Arauco PK
Arauco PK
Arauco PK
TESIS
AUTOR
Katherine Amalia Arauco Pinao
ASESOR
Jorge Luís Arroyo Acevedo
Lima – Perú
2016
DEDICATORIA
ii
AGRADECIMIENTOS
A mi maestro, Dr. Jorge Arroyo Acevedo que en este andar por la vida, influyó con sus
lecciones y experiencias en formarme como una persona de bien y preparada para los
retos que pone la vida.
A todo el gran equipo de trabajo del Hospital Nacional Cayetano Heredia especialmente
a Farmacia Dosis Unitaria a todos los amigos y colegas Farmacéuticos y personal
técnico por ser un gran estímulo en mi vida profesional, por demostrarme que son más
que un equipo de trabajo, somos una gran familia.
Un agradecimiento sincero a Mg. José Valencia Chumpitaz por sus precisas sugerencias,
quien con su dedicación y asesoría hicieron posible la culminación de este proyecto.
A todos mis amigos sin excluir a ninguno, mil gracias porque de una manera forman
parte de lo que soy.
iii
ÍNDICE
RESUMEN vii
SUMMARY viii
I. INTRODUCCIÓN 1
1.1 Situación problemática 1
1.2 Formulación del problema 2
1.3 Justificación teórica 2
1.4 Justificación práctica 3
1.5 Objetivos 4
II. MARCO TEÓRICO 5
2.1 Marco epistemológico de la investigación 5
2.2 Antecedentes de la investigación 5
2.3 Bases teóricas 6
2.4 La planta 11
III. METODOLOGÍA 15
3.1 Materiales y equipos 15
3.2 Inducción de la inflamación y el dolor 17
IV. RESULTADOS 22
4.1 Presentación de resultados 23
V. DISCUSIÓN 32
VI. CONCLUSIONES 38
VII. RECOMENDACIONES 39
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 40
IX. ANEXOS 47
iv
LISTA DE TABLAS
v
Tabla 16. Media del peso del hígado al evaluar toxicidad a dosis única en ratones. 30
Tabla 17. Media del peso del riñón al evaluar toxicidad a dosis única en ratones. 30
Tabla 18. Evolución temporal del valor medio del peso corporal al evaluar toxicidad
a dosis límite en ratones. 30
vi
LISTA DE FIGURAS
vii
RESUMEN
viii
ABSTRACT
The present study aims to evaluate the antiinflammatory and analgesic effect of the
ethanolic extract of volcanic Muehlenbeckia (Benthan) endlicher (mullaca).
Experimental design. Place: Faculties of Medicine and Pharmacy and Biochemistry,
Major National University of San Marcos, Lima, Peru. Methodology. Biological
material: Ethanolic extract from leaves of volcanic Muehlenbeckia, rats and mice.
Interventions: The leaves of volcanic Muehlenbeckia were collected in Junín-Huancayo.
The anti-inflammatory activity was evaluated in vivo using the carrageenan-induced
granuloma method according to Sedwicks and in blood, being evaluated by
histopathology. Main measures of results: with the treatment of the extract at 50 mg / kg,
there is a greater reduction in the blood forming elements (lymphocytes and monocytes),
lower mean of latex at 50 mg / kg, lower mean in red blood cells and segmented at 50
Mg / kg in granuloma exudate, in skin biopsy markers the best effect at 750 mg / kg,
better analgesic effect at 8 hours at the dose of 250 mg / kg, with no toxic effects at the
dose of 2,000 mg / Kg; And no adverse effects, when compared with the control (p
<0.05). Conclusion: It has been demonstrated that the ethanolic extract of volcanic
Muehlenbeckia (Bentham) endlincher - (mullaca) has anti - inflammatory and analgesic
effect in rats and without toxic effect in mice.
