CULTIVOS MENORES CULTIVO DE SPIRULINA

Jos A. Azpilcueta Vsquez, Anny Oblitas Ramos

Docente: Ing. Muoz

Escuela Profesional de Ing. en Acuicultura

Facultad de Oceanografa, Pesquera, Ciencias Alimentarias y Acuicultura

Universidad Nacional Federico Villarreal

2016
I. Resumen
 II. Marco terico

1. Generalidades de las cianobacterias

Las Cyanobacteria, o comnmente algas verde-azules, su origen se remonta al Precmbrico

temprano, hace alrededor de 3000 a 3500 millones de aos, y dada su actividad fotosinttica con
liberacin de oxgeno, se las considera responsables de haber dado origen a la atmsfera oxidante
que hoy conocemos.

Las cianobacterias son bacterias procariotas que presentan el mismo aparato fotosinttico de las
algas eucariotas y de las plantas superiores, adems de la presencia de clorofila-a e incluyendo un
fotosistemas II (PS-II). Este fotosistema as como los pigmentos fotosintticos, los componentes
accesorios y los componentes del transporte de electrones, estn incluidos en los tilacoides.
ntimamente ligados al sistema cloroflico se encuentran unos agregados llamados ficobilisomas o
ficobilinas. Estos grnulos contienen en particular, un pigmento esencial para el transporte de
energa haba el PS-II, la ficocianina. Protena que posee un grupo prosttico del tipo polipirrol, el
cual la confiere un magnifico color azul, asi como una fluorescencia roja de excepcional eficiencia.
Las cianobacterias asimilan el carbono a travs del ciclo de Calvin y almacenan energa y carbono en
forma de glucgeno.

2. Spirulina spp.

2.1 Clasificacin taxonmica

Tabla 1. Ubicacin taxonmica

Dominio: Bacteria

Phylum: Cyanobacteria

Clase: Cyanobacteria

Orden: Oscillatoriales

Familia: oscilatoriaceae

Gnero: Spirulina

Fuente: Rodrguez A., Triana F. (2006)

2.2 Morfologa
Las especies ms representativas en diversas investigaciones son: S mxima y S. platensis, y entre
estas existen diferencias morfolgicas en cuanto a los filamentos, las vacuolas y la regularidad
externa de la cubierta o la capsula de cada filamento, que en la identificacin taxonmica de las
diferentes especies.

Presentan clulas en forma espiral (tricosomas) y una fina membrana externa mucilaginosa llamada
vaina. Las dimensiones celulares, dependen del enrollamiento celular y del largo que pueden llegar
a ser los filamentos. Estas dimensiones dependen del enrollamiento celular y del largo que pueden
llegar a ser los filamentos.

Las condiciones ambientales de crecimiento tambin influirn en su tipo de configuracin, pero

siempre permanece constante de la morfologa en forma helicoidal. Rodrguez A., Triana F. (2006)

Figura 1. Tipos de filamentos y visibles rollos apretados

de una hlice.

2.3 Hbitat

En su mayora se encuentran en aguas muy mineralizadas, extremadamente alcalinas y en ocasiones

calientes, condiciones que logran excluir a la mayora de los seres vivos. Esto se da debido a tres
fenmenos:

Al consumir los carbonatos y bicarbonatos de su medio. La Spirulina spp. Tiende a aumentar todava
ms la alcalinidad del lquido llegando incluso a un pH 11.5

Forman una pantalla muy eficaz, que priva de luz solar a las algas que podran acomodarse a su
medio de cultivo, como por ejemplo Chlorella spp. Una microalga comestible que prolifera a veces
en los cultivos de Spirulina spp poco concentrados.
Es capaz de secretar molculas proteicas como medio de defensa en su medio natural, ha sido
encontrada en lugares como: lagos de Africa, principalmente en Kenia, Etiopa, Egipto, Sudn,
Argelia, Congo, Zaire y Zambia. Ramirez L., Olvera R. (2006)

Reproduccin y ciclo de vida

Un aspecto fundametal es su ciclo de vida, enmarcado por su ubicacin taxonmica, su fisiologa e

implicaciones ambientales de cultivo.

Todas las clulas dispuestas en filamentos o en rosario, tienen la facultad de multiplicarse ppor
biparticin. Hacia los extremos de los filamentos, la divisin es ms frecuente que en la zona
intercalar. Este es un periodo que se puede resumir en tres etapas:

1. Fragmentacin de tricomas
2. La ampliacin de clulas del hormogonio y procesos de maduracin.
3. Alargamiento de tricoma.

