Analisis Quimico
Analisis Quimico
Analisis Quimico
CURSO DE ACTUALIZACIÓN
ANÁLISIS DE ORINA
an os
i
be or
t
MÓDULO 3
rib ra
EXAMEN QUÍMICO
Ca bo
La
an os
“ El presente manual es una recopilación de las consideraciones y
técnicas usadas en el Análisis de una muestra de Orina, sirviendo
de herramienta para una capacitación práctica del Profesional de
i
Laboratorio Clínico.”
be or
t Blgo Martín Chumpén Zamora
rib ra
Ca bo
La
Indice
1.- Examen químico .............................................. 4
an os
2.- La tira reactiva de orina .......................................................... 4
3.- Características de la tira reactiva de orina ............................. 4
4.- Parámetros en las tiras reactivas de orina ........................... 5
5.- Instrucciones para el uso de las tiras reactivas
i
de orina ............................................................................... 5
be or
6.- Descripción de los parámetros en las tiras reactivas ............. 8
t - pH urinario ........................................................................... 8
- proteínas .............................................................................. 8
- leucocitos ............................................................................ 10
rib ra
- nitritos .................................................................................. 11
- urobilinógeno ....................................................................... 12
-.sangre ................................................................................. 13
Ca bo
- densidad ............................................................................. 14
- cuerpos cetónicos ............................................................... 16
- bilirrubina ............................................................................ 17
- glucosa ............................................................................... 18
La
an os
El examen químico de orina son una serie de pruebas rápidas para la detección de
enfermedades como: diabetes, infecciones urinarias, mal funcionamiento de los riñones
o el hígado, y el estado de salud en general. A partir de la generalización del uso de las
tiras reactivas de orina, el examen químico de la misma se ha convertido en un procedi-
miento simple y rápido..
i
La Tira Reactiva de Orina.
be or
Una Tira reactiva de orina es un instrumento de diagnóstico básico, que tiene por
finalidad detectar, durante un examen rutinario de orina, algunos de los cambios
patológicos que pueden aparecer en la orina de un paciente.
Las tiras reactivas utilizadas en la actualidad proporcionan un medio rápido y simple
t
para llevar a cabo el análisis químico de la orina, algo muy importante desde el punto de
vista médico.
rib ra
I.- Características de las tiras reactivas.
1.- Las tiras reactivas consisten en una cinta de material plástico o papel, de apro-
ximadamente 5 milímetros de ancho.
2.- Las cintas de material plástico constan de unas almohadillas impregnadas de
Ca bo
an os
i
be or
t
rib ra
1.- No compare las tiras con la carta de color , antes de sumergir en la orina.
La
an os
i
be or
t
rib ra
3.-Luego, introduzca la tira en el recipiente de la muestra, sumergiendo todos los cuadros,
por no mas de 2 a 3 segundos ( Se recomienda leer el inserto que viene en el envase.
Las tiras reactivas de laboratorios wiener, las Urine Strip indica sumergir las tiras
completamente por no mas de un segundo. Un exceso de orina puede ocasionar
resultados erróneos ).
Ca bo
La
4.- Retire y coloque la tira sobre un paño adsorvente, dando ligeros toques en los bordes
para eliminar el exceso, sin tocar los cuadros con tus manos.
an os
i
be or
5.- Después de 60 segundos, compare los colores de las almohadillas reactivas con la
carta de color del recipiente, asegurándose que lo hace en la fila correspondiente.
t
rib ra
Ca bo
6.-Durante la comparación, mantenga la tira horizontal para evitar una posible mezcla
de los productos químicos.
La
1.- pH Urinario
Junto con los pulmones, los riñones son los principales reguladores del equilibrio
an os
ácido-base del organismo. Como el metabolismo normal produce un exceso de ácidos,
la orina es por lo general ácida con un pH de 6, siendo un rango habitual de 5 a 8. Es
un importante indicador de factores renales, gastrointestinales, respiratorios y
metabólicos.
El pH de una muestra al azar de orina puede variar entre 4,5 y 8, siendo por lo
general más ácida la primera orina de la mañana y más alcalina luego de las comidas.
i
Al ser tan amplia la variación no se asignan valores de referencia normales al pH urinario,
por ésta razón, es importante para el médico poder correlacionar el pH de la orina con
be or
otra información para determinar si existe o no algún problema.