Key words: Muehlenbeckia volcanica (Bentham) endlincher - (mullaca), analgesia,
carrageenan, pain, inflammation.
ix
I. INTRODUCCIÓN
2
(Lara et al, 2014), manifiestan que la actividad antioxidante de los flavonoides de la
dahlia resulta de una combinación de sus propiedades quelantes de hierro y
secuestradoras de radicales libres, además a la inhibición de oxidasas, como la
lipooxigenasa (LO), la ciclooxigenasa (COX), la mieloperoxidasa (MPO), la NADPH
oxidasa y la xantina oxidasa (XO), evitando la generación de especies reactivas del
oxígeno (ERO) in vivo, así como de hidroperóxidos orgánicos. Por otra parte, se ha
podido conocer que también inhiben enzimas involucradas indirectamente en los
procesos oxidativos, como la fosfolipasa A2 (FLA2), al mismo tiempo que estimulan
otras con reconocidas propiedades antioxidantes, la catalasa (CAT) y la superóxido
dismutasa (SOD), (Ciappini et al 2013 pág. 45-51) expresan que los flavonoides
interfieren en las reacciones de propagación de radicales libres y en su formación.
3
1.5. Objetivos
4
II. MARCO TEÓRICO
6
el FI3Q y FI5Q, inhiben el mecanismo del ácido araquidónico, regula la expresión de
MAIC-1, anti-inflamatorias, anti-mutagénicas y anticancerígenas, pueden inhibir las vías
inflamatorias y podrían ser útiles para el tratamiento de enfermedades inflamatorias
crónicas del intestino. Además los fenoles inhiben la producción de óxido nítrico (ON),
la 5 lipooxigenasa (5 LO) y capturan peroxinitrito, (Gonzales et al, 2011; pág. 331-362)
y (Hoensch & Reinhard, 2012; pág. 2738-2740), explican que síndromes de deficiencia
de flavonoides podrían ser dianas terapéuticas en el futuro, (Estrada R, Ubaldo D &
Araujo A, 2012; pág. 375-384), calcula que la ingesta diaria de flavonoides contenidos
en la dieta es de uno a dos gramos por día, dependiendo principalmente de los hábitos
dietéticos. Su entrada en el cuerpo se lleva a cabo a través del tracto gastrointestinal y
por tanto, este órgano, especialmente las células epiteliales de revestimiento están
expuestos a concentraciones bastante altas de flavonoides.
(Justil H, Arroyo J & Valencia J. 2010 pág. 88-96) en sus estudios explican que la
modulación de la respuesta carcinogénica por fitoquímicos naturales juega un papel
importante en la prevención, la mitigación y el tratamiento de muchas enfermedades,
especialmente en el cáncer colorrectal (CCR). Estudios revelaron que los flavonoides
pueden inhibir la neoangiogénesis y aumentar la apoptosis dando lugar a efectos
anticancerígenos y anti-mutagénicos, las plantas han desarrollado mecanismos
antioxidantes para su evolución y para mantener su salud. Al igual que las vitaminas los
flavonoides podrían desempeñar un nuevo papel para la salud humana, la prevención del
cáncer y el bienestar.
(Zapata S, Piedrahita A & Rojano B, 2014 pág. 25-36), (Pan et al. 2011; pág. 32-45),
expresan que el primer desafío en el futuro será la de definir las enfermedades
degenerativas para las que los flavonoides pueden ser útiles. Este concepto podría
aplicarse a la neoplasia intestinal y enfermedades inflamatorias crónicas del intestino, así
como a trastornos neurodegenerativos y cardiovasculares crónicas, (Hoensch &
Reinhard 2011; pág. 71-74), (Yang & Wang, 2010; pág. 931-934) enuncian que el
segundo reto será desarrollar preparados flavonoides específicos para entregar estos
compuestos a las estructuras de destino y de sus receptores. Si esto se puede lograr,
7
puede ser posible utilizar los flavonoides como herramientas para la prevención y el
tratamiento, al igual que las vitaminas en el pasado.
8
Tabla 2. Fenoles comunes en plantas medicinales y sus propiedades.
