Scientia Agropecuaria

ISSN: 2077-9917
sci.agropecu@unitru.edu.pe
Universidad Nacional de Trujillo
Perú

Escobar, Cynthia; Horna, Yuri; Carreño, Carmen; Mendoza, Gilmar

Caracterización de cepas nativas de Azotobacter spp. y su efecto en el desarrollo de Lycopersicon
esculentum Mill. “tomate” en Lambayeque
Scientia Agropecuaria, vol. 2, núm. 1, 2011, pp. 39-49
Universidad Nacional de Trujillo
Trujillo, Perú

Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=357633697005

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 Scientia Agropecuaria 2(2011) 39 - 49

Facultad de Ciencias
Scientia Agropecuaria Agropecuarias
Universidad Nacional de Trujillo

Caracterización de cepas nativas de Azotobacter spp. y su

efecto en el desarrollo de Lycopersicon esculentum Mill.
“tomate” en Lambayeque
Characterization of native strains of Azotobacter spp. and its
effect on growth of Lycopersicon esculentum Mill. “tomato”
in Lambayeque
Cynthia Escobar1, Yuri Horna1, Carmen Carreño1,*, Gilmar Mendoza2
1
Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo, Lambayeque.
2
Departamento de Agronomía y Zootecnia, Universidad Nacional de Trujillo.

Recibido 30 enero 2011; aceptado 12 febrero 2011

Resumen
El objetivo de la presente investigación fue caracterizar y determinar el efecto de cepas nativas de Azotobacter spp.
en el desarrollo vegetativo de Lycopersicon esculentum Mill. “tomate”, como una alternativa al uso indiscriminado
de fertilizantes químicos. Se tomaron muestras de raíces y suelo rizosférico de hortalizas con las que se realizaron
diluciones (10-4) en caldo Ashby-Sacarosa y se incubaron a 30 ºC hasta observar un color amarillo, turbidez y
película superficial. El género Azotobacter se identificó en agar mineral sin nitrógeno y Ashby-Benzoato,
obteniéndose 96 cepas con una producción de 7.10 a 57.99 mgL-1 de ácido indolacético, 0.13 a 1.64 mgL-1 de
nitrógeno fijado como amonio y hasta 1.61 % de eficiencia en la solubilización de roca fosfórica de Bayóvar. Se
obtuvo una suspensión celular (108) de cada una de las cuatro cepas con los mayores valores y se inocularon
independientemente y en consorcio, así como una combinación con 50 % de urea-100 % de roca fosfórica, en la
rizósfera de tomate cv. Río Grande, en un diseño experimental completamente aleatorio. Todas las cepas nativas
incrementaron la altura, volumen radicular, materia seca total, parte aérea y radicular frente al testigo absoluto.
Palabras clave: Azotobacter, PGPRs , Lycopersicon esculentum Mill., ácido indolacético.
Abstract
The objective of this research was characterize and determine the effect of native strains of Azotobacter spp. on the
vegetative growth of Lycopersicon esculentum Mill. "Tomato" as an alternative to the indiscriminate use of chemical
fertilizers. Samples were taken from roots and rhizosphere soil of vegetables from which dilutions (10 -4) in Ashby-
sucrose broth and incubated at 30 ° C to observe a yellow color, turbidity and surface film. The genus Azotobacter
was identified in mineral agar without nitrogen and Ashby-benzoate, obtaining 96 strains with a yield of 7.10 to
57.99 mgL-1 indoleacetic acid, 0.13 to 1.64 mgL-1 of fixed nitrogen as ammonium and up to 1.61% efficiency in the
solubilization of phosphate Bayovar rock. It obtained a cell suspension (10 8) of each of the four strains with the
highest values and inoculated independently and in consortium, as well as a combination with 50% urea-100 %
phosphate rock in the rhizosphere of Rio Grande tomato, in a completely randomized design. The entire native
strains increased height, root volume, total dry matter, shoot and root, compared with absolute control.
Keywords: Azotobacter, PGPRs, Lycopersicon esculentum Mill., indoleacetic acid.

_______________________
* Autor para correspondencia
E-mail: carreno@email.com (C. Carreño)
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1. Introducción disminución de la actividad microbiana

