TEMA 1.

DOTACIÓN CROMOSÓMICA HUMANA

Los cromosomas humanos.
Algo de historia.

El estudio de los cromosomas nació cuando Tijo determinó el

número de cromosomas: 46 cromosomas. El siguiente paso fue
en los años 60, dónde se produjo la ordenación de mayor a
menor, en grupos cromosómicos; ésta fue la primera
organización de nuestra información genética dónde puede
observar una diferenciación de tamaño gracias a una tinción
sólida. En los años 70, se hizo el primer bandeo, que es la
observación más generalizada de un cariotipo y gracias a ello se
creó el primer mapa de los patrones de bandas G de
cromosomas humanos.

De esta forma, la dotación cromosoma consta de 46

cromosomas, de los cuales cada uno de cada par proviene de la
madre y del padre. Hacemos distinción del cromosoma X e Y, el
resto son morfológicamente iguales.

Hay una organización:

- Células somáticas contienen el complemento diploide (2n) constituido por 23 pares de cromosomas.
- Células reproductivas (gametos) que contienen el complemento haploide (n) constituido por 23 cromosomas
que es un representante de cada pareja.

Los elementos característicos del cromosoma

Tenemos la estructura del cromosoma metafásico, estado en el cual la cromatina está en su mayor grado de
condensación. Solo es posible ver los cromosomas cuando están en metafase. La morfología es a nivel estándar.
Observamos:

- El cromosoma metafásico tiene dos cromátidas hermanas. Estas dos, realmente son producto de la replicación
del DNA. Están unidas la una con la otra. Una mejor o peor observación de los cromosomas metafásicos depende
de la manera en la que hemos aislado esas cromátidas (la tinción…).
- Tenemos los dos brazos del cromosoma, que están divididos por el centrómero. La posición del centrómero
cambia, puede estar en el centro, hacia un lado… los cromosomas los podemos distinguir por la posición del
centrómero. Gracias al centrómero, así, denominados cada parte del cromo como largo (q) y corto (p).
- Los telómeros son las partes terminales que están compuestos por una secuencia repetida y están implicados en
el envejecimiento.
- El cinetocoro es una estructura congénita donde se unen los microtúbulos para separar esas cromátidas hermanas
en el momento de la división celular.

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Tipos de cromosomas por la posición del centrómero.

Obtención de un cariotipo.

Como biólogos nosotros no hacemos el cariotipo, sino que lo analizamos. Pero lo que realmente importa es cómo
hacerlo, para ello se sigue unos pasos:

- Extracción
- Cultivo con heparina para que no se coagule. Cultivo con lifocitos T, y además con un compuesto para que las
células se desarrollen, ya que queremos los cromosomas metafásicos. (Se estimula la división de células, luego se
para en un determinado momento, dejamos que vaya a metafase todo lo que tiene que ir y al final obtenemos lo
que queremos).
- Procesado de muestras
- Cariotipado

Desde el punto de vista del laboratorio, lo que se hace es centrifugar, nos quedamos con el sedimento y lo que se hace
es darle diferentes procesos de lavado para romper la célula sin llegar a destrozarla porque sino el núcleo estaría
dañado. Hay que hacer una lisis suave en un medio hipotónico. Necesitamos los cromosomas en metafase. Teniendo
esos cromosomas, los recortamos y ordenamos.

Las células de las que se obtienen los cromosomas son: leucocitos, fibroblastos, medula ósea (solo se obtiene un
cariotipo con este tipo celular cuando queremos una determinada muestra, por ejemplo, cuando estamos tratando
leucemia), fetales (se obtienen del tejido amniótico, son células muy activas, las preparaciones son para un diagnóstico
prenatal; cada vez se está descartando por otro diagnóstico prenatal que es el análisis de DNA circulante por la sangre)
y HELA (estas células provienen de un cáncer de cuello uterino de una mujer: Henrietta Lacks. Se multiplicaron y se
usaron para estudios debido a su alto grado de proliferación).

Métodos de tinción para el análisis cromosómico

- Tinción solida con giemsa. Sirve para poder ver el grado de condensación de
los cromosomas. Se observan las dos cromátidas separadas. En la imagen
vemos unos circulitos que son frecuentes en las tinciones del cariotipo, son los
núcleos interfásicos. Esta tinción es la más utilizada: su proceso implica que
primero las proteínas cromosómicas sean parcialmente digeridas con tripsina,
y luego se tiñen. En la imagen se siguen viendo los 46 cromosomas, pero están
condensados en una sola línea. También es denominada esta tinción como
Bandeo G.

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- Tinción con mostaza de quinacrina. Este bandeo no se ve por un micro normal,
sino con un de fluorescencia. También llamado Bandeo Q.

- Bandeo C, se tiñen específicamente las

regiones centroméricas.

- Bandeo de alta resolución, la técnica es la misma, pero con este podemos

aumentar la observación de 500 bandas hasta 800 bandas. Para ello lo que
hacemos es no llegar a metafase final, llegar al punto en que las cromátidas no
están del todo condensadas y hay una mayor facilidad de verlas. Se ven más
grandes y estirados.

Nomenclatura de cromosomas.
Para posicionar cualquier gen, tenemos que decir el número del cromosoma, luego el brazo donde está localizado (q
o p), después la banda específica y si tenemos una resolución alta podemos diferenciar la posición exacta (21.1, 23.5).

El concepto de idiograma es una caricatura de un cariotipo real.

Cariotipo espectral.
Es otro tipo de tinción que se hace con una serie de combinaciones de colorantes con fluorescencias, los cuales se
unen específicamente a secuencias en los que cada uno de los cromosomas es rico. Con este tipo de tinción vemos
cada cromosoma con un color diferente porque hemos trabajado con sondas que se unen específicamente con cada
cromosoma. La sonda del cromosoma 1 la ponemos con un color, la del cromosoma 2 con otro, y vamos obteniendo
así distintos colores.