Fenoles Propiedades
Pirogalol Antioxidante, inhibidor de COX – 2
Eugenol Antioxidante, inhibidor de COX – 2
Ácido cafeico Antioxidante, inhibe la producción de ON, inhibe la 5 LO, captura
peroxinitrito
Ácido cumárico Antioxidante, inhibe la producción de ON
Ácido ferúlico Antioxidante, inhibe la producción de ON
Ácido clorogénicoAntioxidante, captura peroxinitrito
Ácido siríngico Antioxidante
Ácido vainillínico Antioxidante
Ácido gentísico Antioxidante, inhibidor de COX – 2
Ácido protocateq Antioxidante,, inhibe NOSi
Fuente. Datos tomados de Shigematsu (2003)
Inflamación
Licastro et al, (2005) explica que la inflamación es una respuesta tisular inespecífica
frente a las agresiones que amenazan su integridad. Se manifiesta como una reacción de
la microcirculación, caracterizada principalmente por el desplazamiento de líquido y
leucocitos desde el compartimiento sanguíneo al extravascular, involucrando una serie
de cambios en un tejido que ha sido lesionado. Las clásicas manifestaciones locales de la
inflamación son: tumor (aumento de tamaño de la región u órgano inflamado), rubor
(enrojecimiento), calor (debido a mayor irrigación), dolor (irritación fibras sensitivas por
el aumento de tensión dentro del foco inflamatorio y por mediadores de la inflamación)
y alteración funcional. El proceso inflamatorio se inicia con una vasodilatación
arteriolar, con la consiguiente hiperemia tisular e incremento de la permeabilidad
celular. Seguidamente tiene lugar la marginación y adherencia de los leucocitos a las
paredes de los vasos capilares, proceso mediado por selectinas e integrinas. Finalmente,
los leucocitos abandonan el capilar por diapédesis. Este proceso permite la constitución
del exudado inflamatorio, fluido rico en proteínas plasmáticas y fagocitos (leucocitos
polimorfonucleares y monocitos-macrófagos) encargados de destruir los agentes vivos o
restos celulares una vez fagocitados.
9
(Villalba E. 2014; pág. 2261-2265), (Portilla E, Muñoz W & Sierra C, 2014; pág. 35-43)
definen la inflamación como proceso homeostático que actúa a nivel de tejido, ha sido
formulada desde hace mucho tiempo, los conceptos fueron variando con el paso de las
décadas. Recientemente y sólo con fines prácticos se ha propuesto el considerar la
inflamación como la reacción del tejido vivo vascularizado a una agregación local. Lo
que caracteriza al proceso inflamatorio en las formas biológicas superiores es la reacción
de los vasos sanguíneos, que conduce al acúmulo de líquido y células sanguíneas. La
respuesta inflamatoria en la fase aguda transitoria, se caracteriza por vasodilatación local
y aumento de la permeabilidad capilar. En la fase sub aguda se caracteriza por una
prominente infiltración de leucocitos y fagocitos.
Algesia
(Reyes et al. 2011, pág. 118-134) mencionan que la Asociación Internacional para el
Estudio del Dolor lo define como una experiencia sensorial y emocional desagradable
asociada con daño tisular real o potencial o descrito en términos de tal daño. En su forma
más benigna, nos avisa que algo no está bien, que debemos tomar medicamentos o ver al
médico. En el peor de los casos, sin embargo, el dolor nos quita nuestra productividad y
nuestro bienestar. El dolor es una percepción compleja que difiere enormemente entre
los pacientes, aún entre los que parecen tener lesiones o enfermedades idénticas. El dolor
se ha convertido en el trastorno universal, un tema de salud pública serio y costoso, y un
desafío para la familia, amigos y proveedores médicos que deben dar apoyo al individuo
que sufre las consecuencias físicas al igual que las emocionales del dolor.
(Valenzuela et al. 2011; pág. 356-360) indican que clásicamente se ha aceptado que la
acción analgésica de los fármacos antiinflamatorios no esteroidales (AINEs) tiene lugar
a nivel periférico, mediante la inhibición de la síntesis de las prostaglandinas (PGs)
producidas en respuesta a una agresión o lesión tisular, e impiden, por tanto, que los
eicosanoides contribuyan con su acción sensibilizadora sobre las terminaciones
nerviosas nociceptivas a aumentar la acción estimulante del dolor de otros mediadores
allí liberados: histamina y bradicinina. (Enciso & Arroyo, 2011; pág. 231-237) enuncian
10
que los fenoles además pueden tener efecto analgésico debido a que muchos de estos
compuestos pueden inhibir la síntesis de prostaglandinas.
