Protocolo de Procedimientos de Quimica Sanguinea

Protocolo
PROTOCOLO DE PROCEDIMIENTOS DE
QUIMICA SANGUINEA DEL HOSPITAL LA
MARIA
Área de Laboratorio Clínico

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Tabla de contenido
1. Introducción y alcance ______________________________________________ 5
2. Objetivo ____________________________________________________________ 5
3. Roles y Responsabilidades __________________________________________ 5
4. QUIMICA SANGUINEA ______________________________________________ 6
Equipo analizador: Cobas c311 _______________________________________________ 6
Especificaciones técnicas _________________________________________________ 6
Cobas Link _______________________________________________________________ 8
Muestras con y sin código de barras_______________________________________ 10
Operación de rutina previa ________________________________________________ 12
Control de Calidad _______________________________________________________ 13
Solicitud de mediciones de CC ______________________________________________ 16
5. DETERMINACIONES DE QUIMICA SANGUINEA ______________________ 16

Ácido úrico ______________________________________________________________ 16
Alanino Aminotransferasa (ALT/GPT) ______________________________________ 22
Aspartato Aminotransferasa (AST/GOT) ____________________________________ 26
Albúmina ________________________________________________________________ 28
Albúmina en Suero _______________________________________________________ 28
Albúmina en orina (microalbuminuria) _____________________________________ 32
Amilasa _________________________________________________________________ 36
Bilirrubina Directa ________________________________________________________ 41
Bilirrubina Total __________________________________________________________ 45
Calcio ___________________________________________________________________ 48
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Complemento C3 _________________________________________________________ 52
2.10 Complemento C4 _____________________________________________________ 55
2.11 Colesterol ____________________________________________________________ 58
2.12 Creatinina ____________________________________________________________ 62
2.13 Creatinkinasa (CK) ____________________________________________________ 68
CreatinKinasa Fracción MB _________________________________________________ 72
Dimero D _________________________________________________________________ 79
Factor Reumatoide ________________________________________________________ 83
Fosfatasa Alcalina _________________________________________________________ 86
Fósforo __________________________________________________________________ 90
Gamma Glutamiltransferasa (GGT) __________________________________________ 95
Glucosa __________________________________________________________________ 98
Hemoglobina Glicosilada __________________________________________________ 102
HDL Colesterol ___________________________________________________________ 109
Hierro ___________________________________________________________________ 114
Lactato__________________________________________________________________ 118
2.25 Lactato Deshidrogenasa (LDH) ________________________________________ 122
Lipasa __________________________________________________________________ 125
Magnesio _______________________________________________________________ 128
Prealbúmina _____________________________________________________________ 133
Proteína C Reactiva (PCR) ________________________________________________ 136
Proteínas Totales en Suero y Plasma _______________________________________ 139
Proteínas Totales en Orina y LCR __________________________________________ 143
Triglicéridos _____________________________________________________________ 149
Otras Lipoproteínas (Perfil Lípidico) _________________________________________ 152
Urea/BUN _______________________________________________________________ 155
Osmorlaridad sérica ______________________________________________________ 159
Química de Líquidos Estériles ________________________________________________ 160
Líquido Cefalorraquídeo LCR ______________________________________________ 160
Glicemia ________________________________________________________________ 161
Cloruros _________________________________________________________________ 161
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Proteínas totales _________________________________________________________ 162

Lactato__________________________________________________________________ 162
Líquido Sinovial (Articular) _________________________________________________ 162
Glucosa _________________________________________________________________ 163
Ácido úrico ______________________________________________________________ 163
Proteínas totales _________________________________________________________ 163
Líquidos de Cavidades Serosas ____________________________________________ 163
Gradiente de albúmina plasmática-albúmina de líquido ascítico (GASA) _________ 165
Glucosa _________________________________________________________________ 166
Amilasa _________________________________________________________________ 166
Triglicéridos _____________________________________________________________ 167
Panel Cardíaco (Troponina I, Mioglobina) ______________________________________ 167
Cobas b 121 (BEG). GASES ARTERIALES Y ELECTROLITOS __________________ 178
6. ALMACENAMIENTO Y TRANSPORTE ______________________________ 180

7. ANEXOS _________________________________________________________ 204
8. REFERENCIAS ___________________________________________________ 206
9. Historial de versiones _____________________________________________ 208
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1. Introducción y alcance
El laboratorio clínico E.S.E la María ha aumentado su participación en el apoyo al
diagnóstico, seguimiento y tratamiento de las enfermedades, las decisiones clínicas
basadas en los resultados de los exámenes de laboratorio se toman
adecuadamente cuando las condiciones bajo las cuales se ha recogido la sangre u
otras muestras, están adecuadamente identificadas y estandarizadas.
Aplica al personal de laboratorio encargado de la toma y procesamiento de muestras

del área de química sanguínea y de la gestión de la calidad para la validación de
sus resultados; aplicable a las muestras procedentes de los distintos servicios
hospitalarios, y de los usuarios que acceden al laboratorio por consulta externa.
2. Objetivo
Estandarizar los procedimientos en el área de química clínica como herramienta del
sistema de gestión de calidad del laboratorio Clínico para unificar conceptos,
minimizar los riesgos asociados al proceso y entregar resultados confiables y
basados en la evidencia científica disponible.
3. Roles y Responsabilidades
Responsabilidades:

Área: Rol:

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4. QUIMICA SANGUINEA
Equipo analizador: Cobas c311
Especificaciones técnicas
El analizador cobas c 311 es un analizador automático controlado por software para

el análisis de química clínica. Está concebido para determinaciones in vitro tanto
cuantitativas como cualitativas usando una gran variedad de tests para análisis.
El analizador cobas c 311 lleva a cabo ensayos fotométricos y mediciones por
iónselectivo y utiliza suero/plasma, orina, LCR y sobrenadante como tipos de
muestra.
 Analizador completamente automatizado de acceso

Sistema aleatorio para Química clínica, Electrolítos e
inmunoensayos homogéneos (HIA)
Rendimiento de pruebas  Hasta 300 pruebas por hora por técnica de

fotometría
Concepto de reactivos  Reactivos cobas c con códigos de barras y listos

para usar
 Capacidad de reactivos a Hasta 45 ensayos (42 posiciones para cartucho frio

bordo y 3 canales para ISE)
Parámetros programables Hasta 117 fotométricos, 3 pruebas ISE, 8

parámetros calculados y 3 índices séricos
Tipos de muestra  Suero, plasma, orina, LCR y sangre total
Capacidad de muestras a 108 posiciones con acceso continuo y capacidad de

bordo interrupción STAT
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Tipos de contenedores de Tubos primarios: 5-10 mL

muestra  Copas de muestra: 2.5 mL
 Micro copa: 1.5 mL
Volumen de la muestra  1.0 a 35 µL en pasos de 0.1 µL
Detección de coágulos en Si

la muestra
Base de datos de la 10.000 muestras de rutina/STAT

muestra
Métodos de prueba  1 punto + verificación de prozona, 2 puntos, cinética

de 2 puntos, 2 puntos + verificación de prozona, 3
puntos, 1 punto + cinética A, Cinética A + índice
sérico, cinética A con blanco, Cinética B
Métodos de calibración  Lineal, no lineal de puntos múltiples, calibración de

2 puntos, factor K hasta 100 calibradores pre
programables, almacenamiento de hasta 180
curvas, calibración preventiva de los cartuchos en
stand-by
Métodos de control de Tiempo real, control individual y acumulativo, auto

calidad QC, hasta 100 diferentes controles pre
programables, control de calidad preventivo
después de la calibración de los cartuchos en stand
by
 Nueva corrida/repetición/ Nueva corrida automática/ nueva corrida manual,

confirmatoria se soporta repetición y confirmatoria (espejo)
automática
Exactitud/Precisión de los resultados medidos

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Un resultado incorrecto puede ser motivo de un error de diagnóstico, representando

en consecuencia un riesgo para el paciente.
 Para asegurar el uso debido del instrumento, mida muestras de control y
monitoree el instrumento durante la operación.
 No utilice reactivos, calibradores o controles que hayan caducado. Tenga en
cuenta las condiciones de almacenamiento especificadas. De lo contrario,
pueden obtenerse resultados inexactos.
 Para tareas de diagnóstico, los resultados siempre se deben evaluar junto
con el historial del paciente, el examen médico y otros datos.
Áreas y componentes del analizador
Cobas Link
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Plataforma cobas link La plataforma cobas link es la puerta de enlace para recuperar
y distribuir información (por ejemplo, instrucciones de uso, hojas de valores, notas
importantes, y configuraciones del analizador específicas para tests y lotes) desde
la red Roche
Tele Service-Net hasta los analizadores cobas en el laboratorio. Cobas link es una
parte integral y obligatoria de los analizadores de plataforma modular de cobas.
Tele Service-Net (TSN) TeleService-Net es la infraestructura técnica que ofrece a

los analizadores cobas y a los operadores información importante sobre los
productos de Roche.
Tele Service-Net ofrece varias aplicaciones con las que es posible administrar y
visualizar datos e información de instrumentos conectados remotamente.
Estación de datos cobas link La estación de datos cobas link es un ordenador de

escritorio exclusivo con teclado, ratón, monitor e impresora.
Biblioteca electrónica de cobas La biblioteca electrónica de cobas (e-library) es la

interfaz de usuario para trabajar con cobas link en la estación de datos cobas link.
La aplicación principal de cobas link para el operador es la biblioteca electrónica de
cobas, que consta de boletines técnicos (insertos de reactivo) electrónicos y códigos
de barras electrónicos. Esta aplicación se utiliza para buscar, revisar e imprimir los
boletines técnicos (insertos de reactivo) en formato electrónico.
Hay disponible un manual del operador independiente de la biblioteca electrónica
de cobas.
Utilizar los códigos de barras electrónicos a través de la descarga
El operador puede descargar los códigos de barras electrónicos que necesite desde
la estación de datos de cobas link hasta el analizador.
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Hay disponibles los siguientes tipos de códigos de barras electrónicos:

 Datos de aplicaciones
 Datos de calibradores
 Datos de controles
Si los datos de una aplicación concreta (parámetros de la aplicación, datos de
calibradores y datos de controles) no están disponibles en el analizador, esta
información se debe descargar desde cobas link.
Para iniciar la biblioteca electrónica
1 Inicie una sesión en la estación de datos de cobas link con el nombre de usuario
y la clave correspondientes de la biblioteca electrónica.
La clave correspondiente es RemoteRemos, y la Contraseña someRetomeR
2 Confirme con OK.
Aparecerá la pantalla de inicio de la biblioteca electrónica (Nuevas entradas).
Para obtener la información completa del uso de la aplicación Cobas Link consultar
en el Manual del Operador, disponible en el computador del área de Química
Clínica.
Muestras con y sin código de barras
Identificación de las muestras Cuando el sistema se utiliza en el modo de código de

barras, las etiquetas de cada muestra son leídas con el lector de códigos de barras
del disco de muestras. La etiqueta de código de barras de la muestra contiene el ID
de muestra que se utiliza para identificar la muestra y con fines de selección de
tests.
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El número de ID de muestra permite que el sistema realice un seguimiento de las

muestras. Para realizar el seguimiento de las muestras con el software, seleccione
Seguimiento Muestras en la pantalla Panorámica del Sistema.
Cuando se trabaja con muestras con código de barras, en el software sólo se deben
definir posiciones de urgencia.
Cuando se trabaja con ID de pacientes, se deben asignar posiciones al software
para muestras de rutina y urgentes para todos los tipos de muestras.
Modo sin código de barras Si el sistema se utiliza en el modo sin código de barras,
las muestras se identifican mediante un número de secuencia y su posición en el
disco de muestras. Esta asignación debe realizarse en la pantalla Trabajo >Sel.
Tests.
Cuando se trabaja con muestras sin código de barras, se debe definir la posición de
cada categoría de muestra (controles, calibradores y posiciones de urgencia) en el
software.
Compartimento de reactivos
Los reactivos para las aplicaciones fotométricas se almacenan en un compartimento

cerrado a temperatura controlada (5-15 C) que contiene dos anillos concéntricos
con un total de 42 posiciones para los cobas c pack. Hay 14 posiciones en el anillo
interior y 28 posiciones en el anillo exterior.
Para evitar la evaporación de los reactivos, este compartimento cuenta con una
tapa.
Gracias a su diseño, esta tapa no se puede abrir ni quitar. Los cobas c pack se
introducen y se extraen del compartimento mediante un tipo de puerta (con acceso
controlado por el software).
Sistema de gestión de reactivos
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Los reactivos para todas las aplicaciones de Roche se suministran en cobas c

packs. Estos casetes contienen de una a tres botellas de reactivos especialmente
diseñados y disponen de etiquetas con código de barras con información detallada
sobre el reactivo y el test.
El sistema de gestión de reactivos consta de los siguientes componentes:
 Disco de reactivos (dentro del compartimento de reactivos)
 Estación de carga de reactivos
 Lector de códigos de barras
 Perforador
Estación de carga de reactivos
Utilice la estación de carga de reactivos para cargar y descargar los cobas c packs.
Ambos procesos se deben iniciar mediante el software
Tras hacer clic en el botón Cargar, el analizador gira el disco de reactivos hasta una
posición libre. La estación de carga de reactivos está diseñada de forma que un
pack cobas c se puede cargar en sólo una posición del disco de reactivos. Así se
descarta la posibilidad de colocar un casete en una posición incorrecta del disco de
reactivos o de utilizar reactivos inadecuados.
Operación de rutina previa
Antes de iniciar la operación de rutina debe preparar primero el sistema para

operación. La operación de rutina previa comprende las siguientes tareas:
 Realizar intervenciones de mantenimiento
 Borrar los datos y hacer una copia de seguridad de los mismos, si es
necesario
 Preparar los reactivos, detergentes y diluyentes
 Realizar una calibración (De ser necesaria)
 Medir los controles de calidad
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 Descargar parámetros, si es necesario

El área Flujo Trabajo en la parte superior de la pantalla Panorámica del Sistema
guía al operador a través de la operación de rutina previa.
Botón Mantenimiento Diario

El botón Mantenimiento Diario indica cuándo están a punto de caducar los intervalos
de mantenimiento.
Al seleccionar Mantenimiento Diario en el área Flujo Trabajo aparece la pantalla
Mantenimiento. Utilice la pantalla Mantenimiento para ejecutar intervenciones de
mantenimiento.
Se deben Realizar también mantenimientos semanales y mensuales, que se indican
claramente en el manual del operador disponible en el computador de la sección de
química sanguínea.
Control de Calidad
Efectúe con regularidad mediciones de CC para monitorear constantemente el

rendimiento del equipo. Tras la medición de muestras de CC, los resultados se
pueden transferir a un Host o validar en el Host o se pueden validar en el analizador.
Los siguientes métodos de CC están disponibles en un analizador cobas c 311:

CCdiario (intradía), CC acumulado (largo plazo) y CC en tiempo real.
CC diario y acumulado Todos los resultados de las mediciones de CC se pueden

ver en la pantalla CC >Estado serie y en la pantalla CC >Diario. Se recomienda
transferir los datos CC al final del día desde CC diario a CC acumulado. En el CC
acumulado se encuentra toda la información sobre control de calidad a largo plazo
almacenada en el analizador.
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CC Tiempo Real Con independencia del CC diario y acumulado, la función CC en

tiempo real permite la evaluación de la medición del CC inmediatamente después
de que los resultados estén disponibles (tiempo real) utilizando el algoritmo
Westgard.
El CC en tiempo real correspondiente a un test siempre utiliza dos clases de
controles y compara los resultados del CC con los valores de la media y la
desviación estándar (DS) conocidos de los controles.
CC Rutina Cada test tiene uno o varios controles asignados. Además, no sólo se
debe asignar un test a un control, sino que también se debe activar para ese control
con el fin de posibilitar la medición de CC. El CC Rutina comprende todos los tests
activados de todos los controles instalados. Se puede solicitar una medición de CC
de todos estos tests (por ejemplo, al inicio de un turno de trabajo) con un único
comando (Panorámica del Sistema >Selección Calibración y CC >CC Rutina).
CC Reactivo en Standby Es posible solicitar mediciones de CC individuales para

cobas c packs en modo Standby. Los cobas c packs en Standby son los packs ya
cargados en el equipo, pero que no están en uso actualmente.
CC tras calibración Para esta clase de mediciones de CC, no se precisa ninguna
configuración especial.
Las mediciones de CC se llevan a cabo para todos los tests calibrados sin peticiones
explícitas del operador, cuando el control se ha activado y está cargado.
CC Manual Esta función permite medir los CC de cualquier test según su propio
criterio.
Al finalizar la operación diaria, los resultados de medición del CC se deben

acumular.
Al acumular resultados de CC, los datos correspondientes a los
resultadosacumulados se borran de la pantalla CC >Diario y se transfieren a la
pantalla CC >Acumulado.
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Asignar CC Rutina El botón Asignar CC Rutina selecciona todos los tests de CC

Rutina (sólo reactivos activos) para una medición de control. Los tests de CC de
rutina comprenden todos los tests activados de todos los controles instalados.
Los tests que no se van a medir se pueden deseleccionar en la pantalla
Estado: seleccione los tests en la lista de estado y, a continuación, pulse el botón
Deselecc
CC Rutina Para mostrar una lista de todos los tests de CC de rutina actualmente
activados,
Seleccione CC Rutina.
CC Botella Stand By Utilice este botón para seleccionar cobas c packs para CC en
stand by.
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Solicitud de mediciones de CC
Es posible solicitar mediciones de CC individuales para cobas c packs activos y en
Standby cobas c packs activos actualmente en uso. Los cobas c packs en Standby
son los packs ya cargados en el equipo, pero que no están en uso actualmente.
Para ejecutar controles de reactivos activos

1. Seleccione CC >Estado.
2. Si se va a realizar CC de rutina, seleccione CC Rutina para seleccionar todos los
tests actualmente cargados y activados en el analizador para un CC. Si desea
seleccionar tests individuales, vaya al paso 3.
3 Seleccione el test y control apropiados. Puede marcar varios tests y controles.
4 Pulse Selecc. En la columna Selección aparece una barra de color verde. En la
columna Causa aparece Manual. El botón Selecc. Se convierte en Deselecc.
5 Seleccione Guardar para solicitar la medición de los controles seleccionados.
.
Para ejecutar controles de reactivos en Standby
1 En CC >Estado, seleccione CC Botella Stand By para abrir la ventana CC
Botella Stand By.
Elija Selecc. Para seleccionar todos los tests y controles resaltados. En la columna
Selección aparece una barra de color verde. El botón Selecc. Se convierte en
Deselecc.
4 Seleccione OK para solicitar la medición de los controles seleccionados.
5. DETERMINACIONES DE QUIMICA
SANGUINEA
Ácido úrico
Características
El ácido úrico es el producto final del metabolismo de la purina en el organismo
humano. El ácido úrico se determina en el diagnóstico y el tratamiento de
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numerosos trastornos renales y metabólicos, tales como la insuficiencia renal, la

gota, la leucemia, la psoriasis, la inanición y otros trastornos nutricionales, así como
en pacientes bajo tratamiento con citostáticos.
Existen dos procedimientos para la determinación cuantitativa del metabolito de la
purina que se basan en la oxidación del ácido úrico. Uno de ellos consiste en la
reducción, en solución alcalina, de ácido fosfotúngstico a azul de tungsteno que es
medido fotométricamente. Sin embargo, este método está sujeto a interferencias
debidas a fármacos y a otras sustancias reductoras, no sólo al ácido úrico.
El otro procedimiento, descrito por Praetorius y Poulsen, emplea la enzima uricasa
para oxidar el ácido úrico, eliminando así las interferencias intrínsecas del proceso
químico de oxidación. La uricasa puede emplearse en métodos que determinan el
consumo del ácido úrico por mediciones UV o, en combinación con otras enzimas,
en un test colorimétrico.
Otro método colorimétrico ha sido desarrollado por Town et al. La muestra se incuba
con un reactivo que contiene ascorbato-oxidasa y un sistema de aclaramiento. En
una reacción preliminar, el ácido ascórbico presente en la muestra es eliminado
para que no interfiera en la reacción indicadora de POD. Una vez que se añade el
reactivo iniciador, la uricasa comienza a oxidar el ácido úrico.
El presente test de Roche consiste en el método colorimétrico descrito más arriba
con ligeras modificaciones. En esta reacción, el peróxido reacciona en presencia de
la peroxidasa (POD),
N‑etil‑N‑(2‑hidroxi‑3‑sulfopropil)‑3‑metilanilina (TOOS) y la 4‑aminofenazona
para formar un colorante quinona‑diimina. La intensidad cromática del colorante
rojo formado es proporcional a la concentración del ácido úrico y se mide
fotométricamente.
Principio del test

Test enzimático colorimétrico.
El ácido úrico es desdoblado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno.
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La intensidad cromática de la quinona‑diimina formada es directamente

proporcional a la concentración del ácido úrico y es determinada midiendo el
aumento de la absorbancia.
a) N‑etill‑N‑(2‑hidroxi‑3‑sulfopropil)‑3‑metilanilina
Medidas de precaución y advertencias
Obtención y preparación de las muestras

Emplear únicamente tubos o recipientes adecuados para recoger y preparar las
muestras.
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Sólo se han analizado y encontrado aptos los tipos de muestras aquí mencionados.
Suero.
Plasma tratado con heparina de litio y EDTA dipotásico.
Los valores de muestras de plasma tratado con EDTA son inferiores a los valores
obtenidos en suero en aproximadamente un 7 %.
Orina: Determinar el ácido úrico en orina lo antes posible. No refrigerar.
Para prevenir la precipitación de ureato en muestras de orina, añadir hidróxido de
sodio para mantener la orina en estado alcalino (pH > 8.0).
Para obtener la estabilidad de ácido úrico indicada, añadir NaOH antes de recoger
la muestra. Las muestras de orina se diluyen de 1 + 10 con agua destilada o
desionizada o con una solución de NaCl al 0.9 %. La dilución se toma en cuenta al
calcular los resultados.
Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de realizar elensayo.
Estabilidad en suero/plasma: 15 5 días a 2‑8 °C
6 meses a (-15) ‑(-25) °C
Estabilidad en orina16 (tras adición de NaOH): 4 días a 15‑25 °C
Calibración
Calibradores S1: H2O

S2: C.f.a.s.
Modo de calibración Lineal
Intervalo de calibraciones Calibración a 2 puntos
- tras cambiar de lote de reactivos
- si fuera necesario según los procedimientos de control de calidad
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a DI/EM.17
Factores de conversión: mg/dL x 59.5 = μmol/L mg/dL x 10 = mg/L
Limitaciones del análisis - interferencias
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Criterio: Recuperación dentro de ± 10 % del valor inicial con una concentración del
ácido úrico de 7 mg/dL (417 μmol/L).
Suero/plasma
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un índice I de 40 para la bilirrubina
conjugada y sin conjugar (concentración de la bilirrubina conjugada y sin conjugar:
aproximadamente 684 μmol/L o 40 mg/dL).
Hemólisis: Sin interferencias significativas hasta un índice H de 1000 (concentración
de hemoglobina: aproximadamente 621 μmol/L o 1000 mg/dL).
Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas hasta un índice L de 1500. No
existe una correlación satisfactoria entre el índice L (que corresponde a la turbidez)
y la concentración de triglicéridos.
El ácido ascórbico < 0.17 mmol/L (< 3 mg/dL) no interfiere en el test.
Fármacos: No se han registrado interferencias con paneles de fármacos de uso
común en concentraciones terapéuticas. Excepciones: El dobesilato de calcio
provoca valores artificialmente bajos de ácido úrico.
La uricasa reacciona de forma específica con el ácido úrico. Otros derivados de la
purina pueden inhibir la reacción de ácido úrico.
En concentraciones terapéuticas, Dicynone (etamsilato) puede provocar valores
falsamente bajos.
Las intoxicaciones por paracetamol suelen tratarse con N‑acetilcisteína.
Tanto la N‑acetilcisteína, usada en concentraciones terapéuticas como antídoto,
como el metabolito de paracetamol, la N‑acetil‑p‑benzoquinona imina (NAPQI),
pueden causar valores falsamente bajos.
La venopunción debe efectuarse antes de administrar metamizol. Si la venopunción
se realiza inmediatamente después o durante la administración de metamizol,
pueden obtenerse resultados falsamente bajos.
En casos muy raros pueden obtenerse resultados falsos debidos a la gammapatía,
particularmente del tipo IgM (macroglobulinemia de Waldenström).
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Orina
común en concentraciones terapéuticas.20 Excepciones: El dobesilato de calcio, la
levodopa y la metildopa pueden provocar valores artificialmente bajos de ácido
úrico.
En muestras de orina, altas concentraciones de ácido homogentísico provocan
resultados falsos.
En concentraciones terapéuticas, Dicynone (etamsilato) puede provocar valores
falsamente bajos.
Debido a que el acetaminofén, la acetilcisteína y el metamizol se metabolizan
rápidamente, no es probable que interfieran en el test (aunque no se puede excluir).
Para el diagnóstico, los resultados del test siempre deben interpretarse teniendo en
cuenta la anamnesis del paciente, el análisis clínico así como los resultados de otros
exámenes.
Límites e intervalos
Intervalo de medición
Suero/plasma
0.2‑25.0 mg/dL (11.9‑1487 μmol/L)
Determinar las muestras con concentraciones superiores a través de la función de
repetición. Con la función de repetición, las muestras se diluyen 1:2.5. Los
resultados de las muestras diluidas usando la función de repetición del ciclo se
multiplican automáticamente por el factor 2.5.
Orina
2.2‑275 mg/dL (131‑16362 μmol/L)
repetición. Con la función de repetición, las muestras se diluyen 1:2.5. Los
resultados de las muestras diluidas usando la función de repetición del ciclo se
multiplican automáticamente por el factor 2.5.
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Valores teóricos
Suero/plasma
Hombres: 3.4‑7.0 mg/dL (202.3‑416.5 μmol/L)
Mujeres: 2.4‑5.7 mg/dL (142.8‑339.2 μmol/L)
Orina (intervalo de referencia según Krieg y Colombo)
1ª orina de la mañana 37‑92 mg/dL (2200‑5475 μmol/L)
Orina de 24 horas 200‑1000 mg/día (1200‑5900 μmol/día) correspondiente a 13‑67
mg/dL (773‑3986 μmol/L) (partiendo de un volumen de orina de 1.5 L/24 h)
Orina (intervalo de referencia según Tietz)
Dieta normal 250‑750 mg/24 horas
Nutrición baja en purinas
Mujeres < 400 mg/24 horas
Hombres < 480 mg/24 horas
Nutrición alta en
Purinas < 1000 mg/24 horas
Alanino Aminotransferasa (ALT/GPT)
Generalidades
La presencia de la enzima alanina aminotransferasa (ALT) se registra en tejidos de

varios tipos. La ALT se encuentra especialmente en el hígado, razón por la cual su
actividad se determina en el diagnóstico de hepatopatías. Concentraciones séricas
elevadas de ALT acompañan la hepatitis, la cirrosis, la ictericia obstructiva, el
hepatocarcinoma y el alcoholismo. Concentraciones levemente elevadas de ALT se
determinan en pacientes que han sufrido un infarto de miocardio sin complicaciones.
Si bien tanto la aspartato aminotransferasa sérica (AST) como la ALT aumentan en
procesos patológicos que afectan la integridad de los hepatocitos, la ALT es de
ambas la enzima más específica del hígado.
22
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Además, un aumento en la actividad de la ALT es más persistente que un aumento

en la actividad de la AST.
En pacientes con deficiencia de vitamina B6, la actividad sérica de la
aminotransferasa puede disminuir. Una reducción aparente de la actividad de la
aminotransferasa puede estar relacionada con valores disminuidos de fosfato de
piridoxal, el grupo prostético de las aminotransferasas, obteniendo así un aumento
de la relación apoenzima-holoenzima.
Principio del test

El presente test cumple con las recomendaciones de la IFCC, si bien su estabilidad
y funcionamiento han sido mejorados. La ALT cataliza la reacción entre la L‑alanina
y el 2‑oxoglutarato. El piruvato formado es reducido por NADH en una reacción
catalizada por la lactato deshidrogenasa (LDH) para formar L‑lactato y NAD+.

muestras.
Sólo se han analizado y considerado aptos los tipos de muestra aquí indicados.
– Suero (sin hemólisis).
– Plasma (sin hemólisis) tratado con heparina de litio y EDTA dipotásico.
Separar el suero o el plasma inmediatamente del coágulo o de las células.
Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de realizar el ensayo.
Estabilidad: 3 días a 15‑25 °C
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7 días a 2‑8 °C
> 7 días a (-60) ‑ (-80) °C6
Calibración
S2: C.f.a.s.
Intervalo de calibraciones
Calibración a dos puntos
- con cada lote de reactivos
Trazabilidad: El presente método fue estandarizado frente a la fórmula original de la
IFCC pero sin activación por PYP, utilizando pipetas calibradas con un fotómetro
manual que proporciona valores absolutos y la absorptividad específica del
substrato.
Factor de conversión: U/L x 0.0167 = μkat/L

Criterio: Recuperación dentro de ± 10 % del valor inicial con una actividad de ALT
de 30 U/L (0.5 μkat/L).
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un índice I de 60 par bilirrubina
conjugada y sin conjugar (concentración de bilirrubina conjugada y sin conjugar:
La contaminación con eritrocitos provoca resultados aumentados, ya que el nivel de
analito en los eritrocitos es mayor que en los sueros normales. La magnitud de la
interferencia depende del contenido de analito en los eritrocitos lisados.
24
|
Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas hasta el índice L de 150. No

Las muestras lipémicas pueden causar alarmas debido a valores de absorbancia
elevados (> Abs). Seleccionar el tratamiento de muestra diluida para el
reprocesamiento automático.
común en concentraciones terapéuticas. Excepciones: En concentraciones
fisiológicas, la sulfasalazina y la sulfapiridina plasmáticas pueden llevar a resultados
falsos.
En concentraciones terapéuticas, el dobesilato de calcio y la isoniazida provocan
valores artificialmente bajos y la furosemida valores artificialmente altos de la ALT.
El fármaco Cyanokit (hidroxocobalamina) puede causar interferencias con los
resultados.
exámenes.
5‑700 U/L (0.08‑11.7 μkat/L)
Determinar las muestras con actividades superiores por la función de repetición. La
dilución de las muestras por la función de repetición es de 1:10. Los resultados de
las muestras diluidas por la función de repetición se multiplican automáticamente
por el factor 10.
Valores teóricos
25
|
De acuerdo al método estándar optimizado (comparable con el método IFCC sin

activación por fosfato de piridoxal13):
Hombres hasta 41 U/L (hasta 0.68 μkat/L)
Mujeres hasta 33 U/L (hasta 0.55 μkat/L)
Valores calculados: Para convertir de 25 °C a 37 °C, se empleó el factor
1.85.
Aspartato Aminotransferasa (AST/GOT)

Generalidades
La enzima aspartato-aminotransferasa (AST) se encuentra ampliamente distribuida
en los tejidos del organismo, principalmente en el tejido hepático, cardíaco,
muscular y renal. Los niveles séricos de la enzima aumentan en caso de
enfermedades que afectan estos tejidos. Asimismo las afecciones hepatobiliares
tales como la cirrosis, el carcinoma metastásico y la hepatitis viral producen niveles
séricos elevados de AST. Como consecuencia de un infarto de miocardio, la AST
sérica se encuentra aumentada y alcanza su valor máximo 2 días después de
ocurrido.
Los valores séricos de AST pueden estar disminuidos en pacientes en diálisis renal
o con una deficiencia de la vitamina B6. La reducción aparente de la AST puede
estar relacionada con la disminución del nivel de fosfato de piridoxal, el grupo
prostético de AST, que trae como consecuencia un incremento en la relación entre
la apoenzima y la holoenzima.
Se han aislado 2 isoenzimas de la AST, la citoplasmática y la mitocondrial.
En el suero normal sólo se halla la isoenzima citoplasmática, mientras que en el
suero de pacientes con enfermedades coronarias y hepatobiliares, pueden
detectarse tanto la citoplasmática como la mitocondrial.
Principio de test
El presente test cumple con las recomendaciones de la IFCC, si bien su estabilidad
y funcionamiento han sido mejorados.La AST de la muestra cataliza la transferencia
26
|
de un grupo amino entre L-aspartato y 2-oxoglutarato para obtener oxaloacetato y

L-glutamato.
A continuación y en presencia de la malato deshidrogenasa (MDH), el oxaloacetato
reacciona con NADH para formar NAD+.
La velocidad de oxidación de NADH es directamente proporcional a la actividad

catalítica de la AST. Se determina midiendo la reducción de la absorbancia.