El tricoma maduro se divide en varios filamentos u hormogonios pequeos, gracias a la formacin

previa de clulas especializadas, las llamadas clulas de necridio. Que se caracterizan por tomar un
aspecto granuloso, sus tabiques transversales se abombam fuertemente y la clula se vuelve
bicncava, la materia de la clula se reabsorbe para permitir la fragmentacin. La ruptura celular
ocurre por zonas conocidas como disyuntores. Para este proceso, el tricoma crece
longitudinalmente y toma su forma tpica helicoidal.

Figura 2. Ciclo de vida de la spirulina spp.

Fuente: Rodrguez A., Triana F. (2006)

2.4 Aplicaciones

2.4.1 Acuicultura

En el proceso de cultivo de especies tales como microcrustaceos, moluscos y peces consumidores

de placton requieren de reproduccin y cra artificial a gran escala, por lo tanto es de gran inters
plantas pilotos de produccin de cianobacterias para su alimentacin en los primero estados
larvales.

Mejorando adems a especies ornamentales en aspectos de color debido a la presencia de

caroteno. La cra de microcrustceos tambin se ha implementado para el cultivo de peces, pero se
ha comprobado que la eficiencia es mayor con las microalgas y cianobacterias.

2.4.2 Tratamiento de aguas negras

Es utilizada en los tratamientos de aguas residuales debido a que logra remover los nitratos,
fosfatos, y otros elementos presentes en gran cantidad. En piscinas de oxidacin o estanques se
pueden obtener dos productos esenciales: protena vegetal continua y aguas recuperadas, evitando
la contaminacin y eutroficacin activada por la ozonizacin del agua lo cual permite utilizar el agua
para consumo animal e incluso muy cerca de la potabilizacin para consumo humano.

2.4.3 Produccin comercial

La produccin de Spirulina spp. se puede llevar a cabo en sistemas cerrados o abiertos. El primero
implica foto-bioreactores y este no se utiliza en la produccin industrial por su complejidad. El
segundo sistema, denominado Raceway. Debido a su costo de produccin bajo, fcil manejo y alta
produccin de biomasa, se escoge con frecuencia para la produccin industrial. Este mtodo utiliza
una charca con una isleta central y un motor que opera paletas anchas que permite el
desplazamiento continuo del cultivo lquido en la periferia.

El proceso tiene 5 etapas

1. Filtracin y limpieza
2. Pre-concentracin: se realiza el lavado de la biomasa, para la reduccin del contenido de
sales.
3. Concentracin: en la cual se quita la mayor cantidad posible de agua intrseca.
4. Neutralizacin: adicin de una solucin acida ocasionando la neutralizacin de la biomasa.
5. Deintegracion: desintegracin de la biomasa por la molienda.
6. La deshidratacin por secado: implica el 20-30% del costo de produccin.

2.6 Cultivo
2.6.1 Condiciones del crecimiento

Actualmente la mayora utilizan el medio Zarouk clsico para su crecimiento y desarrollo. Aunque
tambin se experimente variables como: la obtencin de pigmentos, cidos orgnicos como el
gama-linoleico, clorofila, carotenoides y desde luego biomasa como fuente proteica.

El crecimiento de Spirulinna spp. bajo cualquiera se las condiciones presenta fases de desarrollo:

1. Fase de adaptacin: acoplamiento del alga donde la tasa reproductiva es baja.

2. Fase de crecimiento exponencial: se puede observar a aqu que el alga se ha adaptado al
medio, la densidad por unidad de tiempo, es proporcional a la biomasa inicial del cultivo.
3. Fase de crecimiento lineal: la multiplicacin celular se extiende, hasta llegar a ocultarse una
clula sobre la otra, produciendo una disminucin de luz. Reduciendo as la tasa de
crecimiento especifico.
4. Fase estacionaria: se observa la disminucin de la tasa de crecimiento, el suplemento
lumnico en las clulas de Spirulina spp. Es limitado y la respiracin aumenta. El metabolismo
oxidativo de sntesis de sustancias llega a reducir el constante aumento de biomasa. En este
punto del crecimiento la curva de crecimiento presenta el valor aproximado de
concentracin de biomasa alcanzando un equilibrio entre la concentracin mxima de
biomasa y la perdida debida a los procesos de degradacin.
5. Fase de muerte: las clulas de Spirulina spp. mueren liberando materia orgnica.