2.4. La Planta
La clasificación sistemática, descripción botánica se hizo en el Museo de Historia
Natural del Perú. (Anexo N° 1)
Sistemática
División: Fanerógamas
Subdivisión: Angiospermas
Clase: Dicotiledóneas
Sub-clase: Arquiclamídeas
Orden: Poligonáles
Familia: Poligonáceas
Género: Muehlenbeckia
Especie: Muehlenbeckia volcánica
Descripción botánica: Pequeño arbusto que crece preferentemente en las alturas
andinas, es lampiño, muy ramoso y semitrepador, tiene hojas casi orbiculares de color
verde intenso. Florece en el mes de noviembre.
Piso ecológico: Crece en la sierra entre 1,500 y 4,500 m.s.n.m. Se desarrolla en terrenos
secos entre las rocas y piedras volcánicas, derivando de allí su nombre.
Antecedentes históricos: La mullaca es una planta, cuyo nombre es de origen aymara,
ya que se desarrolló en zonas donde se asentaron grandes culturas como Wari,
Tiahuanaco. La flor de esta especie posee un tinte de color azul oscuro que se utilizó
desde épocas milenarias para teñir las fibras que se emplearon en la confección de
textiles, también fue utilizada con fines medicinales para curar el afta, combatir el asma
y controlar la fiebre.
Sinche Justo. (1956).
11
Figura 1. PLANTA DE MULLACA
12
Tabla 3.- Operacionalización de variables.
VARIABLE CONCEPTUAL OPERACIONAL INDICADOR UNID. DE MEDIDA
Inflamación: proceso La administración de Elementos celulares pro- N°
fisiológico, defensivo carragenina por vía oral inflamatorios.
natural del organismo ante produce efecto mL
agresiones del medio, inflamatorio primero por Exudado en el granuloma
Ausencia de
presentando signos: dolor, el trauma de la inyección, Alteración histopatológica granulomas
VARIABLES calor, rubor y edema y luego por un proceso
pérdida de funcionalidad. mediado por autacoides, Ausencia de lesión
(Villalba, 2014) aminas vasoactivas
DEPENDIENTES cininas, PGE1, PGE2 y Cambios conductuales N° de veces de chillidos
PGF2 (SCF, 2003) del ratón
Dolor: experiencia Levantar las patas/brincos
sensorial y emocional N° de veces brincos del
desagradable asociada con El estímulo eléctrico a Lamer las patas ratón
una lesión presente o través del Carrete de
Ruhnkorff produce efecto N° de veces lamidos del
potencial o descrita en
doloroso por las descargas ratón
términos de la misma
(Ibarra E, 2006 pag. 65- eléctricas de diferente
72) voltaje
Extracto etanólico de las Cinco kg de las hojas Extracto etanólico de las mg/kg de peso corporal
hojas de Muehlenbeckia recolectados fueron hojas de Muehlenbeckia
VARIABLE volcánica (Bentham) licuados con etanol, volcánica (Bentham)
INDEPENDIENTE Endlicher (mullaca). filtrados y trasvasados el Endlicher (mullaca).
contenido para desecarlo y
extraer el contenido.
13
Tabla 4.- Matriz de consistencia.
ASPECTOS PROBLEMA OBJETIVO HIPÓTESIS METODOLOGÍA
GENERALES
VARIABLE En la actualidad la Objetivo general: El extracto Se utilizaron 2 modelos de
DEPENDIENTE medicina admite la etanólico de inducción uno para la
inflamación crónica, - Evaluar el efecto antiinflamatorio, analgésico y Muehlenbeckia inflamación y otro para el
Efecto en sus diferentes tóxico del extracto etanólico de Muehlenbeckia volcánica dolor 1) Carragenina al 1
Inflamatorio niveles, como una de volcánica (Benthan) endlicher (mullaca) en ratas (Benthan) % en dosis de ml y 2) el
inducido en ratas las causas de con inducción de granuloma y dolor. endlicher Carrete de Ruhnkorff,
enfermedades. Objetivo especifico (mullaca) respectivamente
Cuando la ciencia y administrado por
- Determinar el efecto antiinflamatorio del extracto Tratamiento estadístico:
los científicos han vía oral, tiene
etanólico de Muehlenbeckia volcánica (Benthan)
profundizado en la efecto Se utilizaron las pruebas
endlicher (mullaca) al ser administrado por vía oral
comprensión del antiinflamatorio y de ANOVA, Student,
a ratas con inducción de granuloma por carragenina.
