Velasquez Pari Mariela

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGRONÓMICA
EXTRACTOS DE PLANTAS CON POTENCIAL NEMATICIDA EN

EL CONTROL DEL FALSO NEMATODO DEL NÓDULO DE LA
RAIZ (Nacobbus spp.) IN VITRO
TESIS
PRESENTADA POR:
MARIELA VELASQUEZ PARI
PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE:
INGENIERO AGRÓNOMO
MENCION: AGRO AMBIENTAL
PROMOCIÓN: 2010 - II
PUNO - PERÚ
2013
DEDICATORIA
A nuestro señor Jesucristo por guiar mis pasos en el logro de mi objetivo.
A la memoria de mi querido padre Martin Velásquez Suaña.
A mi madre natividad por el apoyo incondicional para mi objetivo.
A mi esposo Ludwig, a mi hijo Leonard y a mi hija Jazmin, por ser el motor y

motivo para salir adelante y triunfar juntos.
A mis hermanos y familiares, como testimonio al apoyo y comprensión que en

todo momento me brindaron, para la culminación del presente trabajo de
investigación.
MARIELA
AGRADECIMIENTOS
A la Universidad Nacional del Altiplano, en especial a la Facultad de Ciencias

Agrarias por mi formación profesional.
A los señores docentes de la Facultad de Ciencia Agrarias, por sus sabias

enseñanzas impartidas durante mi formación profesional.
Al D.Sc. Silverio Apaza Apaza, por su acertada dirección en la ejecución del

presente trabajo de investigación.
A los miembros de jurado revisor, M. Sc. Angel Cari Choquehuanca,

presidente; Ing. Humberto Serruto Colque, primer miembro; Mg. Ag. Marilu
Chanini Quispe, segundo miembro; por sus comentarios y sugerencias los
cuales enriquecieron el presente trabajo de investigación.
MARIELA
ÍNDICE GENERAL
Pág.
RESUMEN ....................................................................................................... 14
ABSTRACT ...................................................................................................... 15
INTRODUCCIÓN ............................................................................................. 16
CAPITULO I: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA, ANTECEDENTES Y
OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN ..................................... 19
1.1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .................................................... 19
1.2. ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIÓN .......................................... 21
1.3. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN ................................................... 24
1.3.1. Objetivo General ....................................................................... 24
1.3.2. Objetivos Específicos................................................................ 24
CAPITULO II: MARCO TEÓRICO, MARCO CONCEPTUAL E HIPÓTESIS
DE LA INVESTIGACIÓN ........................................................ 25
2.1. MARCO TEÓRICO................................................................................. 25
2.1.1. Nacobbus aberrans................................................................... 25
2.1.1.1. Biología de Nacobbus aberrans ................................. 25
2.1.1.2. Ubicación taxonómica ................................................ 26
2.1.1.3. Distribución geográfica ............................................... 27
2.1.1.4. Disminución de producción ........................................ 27
2.1.1.5. Hospederos ................................................................ 28
2.1.1.6. Síntomas .................................................................... 29
2.1.1.7. Control........................................................................ 30
2.1.2. Alternativas en el control de nematodos ................................... 30
2.1.3. Método para extraer juveniles del suelo ................................... 32

2.1.3.1. Método de la bandeja ................................................. 32
2.1.4. Plantas biosidas y repelentes ................................................... 33
2.1.5. Plantas nematicidas .................................................................. 36
2.1.5.1. Lechuga (Lactuca sativa L.) ....................................... 37
2.1.5.2. Tarwi (Lupinus mutabilis S.) ....................................... 40
2.2. MARCO CONCEPTUAL ........................................................................ 44
2.3. HIPÓTESIS DE LA INVESTIGACIÓN .................................................... 48
2.3.1. Hipótesis general ...................................................................... 48
2.3.2. Hipótesis especifica .................................................................. 48
CAPITULO III: METODO DE INVESTIGACIÓN............................................... 49
2.1. MATERIAL EXPERIMENTAL ................................................................. 49
2.2. METODOLOGÍA..................................................................................... 49
2.2.1. Fase de campo ......................................................................... 49
2.2.2. Fase de laboratorio ................................................................... 50
2.2.2.1. Separación de los extractos de las plantas con
propiedades nematicidas ........................................... 50
2.2.2.2. Obtención de los juveniles de Nacobbus spp............. 52
2.2.2.3. Aplicación de los extractos de plantas ....................... 53
2.3. ANALISIS ESTADISTICO ...................................................................... 53
2.3.1. Variables en estudio ................................................................. 53
2.3.1.1. Variable independiente .............................................. 53
2.3.1.2. Variable dependiente ................................................. 54
2.3.2. Tratamientos ............................................................................. 54
2.3.3. Diseño Experimental ................................................................. 55
CAPITULO IV: CARACTERIZACIÓN DEL AREA DE INVESTIGACIÓN ......... 57

CAPITULO V: EXPOSICIÓN Y ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS ................ 58
5.1. MORTALIDAD DE JUVENILES DEL FALSO NEMATODO DE LA
RAÍZ (Nacobbus spp.) CON LA APLICACIÓN DE DOS DOSIS DE
TRES EXTRACTOS DE PLANTAS CON POTENCIAL NEMATICIDA A
LOS 15 MINUTOS ................................................................................. 58
5.2. MORTALIDAD DE JUVENILES DEL FALSO NEMATODO DE LA RAÍZ
(Nacobbus spp.) CON LA APLICACIÓN DE DOS DOSIS DE TRES
EXTRACTOS DE PLANTAS CON POTENCIAL NEMATICIDA A LOS
30 MINUTOS ......................................................................................... 63
CONCLUSIONES ............................................................................................ 68
RECOMENDACIONES .................................................................................... 69
BIBLIOGRAFÍA ................................................................................................ 70
ANEXOS .......................................................................................................... 76
ÍNDICE DE CUADROS
Pág.
Cuadro 1. Potencial de plantas con propiedades biocidas reportadas en el
Perú................................................................................................. 35
Cuadro 2. Composición química de la lechuga por cada 100g de materia
seca................................................................................................. 40
Cuadro 3. Composición química del tarwi silvestre por cada 100g .................. 43
Cuadro 4. Plantas con propiedades nematicidas ............................................. 53
Cuadro 5. Tratamientos, concentración y dosis en estudio. ............................. 54
Cuadro 6. Tratamientos, repeticiones y unidades experimentales sin
aleatorizar. ...................................................................................... 54
Cuadro 7. Operacionalización de variables ...................................................... 55
Cuadro 8. Análisis de varianza para los factores en estudio ............................ 56
Cuadro 9. Análisis de varianza para la mortalidad de juveniles (Nacobbus
spp.) a los 15 minutos de su aplicacion con extracto de planta
de la lechuga, tarwi y tarwi silvestre al 15% y 40%. ........................ 59
Cuadro 10. Prueba de Duncan para el factor plantas nematicidas (A) a los
15 minutos de su aplicacion con extracto de planta de lechuga,
tarwi y tarwi silvestre al 15% y 40%. ............................................. 60
Cuadro 11. Prueba de Duncan para el factor dosis (B) a los 15 minutos
de su aplicación con extracto de planta de la lechuga, tarwi y
tarwi silvestre al 15% y 40%.......................................................... 61
Cuadro 12. Prueba de Duncan para la interacción de plantas nematicidas
(A) x dosis (B) a los 15 minutos de su aplicación con extracto de
planta de la lechuga, tarwi y tarwi silvestre al 15% y 40% ............ 62

spp.) a los 30 minutos de su aplicación con extracto de planta
de la lechuga, tarwi y tarwi silvestre al 15% y 40% ....................... 64
Cuadro 14. Prueba de Duncan para el factor plantas nematicidas (A) a los
30 minutos de su aplicación con extracto de planta de la
lechuga, tarwi y tarwi silvestre al 15% y 40% ............................. 65
Cuadro 15. Prueba de Duncan para el factor dosis (B) a los 30 minutos
de su aplicación con extractos de plantas de lechuga, tarwi
y tarwi silvestre al 15% y 40% ....................................................... 65
Cuadro 16. Prueba de Duncan para la interacción de plantas nematicidas
(A) x dosis (B) a los 30 minutos de su aplicación con extractos
de plantas de lechuga, tarwi y tarwi silvestre al 15% y 40% ......... 66
Cuadro 17. Evaluación de mortalidad con extractos de plantas de lechuga,
tarwi y tarwi silvestre al 15% y 40% a los 15 minutos de
aplicación (datos reales). ............................................................. 76
Cuadro 18. Porcentaje de mortalidad con extractos de plantas de lechuga,
aplicación (datos transformados Y= x  1 ). ............................... 77

aplicación (datos transformados Y= x 1 ). ................................ 78

ÍNDICE DE FIGURAS
Pág.
Figura 1. Montar el equipo tal como se muestra en la siguiente fotografía ...... 50
Figura 2. Destilación de arrastre por vapor ...................................................... 51
Figura 3. Ubicación donde se llevó a cabo la investigación. ............................ 57
Figura 4. Mortalidad de juveniles con extracto de planta de la lechuga, tarwi
y tarwi silvestre al 15% y 40% a los 15 minutos de aplicación. ........ 62
Figura 5. Mortalidad de juveniles con extracto de plantas de lechuga, tarwi
y tarwi silvestre al 15% y 40% a los 30 minutos de aplicación. ......... 67
Figura 6. Equipo para la obtención de aceites esenciales. .............................. 79
Figura 7. Planta nematicida en estudio (Lechuga). .......................................... 79
Figura 8. Planta nematicida en estudio (Tarwi). ............................................... 80
Figura 9. Planta nematicida en estudio (tarwi silvestre). .................................. 80
Figura 10. Proceso de Obtención del extracto del tarwi. .................................. 81
Figura 11. Obtención del extracto de lechuga. ................................................. 81
Figura 12. Resultado del extracto de planta obtenido. ..................................... 82
Figura 13. Extractos de plantas obtenidos de Lechuga, Tarwi cultivado y
Tarwi silvestre. ................................................................................ 82
Figura 14. Obtención de los juveniles, empleando el método modificado
de Baermann. .................................................................................. 83
Figura 15. Muestra de suelo 50g, para obtención de juveniles. ....................... 83
Figura 16. Tratamiento en estudio. .................................................................. 84
Figura 17. Aplicación de los extractos de plantas en estudio. .......................... 84
Figura 18. Aplicación de las soluciones en estudio. ......................................... 85

Figura 19. Juveniles de Nacobbus spp. Muertos. ............................................ 85
Figura 20. Nacobbus spp. Muerto por extracto de tarwi silvestre al 40%
dosis en 30 min. .............................................................................. 86

