Método Microbiológico Preparación de Medios de Cultivo 3

Informe Práctica N° 03
MÉTODO MICROBIOLÓGICO:
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE
CULTIVO
- RESULTADOS
Dibujar el método utilizado en la práctica.
AGUA DE PEPTONA AL 0,1% PLATE COUNT AGAR
1. Utilizando un trozo de papel aluminio pese cuidadosamente el medio.
2. Coloque el polvo en un erlenmeyer de 250 mL. limpio y seco y agregue

cuidadosamente el agua destilada medida en la probeta.
3. Mezcle la preparación con movimientos giratorios hasta la completa disolución.

❏ CONTINUACIÓN DEL PROCEDIMIENTO PARA EL AGUA DE PEPTONA AL
0,1%
• Elabore tapones de algodón

para los tubos.
• Distribuya el medio líquido con una

pipeta graduada a razón de 9 ml
en cada tubo.
• Coloque en los tubos los tapones de

algodón, evitando que queden flojos o muy
compactos.
• Disponga los tubos en una canastilla de

metal resistente al calor, envuélvalos con
papel,identifíquelos con el nombre del medio
la fecha de preparación.
• Esterilizar los tubos en autoclave a 121°C ,
15 lb. de presión, durante 20 minutos.
❏ CONTINUACIÓN DEL PROCEDIMIENTO PARA PLATE COUNT AGAR:
• Colocar en una cocinilla hasta disolver el medio.
• Disponga el erlenmeyer en una canastilla de

metal resistente al calor, envuélvalos con papel,
identifíquelos con el nombre del medio, la fecha
de preparación.
• Esterilizar los tubos en autoclave a 121°C ,15 lb. de

presión, durante 20 minutos.
• Colocar de 15 a 20 mL. del medio a cada
placa de Petri previamente esterilizadas.
● Dejar enfriar, luego guardar en refrigeración en posición

invertida hasta el momento de su uso.
VI.- CUESTIONARIO:
1. Mencione y explique porque algunos medios de cultivo no deben ser esterilizados en

el autoclave.
● Medios de cultivo que no se puedan someter a una temperatura superior a 100ºC sin que
pierdan alguna de sus propiedades, como leche, azúcares, suero, etc.
● No se utilizan para medios de cultivo o soluciones proteicas porque producen
alteraciones de los componentes.
● También porque se puede formar emulsiones con el agua
● Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metálicos
● Medios de cultivo en polvo, ya que no soportan la esterilización en vapor o por que el
óxido de etileno no puede penetrar en ellos
2. ¿Qué función cumplen los medios que contienen colorantes?
1. Permiten hacer visibles a los objetos microscópicos y transparentes.

2. Revelan su forma y tamaño.
3. Muestran la presencia de estructuras internas y externas.
4. Producen reacciones químicas específicas.
3. ¿Cómo se realiza la eliminación de material contaminado en laboratorios de
microbiología?
● No se debe descartar ningún material contaminado directamente al desagüe ni en los

depósitos de basura.
● Todo el material contaminado (vidrio, metálico, etc.) deberá ser colocado en
recipientes irrompibles y resistentes al calor, ubicados en el área de trabajo. Si el
material es desechable debe ser colocado directamente en las bolsas rojas de desechos
biológicos.
● Todo material reutilizable contaminado deberá seguir la siguiente secuencia de
tratamiento:
1. Esterilización: por calor húmedo (autoclave), por calor seco (horno), etc.
2. Lavado
3. Secado
4. Preparación
5. Esterilización
6. Almacenamiento
● Todo material no reutilizable contaminado deberá seguir la siguiente secuencia de

tratamiento:
1. Esterilización (autoclave o incineración) en bolsas rojas plásticas de desechos
biológicos, marcadas con un código de color.
2. Eliminación de las bolsas bien anudadas.
4. Mencione 10 medios (líquidos y sólidos) usados en su especialidad.
N° MEDIO ESTADO UTILIDAD
1
Sólido - Aislamiento y cuenta de
microorganismos poco exigentes, a
partir de varias muestras.
- Pruebas de comparación de
esterilidad.
Agrar nutritivo
2
Sólido - Aislamiento y cultivo de
micobacterias. Con su crecimiento.
- Diagnóstico microbiológico de la
tuberculosis.
Medio de löwenstein-jense
3
Sólido - Aislamiento de Pseudomonas
aeruginosa, favoreciendo la
producción de pigmentos.
Agar cetrimida
4 - La adición de vancomicina es útil