Este cariotipo nos sirve para ver directamente una traslocación, por ejemplo, porque si hay un intercambio de color
podemos deducir que hay un error. Este tipo de tinción no es muy usada, pero sirve muy bien para determinar algunas
cosas.

FISH
Es muy utilizada, junto con el cariotipo, para observar modificaciones en los cromosomas (inversiones, alteraciones
finas). FISH es una técnica rutinaria, es una hibridación in situ con una sonda fluorescente. Permite visualizar la
localización de secuencias sobre los cromosomas. Añadimos calor para abrir la hebra, metemos la sonda y se hibrida
específicamente con una secuencia. Luego podemos ver dónde está la sonda. (contratinción con dapi, significa que
pintamos el cromosoma con un color y luego ponemos la fluorescencia de otro). Podemos usar dapi para obtener
secuencias específicas. Podemos usar FISH en células interfásicas o metafásicas, no tenemos que tener
obligatoriamente con interfase. Lo que el FISH nos dice es que cada punto es una secuencia y muchas veces es
complementaria al cariotipo.

Diferentes tipos de sondas para el análisis por fish

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Aplicaciones del análisis cromosómico por fish
- Detectar el número de cromosomas.

- Diagnóstico genético preimplantacional (FISH en GDP). Cuando tenemos un embrión en crecimiento, le quitamos
una célula y realizamos un FISH para detectar los 23 pares de cromosomas en busca de anormalidades en relación
al número (trisomía…).
Cuando hacemos fecundación in vitro se da que las parejas tienen probabilidad de tener un hijo con material
genético complicado o mortal. Tendríamos que elegir un embrión que no tenga las características genéticas que
dan lugar al problema. No podríamos hacer un cariotipo del embrión ya que podríamos quitarle solo una célula,
no podemos hacer crecer. Con una célula solo sí podemos hacer un FISH. Lo normal para analizar son 3, 13, 18, 21
y X. Podemos detectar un blastómero en el que podemos detectar los 22 cromosomas.

- Detección de alteraciones en la estructura del cromosoma, como por ejemplo, la detección de BCR/ABL de la
fusión génica de la t(9;22)(q34;q11) que es una translocación de zonas específicas de uno y otro cromosoma. Una
enfermedad ejemplo que se detecta con esta técnica es la leucemia mieloide crónica.
Detección de BCR/ABL de la fusión genética de la t (9;22) y (q34;q11). Genera el cromosoma filadelfia, se han
unidos dos secuencias en las que vamos a cambiar la regulación de una tirosina quinasa que está siempre activada,
produciendo la leucemia mieloide crónica. Tenemos un 9 reajustado con el 21 y el 21 con el 9, de forma que ambos
puntos se encuentran unidos.

‘Array’ comparativo de hibridación cromosómica (aCGH)

Se hace un microchip con un array (array: disposición en
cuadrícula). Dependiendo de lo que quiero detectar, como
alteraciones en un cromosoma concreto, hacemos una
hibridación de DNA control y DNA del paciente. No se
necesita células en división. Se usan sondas desde 80-80.000
pb y la resolución depende del tamaño de la sonda.

Gracias a esta técnica se pueden detectar pérdidas y

ganancias de regiones cromosómicas comparando la
muestra con un genoma normal. Se analiza todo el genoma
simultáneamente. Una característica importante es que no
se necesitan células en metafase para hacer la detección.

Han tenido un boom en poco tiempo, desplazó a todos los métodos de

cariotipo pero ninguna técnica por muy sofisticada que sea va a ir
desbancando a otras técnicas, sino que son complementarias.
Dependiendo del material y dinero disponible, así será la técnica que
utilizaremos.

aCGH está implantada para determinadas enfermedades, el sistema es

sencillo relacionado con la hibridación fluorescente pero la base es un
chip.

Hay muchas variedades de aCGH. El más común, tenemos el ADN control y el ADN del paciente, cada uno se marca de
forma fluorescente con un color diferente (verde es el control y el rojo es el del paciente en este caso). Podemos poner
el genoma entero o bien fragmentos para analizar mutaciones. Si ponemos un cromosoma solo, pondríamos en cada
pocillo un fragmento del cromosoma en cada uno. Si el ADN paciente y el control son iguales y se encuentran en la
misma cantidad y obtendríamos un punto amarillo, si vemos un punto verde podremos deducir que ese ADN no se
encuentra en el paciente, en principio sería producido por una deleción o bien una mutación muy grande que evita
que hibride. Si tenemos un punto rojo, significa que hay más copias de esa secuencia  una multiplicación.

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Ejemplo. En el chip ponemos cromosoma 13, si hay una raya en el cero significa que todo va normal, si tenemos una
raya 1 la fluorescencia sería de color verde.

Ventajas:

 Detectan pérdidas y ganancias de regiones cromosómicas comparando la muestra con un genoma normal.
 Analiza todo el genoma simultáneamente.
 No necesita que las células se encuentren en metafase.

PCR fluorescente cuantitativo (QF-PCR)

Nos va a indicar el número de bases, por eso es cuantitativo. La idea se basa en el pcr convencional, pero aquí los
cebadores están marcados con fluorescencia. Se usan genes de referencia para controlar el estudio.

Técnica en la que vamos a amplificar una zona, para ello necesitamos dos oligonucleótidos que van a hibridar en la
zona que marca el límite. Es una reacción que supone tres fases: desnaturalización, reasociación y polimerización
(amplificación real), si estos tres ciclos los hacemos 35-40 veces lo amplificamos mucho.

Los cebadores están marcados fluorescentemente y posteriormente medimos la fluorescente. Normalmente, se

analizan secuencias repetidas en un número de veces, éste es diferente para cada organismo, estas secuencias se
denominan secuencias polimórficas.