comprometida en la nutrición vegetal. Cada
El tomate (Lycopersicon esculentum Mill.) es
año se incrementa la cantidad de fertilizantes
una de las principales hortalizas cultivadas en
aplicados debido a la menor eficiencia de
el mundo y una de las de mayor valor
adsorción en el suelo y absorción por la
económico. En el Perú, la producción
planta, aumentando los costos de producción.
asciende a 221594 t por año y en la región
Asimismo, se genera un problema ambiental
Lambayeque se estima en 5000 t (Ministerio
debido a la producción de gases tóxicos que
de Agricultura, 2010). El aumento de la
se desprenden de los fertilizantes como los
productividad es importante para la
óxidos de nitrógeno que dañan la capa de
rentabilidad del cultivo; sin embargo, ésta se
ozono (Lara et al., 2007).
ve afectada por diversos factores limitantes
Como una alternativa a los fertilizantes
como la baja fertilidad del suelo, siendo
químicos está la posibilidad de utilizar
necesario la aplicación de nitrógeno (N),
bacterias del suelo, que como parte de su
fósforo (P) y potasio (K), para asegurar el
metabolismo incrementan la fertilidad y
rendimiento adecuado (Loredo et al., 2004).
benefician a las plantas, por lo que se les ha
El nitrógeno, presente en los tejidos verdes de
denominado promotoras del crecimiento de
las plantas y en semillas, es considerado un
las plantas (PGPRs). Entre sus actividades
macronutriente junto con el fósforo y el
están la fijación del nitrógeno, solubilización
potasio. Los suelos tienen cantidades de
de fosfatos, producción de hormonas,
nitrógeno muy superiores a las requeridas por
antibióticos y otros compuestos de
los cultivos; sin embargo, casi todo este
importancia para el desarrollo de los cultivos.
elemento se encuentra en la materia orgánica
Estas bacterias y otros microorganismos
y anualmente sólo se mineralizan 1 a 3 % del
usados en la fertilización de los suelos
nitrógeno total (Ardila, 2007). Debido a esta
agrícolas constituyen los biofertilizantes y ya
liberación lenta, el nitrógeno es el elemento
existen algunos que son comercializados; sin
más limitante para el crecimiento de los
embargo, algunas veces no son efectivos
cultivos por lo cual es indispensable el uso de
debido a que proceden de condiciones
productos sintéticos para lograr una
edafoclimáticas totalmente diferentes, por lo
producción agrícola aceptable. El fósforo, de
que se prefiere el uso de microorganismos
vital importancia para el desarrollo de los
propios de los suelos donde van a ser
vegetales, se encuentra en el suelo como
formas solubles en muy baja concentración, utilizados, adaptados a las condiciones
ecológicas y que puedan ser utilizados,
con valores comprendidos entre 5 y 30 mg
compitiendo exitosamente con la biota nativa.
kg-1, debido a que el fósforo soluble
Por lo expuesto, se realizó el presente estudio,
reacciona con calcio, hierro o aluminio que
cuyo objetivos fueron aislar y caracterizar
provocan su precipitación, disminuyendo su
cepas nativas de Azotobacter spp., así como
disponibilidad para las plantas. Los fosfatos
determinar el efecto de cuatro cepas en el
inorgánicos aplicados como fertilizantes
desarrollo del cultivo de tomate en
químicos también son inmovilizados en el
invernadero.
suelo, por lo que mayoritariamente no son
aprovechados por los cultivos (Fernández et
al., 2005). 2. Material y métodos
Los fertilizantes químicos han sido benéficos Diseño metodológico
para el sector agrícola; no obstante, el abuso El trabajo de investigación se ejecutó en dos
en su utilización genera residuos que fases. En la primera fase descriptiva, se
producen salinización, problemas en el realizó el aislamiento e identificación de
drenaje, compactación del suelo y Azotobacter spp., así como la cuantificación
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del ácido indolacético producido, nitrógeno estéril (10-2) y dos (10-3 y 10-4) en 9 mL de
fijado y roca fosfórica de Bayóvar caldo Ashby-Sacarosa con azul de
solubilizada por las cepas nativas, utilizando bromotimol. Las diluciones 10-3 y 10-4 se
un diseño no experimental transeccional incubaron a 28 ºC por 4 días y se reportaron
descriptivo (Hernández et al., 2003). En la como positivos los caldos donde se observó
segunda fase, con una investigación viraje del verde al amarillo, turbidez y una
explicativa, se determinó el efecto de la película superficial. Para el aislamiento se
inoculación de cuatro cepas nativas tomó una alícuota, se sembró mediante la
productoras de ácido indolacético, fijadoras técnica francesa de agotamiento y estría en
de nitrógeno y solubilizadoras de fosfato en agar Ashby-Sacarosa y se incubó a 28 ºC
el desarrollo vegetativo de tomate cv. Río hasta por 4 días, seleccionándose las colonias
Grande, en condiciones de invernadero. grandes y viscosas a las que se realizó una
tinción de Gram y cuando se observaron
Muestreo bacilos grandes, Gram negativos y quistes,
Durante los meses de marzo a junio de 2009, se sembraron en agar mineral sin nitrógeno.
se recolectaron 60 muestras de raíces y suelo Después de una incubación a 28 ºC por 48
rizosférico de cultivos de tomate, Lactuca. horas, se seleccionaron las colonias, positivas
sativa L. “lechuga”, Allium cepa L. a las pruebas de catalasa y oxidasa y se
“cebolla”, Spinacia oleracea L. “espinaca”, sembraron en agar Ashby-Benzoato,
Daucus. carota L. “zanahoria” y Beta considerándose presuntivamente como
vulgaris L. “betarraga”, en campos agrícolas bacterias del género Azotobacter aquellas que
del caserío Callanca (6º 53’ 49’’ y 6º 47’ 57’’ presentaron crecimiento y producción de
de latitud sur y 79º 51’ 46’’ y 79º 46’ 59’’ de pigmentos. A su vez, se sembraron en agar
longitud oeste), distrito de Monsefú, y tripticasa soya (TSA), a 28 ºC por 48 horas y
distrito de Reque (6º 52’ 47’’ y 6º 48’ 55’’ posteriormente se guardaron a temperatura
de latitud sur y 79º 50’ 47’’ y 79º 44’ 59’’ de ambiente. Para la identificación se investigó
longitud oeste), provincia de Chiclayo, región la utilización de glucosa, maltosa y manitol
Lambayeque. La zona presenta un clima y se realizó la prueba de desnitrificación,
subtropical, con una temperatura media de 28 según el Manual de Bergey de Bacteriología
ºC. Las muestras se transportaron para su Sistemática (Garrity et al., 2004) y Jiménez
procesamiento en el laboratorio de (2007).
Microbiología y Parasitología de la Facultad
de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional Cuantificación de ácido indolacético,
Pedro Ruiz Gallo. nitrógeno y solubilización de roca fosfórica
Cada una de las cepas de Azotobacter spp.
Obtención de cepas nativas de Azotobacter cultivadas en TSA por 48 horas, se
spp. sembraron por duplicado en 5 mL de caldo
Se tomaron 10 g de raíces y suelo adherido a Tripticasa Soya y se incubaron por 96 horas a
ellas, se depositaron en frascos de vidrio con 28 ºC en agitación constante (150 rpm).
90 mL de solución salina (NaCl 0.89 %) Después, se realizó un análisis colorimétrico
estéril y se agitaron manualmente durante 20 para determinar la concentración de ácido
minutos para obtener una suspensión de indolacético (AIA), para lo cual cada cultivo
suelo, que a su vez constituyó la dilución 10-1. bacteriano se centrifugó a 1000 rpm por 20
Para favorecer el crecimiento de bacterias minutos. Del sobrenadante se tomó una
fijadoras de nitrógeno, cada muestra fue alícuota de 1 mL al que se adicionó 1 mL del
enriquecida, para lo cual se realizaron tres reactivo de Salkowski en relación 1:1 v/v, se
diluciones adicionales, una en solución salina mantuvo en oscuridad a 30 ºC por 30 minutos