Sólido para el aislamiento selectivo de cepas
de Neisseria gonorrhoeae y N.
meningitidis.
Agar chocolate con

isovitalex y vancomicina
5
Sólido - Aislamiento e identificación de
especies de Candida.
- El medio contiene cloranfenicol para

inhibir el desarrollo de bacterias.
CHROMagar (Candida
Medium)
6 - Enriquecimiento de muestras en
Líquido donde se sospecha la presencia de
bacterias enteropatógenas del género
Salmonella.
- Suprime el crecimiento de bacterias
Gram positivas y de la mayoría de las
bacterias del tracto gastrointestinal.
Caldo selenito
7 - Favorecer el desarrollo de C. jejuni

Líquido subsp jejuni.
Caldo tioglicolato Campy

8 - Recuperación de coliformes fecales
Líquido y totales.
- Contiene sales biliares que inhiben
el crecimiento de otros
microorganismos.
Caldo EC
9 - Enriquecimiento y recuperación de
Líquido cepas del género Salmonella.
- Inhibe el crecimiento de coliformes
y favorece el desarrollo de bacterias
que contienen la enzima tetrationato
reductasa (Salmonella).
Caldo tetrationato
10 - Recuperación de Salmonella y
Líquido Shigella.
- Contiene citrato de sodio y
desoxicolato sódico, que inhiben a las
bacterias Gram positivas y a los
coliformes.
Caldo GN
5. ¿Por qué es necesario ajustar el pH en algunos medios de cultivo?
Por la concentración de iones de hidrógeno ayuda en el crecimiento de los

microorganismos. Estos se desarrollan mejor en medios donde el pH es neutro, también
hay algunos que necesitan medios más o menos ácidos. Se ve que la presencia de ácidos o
bases en proporciones que no impidan el crecimiento bacteriano, aún así, pueden inhibir o
hasta alterar los procesos metabólicos normales.
Si observamos un cierto contacto de la raíz con el pH de la solución nutriente, puede

afectar su crecimiento vegetal: El pH afecta la disponibilidad de los nutrientes, además del
proceso fisiológico de adsorción de los nutrientes por las raíces.

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Dibujar el método utilizado en la práctica.

AGUA DE PEPTONA AL 0,1% PLATE COUNT AGAR

1. Utilizando un trozo de papel aluminio pese cuidadosamente el medio.

2. Coloque el polvo en un erlenmeyer de 250 mL. limpio y seco y agregue

3. Mezcle la preparación con movimientos giratorios hasta la completa disolución.

• Elabore tapones de algodón

• Distribuya el medio líquido con una

• Coloque en los tubos los tapones de

• Disponga los tubos en una canastilla de

❏ CONTINUACIÓN DEL PROCEDIMIENTO PARA PLATE COUNT AGAR:

• Colocar en una cocinilla hasta disolver el medio.

• Disponga el erlenmeyer en una canastilla de

• Esterilizar los tubos en autoclave a 121°C ,15 lb. de

● Dejar enfriar, luego guardar en refrigeración en posición

1. Mencione y explique porque algunos medios de cultivo no deben ser esterilizados en

2. ¿Qué función cumplen los medios que contienen colorantes?

1. Permiten hacer visibles a los objetos microscópicos y transparentes.

● No se debe descartar ningún material contaminado directamente al desagüe ni en los

● Todo material no reutilizable contaminado deberá seguir la siguiente secuencia de

4. Mencione 10 medios (líquidos y sólidos) usados en su especialidad.

N° MEDIO ESTADO UTILIDAD

4 - La adición de vancomicina es útil

Agar chocolate con

- El medio contiene cloranfenicol para

7 - Favorecer el desarrollo de C. jejuni

Caldo tioglicolato Campy

5. ¿Por qué es necesario ajustar el pH en algunos medios de cultivo?

Por la concentración de iones de hidrógeno ayuda en el crecimiento de los

Si observamos un cierto contacto de la raíz con el pH de la solución nutriente, puede

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