2.- Proteínas
La presencia de proteína en la orina, conocida como «proteinuria», es una
cantidad excesiva de proteína presente en una muestra de orina. La presencia de
una concentración elevada de proteína en la orina puede constituir un importante índice
de enfermedad renal. Puede ser el primer signo de un problema grave y aparecer mucho
La
Las muestras de orina normal habitualmente contienen algunas proteínas (0-4 mg/dl).
Por lo tanto sólo niveles persistentemente elevados de proteínas urinarias indican una
enfermedad del riñón o el tracto urinario.
Los resultados persistentes de proteínas en trazas o cantidades mayores, indican una
an os
proteinuria significativa, resultando necesarios análisis adicionales. La proteinuria patológica
habitualmente da resultados por encima de 30 mg/dl y es persistente.
i
En el caso de la proteinuria, la principal que la origina, es un deterioro del sistema de
filtrado de los riñones.
be or
Hay algunas afecciones que pueden ocasionar mayores niveles de proteína en la orina
y que no tienen que significar lesiones renales. Estas son las siguientes:
- Deshidratación
- Estrés emocional
- Exposición a frío extremo
- Fiebre
t
- Ejercicio agotador
En cuanto a las que pueden provocar que los niveles de orina sean elevados de forma
rib ra
permanente, encontramos diversos como por ejemplo:
- Diabetes
- Amiloidosis: acumulación de proteínas anómalas en los órganos
- Lupus: enfermedad autoinmune
- Intoxicación con medicamentos
- Nefropatía crónica
Ca bo
o mieloma múltiple.
3.- Leucocitos
Normalmente pueden aparecer leucocitos en orina, se considera normal entre 0 y 3
(a veces 5) leucocitos por campo de gran aumento (40X). Las mujeres tienden a presentar
valores ligeramente superiores debido a la contaminación vaginal. Valores aumentados de
an os
leucocitos urinarios son indicativos de infecciones urinarias.
i
pueden ser asintomáticas.
be or
La prueba de tira para leucocitos detecta esterasa leucocitaria, presente en los gránulos
azurófilos de monocitos y granulocitos (neutrófilos, eosinófilos y basófilos).
Las bacterias, los linfocitos y las células epiteliales del tracto genitourinario no contienen
esterasas.
t
Los neutrófilos son los leucocitos que con mayor frecuencia se asocian a infecciones
urinarias.
rib ra
Una prueba de esterasa leucocitaria positiva suele acompañarse con la presencia de
bacterias y una prueba de nitrito positiva (aunque no es una constante).
Las infecciones causadas por Trichomonas, Chlamydia y levaduras producen leucocituria
sin bacteriuria. La inflamación de los tejidos renales (nefritis intersticial) puede producir
leucocituria,
Ca bo
4.- Nitritos
La prueba de nitritos provee un método rápido de cribado para determinar posibles
infecciones asintomáticas causadas por bacterias reductoras del nitrato. Algunas de las
especies de bacterias gram negativas que más comúnmente causan infecciones urinarias
an os
(Escherichia coli, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter y Proteus) poseen enzimas que
reducen el nitrato presente en la orina a nitrito.
La prueba tiene como finalidad realizar un cribado rápido para detectar rápidamente
posibles infecciones por bacterias del complejo entérico, pero no sustituye al urocultivo
ni al examen microscópico como pruebas diagnósticas ni de monitoreo ya que muchos
otros microorganismos que no reducen el nitrato (bacterias gram positivas y levaduras)
i
también pueden causar infecciones urinarias.
be or
Las tiras reactivas detectan nitrito por medio de la reacción de Greiss en la que el
nitrito reacciona en medio ácido con una amina aromática (ácido para-arsanílico o
sulfanilamida) para formar una sal de diazonio que a continuación se hace reaccionar
con una tetrahidrobenzoquinolina para producir un colorante azoico de color rosa.
La prueba de nitritos no es especialmente fiable, y las pruebas negativas en presencia
t
de síntomas clínicos no son raras, por lo que no debe tomarse como un resultado
concluyente. Los microorganismos no reductores de nitrato no dan reacción positiva,
rib ra
las bacterias reductoras deben permanecer en contacto con el nitrato el tiempo suficiente
para producir cantidades detectables (primera orina de la mañana o al menos 4 horas de
retención urinaria), grandes cantidades de bacterias pueden producir la reducción total
del nitrito hasta formar nitrógeno, lo que causa una reacción negativa, la administración de
antibióticos inhibe el metabolismo bacteriano causando reacciones negativas aún con
Ca bo
bacteriuria, y algunas sustancias tales como el ácido ascórbico compiten con la reacción
de Greiss pudiendo producir resultados falsamente disminuidos.
en la orina. Esas bacterias utilizan el nitrógeno de la úrea y reduce los nitratos a nitritos.