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y se leyó la absorbancia en espectrofotómetro molibdato (Rodier y Rodi, 1981).Para el

a 530 nm. Por su parte, para cuantificar el cálculo del porcentaje de eficiencia de
nitrógeno fijado, se utilizó el método solubilización de roca fosfórica se restó la
indirecto de valoración del ión amonio, con concentración de fósforo del caldo SRSM (Si
la técnica colorimétrica de Berthelot: fenol- = 15.26 g de roca fosfórica por litro,
hipoclorito. Cada una de las cepas bacterianas equivalentes a 2000 mgL-1) menos la
se cultivó en 20 mL de medio Burk concentración de fósforo no solubilizado
modificado, a 28 ºC, durante 96 horas, a 150 remanente. El valor obtenido se dividió entre
rpm. Después, se tomaron 5 mL de los el Si y a su vez se multiplicó por 100.
cultivos y se adicionaron 5 mL de cloruro de
potasio 2M, se homogenizaron y se dejaron Recolección y análisis físico químico del
en reposo por 1 hora. A continuación los suelo experimental
tubos se centrifugaron a 2000 rpm durante 20 En campos agrícolas comerciales del caserío
minutos y al sobrenadante se adicionaron 0.4 de Callanca, distrito de Monsefú y del distrito
mL de solución alcohólica de fenol al 10%; de Reque, se recolectaron 40 submuestras de
0.4 mL de nitroprusiato de sodio al 0.5% y 1 suelo de 2 kg cada una, a una profundidad de
mL de solución oxidante. La mezcla se 0.20 m. Las submuestras se mezclaron para
mantuvo en reposo por 1 hora y obtener un total de 80 kg de suelo y se tomó
posteriormente se leyó la absorbancia en 1 kg para la caracterización física química en
espectrofotómetro a 632.9 nm. Se el laboratorio de Suelos de la Facultad de
seleccionaron las cuatro cepas nativas con los Agronomía, Universidad Nacional Pedro
mayores valores en ácido indolacético, así Ruiz Gallo. Según los resultados, el suelo es
como en nitrógeno fijado como amonio y se fuertemente alcalino (pH 8.24) y
-1
determinó la eficiencia de solubilización de medianamente salino (CE 5.14 mmhos cm )
roca fosfórica de Bayóvar. Las cepas fueron con una textura franco areno – arcilloso, con
sembradas en Agar Sundara Rao Sinha, un contenido bajo de materia orgánica,
SRSM, con roca fosfórica de Bayóvar (30% nitrógeno, fósforo y carbonato de calcio, de
P2O5), considerándose como positivo para la 0.5 %, 0.09 %, 5.5 ppm y 0.42 % y un
solubilización el cambio del color del contenido medio de potasio de 7.15 ppm.
indicador al amarillo y la formación de un Después el suelo se tamizó con una malla de
halo translúcido alrededor de la colonia 0.16 mm, se esterilizó en autoclave a 121 ºC y
después de una incubación a 28 ºC por 4 días. a 1 atmósfera de presión durante 3 horas
A continuación de cada cepa de Azotobacter (Díaz et al., 2001) y se distribuyó en 36
cultivada en TSA se obtuvo una suspensión, macetas a razón de 2 kg por maceta.
se estandarizó la concentración a 3x108
células mL-1 y se inocularon 25 mL en Registro de temperatura
biorreactores tipo tanque, Batch, con flujo de Durante los meses de enero a marzo, la
aire descendente (Miranda et al., 2006), temperatura promedio en invernadero fue de
conteniendo 225 mL de caldo SRSM. La 30 ºC con un valor máximo de 31 ºC y un
incubación se realizó a 28 ºC, con aireación mínimo de 29 ºC.
constante (0.8 vvm) durante 10 días. Para la
cuantificación del fósforo solubilizado, a Características de la especie vegetal
partir de la inoculación (0 horas) y cada 24 cultivada
horas hasta los 10 días, se tomaron muestras Se sembró tomate cv. Río Grande, que
de 20 mL de los cultivos a las que se les requiere 78 días a la madurez fisiológica y
determinó el pH y se cuantificó el fósforo 105 a 140 días (128 días) al inicio de
soluble mediante el método colorimétrico del cosecha, con 4 a 5 kg de frutos por planta y