ÍNDICE DE ACRÓNIMOS
CV : Coeficiente de variación
D.C.A. : Diseño completo al azar
F. de V. : Fuente de variación
G.L. : Grados de libertad
L. : Linneo
m.s.n.m. : metros sobre el nivel del mar
min. : minutos
p/v : porcentaje en volumen
spp. : todas las especies individuales dentro de un género
* : Significativo
** : Altamente significativo
RESUMEN
El trabajo se realizó en el laboratorio de Fitopatología de la Facultad de
Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional del Altiplano, teniendo una
duración de ocho meses siendo el objetivo general : Evaluar el efecto letal in
vitro del extracto de plantas de lechuga (Lactuca sativa L.), Tarwi (Lupinus
mutabilis Sweet) y Tarwi silvestre (Lupinus chlorilepis) sobre el falso nematodo
del nódulo de la raíz (Nacobbus spp.) y como objetivos específicos: a)
Determinar el extracto de plantas y su dosis de aplicación más efectiva para el
control del falso nematodo del nódulo de la raíz ( Nacobbus spp.) in vitro y b)
Detectar el tiempo de mortalidad óptimo de juveniles del falso nematodo del
nódulo de la raíz (Nacobbus spp.) a la aplicación de los extracto de plantas in
vitro. Se utilizó el Diseño Experimental Completamente al Azar (D.C.A), con un
arreglo factorial de tres plantas con propiedades nematicidas por dos dosis de
aplicación, con un total de seis tratamientos, con tres repeticiones, haciendo un
total de 18 unidades experimentales. Antes de realizar los análisis de varianza,
los datos originales fueron transformados a la función de x  1 , para
homogenizar las varianzas debido a que estos constituyen valores de contadas
(Calzada, 1996). Llegando a las siguientes conclusiones: 1. El extracto de
plantas que tuvo mejor resultado en la mortalidad de nematodos juveniles de
Nacobbus spp. fue del tarwi silvestre al 40% en las dos evaluaciones
realizadas. 2. El mejor tiempo en mortalidad de nematodos juveniles de
Nacobbus spp. fue a los 30 minutos de aplicación del extracto de plantas de
tarwi silvestre al 40%.
Palabras clave: Extracto de planta, juvenil, mortalidad y dosis.
14
ABSTRACT
The work was carried out in the Phytopathology laboratory of the Faculty of
Agrarian Sciences of the National University of the Altiplano, with a duration of
eight months being the general objective: To evaluate the in vitro lethal effect of
lettuce plant extract (Lactuca sativa L.), Tarwi (Lupinus mutabilis Sweet) and
Tarwi wild (Lupinus chlorilepis) on the false nodule nematode of the root
(Nacobbus spp.) And as specific objectives: a) To determine the extract of
plants and its dose of more effective application for the (Nacobbus spp.) In vitro
and (b) to detect the optimal mortality time of juveniles of the false root nodule
nematode (Nacobbus spp.) To the application of in vitro plant extracts. The
Experimental Design Completa al Azar (D.C.A) was used, with a factorial
arrangement of three plants with nematicidal properties by two application rates,
with a total of six treatments, with three replications, making a total of 18
experimental units. Before performing the analysis of variance, the original data
were transformed to the function of, to homogenize the variances because
these are counted values (Calzada, 1996). Coming to the following conclusions:
1. The extract of plants that had better result in the mortality of juvenile
nematodes of Nacobbus spp. Was from the wild tarwi to 40% in the two
evaluations carried out. 2. The best time in mortality of juvenile nematodes of
Nacobbus spp. Was at 30 minutes of application of the extract of plants of wild
tarwi to 40%.
Key words: Plant extract, juvenile, mortality and dose.
15
INTRODUCCIÓN
Para el control de los nematodos fitoparásitos a nivel mundial se utilizan
mayormente nematicidas químicos, con el consiguiente riesgo del medio
ambiental. Por lo que se hace necesario la búsqueda y el desarrollo de
productos menos tóxicos y más específicos, como es el caso de los
bioplaguicidas basados en productos naturales, en este caso los extractos de
plantas los cuales constituyen una alternativa (Agrios, 1997).
Es cierto que para combatir las plagas se puede utilizar tecnología avanzada;
pero, se debe tener en cuenta que las técnicas y los métodos utilizados
favorezcan a la salud de los seres humanos y también a la salud de los
animales y vegetales que sirven como alimento del hombre. Muchos
agroquímicos, tales como los fertilizantes y plaguicidas sintéticos de origen
orgánico e inorgánico, aplicados de manera irresponsable e indiscriminada
propician el surgimiento de la resistencia en las principales plagas; al mismo
tiempo que, rompen el equilibrio de los diferentes agroecosistemas; además,
que determinan la bioacumulación y poder residual prolongado causando
contaminación del medio ambiente, de los vegetales comestibles, del agua, de
la atmósfera y de los productos extraídos de animales como la leche, carne,
huevos, mantequilla e intoxicación a los usuarios principalmente (Duke et al.,
2010).
Las observaciones de los agricultores sobre el comportamiento de ciertas
plantas en el campo, especialmente el de plantas vecinas, como la liberación
16
de exudados a través de sus raíces, lixiviación, volatilización y descomposición
de los residuos de las plantas en el suelo, fue probablemente el principio de su
utilización con dichos fines, experiencias que fueron el principio e inicio de su
aplicación en macerados, fermentados, infusiones y posteriormente los
hidrolatos y procesos de hidrodestilación, los que permitieron a los
investigadores el descubrimiento de más de 10 000 metabolitos secundarios
con efectos biocidas (Duke et al., 2010).
Por otro lado; estas plantas adecuadamente procesadas no sólo sirven como
nematicidas sino también como abono radicular, foliar, como funguicida
además tienen propiedades hormonales que permiten un mejor crecimiento del
cultivo. Si su uso es constante mantienen un control sobre enfermedades e
insectos dejándolos al mínimo su presencia, no erradican a los insectos
benéficos que ayudan al control de plagas, mantienen el suelo en buenas
condiciones aumentando su fertilidad y finalmente no contiene ningún tipo de
químico que afecte nuestra alimentación (Duke et al., 2010).
Sabiendo que en la actualidad el control del falso nematodo del nódulo de la
raíz, se hace cada vez más difícil y no existiendo productos que ofrezcan
resultados satisfactorios para disminuir la incidencia del ataque del mismo en
diferentes cultivos y que la población de este fitopatógeno se regenera
rápidamente, es que se ha optado por realizar el presente trabajo de
investigación con la finalidad de generar conocimientos para reducir el grado de
ataque de este fitoparásito. Implementando un determinado método de control,
en el cual se trata sencillamente de usar plantas del cual obtendremos extracto
17
con el método adecuado para la obtención, con el cual vamos a disminuir el
ataque a los diferentes cultivos que son afectados por este nematodo,
sabiendo así cuál de ellos es más favorable.
18
CAPITULO I
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA, ANTECEDENTES Y
OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN
1.1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Los nematodos parásitos de plantas con más de 1 400 especies descritas
constituyen uno de los grupos más importantes de organismos que habitan el
suelo, y que a menudo se tornan en uno de los problemas fitosanitarios más
difíciles de controlar en desmedro de la producción agrícola y por ende de la
economía agraria. Las pérdidas de cosecha anuales estimadas debidas a
nematodos parásitos de plantas en la producción agrícola mundial se aproxima
al 11% y en términos absolutos las pérdidas económicas anuales se calculan
en torno a los 80 billones de dólares (Agrios, 1997).
Los nematodos son denominados enemigos ocultos o invisibles debido a su
pequeño tamaño ya que, cuando su efecto se hace evidente, el nivel
poblacional de la plaga es alto. Estos organismos no solo debilitan las plantas y
disminuyen los rendimientos por su acción directa sobre las raíces, sino que
actúan también en complejos etiológicos que involucran a hongos, bacterias y
virus (Karssen y Moens, 2006).
Los principales nematodos que atacan al cultivo de la papa en la zona andina
de Bolivia son Nacobbus aberrans, conocido como el "rosario de la papa" y
Globodera spp. o "nematodo quiste de la papa". Estos nematodos
19
individualmente o en interacción causan pérdidas del 30 al 70% en los
rendimientos del cultivo de papa en Bolivia (Franco, 1994).
La producción del cultivo de papa en el altiplano peruano es de gran
importancia para los pequeños y medianos agricultores, debido a que es una
fuente de alimentación, trabajo e ingresos. Por otro lado, la intensa actividad
agrícola dedicada al cultivo de papa en el altiplano peruano, ha ocasionado que
sus campos de producción sean considerados como zonas endémicas de
numerosas plagas y enfermedades causando pérdidas en el rendimiento y
calidad del producto.
De los problemas expuestos, surgen las siguientes interrogantes que
intentamos despejar con la presente investigación:
- ¿Cuál será el efecto letal in vitro del extracto de lechuga (Lactuca sativa L.),
Tarwi (Lupinus mutabilis Sweet) y Tarwi silvestre (Lupinus chlorilepis) sobre
el falso nematodo del nódulo de la raíz (Nacobbus spp?)?
- ¿Cuál será el extracto de planta y su dosis de aplicación más efectiva para
el control in vitro del falso nematodo del nódulo de la raíz (Nacobbus
spp?)?
- ¿Cuál será el tiempo de mortalidad óptimo de juveniles del falso nematodo
del nódulo de la raíz (Nacobbus spp?) a la aplicación in vítro de los
extractos de plantas?
20
1.2. ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIÓN
Investigaciones recientes indican que extractos de plantas que contienen
aceites esenciales muestran mayor actividad fungicida, sin embargo, en los
últimos años se han realizado estudios con la intención de evaluar la actividad
fungicida de otros metabolitos secundarios como son los alcaloides, los cuales
se acumulan en cerca del 20% de todas las especies de plantas y se ha
aclarado la estructura química aproximadamente de 12,000. Por la importancia
que representan los alcaloides quinolizidinicos (AQ) en las especies del género
Lupinus (Fabaceae) como defensa química contra patógenos (hongos,
bacterias, nematodos, virus), se han realizado investigaciones con la intensión
de evaluar su actividad contra organismos fitopatógenos. Existen antecedentes
sobre la actividad fungicida in vitro de alcaloides puros (graminia y esparteína)
obtenidos de lupinus amargos sobre hongos, en los que se observó mayor
actividad con graminia en el caso de la esparteína, solo mostro cierto efecto
(Montes y Belmont, 1996).
Varas et al., (2008), al realizar el trabajo denominado “Optimización de dosis de
extractos de Bidens pilosa L. para el control de Meloidogyne incognita Kofoid &
Chitwood 1949 in vitro”. Cuyo objetivo fue determinar la dosis óptima de
extractos de Bidens pilosa L. (amor seco) para el control de Meloidogyne
incognita L, llego a la conclusión que la dosis que presento mejores resultados
fue la dosis del 10% con un porcentaje de efectividad de 98,33%.
El suelo biofumigado con brócoli, coliflor y nabo es eficaz en el control del
nematodo Meloidogyne javanica en invernadero, ya que reduce tanto el número
21
de agallas, el número de huevos presentes en raíces de la planta. La
incorporación de material vegetal en el suelo fue también eficiente en relación
con la ganancia de masa de los brotes, en comparación con el testigo, tanto en
lo que respecta a los nematodos de control, sin nematodos, o incluso en el
suelo sin la presencia de la incorporación de nematodos, las coles promueven
un aumento en la masa de las plantas. El trabajo abre una nueva línea de
investigación y, a continuación, debe llevarse a cabo experimentos con
diferentes dosis de diferentes períodos de las plantas y tratamiento de suelos