muestras.
Sólo se han analizado y encontrado aptas las muestras aquí mencionadas.
Suero.
Plasma tratado con heparina de litio y EDTA bipotásico.
Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de efectuar el test.
Estabilidad: 24 horas a 15-25 °C5
7 días a 2-8 °C
Calibración
S2: C.f.a.s.
Frecuencia de calibración calibración a 2 puntos
- si lo fuera necesario según los procedimientos de control de calidad.
IFCC utilizando pipetas calibradas con un fotómetro manual que proporciona
valores absolutos y la absorptividad específica del substrato.
27
|
5-700 U/L (0.08-11.7 μkat/L)
Determinar las muestras con actividades superiores por la función de repetición del
ciclo. La dilución de las muestras por la función de repetición del ciclo es de 1:10.
Los resultados de las muestras diluidas usando la función de repetición del ciclo se
multiplican automáticamente por el factor 10.
Valores teóricos
De acuerdo al método estándar optimizado (comparable con el método IFCC sin
activación por fosfato de piridoxal):
Hombres: hasta 40 U/L (hasta 0.67 μkat/L)
Mujeres: hasta 32 U/L (hasta 0.53 μkat/L)
Valores calculados: Se ha empleado el factor 2.13 para la conversión de 25 °C a 37
°C.
Albúmina
Albúmina en Suero
La albúmina es una proteína carente de carbohidratos que constituye

aproximadamente el 55-65 % de la totalidad de las proteínas plasmáticas. Sirve
para mantener la presión oncótica en el plasma, está involucrada en el transporte y
almacenamiento de numerosos ligandos y constituye una fuente endógena de
aminoácidos. La albúmina fija y desdobla varios compuestos, como la bilirrubina, el
calcio y ácidos grasos de cadena larga. La albúmina se une asimismo a iones
tóxicos de metales pesados y a múltiples fármacos, razón por la cual la disminución
de la albúmina en sangre puede tener importantes consecuencias farmacocinéticas.
28
|
Excepto en caso de deshidratación, la hiperalbuminemia no reviste gran importancia

diagnóstica. La hipoalbuminemia que acompaña numerosas enfermedades y se
debe a diversos factores: a una síntesis reducida como consecuencia de una
hepatopatía o por absorción disminuida de proteínas, aun aumento en el
catabolismo originado por una lesión tisular (quemaduras graves) o una inflamación,
a la malabsorción de aminoácidos (enfermedad de Crohn), a la proteinuria debida a
un síndrome nefrótico o a la pérdida de proteínas a través de las heces (por
neoplasia). En casos graves de hipoalbuminemia, la concentración plasmática de la
albúmina máxima alcanza 2,5 g/dL (380 μmol/L). Debido a la baja presión osmótica
en el plasma, el líquido pasa de los capilares sanguíneos al tejido (edema). La
determinación de la albúmina permite supervisar a pacientes bajo dieta controlada
y constituye un test excelente del funcionamiento hepático.
Principio del test

Test colorimétrico.
Con un pH de 4,1 la albúmina tiene un carácter suficientemente catiónico como para
formar un compuesto con el verde de bromocresol (BCG), colorante aniónico,
formando un complejo azul verdoso.

muestras.
Suero.
No emplear plasma con fluoruro.
Estabilidad: 2-5 meses a 15-25 °C
29
|
5 meses a 2-8 °C
4 meses a (-15)-(-25) °C
Calibración
Calibradores S1: H2OS2: C.f.a.s.
Frecuencia de calibraciones calibración a 2 puntos
- en el analizador, tras 4 semanas
- y según lo requiera el control de calidad
Factores de conversión:
g/L x 15,2 = μmol/L
μmol/L x 0,0658 = g/L
g/L x 0, 1 = g/dL

Criterio: Recuperación dentro de ± 10 % de los valores iniciales con una
concentración de albúmina de 35 g/L (532 μmol/L).Ictericia: Sin interferencias
significativas hasta un índice I de 60 (concentración de la bilirrubina conjugada y no
conjugada: aprox. 1.026 μmol/L ó 60 mg/dL).
Hemólisis: Sin interferencias significativas hasta un índice H de 1.000
(concentración de hemoglobina: aprox. 621 μmol/L ó 1.000 mg/dL).
Lipemia: Sin interferencia significativa hasta un índice L de 550. No existe una
concordancia satisfactoria entre el índice L (correspondiente a la turbidez) y la
concentración de triglicéridos.
común en concentraciones terapéuticas.
particularmente del tipo IgM (macroglobulinemia de Waldenstroem).
30
|
exámenes.
En pacientes con insuficiencia renal, los métodos colorimétricos empleados para la
determinación de albúmina pueden llevar a resultados de test falsamente elevados
debido a interferencias con otras proteínas. Los métodos inmunoturbidimétricos son
menos afectados.
2-60 g/L (30,4-912 μmol/L, 0,2-6 g/dL) Determinar las muestras con
concentraciones superiores a través de la función de repetición del ciclo. La dilución
automática de las muestras por la función de repetición del ciclo es de 1:5. Los
resultados de las muestras diluidas por la función de repetición del ciclo se
multiplican automáticamente por el factor 5.
Límites inferiores de medición

Límite inferior de detección del test 2 g/L (30,4 μmol/L, 0,2 g/dL)
Valores teóricos
Estudio del intervalo de referencia
Adultos 3,97-4,94 g/dL 39,7-49,4 g/L 603-751 μmol/L
Valores de consenso:
Adultos 3,5-5,2 g/dL 35-52 g/L 532-790 μmol/L
Intervalos de referencia según Tietz11
Neonatos 0-4 días 2,8-4,4 g/dL 28-44 g/L 426-669 μmol/L
Niños 4 días-14 años 3,8-5,4 g/dL 38-54 g/L 578-821 μmol/L
14-18 años 3,2-4,5 g/dL 32-45 g/L 486-684 μmol/L
31
|
Albúmina en orina (microalbuminuria)
La albúmina es una proteína no glicosilada de un peso molecular de 66000 daltons.

Su síntesis, que tiene lugar en las células del parénquima hepático, alcanza 14 g
por día. Desde el punto de vista cuantitativo, constituye el componente proteico más
importante (> 50 %) del plasma, el líquido cefalorraquídeo y la orina. La excreción
baja pero anormal de albúmina es denominada microalbuminuria. Según sus
causas se distingue en glomerular (p.ej. microangiopatía diabética, hipertensión,
lesión glomerular mínima), tubular (resorción inhibida) o posrenal. La albúmina sirve
también como proteína marcadora de diferentes formas de proteinuria. En la
proteinuria glomerular selectiva se excretan a la orina entre 100 y 3000 mg de
albúmina por g de creatinina. Una proteinuria glomerular no selectiva se caracteriza
por la excreción elevada de proteínas con un peso molecular más alto (IgG superior
al 10 % de la albúmina). La proteinuria prerrenal se reconoce por la discrepancia
entre la albúmina y las proteínas totales (albúmina inferior al 30 % con aumento
simultáneo de las proteínas totales). Un aumento simultáneo de los niveles de
albúmina y microproteínas se registra en las proteinurias glomérulo-tubulares que
aparecen por sobrecarga de la resorción tubular en glomerulopatías (p. ej. síndrome
nefrótico), en nefropatías glomerulares túbulo-intersticiales combinadas o en
insuficiencia renal debida a nefropatía diabética u otras causas (proteinuria por
rebosamiento). En el plasma, la albúmina tiene dos funciones principales: mantener
la presión oncótica (80 % debida a la albúmina plasmática) y el transporte. Es la
proteína transportadora de mayor importancia para sustancias poco hidrosolubles
como ácidos grasos libres, bilirrubina, iones metálicos, hormonas y fármacos.
La concentración de albúmina está disminuida en caso de hiperhidratación,
insuficiencia de síntesis hepatocelular, trastornos de la secreción al espacio
intravascular, trastornos en la distribución entre el espacio intra y extravascular,
catabolismo y pérdida de albúmina, en la reacción de fase aguda y analbuminemia
congénita.
32
|
Los trastornos de la barrera hematoencefálica pueden cuantificarse eficazmente

mediante el cociente de albúmina en LCR/suero. Cocientes elevados de albúmina
indican un trastorno de la barrera hematoencefálica.
Si se determinan simultáneamente la IgG en LCR y suero, tomando en cuenta los
cocientes individuales de albúmina, se puede diferenciar entre la IgG sanguínea y
la sintetizada por el SNC. En casos de esclerosis múltiple, encefalitis crónica por el
VIH, neurosífilis y la encefalitis por herpes simple, predomina la existencia de IgG.
Para determinar la albúmina se dispone de varios métodos tales como la
inmunodifusión radial, la nefelometría y la turbidimetría.
Principio de test
Prueba inmunoturbidimétrica.
Los anticuerpos anti-albúmina reaccionan con el antígeno de la muestra formando
un complejo antígeno-anticuerpo que se mide turbidimétricamente después de la
aglutinación.

S2-6: C.f.a.s. PUC
Modo de calibración: RCM
Frecuencia de calibraciones
Calibración completa

muestras.
Sólo se han analizado y encontrado aptos los siguientes tipos de muestra:
Orina
Suero
Plasma tratado con heparina de litio o EDTA bipotásico.
33
|
LCR
LCR
Estabilidad: hasta 3 días a 2-8 °C
6 meses a (-15)-(-25) °C indefinidamente a (-60)-(-80) °C
Suero, plasma
Estabilidad: 10 semanas a 15-25 °C
5 meses a 2-8 °C
4 meses a (-15)-(-25) °C
Orina
Orina espontánea, de 24 horas o la segunda orina de la mañana.
Estabilidad: 147 días a 15-25 °C
1 mes a 2-8 °C
6 meses a (-15)-(-25) °C

Orina
Criterio: Recuperación dentro de ± 10 % del valor inicial con una concentración de
albúmina de 20 mg/L (0.30 μmol/L; 2 mg/dL).
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta una concentración de bilirrubina
conjugada de 855 μmol/L (50 mg/dL).
Hemólisis: Sin interferencias significativas hasta una concentración de hemoglobina
de 248 μmol/L (400 mg/dL).
No se registraron interferencias por acetona ≤ 60 mmol/L, cloruro amónico≤ 0.11
mol/L, calcio ≤ 40 mmol/L, creatinina ≤ 0.18 mol/L, γ-globulina ≤ 500 mg/L, glucosa
≤ 0.19 mol/L, urea ≤ 0.8 mol/L, ácido úrico≤ 5.95 mmol/L ni con urobilinógeno≤ 378
μmol/L.
34
|
Efecto prozona (high-dosehook): Aplicando la verificación cinética, no se produjeron

resultados falsos sin aviso con concentraciones de albúmina hasta 40000 mg/L (608
μmol/L, 4000 mg/dL).
Suero/plasma
albúmina de 35 g/L (532 μmol/L; 3500 mg/dL).
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un índice I de 60 (concentración
aproximada de bilirrubina conjugada y no conjugada: aprox. 1026 μmol/L ó 60
mg/dL).
aproximada de hemoglobina: aprox. 621 μmol/L ó 1000 mg/dL).
Lipemia (Intralipid):18 Sin interferencias significativas hasta el índice L de 1500. La
correlación entre el índice L (correspondiente a la turbidez) y la concentración de
triglicéridos no es concluyente.
Los factores reumatoides ≤ 1200 UI/mL no interfieren en el test.
extendido en concentraciones terapéuticas.
LCR
albúmina de 240 mg/L (3.65 μmol/L; 24 mg/dL).
Efecto prozona (high-dosehook): Aplicando la verificación cinética, no se produjeron
resultados falsos sin aviso con concentraciones de albúmina hasta 30000 mg/L (456
μmol/L, 3000 mg/dL).
35
|
exámenes.
Orina
Cobas c 311: 3–200 mg/L (0.05–3.04 μmol/L, 0.3–20 mg/dL)
Valores teóricos
Orina
2a orina de la mañana:
Adultos: < 20 mg de albúmina/g de creatinina o bien
< 2.26 g (34.35 μmol) de albúmina/mol de creatinina
Niños (3-5 años):20 < 20 mg/L (0.304 μmol/L, 2 mg/dL) de albúmina < 37 mg de
albúmina/g de creatinina
Orina de 24 horas: < 20 mg/L (0.304 μmol/L, 2 mg/dL) < 30 mg/24 h (0.456 μmol/24
h)
Amilasa
Las α‑amilasas (1,4‑α‑D‑glucanohidrolasas, EC 3.2.1.1) catalizan la hidrólisis de
carbohidratos polímeros tales como la amilosa, la amilopectina y el glucógeno por
desdoblamiento de los enlaces 1,4‑α‑glucosídicos. En los poli y oligosacáridos,
algunos enlaces glucosídicos se hidrolizan simultáneamente. La maltotriosa, la
unidad más pequeña de este grupo, se convierte a maltosa y glucosa, si bien muy
lentamente. Se distinguen dos tipos de α‑amilasas: el tipo pancreático (tipo P) y el
tipo salival (tipo S). El tipo P se forma casi exclusivamente en el páncreas y es, por
lo tanto, organoespecífico, mientras que el tipo S se sintetiza en diferentes órganos.
36
|
Este último se encuentra en las glándulas salivales, las lágrimas, el sudor, la leche
materna, el líquido amniótico, los pulmones, los testículos y el epitelio de las trompas
uterinas.
La determinación de la α‑amilasa juega un papel importante en el diagnóstico de
las enfermedades del páncreas ya que éstas presentan síntomas clínicos poco
específicos. La α-amilasa se emplea sobre todo en el diagnóstico y seguimiento de
la pancreatitis aguda. La hiperamilasemia no sólo puede producirse en la
pancreatitis aguda o en la fase inflamatoria de la pancreatitis crónica, sino también
en la insuficiencia renal por filtración glomerular reducida, los tumores pulmonares
u ováricos, la neumonía, las afecciones de las glándulas salivales, la cetoacidosis
diabética, el trauma cerebral así como en intervenciones quirúrgicas o en caso de
una macroamilasemia. Para confirmar la especificidad pancreática, se recomienda
determinar adicionalmente otra enzima específica del páncreas, como la lipasa o la
α‑amilasa pancreática.
Los numerosos métodos descritos para la determinación de la α‑amilasa miden la
reducción del sustrato de forma viscosimétrica, turbidimétrica, nefelométrica o
amiloclástica o bien registran la formación de productos de degradación por
sacarimetría o cinéticamente por reacciones sucesivas catalizadas por enzimas. El
presente método se basa en el probado proceso de degradación del sustrato
4,6‑etilideno‑(G7)‑1,4-nitrofenil‑(G1)‑α,D‑maltoheptaósido (Ethylidene
ProtectedSubstrate = EPS) por la α‑amilasa y la consecuente hidrólisis de todos los
productos de degradación a p‑nitrofenol por la acción de la α‑glucosidasa
(liberación del cromóforo del 100 %). Los resultados del presente método
correlacionan con los obtenidos por CLAR (cromatografía de líquidos de alta
resolución). El presente test cumple con las recomendaciones de la IFCC, si bien
su estabilidad y funcionamiento han sido mejorados.
Principio del test

Prueba enzimática colorimétrica conforme con lo estipulado por la IFCC Los
oligosacáridos definidos tales como el 4,6‑etilideno-(G7)
37
|
p‑nitrofenil‑(G1)‑α,D‑maltoheptaósido (etilideno‑G7PNP) se desdoblan bajo la

acción catalítica de la α‑amilasa. La ‑glucosidasa actúa sobre los fragmentos
G2PNP, G3PNP y G4PNP así formados que se hidrolizan entonces completamente
a p‑nitrofenol y glucosa.
La intensidad cromática del p‑nitrofenol formado es directamente proporcional a la

actividad de la α‑amilasa. Se determinamidiendo el aumento de la absorbancia.

muestras.
Suero
Plasma tratado con heparina de litio.
Orina: Recoger la orina sin aditivos. La α‑amilasa es inestable en orina ácida.
Realizar el test imediatamente o alcalizar las muestras para su almacenamiento
(apenas sobre pH 7).
Estabilidad en suero o plasma: 7 días a 15‑25 °C
1 mes a 2‑8 °C
Estabilidad en orina: 2 días a 15‑25 °C
10 días a 2‑8 °C
Calibración
38
|

S2: C.f.a.s.
Intervalo de calibraciones Calibración a dos puntos
• Con cada lote de reactivos
•si fuera necesario según los procedimientos de control de calidad
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a un reactivo del
sistema Roche utilizando pipetas calibradas con un fotómetro manual que
proporciona valores absolutos y la absorptividad específica del substrato.
Cálculo
Los analizadores Roche/Hitachi cobas c calculan automáticamente la actividad de
analito de cada muestra.

Una ligera modificación de la coloración amarilla de la solución 2 no influye en el
funcionamiento del test.
No pipetear con la boca y evitar el contacto del reactivo con la piel porque La saliva
y el sudor contienen α‑amilasa!
Criterio: Recuperación dentro de ± 10 % del valor inicial con una actividad de la
amilasa de 100 U/L (1.67 μkat/L).
Suero/plasma
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un índice I de 60 para bilirrubina
39
|
Lipemia (Intralipid):15 Sin interferencias significativas hasta el índice L de 1500. No

En algunos casos, las muestras que presentan elevada turbidez (índice L) y al
mismo tiempo una alta actividad de amilasa pueden causar la alarma >React o
>Abs.
Las muestras lipémicas muy turbias pueden causar alarmas debido a valores de
absorbancia elevados.
EDTA.
Glucosa: Sin interferencias por glucosa hasta 111 mmol/L (2000 mg/dL). La
recuperación aumenta en aprox. el 10 % si la concentración de glucosa equivale a
250 mmol/L (4500 mg/dL).
Ácido ascórbico: Sin interferencias por ácido ascórbico hasta 5.68 mmol/L (100
mg/dL).
Excepción: Los fármacos basados en icodextrina pueden provocar valores de
amilasa disminuidos.
Orina
Ácido ascórbico: Sin interferencias por ácido ascórbico hasta 2.27 mmol/L (40
mg/dL). Con concentraciones de ácido ascórbico de 22.7 mmol/L (400 mg/dL) se
registra una recuperación reducida en un 15 %.
examines.
40
|
Valores teóricos
Suero/plasma Hombres/ mujeres
0.47‑1.67 μkat/L 28‑100 U/L
Orina espontánea Hombres mujeres
0.27‑8.20 μkat/L
0.35‑7.46 μkat/L
16‑491 U/L
21‑447 U/L
Cociente de α‑amilasa/creatinina
Hombres mujeres
0.97‑4.73 μkat/g
1.25‑6.51 μkat/g
58‑283 U/g
75‑390 U/g
Bilirrubina Directa
La bilirrubina se forma en el sistema reticuloendotelial por la degradación de los
eritrocitos viejos. El grupo hemo procedente de la hemoglobina y de otras
hemoproteínas es eliminado, metabolizado a bilirrubina y transportado al hígado en
forma de complejo con la albúmina sérica. En el hígado, la bilirrubina se solubiliza
por conjugación con el ácido glucurónico para ser transportada por el conducto biliar
y eliminada por el tracto digestivo. El incremento de los niveles de bilirrubina sin
conjugar (indirecta) en el torrente sanguíneo se debe a enfermedades o
circunstancias en las cuales, a causa de procesos hemolíticos, se produce más
bilirrubina de la que el hígado es capaz de metabolizar. La inmadurez hepática y
otros numerosos trastornos en los que el mecanismo de conjugación de la bilirrubina
se encuentra afectado pueden causar aumentos similares de la bilirrubina circulante
sin conjugar. La obstrucción del conducto biliar o el daño de la estructura
41
|
hepatocelular causan un aumento en los niveles tanto de la bilirrubina conjugada

(directa) como en los de la bilirrubina sin conjugar (indirecta) en el torrente
sanguíneo.
Principio del test

Método diazo.
En un tampón ácido, la bilirrubina conjugada y la δ‑bilirrubina (bilirrubina directa)
reaccionan directamente con la sal de 3,5-diclorofenildiazonio para
formarazobilirrubina de color rojo.
La intensidad cromática del colorante azoico rojo es directamente proporcional a la

concentración de bilirrubina directa (conjugada) que se mide fotométricamente.
Nota: Bajo la influencia de la luz azul, utilizada por ejemplo en la fototerapia de
neonatos, una parte de la bilirrubina sin conjugar se transforma a un isómero
hidrosoluble denominado fotobilirrubina que es un sustrato para pruebas de
bilirrubina directa. Esta fracción es detectada por la BILD2 y puede llevar a
resultados superiores a los normales en niños sanos.
42
|

muestras.
Suero: Recoger las muestras de suero en tubos estándar.
Plasma tratado con heparina de litio, EDTA di y tripotásico.
No exponer las muestras a la luz directa.
7 días a 2‑8 °C
6 meses a (-15) - (-25) °C
Calibración
Calibrador S1: H2O
S2: Calibrador c.f.a.s.
43
|
Modo de calibración Regresión lineal

Factores de conversión: μmol/L x 0.0585 = mg/dL

mg/dL x 10 = mg/L
mg/dL x 17.1 = μmol/L

concentración de la bilirrubina directa de 34 μmol/L (2 mg/dL).
de hemoglobina: aprox. 15.5 μmol/L o 25 mg/dL).
Excepción: La fenilbutazona proporciona resultados artificialmente bajos de
bilirrubina.
exámenes.
En ciertos casos, cuando casi la totalidad de la bilirrubina que reacciona se
encuentra en forma directa, el valor de la bilirrubina directa puede resultar
ligeramente más elevado que el de bilirrubina total. Si es así, el resultado para la
44
|
bilirrubina total debe indicarse tanto para la bilirrubina directa como para la
bilirrubina total.
1.5‑291 μmol/L (0.09‑17 mg/dL)
repetición. Con la función de repetición, las muestras se diluyen 1:2. Los resultados
de las muestras diluidas con la función de repetición se multiplican automáticamente
por el factor 2.
Valores teóricos
Bilirrubina directa ≤ 5 μmol/L (≤ 0.30 mg/dL)
El límite superior de 10 μmol/L para la bilirrubina directa en neonatos se cita en la
literatura.
Bilirrubina Total
La bilirrubina se forma en el sistema reticuloendotelial por la degradación de los
eritrocitos viejos. El grupo hemo procedente de la hemoglobina y de otras
hemoproteínas es eliminado, metabolizado a bilirrubina y transportado al hígado en
forma de complejo con la albúmina sérica. En el hígado, la bilirrubina se solubiliza
por conjugación con el ácido glucurónico para ser transportada por el conducto biliar
y eliminada por el tracto digestivo.
El incremento de los niveles de bilirrubina sin conjugar (indirecta) en el torrente

sanguíneo se debe a enfermedades o circunstancias en las cuales, a causa de
procesos hemolíticos, se produce más bilirrubina de la que el hígado es capaz de
metabolizar. La inmadurez hepática y otros numerosos trastornos en los que el
mecanismo de conjugación de la bilirrubina se encuentra afectado pueden causar
aumentos similares de la bilirrubina circulante sin conjugar. La obstrucción del
conducto biliar o el daño de la estructura hepatocelular causan un aumento en los
45
|
niveles tanto de la bilirrubina conjugada (directa) como en los de la bilirrubina sin

conjugar (indirecta) en el torrente sanguíneo.
Principio del test

Método diazo colorimétrico
En un medio fuertemente ácido y en presencia de un agente disolvente adecuado,
la bilirrubina total se acopla a 3,5‑diclorofenildiazonio.
La intensidad cromática del colorante azoico rojo es directamente proporcional a la

concentración de bilirrubina total y se mide fotométricamente.
Medidas de protección y advertencias
46
|

muestras.
Suero
Plasma tratado con heparina de litio, EDTA di y tripotásico (El uso de plasma EDTA
con niveles elevados de hematocrito puede provocar valores ligeramente
disminuidos.) Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de realizar
el ensayo.
7 días a 2‑8 °C
6 meses a (-15) - (-25) °C
a) Si las muestras se protegen de la luz
2.5‑650 μmol/L (0.146‑38.0 mg/dL)
repetición. En este caso, las muestras se diluyen de 1:2. Los resultados de las
muestras diluidas con la función de repetición se multiplican automáticamente por
el factor 2.
Valores teóricos
Adultos9 hasta 21 μmol/L (hasta 1.2 mg/dL)
Niños ≥ 1 mes de edad hasta 17 μmol/L (hasta 1.0 mg/dL)
Hombres hasta 24 μmol/L (hasta 1.4 mg/dL)
Mujeres hasta 15 μmol/L (hasta 0.9 mg/dL)
Alto riesgo de desarrollar una hiperbilirrubinemia clínicamente significativa:
Neonatos: a término y casi a término
Edad del neonato:
24 horas ≥ 137 μmol/L) (≥ 8.0 mg/dL))
47
|
48 horas ≥ 222 μmol/L) (≥ 13.0 mg/dL))

84 horas ≥ 290 μmol/L) (≥ 17.0 mg/dL))
Tales niveles de hiperbilirrubinemia se consideran significativos y generalmente

requieren una estrecha supervisión y posiblemente una evaluación ulterior o incluso
una intervención.
Calcio
Características
El calcio es el elemento mineral más abundante en el organismo. Aprox. Un 99 %
se encuentra en los huesos, fundamentalmente en su forma de hidroxiapatito. El
calcio restante se halla distribuido entre los diferentes tejidos y líquidos
extracelulares en los que desempeña un papel central en numerosos procesos de
sustancial importancia para la vida. Más allá de su función relacionada con el
esqueleto, el calcio también está implicado en la coagulación sanguínea, la
conducción neuromuscular, la excitabilidad del músculo esquelético y cardíaco, la
activación enzimática y la preservación de la integridad y permeabilidad de la
membrana celular.
Se cree que los niveles séricos y por tanto el contenido corporal de calcio están
controlados por la parathormona (PTH), la calcitonina y la vitamina D.
Un desequilibrio en cualquiera de estos moduladores produce alteraciones en los
niveles de calcio sérico y corporal. El incremento de los niveles de PTH sérica o de
vitamina D está generalmente asociado a la hipercalcemia. Un aumento en los
niveles de calcio sérico también puede observarse en el mieloma múltiple y en otras
afecciones neoplásicas. La hipocalcemia puede acompañar al hipoparatiroidismo,
la nefrosis y la pancreatitis.
Principio del test
48
|
Bajo condiciones alcalinas, los iones de calcio reaccionan con el

5‑nitro‑5’‑metil‑BAPTA (NM-BAPTA) para formar un complejo. En un segundo
paso, el complejo formado reacciona con EDTA.

muestras.
Suero: Se prefiere suero fresco recogido en ayunas.
Plasma: tratado con heparina de litio.
Se recomienda separar las muestras de suero o plasma inmediatamente de las
células sanguíneas, ya que el contacto prolongado con el coágulo puede causar
valores reducidos de calcio. El suero de pacientes que reciben EDTA (en el
tratamiento de la hipercalcemia) no es apto para el análisis, ya que el EDTA fija el
calcio en quelatos e impide que esté disponible para reaccionar con NM‑BAPTA.
Se ha observado una coprecipitación del calcio con la fibrina (p.ej. plasma
heparinizado), los lípidos o la proteína desnaturalizada en condiciones de
almacenamiento o congelamiento.
Orina
Recoger las muestras de orina en frascos lavados con ácido. Recoger las muestras
de 24 horas en recipientes con 20‑30 mL de HCl de 6 mol/L para impedir la
precipitación de sales de calcio. A veces, las sales de calcio precipitadas no se
disuelven por completo tras la adición de HCI a la orina recogida.
Estabilidad en suero/plasma: 57 días a 15‑25 °C

3 semanas a 2‑8 °C
49
|
8 meses a (-15) - (-25) °C

4 días a 2‑8 °C
3 semanas a (-15)‑(-25) °C
Antes de analizar las muestras de suero u orina que hayan estado almacenadas,
mezclarlas bien.
Calibración
S2: C.f.a.s.
• Si fuera necesario según los procedimientos de control de calidad
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente al material de
referencia SRM 956 c, nivel 2.
Limitaciones del análisis – interferencias
Criterio: Recuperación dentro de ± 0.22 mmol/L (0.9 mg/dL) del valor inicial de las
muestras ≤ 2.2 mmol/L (8.8 mg/dL) y dentro de ± 10 % para muestras> 2.2 mmol/L.
Suero/plasma
aprox. 1026 μmol/L o 60 mg/dL).
de hemoglobina: aprox. 621 μmol/L o 1000 mg/dL).
50
|
Lipemia (Intralipid):6 Sin interferencias significativas hasta el índice L de 1000.

Existe una mínima correlación entre el índice L (correspondiente a la turbidez) y la
concentración de triglicéridos.
Magnesio: Sin interferencias significativas hasta una concentración de 15 mmol/L.
Orina
Magnesio: Sin interferencias significativas hasta una concentración de 60 mmol/L.
exámenes.
Suero/plasma
0.20‑5.0 mmol/L (0.8‑20.1 mg/dL)
Orina
0.20‑7.5 mmol/L (0.8‑30.1 mg/dL)
51
|
Determinar las muestras de orina con concentraciones superiores a través de la

función de repetición del ciclo. Con la función de repetición, las muestras se diluyen
1:5. Los resultados de las muestras diluidas con la función de repetición se
multiplican automáticamente por el factor 5
Valores teóricos
Suero/plasma
Recién nacidos (0‑10 días de edad): 1.90‑2.60 mmol/L (7.6‑10.4 mg/dL)
Niños (10 días‑2 años de edad): 2.25‑2.75 mmol/L (9.0‑11.0 mg/dL)
Niños (2‑12 años de edad): 2.20‑2.70 mmol/L (8.8‑10.8 mg/dL)
Niños (12‑18 años de edad): 2.10‑2.55 mmol/L (8.4‑10.2 mg/dL)
Adultos (18‑60 años de edad): 2.15‑2.50 mmol/L (8.6‑10.0 mg/dL)
Adultos (60‑90 años de edad): 2.20‑2.55 mmol/L (8.8‑10.2 mg/dL)
Adultos (> 90 años de edad): 2.05‑2.40 mmol/L (8.2‑9.6 mg/dL)
Orina
2.5‑7.5 mmol/24 h (100‑300 mg/24 h) con una alimentación normal.
Complemento C3
Características
El sistema del complemento se activa por una vía clásica y por una vía alternativa.
Ambas desembocan en una vía terminal común. Dado que el factor C3 del
complemento es el factor común de las dos vías, su concentración y la de sus
productos de degradación (incluyendo C3c) sirven para indicar el grado de
activación del sistema de complemento. Cuando los valores disminuyen, significa
que se ha producido una activación. La determinación adicional de C4 permite una
diferenciación más precisa. Si se obtienen valores normales de C4, es probable que
la activación tenga lugar por la ruta alternativa. Se observan concentraciones
52
|
disminuidas en numerosas enfermedades inflamatorias e infecciosas. Las causas

principales son el lupus eritematoso sistémico (LES), la artritis reumatoidea, la
endocarditis bacteriana subaguda, la viremia, las infecciones parasitarias o la sepsis
bacteriana. En presencia del factor nefrítico C3, los valores del factor del
complemento C3 de pacientes con lipodistrofia parcial o
glomerulonefritismembrano-proliferativa se hallan fuertemente disminuidos.
Por ser C3 una proteína de fase aguda, el organismo produce mayores cantidades
de C3 durante los procesos inflamatorios. Su concentración se incrementa en
enfermedades sistémicas, estados inflamatorios crónicos no infecciosos
(especialmente en la poliartritis crónica) y en situaciones fisiológicas especiales
(durante la gestación). En estos casos, el aumento raramente duplica el valor normal
y puede ocultar una reducción del consumo del complemento.
Para la determinación del factor C3 del complemento se dispone de varios métodos
tales como la nefelometría, la inmunodifusión radial y la turbidimetría.
Principio del test

El C3c humano forma un precipitado con un antisuero específico que se determina
por turbidimetría.

muestras.
Suero.
8 días a 2‑8 °C
8 días a (-15)‑(-25) °C
53
|
El grado de fragmentación de C3 a C3c depende de la fecha de extracción y las

condiciones de conservación de la muestra. Así, los valores obtenidos en muestras
frescas son hasta en un 25 % inferior a aquellos obtenido en muestras recogidas
cierto tiempo atrás según el grado de fragmentación.
Calibración
S2: C.f.a.s. Proteins
Modo de calibración RCM2
Intervalo de calibraciones Calibración completa
Factores de conversión: g/L x 100 = mg/dL
mg/dL x 0.01 = g/L
concentración de C3c de 0.9 g/L.
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un índice I de 60 par-bilirrubina
Los factores reumatoides hasta 1200 UI/mL no interfieren en el test.
Efecto prozona (high‑dosehook): No se produjeron resultados falsos hasta una
concentración de C3c de 12.5 g/L.
54
|

0.04‑5.0 g/L (4‑500 mg/dL)
de las muestras diluidas con la función de repetición se multiplican automáticamente
por el factor 2.
Valores teóricos
0.9‑1.8 g/L (90‑180 mg/dL)
2.10 Complemento C4
Generalidades
El sistema de complemento puede activarse por la vía clásica y por la vía alternativa.
El factor de complemento C4 participa en la activación a través de la vía clásica. Si
bien la disminución de C4 es común, raras veces falta por completo. El C4 está
disminuido o falta por completo en enfermedades del inmunocomplejo, el lupus
eritematoso sistémico (LES), la tiroiditis autoinmune y la dermatomiositis juvenil. En
pacientes con deficiencia de C4, la aparición del LES muchas veces puede
comprobarse muy temprano, siendo su curso más grave en pacientes con niveles
normales de complemento. En infecciones como la meningitis bacteriana y la vírica,
sepsis por estreptococos y estafilococos así como en neumonía, el C4 está
disminuido.
La determinación adicional de C4 en pacientes con valores disminuidos del factor
C3 del complemento permite una diferenciación ulterior. Si en estos casos la
concentración de C4 es normal, es probable que la activación se efectúe por la vía
55
|
alternativa. La determinación de C4 se emplea principalmente para el seguimiento

de los valores reducidos del complemento en sangre.
La formación de C4, por ser una proteína de fase aguda, se acelera durante
procesos inflamatorios. Su concentración se incrementa en enfermedades
infecciosas sistémicas, estados inflamatorios crónicos no infecciosos
(especialmente en la poliartritis crónica) y en situaciones fisiológicas especiales
(durante la gestación). En estos casos, el aumento raramente duplica el valor normal
y puede ocultar una reducción del consumo del complemento.
Para determinar el factor C4 del complemento se dispone de métodos tales como
la nefelometría, la inmunodifusión radial y la turbidimetría.
Principio de test
Prueba inmunoturbidimétrica. El C4 humano forma un precipitado con un antisuero
específico que se determina por turbidimetría.