origen de las analgésico en DMS y SPSS
enfermedades se ha - Demostrar el efecto analgésico del extracto ratas con
entendido la relación etanólico de Muehlenbeckia volcánica (Benthan) granuloma Consideraciones éticas:
entre inflamación y endlicher (mullaca) al ser administrado por vía oral inducido por
Se aplicó la eutanasia,
la etiología de las a ratas con inducción del dolor mediante el Carrete carragenina y el
usando pentobarbital, en
enfermedades de Ruhnkorff. dolor inducido
dosis de 100 mg/kg
- Establecer el grado de toxicidad aguda del por el Carrete de
(Morton et al 1985, pág.
extracto etanólico de Muehlenbeckia volcánica Ruhnkorff.
431).
(Benthan) endlicher (mullaca) al ser administrado
por vía oral a dosis única en ratones. Se sacrificó por
dislocación cervical.
14
III. METODOLOGÍA
Tipo: Experimental
Diseño: Para el modelo de inducción de inflamación se conformaron 7 grupos de ratas,
correspondiendo al blanco, control, 2 estándares (Diclofenaco y Dexametasona) y 3 con
la muestra a investigar en dosis de 50, 250 y 750 mg/kg del extracto etanólico de
Muehlenbeckia volcánica (Benthan) Endlicher.
Para el modelo de inducción del dolor se conformaron 7 grupos de ratas,
correspondiendo al blanco, control, 2 estándares (Diclofenaco y Tramadol) y 3 con la
muestra a investigar en dosis de 50, 250 y 750 mg/kg del extracto etanólico de
Muehlenbeckia volcánica (Benthan) Endliche
Unidad de análisis: para la inflamación y el dolor se utilizaron ratas machos, cepa
Holtzman y para el efecto tóxico ratones machos cepa Balb C-53.
1) Carragenina al 1 % en dosis de 2 mL
2) Carrete de Ruhnkorff
Tratamiento estadístico
Se utilizaron las pruebas de ANOVA, Tde Student, DMS, SPSS y Probits
Consideraciones éticas
Se aplicó la eutanasia, haciendo uso de pentobarbital, en dosis de 100 mg/kg, Morton &
Griffiths (1985).
15
Instituto Nacional de Salud – MINSA ubicado en Chorrillos, los cuales fueron
acondicionados en el Bioterio de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional
Mayor de San Marcos, con condicionamiento previo de 48 horas, con agua y alimentos
ad libitum, ciclo luz-día de 12 horas y temperatura de 22 a 26 °C. Se tuvo en cuenta las
normas y procedimientos éticos para el manejo de animales de laboratorio establecidos
internacionalmente, National Research Council (1996).
3.1.3. Equipos
• Sonda metálica para administración oral
• Balanza sensible al 0,1 g Metler
• Balanza analítica sensible al 0,001 g Belnet
• Estufa de aire circulante de precisión Thelco
• Centrífuga International Company
• Estuche de disección
• Cronómetro Seiko
• Coulter Counter
16
• Cloruro de sodio QP, Sigma
• Alcohol 96º (etanol)
• Tricloruro de hierro
• Reactivo de Shinoda
• Diclofenaco Genérico Genfar 50 mg tableta
• Dexametasona Genérico Genfar 4 mg tableta
• Tramadol Genérico Genfar tableta
• Agua destilada
17
Tabla 5. Diseño experimental para la inducción de inflamación utilizando carragenina 1 %
18
3.2.1.1.2. Estudio histológico
(Samudram et al. 2008 pag. 308-314), una vez sacrificados los animales al administrar
pentobarbital 100 mg/kg, se procedió a realizar cortes del granuloma 0,5 x 1,0 cm de
espesor, los que fueron fijados en formol neutro al 10 %, siendo seccionados para
inclusión en porciones de 2 mm de espesor; posteriormente, se efectuó cortes con
micrótomo, en un espesor de 3 a 5 micras, para luego ser coloreados con HE
(hematoxilina-eosina) y revisados con microscopio óptico. El indicador es la presencia
de polimorfonucleares.
19
Tabla 6. Diseño experimental para la inducción del dolor utilizando el Carrete de
Ruhnkorff
20
Package for Social Sciences (SPSS) versión 15. Para la determinación de la DL50 la
prueba de Probits.