(Wania, et al., 2010).
Xiphinema index Thorne and Allen es un nematodo ectoparásito
económicamente importante en la vid (Vitis vinifera L.) en Chile, como
patógeno de las raíces y como vector del "virus de la hoja en abanico" (GFLV)
en vides. El control tradicional se ha hecho básicamente con productos
químicos, de efectos erráticos y muy cuestionados por sus efectos ambientales.
El objetivo de este trabajo fue evaluar en vides cv. Thompson Seedless el
efecto nematicida de ocho plantas antagónicas en el control de Xiphinema
index. Las plantas antagónicas se cultivaron en líneas de plantación y se
incorporaron como abono verde. Las especies ensayadas fueron: raps
(Brassica napus L.), caléndula (Calendula officinalis L.), cosmos (Cosmos
bipinnatus Cav.), gaillardia (Gaillardia picta L.), lupino (Lupinus albus L.),
clavelón (Tagetes patula L.), tomillo (Thymus vulgaris L.), zinia (Zinnia elegans
Jacq.). El efecto de estas especies se comparó con tres testigos: testigo
absoluto (sólo vides); testigo químico (Fenamiphos, 4 kg i.a. ha-1); y cebada
(Hordeum vulgare L.) testigo planta sin antecedentes nematicidas. La acción
22
nematicida de las especies ensayadas se evaluó determinando las densidades
poblacionales del nemátodo en 250 cm3 de suelo en: 1) antes del
establecimiento de los cultivos; 2) previo a su incorporación al suelo, a los dos
meses del establecimiento; 3) 3 meses después de la incorporación. El mejor
resultado se obtuvo con el establecimiento e incorporación del raps (Brassica
napus), el cual redujo significativamente las poblaciones de Xiphinema index
(P<0,05) en comparación con el testigo químico. El resto de las especies
vegetales no fueron efectivas en el control de Xiphinema index (Aballay e
Insungay, 2009).
Gómez et al., (2009), al realizar el trabajo de investigación denominado
“Efectividad de Lactuca sativa usada como planta trampa de Meloidogyne spp.
en la producción protegida de hortalizas” sostuvieron que: El objetivo de este
trabajo es evaluar la efectividad de la lechuga (Lactuca sativa var. Black
Seeded Simpson) como planta trampa de Meloidogyne spp., en una instalación
de producción protegida de hortalizas. Las plantas de lechuga se trasplantaron
a una densidad de siembra de 49 plántulas. m2-1 y se cosecharon
conjuntamente con el sistema radical a los 25-27 días. El nivel de infestación
inicial y final se determinó a través de la técnica de bioensayo con el uso de
tomate (Solanum lycopersicum var. Campbell-28). Los resultados evidenciaron
que con el empleo de esta táctica fue posible reducir el índice de agallamiento
de las plantas en 1,5 grados, lo que refleja una disminución en el nivel de la
población de los nematodos en el suelo.
23
1.3. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN
1.3.1. Objetivo General
Evaluar el efecto letal in vitro del extracto de lechuga (Lactuca sativa L.), Tarwi
(Lupinus mutabilis Sweet) y Tarwi silvestre (Lupinus chlorilepis) sobre el falso
nematodo del nódulo de la raíz (Nacobbus spp.)
1.3.2. Objetivos Específicos
- Determinar el efecto del extracto vegetal y su dosis de aplicación más
efectiva para el control del falso nematodo del nódulo de la raíz (Nacobbus
spp.) in vitro
- Detectar el tiempo de mortalidad óptimo de juveniles del falso nematodo del
nódulo de la raíz (Nacobbus spp.) a la aplicación de los extractos in vitro.
24
CAPITULO II
MARCO TEÓRICO, MARCO CONCEPTUAL E HIPÓTESIS DE LA
INVESTIGACIÓN
2.1. MARCO TEÓRICO
2.1.1. Nacobbus aberrans
2.1.1.1. Biología de Nacobbus aberrans
En el ciclo biológico de Nacobbus aberrans la primera muda de la cutícula
ocurre dentro del huevo, del cual emerge el segundo estadio larval y penetra en
las raíces donde llega hasta el cuarto estadio. Algunas larvas salen y entran en
las raíces hasta completar su ciclo de vida. Los machos quedan en el suelo,
pero la hembra se establece nuevamente en la raíz y produce nódulos. La
hembra tiene forma ensanchada pero más alargada que Meloidogyne, la parte
posterior de su cuerpo retiene huevos, pero también los depositan en una masa
gelatinosa secretada por ella. Las larvas y hembras jóvenes también penetran
en los tubérculos, pero no forman nodulaciones. El ciclo puede completarse en
25 a 50 días dependiendo de la temperatura. (Canto, 1999).
La hembra adulta es piriforme o esferoidal, de color blanco brillante y mide
aproximadamente un milímetro de diámetro; pudiendo ser vista con una lupa
común. Vive dentro del tejido de las raíces, donde se desarrolla y se alimenta
mediante un fino estilete bucal, con el cual perfora las células de la raíz. Esto
provoca una reacción en la zona afectada, formándose así los llamados
“nudos, nódulos o agallas radiculares”. Cuando alcanza la madurez sexual
25
pone sus huevos dentro de una masa gelatinosa, la cual esta generalmente
dirigida hacia la parte externa de la raíz, luego de la madurez eclosionan los
huevos, salen cientos de larvas que tienen forma de anguilulas pequeñísimas.
A estas se les llama “larvas infestantes” ya que de inmediato emigran en busca
de nuevos tejidos o raíces que infectar. El macho es vermiforme y mide hasta
dos milímetros de largo y no penetra al interior de la raíz. Crece y se alimenta
desde el exterior de la raíz. (Garmendia, 1994).
2.1.1.2. Ubicación taxonómica
Se propuso el género Nacobbus basados principalmente en el pronunciado
dimorfismo sexual, superposición de la glándula esofágica dorsal al intestino y
por el engrosamiento o hinchazones producidos en las raíces que los alojan.
(Thorne y Allen, 1944).
La Sociedad Española de Fitopatología (2000), ubica taxonómicamente al
“falso nematodo del nódulo de la raíz” o “nematodo del rosario” como sigue:
Phylum : Nemata
Clase : Secernentea
Subclase : Tylenchia
Orden : Tylenchida
Suborden : Tylenchina
Superfamilia : Hoplolaimoidea
Familia : Nacobbidae
Género : Nacobbus
Especie : Nacobbus aberrans
26
2.1.1.3. Distribución geográfica
Nacobbus aberrans, denominado también como “falso nematodo del nudo”,
“nematodo rosario de la papa”, “thola sapi” ò “kuran kura” (PROINPA, 1993).
Las especies de Nacobbus han sido reportadas en Argentina, Bolivia, Chile,
Ecuador, India, México, Perú, Rusia y Estados Unidos, bajo diversas
condiciones ecológicas, que permiten sospechar la presencia de razas y en
algunos casos únicamente como resultado de investigación, tal como sucedió
en Inglaterra y Holanda (Quimi, 1981).
En nuestro país, el falso nematodo del nudo se encuentra disperso en el
Callejón de Huaylas, Huamachuco, Moquegua, Cajamarca, Puno y algunas
partes del Valle del Mantaro (Untiveros, 1986).
Al realizar un estudio del grado de ataque del “falso nematodo del nudo”
Nacobbus spp. en la provincia de Chucuito, concluye que en los distritos de
Pomata, Juli e Ilave presentan un mayor grado de infestación radicular,
mientras que en Yunguyo, Desaguadero y Zepita, la infestación es menor
(Astorga, 1974).
2.1.1.4. Disminución de producción
Nacobbus aberrans Thorne & Allen, es uno de los nematodos dañinos de las
plantas, caracterizando por su fuerte estilete, perforando los tejidos de los
vegetales con la ayuda de una secreción enzimática denominado saliva, una
vez introducido el estilete, el esófago actúa como una bomba, para extraer las
27
sustancias del protoplasma celular del huésped, también indica que las plantas,
segregan un agente atractivo y otro repelente, y que el balance entre ambos
determinan el que la planta atraiga o rechace a determinado nematodo, el
incremento de la sanidad de la población de nematodos tiene lugar cuando la
planta hospedera permite un índice de reproducción que excede al de la
mortalidad del nematodo (Yepez, 1970).
Para el caso específico de Nacobbus aberrans, la infección al sistema radicular
de la planta se da a través del segundo estadio juvenil, así como también por
las hembras adultas (Inserra, 1983).
2.1.1.5. Hospederos
El nematodo del nudo se encuentra en plantas como papa, tomate, olluco,
mashua, nabo silvestre, quinua y malezas (Untiveros, 1986).
Evaluaron en invernadero y laboratorio la reacción a Nacobbus aberrans, de 40
entradas de Oxalis tuberosa (oca), 17 de Ullucus tuberosus (papalisa) y 8 de
Tropaeolum tuberosum (izaño) existentes en el banco de germoplasma del
Programa de Investigación de la papa. De las entradas de oca, una sola
presento nódulos en su sistema radicular, mediante un análisis de laboratorio
de las otras 39 (método de la licuadora y recolección en tamices) 38
confirmaron su reacción negativa, sin embargo, una de ellas resulto ser
asintomática, ya que presentó invasión de estados vermiformes del nematodo.
En la papalisa, 15 presentaron nódulos y dos fueron asintomáticas ya que en
laboratorio también presentaron invasión de estados vermiformes. En el isaño,
28
una entrada presento nódulos y de las restantes siete, dos no fueron
hospedantes del nematodo y ocho presentaron reacción asintomática.
(Balderrama et al., 1994).
Es originario de la zona andina de América del Sur. En la actualidad se
encuentra presente en EEUU atacando remolacha azucarera, brócoli y repollo.
En México ataca maíz, poroto, trigo, repollo, girasol, papa, pimiento y tomate.
También está presente en Perú, Bolivia, Chile y Ecuador. En Rusia, India,
Inglaterra y Holanda ataca las producciones de tomate y pimiento en
invernadero. En Argentina se lo citó por primera vez en 1974 en Tafí del Valle,
Tucumán. Actualmente se encuentra presente en cultivos comerciales de papa,
pimiento y tomate en las provincias de Buenos Aires, Santa Fé, Mendoza, San
Juan, Catamarca, Salta, Jujuy, Córdoba y la Rioja (e.campo.com, 2005).
2.1.1.6. Síntomas
En la parte aérea de la planta no existe ningún síntoma que caracterice el
ataque de Nacobbus, ya que estos pueden ser confundidos con una falta de
turgencia en la planta evidenciada por un marchitamiento, que bien podría
deberse a la poca humedad del suelo o en un reducido desarrollo de la planta
por una supuesta deficiencia de nutrientes o un crecimiento radicular pobre
como respuesta a problemas físicos del suelo. Los síntomas causados por este
nematodo en las raíces, son notorios por la presencia de ensanchamientos,
nódulos o agallas, cuyo tamaño dependerá tanto del tamaño de la raíz como de
la raza de nematodo y su densidad poblacional en el suelo (Franco et al.,
1992).
29
2.1.1.7. Control
Para el caso del Género Nacobbus el sistema de rotación de cultivos no es tan
eficiente por el amplio rango de hospederos que posee este nematodo,
incluyendo malezas comunes (Otazú et al. 1986).
Debido a la amplia gama de hospedantes de este nematodo, los sistemas de
control cultural como la rotación de cultivos, barbechos, descanso, etc., se ven
enormemente dificultados (PROINPA, 1991).
El Ministerio de Agricultura (1972), recomiendan para el control de Nacobbus lo
siguiente:
- Temprana y adecuada preparación del terreno.
- Rotación con cereales y leguminosas que deben estar acompañado con la
eliminación o control de plantas huacchas de papa y malezas hospedantes.
- Uso de materia orgánica.
- Uso de cultivares resistentes.
- Uso de semilla sana.
- Uso de Fertilizantes, específicamente fosforados y potásicos.
- Desinfección de tubérculos - semilla.
- Uso adecuado de nematicidas.
- Quema de raíces con nódulos.
2.1.2. Alternativas en el control de nematodos
Tradicionalmente el control de los nematodos fitopatógenos se ha basado en el
uso de nematicidas químicos, productos actualmente muy cuestionados por
30
sus efectos adversos a los seres vivos y a los agroecosistemas, además de su
alto costo. Por lo tanto, se debe investigar otras alternativas de control que
sean ecológicamente benignas y sustentables. Una de estas alternativas está
basada en la actividad alelopática que presentan algunas plantas, lo que ha
suscitado un creciente interés en los últimos años (Hasan, 1992; Halbrendt,
1996).
Varias especies de plantas liberan compuestos alelopáticos a través de la
volatilización, o de exudación de las raíces, o de la disolución y