Ejemplo 1: tenemos un individuo con un alelo con 15 repeticiones y otro alelo con 9 repeticiones. En este QF-PCR, los
cebadores se encuentren marcados con fluorescencia, hacemos PCR y se detecta mediante un fluorímetro. Ambos
alelos van a generar bandas diferentes en el PCR ya que tienen diferente número de copias. Un sistema óptico detecta
dónde se encuentran las bandas, con un tipo de electroforesis diferente, la electroforesis capilar normalmente.

Estamos detectando de forma objetiva, la amplificación de esa zona y a partir de ahí sacamos nuestras conclusiones,
si tenemos tres picos significa que tenemos tres copias, podría significar que es una trisomía pero también puede darse
que tenga tres copias pero no tenga tres cromosomas, puede tener la copia en otro lugar.

Ejemplo 2: individuo disómico, observamos dos picos ya que hay dos bandas
en la electroforesis, estamos observando picos pero realmente son las
bandas de la electroforesis con tamaño diferente.

Ejemplo 3: trisómico, con tres alelos diferentes, tenemos tres picos ya que se
han amplificado tres tamaños diferentes de fragmento.

Ejemplo 4: trisómico pero observamos dos picos, uno mayor que otro. El pico
1 correspondería a una copia y el pico 2 es mucho mayor, es mayor ya que
en principio correspondería a 2 copias.

Ejemplo 5: es informativo, no podemos saber si es monosómico o si es un

individuo normal pero es homocigotico (que tiene las dos copias del mismo).

EXAMEN: ejercicio de meiosis y mitosis.

PCR cuantitativo
Va a estudiar el número de copias mediante la fluorescencia que aparece en determinadas células.

Secuenciación
Ahora mismo es una de las técnicas que se usa para detectar mutaciones a nivel de pares de bases. La secuenciación
sanger es aquella que busca una mutación determinada en una secuencia determinada.

La NGS podemos analizar el genoma completa, el exoma solamente, paneles concretos…

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Aplicaciones del análisis cromosómico
Diagnóstico clínico: numerosos trastornos clínicos están asociados a cambios visibles en el número y morfología de
los cromosomas y su análisis es requerido para el diagnóstico y el consejo genético.

Diagnóstico prenatal: esencial su análisis es requerido para el diagnóstico y el consejo genético.

Diagnóstico de distintos tipos de cáncer: los cambios cromosómicos en las células somáticas participan en el inicio y
progreso de muchos tipos de cáncer.

Ciclo celular de células somáticas humanas en cultivo

Mitosis es la separación de las cromátidas para una siguiente
duplicación de ellas dos. Partimos de una fase de interfase a profase.

El ciclo celular: conjunto de procesos que ocurre en una célula desde

que nace hasta que vuelve a dividirse.

El proceso de mitosis significa el proceso de segregación, esta fase

dividida a su vez en: metafase, profase, anafase y telofase. En cada
una de estas fases el cromosoma se encuentra en un grado de
condensación.

Interfase, después comienza la profase donde comienza a condensarse y empieza a ser visible el cromosoma. En esta
fase se encuentran: 2n-2c, (2n-diploide) 2c son dos cromátidas con la misma información ya que son réplicas.

Llegamos a metafase donde tenemos los cromosomas bien condensados, con dos cromátidas con la misma
información.

Posteriormente se coloca en la placa ecuatorial y cada cromátida se dirige a los lados de la célula. Este estado (anafase)
se encuentra diploide con una cromátida.

En interfase se replica (pasamos de un cromosoma a dos cromátidas), cuando se replica volvemos a tener una sola
cromátida.

Meiosis
1ª División: Reduccional (2n cromosomas con 2 cromátidas)

(n cromosomas con 2 cromátidas)

2ª División: ”Mitosis” (n cromosomas con 1 cromátida)

Marco Pinto Gamboa Grado Biología Uex Genética Médica – 2018

Consecuencias genéticas de la meiosis
- Reducción del número de cromosomas
- Segregación de alelos, repartos entre las dos células.
- Este reparto tb tiene implicado la mezcla del material genética. No todos los genes del padre van a un lado y los
de la madre al otro, la distribución es aleatoria de los cromosomas homólogos (2 elevado a 23)
- Mezcla adicional del material genético por recombinación

Una pareja puede tener 2elevado23 x 2elevado23 o 70 trillones descendientes genéticamente diferentes.

Ambos gametos sufren meiosis en la cuarta semana de la gestación. La espermatogénesis se basa en el número, la
cantidad, mientras que la estrategia de la mujer (ovogénesis) se basa en la calidad.

Con el envejecimiento, los varones sufren más problemas a la hora de división y acumulo de errores (mutaciones) en
los espermatozoides, mientras que las mujeres tienen más problemas en la segregación de la meiosis de los óvulos.

Formación de gametos

La meiosis en sí es la misma pero no se da igual en el tiempo en hombres y en mujeres. La espermatogénesis es la

formación de espermatozoides en el hombre y la ovogénesis es la formación de óvulos en la mujer.

Espermatogénesis: Hay una programación para que la célula entre en meiosis, pasa por una serie de fases como la
espermatogonia, son mitosis para generar muchos espermatozoides. Cuando llega la pubertad, las espermatogonias
se diferencian en espermatocito primario, espermatocito secundario en el que se reduce el número de cromátida,
espermátidas en las que se reduce las cromátidas y finalmente se producen muchas mitosis para producir más y dan
lugar a los espermatozoides. Se calcula que tienen unos 25 ciclos al año que se pueden solapar, genera unos 10^12 en
toda su vida.