21
IV. RESULTADOS
22
4.1. Presentación de Resultados
23
Tabla 8. Actividad antiinflamatoria en ratas y evaluación de la inflamación por acción
de carragenina. Media de elementos formes en sangre.
Media ± Grado de
Variables Tratamiento
Error Estándar variación
Leucocitos Control 100 ± 0,05
Diclofenaco 100 ± 0,05 100,00
Dexametasona 100 ± 0,05 100,00
Mullaca 50 100 ± 0,05 100,00
Mullaca 250 100 ± 0,05 100,00
Mullaca 750 100 ± 0,05 100,00
Abastonados Control 1,83 ± 0,05
Diclofenaco 0,00 ± 0,05 0,00
Dexametasona 0,00 ± 0,05 0,00
Mullaca 50 0,00 ± 0,05 0,00
Mullaca 250 0,33 ± 0,05 545,54
Mullaca 750 0,00 ± 0,05 0,00
Segmentados Control 31,33 ± 0,05
Diclofenaco 6,67 ± 0,05 469,71
Dexametasona 78,67 ± 0,05 39,82
Mullaca 50 30,33 ± 0,05 103,29
Mullaca 250 29,67 ± 0,05 105,59,78,32
Mullaca 750 40,00 ± 0,05
C D
25
A
B C
26
Tabla 10. Media de látex en suero.
27
Tabla 12. Media de características observadas en la biopsia de piel.
28
Tabla 13. Actividad analgésica en ratas y evaluación de dolor por el estímulo eléctrico
a través del carrete de Ruhnkorff.
Media basal del efecto analgésico sobre el dolor.
29
ACTIVIDAD TÓXICA EN RATONES
Tabla 16. .Media del peso de hígado al evaluar toxicidad a dosis única en ratones.
Tabla 17. Media del peso de riñón al evaluar toxicidad a dosis única en ratones.
Tabla 18. Evolución temporal de la media del peso corporal al evaluar toxicidad.
Tiempo Control Con Mullaca 1000 mg/kg Con Mullaca 2000 mg/kg
días peso g peso. ± Error estándar peso. ± Error estándar
0 29,00 ± 0,05 28,80 ± 0,05 27,60 ± 0,05
1 28,70 ± 0,05 28,60 ± 0,05 27,40 ± 0,05
2 29,30 ± 0,05 29,20 ± 0,05 27,60 ± 0,05
3 30,30 ± 0,05 31,00 ± 0,05 28,60 ± 0,05
4 29,70 ± 0,05 30,80 ± 0,05 28,80 ± 0,05
5 29,70 ± 0,05 30,80 ± 0,05 29,20 ± 0,05
6 28,30 ± 0,05 30,60 ± 0,05 30,00 ± 0,05
7 28,70 ± 0,05 30,80 ± 0,05 29,80 ± 0,05
8 29,90 ± 0,05 28,00 ± 0,05 31,40 ± 0,05
9 29,80 ± 0,05 28,00 ± 0,05 30,80 ± 0,05
10 30,20 ± 0,05 27,70 ± 0,05 30,60 ± 0,05
11 30,00 ± 0,05 27,00 ± 0,05 31,00 ± 0,05
12 30,80 ± 0,05 27,00 ± 0,05 31,80 ± 0,05
13 31,00 ± 0,05 26,70 ± 0,05 31,60 ± 0,05
14 30,60 ± 0,05 26,30 ± 0,05 30,60 ± 0,05
30
Figura 4. Evolución temporal de la media del peso corporal al evaluar toxicidad.
La variación es nula a 2000 mg/kg.
31
V. DISCUSIÓN
(Torres & Guinand, 2013; pág. 372-386), en sus investigaciones indican que los
polifenoles pueden tener capacidad antioxidante con potenciales beneficios para la salud
y podrían reducir el riesgo de contraer enfermedades cardiovasculares y cáncer. (Arranz
et al. 2009 pag. 7298) explican que en el cuerpo humano estos compuestos fermentan,
activados por las bacterias que habitan en nuestro sistema digestivo, creando metabolitos
que pueden ser beneficiosos por su actividad antioxidante. El extracto etanólico de las
hojas de Muehlenbeckia volcánica (mullaca) estudiado por nosotros contenía los
compuestos antes mencionados (compuestos fenólicos, taninos y flavonoides).