descomposición de las plantas o residuos. Numerosos de estos compuestos
son nematóxicos o nematostáticos sobre distintas especies de fitoparásitos.
Estos compuestos pueden ser biocidas, o interferir de otras formas en el ciclo
de vida (Chitwood, 1992; Sukul, 1992).
Se han reportado numerosas especies de plantas, representando varias
familias botánicas, que producen compuestos nematicidas. En la literatura se
las denomina como plantas nematicidas o como plantas antagónicas a los
nematodos. En agricultura es factible usar algunas de estas plantas
antagónicas en el manejo de nematodos, tanto en rotaciones, como en cultivos
en cobertura, entre hileras, enmiendas, o abono verde en suelos cultivables
(Halbrendt, 1996). Así, si el suelo se maneja mediante coberturas vegetales
con propiedades nematicidas, además de controlar a los nematodos y otras
plagas, se contribuye a evitar la erosión y compactación del suelo, a favorecer
la diversidad biológica y controlar el crecimiento de malezas.
31
2.1.3. Método para extraer juveniles del suelo
2.1.3.1. Método de la bandeja
Canto (1988), cita un método para la extracción de juveniles (J2) a partir de
raíces o suelo al cual le denomina “método de la bandeja”, este viene a ser una
modificación del método del embudo de Baermann, el mismo que requiere de
los siguientes materiales.
 Bandejas redondas.
 Bandejas con malla o tamiz.
 Papel facial o papel higiénico.
 Beaker de 100 ml o 250 ml.
 Suelo o raíces.
 Balanza.
 Pipeta.
 Tamiz de 400 meses.
Procedimiento:
a. Colocar 500cc de suelo o 5 g de raíces (picadas) en la bandeja con malla o
tamiz en la que previamente se ha colocado el papel facial. Esta bandeja
se coloca sobre la bandeja sin tamiz, a la cual se le echa agua con una
pipeta por un costado al tamiz sin malla, hasta que aparezca una película
de agua en la superficie de la muestra de suelo o raíz (picadas) y se deja
por 48 horas. La frecuencia de recolección de los nematodos es cada dos
días, después de 8 días debe haberse recogido un 80% del total de
nematodos.
32
b. Cada 48 horas, se retira la bandeja con tamiz. Para recoger la suspensión
de la bandeja sin tamiz donde presumiblemente están los nematodos esto
pasando a través del tamiz de 400 mesh.
c. Se recoge los nematodos del tamiz de 400 mesh en un beaker para llevarlo
a 100 ml de suspensión.
d. Homogenizar y tomar alícuotas de 1 a 5 ml Para efectuar el contaje de los
nematodos (J2) en el estereoscopio o microscopio de disección.
2.1.4. Plantas biosidas y repelentes
Plantas biosidas y repelentes son vegetales (raíz, tallo, hojas, flores y semillas)
que por sus características propias de astringentes (constreñir, etc.), grado de
pulgencia (picante, repugnante), amargos y productos químicos de su esencia
controla todo el complejo de plagas y enfermedades de cultivos dependiendo
de su variedad y dosis correspondientes estas plantas no consumimos en la
dieta alimentaria y en su mayoría la calificamos como malas hierbas, otras son
medicinales y la mayoría son resistentes a toda plaga y enfermedades. Las
plantas biosidas y repelentes procesadas sirven de abono, de alimento
radicular y foliar; son funguicidas (mata hongos) e insecticidas (mata insectos);
tienen propiedades hormonales (excitadores) y otros reguladores de
crecimiento, etc. (Higidio, 2006).
La utilización de las plantas con propiedades biosidas es un instrumento
tecnológico importante dentro del marco del manejo ecológico de las plagas. La
existencia de más de 300 especies de plantas inventariadas en el Perú entre
33
nativas e importadas son potencialmente útiles para ser usadas con fines de
manejo de plagas (Arning.et al., 2000).
En el cuadro 1, podemos observar el abanico de posibilidades para que esta
alternativa pueda ser desarrollada. Hasta el momento los mayores trabajos han
estado orientados a impulsar el rescate y la validación técnica de una serie de
estas plantas. Existen plantas con propiedades biocidas inventariadas en el
Perú, entre nativas e introducidas, potencialmente útiles para el manejo de
poblaciones de insectos plaga (Arning.et al., 2000).
Además en el cuadro 1, podemos observar las posibilidades de desarrollo que
tiene esta alternativa. Hasta el momento los mayores trabajos han estado
orientados a impulsar el rescate y validación técnica de una serie de ellas. Las
experiencias realizadas con alguna de estas especies como barbasco
(Lonchocarpus nicou), melia (Melia azaderach), cardo santo (Argemone
subfusiformis), marco (Ambrosia peruviana), muña (Minthostachis spp.),
eucalipto (Eucalipthus sp.), lantana (Lantana cámara); tabaco (Micotoriana sp.)
y últimamente la introducción del árbol del Neem, han demostrado un nivel de
eficiencia para regular una serie de plagas (Arning.et al., 2000).
34
Cuadro 1. Potencial de plantas con propiedades biocidas reportadas en el
Perú.
Número de especies
Propiedad de la planta
Reportadas
Insecticidas 117
Insecticidas de contacto 12
Inhibidores de la alimentación 46
Reguladores de crecimiento de
176
insectos
Repelentes 72
Atrayentes 10
Acaricidas 09
Garrapaticidas 13
Nematicidas 24
Moluscucidas 02
Raticidas 03
Fungicidas 38
Herbicidas 02
Fumigantes 01
TOTAL 350
Fuente: Arning et al., 2000.
Existen otras plantas como la «cola de caballo» (Equisetum sp.) que en
algunas zonas del Perú se utilizan para regular la presencia de Rancha
(Phytophthora infestans) en el cultivo de papa, por su alto contenido de sílice
que ayuda a neutralizar la multiplicación de las hifas del hongo. En esta línea
se está trabajando también con la identificación de las plantas con propiedades
nematicidas, como el uso de «crotolaria» (Crotolaria sp.). Los reportes sobre
los efectos del «cardo santo» para regular la presencia de gusanos nematodos
muestran otra de las bondades de esta planta. Por otro lado, la utilización de
extractos de “tonuz” (Pluchea chingoyo), planta silvestre costeña en el control
35
de la polilla de la papa (Phthorimaea operculella) en almacén, ha demostrado
su eficacia. También son muy importantes el uso de eucalipto (Eucalipthus sp.),
muña (Minthostachis spp.) y lantana (Lantana camara), reportado por el
Colegio de Ingenieros del Perú, para controlar las plagas en los almacenes de
papa. Evidentemente existen muchas experiencias más y los pasos que
actualmente se están dando son iniciales, seguramente en el camino iremos
encontrando alternativas competitivas y de gran impacto para manejar
ecológicamente nuestros sistemas de producción (Gomero, 2002).
2.1.5. Plantas nematicidas
Se han reportado numerosas especies de plantas, representando varias
familias botánicas, que producen compuestos nematicidas. En la literatura se
las denomina como plantas nematicidas o como plantas antagónicas a los
nematodos. En agricultura es factible usar algunas de estas plantas
antagónicas en el manejo de nematodos, tanto en rotaciones, como en cultivos
en cobertera, en entre hileras, enmiendas, o abono verde en suelos cultivables
(Halbrendt, 1996). Así, si el suelo se maneja mediante coberturas vegetales
con propiedades nematicidas, además de controlar a los nematodos y otras
plagas, se contribuye a evitar la erosión y compactación del suelo, a favorecer
la diversidad biológica y controlar el crecimiento de malezas.
Las plantas antagónicas más estudiadas en los sistemas de cultivos son
especies del género Tagetes y otras Asteráceas, e.g., especies de Cosmos,
Gaillardia, Zinnia y Brassicáceas (Crucíferas) como el raps (Brassica napus L.),
mostaza (Sinapis alba L.), rábano forrajero (Raphanus sativus L.) (Halbrendt
36
1996). Sin embargo, no hay reportes referentes al control de Xiphinema index
mediante plantas antagónicas en estudios de campo, aunque si en estudios in
vitro, donde extractos de numerosas plantas demostraron ser tóxicos a este
nematodo.
2.1.5.1. Lechuga (Lactuca sativa L.)
2.1.5.1.1. Origen
Maroto (1989), menciona que Vavilov pensaba que el origen de la lechuga
había que situarlo en el cercano oriente, hoy en día los botánicos no se ponen
de acuerdo al respecto, por existir un segundo antecesor de la lechuga
(Lactuca sativa L.) que puede encontrarse en estado silvestre en áreas
templadas.
Toovey (1983), indica que su origen no parece estar bien definido. Arguye que
es originaria de Europa meridional, además sostiene la teoría de que su origen
está en Asia y concretando más aún, en la India. Es una planta anual cuyo
cultivo se remonta a una antigüedad de 2 500 años.
Dueñas (1978), manifiesta que el cultivo de la lechuga en el Perú fue
introducido por lo españoles durante los primeros años de la conquista, ya que
los pobladores del antiguo Perú no lo conocían posiblemente los
conquistadores junto con Pizarro trajeron diversas variedades tanto de España
como de otros países de Europa.
37
La planta de lechuga, conocida científicamente como Lactuca sativa tiene
dentro de su composición una gran variedad de sustancias. La lechuga se
caracteriza por tener dentro de sus componentes varios tipos de sales
minerales, vitaminas y nutrientes. Debido a esto resulta ser un alimento con
interesantes propiedades nutritivas.
2.1.5.1.2. Taxonomía y morfología
Maroto (1989), ubica su posición taxonómica de la lechuga de la siguiente
manera:
Reyno : Vegetal
Division : Spermatophyta
Subdivision : Angiospermae
Clase : Dicotiledoneae
Subclase : Metaclamideas
Orden : Campanulales
Familia : Asteraceae
Subfamilia : Cichoroideae
Género : Lactuca
Especie : Lactuca sativa
2.1.5.1.3. Descripción botánica
Peña (1955), detalla que la lechuga es una planta anual, que presenta una raíz
pivotante, su tallo contiene látex; al inicio es corto con una roseta de hojas
grandes, en la fase reproductiva la planta desarrolla el tallo floral que llega a 1
metro o más de altura. Sus hojas son alternas y jugosas más o menos anchas
38
y alargadas en forma de espátula, oval o redonda, de color verde uniforme o
moteado con matices amarillentos o rojo violáceo de superficie liza o rugosa,
de bordes lobulados con margen entero espínuloso o aserrado. Las flores son
perfectas y liguladas de pétalos amarillos o blanco amarillentos, con cinco
dientes en el ápice, con cinco estambres adheridos a la corola cuyas anteras
son sagitadas. El ovario está constituido por dos carpelos con un estilo simple y
estigma lobulado. La inflorescencia es terminal las siguientes son axilares el
fruto es un aquenio de color blanco amarillento, blanco castaño o casi negro.
Parodi (1971), indica que es una planta anual o bianual, de 0.50- 1m de altura,
glabra. Hojas básales arrosetadas, obovadas, dentado-crenadas, arrepolladas,
las superiores sésiles abrasadoras. Capítulos pequeños, amarillentos reunidos
en panojas o corimbos. Aquenios comprimidos, agudos de unos 2 mm de largo.
Gordon (1984), describe su morfología de la siguiente manera: la raíz no llega
a sobrepasar los 25 cm. de profundidad, es pivotante, corta y con
ramificaciones; las hojas están colocadas en roseta, desplegadas al principio;
en unos casos siguen así durante todo su desarrollo (variedades romanas), y
en otros se acogollan más tarde. El borde de los limbos puede ser liso,
ondulado o aserrado. El Tallo es cilíndrico y ramificado. Su Inflorescencia son
capítulos florales amarillos dispuestos en racimos o corimbos. Las Semillas
están provistas de un vilano plumoso.
Maroto (1989), desde su punto de vista agronómico, en el ciclo de cultivo de la
mayor parte de las lechugas se distinguen la fase de formación de roseta, la
39
fase de la formación de cogollo y la fase de reproducción o emisión de un tallo
floral. Aunque exista una gran variedad de lechugas que se adaptan a una
gama amplísima de climas, en términos generales puede decirse que prefiere
climas templados y húmedos. La temperatura óptima de germinación de la
lechuga es de 25º C, en términos medio la temperatura óptima de crecimiento
de las lechugas oscila entre los 15 y 20º C.
2.1.5.1.4. Composición química
Cuadro 2. Composición química de la lechuga por cada 100g de materia seca
Carbohidrato (g) 20.1