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con un peso de 150 a 180 g por fruto la base de la planta. Inmediatamente después
(Sánchez y Zuloeta, 2002). de la inoculación, se aplicó el 100% de la
dosis de P recomendada (100 kg ha -1),
Diseño experimental equivalente a 0.7442 g de roca fosfórica de
El trabajo de investigación se realizó Bayóvar por maceta y 10 días después de la
utilizando el Diseño Experimental inoculación bacteriana se aplicó el 50 %
Completamente Aleatorio (DCA), con doce de la dosis de N recomendada (180 kg ha -1),
tratamientos y tres repeticiones, totalizando equivalente a 0.4369 g de urea por maceta.
36 unidades experimentales. Los tratamientos
correspondieron a cuatro cepas nativas de Evaluaciones
Azotobacter spp. (TC30, ZC26, TC06 y Transcurridos 70 días después de la siembra,
TC20), cuatro tratamientos donde se se extrajeron las plantas, determinándose la
combinaron cada cepa con 50 % de altura y el peso de la materia seca aérea y
fertilizante nitrogenado y 100 % de radicular. Asimismo, se calculó el índice de
fosforado, un tratamiento de las cuatro cepas efectividad de la inoculación (IEI) expresado
de Azotobacter spp. en consorcio, un en porcentaje:
tratamiento del consorcio con 50 % de
fertilizante nitrogenado y 100 % de
fosforado, un testigo químico (50% de
fertilizante nitrogenado y 100% de fosforado)
y un testigo absoluto. Análisis estadístico
Se realizó el análisis de varianza para
determinar las diferencias entre los
Siembra de semillas de tomate
En cada una de las 36 macetas con suelo tratamientos y la prueba múltiple de Tukey
tratado, previamente humedecido y (α = 0.05) para comparar la medias entre ellos
distribuidas según el diseño experimental se (Hernández et al., 2003). Se utilizó el
sembraron cinco semillas de tomate. Después software estadístico SPSS versión 15.0.
de 20 días se eliminaron las plantas más
pequeñas, para finalmente conservar dos por 3. Resultados y discusión
maceta.
El 93.33% de las muestras de raíces y suelo
adherido de hortalizas resultó positivo para el
Inoculación de Azotobacter spp.
Cada cepa nativa de Azotobacter spp. se enriquecimiento de bacterias fijadoras de
sembró en TSA a 28 ºC por 48 horas y con la nitrógeno, porcentaje superior a 42.5% y
biomasa desarrollada se obtuvieron 30.0%; reportados por Jiménez (2007) y Borda
suspensiones en solución salina estéril cuya et al. (2009). La diferencia puede ser explicada
concentración se estandarizó a 3x108 porque en el presente estudio se trabajó con
células mL-1. Después de 20 días de la muestras enriquecidas, lo que permitió el
siembra se inocularon 10 mL en la rizósfera, incremento de estas bacterias, a diferencia de
retirando cuidadosamente el suelo hasta la técnica de gránulos de suelo utilizada por
descubrir las raíces en cuatro puntos otros investigadores, donde no se enriqueció la
equidistantes de la planta. muestra. Así mismo, el 81.67 % de las
muestras resultó positivo para el aislamiento
de Azotobacter spp., obteniéndose 96 cepas,
Fertilización química
La aplicación de nitrógeno como urea (46 % donde microscópicamente se observaron
N) y fósforo como roca fosfórica de Bayóvar bacilos grandes, Gram negativos y quistes
(30 % P2O5) se realizó a 10 cm alrededor de (Figura 1), coincidiendo con Lozada y Rivas
(2010), respecto a que las especies del género
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Azotobacter establecen asociación con una seleccionadas cuatro cepas con los mayores
gran cantidad de cultivos como hortalizas, valores (Tabla 1), que a su vez, desarrollaron
maíz, arroz, yuca y batata entre otros. en agar SRSM con viraje del indicador al
amarillo, como producto de la presencia de
ácidos orgánicos producidos por estas
bacterias (Mantilla, 2007; Jiménez, 2007); sin
embargo, no se observaron los típicos halos de
solubilización de fósforo.

