Tarea No. 2 Ley de Beer Lambert Analisis Instrumental

CENTRO DE CIENCIAS BÁSICAS
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA
ANÁLISIS INSTRUMENTAL
ESPECTROMETRÍA
ALUMNO:
Derek Ebenezer Mata Navarro
ING. BIOQUÍMICA
Semestre: 4° Grupo: “A”
PROFESORA:
Janett Cecilia Sanchez Arana
Aguascalientes, Ags.
05 de Marzo de 2021
ING. BIOQUÍMICA MCQ. JANETT CECILIA SÁNCHEZ ARANA

1.- Investiga y explica las desviaciones que puede tener la ley de Lambert-Beer: Desviaciones químicas y
desviaciones instrumentales (radiación policromática y luz parásita).
Limitaciones Físicas: En altas concentraciones, la apertura entre moléculas disminuye, por lo cual, cualqueir cambio en la
molécula absorbente tiene una afectación directa en la capacidad de absorción.
Desviaciones Químicas: Las especies absorbentes tienden a asociarse, disociarse o a reaccionar con el solvente, originando
productos con características distintas a las del analito.
Desviaciones Instrumentales:
1. Radiación Dispersa: La radiación dispersa difiere en gran medida la longitud de onda con respecto a la radiación
principal. Alcanzando el detector sin haber pasado a través de la muestra.
2. Radiaciones Policromáticas: Para la ley de Beer, la radiación incidente debe ser monocromática (dependiendo de
las características tecnológicas del sistema óptico).
2.- Explicar con tus palabras la diferencia entre transmitancia, absorbancia y absortividad molar. Además, señala
¿Cuál de ellas es proporcional a la concentración?
1
Transmitancia: Es la cantidad de luz que logra atravesar una muestra contenida en un recipiente. Cantidad de luz proveniente de la
muestra dividida entre la cantidad de luz incidente.
Absorbancia: Es un factor que indica la cantidad de luz absorbida por una muestra. Es directamente proporcional a la
concentración de una muestra.
Absortividad Molar: Cantidad de luz absorbida por una disolución de una sustancia de estudio, inversamente proporcional a la
concentración de la sustancia de estudio.
3.- La absorbancia de una disolución 2.31 x 10 -5 M de un compuesto es 0.822 a la longitud de onda de 266 nm, en una
cubeta de 1.00 cm. Calcular la absortividad molar a 266 nm.

4.- Una muestra de 25 mL de vertidos que contiene hierro se acidifican con ácido nítrico, y se tratan con un exceso
de KSCN para formar un complejo rojo. (El KSCN es incoloro). La disolución se diluye luego a 100 mL y se pone en
una cubeta de camino óptico variable. Como disolución de comparación, se tratan 10 mL de una muestra de
referencia de Fe +3 6.8 x 10 -4 M con HNO3 y KSCN, y se diluye a 50 mL. La referencia se coloca en una celdilla de 1
cm de camino óptico. La muestra del vertido da la misma absorbancia que la referencia cuando el camino óptico de
su cubeta es de 2.48 cm. ¿Cuál es la concentración de hierro en la muestra problema (vertido)?

5.- Exprese las absorbancias siguientes en porcentaje de transmitancia:
a) 0.0350 c) 0.494
b) 0.310

6.- Convierta los siguientes datos de transmitancia en absorbancias:
a) 22.7% c) 0.103
b) 31.5%

7.- Una solución que contiene 8.75 ppm de KMnO4 tiene una transmitancia de 0.743 en una celda de 1 cm a 520nm.
Calcula la absortividad molar de la especie.

8.- Una disolución de 4.14 x 10 -3 M de un compuesto presentó una transmitancia de 0.126 cuando se midió en una
celda de 2 cm. Calcular la concentración del compuesto necesaria para que la transmitancia aumente tres veces
cuando se utiliza una celda de 1 cm.
9.- Si una muestra para análisis espectrofotométrico se coloca en una cubeta de 10 cm tendrá una absorbancia 10
veces mayor que colocada en una de 1 cm ¿Aumentará también la absorbancia de la disolución del blanco enun
factor de 10? ¿Porqué?
Si la sustancia con un factor de 10 no aumentara la absorbancia, esto se sabe al estudiar el caso con la formula ya que (A =
ε b c), la absorbancia es directamente proporcional a la concentración de la sustancia. Dado que si se siluye la sustancia en
un factor de 10, disminuiriamos la absorbancia en un factor de 10.
Si se diluye la sustancia, la absorbancia disminuirá.