Proteínas(g) 8.4
Grasas(g) 1.3
Calcio(g) 0.4
Vitamina C (mg) 125.7
Hierro (mg) 7.5
Calorías (cal) 18
Fuente: Infoagro. s.f.
2.1.5.2. Tarwi (Lupinus mutabilis S.)
El tarwi es una leguminosa almidonosa, sus granos se utilizan en la
alimentación humana, conocido como chocho en el norte de Perú y Ecuador,
tarwi en el centro del Perú y tarwi en el sur del Perú y Bolivia (chuchusen
Cochabamba, Bolivia). Esta especie es pariente de los lupinos o altramuces
originarios del viejo mundo que aún hoy son cultivados en Europa
mediterránea, especialmente en España e Italia, pero que tienen un número
cromosómico diferente. El grano de tarwi es rico en proteínas y grasas, su
40
contenido proteico es incluso superior al de la soya y su contenido en grasas y
demás componentes es similar (Morón, 2005).
El cultivo del tarwi en la sierra se localiza entre los 2800 a 3900 msnm.
Correspondiendo aproximadamente el 20 % del área sembrada en la sierra
norte entre los departamentos de Cajamarca, La libertad y Amazonas; el 41 %
de la sierra central entre los departamentos de Ancash, Huánuco, y un
mínimo porcentaje en Junín y el 39 % en la sierra sur, en los departamentos de
Cusco, Puno y Apurímac (Palacios et al., 2004).
2.1.5.2.1. Clasificación taxonómica
Reino : Vegetal.
División : Phanerogamae.
Subdivisión : Angiospermae.
Clase : Dicotyledoneae
Subclase : Methachlamydeae.
Orden : Leguminosales
Familia : Fabaceae.
Sub Familia : Papillioneoidea.
Tribu : Ginesteae
Género : Lupinus.
Especie : Lupinus mutabilis S.
Wikipedia (2013).
41
2.1.5.2.2. Distribución geográfica
Su cultivo se mantiene desde Ecuador hasta Chile y el norte de Argentina bajo
distintos sistemas de producción. Fue desplazada por la introducción de
cultivos europeos, y a causa de dicha marginación, el tarwi ha sido una de las
especies nativas más afectadas. Por su contenido de alcaloides en el grano y
en el contenido de su biomasa, es que le da un fuerte sabor amargo, requiere
un proceso que lo elimine; este requisito constituye una desventaja frente a
otras leguminosas introducidas. Ello motivó la disminución de su área cultivada,
a pesar de contar con ventajas agronómicas y nutricionales, como la fijación del
nitrógeno atmosférico (más de 100 kg/ha), resistencia al frío y alto contenido de
proteína y aceite. El ciclo vegetativo varía entre 150 y 360 días, dependiendo
del genotipo y si se toma en cuenta la maduración del eje central solo, o la de
las demás ramas. Las diferentes fases fenológicas son: emergencia, primera
hoja verdadera, formación del racimo en el tallo central, floración, envainado,
maduración de vainas y madurez fisiológica. Las semillas presentan latencia
por inmadurez, ya que requieren una fase de postmaduración antes de
germinar. En especies silvestres de Lupinus la dispersión es espontánea por la
dehiscencia, pudiendo incluso alcanzar varios metros (Mori et al., 2008).
2.1.5.2.3. Composición química del tarwi
Mori et al., (2008), señala que el contenido de alcaloides en el tarwi varia de
0,02 a 4,45% y en el follaje de 0,1 a 0,4%; los alcaloides reportados son los
quinolizidinicos tales como: lupina, esparteína, 13-hidroxilupanina, 4-
hidroxilupanina, islupanina entre otros. Entre todos los indicados, los que se
presentan en mayor cantidad son las lupininas (27-74%), estos alcaloides
42
quinolizidinicos amargos en la semilla del tarwi son sustancias antinutritivas
que hasta el momento han sido mayor obstáculo para su utilización en la
alimentación humana y animal, se reporta que las variedades mejoradas
denominadas dulces tienen un contenido de alcaloides menor al 1,16%.
2.1.5.2.4. Distribución geográfica del tarwi silvestre
Proviene de los andes centrales, principalmente de Perú, Bolivia y Ecuador,
aunque las relaciones comerciales que existen en esa zona han expandido su
cultivo por todos los países andinos, en el Perú se cultiva principalmente en
zonas de Cajamarca, Ancash, en el valle del Mantaro, Ayacucho, Cusco y en
puno. Se conoce el contenido de proteínas y extractos de las especies
cultivadas y silvestres variando de 35-45% en proteínas y de 35- 45 e 15-23%
en aceites, siendo el mayor el contenido proteico en las silvestres. (Mujica et al.
2001).
2.1.5.2.5. Composición química
Cuadro 3. Composición química del tarwi silvestre por cada 100g
Proteína (g) 44.33