Tabla 1
Ácido indolacético (mgL-1) producido y nitrógeno
fijado (mgL-1 de amonio) por cuatro cepas nativas
de Azotobacter spp.

Ácido
Cepa Amonio
indolacético
Azotobacter spp. (mgL-1)
(mgL-1)
Figura 1. Observación microscópica de
bacilos y quistes característicos de TC06 11.99 1.64
Azotobacter spp. TC20 10.44 0.91
TC30 57.99 0.26
Las cepas nativas de Azotobacter spp. ZC26 14.21 0.56
sintetizaron entre 7.10 a 57.99 mgL-1 de AIA,
valores que se encuentran dentro del rango de
3 a 65 mgL-1 de AIA para diferentes especies De igual manera, Borda et al. (2009)
de Azotobacter (Anwar, 2000). Así mismo, cultivaron Azotobacter spp. en medio
fijaron nitrógeno, alcanzando entre 0.13 a 1.64 Picowskaya modificado demostrando la
mgL-1 de amonio. El valor máximo es superior acidificación del medio, pero no los halos de
a 0.26 mgL-1 reportado por Lara et al. (2007) solubilización.
en el medio Burk modificado. Fueron

Tabla 2
Fósforo solubilizado (mgL -1) y eficiencia (%) de solubilización de roca fosfórica de Bayóvar por cuatro
cepas nativas de Azotobacter spp. cultivadas en caldo SRSM.

Cepa Fósforo solubilizado Sf Tiempo de incubación Eficiencia

Azotobacter sp. (mgL-1) (mg/L) (días) (%)

TC30 2.46 1 967.89 6 1.61

ZC26 0.77 1 969.57 9 1.52
TC06 0.57 1 969.77 9 1.51
TC20 0.46 1 969.89 8 1.51

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Al respecto, Quitral (2006), indicó que la invernadero, observándose disminución en el

técnica de agar fosfato precipitado es útil para número de días a la floración, incremento en la
aislar microorganismos solubilizadores, pero altura, volumen radicular y peso de la biomasa
tiene sensibilidad limitada porque la tasa de seca total, parte aérea y radicular (Tabla 3),
difusión de los ácidos orgánicos excretados y alcanzándose índices de efectividad de hasta
el crecimiento de la colonia afectan el tamaño 28.41, 27.58, 104.58, 101.20 y 191.74%
del halo, así como la solubilidad de la fuente respectivamente frente al testigo absoluto
de fósforo, que en la presente investigación fue (Tabla 4, figura 2 ),coincidiendo con García et
roca fosfórica y que es tres veces menos al. (2001); Bonilla et al. (2002); Reyes et al.
soluble que el fosfato bicálcico utilizado (2008) y Dibut (2009), quienes demostraron
frecuentemente en el medio SRSM (Aparicio y que bacterias del género Azotobacter
Arias, 2010). favorecen el desarrollo vegetativo de
El valor máximo en la eficiencia de diferentes cultivos, por lo que se les considera
solubilización de roca fosfórica (Tabla 2), fue como rizobacterias promotoras del crecimiento
de 1.6 %, por lo que las cepas nativas de vegetal (PGPRs).
Azotobacter spp. no pueden ser consideradas Así mismo, Borda et al. (2009) y Lozada y
como eficientes solubilizadoras, coincidiendo Rivas (2010) concluyeron que Azotobacter es
con Borda et al. (2008), quienes concluyeron un fijador de nitrógeno de vida libre que
que el potencial de estas bacterias como promueve el crecimiento de raíces, lo que
promotoras del crecimiento de las plantas se conlleva a un aumento en la concentración de
debe a su capacidad para fijar nitrógeno y materia seca.
producir ácido indolacético, a pesar que no Por su parte, Dibut (2009) mencionó que entre
son eficientes solubilizadoras de fósforo. los efectos benéficos de Azotobacter en las
Todas las cepas nativas de Azotobacter spp. plantas se consideran el incremento de altura,
influenciaron positivamente el desarrollo área radicular y rendimiento a la cosecha.
vegetativo de tomate cv. Río Grande en

Tabla 3
Días al inicio de la floración, altura, volumen radicular y peso de la biomasa seca total, parte aérea y
radicular de Lycopersicon esculentum Mill. por efecto de cuatro cepas de Azotobacter spp, testigos
químico y absoluto.