Ovogénesis: las células primordiales se posicionan y localizan a la tercera semana, ya en vida fetal los óvulos empiezan
su primera división reduccional. Antes de nacer, la ovogonia ha pasado a ser el ovocito primario. Éste se queda retenido
en la metafase I pero ya ha entrado en meiosis. Se detiene hasta que la mujer entra en el ciclo de menstruación. En
cada ovulación solo 1 acaba la meiosis. El ovocito secundario del que se nutre en caso de fecundación. Se produce una
degradación. Solo acaba la meiosis si es fecundado.

El problema desde el punto de vista genético de la formación de los espermatozoides es que sufre muchas mitosis,
esto produce muchas mutaciones. La mujer el problema es que la meiosis lleva parada mucho tiempo.

Marco Pinto Gamboa Grado Biología Uex Genética Médica – 2018

Fecundación: entrada de un espermatozoide
Cuando entra un espermatozoide en el óvulo, existe una despolarización de la membrana del óvulo (una subida de los
niveles de calcio) y este proceso hace que los demás espermatozoides se despeguen. Es un proceso de microsec.

Las proteínas Juno, en el óvulo, y Izumo1, en el espermatozoide, tienen un sistema de llave que forman una molécula
para la iniciación de la fecundación. El hecho de que haya un encaje de estas proteínas solo una vez, hace que Juno se
inhiba y ningún espermatozoide no encaje más. La prueba fue hacer una mutación con deleción en alguna de las dos
proteínas, de modo que si la prueba sale bien ese individuo sería no fértil, no habría encaje de las proteínas y la
fecundación no sería viable.

Hay estudios sobre estas proteínas para métodos de fertilidad y métodos de anticoncepción. Por otra parte, esto
explica los casos de parejas que no sean fértiles, es decir, cualquier de los dos individuos podrían tener mutaciones en
sus proteínas de encaje.

Genoma mitocondrial: el mitomapa

El genoma mitocondrial supone el 5% de nuestro genoma. Una célula puede tener una cantidad entre 1000 y 10000
mitocondrias, todo depende de la necesidad de energía. Las mitocondrias son orgánulos de DNA circular, de un tamaño
de casi 17 mil pb, contiendo un pequeño número de genes. Estos genes de mitocondrias son genes de tRNAs, rRNAs y
mRNAs. Los tejidos que más necesitan energía son el nervioso (las neuronas son muy dependientes), los músculos. Las
mitocondrias son heredadas de la madre, debido a que en la fecundación lo que entra en el óvulo es el núcleo del
espermatozoide, de modo que todas las mitocondrias son de nuestra madre. Cuando hay una enfermedad
mitocondrial son por herencia materna, tanto varones como mujeres.

Posee en su membrana la cadena transportadora de electrones, que permiten la transformación de la energía de

oxidación en la "moneda energética universal" de la célula; el ATP. Los tejidos más dependientes del suministro de
energía son los más afectados: nervioso y muscular.

El funcionamiento de la fosforilación oxidativa tiene importancia médica por la generación de especies reactivas de
O2 (Reactive Oxygen Species, ROS) y por la regulación de la muerte celular programada o apoptosis.

Epigenoma

Cuando hablamos de nuestro genoma, no podemos pensar solo en el genoma interno, sino que hay que pensar en los
pequeñas marcas que existen (metilación, marcas de histonas…).

Microbioma

Constituye el genoma de todos los organismos que existen en nuestro organismo, más de 4 millones de
microorganismos. Hay muchos estudios que buscan saber la relación entre ellos y enfermedades que podemos
padecer.

Hologenoma

Conjunto de todos los tipos de genomas o complementos genómicos que tiene cada individuo (genoma + genoma
mitocondrial + epigenoma + microbioma).

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 TEMA 2. PATRONES DE HERENCIA DE LAS
ENFERMEDADES MONOGÉNICAS
Una vez que conocemos como es nuestro genoma, podemos analizar una serie de enfermedades y observar sus
mecanismos, en nuestro caso, el modo de herencia. Estudiaremos las enfermedades monogénicas y sus patrones de
herencia.

Es importante saber la estructura de un árbol genealógico, para averiguar el acervo genético, calcular la probabilidad
de la presencia de una enfermedad…

Siguen las leyes de Mendel

Los gametos se distribuyen en relación a las leyes de Mendel. Esta distribución no cambia: solo se transmite un alelo
a la descendencia, segregación y distribución son independientes de los alelos de los diferentes loci.

Utilidad de un árbol genealógico

El uso de un árbol genealógico sirve para determinar si una enfermedad es de carácter genético, si es hereditaria y así
poder construir un patrón de herencia. Podemos establecer genotipos y calcular la probabilidad del genotipo en la
descendencia.

Símbolos utilizados en la confección de un árbol genealógico

Marco Pinto Gamboa Grado Biología Uex Genética Médica – 2018

Patrones de herencia

A veces puede pasar que tengamos un fenotipo dominante, pero en realidad no haya la presencia del alelo dominante.
El fenotipo dependería de la cantidad de una proteína, por ejemplo, y si hay poca cantidad de ella obtendríamos ese
fenotipo dominante. Los patrones de herencia se pueden complicar debido a otros factores.

Los patrones de herencia dependen de dos factores:

- Localización cromosómica: autosómica, ligada al cromosoma X o Y, mitocondrial

- Fenotipo: dominante (presencia de un solo alelo) o recesivo (necesita los dos alelos)

Estos patrones de herencia se pueden “complicar” por otros factores.

Enfermedades autosómicas dominantes

Una característica importante de los alelos dominantes es que no tienen saltos generacionales. Existe la misma
frecuencia en hombres y mujeres. Lo normal, exceptuando Huntington, es que los homocigóticos dominantes (AA) no
sean viables. Algunas enfermedades con este carácter son: E.Huntington/Acondroplasia/Osteogénesis imperfecta.