Temperatura

Es importante tener en cuanta dos tipos de tempratura la de ambiente y la del medio del cultivo, ya
que la temperatura influye de manera directa en la velocidad de crecimiento de Spirulina spp., la
mxima velocidad de crecimiento se da ntrelos 35 38C. los cambio bruscos de tempratura
disminuyen el rendimiento de la biomasa.

Iluminacin

Indispensable para el crecimiento de Spirulina spp. Debido al proceso de la fotosntesis

determinante para su constitucin estructural. La iluminacin se debe mantener controlada en foto-
periodos de tiempo 12/12 da/noche); favoreciendo durante el da la asimilacin de CO2 a travs
del ciclo de Calvin y durante la noche ocurren reacciones bioqumicas de sntesis de material
proteico.

Agitacin

Es indispensable agitar el cultivo, para poder as favorecer a la dispersin homognea de la

cianobacteria en el lquido y la exposicin a la luz por parte de todos lo filamentos para mantener
activo su metabolismo fotosinttico.

pH
El medio de cultivo se alcaliniza por el consumo de la fuente de carbono, lo que genera bases como
el NaOH.

Su medicin puede convertirse en una evaluacin de la cantidad de biomasa en el medio.

2.6.2 Sistemas de cultivos

Sistemas abiertos

La mayor parte del cultivo comercial es realizado en este tipo de sistemas, debido a su bajo costo
en construccin y operacin, adems de ser ms duraderos que los cerrados.

La gama de sistemas abiertos que se utilizan ms son:

a) Sistemas incliandos
b) Tanques circulares
c) Tanques raceway

Figura 3. Sistemas inclinados, tanques circulares y tanques receway en Cyanotec (Hawai )

Este ltimo son tanques con baja profundidad que es recirculado con ayuda de ruedas de paletas.
Existen cultivo que se encuentran de manera natural en los lagos, aprovechados para la explotacin
de la Spirulina spp. Como sucede en la ciudad de Mexico. Barra R. (2010)

Fotobioreactor Figura 4. Vista area del algo de Mxico

Fuente: Barra R. (2010)

Este tipo de sistemas son considerados como cultivos donde la luz no invade directamente la
superficie del cultivo, sino pasa a travs de una pared transparente antes de alcanzar las clulas
cultivadas, limitando el intercambio directo de gases y la contaminacin con agentes contaminante
como el polvo, microrganismo, etc.

Existe tipos de fotosistemas como

a) Fotobioreactor tubulares
b) Fotobioreactor planos
c) Cilindro verticales y fundas

Figura 5. Fotobioreactor helicoidal, fotobioreactor planos y por ultimo columnas verticales.

Fuente: Barra R. (2010)

III. Objetivos

Objetivo general

Realizar y aprender a cultivar la microalga Spirulina spp. dentro del laboratorio a menor escala.

Objetivo especficos

Realizar el procedimiento de manera correcta del proceso de cultivo.

Determinar el tipo de nutrientes a utilizar para el desarrollo del cultivo.
Identificar las etapas del proceso del cultivo de la microalga.
Reconocer a la spirulina dentro del microscopio (morfologa).
Aprender a realizar la cosecha de Spirulina spp.

IV. Mtodo
Procedimiento para el cultivo de Spirulina
 1. Nos desinfectamos las manos con jabn lquido antibacterial
2. Se limpi la botella con el alcohol y se coloc en la mesa.
3. Se rotul la botella y se sac dos litros de agua
4. Luego se pes los compuestos qumicos en la balanza analtica, en papel aluminio y
se rotul.
5. Despus aadimos los compuestos pesados a la botella.
6. Se agregaron los cidos con la ayuda de pipetas a la botella.
7. En la fuente se coloc el paliglobo y se le agreg el agua hervida.
8. Prepar el tapn para la botella y colocamos el paliglobo desinfectado.
9. Conectamos la conexin de aire y dejamos la botella a la luz.

Procedimiento para la siembra y cosecha de Spirulina

1. Despus de la aireacin y la preparacin del medio, se filtra la cepa de Spirulina, con

la malla y lembudo.
2. Se sac el tapn de la botella, agregamos la sepa ya filtrada.
3. Se coloc el tapn a la botella y colocamos aireacin.
4. Se coloc la malla en el colador.
5. Vaciamos la botella de la Spirulina sin remover.
6. Se coloc la malla en la mesa y esparcimos la Spirulina con la esptula.
7. Luego se enchufo la secadora de cabello para secar la Spirulina.
8. Se sec el mortero, piln y placa petri, con la ayuda de la secadora de cabello o
papel toalla.
9. Cuando ya estuvo seco el mortero, se agreg la Spirulina, para moler la muestra.
10. Se pes la placa petri, se tar la balanza, por lo tanto se agreg la Spirulina para
pesar
11. Despus de pesar se empez a encapsular la Spirulina.

