Bacterias Anaerobias Imednotes

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Bacterias anaerobias

Bacterias anaerobias no esporuladas: Va a prevenir la instalación de agentes patógenos


Bacteroides y contribuye al desarrollo de la respuesta inmune.
Bacterias anaerobias esporuladas: Clostridium Por esto es tan importante que tengamos dentro de
Se puede definir a las bacterias anaerobias como la microbiota a este grupo de bacterias.
aquellas que para crecer en una superficie de un • La protección que nos da se puede ver
medio de cultivo necesitan una atmósfera sin oxígeno, comprometida en procesos erosivos de las
debido a que para estas bacterias este elemento va mucosas, procesos obstructivos y tratamientos
a ser tóxico. antimicrobianos prolongados.
• La localización dentro de la microbiota nos va a
ayudar a identificar el tipo de bacteria
comprometida cuando tengamos un cuadro clínico
de alguna infección. (Sospechamos de bacterias
específicas según el gráfico siguiente)

- Clasificación de los anaerobios de acuerdo a la


coloración de Gram, divididos en Gram + y Gram -.
Dentro de estos tenemos a los bacilos y cocos.
- El grupo Clostridium está dentro de los Gram + Los números que vemos debajo de las bacterias de la
anaerobios formadores de esporas junto a otros cavidad oral y colon, se refieren a la relación entre
grupos menos comunes en patologías del hombre. bacterias anaerobias y aerobias dentro de la
- En los bacilos Gram - anaerobios los más microbiota.
representativos son los Bacteroides.
Bacteroides spp.
BACTERIAS ANAEROBIAS NO ESPORULADAS • Son los más frecuentemente aislados de infecciones
Clasificación: por anaerobios en el ser humano: Bacteroides
Familia Bacteroidaceae fragilis.
- Bacteroides: • Gran cantidad de factores de virulencia y mayores
• Fragilis (más frecuente) tasas de resistencia contra los antimicrobianos.
• Vulgatus
• Ovatus
• Thetaiotaomicron
• Distasonis
• Ureolyticus
• Gracilis
- Fusobacterium
- Prevotella
- Porphyromonas
FACTORES DE VIRULENCIA
Los BGNA poseen factores de virulencia que le
HÁBITAT
Los BGNA (Bacilos Gram - Anaerobios) forman parte permiten adherirse, invadir y constituirse en biofilms. La
formación de abscesos y la destrucción tisular son
de la microbiota de las mucosas oral, gastrointestinal y
genital. La colonización con bacterias anaerobias presentaciones características de estas bacterias.
comienza luego del nacimiento y se incrementa en • Adhesinas: Son proteínas especializadas de la
cantidad y diversidad a través del tiempo. pared bacteriana que se adhieren a receptores
de las células del hospedero, que están implicadas
• El hábitat de estos organismos anaerobios tiene un
rol que consiste en mantener el balance ecológico. en el primer paso para la colonización o infección.
• Cápsula: Son polisacáridos capsulares de B. fragilis cirugías, ruptura de un divertículo, apendicitis o
(van a permitir formar abscesos intraabdominales). cáncer de colon)
Cubierta con composición variable con función de
inhibir la fagocitosis.
• Producción de ácidos grasos de cadena corta:
Compuestos que provocan necrosis tisular,
resistencia a la muerte intrafagocitaria y descenso
del pH al interior de los abscesos que favorece la
inhibición de la fagocitosis para que el
microorganismo pueda seguir proliferando. Pueden
inhibir la actividad bactericida de los neutrófilos.
• Lipopolisacárido: La porción del LPS, denominada • Infecciones en tracto genital femenino:
lípido A, es una endotoxina que estimula la - Ocasionalmente en cultivos vaginales.
respuesta inmune innata y es mediador de shock - Abscesos en la glándula de Bartolino y en las
séptico. Va a desencadenar una respuesta trompas de Falopio
inflamatoria en el huésped. - Aborto espontáneo a mitad de gestación.
• Enzimas hidrolíticas: Hemolisinas, proteasas, • Infección de heridas, tejido subcutáneo y abscesos
colagenasas, neuraminidasas, lipasa, que ejercen del área rectal (úlceras de decúbito y abscesos
una acción nociva sobre las moléculas o las peri sacrales)
estructuras celular del hospedero. • Osteomielitis:
• Enterotoxina: Poderosa metaloproteasa descrita en - Huesos largos post trauma o fractura
las especies enterotoxigénicas de B. fragilis. relacionada con enfermedad vascular
Produce una diarrea de tipo acuoso con pérdida periférica, úlceras decúbito.
de líquidos y electrolitos. - Huesos craneales y faciales.
- Pélvica después de cirugía.
IMPACTO CLÍNICO Bacteriemias por anaerobios son poco frecuentes:
Las infecciones por BGNA son en su gran mayoría - Asociadas a cirugías y enfermedades
polimicrobianas, piogénicas, de origen endógeno intestinales.
(dentro de la microbiota) y se localizan en la - Pericarditis: diseminación vía sangínea a partir
proximidad de las superficies mucosas, donde las de lesiones del tracto gastrointestinal.
bacterias anaerobias se encuentran en una - Abscesos cerebrales
proporción 10 a 1000 veces mayor que las aerobias. - Diarrea acuosa autolimitada por enterotoxinas
• Una minoría de las infecciones causadas por estos (niños), diarrea asociada a antibióticos y
microorganismos son adquiridas por vía exógena, enfermedades inflamatorias del intestino.
como las producidas por mordeduras de animales Cuadro: Distribución de los géneros que se aíslan con
y humanos (vemos que la cavidad oral tiene una más frecuencia en infecciones en humanos según el
gran cantidad de bacterias anaerobias); las sitio de infección.
ocasionadas por heridas de golpes de puño u En este cuadro veremos la localización anatómica en
otras de origen zoonótico, observadas en la columna izquierda y en la columna derecha los
huéspedes inmunocomprometidos. microorganismos que se asocian más frecuentemente
• Los BGNA se aíslan principalmente de infecciones a infecciones a nivel de esta localización. Esta
intraabdominales, odontógenas, del tracto señalado donde se pueden encontrar Bacteroides,
genitourinario, de piel y partes blandas y de en el sistema nervioso central, en la cavidad oral, a
bacteriemias. nivel del tracto respiratorio bajo, a nivel del abdomen
por abscesos o infecciones apendiculares, en el tracto
PATOGENIA urogenital por abscesos, piel y tejido blando por
Principales infecciones: abscesos, en huesos y articulaciones y en el sistema
• Polimicrobianas cardiovascular. Los Bacteroides se pueden presentar
• Infecciones intraabdominales: en cualquier parte del cuerpo pero tienen la
- Abscesos intraperitoneales y viscerales. característica de presentarse en forma de abscesos.
- Peritonitis causados por alteración de la
integridad de la mucosa intestinal (asociada a
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
• Medios enriquecidos:
- Agar sangre anaerobio: hemina, vit K y AA.
- Agar Bacteroides bilis esculina con amicacina
(BBE). Es un medio selectivo para Bacteroides
del grupo fragilis.
• Pueden identificarse en base a su morfotipo,
características de las colonias, algunos producen
pigmentos, sensibilidad a antibióticos o pruebas
bioquímicas.
• Son resistentes a penicilinas y cefalosporinas.
• Bacteroides spp. son BGNA de desarrollo rápido
(24 a 48 h) con resistencia a todos los antibióticos
de potencia especial. En su mayoría no son HÁBITAT
pigmentados y desarrollan en bilis al 20 %. • Clostridium spp. se distribuyen en el medio ambiente
• Ambiente: atmósfera libre de oxígeno. en forma ubicua, es así que pueden encontrarse en
• Las especies de Bacteroides producen colonias el suelo, sedimentos marinos, pasturas y vegetales
grandes a las 48 h de incubación porque son de en descomposición.
difícil desarrollo. • Resistencia: esporas.
• Colonias: 1-3 mm de diámetro, color gris o blanco,
enteras, convexas, traslúcidas u opacas y no
hemolíticas.

Clostridium difficile se distribuye en el medio


hospitalario y sus esporas pueden ser transportadas
por el agua, el polvo, el instrumental médico u otros
• Al igual que la morfología macroscópica, el micro objetos.
morfotipo observado en la coloración de Gram, es • Algunas especies integran la microbiota residente
muy útil en la identificación presuntiva. del hombre y de los animales, entre ellas Clostridium
perfringens, Clostridium septicum y C. difficile.