Marco Pinto Gamboa Grado Biología Uex Genética Médica – 2018

 Enfermedad de Huntington
Es una enfermedad prototipo, autosómica dominante y afecta a 1/10.000
europeos. Provocada por una mutación en el cromosoma 4, brazo pequeño y en
la banda 16.3.

Es una enfermedad sin cura, se puede hacer un diagnóstico genético fácilmente.

Enfermedad neuronal degenerativa con una edad de inicio sobre 30-50 años.
Hay una pérdida progresiva de material neuronal en el cerebro y también
pérdida del control motor (corea). No existe por el momento tratamiento.

El gen de esta enfermedad tiene 200kb, 67 exones. Dos transcritos diferentes (10.3 y 13.6), es decir, puede afectar dos
líneas celulares diferentes, pero normalmente es la neuronal.

La mutación es debido a la expansión de la repetición CAG localizada en la región codificante del gen. Los no afectados
tienen 11-35 repeticiones, pero la penetrancia incompleta de 36-38 repeticiones hace que los afectados tengan 39-
100 copias o más.

El número de repeticiones está relacionado con la

gravedad de la enfermedad, la edad de inicio es crucial ya
que a más copias, más rápido aparece la enf y con más
crudeza.

Este gran número de copias de CAG en la región codificante

favorece la aglutinación de la proteína HTT (huntintina)
que es un producto génico expresado en todas las células
pero en las neuronas es donde más afecta. El mecanismo
se ha demostrado en los de enfermos de HD: se produce
una acumulación de agregados proteicos tóxicos que están
relacionados con la muerte neuronal prematura.

Mecanismos

- Acumulación de agregados proteicos tóxicos que están relacionados con la muerte neuronal prematura
- Formación de RNA/proteínas tóxicas (RAN) ‘truncadas’ de la HTT que se relacionan con la muerte neuronal
prematura
- Independientemente de los mecanismos anteriores que son negativos, la HTT interacciona con otras proteínas:
GADPD (glucólisis), HIP1 (proapoptótica), HIP2 (procesamiento de residuos), HAT (modificación de histonas)…
- La HTT alterada forma cambios en el patrón de expresión de otras proteínas por la unión al DNA.

La falta de eficacia de cada uno de estos puntos produce la muerte prematura de las neuronas.

Terapias

Es importante conocer el mecanismo para poder paliar la enfermedad o curarla. Las terapias se encuentran en fase de
experimentación, hoy por hoy la enfermedad no tiene cura. Las terapias:

 Una diana para fármacos en la enfermedad de Huntington. Lo que siempre se quiere es tener una diana que pueda
eliminar la muerte neuronal. Una de las terapias publicada alrededor de 2010, se vio que fosforilando
(modificando) ciertos aminoácidos de esta proteína, la célula podía saber que debía ser degradada. La degradaba,
formaba menos agregados tóxicos y la neurona moría más lentamente, se podría paliar de esta forma. Al fosforilar
la huntingtina pierde las funciones de esta proteína, aquí entraría en juego el otro alelo normal. Son efectos
colaterales.

La función de la huntingtina no se sabe exactamente, se sabe que se une a ADN, ARN e interacciona con proteínas.

Marco Pinto Gamboa Grado Biología Uex Genética Médica – 2018

 Cambios de expresión en proteínas como histonas. Inactivar muchos genes en diferentes líneas celulares. Buscaron
en qué línea bajaba la formación de los agregados. Donde se produjeran menos, sería la inactivación de ese gen
el que podría ser usado como diana para disminuir la formación de agregados.

 Encuentran elementos de control en la enfermedad de Huntington. Se intenta diseñar un fármaco que intente
destruir el complejo ribonucleico, de forma que si no se une, no se traduce el ARN y no se forma la proteína.

 Esta terapia consiste en la inactivación de una glutaminil ciclasa, esta es una chaperona que ayuda al plegamiento.
Cuando hay huntingtina alterada presente, hay una activación de un determinado grupo de proteínas. Inactivando
este gen, se puede producir más chaperonas, el hecho de producirlas ayudan a producir menos agregados ya que
el plegamiento de la huntingtina tendría el plegamiento correcto. La huntingtina alterada no posee el plegamiento
correcto y por ello se forma el agregado. El fármaco se dedica a producir más chaperonas.

 Esta terapia consiste en la manipulación genética en un modelo animal (ratones, cómo no, para variar…) para
contar con el gen mutante de la HTT que provoca la enfermedad. En un cierto tiempo los roedores empezaron a
formar agregados en el cerebro y comenzar a mostrar los síntomas. En ese momento, inyectaron un virus adeno-
asociado con la secuencia CRISPR/Cas9 con el ARN guía para el gen mutado de la HTT en el cuerpo estriado del
cerebro de los ratones con la intención de recortar parte de este gen que produce los agregados de proteínas
tóxicas en el cerebro. Los resultados fueron asombrosamente rápidos. En apenas 3 semanas, el tratamiento había
conseguido reducir dramáticamente los agregados de la proteína defectuosa en dicha zona cerebral -casi habían
desaparecido- y los ratones mejoraron increíblemente su control motor y su equilibrio.

 MicroARNs en el líquido cefalorraquídeo como biomarcadores de los síntomas que preceden a la HD. Estos
microARNs podrían ser utilizados para evaluar la eficacia de las terapias preventivas para esta enfermedad. Los
niveles de microARNs empiezan a aumentar muchos años antes de que el individuo muestre síntomas y continúa
aumentando conforme el inicio de la enfermedad se acerca.

Estudiar el mecanismo molecular básico es fundamental para las terapias, por ello muchos grupos de investigación se
dedican a investigar su mecanismo en vista de encontrar una terapia. Todas las terapias tienen efectos secundarios.

