Separacion de Pigmentos

SEPARACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES POR
CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL

INTRODUCCIÓN
Los cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado clorofila. Sin
embargo, lo que en realidad existe en los cloroplastos es una mezcla de pigmentos
representados principalmente por dos tipos de clorofila (clorofila a y clorofila b),
por β caroteno y por xantofila
FUNDAMENTO TEÓRICO
La clorofila es un pigmento de las plantas, que les proporciona su color verde y que
absorbe la luz necesaria para la fotosíntesis. La clorofila absorbe principalmente luz
violeta roja y azul y refleja luz verde. La abundancia de clorofila en hojas y su
ocasional presencia en otros tejidos vegetales es la causa de que esas partes de las
plantas aparezcan verdes, pero en algunas hojas la clorofila es enmascarada por
otros pigmentos. La extracción y reconocimiento de estos pigmentos es interesante
para el estudio y conocimiento de sus propiedades. Los Pigmentos vegetales, que se
encuentran en los cloroplastos, son moléculas químicas que reflejan o transmiten la
luz visible, o hacen ambas cosas a la vez. El color de un pigmento depende de la
absorción selectiva de ciertas longitudes de onda de la luz y de la reflexión de otras.
Constituyen el sustrato fisicoquímico donde se asienta el proceso fotosintético.
HAY DIVERSAS CLASES DE PIGMENTOS:
- Clorofilas (a, b, c, d) y bacterioclorofilas dan el color verde.
- Carotenoides (carotenos y xantofilas) da coloración amarilla y roja.
- Ficobilinas da color azul y ficoeritrina da color rojo, presente en algas.
La Clorofila, es el pigmento que da el color verde a los vegetales y que se encarga de
absorber la luz necesaria para realizar la fotosíntesis, proceso que posibilita la
síntesis de sustancias orgánicas a partir de las inorgánicas (CO2, H2O y sales
minerales), mediante la transformación de la energía luminosa en energía química.
La clorofila absorbe sobre todo la luz roja, violeta y azul, y refleja la verde.
Generalmente la abundancia de clorofila en las hojas y su presencia ocasional en
otros tejidos vegetales, como los tallos, tiñen de verde estas partes de las plantas.
PIGMENTOS VEGETALES
Los colores que presentan los vegetales son debidos a unos compuestos químicos
llamados pigmentos. El color que presenta un determinado órgano vegetal depende
generalmente del predominio de uno u otro pigmento o la combinación de ellos.
Además, algunos de los pigmentos que condicionan el color están estrechamente
ligados a las actividades fisiológicas del propio vegetal.
- CLOROFILAS: En las plantas superiores, la fotosíntesis es posible debido a
la presencia en el cloroplasto, concretamente en las membranas tilacoidales,
de una serie de pigmentos que tienen capacidad para captar la luz. Existen
dos tipos básicos de pigmentos fotosintéticos: Clorofilas. Compuestas por
una porfirina que lleva incorporado un átomo de magnesio en el centro del
núcleo Existen varios tipos de clorofilas, las más importantes de las cuales
son la "a", y la "b". La clorofila a tiene un grupo -CH3 en el anillo II mientras
que la clorofila b tiene un grupo -CHO en esa misma posición.
- CAROTENOIDES: Actúan como pigmentos accesorios en el proceso de la
fotosíntesis. Existen dos tipos de pigmentos carotenoides: carotenos y
xantofilas. Los carotenos dan color amarillo- anaranjado y las xantofilas son
de color amarillo.
- FICOBILINAS: Su distribución es más limitada, encontrándose en algas
rojas (ficoeritrina), algas pardas (fucoxantina), cianobacterias (ficocianina),
etc.
MATERIALES SEPARAR PIGMENTOS VEGETALES POR
CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL
MATERIALES:
- Papel filtro o hoja bond
- Colador
- Gaza
- Alcohol de 96º
- Mortero o sino usar la licuadora
- Hojas de espinaca, perejil,
hierbabuena.
- Vaso
Procedimiento
Extracción de pigmentos
- Cogen algunas hojas verdes y tiernas de

espinaca, separan los peciolos y venas
grandes de las hojas, luego se pica cada una
hasta tener trozos pequeños.
- Luego los trozos cortados que ya han sido
lavados se coloca en un mortero o sino
pueden usar la licuadora (agregamos unos
15 ml de alcohol de 96º) y licuamos hasta
que esté totalmente triturado (obteniendo
una coloración verde intensa).
- Luego filtrar, con ayuda de un colador o sino con gasa y recoger ese filtrado
en un vaso.
Separación de los pigmentos
- La solución obtenida después del filtrado se coloca en una placa Petri o
también puede usar un plato pequeño o vaso
ancho transparente.
- Cortar una tira de papel de filtro de unos 8 cm de
anchura y unos 10 a 15 cm de altura. Y luego
dóblalo en ángulo sobre la solución y se deja en
reposo el tiempo necesario.
- Espera unos 30 minutos y observar.
RESULTADOS
• Realizar las ilustraciones o toma de fotografías de sus procedimientos y la
presentación del producto final.
CUESTIONARIO
1. ¿Por qué empelamos alcohol etílico para extraer la clorofila?
Utilizamos el alcohol porque los pigmentos clorofílicos son solubles en
solventes orgánicos
2. ¿Qué pigmentos son más abundantes?
Los pigmentos fotosintéticos más abundantes son: la clorofila a, la clorofila b,
los carotenos y las xantofilas. Cada uno de ellos presenta distinto color y
solubilidad, características que permite su separación.
3. ¿Cuáles son los beneficios del consumo de betacaroteno y en que alimentos
se encuentra?
El betacaroteno previene concretamente el cáncer de mama, ovarios, estómago,
intestino grueso, vejiga, útero, pulmón y piel. También reduce el daño causado
por la radioterapia y la recurrencia del cáncer. Lo podemos encontrar en
zanahorias, pimientos, calabaza, verduras y hortalizas
4. Haz un dibujo del cromatograma, pon el nombre del pigmento que
corresponde a cada banda coloreada, sabiendo que la velocidad de difusión
de cada uno de ellos es la siguiente de mayor a menor: b caroteno, xantofila,
clorofila a, clorofila b.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Azcón-Bieto, M. Talón (eds.). Fundamentos de Fisiología Vegetal. Madrid: McGraw
Hill/Interamericana, Edicions Universitat de Barcelona, 2000 Blanco Prieto F.
Manual del Laboratorio de Química. Gráficas Cervantes. Salamanca, 1983
B.B. Buchanan, W. Gruissem, R. Jones. Biochemistry and Molecular Biology of
plants. Rockville (USA): American Society of Plant Physiologists, 2000.
Myrna L. Medina B. y Rafael J. Carreño D. EVACUACIÓN DEL MATERIAL
FOLIAR DE RAYO DE SOL COMO POSIBLE FUENTE DE XANTOFILAS.
Venezuela. 2015

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