Azotobacter spp. Testigo Testigo

Características
químico absoluto
ZC26 TC20 TC06 TC30 Consorcio
Floración (días) 57.67 58.00 52.67 52.33 52.00 58.67 59.33
Altura (cm) 52.77 51.67 53.63 48.00 53.83 47.10 41.77
Raíces (cm3) 11.17 12.33 10.33 10.50 13.83 9.83 9.67
Biomasa total (g) 11.26 11.05 8.83 7.63 13.59 7.53 5.51
Biomasa aérea (g) 8.25 6.95 6.61 5.39 8.25 5.80 4.10
Biomasa raíces (g) 30.01 4.10 2.22 2.24 5.34 1.63 1.41

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Tabla 4
Índices de efectividad (%) en características de Lycopersicon esculentum Mill. “tomate” inoculado con
cepas nativas de Azotobacter spp.

Azotobacter spp.
Testigo
Características ZC26 TC20 TC06 TC30 Consorcio químico
Altura 26.34 23.70 28.41 14.92 28.89 12.77
Volumen radicular 15.52 27.58 6.90 8.62 43.10 1.72
Biomasa seca total 104.58 100.73 60.33 38.58 146.77 34.87
Biomasa seca parte aérea 101.20 69.50 61.09 31.50 101.07 41.42
Biomasa seca radicular 114.31 191.74 57.94 59.22 280.00 15.66

de las auxinas son dependientes de la

concentración, que generalmente debe ser
mínima para estimular el crecimiento, porque
concentraciones superiores ocasionan efectos
inhibitorios (Mantilla, 2007). No obstante, el
efecto positivo del AIA se hizo evidente en las
plantas de tomate inoculadas con Azotobacter
spp. TC30 y TC06, que iniciaron la floración
con mayor precocidad, coincidiendo con
Bonilla et al. (2002), quienes determinaron un
menor número de días a la floración en
Figura 2. Altura de Lycopersicon esculentum plantas de tomate inoculadas con Azotobacter
Mill. “tomate”, 40 días después de la inoculación frente al testigo.
individual y en consorcio de cepas nativas de La aplicación de 50 % de urea y 100 % de roca
Azotobacter spp. fosfórica de Bayóvar con cada una de las cepas
nativas de Azotobacter spp. (Tabla 5),
incrementó mayoritariamente el peso total y
Las cepas nativas Azotobacter spp. ZC26 y pate aérea de las plantas y en menor grado el
TC20 alcanzaron los mayores valores en los volumen y peso de la parte radicular frente a
índices de efectividad en volumen radicular y los tratamientos donde no se aplicaron los
peso de la biomasa seca total, aérea y fertilizantes químicos, coincidiendo con
radicular, superiores a los de Azotobacter spp. Medina (2000) citado por Lozada y Rivas
TC30, seleccionada por su valor máximo en (2010), quienes evaluaron el efecto de
ácido indolacético (57.99 mgL-1). Azospirillum lipoferum, A. brasilense y
Investigadores como Celis y Gallardo (2008) Azotobacter chroococcum solos y en
demostraron que las auxinas, principalmente el combinación con NPK, en el cultivo de
AIA, regulan la promoción del crecimiento y tomate cv. Campbell-28 en etapa de semillero,
diferenciación celular, por lo que inducen determinando que en altura y biomasa fresca,
crecimiento en longitud de la planta, mayor los tratamientos inoculados con las bacterias
volumen radicular, mayor floración y superaron al tratamiento sin fertilizar, y éstos a
maduración de frutos; sin embargo, los efectos su vez fueron superados por el tratamiento
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Azotobacter chroococcum + NPK. Lozada y los obtenidos con los tratamientos donde se
Rivas (2010) explicaron que el suministro de aplicó el consorcio con 50% de urea más
nutrientes, particularmente nitrógeno, junto a 100% de roca fosfórica, así como cada una de
la inoculación de Azotobacter spp. permiten las cepas de Azotobacter spp. más los
las mejores respuestas en los cultivos, debido a fertilizantes químicos.
que las bacterias fijadoras de nitrógeno para su La mayor efectividad del consorcio es
establecimiento en el suelo requieren explicada por las interacciones como
condiciones como temperatura, pH, humedad y protocooperación y simbiosis que existen en
fuentes nutricionales de carbono, nitrógeno y los microorganismos y que pueden ser
fósforo. beneficiosas al mejorar el desarrollo y
La inoculación del consorcio de cepas nativas crecimiento o permitir la supervivencia
de Azotobacter spp. disminuyó el número de (Coyne, 2000). Por esta razón, diversos
días a la floración y permitió alcanzar valores microorganismos como las bacterias lácticas,
en volumen y biomasa radicular así como en generalmente se utilizan en mezcla de cepas de
altura y biomasa seca total y de la parte aérea una misma especie o de géneros diferentes.
que no fueron estadísticamente diferentes de

Tabla 5
Prueba de Tukey (α = 0,05) del volumen radicular (cm3), peso (g) de biomasa seca total, parte aérea y
radicular de Lycopersicon esculentum Mill. por efecto de cuatro cepas nativas de Azotobacter spp. y sus
combinaciones en Lambayeque.