muestras.
Suero.
Centrifugue las muestras que contengan precipitado antes de efectuar la prueba.
2 días a 2-8 °C
Calibración
56
|
Multiplicar el valor del calibrador C.f.a.sProteins específico del lote por los factores
indicados a continuación a fin de determinar las concentraciones estándar de la
curva de calibración de 6 puntos.
S2: 0.140 S5: 1.31
S3: 0.328 S6: 2.64
S4: 0.655
mg/dL x 0.01 = g/L
g/L x 100 = mg/dL
g/L x 5.00 = μmol/L

concentración de C4 de 0.1 g/L (0.5 μmol/L, 10 mg/dL).
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un índice I de 60 (concentración
aproximada de bilirrubina conjugada y no conjugada: 1026 μmol/L ó 60 mg/dL).
aproximada de hemoglobina: 311 μmol/L ó 500 mg/dL).
Efecto prozona (high-dosehook): No se obtienen resultados falsos con
concentraciones de C4 de hasta 5 g/L (25 μmol/L, 500 mg/dL).
57
|

Para el diagnóstico, los resultados del ensayo siempre deben interpretarse
conjuntamente con el historial médico del paciente, el análisis clínico así como los
resultados de otros exámenes.
0.02-1.0 g/L (0.1-5 μmol/L, 2.0-100 mg/dL)
Determinar las muestras con concentraciones superiores por la función de
repetición del ciclo. La dilución automática de las muestras por la función de
repetición del ciclo es de 1:2. Los resultados de las muestras diluidas por la función
de repetición del ciclo se multiplican automáticamente por el factor 2.
Valores teóricos
0.1-0.4 g/L (0.5-2.0 μmol/L o 10-40 mg/dL)
Cada laboratorio debería comprobar si los intervalos de referencia pueden aplicarse
a su grupo de pacientes y, en caso necesario, establecer sus propios valores.
2.11 Colesterol
Características
El colesterol es un esteroide con un grupo hidroxilo secundario en la posición C3.
Se sintetiza en tejidos de varios tipos, pero especialmente en el hígado y en la pared
intestinal. Aprox. tres cuartos del colesterol se forman por síntesis, mientras que el
cuarto restante proviene de la alimentación. La determinación del colesterol se
emplea para cribar el riesgo aterosclerótico, así como para diagnosticar y tratar
enfermedades con niveles elevados de colesterol o trastornos de los metabolismos
58
|
lipídico lipoproteico. La determinación del colesterol fue descrita por vez primera
por Liebermann en 1885 y luego por Burchard en 1889. Según el principio de
Liebermann-Burchard, el colesterol forma un compuesto verde azulado a partir de
carbohidratos polímeros insaturados en un medio en el que están presentes el ácido
acético, el anhídrido acético y el ácido sulfúrico concentrado. En el método de Abell
y Kendall, que es más específico pero más complejo desde un punto de vista
técnico, se emplean también reactivos cáusticos. En 1974, Roeschlau y Allain
describieron el primer método completamente enzimático.
Este método se basa en la determinación de la Δ4-colestenona tras el
desdoblamiento enzimático del éster de colesterol por la colesterol esterasa,
después de la transformación del colesterol por la colesterol oxidasa, así como la
medición subsiguiente del peróxido de hidrógeno formado a través de una reacción
de Trinder. La optimización del desdoblamiento de los ésteres (> 99.5 %) permite la
estandarización por estándares primarios y secundarios y una comparación directa
con los métodos de referencia de CDC y NIST. Las muestras recogidas tras la
ingestión de alimentos pueden dar resultados ligeramente inferiores a las obtenidas
en ayunas.
El test de colesterol de Roche cumple con los objetivos sentados en 1992 por los
Institutos Nacionales de la Salud de los EE.UU. (NIH) equivalentes al 3 % o aún
inferiores para la precisión y la desviación.
El presente test ha sido estandarizado frente a Abell/Kendall así como por dilución
isotópica/espectrometría de masa. Los datos de funcionamiento e informaciones
aquí presentados son independientes de la estandarización.
Principio del test

Método enzimático colorimétrico.
Los ésteres de colesterol se desdoblan por la acción de la colesterol esterasa a
colesterol libre y ácidos grasos. La colesterol oxidasa cataliza entonces la oxidación
de colesterol a colest-4-en-3-ona y peróxido de hidrógeno. En presencia de
peroxidasa, el peróxido de hidrógeno formado produce la unión oxidativa del fenol
y la 4-aminofenazona para formar un colorante rojo de quinona-imina.
59
|
La intensidad cromática del colorante formado es directamente proporcional a la

concentración de colesterol. Se determina midiendo el aumento de la absorbancia.

muestras.
Suero.
No emplear plasma con citrato, oxalato o fluoruro.
Se puede emplear muestras recogidas en ayunas o después de comer.
7 días a 2-8 °C
3 meses a (-15)-(-25) °C
Calibración
S2: C.f.a.s.
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado por el método de
Abell/Kendall así como por dilución isotópica/espectrometría de masa.16
Factores de conversión: mmol/L x 38.66 = mg/dL
mmol/L x 0.3866 = g/L
mg/dL x 0.0259 = mmol/L
60
|

Criterio: Recuperación dentro de ± 10 % del valor incial con una concentración de
colesterol de 5.2 mmol/L (200 mg/dL).
conjugada y de 14 para la bilirrubina sin conjugar, lo cual equivale a una
concentración aproximada de bilirrubina conjugada de 274 μmol/L ó 16 mg/dL y a
una concentración aproximada de bilirrubina sin conjugar de 239 μmol/L ó 14 mg/dL.
de hemoglobina: aprox. 435 μmol/L ó 700 mg/dL).
Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas hasta un índice L de 2000. La
Para el diagnóstico, los resultados obtenidos con el test siempre deben evaluarse
junto a la anamnesis del paciente, los exámenes clínicos y los resultados de otros
análisis.
0.1-20.7 mmol/L (3.86-800 mg/dL)
repetición del ciclo. La dilución de las muestras por la función de repetición del ciclo
es de 1:10. Los resultados de las muestras diluidas usando la función de repetición
del ciclo se multiplican automáticamente por el factor 10.
Valores teóricos
Interpretación clínica según las recomendaciones de la Sociedad Europea de
Aterosclerosis:
mmol/L mg/dL Trastorno del metabolismo de lípidos
61
|
Colesterol < 5.2 (< 200)

Triglicéridos < 2.3 (< 200) No
Colesterol 5.2-7.8 (200-300) Sí, si el colesterol-HDL < 0.9 mmol/L (< 35 mg/dL)
Colesterol > 7.8 (> 300)
Triglicéridos > 2.3 (> 200) Sí
Umbrales de corte recomendados por el Programa Nacional Educativo sobre el

Colesterol (NCEP), panel de tratamiento de adultos, para estimar el riesgo en la
población de los EE.UU.
Nivel ideal de colesterol < 5.2 mmol/L (< 200 mg/dL)
Colesterol elevado límite 5.2-6.2 mmol/L (200-240 mg/dL)
Colesterol alto ≥ 6.2 mmol/L (≥ 240 mg/dL)
2.12 Creatinina
Características
La insuficiencia renal crónica es un problema de salud de incidencia mundial que
conlleva un riesgo sustancial de morbilidad y mortalidad cardiovasculares.
Las normas actuales definen la insuficiencia renal crónica, independientemente de
su causa, como el daño renal o la tasa de filtración glomerular (TFG) inferior a 60
mL/min por 1.73 m2 durante un período mínimo de 3 meses.
La determinación de creatinina en suero o plasma es la prueba más común para
evaluar la función renal. La creatinina es un producto de degradación de fosfato de
creatina muscular producido constantemente por el cuerpo (dependiente de la masa
muscular). La creatinina se filtra en los glomérulos y, en condiciones normales, no
es reabsorbida por los túbulos en una cantidad apreciable. Una pequeña pero
significativa cantidad se secreta activamente.
Una subida de los niveles de creatinina en la sangre solamente es observada
cuando hay un marcado daño en los nefrones. Por lo tanto, esta prueba no puede
emplearse para la detección precoz de la insuficiencia renal.
El aclaramiento de creatinina medido a partir de la concentración de creatinina en
orina y suero o plasma y la tasa del flujo urinario constituye una prueba mucho más
62
|
sensible y con mayor capacidad de estimar la tasa de filtración glomerular (TFG).

Esta prueba requiere una muestra de orina recogida con precisión temporal
(usualmente de 24 horas) y una muestra de sangre. Sin embargo, dado que este
test está sujeto a errores debido a la recogida de orina en función del tiempo, se
intentó estimar la TFG solamente a partir del cálculo de la concentración de
creatinina en suero o plasma. Entre los numerosos métodos sugeridos, la ecuación
de Cockroft y Gault y el método basado en los resultados del estudio de MDRD
obtuvieron la mayor aceptación general. Mientras que la primera ecuación está
basada en datos obtenidos con el método de Jaffé convencional, una nueva versión
de la segunda se emplea para métodos de creatinina que pueden rastrearse a DI-
EM. Ambos métodos son aptos para adultos En niños debe emplearse la fórmula
de Bedside Schwartz.
Adicionalmente al diagnóstico y tratamiento de la insuficiencia renal y al control de
la diálisis renal, la medición de creatinina se emplea también para calcular la
excreción fraccional de otros analitos en orina (p. ej. La albúmina y la α-amilasa).
Son numerosos los métodos para determinar la creatinina. Los tests automáticos
establecidos en el laboratorio de rutina incluyen la prueba de Jaffé con picrato
alcalino en sus diferentes modificaciones y la determinación enzimática.
Principio de test
El método enzimático se basa en la conversión de la creatinina a glicina,
formaldehído y peróxido de hidrógeno por la acción de la creatininasa, la creatinasa
y la sacrosina oxidasa. Catalizado por la peroxidasa, el peróxido de hidrógeno
liberado reacciona con la 4-aminofenazona y el HTIBa para formar cromógeno de
quinonaimina. La intensidad cromática del cromógeno de quinonaimina formado es
directamente proporcional
a la concentración de creatinina en la mezcla de reacción.
63
|
Durante la incubación en R1, la creatinina de la muestra es destruida por la

creatinasa, SOD y catalasa.
a) ( ácido 2,4,6-triyodo-3-hidroxibenzoico)

muestras.
Suero.
Orina.
No emplear aditivos para recoger la orina. Pero si se requiere un conservante para
otros analitos para recoger la orina, sólo puede aceptarse el ácido clorhídrico (14-
47 mmol/L de orina, p. ej. 5 mL de HCI al 10 % ó 5 mL de HCI al 30 % por litro de
orina) o bien el ácido bórico (81 mmol/L, p. ej. 5 g por litro de orina).
Estabilidad en suero/plasma: 7 días a 15-25 °C
7 días a 2-8 °C
3 meses a (-15)-(-25) °C
Estabilidad en orina (sin conservante):
2 días a 15-25 °C
6 días a 2-8 °C
6 meses a (-15)-(-25) °C
Estabilidad en orina (con conservante):
3 días a 15-25 °C
8 días a 2-8 °C
64
|
3 semanas a (-15)-(-25) °C
Calibración
S2: C.f.a.s.
Frecuencia de calibración
- al cabo de 4 semanas dentro de laestabilidad (Calibración de blanco)
Calibración a 2 puntos
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a ID/MS
(espectrometría de masa con dilución isotópica).
Cálculo
Los analizadores Roche/Hitachi cobas c calculan automáticamente la
concentración de analito de cada muestra.
μmol/L x 0.0113 = mg/dL
μmol/L x 0.001 = mmol/L

creatinina sérica de 80 μmol/L (0.9 mg/dL) y de creatinina en orina de 2500 μmol/L
(28.3 mg/dL).
Suero/plasma
conjugada y de 20 para la bilirrubina sin conjugar (concentración de la bilirrubina
conjugada: aprox. 257 μmol/L ó 15 mg/dL; concentración de la bilirrubina sin
conjugar: aprox. 342 μmol/L o 20 mg/dL).
65
|

Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas hasta un índice L de 2000. No
existe una correlación concluyente entre el índice L (correspondiente a la turbidez)
Ácido ascórbico: Valores de ácido ascórbico inferiores a 1.70 mmol/L ó 300 mg/L no
interfieren en el test.
Excepciones: La rifampicina, la levodopa y el dobesilato de calcio (p.ej. Dexium)
pueden acarrear resultados falsamente reducidos de creatinina. La N-etilglicina en
concentraciones terapéuticas y la DL-prolina en concentraciones ≥ 1 mmol/L (≥ 115
mg/L) deparan valores falsos elevados.
Sin interferencias significativas hasta una concentración de creatina de 4 mmol/L
(524 mg/L).
Las muestras hemolizadas de neonatos, niños o adultos con valores de la
hemoglobina fetal ≥ 600 mg/dL interfieren en el test.
En concentraciones terapéuticas, la 2–fenil-1,3–indandiona (fenindiona) interfiere
en el test.
Si la velocidad de filtración glomerular (VFG) se estima según la fórmula de
Schwartz, se pueden obtener resultados falsos elevados.
Orina
El ácido ascórbico < 22.7 mmol/L (< 4000 mg/L), la glucosa < 120 mmol/L (< 2.162
mg/dL) y el urobilinógeno < 676 μmol/L (< 40 mg/dL) no interfieren en el test.
66
|
Excepciones: El dobesilato de calcio (p.ej. Dexium), Levodopa y la α-metildopa

pueden acarrear resultados falsamente reducidos de creatinina.
Altas concentraciones de ácido homogentísico en muestras de orina provocan
resultados falsos.
Suero/plasma
5-2700 μmol/L (0.06-30.5 mg/dL)
repetición del ciclo es de 1:4. Los resultados de las muestras diluidas usando la
función de repetición del ciclo se multiplican automáticamente por el factor 4.
Orina
100-54000 μmol/L (1.1-610 mg/dL)
repetición del ciclo es de 1:2.5. Los resultados de las muestras diluidas usando la
función de repetición del ciclo se multiplican automáticamente por el factor 2.5.
Valores teóricos
Suero/plasma
Adultos
Mujeres 45-84 μmol/L (0.51-0.95 mg/dL)
Hombres 59-104 μmol/L (0.67-1.17 mg/dL)
Niños
Neonatos (prematuros) 29-87 μmol/L (0.33-0.98 mg/dL)
Neonatos (a término) 27-77 μmol/L (0.31-0.88 mg/dL)
2-12 m 14-34 μmol/L (0.16-0.39 mg/dL)
de 1 - < 3 años 15-31 μmol/L (0.18-0.35 mg/dL)
67
|

Orina
1ra orina de la mañana
Mujeres 2.55-20.0 mmol/L (29-226 mg/dL)
Hombres 3.54-24.6 mmol/L (40-278 mg/dL)
Orina de 24 horas:
Mujeres 6-13 mmol/24 (720-1510 mg/24 h)
Hombres 9-19 mmol/24 h (980-2200 mg/24 h)
Aclaramiento de creatinina 66-143 mL/min
2.13 Creatinkinasa (CK)
Características
La enzima CK es un dímero compuesto de subunidades procedentes del músculo
(M) o del cerebro (B). Se han identificado tres isoenzimas: MM, MB y BB. La CK
sérica normal está formada principalmente por la isoenzima CK‑MM. Se observan
niveles séricos elevados de CK en las enfermedades del músculo esquelético,
especialmente en la distrofia muscular. La fracción CK‑MB se encuentra sobre todo
en el tejido miocárdico y su presencia se detecta, por regla general, en las 48 horas
siguientes al inicio de un infarto de miocardio. La determinación de la CK total y la
CK‑MB en el diagnóstico del infarto de miocardio constituye la aplicación individual
más importante de la medición de la CK en química clínica. La actividad de la CK
sérica también está aumentada en los estados posteriores a isquemia cerebral,
enfermedades cerebrovasculares agudas y traumatismos craneales.
En 1977, la Sociedad Alemana de Química Clínica (DGKC) y en 1989 la Federación
Internacional de Química Clínica (IFCC) recomendaron métodos estandarizados
68
|
para determinar la CK con reacción inversa y activación por NAC. El presente test
cumple con las recomendaciones de la IFCC y de la DGKC pero ha sido mejorado
en cuanto al rendimiento y la estabilidad.
Test UV
La velocidad de formación de NADPH es directamente proporcional a la actividad

catalítica de la CK. Se determina midiendo el aumento de la absorbancia.
Cantidades equimolares de NADPH y ATP se forman simultáneamente. La
velocidad de formación de NADPH medida por fotometría es directamente
proporcional a la actividad de CK.
Precauciones

muestras.
69
|
Suero (sin hemólisis). El suero sin hemolizar es la muestra más adecuada y
recomendada por la IFCC.
Plasma (sin hemólisis) tratado con heparina de litio.
Advertencia: Se pueden obtener resultados divergentes en suero y plasma debido
a diferentes grados de hemólisis como consecuencia del procedimiento de
obtención de muestras.
Calibración
S2: C.f.a.s.
IFCC utilizando pipetas calibradas con un fotómetro manual que proporciona

creatina quinasa de 140 U/L (2.34 μkat/L).
70
|

de hemoglobina: aproximadamente 124 μmol/L o 200 mg/dL). La magnitud de la
interferencia puede variar según el contenido exacto de eritrocitos.
y la concentración de triglicéridos. En caso de muestras altamente lipémicas (índice
L > 1000) puede producirse un aviso de alta absorbancia. Seleccionar el tratamiento
de muestra diluida para el reprocesamiento automático.
común en concentraciones terapéuticas.9,10 Excepción: El fármaco Cyanokit
(hidroxocobalamina) puede causar interferencias con los resultados.
Valores teóricos
Los intervalos de referencia dependen en gran medida del grupo de pacientes y de
la situación clínica específica.
Para individuos sanos según Klein et al.:12
CK μkat/L U/L
Hombres 0.65‑5.14 39‑308
Mujeres 0.43‑3.21 26‑192
CK μkat/L U/L
Hombres < 3.20 < 190
Mujeres < 2.85 < 170
CK‑MB μkat/L U/L
Hombres/mujeres < 0.42 < 25
71
|
Infarto de miocardio: La probabilidad de lesión miocárdica es alta si se cumplen las

tres siguientes condiciones:
μkat/L U/L
1 CKhombres> 3.17 > 190
CKmujeres> 2.79 > 167
2 CK‑MB > 0.40 > 24
3 La actividad de la CK‑MB constituye el 6‑25 % de la actividad de la CK total.
Según Tietz:
CK μkat/L U/L
Hombres > 19 años 0.33‑3.34 20‑200
Mujeres > 19 años 0.33‑3.01 20‑180
Para garantizar una alta sensibilidad en el diagnóstico de cardiopatías, se

recomienda emplear los valores indicados por Tietz. La eventual pérdida de
especificidad diagnóstica puede compensarse determinando adicionalmente la
CK‑MB y/o la troponina T. Si existe la sospecha de un infarto de miocardio, se
recomienda seguir las propuestas estratégicas indicadas en el documento de
consenso de cardiólogos europeos y americanos.
Si, a pesar de la sospecha de infarto de miocardio, los valores registrados se
mantienen por debajo de los límites indicados, puede tratarse de un infarto reciente.
En tales casos deberán repetirse las determinaciones al cabo de 4 horas.
En personas sanas, los valores de CK pueden variar según el grado de ejercicio
físico y la raza.
a su grupo de pacientes y, en caso necesario, establecer sus propios valores
CreatinKinasa Fracción MB
Características
72
|
La creatina quinasa (CK) aparece en forma de tres isoenzimas que son dímeros
compuestos por dos tipos de subunidades monoméricas. Las isoenzimas
comprenden las tres combinaciones posibles de los monómeros, M (derivado del
músculo esquelético) y B (derivado del cerebro), según lo representa la
denominación MM, MB y BB.
Si bien son numerosos los órganos que contienen CK, las isoenzimas se distribuyen
de forma diferente en cada uno. El músculo esquelético es muy rico en isoenzima
MM, mientras que el cerebro, el estómago, el intestino, la vesícula y los pulmones
contienen principalmente la isoenzima BB. La isoenzima MB se determina sólo en
el tejido miocárdico en cantidades considerables (del 15 al 20 %). Así, la actividad
sérica total de CK se encuentra aumentada en varias enfermedades. Esta falta de
especificidad constituye una limitación de su valor diagnóstico. Sin embargo, las
notables diferencias existentes entre los patrones isoenzimáticos en los diferentes
órganos han convertido a la CK en una de las enzimas más útiles para el diagnóstico
del infarto agudo de miocardio. La CK‑MB aparece en el suero indicando de esta
manera su presencia exclusiva en el tejido miocárdico.
En el laboratorio clínico, la determinación en serie de las isoenzimas CK se aplica
con mayor frecuencia para corroborar el diagnóstico del infarto de miocardio.
Tras la inmunoinhibición de la subunidad CK‑M con anticuerpos, la actividad de la
CK‑B se determina mediante un método estandarizado para la determinación de
CK con reacción inversa y activación por NAC, según lo recomendado por la
Sociedad Alemana de Química Clínica (DGKC) en 1977 y por la Federación
Internacional de Química Clínica (IFCC) en 2002. El presente test cumple con las
recomendaciones de la IFCC y la DGKC pero ha sido mejorado en cuanto al
funcionamiento y la estabilidad.
Principio del test

Test UV inmunológico
Las subunidades CK‑M son inhibidas por anticuerpos específicos. Puesto que la
CK‑BB pocas veces aparece en suero, se considera que la activida de la CK‑B se
73
|
deriva de la CK‑MB presente en la muestra. La actividad de las subunidades CK‑B

se determina y multiplica por 2 para poder estimar la actividad de la CK‑MB. La CK
es activada por la N‑acetilcisteína (NAC). En una reacción primaria, la CK activada
cataliza la desfosforilación del fosfato de creatina para formar creatina y ATP. En
una reacción de acoplamiento catalizada por la hexoquinasa (HK), la glucosa es
fosforilada por ATP para formar D‑glucosa‑6‑fosfato (G6P). Finalmente, la
glucosa‑6‑fosfato‑deshidrogenasa (G6PDH) cataliza la oxidación de G6P por
NADP+ para formar el 6‑fosfogluconato y NADPH.
La velocidad de formación de NADPH es directamente proporcional a la actividad

catalítica de la CK‑MB. Se determina por fotometría midiendo el aumento de la
absorbancia.

Sólo para el uso diagnóstico in vitro.
74
|

muestras.
Suero (sin hemólisis). El suero sin hemolizar es la muestra más adecuada y
recomendada por la IFCC.
Plasma (sin hemólisis) tratado con heparina de litio
En concentraciones normales, la heparina de litio no interfiere con el presente test
aunque la IFCC previene contra su uso.
No emplear plasma preparado con otros anticoagulantes.
Estabilidad en suero: 98 horas a 20‑24 °C
8 días a 2‑8 °C
4 semanas a -20 °C
Estabilidad en plasma con heparina: 98 horas a 20‑24 °C
5 días a 2‑8 °C
8 días a -20 °C
Calibración
75
|
S2: C.f.a.s. CK‑MB

Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a la formulación
original de la IFCC3 con adición de anticuerpos empleando pipetas calibradas junto
con un fotómetro manual obteniendo valores absolutos y la absortividad específica
de sustratos.

Limitaciones del análisis - Interferencias
Se recomienda determinar la actividad total de la CK en la muestra antes de efectuar
el test de CK‑MB. La cantidad de anticuerpos anti‑subunidad CK‑M humana en el
reactivo CK‑MB es suficiente para inhibir completamente una actividad de CK‑MM
de hasta 2000 U/L. Si la actividad total de la CK excede 2000 U/L, la muestra
requiere ser diluida porque no puede garantizarse la inhibición completa de la
subunidad CK‑M. El método CK-MB no determina únicamente la CK‑MB, sino
también la CK‑BB, la CK mitocondrial o la IgG‑CK‑BB presentes en el suero de
pacientes. Estas últimas fuentes de actividad de la CK‑B pueden distinguirse por la
elevación persistente de la CK‑MB durante un período de tiempo prolongado. La
presencia de isoenzimas CK atípicas puede confirmarse por electroforesis.
creatina quinasa MB de 25 U/L (0.42 μkat/L).
conjugada: aproximadamente 684 μmol/L o 40 mg/dL; concentración de la
bilirrubina sin conjugar: aproximadamente 342 μmol/L o 20 mg/dL).
76
|

y la concentración de triglicéridos. En caso de muestras lipémicas (índice L > 100)
puede producirse un aviso de alta absorbancia. Seleccionar el tratamiento de
muestra diluida para el reprocesamiento automático.
En pacientes predispuestos a formar macro‑CK pueden medirse valores altos de
CK‑MB no plausibles respecto del valor de la CK total, porque las macroformas se
componen en su mayoría de subunidades de CK‑B. Ya que estos pacientes
generalmente no han sido víctimas de un infarto de miocardio, se requieren medidas
diagnósticas adicionales.
Adenilato quinasa: La adenilato quinasa (AK) puede causar interferencias positivas.
La AK en sangre puede provenir de los eritrocitos, los músculos y el hígado. A fin
de reducir a un mínimo la interferencia por AK, el reactivo incluye AMP y Ap5A. Esta
mezcla de AMP/Ap5A provoca que se inhiba el 97 % de la AK proveniente de los
eritrocitos y los músculos, así como el 95 % de la AK proveniente del hígado. Una
leve actividad residual de la AK no influye el análisis de la CK total, si bien puede
afectar las actividades bajas de CK‑MB.
común en concentraciones terapéuticas. Excepciones: En concentraciones
fisiológicas, la sulfasalazina o la sulfapiridina plasmáticas pueden llevar a resultados
falsos.
exámenes.
77
|
3‑500 U/L (0.05‑8.35 μkat/L)
Determinar las muestras con actividades superiores por la función de repetición. En
este caso, las muestras se diluyen de 1:1.99. Los resultados de las muestras
diluidas por la función de repetición se multiplican automáticamente por el factor
1.99.
Valores teóricos
Los intervalos de referencia dependen en gran medida del grupo de pacientes y de
la situación clínica específica.
Para personas sanas: Intervalo de referencia (37 °C) según Klein et al. y valores de
consenso:
< 25 U/L (< 0.421 μkat/L)
Para el diagnóstico del infarto de miocardio mediante una combinación entre CK y
actividad de la CK‑MB, con un valor consensual de CK basado en experiencias a
largo plazo:
1. CK hombres> 190 U/L (3.12 μkat/L)
CKmujeres> 167 U/L (2.87 μkat/L)
2. CK‑MB > 24 U/L (0.40 μkat/L)
3. La actividad de la CK‑MB constituye el 6‑25 % de la actividad de la CK total.
En caso de sospechar un infarto de miocardio, proceder según las estrategias
diagnósticas propuestas en el documento de consenso de cardiólogos europeos y
estadounidenses.
Si, a pesar de la sospecha de infarto de miocardio, los valores registrados se
mantienen por debajo de los límites indicados, puede tratarse de un infarto reciente.
En este caso deberían repetirse las determinaciones al cabo de 4 horas.
78
|
Dimero D
Características
La trombina convierte el fibrinógeno en fibrina soluble desdoblando los
fibrinopéptidos A y B. Los monómeros de fibrina se polimerizan espontáneamente.
El factor XIII activo reticula dos dominios D y genera un coágulo de fibrina sólido.
Así se forma un nuevo determinante antigénico resistente a la plasmina (el dímero
D). Por consiguiente, los fragmentos que contienen dímero D se forman cuando la
plasmina disuelve un coágulo de fibrina.
Una gran parte de los productos de degradación de la fibrina son olígomeros X de
alto peso molecular. El test Tina-quant D-Dimer tiene una alta afinidad con estos
productos de degradación de alto peso molecular. La degradación completa hasta
obtener moléculas de dímero D tiene lugar solamente in vitro o bajo terapia de lisis.
El dímero D constituye un marcador de la activación de la coagulación altamente
sensible. Si se encuentran valores de dímero D inferiores al valor de corte, la
trombosis venosa profunda de las extremidades inferiores (TVP) o bien la embolia
pulmonar (EP) pueden excluirse con alta sensibilidad.
Se recomienda no emplear nunca el resultado de dímero D de forma aislada, sino
combinándolo siempre con una herramienta de evaluación clínica de la
probabilidad, como por ejemplo la escala de Wells. Se recomienda excluir la TVP/EP
únicamente si su probabilidad clínica es baja o moderada (no alta) y el resultado de
la prueba Tina-quant D-Dimer es normal (< 0.5 μg UEF/mL).
Es un hecho conocido que pacientes con TVP distal o EP subsegmental/periférica
pueden presentar valores normales en el test Tina-quant D-Dimer. La relevancia
clínica de este tipo de trombos de pequeño tamaño sigue sin ser elucidada. Los
buenos resultados obtenidos en aquellos estudios en los que los pacientes fueron
tratados a partir del resultado obtenido en el test Tina-quant D-Dimer con un
seguimiento trimestral hacen suponer que estos trombos de pequeño tamaño no
tienen consecuencias adversas para los pacientes.
79
|
Los productos de degradación de la fibrina constituyen un marcador sensible para

la coagulación intravasal diseminada (CID)/coagulopatía de consumo. El control de
la evolución de la concentración de los productos de degradación de la fibrina se
emplea para
• confirmar o refutar un diagnóstico de sospecha
• estimar el riesgo de pacientes con CID
• controlar un tratamiento ya iniciado
Más allá de su importancia para el diagnóstico de la TVP, EP y CID, los valores de
dímero D pueden reflejar otras causas asociadas a la formación de fibrina como el
trauma, complicaciones en el embarazo, enfermedades malignas o anomalías
vasculares. Así, los niveles elevados de dímero D deben ser interpretados en el
contexto de las posibles dolencias subyacentes y sus síntomas clínicos.
Principio del test

Test inmunoturbidimétrico potenciado por partículas.
Las partículas de látex de tamaño uniforme, revestidas con anticuerpos
monoclonales (fragmentos F (ab’)2) se dirigen contra el epítopo del dímero D.
Cuando se añaden muestras que contienen dímero D se forman complejos
antígeno-anticuerpo que producen un aumento de la turbidez en la mezcla de
reacción. El cambio de la absorbancia en función del tiempo depende de la
concentración de los epítopos del dímero D contenidos en la muestra. El precipitado
se determina por turbidimetría.

muestras.
Plasma citratado
Recoger la sangre venosa en tubos estándar de muestra para análisis de
coagulación.
80
|
También puede emplearse plasma tratado con heparina de litio 2 y EDTA bi y

tripotásico. A diferencia de su comportamiento en tubos citratados, la muestra no se
diluye al emplear tubos conteniendo heparina o EDTA. Por esta razón, los valores
de dímero D obtenidos en muestras de plasma heparinizado o EDTA son,
promedialmente, en un 19 % superiores en todo el intervalo de medición. Sin
embargo, si se adaptan los valores de calibración y de control, se obtienen los
mismos valores para todo el material de muestra.
CUIDADO: Para evitar valores erróneos en muestras de pacientes, se recomienda
efectuar las determinaciones de dímero D uniformemente en plasma citratado o en
plasma con heparina/EDTA.
Descongelar las muestras congeladas a 37° C y a continuación, mezclarlas bien.