• En la imagen vemos bacilos gram negativos no


comunes de diferentes formas.
BACTERIAS ANAEROBIAS ESPORULADAS
Hay 4 especies patógenas principales:
Clostridium botulinum FACTORES DE VIRULENCIA
C. difficile Los BGNA poseen factores de virulencia que le
C. perfringens permiten adherirse, invadir y constituirse en biofilms. La
C. tetani formación de abscesos y la destrucción tisular son
presentaciones características de estas bacterias.
Toxinas: Las toxinas clostridiales de mayor impacto
clínico son las producidas por C. perfringens, C.
tetani, C. botulinum, C. difficile y C. septicum.
• C. perfringens: enterotoxina (actúa como Clostridium tetani
superantígeno con respuesta inflamatoria Tétano: Es una enfermedad toxigénica, con
exacerbada), responsable de cuadros frecuencia se asociada a heridas, mordeduras,
gastroentéricos. También toxina alfa, con acción fracturas expuestas o quemaduras contaminadas por
hemolítica y necrótica y es esencial en el desarrollo el polvo o por objetos corto-punzantes (astillas,
de gangrenas. espinas, clavos) que contengan esporas de C. tetani.
• C. tetani: produce una hemolisina sin actividad Neurotoxina tetánica y se disemina al SNC. El
patogénica denominada tetanolisina y una resultado es una hiperexitabilidad de las neuronas
neurotoxina, tetanospasmina, responsable de la motoras con contracciones tónicas y clónicas,
sintomatología de la enfermedad. espasmos musculares, parálisis y disfunción autónoma,
• C. botulinum: neurotoxina (Entre las toxinas lo cual puede conducir a un estado de contractura
bacterianas identificadas, las botulínicas se generalizada y permanente y finalmente, a la muerte
reconocen como las más potentes), llega al del paciente por parálisis espástica de los músculos
torrente sanguíneo y actúa en la membrana respiratorios.
presináptica de las neuronas motoras donde
bloquea la liberación del neurotransmisor.
• C. difficile: toxinas A y B, presentan actividad
similar, causan necrosis, aumento de la
permeabilidad intestinal e inhibición de la síntesis
proteica, daña las microvellosidades de la mucosa
intestinal y puede producir una erosión completa
de las mismas.

PATOGENIA
Clostridium perfringens
Se le implica en 3 enfermedades:
• La intoxicación alimentaria por C. perfringens se
presenta con náuseas, dolor abdominal y diarrea
espumosa y maloliente. Se asocia a la ingestión de Clostridium botulinum
alimentos, en particular cárnicos, contaminados con • Botulismo: Intoxicación alimenticia que produce
una elevada carga del toxinotipo A. El período de enfermedad paralítica.
incubación es de 8 a 24 h. Los síntomas son • Se caracteriza por una parálisis fláccida, simétrica
relativamente leves, de corta duración (menos de y descendente. La misma comienza por los pares
24 h) y se deben a la acción de la enterotoxina. de nervios craneales, desciende hacia los músculos
• Enteritis necrosante: inicia 1 día después, por del tórax y de las extremidades y puede causar la
toxina beta necrotóxica. muerte del individuo por falla respiratoria. Las
• Gangrena gaseosa: Se presenta luego de manifestaciones de flaccidez suelen estar
traumatismos abiertos o cerrados, pero se asocia precedidas por síntomas gastrointestinales como
en particular a heridas contaminadas. La acción de náuseas, vómitos, diarrea o constipación.
las toxinas (toxina α) causa gran destrucción tisular
al mismo tiempo que favorece la diseminación del
MO, exacerba la toxemia y genera una marcada
hemólisis intravascular
• Clásica, tras una lesión traumática o lesión
abdominal, celulitis anaeróbica en pacientes con
leucemia y sepsis puerperal – gangrena uterina,
después de un aborto.

• También puede tratarse de una toxoinfección por


la germinación de esporas en el tubo digestivo, lo
cual sucede en lactantes, con menor frecuencia en
niños menores de 1 año o en algunos adultos con
colonización intestinal por este MO y factores
predisponentes.
• Se encuentra en el suelo contaminando, legumbres
y frutas, en alimentos enlatados (pescado,
embutidos).