Peso de biomasa seca (g)

Volumen
Características Parte
radicular (cm3) Total Parte aérea
radicular
Azotobacter spp en consorcio
13.83 a 13.59 a 8.25 abc 5.34 a

Azotobacter spp. en consorcio + Urea + RF 13.50 a 14.09 a 9.14 a 4.95 a

Azotobacter sp. UNPRG TC20 + Urea + RF 13.17 a 13.06 ab 8.70 ab 4.37 a
Azotobacter sp. UNPRG ZC26 + Urea + RF 12.50 ab 13.05 ab 8.25 ab 4.21 ab
Azotobacter sp. UNPRG TC06 + Urea + RF 12.33 abc 11.82 bc 7.65 bcd 4.16 ab
Azotobacter sp. UNPRG TC30 + Urea + RF 12.33 abc 11.20 c 7.15 cd 4.04 ab
Azotobacter sp. UNPRG TC20
12.33 abc 11.05 c 6.95 de 4.10 ab
Azotobacter sp. UNPRG ZC26
11.17 bcd 11.26 c 8.25 abc 3.01 bc
Azotobacter sp. UNPRG TC30
10.50 cd 7.63 de 5.39 f 2.24 cd
Azotobacter sp. UNPRG TC06
10.33 d 8.83 d 6.61 def 2.22 cd
Testigo químico
9.83 d 7.43 e 5.80 ef 1.63 d
Testigo absoluto
9.67 d 5.51 f 4.10 g 1.41 d

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La protocooperación de Streptococcus Referencias

thermophilus y Lactobacillus delbrueckii ssp.
Anwar, G. 2000. Production of growth hormones and
bulgaricus en la elaboración del yogurt es el nitrogenase by diazotrophic bacteria and their effect on
ejemplo más conocido y probablemente la plant growth. PhD thesis. University of Punjab. India.
asociación más estable, donde los lactobacilos Aparicio, J.; Arias, L. 2010. Efecto de hongos
solubilizadores de roca fosfórica de Bayóvar en el
suministran los aminoácidos y péptidos que desarrollo de tomate (Lycopersicon esculentum Mill.) en
los estreptococos necesitan y a su vez éstos invernadero. Tesis Lic. Biología. Universidad Nacional
producen ácido fórmico que estimula el Pedro Ruiz Gallo, Lambayeque, Perú.
Ardila, L. 2007. Fijación de Nitrógeno atmosférico.
desarrollo de los bacilos lácticos (Heller, Agricultura Sensitiva. Disponible en:
2008). De manera similar, aunque en un http://www.agriculturasensitiva.com/n_atmosferico.htm.
proceso diferente, Castro y Gonzáles (2003) Bonilla, R.; Novo, R.; Venegas, N.; Galvis. A.; Martínez, M.;
Parra, D. 2002. Generación de tecnologías para la
demostraron una mayor eficiencia en la utilización de la fijación no simbiótica de nitrógeno como
degradación de cianuro por consorcios de alternativa de fertilización. Editorial Corpoica, Colombia.
bacterias, frente al valor alcanzado con la Borda, D.; Pardo, J.; Martínez, M.; Montaña, J. 2009.
Producción de un biofertilizante a partir de un
inoculación de cada una de los aislamiento de Azotobacter nigricans obtenido en un
microorganismos independientemente. Por lo cultivo de Stevia rebaudiana Bert. Revista Universitas
expuesto, la aplicación en consorcio de las Scientiarum 14.
Castro, M.; Gonzáles, F. 2003. Eficiencia de la
cepas nativas de Azotobacter sp. TC20, biodegradación de cianuro por un consorcio microbiano
ZC26, TC06 y TC30 productoras de ácido aislado de aguas superficiales de quebradas que
indolacético, fijadoras de nitrógeno y alimentan el río Llaucana. Cajamarca, Febrero-
Diciembre, 2002. Tesis Lic. Biología. Universidad
solubilizadoras de fósforo, es una alternativa Nacional Pedro Ruiz Gallo, Lambayeque, Perú.
para la aplicación de fertilizantes químicos en Celis, L.; Gallardo, I. 2008. Estandarización de métodos de
el cultivo de tomate. detección para promotores de crecimiento vegetal (acido
indolacético y giberalinas) en cultivos microbianos. Tesis
Microbiólogo Agrícola y Veterinario. Pontificia
Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia.
Coyne, M. 2000. Microbiología del Suelo: Un enfoque
exploratorio. Editorial Paraninfo, España.
4. Conclusiones Díaz, P.; Dávila, J.; Espinosa, M. ; Cardenas, H. 2001.
Inoculación de bacterias promotoras del crecimiento en
Los resultados obtenidos indican que las lechuga. Terra 19: 327-335.
cuatro cepas nativas de Azotobacter spp., Dibut, B., 2009. Biofertilizantes como insumos en
productoras de ácido indolacético, fijadoras agricultura sostenible. Instituto de Investigaciones
Fundamentales en Agricultura Tropical. La Habana,
de nitrógeno y solubilizadoras de roca Cuba. Editorial Universitaria. Disponible en:
fosfórica influenciaron positivamente en el http://revistas.mes.edu.cu.
desarrollo vegetativo de tomate cv. Río Fernández, L.; Rojas, F.; Vásquez, E.; Medina, A. 2005.
Bacterias solubilizadoras de fosfato inorgánico aisladas
Grande, disminuyendo el número de días a la de suelos de la región sojera. Ciencia del Suelo 23: 215-
floración e incrementando la altura, volumen 220.
radicular, materia seca total, aérea y radicular García, I.; Medina, M.; Espinosa, J. 2001. Desarrollo de un
yogurt con cualidades prebióticas. Revista Chilena de
de plantas de tomate cv. Río Grande. Nutrición 36: 308.
Garrity, M.; Brenner, D.; Krieg, N.; Staley, J.; Boone, D.; De
Así mismo, cuando estas cepas se inocularon Vos, P. 2004. Bergey´s Manual of Systematic
en consorcio, los índices de efectividad Bacteriology. Volume 2: The Proteobacteria, Part B: The
fueron superiores a los obtenidos con la Gamma proteobacteria. 2 ed. Editorial Springer, Estados
Unidos.
inoculación individual, sus combinaciones Heller, K. 2008. Bacterias probióticas en alimentos
con 50 % de urea y 100 % de roca y testigo fermentados. Características de los productos y
químico, alcanzando valores de 28.89 %, microorganismos iniciadores. Mundo Lácteo y Cárnico.
Disponible en http://www.mundolacteoycarnico.com.
43,10 %, 146.77 %, 101.07 % y 280.00 %, Hernández, R.; Fernández, C.; Baptista, P. 2003.
respectivamente frente al testigo absoluto. Metodología de la Investigación.3 ed. Mc Graw Hill
Interamericana Editores S.A., México.