5.- Urobilinógeno
El urobilinógeno es un metabolito incoloro con estructura de tetrapirrol cuya fórmula
molecular es C33H44N4O6. ?Se produce en el intestino de los vertebrados por acción de
las bacterias de la flora anaerobia sobre la bilirrubina,?procedente de las excreciones
an os
biliares en el tracto digestivo.
Cuando la bilirrubina conjugada se excreta por el conducto biliar hacia el intestino, las
bacterias intestinales la convierten en una mezcla de urobilinógeno y estercobilinógeno.
Parte del urobilinógeno se reabsorbe desde el intestino hacia la sangre recircula al hígado
y se vuelve a excretar. Una pequeña parte de este urobilinógeno recirculante filtra por
riñón y aparece en orina (menos de 1 mg/dl de orina). El estercobilinógeno no puede
i
reabsorberse y permanece en el intestino.
be or
El deterioro de la función hepática disminuye la capacidad del hígado para procesar
el urobilinógeno recirculante. El exceso que permanece en sangre filtra por los riñones y
aparece en orina. Cuando se producen trastornos hemolíticos, aumenta la bilirrubina no
conjugada circulante y produce un aumento en la excreción hepática de bilirrubina
conjugada, como resultado se producen mayores cantidades de urobilinógeno que
t
redunda en un aumento en la reabsorción, recirculación y excresión renal.
Las reacciones que se producen en la tira reactiva varían de acuerdo al fabricante,
rib ra
pero en concreto dos son las más utilizadas. Por un lado algunos fabricantes utilizan la
reacción de Ehrlich, en la que el urobilinógeno reacciona con p-dimetilaminobenzaldehído
(reactivo de Ehrlich) para producir colores que varían del rosa claro al rosa oscuro.
Otros fabricantes utilizan una reacción de acoplamiento diazo, que utiliza 4-mtoxibenceno-
diazonio-tetrafluoroborato para producir colores que varían del blanco al rosa.
Ca bo
6.- Sangre
La presencia de sangre en la orina es, de todos los parámetros usualmente testeados,
el que más se relaciona con un daño traumático en los riñones o en la vía genitourinaria.
Las causas más frecuentes de hematuria son: nefrolitiasis, enfermedad glomerular, tumores,
an os
pielonefritis, exposición a nefrotóxicos, y tratamiento anticoagulante.
La hematuria sin importancia patológica se observa luego del ejercicio extenuante y
durante la menstruación.
La cantidad de eritrocitos en orina normal no debe superar los 3 por campo de gran
aumento.
También puede aparecer hemoglobinuria, no detectable al microscopio como
i
consecuencia de la lísis de los hematíes en la vía urinaria (en especial en orinas alcalinas
be or
y diluidas), o puede ser secundaria a una hemólisis intravascular.
La hemoglobinuria es la presencia de hemoglobina libre en la orina como
consecuencia de hemólisis intravascular.
La anemia hemolítica es un grupo de trastornos hemolíticos, que causan la disminución
de la masa de glóbulos rojos sanguíneos. A diferencia de anemias no hemolíticas, en las
t
anemias hemolíticas la vida de los glóbulos rojos en sangre periférica está acortada.
La tira reactiva para sangre se basa en la actividad pseudoperoxidasa de la hemoglobina
rib ra
para catalizar una reacción entre peróxido de hidrógeno y el cromógeno tetrametilbencidina
para producir un producto oxidado de color azul oscuro. Dependiendo de la cantidad de
hemoglobina, el color puede variar de verde a azul oscuro.
an os
1,005 g/mL a 1,030 g/mL,
Para la urodensitometría en laboratorios clínicos se utilizan normalmente tres técnicas:
A) Urodensitómetro, para el cual se necesita un mínimo de 20 mL de orina donde se deja
flotar el densitómetro sin tocar las paredes del tubo.