Clostridium difficile
• La infección por C. difficile toxigénico produce un Clostridium tetani
amplio espectro de manifestaciones clínicas, desde El diagnóstico de tétanos se realiza en base a las
la colonización del tracto gastrointestinal, diarrea manifestaciones clínicas y a los antecedentes del
leve a moderada., hasta colitis pseudomembranosa paciente.
con graves complicaciones y riesgo de vida para C. tetani se puede aislar a partir del tejido infectado u
el paciente como en los casos de megacolon objeto hallado en la herida; sin embargo, este
tóxico, íleo paralítico y perforación colónica. procedimiento no es muy empleado ya que la
• Colitis pseudomembranosa: en pacientes que han sensibilidad de los cultivos es baja.
recibido exceso de antibióticos: (cefalosporinas, Características
clindamicina o fluoroquinolonas). Bacilos finos cortos gram positivos. Espora terminal
• Causa el 25-30 % de las diarreas adquiridas en el deformante en palillo de tambor.
medio hospitalario y el 15 a 25 % de los episodios
asociados a tratamientos antibióticos.

DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
Clostridium perfringens
Cultivo líquido (caldo tioglicolato) y sólido (agar
sangre anaerobio).
Características
Bacilos finos cortos gram positivos con espora
subterminal.
Clostridium botulinum
El diagnóstico del botulismo se basa en las
manifestaciones clínicas y la epidemiología. La
identificación de las toxinas se realiza en laboratorios
de referencia. Para ello se examinan alimentos, heces
y suero de los individuos afectados y en el caso de
animales, también se incluyen tejidos.
Características
Bacilos gram positivos, con espora subterminal
ovalada.

ANAEROBIOS
Colonias rodeadas de una zona de hemólisis, debido
a las toxinas α y β producidas por C. perfringens.
Clostridium difficile - Los medios de cultivo usados pueden ser sólidos
Demostración de la enterotoxina o citotoxina en o líquidos, selectivos.
heces. - Incubación en atmósfera libre de oxígeno. Las
Cultivo líquido (caldo tioglicolato) y sólido (agar jarras o cajas para anaerobiosis son los sistemas
ANA). Difícil desarrollo. Pruebas de más utilizados para generar una atmósfera
inmunocromatografía para detección de toxinas. anaeróbica. Consisten en una jarra o caja con
Características una tapa que cierra herméticamente y contiene
Bacilos gram positivos, con espora central o un sobre generador de anaerobiosis.
subterminal. - Primera observación: 48 hrs→7 días
- Colonias: Gram
- Pruebas bioquímicas: crecimiento en bilis, pruebas
de catalasa generalmente negativas.
(automatizado).
- Pruebas moleculares: las menos usadas por los
laboratorios en general.

PROCESAMIENTO INICIAL DE LA MUESTRA

La recuperación e identificación de estos


microorganismos está condicionada a:
- Sospecha clínica adecuada
- Correcta toma, transporte y conservación de la
muestra: Es necesario evitar la contaminación de
la muestra con la microbiota residente de piel y
mucosas. Las muestras deben ser protegidas del
efecto deletéreo del O2 hasta que puedan ser
procesadas. Lo ideal es cultivarlas de inmediato.
Las muestras líquidas, purulentas y de volumen Este es un resumen del procesamiento de la muestra.
considerable pueden transportarse en tubos Llega la muestra y lo primero que se le puede hacer es
estériles si se van a cultivar antes de las dos una coloración para hacer un diagnóstico presuntivo
horas. De lo contrario deben inyectarse en inicial y se le siembra ya sea en Agar sangre anaerobio
frascos, sin introducir aire. Los raspados, o en un Agar selectivo o en un medio líquido que
hisopados y piezas de tejido pequeñas pueden puede ser un caldo de tioglicolato para para aislar
colocarse en tubos que contengan medio de anaerobios luego de ser sembradas, si hay desarrollo
Stuart o Cary - Blair. se coloca en la jarra anaerobio y luego se incuba por
• Métodos diagnósticos: unos 2 días a 37°C centígrados.
- Coloración de Gram (morfología compatible con
anaerobios)

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