Marco Pinto Gamboa Grado Biología Uex Genética Médica – 2018

 Acondroplasia (FGFR)
Es otra de las enfermedades prototipo, autosómica dominante, que se da en el cromosoma 4, brazo p, en la banda
16.3. Afecta a 1/15.000-1/40.000.

La enfermedad supone un crecimiento anormal de los huesos que conlleva a una baja estatura con unos brazos y
piernas especialmente cortos, una cabeza grande y características faciales propias. La inteligencia y vida media es
normal. La homocigosis (AA) es una condición letal.

El gen tiene una elevada tasa de mutación, un 80% de los casos de acondroplasia tiene padres normales y por lo tanto
la enfermedad ha sido provocada por una mutación nueva. Se ha demostrado que provienen de la avanzada edad del
padre debido al nº de divisiones para generar los espermatozoides.

El producto génico es FGFR (receptor del factor de crecimiento de fibroblastos). Su mutación supone que en el 98% de
los casos corresponda a una mutación puntual que provoca el cambio de G  A en el nucleótido 1138 del gen FGFR3
que sería el cambio de una glicina por una arginina.

La mutación G  A resulta en una activación constitutiva del receptor FGFR. Su mecanismo se ha sabido por las
investigaciones en ratones se sabe que regula negativamente el crecimiento de los huesos, por lo que la mutación G
 A se interpreta como una ganancia de función de forma que la mutación hace constitutiva la inhibición ejercida por
FGFR3 sobre el crecimiento de los huesos. Es decir, ese cambio de G por A, conlleva a una activación permanente del
receptor por lo que no necesita ni que dimerice ni que prolifere, por lo que siempre se encuentra inhibido.

En huntington la mutación generada produce una ganancia de función, esa función era la formación de agregados.

Osteogénesis imperfecta
Enfermedad autosómica dominante. Afecta a 1/20.000 individuos. La enfermedad de los huesos de cristal. Consiste
en mutaciones localizadas en dos genes implicados en la biosíntesis del colágeno. Hay muchos tipos según las
alteraciones. La I es letal y la V es la más leve.

La característica fundamental es malformaciones óseas, de articulaciones y fragilidad de los huesos ya que la densidad
ósea es muy baja. Es un síndrome de expresión clínica muy variable. Las características clínicas de la enfermedad van
desde letalidad perinatal a individuos casi asintomáticos con una moderada predisposición a las fracturas óseas. En
otros casos aparecen deformidades óseas, deficiencias de movilidad y muy baja estatura. La pérdida de audición
también es frecuente.

La enfermedad es causada por una alteración del gen COL1A1 del cromosoma 17 brazo largo 21.31-32 y el otro gen es
COL1A2 localizado prácticamente en el mismo sitio. Es muy poco frecuente. El producto génico es el colágeno tipo I.
Las mutaciones que provocan una proteína anormal causan un grado más severo de la enfermedad que las que
reducen su producción, debido a que se forman moléculas de procolágeno aberrante. Son, por tanto, mutaciones que
tienen un efecto dominante negativo.

Para explicar esta amplia variedad, tenemos que entender que el colágeno está formado por tres cadenas, dos de ellas
es de COL1A1 y otra de COL1A2. Si tenemos una mutación en uno de los genes, de forma que esa alteración produce
diferentes tipos de esa cadena (uno del alelo afectado y otro del no afectado), todas se tienen que unir por lo que con
que una esté alterada, el colágeno se altera. Puede ocurrir que una se sintetice diferente, también podemos encontrar
que una cadena de colágeno no se sintetice y tenemos menos cantidad. Lo más grave se da cuando se sintetiza
malformada, como consecuencia todas las moléculas de colágeno se verán afectadas. En cambio, si una no se sintetiza,
tendremos la mitad de colágeno, pero las que tenemos están bien.

La mutación 1 generaría una mutación de tipo dominante, ya que todo lo que se forma está mal. Se da una pérdida
total de función. La herencia de esa mutación sería dominante.

La mutación 2, no se sintetiza, tenemos la mitad de colágeno. Sería dominante esa mutación cuando la mitad suponga
una osteogénesis. Si la mutación no diera lugar a osteogénesis no sería de tipo dominante.
Marco Pinto Gamboa Grado Biología Uex Genética Médica – 2018
Dominancia: El fenotipo que da la mutación que sea hace que el individuo se vea afectado.

Dependiendo de lo funcional que sea cada molécula de colágeno que se forma, así será la gravedad de la enfermedad.
La homocigosis implica no tener ninguna molécula de colágeno y no es viable.

Enfermedades autosómicas recesivas

Normalmente se produce cuando los padres no están afectados. Posee saltos generacionales. Su frecuencia es igual
en hombres y mujeres.

Padre y madre no afectados, pero portadores, podrían tener de todo. Los emparejamientos más frecuentes,
dependiendo de la enfermedad, podemos tener un individuo portador y el afectado.

Sistemas en los que aumentar la probabilidad de que ambos progenitores sean portadores de un
mismo alelo

- Consaguinidad
Hay que determinar el grado de consanguinidad. El concepto: reproducción entre individuos que genéticamente son
cercanos. Hay una mayor probabilidad pero tampoco es mucha más probabilidad de la normal de tener la enfermedad.
Todos tenemos una media aproximadamente de 7 alelos que, en homocigosis son letales. El problema de la
homocigosis es muy importante ya que hay determinados rasgos que conllevan a enfermedad y se necesitan los dos
alelos presentes. En otras culturas se fomenta la homocigosis (castas hindúes y egipcios) por no querer mezclar.

Coeficiente de consanguinidad (F): mide la probabilidad de que un individuo sea homocigótico teniendo el mismo
alelo, no la misma mutación.

Cuando se da un emparejamiento, diferenciamos un alelo de otro, tenemos 4 alelos. Calculamos la probabilidad de

que un individuo tenga una homocigosis de cualquiera de los cuatro alelos.