B) Refractómetro que requiere solo una gota de orina, y mide el índice de refracción de la
solución con la ayuda de un prisma.
i
C) Tiras reactivas, se basa en el cambio de la constante de disociación pKa de determinados
be or
polielectrolitos, relacionados con la concentración iónica de la orina, que a su vez se relaciona
con el peso específico, de tal manera que produce un cambio de color en un indicador de
pH (Figura 1).
Cabe acotar que las tiras reactivas son el método menos confiable.
t
rib ra
Ca bo
La
an os
disueltas en la orina como la glucosa, las proteínas o los electrolitos presentes.
Cuanto más elevada es la densidad más concentrada está la orina y cuanto más baja
es la densidad más diluida está la orina.
Los bebés tienen menos capacidad para concentrar la orina que los adultos puesto que
sus riñones son aún inmaduros y por tanto la orina suele ser menos concentrada
(densidad menor).
i
Valoración de resultados anormales
be or
Valores elevados de la densidad de la orina (superiores a 1.030) pueden ser debidos a:
- Insuficiencia cardiaca
- Deshidratación
Cualquier causa que produzca deshidratación
- Vómitos
t
- Diarrea
- Sudoración excesiva
rib ra
- Problemas de la glándula adrenal
- Glucosuria
- Proteinuria
- Diabetes mellitus
Ca bo
- Pielonefritis
- Consumo de diuréticos
Valores constantes cercanos a 1.010 (hace falta más de una medición en distintos estados
de hidratación sin que varíe la densidad)
- Nefritis crónica donde la capacidad de concentración de los túbulos renales es muy baja
- Deficiencia de hormona antidiurética (ADH)
- Estenosis de la arteria renal
an os
- Hiperestenúrica: Densidad > 1.012 (orina concentrada)
i
orinas normales.
Por lo general en la orina no aparecen cantidades cuantificables de cetonas pues todas
be or
estas sustancias se metabolizan completamente para producir energía, dióxido de carbono
y agua. Sin embargo cuando el metabolismo de los hidratos de carbono se encuentra
alterado, se producen desbalances metabólicos que conducen a la aparición de cetonas
como producto del metabolismo de las reservas grasas del organismo.
El aumento en el metabolismo de las grasas se puede producir por inanición o
t
malabsorción, incapacidad de metabolizar hidratos de carbono (como sucede por ejemplo
en la diabetes), o perdidas debidas a vómitos frecuentes.
rib ra
El control de cetonas urinarias es de especial utilidad en el manejo y monitorización de
la diabetes mellitus tipo 1. La cetonuria indica deficiencia de insulina lo que indica la
necesidad de regular la dosis. El aumento de concentración de cetonas en sangre
produce un desequilibrio electrolítico, deshidratación y si no se corrige, acidosis y por
último coma diabético.
Ca bo
9.- La Bilirrubina
La bilirrubina es un compuesto muy pigmentado producto de la degradación de la
hemoglobina.
La hemoglobina liberada luego de que el sistema reticuloendotelial en hígado y bazo retira
an os
de circulación a los eritrocitos envejecidos, es degradada en sus componentes hierro,
protoporfirina y proteína.
Las células del sistema reticuloendotelial convierten la protoporfirina en bilirrubina no
conjugada, que pasa a la circulación sistémica unida a proteína, en especial
a la albúmina.
i
Esta bilirrubina no puede filtrar por riñón por estar unida a proteína, siendo conducida al
hígado, donde es conjugada con ácido glucurónico para formar bilirrubina hidrosoluble o
be or
conjugada. Esta bilirrubina conjugada no debería aparecer en orina pues es excretada
directamente hacia el intestino con la bilis.
En el intestino, las bacterias intestinales reducen la bilirrubina a urobilinógeno, que luego
es oxidado y excretado con las heces en forma de urobilina.
La bilirrubina conjugada aparece en orina cuando se altera el ciclo normal de degradación
t
a causa de una obstrucción en los conductos biliares, o cuando se lesiona la integridad
funcional del hígado, permitiendo la fuga de bilirrubina conjugada hacia la circulación
rib ra
(p. ej. en la hepatitis y cirrosis hepática).
La detección de bilirrubina urinaria provee un indicio temprano de hepatopatía y
su presencia o ausencia puede utilizarse para determinar las causas de ictericia clínica.
La ictericia producto de la destrucción acelerada de eritrocitos no produce bilirrubinuria,
debido a que la bilirrubina se encuentra en la forma no conjugada y los riñones no pueden
Ca bo
excretarla.
