona de casena, NaCl, extracto
con tapn de baquelita
de carne, agar
3 tubos de cultivo de 16 x 150 mm
sin tapn de baquelita
9 cajas de Petri de vidrio
Medio agar papa dextrosa:
3 pipetas de 10 mL
Glucosa
1 Pipeta Pasteur
Extracto de papa
3 matraces Erlenmeyer de 250 mL Agar
1 Parrilla de calentamiento
Requerimientos (Material
1 autoclave
Medio mnimo de sales:
o equipo):
1 potencimetro
Glucosa
1 horno de calor seco
(NH4)2.SO4
1 Mechero, incubadora
K2PHO4
1 Hisopo, algodn, gasa, papel
FeSO4.7H2O
manila
Reactivos
Caldo nutritivo:
Solucin amortiguadora pH 4.0
Peptona de casena
Solucin amortiguadora pH 7.0
NaCl
Extracto de carne
Colorantes para tincin de Gram
Actividades a desarrollar en la prctica:
1. Con apoyo del material de laboratorio requerido, el alumno seguir las indicaciones del
facilitador para preparar material de vidrio y medios de cultivo.
a. Aprender a envolver cajas Petri, pipetas, matraces con medio de cultivo, tubos con
cultivo, tapones de algodn con gasa para su esterilizacin en autoclave.
b. Preparar medio de cultivo nutritivo, agar nutritivo, y medio mnimo de sales: Disolver y
ajustar al pH deseado.

2. El alumno colocar las cajas Petri y pipetas envueltas en un horno a 150 C durante 2 horas,
despus enfriarlas, y abrir los paquetes en un rea asptica. El alumno esterilizar los medios
de cultivo en autoclave: revisar volumen de agua, vlvulas, vapor, encender y dejar que
alcance 121 C o 15 libras de presin durante 15 minutos, mantener temperatura por 15
minutos y apagar.
3. El alumno prepara las cajas Petri y tubos con medio de cultivo. El alumno saca los tubos de
cultivo de la autoclave, los cierra adecuadamente y los deja en una superficie inclinada hasta
que solidifiquen. El alumno saca los matraces con medio de cultivo y los vaca en las cajas
Petri (25-30 mL) en zona asptica cerca del mechero o en campana de flujo laminar. Por
ltimo, los guarda en refrigeracin.
4. El alumno coloca los tubos de cultivo y cajas Petri en forma invertida en una estufa de
incubacin ajustada a 30 C durante 24-48 horas.
5. Realizar la descripcin morfolgica de microorganismos en las cajas Petri con diferentes
medios de cultivo (resultado de la prctica).
MEDIO DE CULTIVO
ABIERTA AL AIRE
ABIERTA EN AREA
CONTROL
ASEPTICA
Agar nutritivo

Mnimo de sales

Papa dextrosa agar

6. Realizar una tincin de Gram en cada uno de los cultivos y llevar a cabo una observacin
microscpica de hongos filamentosos.
7. Con los resultados el alumno integrara un reporte detallado donde incluir: objetivo de la
prctica, fundamento, metodologa, equipo, material y reactivos utilizados, observaciones
esquemas, solucin de cuestionario, conclusin y bibliografa.

Evidencias a las que contribuye el desarrollo de la prctica:


EP1: Medios de cultivo (preparados y esterilizados) listos para la siembra de microorganismos, su
aislamiento y/o identificacin por pruebas bioqumicas.
EP2: Reporte de prctica sobre preparacin de medios de enriquecimiento, selectivos y/o pruebas
bioqumicas.

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