10.- Un procedimiento para determinar trazas de yoduro (I−) en aguas consiste en oxidar I− a I2 en un complejo
intensamente coloreado con el colorante verde brillante que se extrae en el disolvente orgánico tolueno.
a) Una disolución 3.15 x 10 -6 M del complejo coloreado presenta una absorbancia de 0.267 nm en una cubeta de
1 cm. Una disolución de blanco, con agua destilada en lugar de agua subterránea, tiene una absorbancia de 0.018.
Hallar la absortividad molar del complejo coloreado.
b) La absorbancia de una disolución problema preparada con agua subterránea es 0.175. Hallar la
concentración de I− en el problema.

11.- El contenido de hierro en bizcochos dulces se determina por formación del quelato tris (1,10-fenantrenolina)
Fe(II). Si una solución estándar de 0.50 μg/mL presenta una absorbancia de 0.34 a 515 nm con una celda de
1.00 cm, calcular los valores de %T y a para este sistema.

12.- Se desea determinar el contenido de proteínas de una muestra incógnita por medio de un método
espectrofotométrico. Para ello se realiza una curva de calibración empleando una proteína de referencia como
patrón. Se obtuvieron los siguientes datos:
a. Grafique la curva de calibración, indique el rango de respuesta lineal del método y obtenga la ecuación de
la recta.
b. Si su muestra arrojó una absorbancia de 0.506 ¿qué concentración de proteína tiene la muestra?

13.- ¿Cuál es la concentración de una solución de NADH (coeficiente de absorción molar a 340 nm igual a 6220M-1
cm-1), 1 mL de la cual tiene una absorbancia de 0.16 en una cubeta de 1 cm de paso óptico?
Se tiene una solución de NADH tiene una absorbancia a 340 nm de 1,24. ¿Cuántos mL de esta solución se deberán
tomar para preparar 10 ml de una solución 1 µM?
¿Cuántos μmoles de NADH hay en 10 mL de una solución que tiene una absorbancia de 0.31 a 340 nm?

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14.- Se pueden determinar las concentraciones de una mezcla de Fe+3 y Cu +2 formando el complejo con
hexacianorutenato (II), Ru(CN)6-4, que forma un complejo de color azul- violáceo con el Fe+3 (λmax = 550 nm) yun
complejo gris pálido con el Cobre (λ max = 396 nm) Las absortividades molares de los complejos de metal se resumen
en la tabla siguiente:
Cuando una muestra que contiene Fe+3 y Cu+2 se analiza en una cubeta de 1 cm de paso óptico la absorbanciaa 550
nm fue de 0,183 y la absorbancia a 396 nm fue de 0,109. ¿Cuál es la concentración molar de Fe +3 y Cu+2 en la
muestra?

15.- Los compuestos A y B absorben en la región UV del espectro. La sustancia A tiene un máximo a 267 nm
(a=175 Lt g-1cm-1) y un mínimo a 312 nm (a=12.6 Lt g-1cm-1). La sustancia B exhibe un máximo de absorción a 312
nm (a=186 Lt g-1cm-1) y no absorbe a 267 nm. Una solución que contiene los dos componentes tiene unaabsorbancia
de 0.726 y 0.544 a 267 y 312 nm respectivamente cuando se utilizan celdas de 1 cm de camino óptico. ¿Cuáles son
las concentraciones de A y B en mg/l?
Lo maravilloso de aprender algo, es que nadie puede arrebatárnoslo.

B.B. King

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Si se diluye la sustancia, la absorbancia disminuirá.

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Lo maravilloso de aprender algo, es que nadie puede arrebatárnoslo.

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