Antes de realizar el test, dejar reposar 15 minutos a temperatura ambiente y a
continuación, analizar inmediatamente. Para los análisis de coagulación, no volver
a congelar una muestra descongelada.
Emplear las muestras sin diluir.
Estabilidad: 8 horas a 15-25 °C
4 días a 2-8 °C
6 meses a (-15)-(-25) °C
Calibración
Calibradores S1-S6: D-Dimer Gen.2 Calibrator Set
Modo de calibración Spline
Frecuencia de calibraciones Calibración completa
- cada 6 meses si se trata del mismo lote de reactivos
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente
al método Asserachrom D-Dimer.28
Factores de conversión: μg UEF/mL = mg UEF/L
μg UEF/mL x 1000 = ng UEF/mL
81
|

concentración de dímero D de 0.5 μg de UEF/mL.
conjugada: aprox. 1026 μmol/L ó 60 mg/dL y de la bilirrubina sin conjugar: aprox.
513 μmol/L ó 30 mg/dL).
Lipemia: Sin interferencias significativas hasta el índice L de 1000.
Existe una mínima correlación entre el índice L (correspondiente a la turbidez) y la
concentración de triglicéridos. Los factores reumatoides hasta 100 UI/mL no
interfieren en el test. Las concentraciones de heparina hasta 100 UI/mL no
interfieren en el test.
Efecto prozona (high-dose hook): No se produjeron resultados falsos hasta una
concentración de dímero D de 220 μg UEF/mL.
Otros: Durante la terapia de lisis en caso de altas concentraciones de fragmentos
de dímero D se pueden obtener mediciones falsas reducidas.
análisis.
Valores teóricos
< 0.5 μg de equivalente de fibrinógeno/mL (μg UEF/mL).
El equivalente de fibrinógeno indicado se basa en la cantidad de fibrinógeno
empleado en la preparación del estándar original de Asserachrom.
82
|
0.15-9.00 μg UEF/mL
repetición del ciclo. En muestras con concentraciones superiores, la función de
repetición del test disminuye el volumen de la muestra por el factor 2.4. Los
resultados son multiplicados automáticamente por este factor.
Factor Reumatoide
Generalidades
Los factores reumatoideos son un grupo heterogéneo de autoanticuerpos dirigidos
contra los determinantes antigénicos de la región Fc de las moléculas de IgG.
Desempeñan un papel importante en el diagnóstico de la artritis reumatoidea, pero
también pueden aparecer en otras enfermedades reumáticas inflamatorias, así
como en diferentes enfermedades no reumáticas. Asimismo pueden manifestarse
en personas clínicamente sanas mayores de 60 años. A pesar de estas
consideraciones, la prueba de los factores reumatoides constituye un criterio
diagnóstico para la clasificación de la artritis reumatoide según el Colegio de
Reumatología de los EE.UU.
(American College of Rheumatology). Los autoanticuerpos se encuentran en
inmunoglobulinas de todo tipo, sin embargo, los métodos corrientes se limitan
generalmente a comprobar los factores reumatoideos del tipo IgM.
El método clásico de determinación de los factores reumatoideos es la aglutinación
con eritrocitos ovinos sensibilizados para IgG o bien con partículas de látex. Los
problemas específicos de estos métodos semicuantitativos son su escasa precisión
y reproducibilidad de laboratorio a laboratorio, así como su difícil estandarización.
Por esta razón, se han desarrollado nuevos métodos de determinación tales como
la nefelometría, la turbidimetría, los enzimoinmunoanálisis y los
radioinmunoanálisis. El test RF de Roche se basa en el principio de aglutinación
inmunológica con intensificación de la reacción por látex.
83
|
Principio del test

El antígeno IgG inactivado por calor fijado a partículas de látex, reacciona con los
anticuerpos anti-FR de la muestra formando un complejo antígeno-anticuerpo que
se mide turbidimétricamente después de la aglutinación.

muestras.
Suero
Estabilidad: 24 horas a 15-25 °C
3 días a 2-8 °C
4 semanas a (-15)-(-25) C (congelar sólo una vez)
Calibración
S2-6: Preciset RF
Modo de calibración RCM
Frecuencia de calibraciones Calibración completa
- después de 180 días (observe la fecha de caducidad)
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado con el estándar 64/2 de la
OMS

Criterio: Recuperación dentro de ± 10 % del valor inicial con una concentración del
FR de 14 UI/mL.
84
|

conjugada: aprox. 40 mg/dL ó 624 μmol/L y de la bilirrubina no conjugada: aprox.
60 mg/dL ó 1026 μmol/L).
Efecto prozona (high-dose hook): Aplicando la verificación cinética y con
concentraciones de FR hasta 6000 UI/mL, no hubo resultados erróneos sin aviso.
Existe la posibilidad de que otras sustancias y/o factores interfieran con el presente
test y causen resultados poco fiables.
análisis.
10-130 UI/mL
Determinar las muestras con concentraciones superiores por la función de
Valores teóricos
< 14 UI/mL
85
|
Fosfatasa Alcalina
Características
La fosfatasa alcalina consta de cuatro genotipos estructurales en suero: el tipo de
origen hepático, óseo y renal, el tipo intestinal, el tipo placentario y la variante de las
células germinales. La fosfatasa alcalina se encuentra en los osteoblastos, los
hepatocitos, los riñones, el bazo, la placenta, la próstata, los leucocitos y el intestino
delgado. El tipo de origen hepático, óseo y renal es de particular importancia.
Se registran valores elevados de fosfatasa alcalina en todas las formas de la
colestasis, especialmente en la ictericia obstructiva. Su actividad también está
elevada en enfermedades del esqueleto tales como la enfermedad de Paget, el
hiperparatiroidismo, el raquitismo, la osteomalacia, así como en fracturas y tumores
malignos. En niños y adolescentes se observa frecuentemente un fuerte incremento
de la actividad de la fosfatasa alcalina, pues cuando el crecimiento óseo se acelera,
la actividad de los osteoblastos aumenta.
El método de determinación fue descrito primeramente por King y Armstrong,
modificado por Ohmori, Bessey, Lowry y Brock, y finalmente optimizado por
Hausamen y cols. En 1983, la Federación Internacional de Química Clínica (IFCC)
recomendó un método estandarizado para determinar la fosfatasa alcalina con una
concentración de substrato óptima y el empleo de 2‑amino‑2‑metil‑1‑propanol
como tampón y los cationes magnesio y cinc. El test aquí descrito ha sido
desarrollado a partir de estas recomendaciones y ha sido mejorado en cuanto al
rendimiento y la estabilidad. La prueba ha sido estandarizada frente a la fórmula de
referencia de la IFCC indicada más arriba.
Principio del test

Test colorimétrico según un método estandarizado
En presencia de iones de magnesio y cinc, las fosfatasas desdoblan el
p‑nitrofenilfosfato a fosfato y p‑nitrofenol.
86
|
El p‑nitrofenol liberado es directamente proporcional a la actividad catalítica de la

ALP. Se determina midiendo el aumento de la absorbancia.
Medidas de precaución y advertencies

muestras.
Suero.
87
|
7 días a 2‑8 °C
2 meses a (-15) ‑(-25) °C
Calibración
S2: C.f.a.s.
Trazabilidad: El presente método fue estandarizado frente a la fórmula propuesta
por la IFCC utilizando pipetas calibradas con un fotómetro manual que proporciona

fosfatasa alcalina de 100 U/L (1.67 μkat/L).
común empleando concentraciones terapéuticas.
88
|
exámenes.
5‑1200 U/L (0.084‑20.0 μkat/L)
Determinar las muestras con actividades superiores por la función de repetición. En
este caso, las muestras se diluyen de 1:5. Los resultados de las muestras diluidas
usando la función de repetición se multiplican automáticamente por el factor 5.
Valores teóricos
(Valores medidos a 37 °C)
Adultos
Hombres (n = 221) 40‑129 U/L (0.67‑2.15 μkat/L)
Mujeres (n = 229) 35‑104 U/L (0.58‑1.74 μkat/L)
Valores de consenso
Hombres 40‑130 U/L (0.67‑2.17 μkat/L)
Mujeres 35‑105 U/L (0.58‑1.75 μkat/L)
Niños)
De 1 día de edad < 250 U/L (< 4.17 μkat/L)
De 2‑5 días de edad < 231 U/L (< 3.84 μkat/L)
De 6 días‑6 meses de edad < 449 U/L (< 7.49 μkat/L)
De 7 meses‑1 año de edad < 462 U/L (< 7.69 μkat/L)
De 1‑3 años de edad < 281 U/L (< 4.67 μkat/L)
De 13‑17 años de edad
89
|
(Mujeres)
< 187 U/L (< 3.11 μkat/L)
De 13‑17 años de edad
(Hombres)
< 390 U/L (< 6.51 μkat/L)
a) Calculado a partir de intervalos de referencia publicados para el método
ALP opt. (DGKC) empleando un factor de 0.417 derivado de una comparación de
métodos.
Fósforo
Características
El 88 % del fósforo que se encuentra en el organismo se localiza en los huesos en
forma de fosfato cálcico como apatito Ca2 + [Ca3(PO4)2]32-. El calcio restante
participa en el metabolismo intermediario de los carbohidratos y se halla en
sustancias fisiológicamente importantes como los fosfolípidos, los ácidos nucleicos
y el ATP. En la sangre, el fósforo está presente en forma de fosfato inorgánico y
ácido fosfórico fijado orgánicamente. La pequeña proporción de fósforo orgánico
extracelular existente se halla casi exclusivamente en forma de fosfolípidos.
El fósforo y el calcio se encuentran en la sangre en una relación de 6 a 10.
El aumento de la concentración de fósforo provoca una disminución del nivel de
calcio, mecanismo que se ve influido por una interacción entre la parathormona y la
vitamina D. Así, el hipoparatiroidismo, la intoxicación con vitamina D y la
insuficiencia renal con escasa filtración glomerular de fósforo provocan
hiperfosfatemia. La hipofosfatemia acompaña el raquitismo, el hiperparatiroidismo y
el síndrome de Fanconi.
El fósforo inorgánico se determina preferentemente a partir de la formación de

fosfomolibdato de amonio con posterior reducción a azul de molibdeno.
Este método tiene el inconveniente que la estabilidad de los reactivos suele ser
problemática. El método aquí presentado se basa en la reacción del fosfato con
molibdato de amonio para formar fosfomolibdato de amonio sin reducción. La
90
|
adición de un acelerador permite obtener una reacción más rápida y la aplicación

de un blanco de muestra proporciona resultados más precisos.
Principio del test

Método por radiación ultravioleta con molibdato.
En presencia de ácido sulfúrico, el fosfato inorgánico forma un complejo de
fosfomolibdato de amonio con el molibdato de amonio que se expresa con la fórmula
(NH4)3[PO4(MoO3)12].
La concentración del fosfomolibdato formado es directamente proporcional a la

concentración de fosfato inorgánico y se mide fotométricamente.

muestras.
91
|
Suero
Orina
Recoger la orina en recipientes sin detergente. Una vez recogida la orina, acidificar
con ácido clorhídrico (pH < 3).
Estabilidad en suero/plasma: 24 horas a 15‑25 °C
4 días a 2‑8 °C
1 año a (-15)‑(-25) °C
Estabilidad en orina:
Orina de 24 horas: 6 meses a 2‑8 °C (muestras acificadas)
Guardar en el refrigerador mientras se recoge.
Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de realizar el Ensayo
Calibración
S2: C.f.a.s.
• Tras cambiar de lote de reactivos
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente al material primario
de referencia NERL.

mmol/L x 31 = mg/L
mg/L x 0.0323 = mmol/L
Limitaciones del análisis - interferencias6

fosfato de 0.87 mmol/L (2.7 mg/dL).
92
|
Suero/plasma
Hemólisis: Se produce una interferencia positiva significativa a un índice H > 300
(concentración de hemoglobina: aproximadamente 186 μmol/L o 300 mg/dL).
Nota: Esta interferencia se debe al fosfato inorgánico producido por acción de la
fosfatasa sobre el fosfato orgánico, ambos liberados de los eritrocitos tras hemólisis.
común empleando concentraciones terapéuticas.
Excepción: Los fosfolípidos contenidos en diversas formulaciones farmacéuticas
liposomales (p.ej. AmBisome) pueden ser hidrolizados por el pH ácido del test
llevando a valores elevados de fosfato.
Orina
exámenes.
Suero/plasma
0.10‑6.46 mmol/L (0.31‑20.0 mg/dL)
93
|
muestras diluidas por la función de repetición se multiplican automáticamente por el

factor 2.
Orina
1.1‑92 mmol/L (3.4‑285 mg/dL)
muestras diluidas por la función de repetición se multiplican automáticamente por el
factor 2.
Valores teóricos
Suero/plasma
Adultos
0.81‑1.45 mmol/L (2.5‑4.5 mg/dL)
Niños:
Edad Hombres Mujeres
mmol/L (mg/dL) mmol/L (mg/dL)
1-30 días 1.25–2.25 (3.9–6.9) 1.40–2.50 (4.3–7.7)
1–12 m 1.15–2.15 (3.5–6.6) 1.20–2.10 (3.7–6.5)
1–3 años 1.00–1.95 (3.1–6.0) 1.10–1.95 (3.4–6.0)
4–6 años 1.05–1.80 (3.3–5.6) 1.05–1.80 (3.2–5.5)
7–9 años 0.95–1.75 (3.0–5.4) 1.00–1.80 (3.1–5.5)
10–12 años 1.05–1.85 (3.2–5.7) 1.05–1.70 (3.3–5.3)
13–15 años 0.95–1.65 (2.9–5.1) 0.90–1.55 (2.8–4.8)
16–18 años 0.85–1.60 (2.7–4.9) 0.80–1.55 (2.5–4.8)
Orina
1a orina de la mañana: 13‑44 mmol/L (40‑136 mg/dL)
Orina de 24 horas: 13‑42 mmol/d (0.4‑1.3 g/d
94
|
Gamma Glutamiltransferasa (GGT)

Características
La γ‑glutamiltransferasa contribuye al diagnóstico y seguimiento de las
enfermedades hepatobiliares. La actividad enzimática de la GGT constituye
frecuentemente el único parámetro cuyos valores aumentan en este tipo de
enfermedades y es considerado como uno de los indicadores más sensibles.
Además, la prueba de la γ‑glutamiltransferasa es un test sensible para cribar el
alcoholismo encubierto. En el suero de pacientes bajo medicación a largo plazo con
fenobarbital y fenitoína también se detectan actividades aumentadas de GGT.
En 1969, Szasz describió la primera determinación cinética de la GGT en suero
empleando la γ‑glutamil‑p‑nitroanilida como substrato y la glicilglicina como
aceptor. A fin de sortear el problema presentado por la escasa solubilidad de
la‑γ‑glutamil‑p‑nitroanilida, Persijn y van der Slik investigaron varios derivados del
compuesto para hallar que la estabilidad y solubilidad del sustrato soluble en agua
L‑γ‑glutamil‑3‑carboxi‑4‑nitroanilida son superiores. Los resultados del test se
correlacionan con los obtenidos con el sustrato original.
En 2002, la Federación Internacional de Química Clínica (IFCC) recomendó el
procedimiento estandarizado para determinar la GGT, que incluyen una
concentración de sustrato optimizada, el empleo de NaOH, el tampón de glicilglicina
y una muestra iniciadora de la reacción. El reactivo GGT líquido cumple con la
formulación recomendada por Szasz, si bien su estabilidad y funcionamiento han
sido mejorados. El test ha sido estandarizado de forma opcional frente al método
original de la IFCC y de
Szasz. Los datos de funcionamiento e informaciones aquí presentados son
independientes de la estandarización.
Principio del test
95
|
Método enzimático, colorimétrico La γ‑glutamiltransferasa transfiere el grupo

γ‑glutamílico de L‑γ‑glutamil‑3‑carboxi‑4‑nitroanilida a la glicilglicina.
La cantidad de 5‑amino‑2‑nitrobenzoato liberada es proporcional a la actividad de

la GGT en la muestra. Se determina por fotometría midiendo el aumento de la
absorbancia.

muestras.
Suero: Recoger las muestras de suero en tubos estándar.
Plasma tratado con heparina de litio y EDTA dipotásico
7 días a 2‑8 °C
1 año a (-15)‑(-25) °C
Calibración
S2: C.f.a.s.
Trazabilidad: El presente test ha sido estandarizado tanto frente a la formulación
original de la IFCC (de 2002)5 como frente al método GGT publicado por Persijn y
van der Slik (de1976).
Utilizar el valor apropiado del calibrador para la aplicación correspondiente.
96
|
Limitaciones del análisis – interferencias

γ‑glutamiltransferasa de 40 U/L (0.67 μkat/L).
conjugada y de 20 para la bilirrubina no conjugada (concentración de la bilirrubina
conjugada: aprox. 855 μmol/L o 50 mg/dL; concentración de la bilirrubina sin
conjugar: aproximadamente 342 μmol/L o 20 mg/dL).
Para el diagnótico, los resultados del test siempre deben interpretarse teniendo en
exámenes.
3‑1200 U/L (0.05‑20.0 μkat/L)
las muestras diluidas usando la función de repetición del ciclo se multiplican
automáticamente por el factor 11.
Valores teóricos
Estandarización frente a Szasz (Persijn, van der Slik)
97
|
Hombres 8-61 U/L 0.13-1.02 μkat/L

Mujeres 5-36 U/L 0.08-0.60 μkat/L
Estandarización frente al método IFCC
Estudio del intervalo de referencia a 37 °C (corregido en 2005)
Hombres (n = 216) 10-71 U/L 0.17-1.19 μkat/L
Mujeres (n = 228) 6-42 U/L 0.10-0.70 μkat/L
Valores consensuales (IFCC)16
Hombres < 60 U/L < 1.00 μkat/L
Mujeres < 40 U/L < 0.67 μkat/L
Glucosa
Características
La glucosa es el carbohidrato más importante de la sangre periférica que, al
oxidarse, constituye la mayor fuente de energía celular en el organismo.
La glucosa proveniente de la alimentación se convierte a glucógeno para ser
almacenada en el hígado o a ácidos grasos para ser almacenada en el tejido
adiposo. El estrecho intervalo de concentración de la glucosa en sangre (glucemia)
es controlado por numerosas hormonas, siendo las más importantes las sintetizadas
en el páncreas.
La causa más frecuente de hiperglucemia es la diabetes mellitus, producida por una
deficiencia en la secreción o en la acción de la insulina.
Además, existen numerosos factores secundarios que contribuyen a elevar los
niveles de glucemia, incluyendo la pancreatitis, la disfunción tiroidea, la insuficiencia
renal y las hepatopatías.
La hipoglucemia se observa con menor frecuencia. Está causada por estados tales
como el insulinoma, el hipopituitarismo o el exceso de insulina. La determinación de
la glucosa en orina (glucosuria) se utiliza como procedimiento de cribado de la
diabetes y constituye un auxiliar en la evaluación de la glucosuria, la detección de
defectos en los túbulos renales y la gestión de la diabetes mellitus. La determinación
98
|
de la glucosa en el líquido cefalorraquídeo se utiliza en la evaluación de la

meningitis, la implicación neoplásica de las meninges y trastornos neurológicos.
Principio del test

Test por radiación ultravioleta
Método enzimático de referencia empleando hexoquinasa.
La hexoquinasa cataliza la fosforilación de la glucosa a glucosa‑6‑fosfato por ATP.
En presencia de NADP, la glucosa‑6‑fosfato deshidrogenasa oxida el

glucosa‑6‑fosfato a gluconato‑6‑fosfato. No se oxidan otros hidratos de carbono.
La velocidad de formación de NADPH durante la reacción es directamente
proporcional a la concentración de glucosa y se determina fotométricamente.

muestras.
Suero.
Plasma tratado con heparina de litio, EDTA dipotásico, EDTA con fluoruro
sódico/disódico, EDTA con fluoruro potásico/disódico, oxalato con fluoruro
sódico/potásico y EDTA con fluoruro sódico/citrato/disódico.
Recoger la sangre por punción venosa con un sistema de tubos al vacío en

individuos que estén en ayunas. La estabilidad de la glucosa en las muestras
depende de la temperatura de almacenamiento, la contaminación bacteriana y la
glucólisis. Separar las muestras de plasma o suero sin conservante (NaF) de las
células o del coágulo dentro del lapso de media hora tras su extracción. Si la sangre
se deja coagular tras su extracción y reposar sin ser centrifugada a temperatura
ambiente, la glucosa en suero disminuye en una tasa promedio de 7 % por hora
99
|
(0.28-0.56 mmol/L o 5-10 mg/dL). Esta reducción se debe a la glucólisis. Ésta puede
ser inhibida recogiendo las muestras en tubos que contienen fluoruro sódico.
Estabilidad (sin hemólisis): 8 horas a 15‑25 °C 72 horas a 2‑8 °C
Estabilidad en plasma con fluoruro: 6- 3 días a 15‑25 °C
Orina.
Utilizar un frasco pardo para recoger la orina. Antes de recoger orina de 24 horas,
añadir 5 mL de ácido acético glacial al frasco para conservar la glucosa. Si las
muestras de orina no se conservan adecuadamente pierden, conservadas a
temperatura ambiente durante 24 horas, hasta el 40 % de su contenido de glucosa.3
Por esta razón, conservar las muestras en hielo mientras se recogen.
LCR.
El líquido cefalorraquídeo puede contener bacterias u otros componentes celulares.
Por esta razón, las muestras de LCR destinadas a la determinación de glucosa
deben analizarse inmediatamente o conservarse a 4 °C o a -20 °C.
Calibración
S2: C.f.a.s.
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a DI/EM.
mmol/L x 0.1802 = g/L
glucosa de 3.9 mmol/L (70.3 mg/dL).
100
|
Suero/plasma
Orina
exámenes.
Suero, plasma, orina y LCR
0.11‑41.6 mmol/L (2‑750 mg/dL)
muestras diluidas usando la función de repetición se multiplican automáticamente
por el factor 2.
Valores teóricos
Plasma
En ayunas 4.11‑6.05 mmol/L (74‑109 mg/dL)
Orina
101
|
1ra orina de la mañana 0.3‑1.1 mmol/L (6‑20 mg/dL)

Orina de 24 horas 0.3‑0.96 mmol/L (6‑17 mg/dL) (orina promedio de 1350 mL/24
h)
Suero, plasma
Adultos 4.11‑5.89 mmol/L (74‑106 mg/dL)
60‑90 años 4.56‑6.38 mmol/L (82‑115 mg/dL)
> 90 años 4.16‑6.72 mmol/L (75‑121 mg/dL)
Niños 3.33‑5.55 mmol/L (60‑100 mg/dL)
Neonatos (1 día) 2.22‑3.33 mmol/L (40‑60 mg/dL)
Neonatos (> 1 día) 2.78‑4.44 mmol/L (50‑80 mg/dL)
Orina
Orina de 24 horas < 2.78 mmol/24 h (< 0.5 g/24 h)
Orina aleatoria 0.06‑0.83 mmol/L (1‑15 mg/dL)
LCR
Niños 3.33‑4.44 mmol/L (60‑80 mg/dL)
Adultos 2.22‑3.89 mmol/L (40‑70 mg/dL)
Los valores de glucosa en LCR deberían equivaler al aproximadamente
60 % de los valores en plasma. Para una interpretación clínica adecuada,
compararlos siempre con los valores de plasma obtenidos paralelamente.
Hemoglobina Glicosilada
Características
La hemoglobina (Hb), un componente de los eritrocitos, es una proteína de color
rojo formada por cuatro subunidades proteicas de las cuales cada una contiene una
porción hemo. Su función principal es el transporte de oxígeno y de dióxido de
carbono en la sangre. Cada molécula de Hb es capaz de fijar cuatro moléculas de
oxígeno. La Hb consiste en una serie de subfracciones y derivados. Dentro de este
grupo heterogéneo de hemoglobinas, la HbA1c constituye una de las hemoglobinas
glucosiladas, una subfracción formada por la adición de varios azúcares a la
102
|
molécula Hb. La HbA1c se forma en dos pasos por la reacción no enzimática de la

glucosa con el grupo amino N‑terminal de la cadena β de la hemoglobina de adultos
normales (HbA). El primer paso es reversible y resulta en la HbA1c lábil que se
reordena en el segundo paso de la reacción para generar la HbA1c estable.
En los eritrocitos aumenta la cantidad relativa de HbA transformada en HbA1c
estable según la concentración promedio de glucosa en sangre. La conversión a
HbA1c estable se encuentra limitada por la duración de la vida media de los
eritrocitos, de aproximadamente 100 a 120 días. En consecuencia, la concentración
de HbA1c determinada refleja el nivel promedio de glucemia en los 2 a 3 meses
previos a la medición. Por eso, la HbA1c permite controlar los niveles de glucemia
a largo plazo en individuos con diabetes mellitus. Las concentraciones de glucosa
más recientes influyen más fuertemente en el nivel de HbA1c.
La relación aproximada entre la HbA1c y el valor medio de glucemia durante los 2

a 3 meses previos ha sido analizada en numerosos estudios.
En un estudio reciente se obtuvo la siguiente correlación:
Estandarización IFCC
• Glucosa media estimada [mmol/L] = 0.146 x HbA1c (mmol/mol) + 0.834 o
• Glucosa media estimada [mg/dL] = 2.64 x HbA1c (mmol/mol) + 15.03
Estandarización según el DCCT/NGSP7
• Glucosa media estimada [mmol/L] = 1.59 x HbA1c (%) - 2.59 o
• Glucosa media estimada [mg/dL] = 28.7 x HbA1c (%) - 46.7
Si el metabolismo del diabético no se controla adecuadamente, aumenta el riesgo
que sufra complicaciones tales como la nefropatía y la retinopatía diabéticas. Por
indicar el nivel medio de glucemia, la HbA1c proporciona para diabéticos un
pronóstico de la evolución de las complicaciones propias de la enfermedad.
Para el control a largo plazo de la glucemia, generalmente resulta suficiente
determinar la HbA1c cada 3 ó 4 meses. En ciertas situaciones clínicas, como en la
diabetes gestacional o al modificar el tratamiento de forma relevante, puede ser
conveniente medir la HbA1c en intervalos de 2 a 4 semanas.
103
|
Principio del test

El presente método utiliza TTABa) como detergente en el reactivo hemolizante para
eliminar la interferencia producida por los leucocitos (TTAB no lisa los leucocitos).
La muestra no requiere ser pretratada para eliminar la HbA1c lábil.
El ensayo determina todas las variantes de la hemoglobina glucosiladas en el
término N de la cadena ß cuyas regiones reconocibles por anticuerpos sean
idénticas a las de la HbA1c. De este modo, el test puede emplearse para averiguar
tanto el estado metabólico de pacientes con uremia como las hemoglobinopatías
más frecuentes (HbAS, HbAC, HbAE).
a) TTAB = bromuro de tetradeciltrimetilamonio
Hemoglobina A1c
La determinación de HbA1c se basa en el inmunoensayo turbidimétrico de inhibición
(TINIA) para sangre total hemolizada.
▪ Muestra y adición de R1 (tampón/anticuerpo)
La glucohemoglobina (HbA1c) en la muestra reacciona con el anticuerpo anti-
HbA1c para formar complejos solubles antígeno anticuerpo.
Debido a que existe un único punto específico de fijación para el anticuerpo anti-
HbA1c en la molécula de HbA1c, no pueden formarse complejos insolubles.
▪ Adición de R2 (tampón/polihapteno) e inicio de la reacción:
Los polihaptenos reaccionan con los anticuerpos anti-HbA1c excesivos y forman un
complejo anticuerpo-polihapteno insoluble que puede ser determinado
turbidimétricamente.
Hemoglobina
La hemoglobina liberada de la muestra hemolizada es transformada a un derivado
con un espectro de absorción característico y se mide bicromáticamente durante la
fase de preincubación (muestra + R1) de la reacción inmunológica descrita. Por
consiguiente no se requiere un reactivo Hb por separado.
El resultado final se expresa como HbA1 en mmol/mol o HbA1c en % y se calcula a
partir del cociente HbA1c/Hb de la manera siguiente:
104
|
Protocolo 1 (HbA1c en mmol/mol según la IFCC):

HbA1c (mmol/mol) = (HbA1c/Hb) × 1000
Protocolo 2 (HbA1c porcentual según el DCCT/NGSP):
HbA1c (%) = (HbA1c/Hb) × 91.5 + 2.15
muestras.
Sangre venosa o capilar anticoagulada o hemolizado.
Los únicos anticoagulantes aceptables son la heparina de litio, el EDTA di y
tripotásico, el fluoruro/EDTA disódico, la heparina sódica y el fluoruro/oxalato
potásico.
7 días a 2‑8 °C
6 meses a (-15)‑(-25) °C
Congelar sólo una vez. Mezclar la muestra cuidadosamente antes del uso.
Preparación de hemolizado para la aplicación en hemolizado (Este punto del
proceso se realiza automáticamente al interior del equipo Cobas c311)
Calibración de las aplicaciones en sangre total y hemolizado
Hb
Calibradores S1-S2: C.f.a.s. HbA1c
HbA1c
Calibradores S1-S6: C.f.a.s. HbA1c
Modo de calibración Spline
Intervalo de calibraciones Hb y HbA1c: se recomienda efectuar una calibración
completa
- después de 29 días (observe la fecha de caducidad)
105
|

Siempre calibrar las pruebas Hb y HbA1c al mismo tiempo. Desactivar la calibración
automática en caso de control de calidad no exitoso.
Trazabilidad: Este método ha sido estandarizado frente al método de referencia
aprobado por la IFCC para la medición de la HbA1c en sangre humana y puede
transferirse a resultados que pueden rastrearse hasta el método DCCT/NGSP
mediante cálculo.
Nota relativa a las aplicaciones en sangre total y hemolizado
Para estas aplicaciones, los valores de calibrador C.f.a.s. HbA1c concuerdan con el
lote de reactivos. En la respectiva hoja de valores electrónicamente disponible se
indican los valores de calibrador exactos para cada aplicación y cada combinación
de lote de calibrador C.f.a.s. HbA1c y reactivo Tina‑quant HbA1c Gen.3. Introducir
el valor asignado al calibrador específico del lote y de la aplicación. Emplear
únicamente el calibrador C.f.a.s. HbA1c apropiado.
La calibración sólo puede efectuarse si el analizador está equipado con el pack de
reactivo cobas c Hemolyzing Reagent Gen.2, 51 mL, Ref. 04528182 190
Cálculo del cociente de la HbA1c
Para calcular el valor de la HbA1c en mmol/mol (IFCC) y el valor de la
HbA1c en % (DCCT/NGSP)
Limitaciones – interferencia para la aplicación en sangre total y hemolizado

1. Para el diagnóstico, los valores de la HbA1c en mmol/mol (IFCC) y los valores de
la HbA1c en % (DCCT/NGSP) deben emplearse conjuntamente con la información
obtenida por otros procedimientos diagnósticos y evaluaciones clínicas.
2. El test está concebido exclusivamente para la medición exacta y precisa de la
HbA1c en mmol/mol (IFCC) y en % (DCCT/NGSP). Por ello, no deben darse a
conocer los resultados individualmente obtenidos para Hb total y HbA1c.
3. Interpretar siempre con gran cautela cualquier tipo de resultado de pacientes con
variantes de Hb. Las hemoglobinas anormales pueden afectar la vida media de los
106
|
eritrocitos o la velocidad de glucosilación en vivo. En estos casos, aun obteniendo

resultados analíticamente correctos, no se dispone de un control del nivel glucémico
equivalente al de personas con hemoglobina normal. No emplear la HbA1c para
diagnosticar la diabetes cuando se sospecha que la presencia de variantes de Hb
(p. ej. HbSS, HbCC o HbSC) influye en la correlación entre el valor de HbA1c y el
control glucémico.
4. Toda causa de disminución de la supervivencia eritrocitaria o de la vida media de
los eritrocitos reducirá la exposición de éstos a la glucosa disminuyéndose el valor
de HbA1c en mmol/mol (IFCC) y en % (DCCT/NGSP) aun cuando el nivel promedio
de glucemia sea elevado en función del tiempo. La reducción de la vida media de
los eritrocitos puede deberse, entre otros, a la anemia hemolítica u otras
enfermedades hemolíticas, a células falciformes de carácter homocigoto, al
embarazo o a hemorragias crónicas o recientes de gran magnitud. Asimismo, las
transfusiones de sangre recientes pueden alterar los valores de HbA1c en mmol/mol
(IFCC) y en % (DCCT/NGSP). Se recomienda interpretar los resultados de HbA1c
de los respectivos pacientes con cautela y no considerarlos para el diagnóstico de
la diabetes mellitus.
5. Este test no detecta la HbF glucosilada, ya que no contiene la cadena beta
glucosilada característica de la HbA1c. Sin embargo, la HbF se mide en el test de
Hb total y por consiguiente, las muestras con altas concentraciones de HbF (> 10
%) pueden producir resultados de HbA1c en mmol/mol (IFCC) y en %
(DCCT/NGSP) inferiores a los previstos.
6. Los valores de la HbA1c en mmol/mol (IFCC) y los valores de la HbA1c en %
(DCCT/NGSP) no son aptos para el diagnóstico de la diabetes gestacional.
7. En casos muy raros de diabetes tipo 1 de evolución rápida, los valores de la
HbA1c aumentan con retraso en comparación con los valores de la glucosa. En
tales casos, la diabetes mellitus debe diagnosticarse en base a las concentraciones
plasmáticas de la glucosa y/o los síntomas clínicos típicos.
Criterio: Recuperación dentro de ± 10 % del valor inicial.
107
|

Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas con una concentración de
Intralipid de hasta 600 mg/dL. No existe ninguna correlación satisfactoria entre la
concentración de triglicéridos y turbidez.
Glucemia: Sin interferencias significativas hasta una concentración de glucosa de
55.5 mmol/L (1000 mg/dL). No se requieren muestras recogidas en ayunas.
Factores reumatoides: Sin interferencias significativas hasta un nivel de factor
reumatoide de 750 UI/mL.
Otros: Los anticuerpos anti-HbA1c empleados en el presente estuche no producen
reacciones cruzadas con HbA0, HbA1a, HbA1b, hemoglobina acetilada,
hemoglobina carbamilada, albúmina glucosilada ni con HbA1c lábil.
exámenes.
Valores teóricos
Protocolo 1 (HbA1c en mmol/mol según la IFCC): 29‑42 mmol/mol de HbA1c
Protocolo 2 (HbA1c porcentual según el DCCT/NGSP): 4.8‑5.9 % de HbA1c
Según las recomendaciones de la
Asociación Americana de Diabetes, los valores superiores a 48 mmol/mol de HbA1c
(IFCC) o 6.5 % de HbA1c (DCCT/NGSP) pueden emplearse para el diagnóstico de
la diabetes mellitus.25,29 Los pacientes con valores de HbA1c dentro del intervalo
de 39‑46 mmol/mol de HbA1c (IFCC) o 5.7‑6.4 % de HbA1c (DCCT/NGSP) corren
el riesgo de desarrollar una diabetes.
Si la diabetes no se controla adecuadamente, las concentraciones de HbA1c
pueden alcanzar e incluso superar 195 mmol/mol de HbA1c (IFCC) o los 20 % de
108
|
HbA1c (DCCT/NGSP). Se recomienda la intervención terapéutica a partir de niveles

de 64 mmol/mol de HbA1c (IFCC) o 8 % de HbA1c (DCCT/NGSP). Los diabéticos
con niveles de HbA1c inferiores a 53 mmol/mol de HbA1c (IFCC) o del 7 % de
HbA1c (DCCT/NGSP) cumplen con los objetivos fijados por la Asociación
Americana de Diabetes.
Los niveles de HbA1c inferiores al intervalo de referencia establecido pueden indicar

un episodio reciente de hipoglucemina, la presencia de variantes de Hb o bien la
reducción de la vida media de los eritrocitos.
HDL Colesterol
Características
Las lipoproteínas de alta densidad (High Density Lipoproteins, HDL) son
responsables del transporte inverso del colesterol de las células periféricas al
hígado. En el hígado, el colesterol es transformado a ácidos biliares que son
excretados al intestino a través de las vías biliares. El seguimiento del colesterol
HDL en suero es de importancia clínica porque existe una correlación inversa entre
la concentración sérica del colesterol HDL y el riesgo de sufrir arteriosclerosis.
Concentraciones elevadas del colesterol
HDL protegen contra cardiopatías coronarias mientras que concentraciones
disminuidas del colesterol HDL, especialmente en combinación con valores
elevados de triglicéridos, implican un elevado riesgo cardiovascular. Se han creado
estrategias para aumentar el nivel de colesterol HDL con el objeto de tratar las
enfermedades cardiovasculares.
Se dispone de diversos métodos para determinar el colesterol HDL, incluyendo la
ultracentrifugación, la electroforesis y la cromatografía líquida de alta presión
(CLAP), que están basados tanto en la precipitación como en la determinación
directa. Este último método se emplea en la rutina. La determinación directa del
colesterol HDL en muestras de suero ha sido abordada desde numerosas
perspectivas que incluyen el uso de partículas de respuesta magnética como
109
|
combinaciones de polianiones y metales, así como el uso de polietilenglicol (PEG)

con anticuerpos anti‑apoproteína B y
anti‑apoproteína CIII.
Este método automatizado destinado a la determinación directa del colesterol HDL
en suero y plasma utiliza enzimas modificadas por PEG y sulfato de dextrano. Las
enzimas colesterol esterasa y colesterol oxidasa modificadas por PEG presentan
actividades catalíticas selectivas frente a las fracciones de lipoproteínas
aumentándose la reactividad en el orden siguiente: LDL < VLDL ≈ quilomicrones <
HDL.
Los resultados obtenidos con muestras recogidas después de comer son
ligeramente inferiores a los obtenidos en ayunas. Con el método betaquant se
obtuvieron resultados postprandiales comparables.
El test directo de Roche para la determinación del colesterol HDL cumple con los
objetivos sentados en 1998 por el National Institute of Health (NIH) y del National
Cholesterol Education Program (NCEP) en lo relativo a un funcionamiento analítico
aceptable. Los resultados obtenidos con este método se correlacionan con aquellos
obtenidos por métodos basados en la precipitación y en la ultracentrifugación.
Principio del test

Test colorimétrico enzimático homogéneo.
En presencia de iones de magnesio, el sulfato de dextrano forma complejos
hidrosolubles, selectivamente con LDL, VLDL y quilomicrones resistentes contra las
enzimas modificadas por PEG.
La concentración del colesterol HDL se determina enzimáticamente por la colesterol
esterasa y colesterol oxidasa acopladas con PEG a los grupos amínicos (aprox. 40
%).
La colesterol esterasa provoca el desdoblamiento de los ésteres de colesterol a
colesterol libre y ácidos grasos.
110
|
En presencia de la peroxidasa, el peróxido de hidrógeno formado reacciona con 4-

aminoantipirina y HSDA para formar un colorante purpúreo azul. La intensidad del
colorante es directamente proporcional a la concentración de colesterol que se mide
fotométricamente.

muestras.
Suero.
El plasma con EDTA produce valores disminuidos.
Es posible emplear muestras recogidas en ayunas o después de comer.
Recoger la sangre empleando un tubo o una jeringa de vacío. Se recomienda
analizar las muestras el mismo día en que fueron recogidas.
30 días a (-60) ‑(-80) °C
Se comunica que EDTA estabiliza las lipoproteínas.
Calibración
111
|
S2: C.f.a.s. Lipids

Trazabilidad: Este método ha sido estandarizado frente al método de referencia
definido por el CDC (método de comparación designado).

mmol/L x 0.3866 = g/L
colesterol de 1 mmol/L (38.7 mg/dL).
Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas hasta un índice L de 1800. Sin
interferencias por triglicéridos nativos hasta 13.7 mmol/L
(1200 mg/dL). No existe una correlación satisfactoria entre el índice L (que
corresponde a la turbidez) y la concentración de triglicéridos.
Otros: Las concentraciones elevadas de ácidos grasos libres y de proteínas
desnaturalizadas pueden causar valores falsos elevados de colesterol HDL.
En casos aislados, concentraciones elevadas de inmunoglobulinas pueden
proporcionar resultados falsos elevados de colesterol HDL.
Las concentraciones de ácido ascórbico de hasta 2.84 mmol/L (50 mg/dL) no
interfieren con el test.
Una función hepática anormal afecta el metabolismo de lípidos; en estos casos, el
valor diagnóstico de los resultados de colesterol HDL y LDL es limitado. En ciertos
112
|
pacientes con una función hepática patológica, los resultados de colesterol HDL
pueden diferir considerablemente respecto de los obtenidos por el método de
comparación designado.
Las intoxicaciones por paracetamol suelen tratarse con N‑acetilcisteína. Tanto la
N‑acetilcisteína, usada en concentraciones terapéuticas como antídoto, como el
metabolito de paracetamol, la N‑acetil‑p‑benzoquinona imina (NAPQI), pueden
causar valores falsamente bajos.
La venopunción debe efectuarse antes de administrar metamizol. Si la venopunción
se realiza inmediatamente después o durante la administración de metamizol,
pueden obtenerse resultados falsamente bajos.
exámenes.
0.08‑3.12 mmol/L (3‑121 mg/dL)
el factor 2.
Valores teóricos
Sin riesgo Riesgo moderado Alto riesgo
Mujeres: > 1.68 mmol/L 1.15‑1.68 mmol/L < 1.15 mmol/L
(> 65 mg/dL) (45‑65 mg/dL) (< 45 mg/dL)
Hombres: > 1.45 mmol/L 0.90‑1.45 mmol/L < 0.90 mmol/L
113
|
(> 55 mg/dL) (35‑55 mg/dL) (< 35 mg/dL)

Directivas del Programa Educativo del Colesterol de los Estados
Unidos (NCEP):31
< 40 mg/dL: Colesterol HDL bajo (principal factor de riesgo para enfermedades
cardiovasculares)
≥ 60 mg/dL: Colesterol HDL alto (factor "negativo" de riesgo para enfermedades
cardiovasculares)
El colesterol HDL se ve afectado por una serie de factores como el tabaquismo, el
deporte, las hormonas, el sexo y la edad.
a su grupo de pacientes y, en caso necesario, establecer sus propios valores.
Hierro
Características
El hierro ingerido es absorbido principalmente como Fe2+ en el duodeno y el yeyuno
superior. La forma trivalente y el componente Fe3+ unido al grupo hemo del hierro
de la alimentación requieren para su reducción vitamina C.
La asimilación diaria de hierro es de aprox. 1 mg. Los iones de Fe2+ que penetran
en las células de la mucosa se unen a sustancias de transporte.
Antes de pasar al plasma, la ceruloplasmina los oxida a Fe3+, ligándose entonces
en esta forma a la transferrina. Los iones de hierro se transportan en el plasma
sanguíneo en forma de complejos de transferrina-hierro, siendo la capacidad
máxima de transporte de cada molécula de proteína de 2 iones de Fe3+. El hierro
sérico se encuentra fijado casi por completo a la transferrina.
La determinación del hierro (no hemínico) sirve para el diagnóstico y el tratamiento
de anemias ferropénicas, hemocromatosis (una enfermedad en la que los dos
pigmentos férricos, la hemosiderina y la hemofuscina, forman depósitos tisulares
que se manifiestan por pigmentación cutánea) y nefropatías crónicas. El hierro se
determina en el diagnóstico y el seguimiento de anemias microcíticas (debidas por
ejemplo a trastornos del metabolismo férrico y hemoglobinopatías), anemias
114
|
macrocíticas (debidas por ejemplo a la deficiencia de vitamina B12 o de ácido fólico

y a trastornos metabólicos de origen desconocido inducidos por fármacos), así como
de anemias normocíticas y renales (deficiencia de eritropoyetina), anemias
hemolíticas, hemoglobinopatías, enfermedades de la médula ósea y daños tóxicos
de la médula ósea.
Son numerosos los métodos fotométricos destinados a la determinación del hierro.
Todos siguen los siguientes pasos:
▪ Liberación de los iones de Fe3+ del complejo de transferrina por medio de ácidos
o detergentes,
▪ Reducción de los iones de Fe3+ a iones de Fe2+,
▪ Eeacción de los iones de Fe2+ para formar un complejo cromático.
El presente método se basa en el método FerroZine sin desproteinización.
Principio del test
115
|

muestras.
Suero (sin hemólisis).
Plasma (sin hemólisis) tratado con heparina de litio. No usar plasma con EDTA u
oxalato.
Separar el suero o el plasma de las células o del coágulo dentro de 1 hora.
116
|

3 semanas a 2‑8 °C
Varios años a (-15) - (-25) °C
Calibración
S2: C.f.a.s.
• Después de cambiar el cobas c pack
• Tras 7 días en el analizador
• Si fuera necesario según los procedimientos de control de calidad.
0.90‑179 μmol/L (5.00‑1000 μg/dL, 0.05‑10.0 mg/L)
repetición. En muestras con concentraciones superiores, la función de repetición del
test disminuye el volumen de la muestra por el factor 2.1. Los resultados son
multiplicados automáticamente por este factor.
Límites inferiores de medición

Límite de detección inferior del test
0.90 μmol/L (5.00 μg/dL, 0.05 mg/L)
Valores teóricos
Adultos: 5.83‑34.5 μmol/L (33‑193 μg/dL)
La concentración de hierro en suero y plasma depende de la ingestión de hierro y
está sujeta a variaciones circadianas.
117
|
Lactato
Características
La glucólisis anaeróbica aumenta marcadamente el lactato en la sangre,
provocando un aumento de los niveles de piruvato, especialmente bajo esfuerzo
prolongado. La causa común de niveles incrementados de piruvato y lactato
sanguíneos es la anoxia secundaria a condiciones como el choque, la neumonía y
la insuficiencia cardíaca congestiva. También puede haber acidosis láctica en la
insuficiencia renal y la leucemia.
La deficiencia de tiamina y la cetoacidosis diabética están asimismo asociadas a
niveles incrementados de lactato y piruvato.
En la meningitis bacteriana, se observa un aumento de los niveles de lactato en el
líquido cefalorraquídeo (LCR). Asimismo se observan niveles elevados de LCR en
la hipocapnia, el hidrocefalo, los abscesos cerebrales, la isquemia cerebral y
cualquier condición clínica asociada a una oxigenación reducida del cerebro y/o una
presión intracraneal incrementada.
En el diagnóstico y el tratamiento de la acidosis láctica (acidez anormalmente
elevada en la sangre) se emplean mediciones de lactato que evalúan el estado
acidobásico.
Desde hace algunos años, se van imponiendo en la determinación del lactato los
métodos enzimáticos frente a los métodos colorimétricos y de valoración. Por lo
general, los métodos enzimáticos son más sencillos, ofreciendo mayor
especificidad, exactitud y reproducibilidad.
El primer método enzimático descrito para la determinación del lactato se basó en
la transferencia de hidrógeno del lactato al ferricianuro potásico mediante lactato
deshidrogenasa. Pero este método tenía el inconveniente de ser bastante laborioso
por lo que no fue bien aceptado.
Los métodos posteriores se referían a la medición ultravioleta de la formación de la
NADH. En 1974, Gutmann y Wahlefeld1 describieron un procedimiento de lactato
que mide la NADH formada por oxidación de lactato catalizado por LD, empleando
la hidracina como agente de captación del piruvato.
118
|
Un método descrito por Noll2 se basa asimismo en la acción catalítica de la LD,

pero incluye ALT en la mezcla de reacción para eliminar más rápidamente el
piruvato formado por la conversión del lactato.
El método aquí presentado emplea una reacción enzimática para transformar el
lactato en piruvato. El peróxido de hidrógeno producido por esta reacción se emplea
después en una reacción enzimática para generar un colorante. Este método ofrece
una mayor estabilidad del reactivo que los métodos enzimáticos ultravioletos
anteriores.
Principio de test
El L-lactato es oxidado a piruvato por la enzima específica lactato oxidasa
(LOD). La peroxidasa (POD) se emplea para generar un colorante utilizando el
peróxido de hidrógeno producido en la primera reacción.
La intensidad cromática del complejo formado es directamente proporcional a la

concentración de L-lactato. Se determina midiendo el aumento de la absorbancia.

muestras.
Suero: No emplear muestras de suero.
Plasma tratado con fluoruro sódico/oxalato potásico y fluoruro sódico/heparina
sódica.
Centrifugar dentro de los 15 minutos después de obtener la muestra.
LCR: El LCR puede usarse en la forma obtenida.
119
|
Nota
1. El nivel de lactato aumenta rápidamente bajo actividades físicas. El tiempo
requerido para volver a valores normales de lactato depende del estado físico
individual. Generalmente bastan 30 minutos de reposo.
2. Las muestras de sangre deben extraerse de una vena libre de estasis, si bien una
hemostasis mínima (inferior a 30 segundos) no afecta el nivel de lactato. Evite en lo
posible el uso de un torniquete.
3. Una vez activado el proceso de glucólisis en muestras de sangre, su nivel de
lactato puede aumentar rápidamente. Ya que la presencia de las células favorece
el proceso de glucólisis, resulta fundamental separarlas rápidamente de la muestra
a fin de obtener resultados exactos de lactato. El plasma heparinizado es aceptable,
si se inhibe la glucólisis conservando la sangre completa en hielo y separando el
plasma de las células en el plazo de 15 minutos tras la recogida. Estabilidad en
plasma (separado): 8 horas a 15-25 °C 14 días a 2-8 °C
Estabilidad en LCR: 3 horas a 15-25 °C 24 horas a 2-8 °C 2 meses a (-15)-(-25) °C
Calibración
S2: C.f.a.s.
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a un estándar
primario.
mmol/L x 90.09 = mg/L
lactato de 2.2 mmol/L (19.8 mg/dL).
120
|
Plasma
conjugada y de 60 para la bilirrubina no conjugada (concentración de la bilirrubina
conjugada: aprox. 479 μmol/L ó 28 mg/dL y de la bilirrubina no conjugada: aprox.
1026 μmol/L ó 60 mg/dL).
Excepción: El dobesilato de calcio provoca valores falsamente bajos de lactato.
Fluctuando de lote a lote de reactivo, se registran interferencias positivas con el
glucolato, un metabolito del etilenglicol.
LCR
Sin interferencias conocidas.
Con fines diagnósticos, los resultados obtenidos con el test siempre deben
evaluarse junto al historial del paciente, los exámenes clínicos y los resultados de
otros análisis.
0.2-15.5 mmol/L (1.8-140 mg/dL)
es de 1:10. Los resultados de las muestras diluidas usando la función de repetición
del ciclo se multiplican automáticamente por el factor 10.
Valores teóricos
Plasma 0.5-2.2 mmol/L (4.5-19.8 mg/dL) Venoso
LCR: 1.1-6.7 mmol/L (10-60 mg/dL) Neonatos
1.1-4.4 mmol/L (10-40 mg/dL) de 3-10 días
1.1-2.8 mmol/L (10-25 mg/dL) > 10 días de edad
121
|
1.1-2.4 mmol/L (10-22 mg/dL) Adultos

2.25 Lactato Deshidrogenasa (LDH)
Características
La enzima lactato deshidrogenasa (LDH) se halla ampliamente distribuida en los
tejidos, especialmente en el corazón, el hígado, los músculos y los riñones. La LDH
sérica puede dividirse en cinco isoenzimas diferentes, discernibles a partir de su
movilidad electroforética. Cada isoenzima es un tetrámero compuesto de dos
subunidades diferentes. Estas subunidades corresponden al corazón y músculo, de
acuerdo a sus cadenas de polipéptidos. Existen dos homotetrámeros, la LDH‑1
(corazón) y la LDH‑5 (músculos), así como tres isoenzimas híbridas.
Niveles elevados de LDH sérica acompañan diversos cuadros patológicos.
La actividad más alta se observa en pacientes con anemia megaloblástica,
carcinoma diseminado y choque. Un aumento moderado se produce en los
trastornos musculares, el síndrome nefrótico y la cirrosis. En caso de infarto de
miocardio o pulmonar, leucemia, anemia hemolítica y hepatitis no vírica, la actividad
de la LDH sólo está ligeramente elevada. El presente método se deriva de la
formulación recomendada por la IFCC, y ha sido mejorado en cuanto al rendimiento
y la estabilidad.
Principio del test

Análisis por radiación ultravioleta.
La enzima lactato deshidrogenasa cataliza la conversión de L‑lactato a piruvato. En
este proceso, el NAD se reduce a NADH.
122
|
La tasa inicial de formación de NADH es directamente proporcional a la actividad

catalítica de la LDH. Se determina por fotometría midiendo el aumento de la
absorbancia

muestras. Sólo se han analizado y considerado aptos los tipos de muestra aquí
Indicados:
Suero (sin hemólisis).
Plasma tratado con heparina de litio. El plasma debe estar exento de hemólisis y de
células.
Separar el suero o el plasma inmediatamente del coágulo o de las células.
La muestra puede conservarse durante 4 días a 2‑8 °C o durante 6 semanas a -20
°C. En algunas enfermedades (p. ej., hepatopatías, afecciones
musculoesqueléticas, tumores malignos), las isoenzimas LDH‑4 y LDH‑5 se
encuentran aumentadas e inestables en muestra refrigeradas y congeladas.
Así pues, las muestras de los pacientes que padecen estas enfermedades pueden
dar un valor erróneo de LDH.
Calibración
S2: C.f.a.s.
123
|
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a la formulación

original de la IFCC utilizando pipetas calibradas con un fotómetro manual que
proporciona valores absolutos y la absortividad ε específica del substrato.

lactato deshidrogenasa de 200 U/L (3.34 μkat/L).
Hemólisis Sin interferencias significativas hasta un índice H de 15 (concentración
de hemoglobina: aproximadamente 9.6 μmol/L o 15 mg/dL).
La contaminación con eritrocitos provoca resultados aumentados, ya que el nivel de
analito en los eritrocitos es mayor que en los sueros normales. La magnitud de la
interferencia depende del contenido de analito en los eritrocitos lisados.
10‑1000 U/L (0.17‑16.7 μkat/L)
Determinar las muestras con actividades superiores por la función de repetición.
Con la función de repetición, las muestras se diluyen 1:2.5. Los resultados de las
el factor 2.5.
Valores teóricos: Según la IFCC, medidos a 37 °C:
124
|
Mujeres 135‑214 U/L (2.25‑3.55 μkat/L)

Hombres 135‑225 U/L (2.25‑3.75 μkat/L)
Niños (2‑15 años) 120‑300 U/L (2.00‑5.00 μkat/L)
Recién nacidos (4‑20 días) 225‑600 U/L (3.75‑10.0 μkat/L)
Hombres y mujeres hasta 250 U/L (hasta 4.2 μkat/L)
Lipasa
Características
Las lipasas son glucoproteínas con un peso molecular de 47000 daltons.
Se definen como hidrolasas de triglicéridos que catalizan el desdoblamiento de
triglicéridos a diglicéridos con formación subsiguiente de monoglicéridos y ácidos
grasos. Junto con la α‑amilasa, la lipasa pancreática constituye indudablemente el
parámetro químico-clínico más importante en el diagnóstico diferencial de
enfermedades pancreáticas. A nivel internacional, la determinación de la actividad
de la lipasa ha adquirido mayor importancia gracias a su alta especificidad y su
liberación rápida. Después de una pancreatitis aguda, la actividad de la lipasa
aumenta en el plazo de 4 a 8 horas, alcanza su máximo a las 24 horas y vuelve a
disminuir tras 8 a 14 días. Sin embargo, no existe correlación alguna entre la
actividad de la lipasa determinada en suero y el grado de la lesión pancreática.
Se han descrito numerosos métodos para determinar la lipasa en los que la
disminución del substrato se mide por turbidimetría o nefelometría o se comprueban
los productos de degradación formados.
El presente método se basa en el desdoblamiento de un substrato cromático
específico para la lipasa emulsionado con ácidos biliares, el éster
1,2‑O‑dilauril‑rac‑glícero‑3‑ácido glutárico- (6‑metilresorufina). El presente test
comprueba específicamente la actividad de la enzima pancreática combinando el
ácido biliar con la colipasa. En caso de ausencia de colipasa, la actividad de la lipasa
es prácticamente inexistente.
La colipasa activa solamente la lipasa pancreática y no las otras enzimas
125
|
Lipolíticas presentes en el suero. La alta proporción de colatos garantiza que las

esterasas presentes en el suero no pueden reaccionar con el substrato cromático
debido a la alta tensión negativa de su superficie.
Principio del test

Test enzimático colorimétrico con éster de 1,2‑O‑dilauril‑rac‑glícero‑3‑ácido
glutárico‑(6‑metilresorufina) como substrato.
El sustrato cromático de lipasa, el éster de 1,2‑O‑dilauril‑rac‑glícero‑3‑ácido
glutárico- (6‑metilresorufina) es desdoblado bajo la acción catalítica de la solución
de lipasa alcalina formando 1,2‑O‑dilauril‑rac‑glicerol y un producto intermedio
inestable, el éster de ácido glutárico-(6‑metilresorufina). En una solución alcalina,
éste se descompone espontáneamente para formar ácido glutárico y
metilresorufina. La adición de detergente y colipasa aumenta la especificidad
analítica para la lipasa pancreática.
La intensidad cromática del colorante rojo formado es directamente proporcional a

la actividad de la lipasa y puede ser determinada fotométricamente.

muestras.
Suero.
126
|

Estabilidad: 1 semana a 15‑25 °C
1 semana a 2‑8 °C
1 año a (-15)‑(-25) °C
Calibración
S2: C.f.a.s.
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado manualmente frente a un
reactivo del sistema Roche utilizando pipetas calibradas y un fotómetro manual que
proporciona valores absolutos y la absorptividad ε específica del substrato.

Criterio: Recuperación dentro de ± 10 % de los valores iniciales con una actividad
de la lipasa de 60 U/L (1.00 μkat/L).
Fármacos: No se han registrado interferencias con paneles de fármacos deuso
127
|
exámenes.
3‑300 U/L (0.05‑5.01 μkat/L)
las muestras diluidas por la función de repetición se multiplican automáticamente
por el factor 10.
Magnesio
Características
El magnesio constituye, junto con el potasio, uno de los cationes intracelulares más
importante. El Mg2+ es cofactor de numerosos sistemas enzimáticos. Así que todas
las reacciones enzimáticas dependientes del ATP requieren Mg2+ como cofactor
en el complejo ATP‑magnesio.
Aproximadamente el 69 % de los iones de magnesio se encuentra depositado en
los huesos. El resto participa en el metabolismo intermediario, alrededor del 70 %
se halla en forma libre, mientras que el otro 30 % está fijado a proteínas
(especialmente a la albúmina), citratos, fosfato y a otros formadores de complejos.
El nivel sérico de Mg2+ permanece constante dentro de un intervalo muy estrecho
(0.65‑1.05 mmol/L). La regulación de la concentración de magnesio se produce
mayormente mediante los riñones, en particular a través de la rama ascendente del
asa de Henle.
El presente test se emplea para el diagnóstico y el control del curso de la
hipomagnesemia (falta de magnesio) y de la hipermagnesemia (exceso de
magnesio). Son numerosos los estudios que demuestran la existencia de una
correlación entre la falta de magnesio y alteraciones de la homeostasis del calcio,
128
|
potasio y fosfato relacionadas con trastornos cardíacos tales como las arritmias
ventriculares que no responden a una terapia convencional, la sensibilidad
aumentada contra la digoxina, los espasmos de las arterias coronarias y la muerte
súbita. Otros síntomas concomitantes adicionales consisten en diversos trastornos
neuromusculares y
neuropsiquiátricos. La hipermagnesemia acompaña a la insuficiencia renal aguda y
crónica, al suministro excesivo de magnesio y su liberación a partir del espacio
intracelular.
La determinación de magnesio se lleva a cabo a través de la espectrometría de
absorción atómica (AAS), así como mediante métodos complexométricos.
El método aquí descrito se basa en la reacción del magnesio con el azul de xilidil en
una solución alcalina que contiene EGTA a fin de enmascarar el calcio presente en
la muestra.
Los niveles urinarios de magnesio se determinan por pruebas de depleción de
magnesio.
Principio del test

Método colorimétrico con determinación del punto final.
▪ Muestra y adición de R1
▪ Adición de R2 e inicio de la reacción:
En solución alcalina, el magnesio forma un complejo purpúreo con azul de xilidil, el
sal de diazonio. La concentración de magnesio se mide fotométricamente por la
disminución de la absorbancia del azul de xilidil.
Precauciones y advertencias
129
|

muestras.
Suero
No emplear anticoagulantes que forman complejos tales como EDTA, fluoruro y
oxalato.
Los sistemas de recogida de muestras de diversos fabricantes pueden contener
diferentes materiales que, en ciertos casos, pueden llegar a afectar los resultados
de los análisis. Si las muestras se procesan en tubos primarios (sistemas de
recogida de muestras), seguir las instrucciones del fabricante de los tubos.
Estabilidad en suero/plasma: 7 días a 15‑25 °C
7 días a 2‑8 °C
1 año a (-15)‑(-25) °C
Orina:
130
|
Acidificar las muestras de orina a un pH 1 empleando HCl concentrado a fin de

prevenir la precipitación de fosfato amónico-magnésico. Recoger las muestras de
orina en un recipiente que no sea de metal. El instrumento prediluye
automáticamente las muestras de orina con NaCl al 0.9 %.
3 días a 2‑8 °C
1 año a (-15)‑(-25) °C
Calibración
S2: C.f.a.s.
Trazabilidad: El presente método ha sido calibrado frente a espectrometría de
absorción atómica.
Cálculo
mval/L x 0.5 = mmol/L
mval/L x 1.22 = mg/dL
mval/L = mEq/L
Interferencias
Suero/plasma
131
|

aproximadamente 60 mg/dL o 1026 μmol/L).
La hemólisis produce resultados aumentados según el contenido exacto del analito
en los eritrocitos lisados.
Orina
exámenes.
Suero/plasma
0.10‑2.0 mmol/L (0.243‑4.86 mg/dL)
por el factor 2.
Orina
0.56‑11.0 mmol/L (1.36‑26.7 mg/dL)
132
|

por el factor 2.
Valores teóricos:
Suero/plasma:
Neonatos: 0.62‑0.91 mmol/L (1.5‑2.2 mg/dL)
5 meses‑6 años: 0.70‑0.95 mmol/L (1.7‑2.3 mg/dL)
6‑12 años: 0.70‑0.86 mmol/L (1.7‑2.1 mg/dL)
12‑20 años: 0.70‑0.91 mmol/L (1.7‑2.2 mg/dL)
Adultos: 0.66‑1.07 mmol/L (1.6‑2.6 mg/dL)
60‑90 años: 0.66‑0.99 mmol/L (1.6‑2.4 mg/dL)
> 90 años: 0.70‑0.95 mmol/L (1.7‑2.3 mg/dL)
Orina (24 h):
3.0‑5.0 mmol/d (72.9‑121.5 mg/d)
Prealbúmina
Características
La prealbúmina es una proteína rica en triptófano que tiene una masa molar de
55000 daltons y que se sintetiza en los hepatocitos. En la electroforesis a un pH de
8.6, precede a la albúmina gracias a su mayor velocidad de migración anódica y
representa una cantidad relativa de < 2.5 %. Su función consiste en unir y
transportar las proteínas fijadoras del retinol (con un peso molecular inferior a 21000
daltons) impidiendo su filtración glomerular. El 30 al 50 % de la prealbúmina
circulante forma un complejo con la proteína fijadora de retinol. Además, fija y
transporta la tiroxina (T4), aunque su afinidad con esta hormona es inferior a la de
la globulina fijadora de tiroxina.
133
|
Debido a que la prealbúmina tiene una corta vida media de apenas 2 días, su
concentración sérica disminuye muy rápidamente en caso de que la síntesis
hepatocelular sea insuficiente debido a lesiones hepáticas agudas o a una
alimentación deficiente en proteínas. Se ha publicado que la prealbúmina puede
actuar como reactante negativo de fase aguda, con concentraciones que
disminuyen muy rápidamente durante inflamaciones agudas.
Para la determinación de la prealbúmina se dispone de diferentes métodos tales
como la inmunodifusión radial, la nefelometría y la turbidimetría.
Principio del test

La prealbúmina humana forma un precipitado con un antisuero específico que se
determina por turbidimetría.

muestras.
Suero.
El uso de plasma tratado con heparina de litio puede provocar valores disminuidos
en unos 6 %. El uso de plasma tratado con EDTA dipotásico puede provocar valores
disminuidos en aproximadamente 5 %.
6 meses a (-15) - (-25) °C
Calibración
S2-S6: C.f.a.s. PAC
134
|
Multiplicar el valor del calibrador C.f.a.s PAC específico del lote por los factores
indicados a continuación a fin de determinar las concentraciones estándar de la
curva de calibración de 6 puntos.
S2: 0.200 S5: 1.75
S3: 0.400 S6: 2.75
S4: 0.800
• Tras cambiar de lote de reactivos
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a la preparación de
referencia certificada ERM‑DA470k/IFCC en suero humano del Instituto de
materiales y medidas de referencia (IRMM, por sus siglas en inglés).
Cálculo
Factores de conversión: mg/dL x 0.01 = g/L
g/L x 100 = mg/dL
g/L x 18.2 = μmol/L

prealbúmina de 0.4 g/L (7.28 μmol/L; 40 mg/dL).
135
|

Efecto prozona (high-dose hook): No se obtienen resultados falsos con
concentraciones de prealbúmina de hasta 2.5 g/L (45.5 μmol/L, 250 mg/dL).
0.03‑0.8 g/L (0.55‑14.6 μmol/L, 3‑80 mg/dL)
es de 1:3. Los resultados de las muestras diluidas por la función de repetición del
ciclo se multiplican automáticamente por el factor 3.
Valores teóricos
0.2‑0.4 g/L (3.64‑7.28 μmol/L o 20.0‑40.0 mg/dL)
Proteína C Reactiva (PCR)

Generalidades
La proteína C-reactiva es la proteína de fase aguda clásica de las reacciones
inflamatorias. Se sintetiza en el hígado y se compone de cinco cadenas
polipeptídicas idénticas en forma de un anillo de cinco eslabones con un peso
molecular de 105000 daltons. La CRP es el reactante de fase aguda más sensible
y su concentración aumenta muy rápidamente en procesos inflamatorios. La CRP
en complejo activa la vía clásica del complemento.
La respuesta de la CRP frecuentemente precede a los síntomas clínicos, incluyendo
la fiebre. En individuos normales sanos, sólo se detectan vestigios de CRP con
136
|
niveles de hasta 5 mg/L. Al iniciarse la respuesta de fase aguda, la concentración

sérica de la CRP aumenta rápida y acentuadamente.
Este aumento puede detectarse tras 6 a 12 horas alcanzando el valor máximo
pasadas 24 a 48 horas. Los niveles superiores a 100 mg/L son consecuencia de
serios estímulos tales como traumatismos de gran magnitud e infecciones severas
(sepsis). La respuesta de la CRP puede ser menos acentuada en pacientes con
hepatopatías. La determinación de CRP sirve para reconocer procesos
inflamatorios sistémicos, para evaluar el éxito del tratamiento de infecciones
bacterianas con antibióticos, para reconocer infecciones intrauterinas en caso de
amniorrexis prematura, para diferenciar entre las formas activa e inactiva de
enfermedades con infecciones concomitantes, como p.ej. en pacientes con lupus
eritematoso sistémico y colitis ulcerosa, para evaluar la actividad de enfermedades
reumáticas y la eficacia del tratamiento antiinflamatorio, para el reconocimiento
precoz de complicaciones postoperatorias (heridas infectadas, trombosis,
neumonía) y para distinguir entre una infección y una reacción de rechazo tras el
trasplante de médula ósea. El seguimiento postoperatorio de los niveles de
CRP permite comprobar si el paciente se recupera normalmente (los niveles
disminuyen hasta ser normales) o si sufre complicaciones inesperadas (losniveles
permanecen altos). La medición de los cambios en la concentración de CRP
proporciona informaciones útiles para diagnosticar el grado de agudeza y seriedad
de la enfermedad. Asimismo permite establecer hipótesis acerca de su origen.
Generalmente, la persistencia de una concentración sérica elevada de CRP
significa un pronóstico grave que suele indicar la presencia de una infección fuera
de control.
Principio del test

Prueba inmunoturbidimétrica potenciada con partículas. La CRP humana se
aglutina con las partículas de látex recubiertas con anticuerpos monoclonales anti-
CRP. El precipitado se determina por turbidimetría.