Grasa (g) 16.5
carbohidratos(g) 28.2
Fibra 7.1
Ceniza (%) 3.3
Humedad 7.7
Fuente: Collazos (1996).
43
2.2. MARCO CONCEPTUAL
Alelopatía
Es la ciencia que estudia las interrelaciones entre plantas, mediante las
relaciones de regulación o repulsión entre ellas y otros organismos. Muchas
plantas producen sustancias químicas que repelen a otras plantas, hongos,
bacterias, nematodos, virus e insectos, por lo que representan un control
natural muy efectivo que en muchos casos evita la utilización de insecticidas,
herbicidas y funguicidas.
Aceite vegetal
Es un compuesto orgánico obtenido a partir de semillas u otras partes de las
plantas en cuyos tejidos e acumula como fuente de energía. Como todas las
grasas está constituido por glicerina y tres ácidos grasos
Bioplaguicidas
Son productos a base de extractos de sustancias naturales con propiedades de
control de la población y/o reguladoras sobre insectos y microorganismos
consideradas plagas para los cultivos. Los bioplaguicidas presentan acción
preventiva, repelente, eliminación o reducción del agente causal de daños al
cultivo.
Ciclo biológico
Sucesión de formas que se producen en el crecimiento y desarrollo del
microorganismo.
44
Control
El acto de combatir cualquier peste hasta un punto en que los daños que
causan dejan de tener importancia económica. También en el caso en que los
daños evitados compensan por los gastos en se ha incurrido.
Dosis
Cantidad de pesticida que resulta eficaz contra determinadas fitopestes. Se
expresa ordinariamente como cantidad por hectárea.
Extracto vegetal
Es un preparado que permite extraer de las plantas determinadas substancias
útiles. Estas substancias pueden tener diferentes efectos:
 Fortificantes: empleados para tener cultivos resistentes.
 Control de enfermedades: permiten prevenir los hongos que atacan a los
cultivos.
 Control de plagas: usados para el control de insectos plaga.
Los extractos se pueden hacer a partir de varias plantas, con fermentaciones,
decocciones, maceraciones e infusiones.
Ectoparásito
Parásito que se nutre sobre su hospedero desde el exterior.
Endoparásito
Organismo parásito que vive dentro del huésped.
45
Estilete
Estructura en forma de lanza hueca sujetada con fuertes músculos que es
retractable y que caracteriza a los nematodos parásitos de plantas. funciona
como boca y a la vez como órgano de penetración, succión para alimentarse
del contenido de las células. También despachan sustancias químicas como
enzimas que disuelven paredes celulares o estimulan la formación de células
gigantes.
Fitopatógeno
Término que se aplica a los microorganismos que producen enfermedades en
las plantas.
Hospedante
Planta que proporciona un medio adecuado para el desarrollo de un patógeno.
Hospedero
Planta que es invadida por un parásito y de la cual éste obtiene sus nutrientes.
Cultivo que multiplica al nematodo.
In vitro
In vitro (latín: dentro del vidrio) se refiere a una técnica para realizar un
determinado experimento en un tubo de ensayo, o generalmente en un
ambiente controlado fuera de un organismo vivo. La fecundación in vitro es un
ejemplo ampliamente conocido. Se puede decir también que es un conjunto de
fenómenos observados en el laboratorio a partir de productos biológicos vivos o
46
es método para mantener en vida diversos organismos vivos (células,
espermatozoides, óvulos, virus, etc.) en condiciones diferentes a las naturales,
con técnicas de laboratorio.
Manejo Integrado
Se consideran las piezas fundamentales sobre las que deben marchar el
manejo integrado de nematodos el uso de cultivares resistentes, cultivares
susceptibles y tolerantes, la rotación de cultivos, complementando con otras
alternativas de manejo como la remoción del suelo, sanidad de los tubérculos y
semillas, la eliminación de plantas voluntarias, la aplicación de enmiendas
orgánicas y productos químicos, no hospedantes contribuirán a mejorar los
rendimientos.
Nematodo fitoparásito
Son aquellos nematodos equipados con una lanza o aguja filuda y hueca
propulsada por un fuerte músculo denominado estilete, que tiene la habilidad
de punzar y succionar los líquidos de las células para alimentarse.
Nódulo
Concreción de poco volumen, síntoma hipertrófico.
Síntoma
Reacciones o alteraciones internas y externas que sufre una planta como
resultado de su enfermedad.
47
2.3. HIPÓTESIS DE LA INVESTIGACIÓN
2.3.1. Hipótesis general
El uso de extractos de lechuga (Lactuca sativa L.), Tarwi (Lupinus mutabilis
Sweet) y Tarwi silvestre (Lupinus chlorilepis) influye sobre el control in vitro del
falso nematodo del nódulo de la raíz (Nacobbus spp.)
2.3.2. Hipótesis especifica
- El efecto de la aplicación in vitro de los extractos de tres plantas con
potencial nematicida a diferentes concentraciones sobre juveniles del falso
nematodo del nódulo de la raíz (Nacobbus spp.) es diferente.
- El tiempo de mortalidad óptimo de juveniles del falso nematodo del nódulo
de la raíz (Nacobbus spp.) a la aplicación de los extractos vegetales in vitro
son diferentes.
48
CAPITULO III
METODO DE INVESTIGACIÓN
2.1. MATERIAL EXPERIMENTAL
 Plantas con propiedades nematicidas
- Lechuga (Lactuca sativa L.)
- Tarwi (Lupinus mutabilis Sweet)
- Tarwi silvestre (Lupinus chlorilepis)
 Juveniles de Nacobbus spp.
2.2. METODOLOGÍA
Para el desarrollo del presente trabajo se consideraron dos fases las mismas
que se detallan a continuación:
2.2.1. Fase de campo
En primer lugar se procedió a recolectar las plantas con propiedades
nematicidas en estudio ( lechuga, tarwi y tarwi silvestre) pasando por un
proceso de selección, en el que se eliminaron los tejidos dañados ya sea por
factores ambientales y/o fitopatológicos procurando que todas las muestras
sean de un misma fase fenológica (floración) luego estas plantas fueron
llevadas al laboratorio de Fitopatología para la obtención de los extractos de
plantas, en segundo lugar se procedió a recolectar muestras de suelo infestado
con Nacobbus spp. del distrito de Acora localidad Ccopamaya, de donde se
obtuvieron los juveniles de Nacobbus spp. empleando el método del embudo
49
de Baermann citado por (Cepeda, 1995), para ser sometidos a la aplicación de
los extractos de plantas en sus correspondientes concentraciones.
2.2.2. Fase de laboratorio
En esta fase se efectuaron las siguientes actividades:
2.2.2.1. Separación de los extractos de las plantas con propiedades
nematicidas
El cual se realizó aplicando el método químico denominado “Arrastre por vapor”
siguiendo el procedimiento propuesto por (Orgánica, 2011). Teniendo en
consideración que la destilación por arrastre con vapor se emplea con
frecuencia para separar extractos de plantas de tejidos vegetales.
Procedimiento que se detalla a continuación:
Procedimiento:
Figura 1. Montar el equipo tal como se muestra en la siguiente fotografía
50
Figura 2. Destilación de arrastre por vapor
a. Colocar aproximadamente 150 ml de agua destilada en el matraz (a).
b. En el matraz (b) colocar hojas de la planta en estudio cortado en trozos
pequeños en una cantidad aproximada de 40 g.
c. Con el mechero, caliente hasta ebullición el matraz (a) a fin de generar el
vapor de agua que pasará al matraz (b), extrayéndose de esta manera el
extracto de planta de las muestras, que inmediatamente es arrastrado
por el vapor de agua en un proceso de codestilación al matraz (c).
d. Suspenda el calentamiento cuando el volumen del destilado sea de 100
ml aproximadamente.
El extracto de planta obtenido será luego envasado en un frasco ámbar y
colocado en refrigeración (8°C) hasta el momento de su uso.
El tiempo empleado para la obtención del extracto de planta fue de
aproximadamente una hora.
51
2.2.2.2. Obtención de los juveniles de Nacobbus spp.
Se realizó empleando el método modificado de Baermann (1917), método que
se detalla a continuación:
Es una técnica sencilla, con materiales al alcance de cualquier investigador y
que da resultados aceptables. El material consiste en un embudo de 10 cm. de
boca al que se adosa un tubo de goma con una llave de cierre. El embudo se
coloca en un soporte universal y dentro de él se ubica una pequeña rejilla para
soportar la muestra. Esta se obtiene de suelo, raíces, hojas o tallos en estudio,
bien lavados y cortados en trocitos de 1 cm. aproximadamente. Una cantidad
determinada de 50 g. se coloca dentro de una bolsita de muselina o tejido
semejante y ésta dentro del embudo. Se agrega agua por las paredes del
mismo hasta que la muestra quede totalmente cubierta. En vez de la bolsita de
tela puede utilizarse también un vaso de precipitados de 100 ml, colocar la
muestra en su interior y tapar la boca con una tela o filtro de algodón que se
sujeta con una bandita de goma. Luego se coloca el vaso invertido en el
embudo y se procede a agregar agua.
Una vez en contacto la muestra con el agua debe evitar moverse el aparato y
luego de 24 a 48 horas se recoge el agua por el tubo de goma que sale del
embudo. Se deja precipitar y se concentra o se diluye la suspensión obtenida
hasta llevar a un volumen de 100 ml. se homogeniza bien y se toman dos
partes alícuotas de 10 cc cada una; se cuentan separadamente, se promedian
y multiplicando por diez el resultado obtenido se tienen los nematodos que hay
52
en 50 gramos (la muestra original) de suelo, raíces, hojas o tallos. (Fraga,
1984).
2.2.2.3. Aplicación de los extractos de plantas
Para la aplicación de los extractos de planta en sus concentraciones
propuestas inicialmente se efectuaron los cálculos correspondientes, luego se
prepararon la solución correspondiente (extracto de plantas + agua destilada).
Obtenida la solución luego con ayuda de micropipetas se aplicaron sobre los 10
juveniles de Nacobbus spp., por repetición juveniles que estuvieron sobre una
placa tipo siracusa, en las dosis y tiempos de exposición propuestos en la
presente investigación, procediendo luego a tomar el tiempo y contabilizando el
número de juveniles muertos a los 15 y 30 minutos.
2.3. ANALISIS ESTADISTICO
2.3.1. Variables en estudio
2.3.1.1. Variable independiente
Plantas con propiedades nematicidas a las concentraciones del 15% y 40%.
Cuadro 4. Plantas con propiedades nematicidas
CONCENTRACION
NOMBRE COMÚN NOMBRE CIENTIFICO
BAJA ALTA
Lechuga Lactuca sativa L. 15% 40 %
Tarwi Lupinus mutabilis Sweet 15% 40 %
Tarwi silvestre Lupinus chlorilepis 15% 40 %
53
2.3.1.2. Variable dependiente
Número de nematodos (juveniles) muertos a los 15 y 30 minutos.
2.3.2. Tratamientos
Cuadro 5. Tratamientos, concentración y dosis en estudio.
DÓSIS
TRATAMIENTOS EXTRACTOS (ml de extracto de plantas/ml de
agua destilada)
T1 Lechuga al 15% (p/v) 15ml/85ml
T2 Lechuga al 40% (p/v) 40ml/60ml
T3 Tarwi al 15 % (p/v) 15ml/85ml
T4 Tarwi al 40 % (p/v) 40ml/60ml
T5 Tarwi silvestre al 15 % (p/v) 15ml/85ml
T6 Tarwi silvestre al 40 % (p/v) 40ml/60ml
p/v= Procentaje en volumen
Cuadro 6. Tratamientos, repeticiones y unidades experimentales sin
aleatorizar.
TRATAMIENTOS
Repetición T1 T2 T3 T4 T5 T6
R1 T1R1 T2R1 T3R1 T4R1 T5R1 T6R1
54
Cuadro 7. Operacionalización de variables
Variable Independiente Sub variables Indicador Escala
Plantas con propiedades Actividad Mortalidad Mortalidad de
nematicidas a las nematicida contra juveniles a los 15 y
concentraciones del 15% Nacobbus spp. 30 minutos
y 40%
Variable Dependiente Sub variables Indicador Escala
Número de nematodos Frecuencia de Nº vivos y Es vigesimal el
(juveniles) muertos a los tiempo (cada 15 muertos conteo es de 10 en
15 y 30 minutos minutos) 10
2.3.3. Diseño Experimental
Se utilizó el Diseño Experimental Completamente al Azar (D.C.A), con un
arreglo factorial de tres plantas con propiedades nematicidas por dos dosis de
aplicación, con un total de seis tratamientos, con tres repeticiones, haciendo un
total de 18 unidades experimentales. Antes de realizar los análisis de varianza,
los datos originales fueron transformados a la función de x  1 , para
homogenizar las varianzas debido a que estos constituyen valores de contadas
(Calzada, 1996).
El modelo estadístico lineal aditivo en el arreglo factorial de dos factores
conducido bajo un diseño completo al azar, es el siguiente:
Xijk    i   j  ()ij  ijk
i=1,2,…,a; j=1,2,…,b; k=1,2,…,r
55
Donde:
Xijk = Es la variable dependiente de la k-ésima observación bajo el j-ésimo
nivel de factor B (dósis de aplicación), sujeto al i-ésimo nivel de
tratamiento A(Plantas nematicidas).
 = Constante, media de la población a la cual pertenecen las
observaciones.
αi = Efecto del del i-ésimo nivel del factor A (plantas nematicidas).
j = Efecto del j-ésimo nivel del factor B (dosis de aplicación).
()ij = Efecto de la interacción del i-ésimo nivel del factor A (Plantas
nematicidas), en el j-ésimo nivel del factor B (dósis de aplicación).
ijk = Efecto del error experimental.
Para el análisis de los datos de conteo de nematodos muertos (juveniles) por
aplicación de plantas con propiedades nematicidas se propone en el siguiente
cuadro 8, en donde se muestra el análisis de varianza para la evaluación de la
efectividad de plantas con propiedades nematicidas a diferentes dosis.
Cuadro 8. Análisis de varianza para los factores en estudio
F. de V. G. L.
A (Plantas con propiedades nematicidas) a-1 3–1=2
B (Dósis de aplicación) b-1 2–1=1
AxB (a-1)(b-1) 2x1=2
Error experimental ab(r-1) 3 x 2 (3-1)=12
TOTAL abr-1 3 x 2 x3 -1=17
56
CAPITULO IV
CARACTERIZACIÓN DEL AREA DE INVESTIGACIÓN
El presente trabajo de investigación se llevó a cabo en el laboratorio de
Fitopatología de la Escuela Profesional de Ingeniería Agronómica de la
Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional del Altiplano-Puno.
Ubicado en el departamento, provincia y distrito de Puno, ubicado sobre los 3
800 msnm, situado entre las coordenadas geográficas 15°50´15´´ latitud sur y
70°01´18´´ longitud oeste del meridiano de Greenwich.
Siendo este un trabajo de investigación aplicativo, la clase de investigación es
experimental el mismo que dará lugar a nuevos conocimientos científicos para
lograr mayor comprensión de los problemas, y una técnica inmediata.
Figura 3. Ubicación donde se llevó a cabo la investigación.
57
CAPITULO V
EXPOSICIÓN Y ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS
EXTRACTOS DE PLANTAS CON POTENCIAL NEMATICIDA A LOS
15 MINUTOS
El análisis de varianza para la mortalidad de juveniles (Nacobbus spp.) a los 15
minutos de su aplicación con extractos de plantas de Lechuga, tarwi y tarwi
silvestre al 15% y 40%, con datos transformados a ( X  1) , (cuadro 9)
muestra una diferencia estadística altamente significativa para plantas
nematicidas (A), lo cual nos indica que entre ellas hay diferencias en los
efectos de mortalidad debido a sus propiedades nematicidas de estas. Para el
caso de las dosis (B) existe también una diferencia altamente significativa, lo
cual indica que entre las dosis hay diferencias en los efectos de mortalidad
debido a que cada dosis propuesta muestra un efecto diferente. Respecto a la
interacción A x B, hubo una diferencia también altamente significativa, lo cual
nos indica que tanto el factor de plantas nematicidas (A) así como el factor
dosis (B) actúan de forma dependiente uno del otro sobre la mortalidad de
juveniles de Nacobbus spp., estos resultados se deben probablemente debido
a su composición y sus propiedades de estas plantas. Por otro lado, el
CV=5.128% nos indica la confiabilidad de los datos logrados en el presente
trabajo, ya que Vásquez (1990), manifiesta que para experimentos en
laboratorio el coeficiente de variación debería ser menor a 10%.
58
Cuadro 9. Análisis de varianza para la mortalidad de juveniles (Nacobbus spp.)
a los 15 minutos de su aplicacion con extracto de planta de la
lechuga, tarwi y tarwi silvestre al 15% y 40%.
Grados F F Tabular
Fuente de Suma de Cuadrado
de Calculad Sig.
variación cuadrados medio 0.05 0.01
libertad a
Plantas
nematicidas 2 11.3192 5.6596 408.62 3.89 6.93 **
(A)
Dosis (B) 1 0.3781 0.3781 27.30 4.75 9.33 **
AxB 2 2.3442 1.1721 84.62 3.89 6.93 **
Error 12 0.1662 0.0139
Total
17 14.2076
correcto
CV= 5.12% Promedio general=2.30
En el cuadro 9, se observa la alta significancia estadística de todos los factores
en estudio al 0.01 de probabilidad, por lo que se procedió a realizar la prueba
de medias de Duncan.
Realizada la prueba de significancia de Duncan a un nivel del 0.01 de
probabilidad (cuadro 10) para detectar las diferencias entre tratamientos nos
muestra que hay diferencia significativa entre las plantas con propiedades
nematicidas, donde el tarwi silvestre muestra una mortalidad promedio de 9.2
Juveniles, el cual es estadísticamente superior a las demás plantas
nematicidas, seguido del resto de los tratamientos, probablemente estas
diferencias se deban por la importancia que representan los alcaloides
quinolizidinicos (AQ) en las especies del género Lupinus (Fabaceae) como
defensa química contra patógenos (hongos, bacterias, nematodos, virus)
59
(Montes y Belmont, 1996). Así como también por lo señalado por (Mori et al.,
2008), quienes indican que el contenido de alcaloides en el tarwi varia de 0,02
a 4,45% y en el follaje de 0,1 a 0,4%; los alcaloides reportados son los
Quinolizidinicos tales como: lupina, esparteína, 13-hidroxilupanina, 4-
hidroxilupanina, islupanina entre otros. Entre todos los indicados, los que se
presentan en mayor cantidad son las lupininas (27-74%), estos alcaloides
quinolizidinicos son amargos y se hallan en la semilla del tarwi, se reportó
también que las variedades mejoradas denominadas dulces tienen un
contenido de alcaloides menor al 1,16%. En último lugar se la lechuga con 0.7
en promedio de juveniles muertos.
Cuadro 10. Prueba de Duncan para el factor plantas nematicidas (A) a los 15
minutos de su aplicacion con extracto de planta de lechuga, tarwi y
tarwi silvestre al 15% y 40%.
Mortalidad Mortalidad de
de Juveniles Juveniles
Orden de Plantas
(datos (datos Sig. 0.01
Mérito nematicidas
reales) transformados
Y= x  1 )
1 Tarwi silvestre 9.2 3.19 a
2 Tarwi 5.3 2.44 b
3 Lechuga 0.7 1.26 c
En el cuadro 11, se observa que la dosis al 40% ocasiono mayor mortalidad
sobre los juveniles de Nacobbus spp. causando 6.0 muertos en promedio, el
cual es estadísticamente superior a la dosis de 15%, ubicándose al final con
menor mortalidad, ocasionando 4.1 muertos en promedio.
60
Cuadro 11. Prueba de Duncan para el factor dosis (B) a los 15 minutos de su
aplicación con extracto de planta de la lechuga, tarwi y tarwi
silvestre al 15% y 40%.
Orden de
Dosis (datos (datos Sig. 0.01
Mérito
Y= x  1 )
1 40% 6.0 2.44 a
2 15% 4.1 2.15 b
En el cuadro 12, se observa que la combinación de Tarwi silvestre al 40%
causó la mayor mortalidad sobre los juveniles de Nacobbus spp. en un número
de 9.7 muertos en promedio, probablemente sea debido a que en el tarwi
silvestre se tenga mayor contenido de alcaloides, sumándose a este se le
encuentran las combinaciones de tarwi silvestre al 15% y tarwi al 40% con 8.7 y
8.3 muertos en promedio respectivamente, los cuales son estadísticamente
superiores a las demás combinaciones en estudio;
También se observa que, al final que, las combinaciones de lechuga al 15 % y
40%, los cuales causaron una mortalidad de 1.3 y 0.0 juveniles de Nacobbus
spp. en promedio.
Las diferencias entre tratamientos en estudio, se pueden apreciar en la figura 4.
61
Cuadro 12. Prueba de Duncan para la interacción de plantas nematicidas (A) x
dosis (B) a los 15 minutos de su aplicación con extracto de planta
de la lechuga, tarwi y tarwi silvestre al 15% y 40%
Orden de
Mérito
Y= x  1 )
Tarwi Silvestre x 3.27 a
1 9.7
40%
2 8.7
15%
3 Tarwi x 40% 8.3 3.05 a
4 Tarwi x 15% 2.3 1.82 b
5 Lechuga x 15% 1.3 1.52 c
6 Lechuga x 40% 0.0 1.00 d
Figura 4. Mortalidad de juveniles con extracto de planta de la lechuga, tarwi y
tarwi silvestre al 15% y 40% a los 15 minutos de aplicación.
62
EXTRACTOS DE PLANTAS CON POTENCIAL NEMATICIDA A LOS 30
MINUTOS
El análisis de varianza para la mortalidad de juveniles (Nacobbus spp.) a los 30
minutos de su aplicación con extracto de planta de Lechuga, tarwi y tarwi
silvestre al 15% y 40%, con datos transformados a ( X  1) , (cuadro 13)
muestra una diferencia estadística altamente significativa para plantas
nematicidas (A), lo cual nos indica que entre ellas hay diferencias en los
efectos de mortalidad debido a sus propiedades nematicidas de estas. Para el
caso de las dosis (B) existe también una diferencia altamente significativa, lo
cual indica que entre las dosis hay diferencias en los efectos de mortalidad
debido a que cada dosis propuesta muestra un efecto diferente. Respecto a la
interacción A x B, hubo una diferencia también altamente significativa, lo cual
nos indica que tanto el factor de plantas nematicidas (A) así como el factor
dosis (B) actúan de forma dependiente uno del otro sobre la mortalidad de
juveniles de Nacobbus spp., estos resultados se deben probablemente debido
a su composición y sus propiedades de estas plantas. Por otro lado el
CV=6.85% nos indica la confiabilidad de los datos logrados en el presente
trabajo, ya que Vásquez (1990), manifiesta que para experimentos en
laboratorio el coeficiente de variación debería ser menor a 10%.
63
spp.) a los 30 minutos de su aplicación con extracto de planta de la
lechuga, tarwi y tarwi silvestre al 15% y 40%
Grados F Tabular Sig.