V. Resultados

VI. Discusin y conclusiones

Durante la primera fase de desarrollo del cultivo de Spirulina spp. se logr observar la
fase de adaptacin de la microalga con el medio, el cual duro un periodo aproximado
de tres das observando el cambio de color a verde claro, en caso contrario no se llega
a observar ningn cambio, lo cual determina la cada del cultivo, posiblemente
ocasionado por el valor del pH dentro de este, ya que este parmetro afecta a la
adaptabilidad de la Spirulina spp. siendo favorable en un pH alcalino para su crecimiento
lo cual est de acuerdo con hallazgos anteriores. Pelizer L. (2002)
 Segn. Rodrguez A., Triana F. (2006) en su experiencia desarrollada del cultivo de
Spirulina spp. determino que a un pH de 0.9 es el ms adecuado para el incremento de
la biomasa.

EL desarrollo de la ltima etapa del cultivo se realiz luego de varios meses de iniciado
el cultivo, llegando a obtener la produccin en peso seco de la cosecha 0.9 gramos en
5 litros, a diferencia de lo desarrollado por Huarachi R. (2013) quien realizo la
produccin de Spirulina platensis (cyanophyta) utilizando el sistema fotobioreactor
tubular cnico bajo condiciones de laboratorio, realizando la cosecha y obteniendo en
peso seco 0,51g de biomasa por da.

Conclusiones

A un pH alcalino se desarrolla mejor la produccin de Spirulina spp. a diferencia

del pH meno alcalino que afecta y demora ms en la produccin de biomasa,
adems de causar la cada rpida del cultivo.
El sistema utilizado para el desarrollo del cultivo debe ser el adecuado y
econmico para la mayor obtencin de la biomasa final.

VII. Recomendaciones

El envase donde se desarrollara el cultivo debe estar completamente limpio

libre de algn contaminante externo.
Durante el proceso de cultivo, se recomienda ser cuidadoso y limpio al
momento de agregar los nutrientes al cultivo.
Una agitacin muy brusca puede provocar la aparicin de espuma, que
obstaculiza la penetracin de la luz y el intercambio gaseoso del cultivo.
La exposicin de la luz controlada es importante para los filamentos ya que si
se excede este podra ser destruido por fotolisis.
Es necesario manejar e investigar acerca del mtodo de desarrollo de tu cultivo
para poder prolongar el tiempo de vida til.
El producto final obtenido de la cosecha debe ser almacenado en un lugar fresco
y seco.

VIII. Referencias bibliogrficas

Barra R. (2010). Diseo de un fotobioreactor industrial para cultivo de

spirulina (Arthrospira platensis). Guayaquil-ecuador. Tesis de ttulo. Ledo en :
https://www.dspace.espol.edu.ec/bitstream/123456789/24663/1/TESIS%20R
ONNY%20%20BARRA.pdf
 Huarachi R. (2013). Produccin de spirulina platensis (cyanophyta) en
fotobioreactor tubular cnico bajo condiciones de laboratorio. The Biologist
(Lima), 2013, 11(2), pg 217-227. Ledo en
http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/biologist/v11_n2/pdf/a4v11n2.pdf

Ramrez L., Olvera R. (2006). CONOCIMIENTOS ACERCA DEL ALGA SPIRULINA

(ARTHROSPIRA). publicado en Interciencia, vol.31 (n 009) 2006, Venezuela.
Ledo en:
http://www.agroindustria.gob.ar/sitio/areas/acuicultura/publicaciones/_archi
vos//080515_Acuicultura%20de%20organismos%20vegetales.pdf

Rodrguez A., Triana F. (2006).Evaluacin del pH en el cultivo de Spirulina

spp.(=Arthospira) bajo condiciones de laboratorio. Trabajo de grado. Pontifica
universidad javeriana. Bogot Colombia. Ledo en
http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis261.pdf.

Pelizier L., Carvalho J., Sato S., De olivera I., (2002) Spirulina platensis.
Estimacin del crecimiento por la determinacin del pH en diferentes
condiciones de cultivos. Electronic journal of biotech. Vol 5 N3. Valparaiso
Chile. Ledo en
http://www.ejbiotechnology.info/content/vol5/issue3/full/8/index.html

IX. Anexos