137
|

muestras.
Suero.
Plasma tratado con heparina de litio, EDTA bi- o tripotásico.
2 meses a 2-8 °C
3 años a (-15)-(-25) °C
Calibración
Multiplicar los valores del calibrador C.f.a.s. Proteins específicos del lote por los
factores indicados a continuación a fin de determinar las concentraciones estándar
de la curva de calibración de 6 puntos.
S2: 0.10000 S5: 2.0000
S3: 0.3325 (c 501/502)
0.3500 (c 311)
S6: 4.0000
S4: 1.0000
Modo de calibración spline 6 puntos
Cálculo
Los analizadores calculan automáticamente la concentraciónde analito de cada
muestra.
Factores de conversión: mg/L x 9.52 = nmol/L mg/dL x 95.2 = nmol/L
Mg/L x 0.1 = mg/dL mg/dL x 10 = mg/L
138
|
Mg/dL x 0.01 = g/L g/L x 100 = mg/Dl

CRP de 5.0 mg/L (47.6 nmol/L).
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un índice I de 60 (concentración de
la bilirrubina conjugada y sin conjugar: aprox. 60 mg/dL o 1026 μmol/L).
Efecto prozona (high-dose hook): No se obtienen resultados falsos con
concentraciones de CRP de hasta 1200 mg/L (11424 nmol/L).
Fármacos: Pueden obtenerse valores de CRP falsamente disminuidos obtenidos de
muestras de pacientes tratados con carboxipenicilinas.
0.3-350 mg/L (2.9-3333 nmol/L)
Valores teóricos
Intervalo de referencia consensual para adultos:16 < 5 mg/L (< 47.6 nmol/L)
Proteínas Totales en Suero y Plasma

Características
Las proteínas plasmáticas se sintetizan principalmente en el hígado, las células
plasmáticas, los ganglios linfáticos, el bazo y la médula espinal. En caso de
enfermedad, tanto la concentración de las proteínas totales como sus fracciones
139
|
individuales pueden divergir considerablemente de los valores normales. La

hipoproteinemia puede deberse a enfermedades y alteraciones como la hemorragia,
el esprue, el síndrome nefrótico, quemaduras graves, el síndrome de retención de
sales y Kwashiorkor (carencia aguda de proteínas).
La hiperproteinemia puede observarse en casos de deshidratación severa y en
enfermedades como el mieloma múltiple. El porcentaje relativo de las proteínas
plasmáticas puede modificarse al cambiar el porcentaje de una sola fracción de
estas proteínas. En este caso, la cantidad total de proteína frecuentemente queda
inalterada. La relación entre albúmina y globulina se utiliza frecuentemente como
índice de la distribución entre las fracciones de albúmina y globulina. Esta relación
sufre grandes alteraciones frente a afecciones tales como la cirrosis hepática, la
glomerulonefritis, el síndrome nefrótico, la hepatitis aguda, el lupus eritematoso, así
como en algunas infecciones agudas y crónicas. La medición de la proteína total se
utiliza en el diagnóstico y tratamiento de una variedad de enfermedades hepáticas,
renales, de la médula ósea así como de otros trastornos metabólicos o nutricionales.
Principio del test

En solución alcalina, el cobre divalente reacciona con los enlaces peptídicos de las
proteínas formando el color púrpura característico del complejo biuret.
El tartrato sódico potásico impide la precipitación de hidróxido de cobre, mientras
que el yoduro potásico inhibe la autorreducción del cobre.
La intensidad cromática es directamente proporcional a la concentración de proteína

que puede determinarse fotométricamente.
140
|

muestras.
Suero.

Estabilidad: 1 mes a 2-8 °C
6 meses a (-15)-(-25) °C
Separar el suero o el plasma del coágulo o de las células dentro de las 4 horas
después de haber recogido la muestra.
Si la muestra se recoge estando el paciente acostado, la concentración de las
proteínas totales disminuye en 4 a 8 g/L, en comparación con los valores obtenidos
si el paciente está de pie.
Calibración
S2: C.f.a.s.
141
|
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a SRM 927c.

Cálculo
Factor de conversión:g/L x 0.1 = g/dL
la proteína total de 66 g/L (6.6 g/dL).
conjugada y sin conjugar (concentración de la bilirrubina conjugada: 20 mg/dL o 342
μmol/L, concentración de la bilirrubina sin conjugar: aprox. 20 mg/dL o 342 μmol/L).
Hemólisis: Sin interferencias significativas
2.0-120 g/L (0.2-12 g/dL)
Valores teóricos
Valores teóricos según Tietz
Cordón umbilical 48-80 g/L (4.8-8.0 g/dL)
Prematuro 36-60 g/L (3.6-6.0 g/dL)
Neonatos 46-70 g/L (4.6-7.0 g/dL)
1 semana 44-76 g/L (4.4-7.6 g/dL)
7 meses-1 año 51-73 g/L (5.1-7.3 g/dL)
1-2 años 56-75 g/L (5.6-7.5 g/dL)
> 3 años 60-80 g/L (6.0-8.0 g/dL)
Adultos (ambulatorios) 64-83 g/L (6.4-8.3 g/dL)
142
|
Proteínas Totales en Orina y LCR

Características
La medición de proteínas en orina se emplea en el diagnóstico y el tratamiento de
enfermedades renales, cardíacas así como de trastornos tiroideos, caracterizados
por proteinuria o albuminuria. La medición de las proteínas en el líquido
cefalorraquídeo (LCR) se emplea en el diagnóstico y el tratamiento de
enfermedades como la meningitis, los tumores cerebrales y las infecciones del
sistema nervioso central.
La orina se forma por ultrafiltración del plasma a través de la pared capilar
glomerular. Las proteínas con una masa molecular relativa superior a 40000 son
retenidas casi completamente, mientras que las sustancias más pequeñas pasan
con facilidad al filtrado glomerular. La mayor parte de las proteínas del LCR se
origina por la difusión del plasma a través de la barrera hematoencefálica. Las
concentraciones aumentan como consecuencia de un incremento en la
permeabilidad de la barrera hematoencefálica o bien debido al aumento en la
síntesis local de inmunoglobulinas.
Los métodos turbidimétricos que emplean el ácido tricloroacético (TCA) o el ácido
sulfosalicílico (SSA) precipitan las proteínas en la muestra según sea su tamaño, lo
cual puede dar lugar a una turbidez inestable y flocular. Los reactivos de los
métodos colorimétricos como el azul de Coomassie y el rojo de pirogalol-molibdato
reaccionan con las proteínas según la composición de sus aminoácidos, pudiendo
teñir los recipientes de vidrio y plástico. Debido a sus mecanismos de reacción, la
sensibilidad tanto de los métodos turbidimétricos como colorimétricos varía respecto
de diversas proteínas, especialmente frente a fragmentos proteicos como las
proteínas
Bence Jones y a las proteínas de pequeño tamaño como la α1‑microglobulina.
El ensayo Urinary/CSF Protein de Roche Diagnostics se basa en el método descrito
por Iwata y Nishikaze3 y modificado posteriormente por Luxton, Patel, Keir y
Thompson.4 En este método, el cloruro de bencetonio reacciona con proteínas en
143
|
un medio básico produciendo una turbidez más estable y uniformemente distribuida

que la observada con los métodos con SSA o TCA. En el presente test, la
recuperación de la γ‑globulina respecto de la albúmina es inferior en unos 30 %5
mientras que la adición de EDTA permite neutralizar las interferencias por iones de
magnesio.
Principio del test

Método turbidimétrico.
La muestra se preincuba en una solución alcalina con EDTA, que desnaturaliza las
proteínas, eliminando así las interferencias por iones de magnesio. Al agregar
cloruro de bencetonio se produce turbidez.
Medidad de protección y advertencias
144
|
145
|

muestras. Sólo se han analizado y encontrado aptos los tipos de muestras aquí
mencionados.
Orina
Utilizar muestras de orina espontánea o de 24 horas. No emplear conservantes.
Refrigerar la muestra durante la recolección.
LCR
No se requieren aditivos especiales. Si la muestra de LCR está contaminada con
sangre, el resultado del test de proteína no tiene validez.
Se recomienda recoger las muestras para el test de proteína en orina o LCR antes
de suministrar fluoresceína o bien, como mínimo, 24 horas después.
Nota: Para no obstruir los canales del instrumento, no determinar con el presente
test aquellas muestras de orina, LCR o de control cuyas concentraciones de
proteínas superan los 7000 mg/L.
Estabilidad:
Orina: 1 día a 15‑25 °C
7 días a 2‑8 °C
1 mes a (-15) - (-25) °C
LCR: 1 día a 15‑25 °C
6 días a 2‑8 °C
> 1 año a (-15)‑(-25) °C
Las muestras sin centrifugar pueden producir resultados elevados.
Calibración
S2‑S6: C.f.a.s. PUC
Multiplicar el valor del calibrador C.f.a.s.
146
|
PUC específico del lote por los factores indicados a continuación a fin de determinar
las concentraciones estándar de la curva de calibración de 6 puntos.
S2: 0.025
S3: 0.050
S4: 0.125
S5: 0.250
S6: 1.0
Modo de calibración RCM
Intervalo de calibraciones Calibración completa
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a un estándar
primario que puede rastrearse hasta NIST (National Institute of Standards and
Technology).
Cálculo
concentración de analito de cada muestra. Factores de conversión: mg/L x 0.1 =
mg/dL mg/L x 0.001 = g/L
Cálculo de la excreción proteica en la orina de 24 horas: mg/L x volumen total (litros
por 24 horas) = mg/día
la proteína total de 120 mg/L (12 mg/dL; 0.12 g/L). Efecto prozona (high‑dose hook):
Los resultados de las muestras con altas concentraciones de proteína total
superiores al intervalo de medición de 100000 mg/L serán indicados mediante
alarmas del sistema como > TEST o > ABS.
Orina
147
|

Hemólisis: La hemoglobina interfiere en el test.
Excepción: La levodopa, la metildopa y la cefoxitina disódica causan valores de
proteína total falsamente altos mientras que el dobesilato de calcio provoca valores
de proteína falsamente disminuidos.
Otros: Las muestras que contienen más de 8 g/L de yodo fijado orgánicamente de
medios radiopacos (p. ej. Hexabrix) pueden tener resultados falsamente altos.
En pacientes con la enfermedad genética rara alcaptonuria pueden encontrarse
altas concentraciones de ácido homogentísico. Las concentraciones de ácido
homogentísico > 0.6 mmol/L pueden falsificar los resultados de muestras de orina.
En pacientes bajo tratamiento con sustitutos del plasma basados en gelatina pueden
obtenerse valores aumentados de proteína en orina.
LCR
Hemólisis: La hemoglobina interfiere en el test.
exámenes.
40‑2000 mg/L (4‑200 mg/dL; 0.04‑2 g/L)
148
|
de las muestras diluidas por la función de repetición del ciclo se multiplican

automáticamente por el factor 3.
Valores teóricos
Orina: 24 h: < 140 mg/24 h*
Espontánea: < 150 mg/L*
Valores obtenidos de muestrascentrifugadas

LCR: Intervalo de referencia según Tietz:
150‑450 mg/L (15‑45 mg/dL)
Intervalo de referencia según Thomas:
200‑400 mg/L (20‑40 mg/dL)
Triglicéridos
Características
Los triglicéridos son ésteres del glicerol, un alcohol trivalente con 3 ácidos grasos
de cadenas largas. En parte son sintetizados en el hígado, en parte se ingieren con
la alimentación.
La determinación de los triglicéridos se emplea para diagnosticar y tratar pacientes
con diabetes mellitus, nefrosis, obstrucción hepática, trastornos del metabolismo
lipídico y otras numerosas enfermedades endocrinas.
La determinación enzimática de triglicéridos descrita por Eggstein y Kreutz aún
requería la saponificación con hidróxido de potasio. Posteriormente se realizaron
varios experimentos para sustituir la saponificación alcalina por una hidrólisis
enzimática con lipasa. Así, Bucolo y David experimentaron con una mezcla de lipasa
y una proteasa, mientras Wahlefeld empleaba para la hidrólisis una esterasa
hepática combinada con una lipasa particularmente efectiva obtenida de Rhizopus
arrhizus.
El presente método se basa en el trabajo de Wahlefeld y utiliza una lipasa
lipoproteica obtenida de microorganismos para hidrolizar completa y rápidamente
149
|
triglicéridos a glicerol, con la oxidación posterior a dihidroxiacetonafosfato y

peróxido de hidrógeno. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la acción
catalítica de la peroxidasa con la 4-aminofenazona y 4-clorofenol para formar un
colorante rojo en una reacción de punto final según Trinder. La intensidad cromática
del colorante rojo formado es directamente proporcional a la concentración de
triglicéridos y puede medirse fotométricamente.
Principio del test

Test enzimático colorimétrico.

muestras.
Suero. Plasma tratado con heparina de litio y EDTA bipotásico.
Calibración
S2: C.f.a.s.
150
|
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a espectrometría de

masa por dilución de isótopo.
Cálculo
mmol/L x 88.5 = mg/dL

concentración de triglicéridos de 2.3 mmol/L (203 mg/dL).
conjugada: aprox. 171 μmol/L ó 10 mg/dL; concentración de la bilirrubina sin
conjugar: aprox. 599 μmol/L ó 35 mg/dL).
Hemólisis: Sin interferencias significativas hasta una concentración de
hemoglobina: aprox. 434 μmol/L ó 700 mg/dL
Lím. Prozona: El aviso > Kin indica concentraciones de triglicéridos
extremadamente altas en la muestra. Los resultados normales falsos se deben a la
depleción de oxígeno durante la reacción analítica.
El glicerol endógeno sin esterificar en la muestra puede producir valores séricos de
triglicéridos falsamente elevados.
Excepción: El ácido ascórbico y el dobesilato de calcio causan resultados de
triglicéridos artificialmente bajos
151
|
0.1-10.0 mmol/L (8.85-885 mg/dL)
Valores teóricos según el NCEP (programa de educación nacional del

Colesterol)
Intervalo normal: < 2.26 mmol/L (< 200 mg/dL)
Interpretación clínica según las recomendaciones de la Sociedad
Europea de Aterosclerosis:
Nota: Si se desea tomar en cuenta el glicerol libre, substraer 0.11 mmol/L

(10 mg/dL) del valor de triglicéridos obtenido.
Otras Lipoproteínas (Perfil Lípidico)

Lipoproteínas de muy baja densidad Las lipoproteínas de muy baja densidad, que
suelen denominarse por sus iniciales en inglés, VLDL, son también partículas
grandes, poco densas (d < 1,006 g/ml) y muy ricas en triglicéridos. También tienen
una composición apolipoproteica similar a los quilomicrones, salvo en 2 aspectos
esenciales: no contienen apo A-I y presentan la forma completa de apo B (apo B-
100) porque en el hígado, lugar de síntesis de VLDL, no se expresa la enzima
152
|
editora de la apo B. La apo B-100 es la proteína estructural de VLDL y de las

ipoproteínas que se sintetizan en buena parte a partir de su catabolismo: IDL y LDL
y Lp(a). El principal estímulo para la síntesis de VLDL parece ser la captación y el
catabolismo de quilomicrones residuales por parte del hígado. La principal función
de las VLDL es, de forma análoga a la de los quilomicrones, el transporte de
triglicéridos y su suministro (en forma de ácidos grasos) a los tejidos muscular y
adiposo. El proceso por el cual se generan los ácidos grasos a partir de los
triglicéridos es básicamente idéntico al ya explicado en el caso de los quilomicrones
y, por tanto, depende fundamentalmente de la actividad de la enzima LPL y de su
cofactor apo C-II. El resultado de esta acción es que las VLDL se hacen más
pequenas, ˜ con una relación más pareja en su contenido en colesterol y triglicéridos
y con una mayor densidad, flotando en la ultracentrifugación como IDL. También, a
semejanza de lo que ocurre en el catabolismo de los quilomicrones, el catabolismo
de las VLDL es una de las vías de síntesis de HDL.
Lipoproteínas de baja densidad (Para más información, ver referencias 4,5.) Las
lipoproteínas de baja densidad, o LDL (d < 1,063 g/ml, > 1,019 g/ml), se caracterizan
por su contenido en apo B-100 y tienen como componente lipídico mayoritario los
ésteres de colesterol. La función de las LDL es el transporte y entrega de colesterol
a las células, incluyendo tejidos periféricos e hígado. Las LDL son reconocidas por
los receptores de LDL situados en la membrana plasmática que reconocen apo B-
100 y apo E (fig. 1). El receptor de LDL es sintetizado por múltiples estirpes celulares
y viaja hacia la membrana plasmática quedando fijado por una proteína,
denominada clatrina, en unas zonas específicas que se denominan hoyos
revestidos. Aproximadamente cada 5 min, hayan unido o no LDL, estos hoyos
revestidos experimentan endocitosis y son transportados hacia el citoplasma en
forma de endosomas. En el caso de que contengan LDL unidas al receptor, el
contenido proteico y lipídico de las mismas es hidrolizado hasta formar aminoácidos
y colesterol no esterificado. El colesterol no esterificado es tóxico para las células
por encima de una cierta concentración y, por tanto, debe ser o bien utilizado (para
síntesis de membranas o de hormonas esteroideas, por ejemplo), o bien convertido
por enzimas del tipo acil: colesterol aciltransferasa (ACAT) en ésteres de colesterol,
153
|
forma en que pueden ser guardados como reservorio celular de colesterol. El

receptor de LDL, una vez completado su ciclo celular, puede ser degradado por la
PCSK9 o bien reciclado para volver a comenzar el ciclo. Las células pueden también
sintetizar de novo colesterol a través de una larga vía de síntesis (endógena) que
tiene como punto crítico de regulación el paso de hidroximetilglutaril CoA (HM CoA)
a mevalonato, paso catalizado por la HMGCoA reductasa. Sin embargo, la mayor
eficiencia de la vía de síntesis del receptor de LDL hace que predomine sobre la
activación de la vía de síntesis endógena de colesterol, ya que mediante la síntesis
de menos proteínas consiguen acceso a un mayor número de moléculas de
colesterol. Los niveles de colesterol no esterificado intracelular regulan de forma
coordinada los 2 sistemas de síntesis de colesterol, asegurando así su coordinación
y evitando un exceso de colesterol intracelular. La expresión y la funcionalidad
adecuadas de los receptores de LDL son un determinante importante de la
concentración de LDL sérico. Como prueba, la hipercolesterolemia familiar, que es
una enfermedad autosómica dominante causada por mutaciones en el gen del
receptor de LDL o, menos frecuentemente, del dominio de ligando de apo B-100 o
de PCSK9, presenta concentraciones séricas elevadas de LDL. En este contexto es
importante conocer que el tipo de medicamentos hipocolesterolemiantes más
usados en clínica, las estatinas, funcionan inhibiendo la HMGCoA reductasa, ya que
de esta forma se consigue un aumento de la síntesis de receptor de LDL celular, lo
que disminuye la concentración sérica de LDL y, por tanto, de colesterol.
Cálculo
Colesterol VLDL
Colesterol total - HDL - LDL = VLDL
Colesterol LDL
LDLc = CT - (HDLc + TG/5) en mg/dl
Existe, no obstante, una limitación a la utilización de esta fórmula y es cuando los

triglicéridos superan los 400 mg/dl situación que como conocemos no es
excepcional. También, aunque es mucho menos frecuente, cuando existe una
154
|
disbetalipoproteinemia, ya que las beta- VLDL contienen más colesterol que las
VLDL normales ó si el paciente es homocigoto para la apo E.
Nota: El Software del laboratorio calcula automáticamente estos valores, si se

ingresa el perfil lipídico.
Urea/BUN
Características
La urea es el principal producto terminal del metabolismo proteico que contiene
nitrógeno. Se sintetiza en el hígado en el ciclo de la urea a partir del amoníaco
derivado de la desaminación de los aminoácidos. Los riñones excretan la mayor
parte de la urea, si bien también se excreta, en cantidades mínimas, a través de la
transpiración y se degrada en los intestinos por acción bacteriana.
La determinación del nitrógeno de urea en sangre es la prueba más utilizada para
el cribado de la función renal. Su utilización combinada con la determinación de la
creatinina sérica contribuye al diagnóstico diferencial entre los tres tipos de azoemia:
la azoemia prerrenal, renal y la posrenal.
Se observan aumentos de la concentración del nitrógeno ureico en sangre en caso
de perfusión renal inadecuada, shock, hipovolemia (por causas prerrenales), nefritis
crónica, nefroesclerosis, necrosis tubular, glomerulonefritis (por causas renales) y
la obstrucción de las vías urinarias (por causas posrenales). También se aprecian
incrementos pasajeros durante períodos de alta ingestión proteica. En presencia de
hepatopatías, los niveles de urea son imprevisibles.
Principio de test
Test cinético con ureasa y glutamato deshidrogenasa.
La urea es hidrolizada por la ureasa a amonio y carbonato.
155
|
La velocidad con que la concentración de NADH disminuye es directamente

proporcional a la concentración de urea en la muestra y se mide fotométricamente.

muestras.
Suero Plasma tratado con heparina de litio y EDTA bipotásico. No emplear la
heparina de amonio.
Orina
La proliferación bacteriana en la muestra y la alta concentración atmosférica del
amoníaco, así como la contaminación por iones de amonio pueden causar
resultados falsos elevados.
Estabilidad en suero/plasma: 7 días a 15-25 °C
7 días a 2-8 °C
1 año a (-15)-(-25) °C
Estabilidad en orina:6 2 días a 15-25 °C
7 días a 2-8 °C
1 mes a (-15) - (-25) °C
Calibración
S2: C.f.a.s.
- en el analizador, tras 4 semanas
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a SRM 909b.
156
|
Cálculo
Factores d conversión:
mmol/L de urea x 6.006 = mg/dL de urea
mmol/L de urea x 0.06006 = g/L de urea
mmol/L de nitrógeno ureico × 2.801 = mg/dL de nitrógeno ureico
mmol/L de nitrógeno ureico x 0.02801 = g/L de nitrógeno ureico
mg/dL de urea × 0.467 = mg/dL de nitrógeno ureico
Al emplear orina de 24 horas como muestra, multiplicar el resultado por el volumen
de 24 horas para obtener valores en g o mmol/24 horas.

urea de 8.3 mmol/L (49.8 mg/dL de urea y 23.2 mg/dL de nitrógeno ureico).
Suero/plasma
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un índice I de 60 (concentración de
la bilirrubina conjugada y no conjugada: aprox. 60 mg/dL o 1026 μmol/L).
Hemólisis: Sin interferencias significativas hasta una concentración de
hemoglobina: aprox. 621 μmol/L ó 1.000 mg/dL.
Los iones de amonio pueden causar resultados erróneamente elevados.
Orina
Suero/plasma
0.5-40 mmol/L (3.0-240 mg/dL de urea, 1.4-112 mg/dL de nitrógeno ureico)
157
|

Orina
1-2000 mmol/L (6-12000 mg/dL de urea, 2.8-5600 mg/dL de nitrógeno ureico)
repetición del ciclo es de 1:1.8. Los resultados de las muestras diluidas por la
función de repetición del ciclo se multiplican automáticamente por el factor 1.8.
Determinar las muestras con concentraciones inferiores al límite técnico de 40
mmol/L (240 mg/dL de urea y 112 mg/dL de nitrógeno ureico) a través de la función
de repetición del ciclo. Las muestras se miden sin diluir.
Valores teóricos
Urea:
Suero/plasma
Adultos 2.76-8.07 mmol/L (16.6-48.5 mg/dL)
Orina
Orina de 24 horas < 580 mmol/24 h (< 35 g/24 h)
1ra orina de la mañana 150-500 mmol/L (0.9-3.0 g/dL)
Nitrógeno ureico (BUN):
Suero/plasma
Adultos (18-60 años) 6-20 mg/dL
Adultos (60-90 años) 8-23 mg/dL
Lactantes (< 1 año) 4-19 mg/dL
Lactantes/niños 5-18 mg/dL
Orina
Orina de 24 horas: 800-1666 mg/dL (12-20 g/24 h)
a) Basado en una excreción media de orina de 1.2 a 1.5 L/24 h.
158
|
Osmorlaridad sérica
El intercambio de solutos y agua entre el ultrafiltrado y el plasma se lleva a cabo por
medio de complejos mecanismos de transporte en las diferentes porciones de la
nefrona y dependiendo del exceso o déficit de alguno de éstos en la sangre o en el
líquido intersticial, se producirá su mayor o menor eliminación renal, logrando así
una concentración normal para mantener una homeostasis permanente. La
concentración plasmática de los electrólitos depende de la cantidad que se
administre por vía oral (en la dieta) o por vía parenteral (intravenosa) y del ingreso
neto del agua. Como la ingesta no se realiza a un ritmo constante a largo del día,
se producen permanentemente cambios en dichas concentraciones que son
manejados de una manera muy precisa por parte del riñón. Los líquidos que
ingresan al organismo pueden ser hipo, iso o hiperosmolares con respecto al
plasma.
La administración intravenosa (compartimiento plasmático) de altos volúmenes de

líquido, modifica de manera importante el volumen de los demás compartimientos,
sin embargo, dichos cambios se presentan de manera diferente dependiendo de la
osmolaridad del fluido inyectado.
Los cambios de osmolaridad se manejan de forma distinta de acuerdo a la

composición del líquido administrado, pero incluyen en general modificación del
balance de sodio, glucosa y agua (ADH). El balance entre los compartimientos,
particularmente en el plasmático influye además en la función cardiovascular, y ésta
a su vez es importante para mantener un aporte de oxígeno adecuado al riñón.
Compartimentos Corporales. En el cuerpo humano los fluidos se encuentran
distribuidos en dos compartimentos: El compartimiento extracelular (LEC) y el
intracelular (LIC). Aproximadamente un tercio del agua corporal total se halla en el
LEC y dos tercios en el LIC; y el agua corporal total constituye entre el 50-60% del
peso corporal total de un individuo adulto. Los iones constituyen el 95% de los
solutos suspendidos en los fluidos orgánicos, la suma de las concentraciones de
cationes equivalen a la de los aniones en cada compartimiento y así el fluido de
159
|
cada uno de los espacios es eléctricamente neutral y químicamente isosmolar. El

principal catión del líquido extracelular es el Na+ y el principal anión el Cl-. El
bicarbonato (HCO3-) es un anión predominante y también se encuentran otros en
cantidades menores como urea, proteínas y glucosa. Estos aniones y cationes
determinan la osmolaridad del plasma (Su valor normal es 290 +/- 10 mosmol/l), que
se calcula teniendo en cuenta la concentración de estos y otras sustancias en
sangre como la glucosa y el BUN (nitrógeno ureico en sangre). El Na+ es el principal
determinante de este valor es situaciones fisiológicas. La fórmula para hallar la
osmolaridad plasmática es:
2 Na+ + K+ + Glicemia (mg/dl)/18 + BUN (mg/dl)/2.8
La osmolaridad plasmática oscila normalmente entre 280 y 290 mOsm/l; cuando se

calcula mediante la fórmula anterior, las cifras son normalmente 6-8 mOsm/l más
bajas.
Química de Líquidos Estériles

Líquido Cefalorraquídeo LCR
Es un líquido claro, incoloro, formado dentro de las cavidades o ventriculares del
cerebro, por los plexos coroideos y el plasma sanguíneo. Se forman
aproximadamente 500 cc de líquido cefalorraquídeo cada día, aunque solo hay de
120 a 150 ml en el sistema en cualquier momento. El LCR es reemplazado
completamente unas 3 veces al día. Su función es amortiguar la masa cefálica y
absorber las fuerzas que se transmiten a través de la bóveda craneana hacia el
cerebro. También ayuda a regular la presión intracraneal, la cual puede cambiar con
el flujo sanguíneo, el transporte de nutrientes y el nivel de productos de desecho.
Se considera además que este líquido influye en otros mecanismos de control como
las concentraciones de glucosa en el hipotálamo, las sensaciones de hambre y el
comportamiento en el comer. La mayor parte de los componentes del LCR existen
en mayor o menor concentración que en el plasma, sin embargo las enfermedades
160
|
pueden hacer que algunos elementos que normalmente son retenidos por la barrera
hematoencefálica, penetren al líquido, tales como los leucocitos y eritrocitos, que
pueden entrar a través de los vasos sanguíneos. El LCR se obtiene por punción
lumbar. Esta se realiza cuando hay sospecha de una meningitis, cuando se requiere
valorar la presión del líquido o para introducir anestésicos, fármacos o medios de
contraste radiográficos.
A nivel químico se realizan al LCR pruebas como:
Glicemia
La concentración varía con los niveles de glucosa en sangre. En el LCR suele ser
de 60 a 70% de la concentración total en sangre. Esta medición es de ayuda para
estimar algún impedimento en el transporte de glucosa del plasma al LCR y un uso
elevado de glucosa por el S.N.C, leucocitos o microorganismos. Puede estar
disminuida en casos de infecciones piógenas, micóticas, tuberculosis, linfomas con
extensión meníngea, leucemia con extensión meníngea, meningoencefalitis e
hipoglicemia. Casi todos los organismos superiores e inferiores consumen glucosa,
y en casi todos los casos en que se presenta la glucosa disminuida, se puede deber
a una actividad bacteriana. En la mayoría de los casos el aumento es debido a una
diabetes. Las concentraciones de la glucosa en el LCR suelen ser normales en el
caso de algunas clases de infecciones virales cerebrales y meníngeas, así como en
la meningitis aséptica.
Cloruros
Cualquier situación que aumente la cantidad de cloruros en el plasma afectará
también el cloro en el LCR. La medición de cloro en LCR es útil en el diagnóstico de
la meningitis tuberculosa, en la cual se verá disminuido. La administración de
cloruros invalida los resultados de la prueba. Los valores de la prueba no son válidos
si como consecuencia de un golpe traumático, la sangre se mezcla con la muestra.
161
|
Proteínas totales
El LCR contiene muy pocas proteínas, ya que las proteínas en el suero sanguíneo
están en forma de grandes moléculas que no atraviesan la barrera
hematoencefálica. No obstante, la proporción de albúmina/globulinas, es superior
en el LCR ya que la molécula de albúmina es significativamente menor y puede
atravesar con más facilidad la barrera. En las infecciones se da un incremento en la
permeabilidad de la barrera hematoencefálica. Los aumentos moderados o notorios
en las concentraciones de proteínas totales y alteraciones en la proporción de
albúmina/globulina, son originados por el aumento en la permeabilidad de la barrera,
así como por las obstrucciones en la circulación de los sistemas de conducción de
LCR, aumento en la síntesis de proteínas en el S.N.C por degeneración tisular y los
tumores cerebrales. Se pueden encontrar aumentadas en meningitis purulenta,
tuberculosa o aséptica, en sífilis y neurosífilis, abscesos cerebrales, hemorragia y
hematomas subaracnoideos, poliomielitis, síndrome de Guillan-Barré. Se pueden
encontrar disminuidas por aumento de la presión intracraneal o hipertiroidismo.
Los valores de referencia se encuentran en las técnicas de glucosa y proteínas
urinarias/LCR.
Lactato
En la meningitis bacteriana, se observa un aumento de los niveles de lactato en el
líquido cefalorraquídeo (LCR). Asimismo se observan niveles elevados de LCR en
la hipocapnia, el hidrocefalo, los abscesos cerebrales, la isquemia cerebral y
cualquier condición clínica asociada a una oxigenación reducida del cerebro y/o una
presión intracraneal incrementada.
Valores de referencia: LCR: 1.1-6.7 mmol/L (10-60 mg/dL) Neonatos
1.1-4.4 mmol/L (10-40 mg/dL) de 3-10 días
1.1-2.8 mmol/L (10-25 mg/dL) > 10 días de edad
1.1-2.4 mmol/L (10-22 mg/dL) Adultos
Líquido Sinovial (Articular)
Es uno de los principales componentes de las articulaciones. Este se halla en el
interior de las cápsulas articulares presentes entre las extremidades móviles y su
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función principal es proveer protección a las superficies óseas que tiene movilidad.
El valor diagnóstico de este líquido, radica en la diferenciación entre enfermedad
inducida por aposición de cristales y artritis infecciosa. La concentración de
inmunoglobulinas y proteínas totales corresponde a 1/4 parte de la concentración
en suero; los valores de electrolitos, glucosa y ácido úrico son iguales que en el
suero.
Glucosa
Es indicador valioso para el caso de las infecciones bacterianas, ya que existe una
diferencia de hasta 60 mg/dl menos que el valor hallado de glucosa en suero; por
lo tanto los niveles muy bajos de glucosa son sugestivos de infección bacteriana.
Ácido úrico
Se evalúa con relación a los niveles de ácido úrico en suero y la observación
microscópica de la formación de cristales de dicho ácido.
Proteínas totales
En el líquido sinovial el valor es ligeramente menor que en el suero; en estados
patológicos se puede hallar elevado, correspondiendo en este caso a procesos
inflamatorios y/o bacterianos.
Líquidos de Cavidades Serosas