Fuente de Suma de Cuadrado F
de
variación cuadrados medio Calculada 0.05 0.01
libertad
Plantas
nematicidas 2 13.3288 6.6644 242.20 3.89 6.93 **
(A)
Dosis (B) 1 0.2708 0.2708 9.84 4.75 9.33 **
AxB 2 2.5018 1.2509 45.46 3.89 6.93 **
Error 12 0.3302 0.0275
Total
17 16.4316
correcto
CV= 6.85% Promedio general=2.42
En el cuadro 13, se observa la alta significancia estadística de todos los
factores en estudio al 0.01 de probabilidad, se realizó la prueba de medias de
Duncan.
Realizada la prueba de significancia de Duncan a un nivel del 0.01 de
probabilidad (cuadro 14) para detectar las diferencias entre tratamientos nos
muestra que hay diferencia significativa entre las plantas con propiedades
nematicidas, donde el tarwi silvestre muestra una mortalidad promedio de 10.0
Juveniles, el cual es estadísticamente superior a las demás plantas
nematicidas, seguido del resto de los tratamientos, probablemente estas
diferencias se deban en el caso del tarwi silvestre tenga buen contenido de
alcaloides que causaron la mayor mortalidad de juveniles. En último lugar se la
lechuga con 0.7 en promedio de juveniles muertos en promedio.
64
Cuadro 14. Prueba de Duncan para el factor plantas nematicidas (A) a los 30
minutos de su aplicación con extracto de planta de la lechuga, tarwi
y tarwi silvestre al 15% y 40%
Orden de Plantas (datos
(datos Sig. 0.01
Mérito nematicidas transformados
reales)
Y= x  1 )
1 Tarwi silvestre 10.0 3.32 a
2 Tarwi 6.7 2.69 b
3 Lechuga 0.7 1.26 c
En el cuadro 15, se observa que la dosis al 15% ocasiono mayor mortalidad
sobre los juveniles de Nacobbus spp. causando 6.7 muertos en promedio, el
cual es estadísticamente superior a la dosis de 40%, ubicándose al final con
menor mortalidad, ocasionando 4.9 muertos en promedio.
Cuadro 15. Prueba de Duncan para el factor dosis (B) a los 30 minutos de su
aplicación con extractos de plantas de lechuga, tarwi y tarwi
silvestre al 15% y 40%
Orden de
Mérito
Y= x  1 )
1 15% 6.7 2.54 a
2 40% 4.9 2.30 b
65
En el cuadro 16, se observa que la combinación de Tarwi silvestre al 40%
causó la mayor mortalidad sobre los juveniles de Nacobbus spp. en un número
de 10.0 muertos en promedio, a este se le agrega las combinaciones de tarwi
silvestre al 15% y tarwi al 40% con 10.0 muertos en promedio respectivamente,
los cuales son estadísticamente superiores a las demás combinaciones en
estudio; ubicándose al final las combinaciones de lechuga al 15 % y 40%, los
cuales causaron una mortalidad de 1.3 y 0.0 juveniles de Nacobbus spp. en
promedio. Las diferencias entre tratamientos en estudio, se pueden apreciar en
la figura 5.
Cuadro 16. Prueba de Duncan para la interacción de plantas nematicidas (A)
x dosis (B) a los 30 minutos de su aplicación con extractos de
plantas de lechuga, tarwi y tarwi silvestre al 15% y 40%
Mortalidad de
Mortalidad Juveniles
Orden
de Juveniles (datos
de Dosis Sig. 0.01
(datos transformados
Mérito
reales)
Y= x  1 )
1 3.32
40%
2 3.32
15%
3 Tarwi x 40% 10.0 3.32 a
4 Tarwi x 15% 3.3 2.06 b
5 Lechuga x 15% 1.3 1.52 c
6 Lechuga x 40% 0.0 1.00 d
66
Figura 5. Mortalidad de juveniles con extracto de plantas de lechuga, tarwi y
tarwi silvestre al 15% y 40% a los 30 minutos de aplicación.
67
CONCLUSIONES
El extracto vegetal que tuvo mejor resultado en la mortalidad de nematodos
juveniles de Naccobus spp. fue el extracto de tarwi silvestre al 40% en las
evaluaciones realizadas, a los 15 minutos (96.7% de mortalidad) y 30 minutos
(100.0% de mortalidad).
El mejor tiempo en mortalidad de nematodos juveniles de Naccobus spp. fue a
los 30 minutos con un número promedio de mortalidad de 10 con la aplicación
de dosis de 40% de extracto de tarwi silvestre In Vitro.
68
RECOMENDACIONES
Incentivar y difundir la aplicación de extracto de tarwi silvestre en un 40% para
el control de Naccobus spp. Realizando similares trabajos experimentales cuyo
objetivo principal sea obtener mayor mortalidad de Naccobus Spp.
Realizar investigaciones con alternativas de control a diferentes
concentraciones de dosis del extracto de tarwi silvestre para dar uso a plantas
nematicidas para el control de Naccobus spp.
Continuar con investigaciones, compartiendo conocimiento cara a cara con el
agricultor mediante charlas y realizar demostraciones, para reducir la población
de Naccobus en menor tiempo determinado con plantas de potencial
nematicida y asi obtener resultados satisfactorios para el agricultor.
69
BIBLIOGRAFÍA
Arning, I y Velásquez, H. (2000). Plantas con potencial biocida. Red de acción
en alternativas al uso de agroquímicos. Editorial Gráfica Sttefany S.R. Ltda.
Lima, Perú. 35p.
Agrios, G. (1997). Fitopatología. Editorial Limusa. México. 756 p.
Astorga, L. V. (1974). Mapeo del Falso Nematodo del Nudo (Nacobbus spp) y
correlación con el pH del suelo de la provincia de Chucuito. Tesis Ing. Agr.
UNTA-Puno. 45p.
Balderrama, F. y Franco, J. (1994). Evaluación de Cultivos Andinos al Ataque
de Nacobbus aberrans. VIII Congreso Internacional de Sistemas Agropecuarios
Andinos. Chile. 98p.
Chitwood, D.J. (1992). Nematicidal compounds from plants. p. 185-204. In
H.N.Nigg and D. Seigler (eds.). Phytochemical resources for medicine and
agriculture. Plenum Press, New York, USA. 20p.
Canto, S. M. (1999). Nematodos que atacan la Papa. Universidad Nacional
Agraria-La Molina.Lima, Perú. 110p.
Collazos, C. J. (1996). Tablas peruanas de Composición Química de los
Alimentos. Séptima Edición, Lima.
70
Duke, S. O.; Cantrell, C. L.; Meepagala, K. M.; Wedge, D. E.; Tabanca, N.; &
Schrader, K.K. (2010). Natural toxins for use in pest management. Toxins, 2,
1943-1962.
Dueñas, A. (1978). La huerta popular. Ed. FAO. Santiago de Chile. Chile. pp
12-56. e.campo.com. 2005. Malargüe, Área de Semillero de Papa. Disponible
en:
http://www.e-campo.com/sections/news/display.php/uuid.18DA7896-373E-
11D4-A5390006292E2740/
Franco, J.; González, A. y Matos, A. (1992). Manejo Integrado del nematodo
quiste de la papa. CIP. Lima, Perú.30p.
Fraga, P. (1984). Introducción a la Nematología Agrícola. Edición Hemisferio
Sur S.A. Buenos Aires, Argentina. 60p.
Franco, J.; Montecinos, R.; Ortuño, N. (1994). Nacobbus aberrans. Nematodo
Fitoparasito del Cultivo de Papa en Bolivia; Desarrollo de una Estrategia para
su Manejo Integrado. Revista de Agricultura nº 12. Cochabamba, Bolivia. 40p.
Garmendia, A. (1994). Fitopatología General. Ed. Universidad Nacional San
Antonio Abad del Cusco, Perú. 130p.
Gómez, L.; Rodríguez, M. y Enrique, R. (2009). Efectividad de Lactuca sativa
usada como planta trampa de Meloidogyne spp. en la producción protegida de
71
hortalizas. Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA). San José de
las Lajas, La Habana. 12 p.
Hasan, A. (1992). Allelopathy in the management of root-knot nematodes. p.
413-441. In S.J.H Rizvi and V. Rizvi (eds.). Allelopathy: basic and applied
aspects. Chapman & Hall, London, UK.30p.
Halbrendt, J. M. (1996). Allelopathy in the management of plant-parasitic
nematodes. Journal of Nematology. 10p.
Higidio, E. A. (2006). Plantas biocidas y repelentes. Consejo de Gestión de la
Calidad del valle de Chancay y Huaraz. Disponible en:
http://sia.huaral.org/sia_uploads/10ecacb8e1dfc97d8af3e4e5ee4202d9/pb.doc
Infoagro. s. f. El cultivo de la Lechuga. (En línea). Consultado 1 abr. 2013.
Disponible en http://www.infoagro.com/hortalizas/lechuga.htm
Inserra, R. N.; Vovlas, N.; Griffin, G. D.; and Anderson, J. L. (1983).
Development of the root-knot nematode Nacobbus aberrans, on sugarbeet. j.
Nematology. 02.21p.
Karssen, G; Moens, M. Root-knot nematodes. (2006). In: Perry R, Moens M,
editors. Plant nematology. CABI, UK. pp: 59-90.
Ministerio de Agricultura. (1972). Enfermedades de la Papa en el Perú.
Estación Experimental la Molina. Lima, Perú. 42p.
72
Maroto, J. V. (1989). Horticultura herbácea especial. 3° ed. Madrid, España.
Ediciones Mundi Prensa. pp: 200 - 217.
Morón, C. (2005). Importancia de los cultivos andinos en la seguridad
alimentaria y nutrición. Cultivos Andinos-FAO.
Mori, C. L.; Paz, R. y otros. (2008). Eliminación de alcaloides en el tarwi
( Lupinus mutabilis ) mediante lavado con agua a diferentes pH. Universidad
Católica de Santa María. Arequipa- Perú.
Montes, L. y Belmont, R. (1996). Productos naturales de origen vegetal para el
combate de fitopatógenos. Revista Mexicana de Fitopatología. 14:9-14.
Mujica, A.; Aguilar J. y S. Jacobsen. (2001). Resúmenes de investigaciones en
Tarwi (Lupinus mutabilis Sweet) 1976-2001. UNA, Puno. 87p.
Orgánica. (2011). Destilación por arrastre con vapor y otros métodos de
aislamiento. Consultado el 3 de junio del 2011:
http://organica1.org/1345/1345pdf10.pdf
PROINPA. (1993). Diagnóstico de los Principales Nematodos del Cultivo de la
Papa. Programa de Investigación de la Papa. Cochabamba, Bolivia. 38p.
PROINPA. (1991). Informe anual (1990-1991). Programa de Investigación de la
Papa. Cochabamba, Bolivia. 60p.
73
Palacios, A.; Demetrio, M.; Espinoza, L.; Herrera, M. y Huamancaja, C. (2004).
Obtención de alcohol a partir de la malta de Lupinus mutabilis (tarwi).
Universidad Nacional del Centro del Perú. Junín, Perú.
Parodi, L. (1971). La huerta Hidropónica popular. Ed. FAO. Santiago de Chile,
Chile. pp. 12-56.
Peña, R. (1955). Horticultura y Fruticultura. 3 ed. Edit. Artes gráficas.
Barcelona, España. pp. 65-89.
Quimi, V. H. (1981). Ciclo Biológico y comportamiento de Nacobbus aberrans.
Nematrópica. Nº 11. 27p.
Sociedad Española de Fitopatología. (2000). Patología Vegetal. 2ª Edic. Edit.
Phytoma-España.140p.
Toovey, W. (1983). Cultivo de hortalizas. Dpto. de Horticultura. La Molina. Lima,
Perú. p.37-42.
Untiveros, D. O. (1986). Principales Plagas y Enfermedades de la Papa en el
Perú. Manual Técnico. INIPA. Lima, Perú. 98p.
Varas, N.; Espino, R.; Guillermo, J.; Quispe, L. y Machahuay, L. (2008).
Optimización de dosis de extractos de Bidens pilosa L. para el control de
74
Meloidogyne incógnita Kofoid & Chitwood 1949 in Vitro. Universidad Nacional
San Luís Gonzaga de Ica. Facultad de Agronomía. Ica, Perú. 60p.
Vásquez, V. (1990). Experimentación agrícola. Diseños estadísticos para la
investigación científica y tecnológica. Editores Amaru. 1ra ed. Lima, Perú.
278 p.
Wania, S. Neves; Leandro; G. Freitas; Marcelo, M. Coutinho; Douglas, F.
Parrera; Silamar Ferraz y Maurício, D. Costa. (2010). Biofumigação do Solo
com Espécies de Brássicas para o Controle de Meloidogyne javanica.
Universidade Federal de Viçosa. Viçosa, Brasil. 10 p.
Wikipedia, (2013). Lupinus mutabilis. Disponible en:
http://es.wikipedia.org/wiki/Lupinus_mutabilis
Yépez, G. (1970). Nematologia. Facultad de Agronomía. Caracas, Venezuela.
54p.
75
ANEXOS
tarwi y tarwi silvestre al 15% y 40% a los 15 minutos de aplicación
(datos reales).
LECHUGA TARWI TARWI SILVESTRE