Probabilidad de que un alelo pase a la siguiente generación ½, tenemos cuatro vías ya que puede ser homocigótico
para los cuatro alelos. Cada paso supone ½. Finalmente obtenemos ½ elevado a 6 ya que hay 6 pasos. Hay que
multiplicar x4 ya que eso son las probabilidades de que sea A1, A2, A3 y A4.

- Alta frecuencia de un alelo en una población

Si estamos ante un emparejamiento consanguíneo va a tener mayor probabilidad de encontrar el alelo. Hay veces que
no hay consanguinidad, pero en la etnia donde se mueve la frecuencia es muy alta. Por ejemplo, judíos hay una
comunidad que tienen un frecuencia de enfermedad muy elevada. La frecuencia alélica de esa comunidad es muy alta.
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Los grupos sanguíneos: podemos ver diferentes etnias, podemos comprobar como las frecuencias son muy diferentes,
el esquimal tiene como grupo mayoritario MM. Hay veces que coincide con etnias y en otros casos no.

Cálculo de la frecuencia alélica en una población

El problema de la consanguinidad es que cada uno tenemos una media de alelos letales, de modo que si estamos
emparentados con la persona con la que vamos a procrear aumentará la probabilidad de usar esos determinados
alelos letales.

A la hora de establecer la frecuencia de alélica, dependemos del tipo de herencia de la enfermedad que estamos
tratando. Para ellos tenemos que saber cómo se distribuyen los distintos genotipos. En una herencia simple, dialélica,
los genotipos se distribuyen por la ley de Hardy Weinberg (1908, genética de poblaciones) suponiendo que las
frecuencias de los alelos son p = f(A) y q = f(a), y los apareamientos en la población son aleatorios. La suma de los tres
genotipos será la población entera y de este modo sería 1.

La frecuencia de los tres genotipos viene dada por el desarrollo del binomio (p+q)2= p2+ q2+ 2pq= 1 donde p y q
representan la frecuencia de dos alelos alternativos en un locus, siendo p+q=1.

1) Alelos codominantes (grupos sanguíneos, actividades enzimáticas)

2) Alelo autosómico recesivo

Tenemos un carácter distinto, ya que el
individuo homocigótico recesivo es el que
expresa la enfermedad, mientras que el
heterocigótico lleva el alelo recesivo
enmascarado. De este modo, los
portadores son mucho más frecuentes que
los enfermos. Así podemos deducir que el
problema del mantenimiento del alelo no
son los individuos enfermos, sino que
viene dado por los heterocigóticos.

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 3) Alelo autosómico dominante
Asumiendo que los individuos AA no existen, dado que este alelo es letal. Para calcular las frecuencias alélicas, los
ind enfermos son los individuos que son heterocigóticos, ya que el alelo A es el portador de la enfermedad. La
observación del problema es gracias a la frecuencia genotípica, ya que nos permite saber cómo es la frecuencia
alélica.

4) Ligado al sexo (X) recesivo

El número de alelos (a) en varones es el número de varones afectados. Esta es la razón de que en las enfermedades
ligadas al sexo, las mujeres tienen una frecuencia muchísimo menor que los hombres.

¿Para qué nos sirve conocer el valor de p y q?

Una pareja sana en la población quiere saber la

probabilidad de tener un hijo enfermo (con una
determinada enfermedad), si uno de ellos tiene
una alta carga genética de una enfermedad y otro
no. Lo primero que tenemos que tener claro, es
que en la mayoría de los casos se quiere saber si
hablamos de una enfermedad autosómica
recesiva teniendo personas sanas que son AA y
Aa.

Primero se busca cuantos emparejamientos hay dentro de la POBLACIÓN. Todos los emparejamientos que impliquen
un individuo esté enfermo (aa), deben salir del cálculo porque eso significaría que la pareja no fuese sana. Solo nos
quedamos con cuatro emparejamientos que son los que implican una pareja sana. De todos ellos, solo uno será el que
nos dará la posibilidad de tener un hijo enfermo, la pareja donde ambos son heterocigóticos.

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 Fibrosis quística (CFTR)
Es una de las enfermedades más importantes por su alta frecuencia, aunque sigue siendo muy rara. Es autosómica
recesiva. Afecta a 1/2000-4000 individuos de raza blanca, 1/17000 africanos. Su fenotipo tiene distintos órganos
afectados.

El producto génico es el CFRT que es una proteína transmb, que además es un regulador de transporte de iones a
través de la mb.

Tienen insuficiencia pancreática, tienen elevadas concentraciones de cloro en el sudor. Una forma muy fácil de
detectar de primera si los recién nacidos están afectados, es una pulsera que se le coloca al bebe, cambia de color los
niveles de sodio y cloro del sudor.

En varones en edades adultas, son estériles por una obstrucción de los canales eferentes, tienen una obstrucción
porque son incapaces de segregar una determinada enzima. Muchos mueren por obstrucción pulmonar, se da ya que
segregan sustancia muy viscosa. Parecido a cuando estamos muy constipados, es muy probable que todas las
sustancias queden atrapadas en esa viscosidad, al no poder ser expulsadas se produce infección. Los niños recién
nacidos, se les pone una membrana, que les ayuda a que esa viscosidad sea más fluida.

El gen CFRT tiene 17 exones y 250 kb, es muy grande. Fue uno de los primeros genes clonado, se localizó. Todas las
enfermedades de tipo monogénico y que fueron las primeras clonadas, fueron las primeras introducidas en un
programa de terapia génica. Para ello, lo primero que hay que tener es localizado y clonado el gen.