Los líquidos de cavidades serosas derivan del plasma y se encuentran en las
cavidades pleural, pericárdica y peritoneal.
Los procesos de formación de éstos líquidos son dinámicos y están controlados por
la permeabilidad de los capilares en la membrana parietal, la presión hidrostática en
estos capilares, la presión oncótica (o coloide osmótica) producida por las proteínas
plasmáticas dentro de los capilares y la absorción de líquidos por el sistema linfático.
La presión hidrostática de la sangre fuerza al plasma a ultrafiltrarse hacia las
163
|
cavidades, mientras que las proteínas ejercen una presión inversa a esta filtración.
La permeabilidad del endotelio capilar regula la velocidad de formación del
ultrafiltrado y de su composición proteica. Si se incrementa la permeabilidad
endotelial provoca un desplazamiento de las proteínas sanguíneas hacia las
cavidades. Estos fluidos vasculares ricos en proteínas aumentarán la acumulación
de líquido en las cavidades. Esta acumulación de líquido en las cavidades se
denomina derrame e indica un proceso patológico.
Transudados y Exudados
Clásicamente, según su contenido proteico, los líquidos serosos se diferencian
en transudados y exudados. Esta distinción es fundamental para su clasificación
etiopatogénica y para la selección de las magnitudes bioquímicas cuyo estudio
aportará una mayor eficacia diagnóstica.
Los transudados son líquidos no inflamatorios que se originan por alteración de
factores sistémicos que afectan a la formación o reabsorción del líquido (presión
hidrostática o coloidosmótica). Frecuentemente están asociados con insuficiencia
cardíaca congestiva, cirrosis hepática y síndrome nefrótico, los dos últimos se
asocian con hipoproteinemia.
Los derrames de líquido en la cavidad pleural, pueden formarse como un ultrafiltrado
del plasma. Se puede clasificar como transudado (formado por factores mecánicos
que influyen en la formación y reabsorción de líquidos. Ej: disminución de albúmina
o aumento de la presión venosa), o exudado (derrame provocado por una lesión de
los recubrimientos del mesotelio. Ej: Tuberculosis, infecciones bacterianas, Lupus
Eritematoso Sistémico).
Los exudados son líquidos inflamatorios cuya formación depende de un aumento

de la permeabilidad capilar debido a alteraciones que implican directamente a
estructuras de la superficie de determinadas cavidades corporales (mesotelio,
vasos linfáticos y capilares). Algunas infecciones pueden producir exudados, así
como también, neoplasias, desordenes sistémicos, traumatismos o condiciones
164
|
inflamatorias. Los exudados requieren un mayor número de pruebas de laboratorio

que los transudados, tales como estudios microbiológicos o estudios citológicos.
La diferencia entre transudados y exudados se basa en niveles arbitrarios de
decisión clínica que ha sido determinada empíricamente. Uno de los criterios
ampliamente utilizados es el criterio de Light, publicado en el año 1972, el cual
considera los niveles proteicos en el líquido pleural versus los niveles de proteínas
en suero, al igual que los niveles de lactato deshidrogena (LDH) pleural versus LDH
plasmática. Esto se describe mas adelante, en la sección de exámenes químicos
de los líquidos serosos.
Las pruebas útiles para la clasificación de transudados y exudados son las
mediciones simultáneas de proteína total (PT) y lactato deshidrogenasa (LDH), tanto
en el suero como en el líquido seroso. A partir de estas mediciones se establecen
cocientes de concentración de proteína y LDH:
Estos cocientes proporcionan medios confiables para distinguir entre

transudados y exudados. Si el cociente PT es < 0,5 y el cociente LDH es < 0,6, el
líquido se clasifica como un transudado. En contraste, los exudados son aquellos
líquidos con un cociente PT > 0,5 y un cociente LDH > 0,6.
En transudados el nivel de LDH es < 2/3 del nivel de LDH sérica y en exudados el
nivel de LDH es > 2/3 de los niveles de LDH sérica.
Gradiente de albúmina plasmática-albúmina de líquido ascítico (GASA)

Cuando el líquido peritoneal excede de 25 mL y además aumenta progresivamente
se denomina ascitis. La relación entre la concentración de albúmina en suero y la
de albúmina en líquido ascítico proporciona una mejor clasificación diagnóstica de
la ascitis que la concentración de proteínas, por lo que algunos expertos reemplazan
165
|
los términos transudados y exudados en la descripción de la ascitis, por el de

gradiente de albúmina elevado y gradiente de albúmina disminuido.
El gradiente de albúmina se obtiene sustrayendo la concentración de albúmina en
líquido ascítico a la concentración de albúmina en suero. Para lo anterior, las
muestras de suero y líquido ascítico deben obtenerse simultáneamente.
La utilidad del gradiente de albúmina se basa en el concepto de equilibrio oncótico-
hidrostático. La diferencia entre albúmina sérica y en líquido ascítico es muy grande
en pacientes con hipertensión portal. Si esta diferencia es mayor o igual a 1,1 g/dL,
sugiere la presencia de hipertensión portal, como se puede encontrar en cirrosis
hepática, metástasis hepáticas y síndrome nefrótico, enfermedad pancreática y
otras. El gradiente de albúmina nos permite clasificar, con una eficacia del 95%, la
ascitis como asociada o no a hipertensión portal. Los laboratorios deben informar el
primer decimal.
Glucosa
La medición simultanea de glucosa sérica y en el líquido seroso tiene un valor
limitado. Si en el líquido seroso la glucosa es inferior a 60 mg/dL o la diferencia entre
glucosa sérica y glucosa del líquido seroso es superior a 30 mg/dL, se identifica un
proceso exudativo. Solo tienen relevancia clínica los niveles bajos de glucosa ante
la sospecha diagnóstica de artritis reumatoide.
Amilasa
La medición simultanea de amilasa en suero y líquido seroso es clínicamente de
utilidad para líquido pleural y peritoneal, siendo un examen de rutina en muchos
laboratorios. Un valor de amilasa en el líquido que excede el valor normal a nivel
sérico, o es superior 1,5 a 3 veces, se considera como anormalmente aumentado.
Estos niveles elevados de amilasa en los líquidos se presentan en derrames
provocados por pancreatitis, ruptura esofágica, perforación gastroduodenal y
neoplasias.
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Triglicéridos
El nivel de los triglicéridos en líquidos serosos es de utilidad especialmente cuando
estos son de aspecto lechoso o quiloso. Cuando los niveles de triglicéridos exceden
los 110 mg/dL indican un derrame quiloso, mientras que si estos son inferiores a 60
mg/dL lo descartan. Si los niveles de triglicéridos están entre 60 y 110 mg/dL, se
puede efectuar adicionalmente una electroforesis de lipoproteínas.
La presencia de quilomicrones identifica al derrame como quiloso, mientras que su
ausencia la identifica como pseudoquiloso. El contenido de colesterol del derrame
quiloso y pseudoquiloso es de utilidad clínica. La efusión quilosa se asocia con
obstrucción o daño al sistema linfático. Neoplasias (por ejemplo linfoma), traumas,
tuberculosis y procedimientos quirúrgicos a menudo provocan derrames quilosos;
mientras que los pseudoquilosos se presentan más a menudo en inflamaciones
crónicas como ocurre en artritis reumatoide.
Panel Cardíaco (Troponina I, Mioglobina)

La prueba de enzimas cardíacas Triage® Cardiac Panel es un fluoroinmunoanálisis
que se utiliza con el lector Triage Meter para la determinación cuantitativa de
creatina-cinasa MB (CK-MB), mioglobina y troponina I en muestras de sangre entera
y plasma recogidas con EDTA. La prueba se utiliza como ayuda en el diagnóstico
del infarto de miocardio (lesión).
Características
En muchos casos, el diagnóstico del infarto agudo de miocardio (IAM) en pacientes
que presentan dolor torácico es difícil. Los tres criterios principales indicados por la
Organización Mundial de la Salud para diferenciar el dolor torácico asociado a IAM
del dolor torácico debido a otras razones son: 1) anamnesis y exploración física del
paciente, 2) datos electrocardiográficos y 3) cambios en los marcadores de
proteínas séricas asociados al infarto de miocardio. Para diagnosticar
adecuadamente un IAM se deben cumplir al menos dos de estos criterios.
A menudo, la exploración física no puede diferenciar el IAM de otras anomalías
cardíacas. El electrocardiograma es útil en el diagnóstico del IAM, pero está
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|
limitado, porque sólo es concluyente en aproximadamente el 50% de los pacientes

con IAM. Por lo general, la formación de ondas Q y los cambios en el segmento ST,
elevación o depresión, son indicativos de IAM. No obstante, los resultados del
electrocardiograma deben considerarse junto con la anamnesis yla exploración
física del paciente. El electrocardiograma puede ser inicialmente normal aunque el
paciente tenga realmente un IAM.
Los marcadores de proteínas sanguíneas desempeñan un papel importante en el
diagnóstico diferencial del IAM cuando otros indicadores pueden ser negativos o
cuestionables. Los marcadores utilizados en el diagnóstico del infarto de miocardio
son: creatina-cinasa (CK), la isoenzima MB de la creatina-cinasa (CK-MB),
mioglobina y las proteínas estructurales delcomplejo troponina, es decir, troponina
T y troponina I.
Después de un IAM, la aparición de marcadores de proteínas en la sangrese
produce a consecuencia de la necrosis celular iniciada por un episodioisquémico.
Las proteínas presentes en concentraciones más altas y las mássolubles son las
que primero aparecen en la sangre, por ejemplo, la mioglobina.
Las proteínas estructurales y mitocondriales de los miocitos aparecen mástarde,
como por ejemplo la CK-MB y las proteínas del complejo troponina,incluida la
troponina I.La mioglobina es una hemoproteína citoplasmática soluble, con un
pesomolecular de aproximadamente 17 kDa, presente en las células
musculares.Considerando su tamaño relativamente pequeño, su alta concentración
celular ysu localización citoplasmática, la mioglobina se libera antes que otros
marcadorescardíacos después de una necrosis o una lesión celulares. Las
concentracionessanguíneas de mioglobina aumentan por encima del intervalo de
referencia enlas dos primeras horas después de la lesión, y alcanzan el máximo
entre seis yocho horas después de la aparición de los síntomas. La mioglobina
vuelve aconcentraciones iniciales o normales entre 20 y 36 horas después de la
lesióntisular. La mioglobina está presente en todos los tipos de células musculares.
Por lo tanto, su presencia en la sangre no se asocia necesariamente a
lesiónmiocárdica. Las concentraciones sanguíneas de mioglobina pueden aumentar
como resultado de distintas situaciones que producen lesión muscular. Entre ellas
168
|
están traumatismos, isquemia, cirugía, ejercicio y una serie de enfermedades

musculares degenerativas. Con respecto a esto, la mioglobina tiene su mayor valor
en la exclusión del infarto de miocardio en las primeras horas después del dolor
torácico. Debido al rápido aumento de las concentraciones sanguíneas de
mioglobina, seguido por un aclaramiento moderadamente sostenido, la utilidad de
la mioglobina está limitada a las 2-30 horas siguientes a la lesión tisular. No
obstante, la mioglobina es particularmente útil cuando se conocen los antecedentes
clínicos del paciente. La creatina-cinasa MB (CK-MB) es una enzima citosólica de
82 kDa que está presente en altas concentraciones en el miocardio. Esta isoenzima
de la creatina-cinasa se utiliza frecuentemente en el diagnóstico del infarto agudo
de miocardio. Por lo general, las concentraciones de CK-MB suben por encima de
lo normal entre las cuatro y las ocho horas siguientes al infarto agudo de miocardio,
alcanzan concentraciones máximas entre las 12 y las 24 horas y vuelven a sus
valores normales en aproximadamente tres días. La CK-MB, como la mioglobina,
no se localiza específicamente en el músculo cardíaco. Las concentraciones
sanguíneas de CK-MB pueden aumentar como resultado de lesiones musculares
agudas o crónicas, incluido el ejercicio intenso y los traumatismos. Aun así, la
determinación de la concentración sanguínea de CK-MB es muy fiable para el
diagnóstico y tratamiento de los pacientes con IAM.
Las proteínas contráctiles de las miofibrillas se han hecho populares como
marcadores cardíacos específicos del infarto agudo de miocardio y de la lesión
miocárdica. Entre ellas están dos proteínas específicas del complejo regulador de
la contracción: la troponina I y la troponina T. La troponina I y la troponina T aisladas
del músculo cardíaco tienen secuencias específicas de aminoácidos que permiten
el desarrollo de anticuerpos específicos antiproteínas cardíacas.
La secuencia de aminoácidos amino terminal del isotipo cardíaco de la troponina I
tiene 31 residuos aminoacídicos que no están presentes en ninguno de los dos
isotipos de la troponina I del músculo esquelético. Por lo tanto, los inmunoanálisis
específicos para la troponina I cardíaca se utilizan en la evaluación de pacientes
que se sospecha que han sufrido un IAM.
169
|
Las concentraciones sanguíneas de troponina I se elevan entre las 4 y las 8 horas

siguientes a un IAM, alcanzan su máximo entre las 12 y las 16 horas, y permanecen
elevadas de 5 a 9 días después de la lesión miocárdica. Las concentraciones de
troponina I cardíaca aumentan principalmente debido al infarto de miocardio. Sin
embargo, también pueden aumentar como resultado de lesiones cardíacas
menores, que incluyen: angina inestable, contusiones cardíacas, trasplante de
corazón, cirugía de derivación («bypass») aortocoronaria, traumatismo físico del
corazón, insuficiencia cardíaca congestiva y otras afecciones que pueden lesionar
el miocardio. Además, la troponina I cardíaca no parece elevarse como resultado
de lesiones del músculo esquelético. Debido al aumento de la especificidad analítica
y a la prolongada duración de su elevación, la troponina I cardíaca se ha convertido
en un importante marcador en el diagnóstico y evaluación de los pacientes que se
sospecha que han sufrido un IAM. La cuantificación simultánea de las
concentraciones de mioglobina, CK-MB y troponina I cardíaca después de un IAM
puede ser de gran ayuda para el médico en el diagnóstico y tratamiento de los
pacientes que se sospecha que han sufrido un IAM. En la bibliografía científica
también se ha descrito que las concentraciones de troponina I ofrecen información
de pronóstico relacionada con el riesgo de futuras afecciones cardíacas y de
mortalidad en pacientes con síndromes coronarios agudos. Más recientemente, se
ha demostrado que los análisis de varios marcadores, entre ellos troponina I, CK-
MB y mioglobina, ofrecen una mejor estratificación del riesgo que los de un solo
marcador.
Principios del procedimiento de la prueba
El procedimiento de la prueba incluye la adición de varias gotas de una muestra de
sangre entera o plasma recogida con EDTA al orificio del dispositivo de prueba.
Después de depositar la muestra en el orificio del dispositivo de prueba, las células
de sangre entera se separan del plasma por medio de un filtro incorporado en el
dispositivo de prueba. La muestra reacciona con conjugados de anticuerpos
fluorescentes y pasa por el dispositivo de prueba por acción capilar. Los complejos
de cada conjugado de anticuerpos fluorescentes son capturados en zonas
determinadas, lo que produce análisis de unión específicos para cada analito.
170
|
El dispositivo de prueba se inserta en los lectores Triage Meter®. Los resultados

aparecen en la pantalla del lector y pueden imprimirse. Todos los resultados se
almacenan en la memoria del medidor, por lo que se podrán imprimir y visualizar
cuando sea necesario. Si está conectado, el medidor puede enviar los resultados al
sistema de información del hospital o el laboratorio.
Reactivos y materiales suministrados

El dispositivo de prueba contiene todos los reactivos necesarios para la
cuantificación simultánea de las proteínas CK-MB, mioglobina y troponina I en
muestras de plasma y sangre entera a las que se ha añadido ácido edético (EDTA)
como anticoagulante.
El dispositivo de prueba contiene:
• Anticuerpos monoclonales murinos contra la CK-MB, la mioglobina y la troponina
I.
• Anticuerpos policlonalesmurinos contra la CK-MB y la mioglobina.
• Anticuerpos policlonales de cabra contra la troponina I.
• Tinte fluorescente
• Fase sólida
• Estabilizadores
Advertencias y precauciones
• Para uso diagnóstico in vitro.
• Para el uso por profesionales sanitarios.
• No utilice el estuche después de la fecha de caducidad indicada en el exterior de
la caja.
• Mantenga el dispositivo de prueba en la bolsa sellada hasta que esté preparado
para utilizarla. Deséchela tras un solo uso.
• Obtendrá resultados óptimos si realiza la prueba a temperaturas comprendidas
entre los 20 y los 24 °C.
• La pipeta de transferencia debe utilizarse para una sola muestra. Deséchela tras
un solo uso.
171
|
• Al trabajar con muestras de pacientes, se deberán seguir técnicas de seguridad

de laboratorio adecuadas en todo momento, ya que las muestras son
potencialmente infecciosas.
Requisitos de almacenamiento y manipulación

• Almacene los dispositivos de prueba en un refrigerador a entre 2 °C y 8 °C
• Una vez que se saca del refrigerador, el dispositivo de prueba sellado es estable
durante 14 días, siempre y cuando no se supere la fecha de caducidad indicada en
la bolsa.
• No extraiga el dispositivo de prueba de la bolsa hasta que esté preparado para
utilizarlo
• Antes de utilizar dispositivos de prueba refrigerados (2 °C a 8 °C), deje que
alcancen la temperatura ambiente en sus bolsas individuales. Esto llevará un
mínimo de 15 minutos. Si se saca del refrigerador un kit que contenga más de un
dispositivo de prueba, espere a que el kit y los dispositivos de prueba alcancen la
temperatura ambiente antes de usarlos.
Esto llevará un mínimo de 1 hora.
Obtención y preparación de muestras
• Para realizar análisis con este producto se requieren muestras de sangre total o
plasma venosos recogidas con (EDTA) comoanticoagulante. No se han evaluado
otros tipos de muestras, métodos deextracción o anticoagulantes.
• Analice las muestras de sangre en el dispositivo de prueba inmediatamente o en
las 4 horas posteriores a su obtención. Si no pudiera completarse el análisis antes
de 4 horas, el plasma debe separarse y almacenarse a -20 °C hasta que pueda
analizarse.
• Transporte las muestras a temperatura ambiente o refrigerada y evite las
temperaturas extremas.
• Si piensa que una muestra está hemolizada, deberá obtener otra muestra para la
prueba.
Procedimiento de la prueba
172
|
Notas referentes al procedimiento

El plasma congelado y las muestras refrigeradas de plasma o sangre entera deben
alcanzar la temperatura ambiente antes de la realización de la prueba. Mezcle bien
las muestras de los pacientes.
 Mezcle las muestras de sangre entera invirtiendo suavemente el tubo varias
veces antes de realizar el análisis.
 Si fuera posible, mezcle las muestras de plasma agitando el tubo antes de
realizar el análisis.
Realización del control de calidad del sistema Triage®: dispositivo de CC

Utilice el dispositivo de CC para verificar el funcionamiento correcto del lector.
Realice el procedimiento cada día que se lleven a cabo pruebas de pacientes.
1. La primera vez que utilice un dispositivo de CC en el lector, deberá instalar el
CODE CHIP™ del dispositivo de CC. Los datos del CODE CHIP del dispositivo
de CC se almacenan en la memoria del lector. No es necesario volver a
instalar el CODE CHIP del dispositivo de CC después de la instalación
inicial.
a) En la pantalla principal, seleccione <Ins. nuevoCode Chip>y pulse Enter.
b) Coloque el Code Chip del dispositivo de CC en la esquina frontal inferior izquierda
del lector. Siga las instrucciones que aparecen en la pantalla.
c) Retire el Code Chip del dispositivo de CC del lector cuando se haya completado
la transferencia de datos.
2. En la pantalla principal, seleccione <Ejecutar test>y pulse Enter.
3. Si hay un ID de usuario activado, introduzca su número de ID de usuario y pulse
Enter.
4. Seleccione <Dispositivo de CC>y pulse Enter.
5. Introduzca el dispositivo de CC y pulse Enter.
6. Aparecerá o se imprimirá un resultado de OK o Fallo cuando se complete el
análisis. Todos los parámetros deben ajustarse a los límites establecidos antes
de la realización de la prueba del paciente.
173
|
7. Retire el dispositivo de CC del lector y colóquelo en su caja negra especial. NO

DESECHE EL DISPOSITIVO DE CC.
Calibración del lote usando el chip del reactivo
Al abrir un lote nuevo de dispositivos de prueba, debe transferirse la información
sobre calibración y caducidad de ese lote de tarjetas al lector antes del análisis del
paciente. Para transferir dicha información al lector, utilice el CODE CHIP del
reactivo suministrado con el nuevo lote de dispositivos de prueba.
Hágalo una vez con cada nuevo lote de dispositivos de prueba.
1. En la pantalla principal, seleccione <Ins. nuevoCode Chip>. Pulse Enter.
2. Inserte el CODE CHIP del reactivo en la esquina frontal inferior izquierda del lector
y siga las indicaciones que aparecen en pantalla.
3. Retire el módulo del chip del reactivo del lector cuando haya completado la
transferencia.
Análisis de las muestras de los pacientes
PASO 1 Añadir la muestra del paciente

1. Abra la bolsa y rotule el dispositivo de prueba con el número de identificación
del paciente.
2. Con la pipeta de transferencia, apriete por completo la perilla de mayor tamaño

(superior) e introduzca la punta en la muestra del paciente.
3. Suelte el bulbo lentamente. El cilindro de la pipeta de transferencia deberá

llenarse por completo y parte del líquido deberá entrar en la perilla de menor
tamaño (inferior).
4. Coloque la punta de la pipeta de transferencia en el puerto de muestreo del

dispositivo de prueba y apriete por completo la perilla de mayor tamaño. La
totalidad del contenido líquido del cilindro de la pipeta de transferencia debería
entrar en el puerto de muestreo. No deberá dispensarse la muestra del bulbo
menor (inferior).
5. Retire la punta de la pipeta de transferencia del puerto de muestreo y, a

continuación, suelte la perilla de mayor tamaño (superior).
174
|
6. Deseche la pipeta de transferencia.
PASO 2 Realización de la prueba

1. En la pantalla principal, seleccione <Run Test>(Realizar prueba) y pulse Intro.
2. Seleccione <Muestra del paciente>y pulse Enter.
3. Introduzca el número de identificación del paciente y pulse Enter.
4. Para confirmar que ha introducido el número correctamente, seleccione

<Confirmar ID del paciente>y pulse Enter. Si no ha introducido el número
correctamente, seleccione <Corregir ID del paciente>, pulse Entery repita el
paso anterior.
5. Introduzca el dispositivo de prueba en el lector y pulse Enter. Los resultados se

mostrarán cuando el análisis haya finalizado.
Nota: el dispositivo de prueba debería introducirse en el medidor en un plazo de 30

minutos a partir del momento en el que se añadió la muestra del paciente. Un retraso
de más de 30 minutos podría producir resultados incorrectos y que éstos aparezcan
sombreados en negro en la copia impresa.
PASO 3 Lea los resultados
1. Los resultados pueden imprimirse pulsando el botón Print.
2. Deseche el dispositivo de prueba después de que el lector lo expulse.
3. Un resultado sombreado en negro indica que éste fue incorrecto y que debe
repetirse la prueba.
Resultados
El medidor Triage® mide la muestra del paciente de forma automática. Los
resultados se visualizan en la pantalla. El usuario tiene la opción de imprimir los
resultados.
Para obtener información adicional, consulte el manual del usuario del lector Triage
Meter.
175
|
Estandarización
La prueba de enzimas cardíacas Triage® Cardiac Panel se ha estandarizado
utilizando preparaciones proteínicas purificadas de CK-MB, mioglobina y troponina
I a partir de una concentración de analito presente en plasma anticoagulado con
ácido edético (EDTA).
Control de calidad
Consideraciones sobre el control de calidad
Cada dispositivo de prueba consiste en un kit para la determinación cuantitativa con
dos materiales de control de concentraciones diferentes que se procesan
automáticamente con cada muestra de paciente, solución de controles líquidos
externos o muestra para pruebas de aptitud. Si la comprobación automática de
estos controles incorporados muestra que los resultados de los valores de los
controles están dentro de los límites establecidos durante la fabricación, el lector
ofrecerá un resultado para la muestra que se esté analizando. Si la comprobación
automática de estos controles incorporados muestra que los resultados de los
valores de los controles no están dentro de los límites establecidos durante la
fabricación, no se ofrecerá ningún resultado analítico. En su lugar, el lector mostrará
una advertencia o un mensaje de error que aparece descrito en el manual del
usuario del lector Triage®.
Las prácticas correctas de laboratorio indican que los controles externos deben
analizarse con cada nuevo lote o remesa de material, o cada 30 días, y cuando así
lo requiera el control de calidad estándar de su laboratorio. Los controles deberían
analizarse del mismo modo que las muestras de pacientes. Al analizar muestras de
pacientes o controles externos, si un analito falla por alguna razón (un fallo de un
control incorporado o un control externo fuera del intervalo), no se ofrecerán
resultados de pacientes.
Dispositivo de CC Triage®
Realice la prueba del dispositivo de CC cada día que se analicen muestras de
pacientes para comprobar el funcionamiento del instrumento. La prueba del
176
|
dispositivo de CC también puede realizarse al configurar el lector y siempre que lo

requieran los requisitos de control de calidad del laboratorio.
Analice el dispositivo de CC en los siguientes casos:
• Al instalar inicialmente el lector.
• Cada día que se hagan análisis de pacientes.
• Cuando se haya movido o transportado el lector.
• Cuando haya incertidumbre acerca del funcionamiento del lector.
Nota: Si el dispositivo de CC o los controles externos no funcionan como se
esperaba, revise las instrucciones anteriores para ver si la prueba se realizó
correctamente. Consulte el manual del usuario del lector Triage Meter para obtener
una descripción completa del sistema de control de calidad.
Limitaciones del procedimiento

Los resultados de la prueba no deben utilizarse como prueba absoluta de infarto de
miocardio y deben evaluarse en el contexto de todos los datos clínicos y de
laboratorio disponibles. En los casos en que los resultados del laboratorio no
coincidan con la evaluación clínica, deberán realizarse pruebas adicionales.
Los pacientes con lesiones del músculo esquelético pueden tener concentraciones
elevadas de CK-MB, mioglobina y troponina I. Los pacientes con fallo renal pueden
tener concentraciones elevadas de CK-MB y mioglobina.
Si no se consigue ver u obtener los resultados de la troponina I, la prueba no podrá

utilizarse como ayuda en el diagnóstico del infarto de miocardio (lesión).
Características de rendimiento
Sensibilidad analítica
La sensibilidad analítica o concentración mínima detectable y distinguible de cero
para los tres analitos se determinó analizando un calibrador de valor cero 20 veces
para cada analito, utilizando 3 lotes de reactivos y 5 lectores en 3 días distintos. La
sensibilidad analítica de cada análisis de la prueba de enzimas cardíacas Triage®
Cardiac Panel se indica a continuación:
CK-MB: 1, 0 ng/ml
177
|
Mioglobina: 5 ng/ml
Troponina I: 0,05 ng/ml
Intervalos de medición
CK-MB: 1, 0 - 80 ng/ml
Mioglobina: 5 - 500 ng/ml
Troponina I: 0,05 - 30 ng/ml
Sustancias que interfieren

La hemoglobina (hasta 1.000 mg/dl), los lípidos (colesterol hasta 1.000mg/dl y
triglicéridos hasta 1.000 mg/dl) o la bilirrubina (hasta 20mg/dl) añadidos a plasma
recogido con ácido edético (EDTA) como anticoagulante que contenía los tres
analitos no interfirieron en la recuperación de éstos. Estas sustancias no produjeron
una respuesta positiva en una muestra que no contenía ninguno de los analitos de
interés.
El hematocrito se varió entre un 30 y un 60%, sin ningún efecto significativo sobre
la recuperación de CK-MB, mioglobina o troponina I. No obstante, deben evitarse
en lo posible muestras muy hemolizadas. Cuando una muestra parezca muy
hemolizada, debe obtenerse y analizarse otra muestra.
Reporte De Resultados
Como en el Laboratorio Clínico del Hospital La María está protocolizada la prueba
CK-MB mediante otra técnica, sólo se reportan los resultados obtenidos para la
Troponina I y la Mioglobina.
Cobas b 121 (BEG). GASES ARTERIALES Y ELECTROLITOS
El sistema cobas b 121 (BGE) reúne las condiciones de brindar bajos costos y ser
un instrumento confiable para las determinaciones rápidas de gases en sangre y
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|
electrolitos. El sistema cobas b 121 (BGE) sostiene a laboratorios clínicos que

enfrentan el desafío de la presión del incremento de sus costos para el cuidado de
la salud de sus pacientes. Altos niveles de automatización y bajos niveles de
mantenimiento significan muy poca intervención del operador. Esta combinación
con su modo económico, su mantenimiento libre alarga la vida de sus sensores y
sus botellones de desechos reusables ayudan a disminuir los costos del laboratorio.
Sistema confiable y efectivo en costos. Durante el desarrollo del instrumento Roche
se focalizó en reducir la complejidad y los costos para proveer así una solución
Premium para los laboratorios clínicos. Esto se logró utilizando la plataforma, ya
existente y ampliamente probada, cobas b 121 que simplifica y reduce las
determinaciones de los analitos necesarios para gases en sangre y desórdenes del
equilibrio ácido-base.
El sistema cobas b121 (BGE) entrega resultados de alta calidad en 50 segundos

incluyendo gases en sangre (pH, PCO2, PO2), electrolitos (Na+, K+, Ca++, Cl-) y
hematocrito (Hct), de estos parámetros son calculadas otras mediciones en forma
adicional como por ejemplo Base Excess (BE).
Gases Arteriales
Toma Y Manipulacion De La Muestra
La fase preanalítica es la que más contribuye a la inexactitud en la medición de los
gases sanguíneos. Para minimizar estos errores sería conveniente seguir las
siguientes recomendaciones:
1. Dispositivos para la toma de la muestra:

Los recipientes de referencia son las jeringas de vidrio o plástico. Las
determinaciones de los gases sanguíneos se deben realizar en sangre completa,
por lo que para impedir que la sangre extraída se coagule en la jeringa se utilizan
anticoagulantes para inactivar los mecanismos que ponen en marcha la
coagulación. La heparina de litio es el anticoagulante de elección, pero hay que
tener en cuenta que un exceso de heparina afecta a la determinación del pH, pCO2,
pO2 y a la hemoglobina.
179
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2. Preparación de la muestra tras la obtención:

Hay que evitar la formación de burbujas de aire en la jeringa. Las burbujas que se
mezclan con una muestra de sangre dará lugar a una equilibración de gases entre
el aire y la sangre, reduciéndose de forma importante la pCO2 de la muestra,
aumentando el pH, por lo que tras la extracción es conveniente expulsar las
burbujas. Seguidamente se cierra con un tapón y se agita para disolver la heparina,
evitando así la formación de coágulos.
6. ALMACENAMIENTO Y TRANSPORTE
Las muestras deberían analizarse lo antes posible, ya que la sangre consume
oxígeno y libera
CO2 a una velocidad que depende de la temperatura corporal. Por ello, si se ha de
almacenar una muestra más de 10 minutos, deberá enfriarse entre 0 ºC y 4 ºC no
más de 30 minutos para minimizar los efectos del metabolismo.
Actuación previa a la etapa analítica:

Una vez que la muestra llega al laboratorio, debe colocarse en agua helada e
identificarse. A continuación, se procede a su inspección para descartar la
existencia de coágulos o burbujas de aire, en cuyo caso debe ser rechazada. La
muestra debe ser homogénea, para ello es necesario mezclarla bien.
Las primeras gotas de sangre del cono de la jeringa suelen estar coaguladas, por lo
que deben rechazarse.
TIPO DE MUESTRAS
Cuando se accede a un vaso para obtener una muestra donde determinar los gases
en sangre, hay que tener presente que pueden ocurrir tres tipos de complicaciones:
obstrucción vascular, hemorragia con formación de hematomas e infección.
Las muestras sanguíneas pueden obtenerse por los siguientes procedimientos:
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|
3. Muestras de sangre capilar.

Es especialmente útil en cuidados intensivos de neonatos y pediatría, debiéndose
emplear con precaución por el riesgo de cometer errores muy graves.
181
|
4. Muestras de sangre venosa.

Para el análisis de gases en sangre no se recomienda las muestras de sangre
venosa priférica ya que no proporcionan ninguna información sobre el estado de
oxigenación y sólo a groso modo reflejan el estado ácido-base arterial. La
distribución del volumen minuto cardiaco total a los diversos sistemas orgánicos
depende de la resistencia arteriolar local y del tono vasomotor de los lechos
capilares respectivos. El sistema cardiovascular intenta mantener un flujo
sanguíneo adecuado hacia los sistemas orgánicos ajustando las resistencias
periféricas, es por ello que los diferentes órganos no reciben una irrigación
proporcional a sus demandas metabólicas, lo que se traduce en una variación de
los valores de oxígeno según el sistema orgánico del que proviene la sangre
venosa.
PRINCIPALES PARAMETROS IMPLICADOS EN EL EQUILIBRIO ACIDOBASE.