Las tiras reactivas utilizan una reacción de diazotación para la detección de bilirrubina.
La bilirrubina se combina con una sal de diazonio (2,4-dicloroanilina o 2,6-diclorobenceno-
diazonio-tetrafluoroborato) en medio ácido para producir un colorante azoico con colores
que varían del rosado al violeta.
Las reacciones falsas positivas se deben a pigmentos no usuales en orina (p. ej. los
La
10.- La Glucosa
En circunstancias normales, casi toda la glucosa filtrada por glomérulo es reabsorbida
a nivel del túbulo contorneado proximal. Si la concentración de glucosa en sangre aumenta,
como sucede en la diabetes mellitus, se supera la capacidad de reabsorción tubular
an os
(efecto conocido como umbral de reabsorción renal), y aparece en orina. Para la glucosa
este umbral es de entre 160-180 mg/dl.
Las concentraciones de glucosa varían en un mismo individuo y una persona sana puede
presentar glucosuria transitoria luego de una comida abundante en azúcares, por lo que los
resultados más indicativos se obtienen de muestras de orina obtenidas luego de por lo menos
i
dos horas de la última comida.
Las tiras de orina basan la detección de glucosa en la reacción enzimática de la
be or
glucosa oxidasa. Esta enzima cataliza la oxidación de la glucosa por el oxígeno ambiental
para formar D-glucono-d-lactona y peroxido de hidrogeno. En una segunda reaccion
acoplada, mediada por una enzima peroxidasa cataliza la reaccion entre el peroxido y un
cromogeno (una sustancia que adquiere color luego de una reaccion quimica), para formar
un compuesto coloreado que indica la concentracion de glucosa.
t
Como todos los métodos enzimáticos, la reacción es específica para glucosa, pero
pueden presentarse algunos falsos positivos debido a la presencia de restos de agentes
rib ra
oxidantes fuertes o peróxido de los desinfectantes en el instrumental del laboratorio.
Reacción en la tira reactiva de orina
Es una reacción reacción enzimática secuencial donde la glucosa oxidasa cataliza
la oxidación de la glucosa dando ácido glucónico y peróxido de hidrógeno.
Ca bo
Luego la peroxidasa cataliza la reacción del peróxido de hidrógeno con una sal de
potasio, formando productos coloreados, que van desde el color verde, pasando por el
color marrón verdoso intermedio al marrón oscuro.
Se observa cuando hay hiperglicemia o disfunción renal.
La
an os
Leucocitos
Nitritos
Urobilinógeno
i
Proteínas
be or
t pH
Sangre
Densidad
Cuerpos cetónicos ó
rib ra
Cetonas
Bilirrubina
Glucosa
Ca bo
ensayo ( 3 y 4 )
1 2
3 4
an os
i
be or
t
rib ra
Esta tira se ve muy normal, después de haberla sumergido en la muestra de orina.
- No hay presencia ni de leucocitos, ni de nitritos, ni urobilinógeno , ni proteínas.
- El pH está en 5
- La densidad específica está en 1,010
Ca bo
an os
i
be or
t
rib ra
Ca bo
La
an os
y el análisis microscópico ( sedimento ), tema de estudio del sgte módulo.
Logo del
Laboratorio
i
be or
t
rib ra
Ca bo
La
Firma y sello
del
Profesional
Logo del
Laboratorio
an os
i
be or
t
rib ra
Ca bo
l
La
Firma y sello
del
Profesional
ACTIVIDAD DE CLASE Nº 1
( ENVIE SUS RESPUESTAS PARA SU EVALUACION
EN FORMATO WORD )
Responda a las sgtes preguntas:
an os
1.- ¿A qué llamamos examen químico de orina?
2.- ¿ Qué es una tira reactiva de orina?
3.- ¿ Cuántos tipos de tira reactivas de orina existen de acuerdo a su objetivo del
análisis?
i
4.- ¿ Qué parámetros a analizar encontramos en una tira reactiva de orina?
5.- Defina cada parámetro de manera breve y concreta
be or
6.- ¿ Cuál es el tiempo que se recomienda , para sumergir la tira reactiva en una
muestra de orina?
7.- Realice un cuadro en donde se indique los valores normales de cada parámetro
en una muestra de orina.
t
8.- Enumere el procedimiento a seguir para el análisis de una muestra de orina con
rib ra
tira reactiva.
Ca bo
La