(Doroteo et al. 2012, pág. 254-263) en sus estudios realizados han demostrado la
capacidad antiinflamatoria en compuestos fenólicos, (Quiñones M, Miguel M &
Aleixandre A, 2012; pág. 76-89), expresan de igual forma que los polifenoles brindan
32
efecto antiinflamatorio, debido a que inhiben los metabolitos del ácido araquidónico
como prostaglandinas y leucotrienos. (Surh Y, 2003; pág. 768-780) explica que en la
intervención de los polifenoles supresores (curcumina, genisteina y resveratrol) en la
fase de iniciación del proceso de carcinogénesis actúan bloqueando el aumento de los
radicales libre de oxígeno, la activación de la glutatoperoxidasa, glutato reductasa y la
inactivación de la glutatión S transferasa, en la fase de promoción bloquean la activación
de oncogenes y la alteración del ciclo celular y en la fase de progresión bloquean la
activación de la metaloproteasa, ciclooxigenasa 2, factor de necrosis tumoral, moléculas
de adhesión y factores de angiogénesis.
Enciso & Arroyo (2011), mencionan que los flavonoides son antiinflamatorios en razón
de que inhiben la prostaglandina endoperóxido sintetasa, (Velásquez & Posada, 2013)
manifiestan que los flavonoides regulan funciones inmunes e inflamatorias de las células
in vitro e in vivo. (Jiménez & Girbés 2013), afirman que los flavonoides y triterpenos
contribuyen en el efecto antiinflamatorio debido a una inhibición de la prostaglandina
sintetasa reduciendo el nivel de prostaglandinas en el proceso inflamatorio.
(Kim et al. 2004, pág. 229-245), en estudios realizados han mostrado que ciertos
flavonoides, especialmente los derivados de flavonas, expresan su actividad
antiinflamatoria al menos en parte por la modulación en la expresión de genes
proinflamatorios como la COX-2, la iNOS y numerosas citosinas, compuestos que
también inhiben a la cinasa de la tirosina citosólica y membranal. Las proteínas
integrales de membrana, como la cinasa de la tirosina 3-monooxigenasa, están
33
involucradas en una variedad de funciones, tales como catálisis enzimática, transporte a
través de membranas, transducción de señales que funcionan como receptores de
hormonas y factores de crecimiento, y la transferencia de energía en la síntesis de ATP.
La inhibición de estas proteínas resulta en la inhibición del crecimiento y la proliferación
celular descontrolada. (Álvarez N. 2010) manifiesta que los sustratos de la cinasa de la
tirosina parecen jugar un papel clave en la ruta de transducción de señales que regula la
proliferación celular.
(Muñoz et al, 2012; pág. 481-495), explican que la capacidad antioxidante está ligada al
proceso antiinflamatorio, actividad biológica dada por los compuestos fenólicos,
flavonoides y coumarinas en diferentes grados (in vitro e in vivo), dado que estos
ejercen su acción a través de la quelación de iones metálicos de transición que participan
en la producción de radicales libres, el proceso de quelación se debe a que los
flavonoides (flavonol, flavone, flavanone y familia flavane) contienen un grupo catecol
en el anillo B, un grupo hidroxilo en el anillo C y una doble ligadura en los carbonos 2, 3
del anillo C. (González, Guerra, Maza & Cruz A, 2014; pág. 35-39), afirman que el
efecto antioxidante también se explicaría, porque los flavonoides actúan como
inhibidores naturales de la enzima adenosina deaminasa,
34
El extracto etanólico de las hojas de Muehlenbeckia volcánica (mullaca) ha demostrado
tener capacidad antiinflamatoria.
35
polimorfonucleares a 250 y 750 mg/kg. En marcadores de biopsia de piel el mejor
efecto se da a 750 mg/kg (Tabla 10).
Las características histopatológicas de las muestras de piel del lomo de rata con
inducción de granuloma por carragenina, demuestran que el extracto etanólico de
Muehlenbeckia volcánica (mullaca) tiene efecto antiinflamatorio, puesto que con el
tratamiento del extracto de 750 mg/kg: se distingue discreta subepidermolisis, microlisis
subdermica, epidermólisis, lisis regular sin alteración inflamatoria y zona de lisis
subepidermica.