VALORES DE REFERENCIA.
1. pH: es un parámetro indicador de la acidez o alcalinidad de una muestra de

sangre.
Por su relación con la pCO2, el pH se considera que tiene un componente
respiratorio, y por su relación con la concentración de bicarbonato plasmático y el
exceso de baseestándar se considera que tiene un componente metabólico,
pudiendo así distinguirse entre desequilibrios respiratorios y metabólicos.
Rango de referencia del pH en el adulto: 7.35-7.45.
2. pCO2: es la presión parcial de dióxido de carbono en la fase gaseosa en equilibrio

con la sangre. El dióxido de carbono difunde rápidamente a través de las
membranas celulares y puede considerarse igual a cero en el aire inspirado normal.
Por tanto su determinación es una medida directa de la idoneidad de la ventilación
alveolar en relación con el índice metabólico. Los valores altos y bajos de pCO2 en
sangre arterial indican hipercapnia e hipocapnia respectivamente.
182
|
Rango de referencia de pCO2 en adultos: varones: 35-48 mmHg; mujeres: 32-45

mmHg.
3. pO2: Es la presión parcial de extracción del oxígeno de la sangre arterial. Este
parámetro refleja los cambios producidos en la pO2 arterial, la concentración de
oxígeno y la afinidad de la hemoglobina por el oxígeno sobre la capacidad de la
sangre arterial para suministrar oxigeno a los tejidos.
Rango de referencia de pO2 en el adulto: 83-108 mmHg.
4. HCO3-real: Es la concentración de bicarbonato en el plasma de la muestra. Se

calcula utilizando los valores de pH y pCO2 en la ecuación de Henderson-
Hasselbalch.
Encontramos valores elevados en la alcalosis metabólica y como mecanismo de
compensación en la acidosis respiratoria. Los niveles bajos se detectan en la
acidosis metabólica y como mecanismo compensatorio en la alcalosis respiratoria.
Rango de referencia en el adulto de la HCO3-real: 22-26 mmol/L.
5. HCO3-estándar: es la concentración de carbonato de hidrógeno en el plasma de

sangre equilibrada con una mezcla de gases con una pCO2 de 40 mmHg y una pO2
mayor o igual a 100 mmHg. Un bicarbonato estandar bajo indicaría una una acidosis
metabólica y si por el contrario fuera alto, sería indicativo de una alcalosis
metabólica.
Rango de referencia en el adulto del HCO3 estándar: 22-26 mmol/L

 6. CTCO2: es la suma de las concentraciones de cada una de las formas en las que
se puede encontrar el dióxido de carbono.

7. Exceso/deficit de base: Es la concentración de base en sangre total valorable
con un ácido o una base fuerte hasta un pH de 7.4 a una pCO2 de 40 y a 37ºC. El
valor numérico del exceso (o déficit) de base representa la cantidad teórica de ácido
o base que habría que administrar para corregir una desviación de pH.
183
|
Rango de referencia: +2 / -2 mEq/L

8. SO2: es la saturación de oxígeno. Hace referencia al porcentaje de la
hemoglobina oxigenada en relación con la cantidad de hemoglobina capaz de
transportar oxígeno.
Rango de referencia de SO2 en el adulto: 95-99%.
9. FiO2: es la concentración de oxígeno inspirado fraccional. Representa la

concentración calculable de oxígeno que se administra al paciente. Se utiliza para
adecuar la oxigenoterapia en función de la clínica y del análisis de los gases
sanguíneos.
Electrolitos
Se define como electrolito a toda sustancia con iones libres, capaz de transportar
la corriente eléctrica y que se encuentra en forma de sólido fundido o presente en
una disolución.
184
|
En el cuerpo humano, los electrolitos se encuentran disueltos en el plasma y sus

variaciones provocan movimiento de agua entre los compartimientos donde se
encuentran, concentrándose de manera diferente y manteniendo un equilibrio de los
fluidos en las células.
Cabe mencionar que los más importantes son aquellos con carga positiva como el:
sodio (Na+), potasio (K+), calcio (Ca++) y magnesio (Mg++); y los iones con carga
negativa como el:
Cloro (Cl-), bicarbonato (HCO3-) y fosfato (HPO4-).
El de mayor concentración en el líquido extracelular es el Na++, mientras que el K+

es el electrolito de mayor concentración del líquido intracelular, junto con el Mg+.
De igual manera, se pueden identificar a la dextrosa, creatinina y urea que son
consideradas no electrolitos debido a que no pueden disociarse, formando iones,
como lo hacen las sustancias antes mencionadas.
De esta manera, cada compartimiento líquido tendrá su propia composición
electrolítica, que se encuentra medida en miliequivalentes (mEq) que indican el
número de cargas iónicas o uniones electrovalentes en la solución ionizada.
POTASIO
El potasio es uno de los principales iones del organismo alcanzando una
concentración de cerca a 3500 mEq y a diferencia del sodio, se localiza (98%),
mientras que su concentración plasmática alcanza a los 5 mEq/l.
La eliminación del K+por vía fecal es de 5 a 10 mEq/d, y por sudor se pierde al
menos 10 mEq/d.
La principal función del potasio es la generación del potencial de reposo de la
membrana celular, siendo particularmente importante en el proceso de excitabilidad
del tejido nervioso, corazón y músculos (liso y esquelético), encontrándose en estos
últimos, así como en el hígado el mayor reservorio de este elemento.
CLORO
185
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Es el principal anión del líquido extracelular y se encuentra casi siempre unido al

sodio en forma de cloruro de sodio (ClNa), lo que favorece al mantenimiento de la
presión osmótica de la sangre.
El cloro se excreta en pequeñas cantidades a partir de la transpiración insensible y
al igual que el Na+ se elimina en grandes cantidades en caso de sudoración profusa.
Este anión tiene poca reabsorción renal, misma que se encuentra determinada por
la reabsorción de sodio (Na+), controlada por la acción de la aldosterona. De esta
forma por cada cloruro de sodio reabsorbido, se reabsorbe una molécula de
bicarbonato, participando de esta forma en la neutralización de pH sanguíneo y el
mantenimiento del equilibrio ácido base.
El cloro regula también la producción de ácido clorhídrico en el estómago e

interviene en la contractilidad muscular, además de favorecer el transporte del
dióxido de carbono por los hematíes.
CALCIO IONIZADO
Este electrolito requiere una ingesta diaria de 500 a 1000 mg de calcio elemental,
eliminándose 100 a 200 mg por riñones, y 400 a 800mg/d por heces.El calcio (Ca++)
es un ion importante para la formación del hueso, interviniendo de manera activa
en la coagulación sanguínea, reabsorción de la vitamina B12, transmisión sináptica
y excitabilidad de las membranas. Sus valores plasmáticos dependen de la
contracción muscular y se mantienen constantes, aun a expensas de extraer
Ca++de los huesos.
1. Marcadores Tumorales
El VEDALAB EASY READER

Es un medidor para la lectura de tarjetas de pruebas rápidas inmunocromatográficas
usando una cámara-CCD de alta resolución un software integrado creado para el
análisis de imágenes.
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El EASY READER tiene un chip extraíble que contiene todo el software necesario
para la obtención de los resultados cuantitativos o semi - cuantitativos de las líneas
de prueba los valores de absorbancia. Dependiendo del parámetro probado, los
resultados pueden ser obtenidos a partir de muestras de sangre total, plasma, suero
u orina.
El medidor también tiene una impresora incorporada para mantener archivos de
toda la información relativa a cada paciente (nombre, fecha de nacimiento y
resultados) y para el usuario después de haber realizado el análisis.
Principio de la reacción
Si está presente en la muestra, el analito reacciona con el conjugado de color y fluye
para ser capturado por los reactivos de la cubierta de la membrana. La intensidad
de la banda de color que aparece en la zona de prueba es directamente proporcional
a la concentración del analito.
Principio del lector

El VEDALAB EASY READER se basa en tecnología de inmunocromatografía
cuantitativa mediante la medición de la intensidad de la reacción en un casete de
prueba.
187
|
La cámara CCD de Easy reader puede medir la intensidad del color y determinar
la concentración de analitos en una muestra.
1. Coloque el instrumento en condiciones ambientales no corrosivas, en una
superficie plana y uniforme que está libre de polvo, el agua (o cualquier líquido)
y vibraciones fuertes .
2. Primero conecte el teclado para el lector
3. Conecte el lector a una fuente de alimentación
4. Pulse el interruptor en la parte posterior del lector para empezar a usarlo.
5. Pulse el botón " Inicio"
6. Seleccione el parámetro
7. Los datos de entrada del paciente necesarios para identificar la muestra a través
del teclado
8. Realizar el procedimiento de ensayo como se indica en las descripciones de las
pruebas a continuación.
9. Seleccione el modo " inmediato " o " cuenta atrás "
10. Inserte la tarjeta de prueba en el medidor
GONADOTROPINA CORIONICA HUMANA (hCG)

La gonadotropina coriónica humana (hCG) es una hormona glicoproteica
producida en el embarazo, fabricada por el embrión en desarrollo poco después de
la concepción y más tarde por el sinciciotrofoblasto (parte de la placenta). Su función
es evitar la desintegración del cuerpo lúteo del ovario y, por ende, mantener la
producción de progesterona que es fundamental para el embarazo en los seres
humanos. La hCG puede tener funciones adicionales; por ejemplo, se cree que
afecta a la tolerancia inmunológica del embarazo. Las primeras pruebas de
embarazo, en general, se basan en la detección o medición de hCG. Debido a que
la hCG es producida también por algunos tipos de tumores, es un importante
marcador tumoral, pero no se sabe si esta producción es una causa o un efecto de
la tumorigénesis.
188
|
HCG CHECK-1 es una prueba cuantitativa rápida para la detección de la HCG en

el suero, el plasma o la orina El método, patentado, se basa en la combinación única
de anticuerpos monoclonales marcados con oro coloidal y de anticuerpos
policlonales en la fase sólida para identificar la HCG en las muestras con gran
especificidad. Según la concentración en HCG, varias líneas aparecen en la zona
de lectura, permitiendo la medida cuantitativa del nivel de HCG en las muestras de
suero, plasma u orina, si la prueba se realiza con el lector rápido EASY READER®.
III. CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
1. Todos los componentes del kit deben conservarse a temperatura ambiente (entre
+4°C y +30°C) en sus empaques originales.
2. No congele el kit.
3. La prueba es estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del
empaque.
IV- PRECAUCIONES
1- Esta prueba es concebida sólo para uso diagnóstico in vitro y un uso
profesional.
2- Léase atentamente estas instrucciones antes de usar la prueba.
3- No use la prueba después de la fecha de caducidad indicada en el empaque.
4- No use una prueba si su bolsa de protección está deteriorada.
TOMA Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS

a) Suero o plasma
1. Las muestras deben tomarse en condiciones de toma estándares (de manera
aséptica para procurar evitar cualquier hemólisis).
2. No es necesario centrifugar o una filtrar de suero.
3. Si la prueba se realiza dentro de 48 horas después de la toma, la muestra
debe conservarse en el frigorífico (entre +2°C y +8°C). 4. Si la prueba se realiza
a más de 48 horas después de la toma, la muestra debe congelarse.
Antes de la prueba, la muestra debe ser totalmente descongelada,
cuidadosamente mezclada y equilibrada a temperatura ambiente. Evite
descongelar y recongelar las muestras. 5. En caso de turbidez, de viscosidad
189
|
alta o de presencia de partículas en la muestra de suero, hay que diluir con un

volumen igual (V/V) de solución fisiológica antes de realizar la prueba.
b) Orina 1. Para la detección óptima de un embarazo precoz, es preferible usar
una muestra de la primera orina de la mañana, porque contiene la concentración
más alta de HCG. Sin embargo, se pueden usar muestras de orina tomadas en
cualquier momento del día. 2. Tome la muestra de orina en un recipiente limpio,
seco y sin conservantes 3. Si la prueba no se realiza inmediatamente, la muestra
debe conservarse en el frigorífico (entre +2°C y +8°C) o a una temperatura
inferior a +25°C durante 24 horas máximo. En este c aso, equilibre la muestra a
temperatura ambiente antes de realizar la prueba. 4. Si la prueba se realiza más
de 48 horas después de la toma, la muestra debe congelarse. Antes de la
prueba, la muestra debe ser totalmente descongelada y equilibrada a
temperatura ambiente. Evite descongelar y recongelar las muestras.
PROCEDIMIENTO DE PRUEBA
1. Asegúrese de que todas las muestras y todos los casetes de reactivo estén a
temperatura ambiente antes de empezar la prueba.
2. Saque el casete de reactivo de su bolsa de protección rasgando a lo largo de
las muescas.
3. Indique en la prueba el nombre del paciente o un número de identificación.
4. Llene la pipeta con la muestra (plasma, suero u orina) y manténgala
verticalmente. Deposite exactamente 4 gotas (150 µL, sin burbuja de aire) de
plasma, suero u orina en el pocillo de muestra.
5. Lea el resultado (en mUI/mL) después de 15 minutos, en lectura inmediata o
diferida.
VII- RENDIMIENTO
El intervalo de medida es de 5 hasta 500,000 UI/L
190
|
LÍMITACIONES DE LA PRUEBA
1. La orina de los hombres sanos y de las mujeres no embarazadas muestra
normalmente concentraciones indetectables de HCG con la prueba.
2. A pesar de la variabilidad de las concentraciones de HCG en las mujeres sanas
al principio del embarazo, la prueba puede generalmente confirmar un embarazo
desde el primer día de amenorrea.
3. La HCG fue encontrada no sólo durante el embarazo, sino también en pacientes
sufriendo de una enfermedad trofoblástica gravídica y no gravídica. Como la HCG
de los tumores trofoblásticos es la misma que la observada durante el embarazo,
estas afecciones, como el coriocarcinoma y la mola hydatidiforma, deben
descartarse antes de realizar el diagnóstico de embarazo.
4. Un embarazo normal no se puede distinguir de un embarazo ectópico sólo
basándose en la concentración de HCG. De la misma manera, un aborto
espontáneo puede afectar la interpretación de los resultados de la prueba.
5. Un embarazo muy precoz, con una concentración extremamente baja de HCG,
puede resultar en un resultado negativo. En este caso, otra muestra debe tomarse
y analizarse al menos 48 horas más tarde.
6. Las concentraciones de HCG pueden detectarse durante varias semanas
después de un parto normal, un parto por cesárea, un aborto terapéutico.
7. Ciertas muestras de suero conteniendo altas concentraciones de factor
reumatoide (RF), de anticuerpos heterofilos o de Forssman pueden resultar en
191
|
resultados positivos no específicos. Estas pacientes deben ser identificadas antes

de la prueba.
8. Como para cualquier procedimiento diagnóstico, el médico debe evaluar los datos
obtenidos con esta prueba simultáneamente con otros datos clínicos.
9. La presencia de hidroxietilcelulosa en la composición del lubricante de las sondas
urinarias puede resultar en un resultado falso-positivo con la prueba en una
concentración superior o igual a 0.1 %.
10. Este tipo de prueba sólo debe usarse con el lector de pruebas rápidas EASY
READER® de VEDALAB.
11. Si el tiempo de lectura (15 minutos) no es rigurosamente respetado, los
resultados obtenidos son falseados.
12. Este tipo de prueba no debe usarse para una lectura visual.
13. Como es el caso para cualquier método de diagnóstico o para cualquier sistema
automático, existe una variabilidad de los resultados obtenidos. Por consiguiente,
hay que tomar en cuenta un intervalo de confianza de +/-25% para el valor obtenido
y para la interpretación clínica del resultado.
Antígeno de Cáncer CA-125
El antígeno de cáncer CA 125 es un antígeno de superficie asociado con el cáncer
de epitelio ovárico. En suero, el CA-125 circula asociado con una glicoproteína de
gran peso molecular. Estudios publicados han in dicado que niveles séricos
elevados de CA-125 pueden ser detectados en individuos con carcinoma
indiferenciado de ovario, endometrio y células claras. Las concentraciónes séricas
de CA-125 son superiores a 35 IU/mL en el 60% de las mujeres con cáncer de
ovario. Por lo tanto gran parte de los estudios recomiendan este valor como nivel de
decisión. El CA 125 sérico se encuentra elevado en el 1% de la mujeres sanas, 3%
de las mujeres sanas con alteraciones benignas de ovario, 6% de pacientes con
condiciones no neoplásicas (incluído pero no limitado al primer trimestre de la
gestación, endometriosis, menstruación, fibrosis uterina, salpingitis aguda,
enfermedad hepática e inflamación peritoneal, de pericardio o pleura).
Determinaciones seriadas de CA 125 en suero, así como una evaluación pélvica
incrementa la especificidad del test. Las concentraciones séricas de CA 125 pueden
192
|
ser útiles en el monitoreo del tratamiento y el pronóstico a la respuesta al mismo y

la progresión de la enfermedad. CA 125 es un marcador tumoral sérico para el
monitoreo de la respuesta a la quimioterapia, detectando la recurrencia y es útil para
distinguir las masas pélvicas malignas de las benignas. Una caída rápida de valores
séricos de CA 125 durante la quimioterapia predice un pronóstico favorable.
Hasta la fecha, CA 125 es el marcador más sensible para el cáncer de epitelio
ovárico residual. CA 125 también puede estar elevado en pacientes con cáncer de
pulmón, cérvix, trompas de Falopio, útero y endometriosis.
El CA-125 –CHECK-1 es un ensayo cuantitativo rápido para la detección de
antígeno de cáncer de ovario en suero, plasma o sangre total para ser usado como
prueba de detección- el método emplea una única combinación de conjugado
monoclonal marcado con anticuerpos policlonales de fase sólida para identificar CA
125 con un alto grado de especificidad.
Cuando la muestra fluye a través del dispositivo absorbente el conjugado de
anticuerpos marcado se une con el CA 125 contenido en la muestra. Este complejo
migra en la membrana y es ligado por los anticuerpos policlonales anti CA 125
atrapados en la fase sólida en la zona de reacción (T). la intensidad del color de la
banda del test es proporcional a la concentración de CA 125 en la muestra. la
mezcla sigue fluyendo a través del dispositivo absorbente pasando la zona reactiva
(T), la zona de control (C). El conjugado no ligado se une a los reactivos en la zona
control (C), produciendo una banda de color rosa demostrando que los reactivos
funcionan correctamente.

empaque.
IV- PRECAUCIONES
193
|
 Esta prueba es concebida sólo para uso diagnóstico in vitro y un uso

profesional.
 Léase atentamente estas instrucciones antes de usar la prueba.
 No use la prueba después de la fecha de caducidad indicada en el empaque.
 No use una prueba si su bolsa de protección está deteriorada.

aséptica para evitar cualquier hemólisis).
las muescas.
4. Llene la pipeta con la muestra (plasma, suero o sangre total) y manténgala
verticalmente. Deposite exactamente 1 gota (25 µL, sin burbuja de aire) de
plasma o suero o 2 gotas (50 µL) de sangre total en el pocillo de muestra y
espere a que la muestra sea totalmente absorbida antes de adicionar el diluente.
5. agregue exactamente 4 gotas de diluente en el pocillo de muestra
194
|
6. lea los resultados (en U/mL) pasados 15 minutos usando el modo de lectura
inmediato o en conteo regresivo.
CARACTERISTICAS ANALÍTICAS
Linealidad
El rango de medida es 15-750 U/ml
Para muestras cuya concentración es superior a 750 U/ml, diluir con solución salina
y repetir el ensayo. Multiplicar el resultado por el factor de dilución.
Sensibilidad
El CA-125-CHECK-1 detecta niveles cercanos a los 10U/ml, caso en el cual los
resultados se reportan como < 15 U/ml. Niveles superiores a 35 U/ml son
considerados anormales.
LIMITACIONES DEL TEST

1. Como en cualquier procedimiento diagnóstico, el médico debe confirmar los
resultados obtenidos con este test, empleando otros métodos diagnósticos.
2. Para el caso de muestras de sangre total utilice sólo muestras recién
obtenidas (<4 horas). Si la muestra procede de punción dactilar debe ser
procesada inmediatamente.
3. En caso de concentraciones altas de factor reumatoide (RF) o proteína C
Reactiva (PCR), el test puede presentar un falso positivo.
4. El test está diseñado para eliminar la inteferencia potencial de anticuerpos
humanos contra IgG murina (HAMA). Sin embargo niveles elevados de
HAMA pueden inducir falsos positivos.
5. El test sólo puede ser usado empleando el VEDALAB EASY READER.
6. Si el test no es leído en exactamente 15 minutos los resultados pueden ser
erróneos.
ALFA FETO PROTEÍNA.

La alfa fetoproteína (AFP) es una glicoproteína de cadena simple con un peso
molecular aproximado de 70.000 kDa. Es producida por el saco vitelino fetal y
195
|
estructuras proximales del hígado y tracto gastrointestinal. En el feto humano, AFP

es la principal proteína que alcanza altos niveles séricos alrededor de la semana 12
de gestación y luego desciende a niveles indetectables en el adulto sano no
gestante.
AFP como marcador tumoral no fue inmediatamente apreciado porque el ensayo
usado para la cuantificación no era lo suficientemente sensible para detectar las
concentraciones en nanogramos asociadas con enfermedad temprana. Cuando un
radioinmunoensayo más sensible estuvo disponible, la utilidad de AFP como
marcador tumoral fue en aumento.
Aumentos marcados se encuentran en tumores malignos en l infancia, tales como
hepatoblastomas y nefroblastomas y en carcinoma hepatocelular y ciertos tumores
testiculares en adultos. Menos comúnmente, tumores malignos de tracto
gastrointestinal y otros órganos con metástasis masiva en hígado son asociados
con concentraciones aumentadas de AFP en suero.
La AFP-CHECK -1 es un ensayo cuantitativo rápido para la detección de AFP
humana en suero, plasma o sangre total. El método emplea un conjugado
monoclonal coloreado y una fase solida con anticuerpos policlonales para identificar
AFP en muestras con alto grado de especificidad.
Cuando la muestra fluye a través del dispositivo absorbente el conjugado de
anticuerpos marcado se une con la AFP contenido en la muestra. Este complejo
migra en la membrana y es ligado por los anticuerpos policlonales anti AFP
atrapados en la fase sólida en la zona de reacción (T). La intensidad del color de la
banda del test es proporcional a la concentración de AFP en la muestra. La mezcla
sigue fluyendo a través del dispositivo absorbente pasando la zona reactiva (T), la
zona de control (C). El conjugado no ligado se une a los reactivos en la zona control
(C), produciendo una banda de color rosa demostrando que los reactivos funcionan
correctamente.

196
|
empaque.
IV- PRECAUCIONES
profesional.
 No use la prueba después de la fecha de caducidad indicada en el empaque.


las muescas.
197
|

6. lea los resultados (en ng/mL) pasados 10 minutos usando el modo de lectura
Linealidad
El rango de medida es 10-300 ng/ml
Para muestras cuya concentración es superior a 300 ng/ml, diluir con solución salina
Sensibilidad
El AFP-CHECK-1 detecta niveles cercanos a los 5U/ml, caso en el cual los
resultados se reportan como < 15 U/ml. Niveles superiores a 30 ng/ml en menores
de 1 año y de 40 ng/ml en adultos son considerados anormales.

 Como en cualquier procedimiento diagnóstico, el médico debe confirmar los
resultados obtenidos con este test, empleando otros métodos diagnósticos.
 Para el caso de muestras de sangre total utilice sólo muestras recién
obtenidas (<4 horas). Si la muestra procede de punción dactilar debe ser
procesada inmediatamente.
 En caso de concentraciones altas de factor reumatoide (RF) o proteína C
 El test está diseñado para eliminar la inteferencia potencial de anticuerpos
humanos contra IgG murina (HAMA). Sin embargo niveles elevados de
HAMA pueden inducir falsos positivos.
198
|
 El test sólo puede ser usado empleando el VEDALAB EASY READER.

 Si el test no es leído en exactamente 10 minutos los resultados pueden ser
erróneos.
ANTÍGENO CARCINOEMBRIONARIO CEA

El antígeno Carcinoembrionario al igual que la AFP es producido durante el
desarrollo fetal. Después del nacimiento, la producción de CEA se detiene y remite
a valores indetectables en adultos sanos normales. Sin embargo antígenos onco-
fetales pueden aparecer debido a la des- represión de genes que son normalmente
expresados solo durante los primeros años de vida. Como antígenos secretados
CEA y AFP no contribuyen significativamente en la inmunidad contra tumores, el
papel de estos antígenos, llamados neoantígenos, en la inmunovigilancia es
cuestionable. Los niveles normales de CEA niveles en las personas normales no
fumadoras oscilan hasta 2,5 y 5,0 para el grupo de los fumadores pero se elevan
por encima de 10 ng/ml normalmente en variedad de cáncer: pulmón, mama, colo-
rectal. El seguimiento de estos pacientes es el principal uso de estos neoantígenos
tumorales. La presencia de CEA en la circulación ha sido explotada estos
diagnósticos y esquemas terapéuticos. La medición de CEA no indica
necesariamente desarrollo de cáncer ya que los niveles de este antígeno también
puede aumentar en algunas condiciones no malignas, como en cirrosis crónica,
enfisema pulmonar o tabaquismo crónico. Cuando se contempla un procedimiento
curativo (cirugía), los niveles prequirúrgicos de CEA pueden hacer pronóstico
significativo. Altos niveles de CEA en vesicula biliar pueden indicar la presencia de
metástasis hepática en pacientes que fueron sometidos a cirugía curativa de
carcinoma colorrectal. Además, se ha hallado que niveles séricos de CEA son un
valioso indicador pronóstico de cáncer de mama avanzado.
CEA-CHECK-1 es un test cuantitativo rápido para la medición de CEA en suero,

plasma o sangre total. El método se basa en la unión entre anticuerpos monoclonal
anti-CEA fijados en el conjugado coloreado y el CEA presente en la muestra.
199
|
Cuando el CEA esta preente en la muetra, el complejo antígeno- conjugado e une

a los anticuerpos monoclonales que recubren la membrana del test. Una muestra
que contiene niveles elevados de CEA induce la formación de una banda coloreada
de rosa en la región del test (T) mientras que una muestra negativa solo producirá
la formación de la banda de control (C), que indica el correcto funcionamiento de la
prueba.

empaque.
IV- PRECAUCIONES
profesional.
 No use la prueba después de la fecha de caducidad indicada en el
empaque.

200
|

las muescas.
6. lea los resultados (en U/mL) pasados 15 minutos usando el modo de lectura
Linealidad
El rango de medida es 5-250 ng/ml
Para muestras cuya concentración es superior a 250 ng/ml, diluir con solución salina
Sensibilidad
El CEA-CHECK-1 detecta niveles cercanos a los 2 ng/ml, caso en el cual los
resultados se reportan como < 5 ng/ml. Niveles superiores a 5 ng/ml son
considerados anormales.
201
|
1. Si bien el aumento en los niveles de CEA generalmente ocurre en ciertas

malignidades, estos también pueden aparecer en algunas condiciones no
malignas como la cirrosis crónica, el enfisema pulmonar y fumar en exceso.
2. Los resultados de CEA no deben ser interpretados como evidencia absoluta de
la presencia o ausencia de enfermedad malina pero puede ser usada en
conjunto con información procedente de otros procedimientos diagnósticos y
la evaluación clínica del paciente. CEA no es una prueba de detección de
cáncer oculto pero si una prueba de monitoreo para pacientes con varios tipos
de malignidades o para evaluar la respuesta a la terapia y como potencial
indicador de la recurrencia y pronóstico.
3. Niveles inferiores a 5 ng/ml pueden ser obtenidos en muestras de pacientes
con carcinoma temprano.
4. Se pueden obtener resultados positivos en pacientes con tratamientos
antineoplásicos (la hepatotoxicidad producida por estos medicamentos puede
causar el incremento de niveles séricos de CEA). La radioterapia también
puede causar incrementos transitorios de CEA.
5. En caso de concentraciones altas de factor reumatoide (RF) o proteína C
6. El test está diseñado para eliminar la inteferencia potencial de anticuerpos
humanos contra IgG murina (HAMA). Sin embargo niveles elevados de HAMA
pueden inducir falsos positivos.
7. El test sólo puede ser usado empleando el VEDALAB EASY READER.
8. Si el test no es leído en exactamente 15 minutos los resultados pueden ser
erróneos.
INMUNOGLOBULINA E TOTAL
La IgE es una inmunoglobulina normalmente encontrada en niveles mínimos

(nanogramos) en individuos sanos.
En pacientes alérgicos la IgE está presente tanto en el suero como fuertemente
unido a la superficie de los basófilos y mastocitos. La detección del nivel de IgE total
202
|
es de uso diagnóstico en caso de asma (para diferenciar alérgica de asma no

alérgica), rinitis y eczema.
Otras enfermedades en las que se encuentran niveles elevados de IgE en suero
incluyen infecciones parasitarias, aspergilosis broncopulmonar y algunas dermatitis.
La IgE -CHECK - 1 es un ensayo cuantitativo rápido para la detección de IgE en

muestras de sangre total, plasma o suero. El método emplea una combinación única
de conjugado monoclonal coloreado y anticuerpos policlonales en fase sólida para
identificar IgE en las muestras de ensayo con un alto grado de sensibilidad.
Como la muestra de prueba fluye a través del dispositivo absorbente, el conjugado

anticuerpo - colorante se une al anticuerpo anti IgE formando un complejo antígeno-
anticuerpo. Este complejo se une al anticuerpo anti IgE en la zona de reacción (T)
y produce una banda de color rosa. En ausencia de IgE, la mezcla continúa fluyendo
a través del dispositivo absorbente por la zona control y la zona reactiva. El
conjugado no unido se une a los reactivos en la zona de control (C), la producción
de una banda de color rosa, lo que demuestra que el reactivo está funcionando
correctamente.
203
|
7. ANEXOS
204
|
205
|
8. REFERENCIAS
http://med.javeriana.edu.co/fisiologia/nguias/other/renalallNS.pdf
Ministerio de Salud, República de Chile, Instituto Nacional de Salud. Documentos
Técnicos para el Laboratorio Clínico: Recomendaciones para el análisis de Líquidos
biológicos Abril 01 de 2016. Santiago de Chile. [Internet] Disponible en:
http://www.ispch.cl/sites/default/files/Recomendaciones%20para%20el%20Analisis
%20Liquidos%20Biologicos.pdf Consultado: julio 01 de 2016
Ruíz, M. Ortíz, C. Sánchez, J. Peña, A. Transtornos del Equilibrio Acido base.
Málaga, España. [Internet] Disponible en:
http://www.medynet.com/usuarios/jraguilar/Manual%20de%20urgencias%20y%20
Emergencias/acidbase.pdf Consultado: julio 01 de 2016
206
|
Bustamante C. Gladys, Cuba Pardo Grover. Electrolitos. Rev. Act. Clin. Med [revista
en la Internet]. [citado 2016 Ago 07]. Disponible en:
http://www.revistasbolivianas.org.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2304-
37682013001200001&lng=es. Consultado: 15 Junio de 2016
Elaborado por Cargo Fecha
Revisado por Cargo Fecha
Aprobado por Cargo Firma Fecha
207
|
9. Historial de versiones
Versión Fecha del Cambio Descripción
208

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Área de Laboratorio Clínico

5. DETERMINACIONES DE QUIMICA SANGUINEA ______________________ 16

Proteínas totales _________________________________________________________ 162

6. ALMACENAMIENTO Y TRANSPORTE ______________________________ 180

Aplica al personal de laboratorio encargado de la toma y procesamiento de muestras

El analizador cobas c 311 es un analizador automático controlado por software para

 Analizador completamente automatizado de acceso

Rendimiento de pruebas  Hasta 300 pruebas por hora por técnica de

Concepto de reactivos  Reactivos cobas c con códigos de barras y listos

 Capacidad de reactivos a Hasta 45 ensayos (42 posiciones para cartucho frio

Parámetros programables Hasta 117 fotométricos, 3 pruebas ISE, 8

Tipos de muestra  Suero, plasma, orina, LCR y sangre total

Capacidad de muestras a 108 posiciones con acceso continuo y capacidad de

Tipos de contenedores de Tubos primarios: 5-10 mL

 Micro copa: 1.5 mL

Volumen de la muestra  1.0 a 35 µL en pasos de 0.1 µL

Detección de coágulos en Si

Base de datos de la 10.000 muestras de rutina/STAT

Métodos de prueba  1 punto + verificación de prozona, 2 puntos, cinética

Métodos de calibración  Lineal, no lineal de puntos múltiples, calibración de

Métodos de control de Tiempo real, control individual y acumulativo, auto

 Nueva corrida/repetición/ Nueva corrida automática/ nueva corrida manual,

Exactitud/Precisión de los resultados medidos

Un resultado incorrecto puede ser motivo de un error de diagnóstico, representando

Áreas y componentes del analizador

Tele Service-Net (TSN) TeleService-Net es la infraestructura técnica que ofrece a

Estación de datos cobas link La estación de datos cobas link es un ordenador de

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Al finalizar la operación diaria, los resultados de medición del CC se deben

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La presencia de la enzima alanina aminotransferasa (ALT) se registra en tejidos de