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 C. Escobar et al. / Scientia Agropecuaria 2(2011) 39 - 49

Jiménez, D. 2007. Caracterización molecular de cepas Miranda, H.; Robles, H.; Villanueva, L.; Rodriguez, C.
nativas colombianas de Azotobacter spp. mediante el 2006. Biorreactores, Diseños y Aplicaciones. Sociedad
análisis de restricción del DNA ribosomal 16S. Tesis Peruana de Biotecnología. Trujillo, Perú.
Microbiólogo. Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Quitral, A., 2005. Solubilización de roca fosfórica por
Colombia. hongos rizosféricos aislados de especies forrajeras de
Lara, C.; Villalba, M.; Oviedo, L. 2007. Bacterias fijadoras importancia en la X Región de Chile. Tesis de
asimbióticas de nitrógeno de la Zona agrícola de San Licenciatura. Universidad Austral de Chile, Valdivia,
Carlos. Córdoba, Colombia. Revista Colombiana de Chile.
Biotecnología 9 (2): 6-14. Rojas, J.; N. Moreno. 2008. Producción y formulación de
Loredo, C.; López, L.; Espinosa, D. 2004. Bacterias prototipos de un biofertilizante a partir de bacterias
promotoras del crecimiento vegetal asociadas con asociadas al cultivo de arroz (Oryza sativa). Revista
gramíneas: una revisión. Terra Latinoamericana, 22 (2): Colombiana de Biotecnología 10 (2): 27-35.
225-239. Reyes, I.; Alvarez, L.; Ayoubi, H.; Valery, A. 2008.
Lozada, L.; Rivas, C. 2010. Evaluación del efecto de la Selección y evaluación de rizobacterias promotoras del
inoculación de Azotobacter spp. en plantas de ají dulce crecimiento en pimentón y maíz. Bioagro 20 (01): 37-48.
(Capsicum frutescens). Trabajo de grado Técnico Rodier, J.; Rodi, L. 1981. Análisis de Aguas. Ediciones
Superior Agrícola. Universidad de los Andes, Trujillo. Omega, España.
Mantilla, M. 2007. Evaluación de la acción de un Sánchez, A.; Zuloeta, J. 2002. Fuentes y dosis de
bioinoculante sobre un cultivo de crisantemo abonamiento en el manejo agroecológico de cultivos
(Chrysanthemun morifolium var. yoko ono) en periodo asociados de tomate (Lycopersicon esculentum Mill.) cv.
de enraizamiento. Tesis Microbiólogo Agrícola. Río Grande y beterraga (Beta vulgaris L.) cv. Early
Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia. Gonder, en la parte baja del valle Chancay. Tesis
Ministerio de Agricultura 2010. Estadística Agraria Ingeniero Agrónomo. Universidad Nacional Pedro Ruiz
Mensual. Octubre 2010. Oficina de Estudios Económicos Gallo, Lambayeque, Perú.
y Estadísticos del Ministerio de Agricultura. Perú.

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