36
presentan efectos sobre la expresión de: citoquinas proinflamatorias (IL-1b, IL-6, IL-8,
GM-CSF and TNF-), enzimas mediadoras (MMP-3, MMP-13, iNOS y COX-2) y
catabolitos (NO y PGE2). Esta actividad ha sido asociada con: la inactivación del NF-B,
por la prevención de la fosforilación- degradación de IkBo la regulación de ciertos
factores de trascripción, entre otros, lo cual constituye el mecanismo de acción de tales
compuestos del proceso inflamatorio (Gómez H, Gonzalez K & Medina J, 2011; pág.
182-217). Por los hallazgos se podría inferir que el extracto etanólico de Muehlenbeckia
volcánica (mullaca) actuaría en forma similar, recomendándose mayores estudios para
aclarar este posible mecanismo de acción.
Siendo la toxicidad aguda de una sustancia química los efectos adversos que se
manifiestan tras la administración por vía oral de la sustancia, en nuestro estudio de
toxicidad oral aguda no se observó cambios significativos en la ganancia o pérdida de
peso, ni alteraciones patológicas en órganos ni tejidos, que pueden ser atribuidos a la
administración del extracto. Debido a la ausencia de mortalidad o presencia de animales
moribundos se puede afirmar que la DL 50 oral para el extracto es superior a 2000
mg/kg, calificándose así según la OMS como ¨NO TÓXICA¨. No apreciándose
variación del peso de hígado según el modelo experimental; (Tabla 14), así como en el
peso de riñón tampoco se observa variación (Tabla 15). En la evolución temporal de
peso; la variación del peso corporal es nula en 2000 mg/kg, por cuanto el peso corporal
se ha mantenido de manera similar al grupo control (Tabla 1, Figura 3).
37
VI. CONCLUSIONES
38
VII. RECOMENDACIONES
39
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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46
ANEXOS
Anexo 1.
Constancia del Museo de Historia Natural UNMSM.
47
Anexo 2.
Glosario de términos
48
Figura 5.- Preparación del Extracto Etanólico de Muehlenbeckia volcánica
(Bentham) endlincher - (mullaca).
49
Figura 7.- Marcha fitoquímica del Extracto Etanólico de Muehlenbeckia
volcánica (Bentham) endlincher - (mullaca) con resultados positivos para
compuestos fenólicos, taninos y flavonoides.
Figura 8.- Corte del lomo de la rata para comparar la actividad antiinflamatoria
50
Figura 9.- Vista de la zona dorsal y la nuca rasurada de la rata.
51
Figura 11.- Administrando el tratamiento con el extracto de mullaca.
52
Figura 13.- Medida del impulso eléctrico
53
Figura 15.- Prueba de látex en suero.
54
Figura 17.- Prueba de elementos formes del exudado
55
Figura 19.- Prueba de toxicidad en ratones el primer día.
56
Figura 21.- Evaluación del hígado y del riñón en el estado pos mortem del ratón
57
Padre, al llegar al final del presente trabajo quiero
darte las gracias, en el nombre del Señor Jesús,
por todas tus bendiciones. Gracias por todos los
dones de tu misericordia , por todos esos
momentos luminosos en que sentimos alegría de
tu presencia, por todo lo bueno, lo noble, lo
verdadero que acontece en nuestra vida la
amistad, los abrazos, la oración, el esfuerzo
compartido, la esperanza, gracias, Padre,
gracias.
También te damos gracias por las dificultades que
hemos vivido, los problemas, los sufrimientos que
nos ha tocado afrontar y padecer. Sabemos, Padre
todopoderoso que ordenas todas las cosas para
nuestra mayor bien, pues cuánto sucede es
querido y permitido por ti, por eso ponemos en ti
nuestros ojos, y confiamos en tu fidelidad y en tu
gracias.
Padre, danos un corazón agradecido, y que
aprendamos a darte gracia en momentos de
tribulación, para que nuestra acción de gracias se
convierta para nosotros u esplendoroso camino de
bendición y seamos testigos del poder inmenso de
tu amor en nuestras vidas. Amén.
58
59