La enzima que provoca la enfermedad: el gen CFTR codifica a una proteína transmembrana reguladora del transporte
de los iones a través de la membrana. Esta especie de pulpo amarillo, con los brazos hacia dentro, regula el transporte
de sodio, cloro y agua a través de la membrana.

Los epitelios más afectados son los que necesitan un equilibrio más exacto: el epitelio pulmonar y el intestinal. Si esta
enzima falla, provoca un desequilibrio iónico, quedando una membrana deshidratada y, como consecuencia,
produciendo estas sustancias tan viscosas.

Las mutaciones generalmente, afectan de forma que queda inactiva. En otras ocasiones, afectan al AMPc (ya que se
regula por esta sustancia), teniendo menor efecto.

Se ha localizado muchas mutaciones, en la mayoría 70%, tienen una deleción de la fenilalanina en la posición 508. Ello
se encuentra relacionado con el centro activo, la enzima que produce el gen es totalmente inactiva con esta deleción.
Los fenotipos más leves afectan a la parte reguladora, no es lo mismo tener una actividad desregulada (funciona pero
mal) que una enzima inactiva que no funciona.

Es una de las enfermedades que primero entraron en la terapia génica ya que tenía las características para ello. La
enfermedad tiene diferentes niveles de gravedad. La enfermedad es recesiva, es decir, tiene que tener las dos copias
alteradas del gen. Con un solo alelo, con la mitad de la actividad, tendrá alguna predisposición pero puede realizar una
vida normal. Es recesiva ya que el nivel que necesita para generarse es la presencia de los dos alelos.

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 Enfermedad de Tay-Sachs (HEXA)
Generada por la alteración del gen HEXA 15q23. Esta enfermedad se usa como ejemplo de una enfermedad que tiene
una incidencia muy diferente dependiendo del grupo étnico, afecta principalmente a los judíos ashkenazi. Incidencia
de 1/3000, mientras que en el resto de la población tienen una frecuencia de 1/30000, es decir, 100 veces más.

Esta enfermedad es muy grave neurodegenerativa, lleva a la parálisis, demencia. El mejor fenotipo es la ceguera.
Conlleva a la muerte incluso antes de los 4 años, pero depende de la mutación. Esta mutación tiene diferentes
versiones: infantil, juvenil o adulta. Dependiendo del grado de inactividad de la enzima siendo la más grave la infantil.

Esta enfermedad afecta a la actividad de una enzima: la hexosaminidasa A, esta cataliza la degradación de un
compuesto llamado GM2-gangliósido (y otros más), pero este especialmente se acumula en las neuronas. La
hexosaminidasa se encuentra en el lisosoma y degrada los productos tóxicos que se dan en la célula. Si no hay actividad
de hexosaminidasa, se acumula el GM2- gangliósido en la célula, éste se acumula más en la neurona ya que ésta la
provoca de forma más frecuente que en el resto de células.

Casi todas las enfermedades neurodegenerativas se producen por acumulación de algunas sustancias específicas de
neurona, es una causa bastante generalizada. Esa acumulación de sustancia conduce a la muerte neuronal.

Hay diferentes grados y no aparece nada más nacer ya que tiene que acumularse. Hay diferentes mutaciones
diferentes, todas en la parte estructural de gen, por lo que afecta a la parte estructural de la enzima. Cuanta menos
actividad tenga la enzima, más grave será la enfermedad. Si contiene un alelo solo, puede degradar la sustancia.

Si no tiene actividad hexosaminidasa, será un tipo de esta enfermedad de tipo infantil. La juvenil puede degradar un
poco gangliósido y tarda más en acumularse. Todo depende de la actividad de la hexosaminidasa que se encuentra en
relación inversa con el gangliósido.

Todas las terapias tienen efectos secundarios, pero en este caso, una forma de paliar la enfermedad es intentar que
la célula acumule la menor cantidad de GM2gangliósido, investigamos como se genera ese compuesto y disminuimos
su producción. Lo que no se sabe es que más se provoca con la inhibición del metabolismo de esa sustancia.

Enfermedades metabólicas
Enfermedades monogénicas que tienen afectadas un solo metabolismo.

La fenilcetonuria, implicado en el paso de fenilalanina a tirosina, cuando hay una inactividad de la enzima (pk1) se
produce una acumulación tóxica de la fenilalanina. Esta enfermedad se palia provocando que su alimentación sea
pobre en fenilalanina, provocando que la acumulación sea la menor posible.

El albinismo, implicado en la síntesis de melanina, todo lo que se trata de pigmentación está afectado. Conlleva tono
pálido con la piel y problemas en los ojos.

La alcaptonuria, primera enfermedad reconocida que era producida por un componente genético. Enfermedad
autosómica recesiva, se detectaba ya que al no tener la enzima no pasa del ácido hidroxi-fenil-pirúvico al ácido
homogentístico.

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TEMA 3. DÓNDE BUSCAR
Hay distintos niveles de búsqueda.

a) Investigación – profesionales de la medicina.

b) Conocimiento – estudiantes.
c) Divulgación – afectados.

Hay determinadas páginas que usan lenguaje simple, pero eso no significa que sean para personas que no tengan ese
nivel de conocimiento, sino que es para mejor entendimiento. Los afectados con enfermedades o familiares de los
afectados suelen ser los principales buscadores de información sobre genética médica.

Investigación – profesionales

Dan información más compleja, son páginas con un nivel alto.

La primera y original (OMIM) es un catálogo de desórdenes genéticas causadas por una base genética. Fue creada en
los años 80 por McKusick que fue el primero en ir ordenando estas enfermedades. En esta página podemos buscar
enfermedades, cosas relacionadas con una enfermedad, alteraciones… en las fichas de cada enfermedad aparece casi
toda la información sobre ella.

Otra de las páginas es NBCI, es simple pero llena de información.

Marco Pinto Gamboa Grado Biología Uex Genética Médica – 2018