Rep. 15 % 40 % 15 % 40 % 15 % 40 %
T1 T2 T3 T4 T5 T6
1 2 0 2 9 8 10
2 1 0 2 8 9 9
3 1 0 3 8 9 10
SUMA 4.0 0.0 7.0 25.0 26.0 29.0
PROM. 1.3 0.0 2.3 8.3 8.7 9.7
PROM. A 0.7 5.3 9.2
PROM. B 4.1 6.0
(datos reales).

Rep. 15 % 40 % 15 % 40 % 15 % 40 %
T1 T2 T3 T4 T5 T6
1 20 0 20 90 80 100
2 10 0 20 80 90 90
3 10 0 30 80 90 100
SUMA 40 0 70 250 260 290
PROM. 13.3 0.0 23.3 83.3 86.7 96.7
PROM. A 6.7 53.3 91.7
PROM. B 41.1 60.0
76
(datos transformados Y= x  1 ).

Rep.
15 % 40 % 15 % 40 % 15 % 40 %
T1 T2 T3 T4 T5 T6
1 1.73 1.00 1.73 3.16 3.00 3.32
2 1.41 1.00 1.73 3.00 3.16 3.16
3 1.41 1.00 2.00 3.00 3.16 3.32
SUMA 4.56 3.00 5.46 9.16 9.32 9.80
PROM. 1.52 1.00 1.82 3.05 3.11 3.27
PROM. A 1.26 2.44 3.19
PROM. B 2.15 2.44
(datos reales).

Rep. 15 % 40 % 15 % 40 % 15 % 40 %
T1 T2 T3 T4 T5 T6
1 1 0 2 10 10 10
2 2 0 3 10 10 10
3 1 0 5 10 10 10
SUMA 4.0 0.0 10.0 30.0 30.0 30.0
PROM. 1.3 0.0 3.3 10.0 10.0 10.0
PROM. A 0.7 6.7 10.0
PROM. B 4.9 6.7
77
(datos reales).

Rep. 15 % 40 % 15 % 40 % 15 % 40 %
T1 T2 T3 T4 T5 T6
1 10 0 20 100 100 100
2 20 0 30 100 100 100
3 10 0 50 100 100 100
SUMA 40 0 100 300 300 300
PROM. 13.3 0.0 33.3 100.0 100.0 100.0
PROM. A 6.7 66.7 100.0
PROM. B 48.9 66.7
(datos transformados Y= x 1 ).

Rep. 15 % 40 % 15 % 40 % 15 % 40 %
T1 T2 T3 T4 T5 T6
1 1.41 1.00 1.73 3.32 3.32 3.32
2 1.73 1.00 2.00 3.32 3.32 3.32
3 1.41 1.00 2.45 3.32 3.32 3.32
SUMA 4.56 3.00 6.18 9.95 9.95 9.95
PROM. 1.52 1.00 2.06 3.32 3.32 3.32
PROM. A 1.26 2.69 3.32
PROM. B 2.30 2.54
78
Figura 6. Equipo para la obtención de aceites esenciales.
Figura 7. Planta nematicida en estudio (Lechuga).
79
Figura 8. Planta nematicida en estudio (Tarwi).
Figura 9. Planta nematicida en estudio (tarwi silvestre).
80
Figura 10. Proceso de Obtención del extracto del tarwi.
Figura 11. Obtención del extracto de lechuga.
81
Figura 12. Resultado del extracto de planta obtenido.
Figura 13. Extractos de plantas obtenidos de Lechuga, Tarwi cultivado y Tarwi
silvestre.
82
Figura 14. Obtención de los juveniles, empleando el método modificado de
Baermann.
Figura 15. Muestra de suelo 50g, para obtención de juveniles.
83
Figura 16. Tratamiento en estudio.
Figura 17. Aplicación de los extractos de plantas en estudio.
84
Figura 18. Aplicación de las soluciones en estudio.
Figura 19. Juveniles de Nacobbus spp. Muertos.
85
Figura 20. Nacobbus spp. Muerto por extracto de tarwi silvestre al 40%dosis
en 30 min.
86

Velasquez Pari Mariela

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Velasquez Pari Mariela

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Velasquez Pari Mariela

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

EXTRACTOS DE PLANTAS CON POTENCIAL NEMATICIDA EN

MARIELA VELASQUEZ PARI

PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE:

MENCION: AGRO AMBIENTAL

A nuestro señor Jesucristo por guiar mis pasos en el logro de mi objetivo.

A la memoria de mi querido padre Martin Velásquez Suaña.

A mi madre natividad por el apoyo incondicional para mi objetivo.

A mi esposo Ludwig, a mi hijo Leonard y a mi hija Jazmin, por ser el motor y

A mis hermanos y familiares, como testimonio al apoyo y comprensión que en

A la Universidad Nacional del Altiplano, en especial a la Facultad de Ciencias

A los señores docentes de la Facultad de Ciencia Agrarias, por sus sabias

Al D.Sc. Silverio Apaza Apaza, por su acertada dirección en la ejecución del

A los miembros de jurado revisor, M. Sc. Angel Cari Choquehuanca,

CAPITULO I: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA, ANTECEDENTES Y

OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN ..................................... 19

1.1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .................................................... 19

1.2. ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIÓN .......................................... 21

1.3. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN ................................................... 24

1.3.1. Objetivo General ....................................................................... 24

1.3.2. Objetivos Específicos................................................................ 24

CAPITULO II: MARCO TEÓRICO, MARCO CONCEPTUAL E HIPÓTESIS

2.1. MARCO TEÓRICO................................................................................. 25

2.1.1. Nacobbus aberrans................................................................... 25

2.1.1.1. Biología de Nacobbus aberrans ................................. 25

2.1.1.2. Ubicación taxonómica ................................................ 26

2.1.1.3. Distribución geográfica ............................................... 27

2.1.1.4. Disminución de producción ........................................ 27

2.1.1.5. Hospederos ................................................................ 28

2.1.1.6. Síntomas .................................................................... 29

2.1.2. Alternativas en el control de nematodos ................................... 30

2.1.3. Método para extraer juveniles del suelo ................................... 32

2.1.4. Plantas biosidas y repelentes ................................................... 33

2.1.5. Plantas nematicidas .................................................................. 36

2.1.5.1. Lechuga (Lactuca sativa L.) ....................................... 37

2.1.5.2. Tarwi (Lupinus mutabilis S.) ....................................... 40

2.2. MARCO CONCEPTUAL ........................................................................ 44

2.3. HIPÓTESIS DE LA INVESTIGACIÓN .................................................... 48

2.3.1. Hipótesis general ...................................................................... 48

2.3.2. Hipótesis especifica .................................................................. 48

CAPITULO III: METODO DE INVESTIGACIÓN............................................... 49

2.1. MATERIAL EXPERIMENTAL ................................................................. 49

2.2.1. Fase de campo ......................................................................... 49

2.2.2. Fase de laboratorio ................................................................... 50

2.2.2.1. Separación de los extractos de las plantas con

propiedades nematicidas ........................................... 50

2.2.2.2. Obtención de los juveniles de Nacobbus spp............. 52

2.2.2.3. Aplicación de los extractos de plantas ....................... 53

2.3. ANALISIS ESTADISTICO ...................................................................... 53

2.3.1. Variables en estudio ................................................................. 53

2.3.1.1. Variable independiente .............................................. 53

2.3.1.2. Variable dependiente ................................................. 54

2.3.2. Tratamientos ............................................................................. 54

2.3.3. Diseño Experimental ................................................................. 55

CAPITULO IV: CARACTERIZACIÓN DEL AREA DE INVESTIGACIÓN ......... 57

5.1. MORTALIDAD DE JUVENILES DEL FALSO NEMATODO DE LA

RAÍZ (Nacobbus spp.) CON LA APLICACIÓN DE DOS DOSIS DE

TRES EXTRACTOS DE PLANTAS CON POTENCIAL NEMATICIDA A