Informe Reconocimiento de Biomoléculas
Informe Reconocimiento de Biomoléculas
Informe Reconocimiento de Biomoléculas
INTEGRANTES:
- ANDRADE VARGAS NAYELI DEL PILAR.
- BORBOR BARTRA JESSICA CAMILA.
- CARRANZA REQUEJO ERICA ELENA.
- MACEDO COTRINA FLAVIA MALÚ.
- RAMIREZ CEOPA JOCELYN NICOLE.
- SANDOVAL HUAMÁN BLANCA ALEXANDRA.
- SOLIS NAVARRO SIANNA LUCIA.
SEMESTRE: 2022- II
MORALES – PERÚ
1
ÍNDICE
I. INTRODUCCIÓN…………………………………………………… (3)
V. RESULTADOS…………………………………………………..…..(16-18)
VII. CUESTIONARIO…………………………………………………….(20-)
VIII. BIBLIOGRAFÍA……………………………………………………(21-22)
IX. ANEXOS…………………………………………………………….(23-24)
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I. INTRODUCCIÓN:
Las biomoléculas orgánicas son las moléculas que constituyen a los seres vivos, a la vez
son sintetizadas únicamente por estos. Sus principales conceptos son Carbono,
Hidrogeno, Oxigeno y Nitrógeno. Las biomoléculas orgánicas se agrupan en cuatro
grandes tipos: Hidratos de Carbono, Lípidos y Proteínas. Los hidratos de carbono
(azucares) son una fuente primaria de energía para los seres vivos. Los Lípidos (grasas o
aceites) desempeñan papeles importantes en el almacenamiento de energía, no se
disuelven en agua. Las proteínas son proteínas todas las enzimas, catalizadores de
reacciones metabólicas de las células, para estudiar las biomoléculas se deben extraer de
los seres vivos mediante procedimientos físicos o químicos.
En le presente informe vamos a describir y explicar los resultados de las reacciones
cualitativas de color que utilizamos para el análisis cualitativo de las proteínas como la
reacción de Biuret y Xantroproteica, para el reconocimiento de carbohidratos, la reacción
de Molich y Fehling, y para el reconocimiento de lípidos por su insolubilidad en agua.
Dentro del desarrollo también mencionaremos la metodología que hemos utilizado, los
objetivos y responderemos las preguntas del cuestionario.
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II. OBJETIVOS:
Analizar a los organismos y la reacción que ocurre tras entrar en contacto con las
distintas sustancias.
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III. FUENTES TEÓRICAS:
Las biomoléculas son la fuente primordial de la vida, ya que todos los organismos vivos
estas conformados por estas moléculas orgánicas, en su estructura principalmente
contienen el bioelemento del Carbono. Estas biomoléculas son; los carbohidratos
(hidratos de carbono), lípidos, proteínas y ácidos nucleicos, en su mayoría de los seres
vivos se encuentran cuatro bioelementos más abundantes que son el carbono, hidrógeno,
oxígeno y nitrógeno, representando alrededor del 99% de la masa de la mayoría de las
células. (1)
CARBOHIDRATOS:
Los carbohidratos son componentes estructurales importantes de las células y son
además una forma importante de almacenar energía. Estas moléculas usualmente
contienen carbono, hidrógeno y oxígeno. Los carbohidratos se clasifican como
monosacáridos (una sola molécula de azúcar), disacáridos (dos monosacáridos) o
polisacáridos (dos o más disacáridos), dependiendo del tamaño y la complejidad de la
molécula. Los carbohidratos incluyen azúcares, almidones, quitina y celulosa. El
azúcar es sirven temporalmente para almacenar energía y construir otras moléculas. Los
almidones y el glucógeno son polisacáridos que sirven para almacenar energía
a plazo más largo en plantas y animales, respectivamente. La celulosa forma las
paredes celulares de las plantas y la quitina fortalece las cubiertas externas duras
(exoesqueleto) de muchos invertebrados y varios tipos de hongos. Otras clases de
polisacáridos forman las paredes celulares de las bacterias (2)
- Reacción de Molish: La reacción de Molish es una reacción que tiene cualquier
carbohidrato (hidrato de carbono) presente en una disolución. Mide la presencia de
glúcidos (azucares) en una muestra de α-naftanol 5% en etanol de 96°. Todos los
carbohidratos tanto los monosacáridos como los disacáridos y polisacáridos
reaccionan con α-naftanol, en presencia de ácido sulfúrico para formar sustancias
complejas coloreadas. Esta reacción se utiliza para la identificación en general de los
carbohidratos. El proceso se fundamenta en la deshidratación que experimentan los
carbohidratos en presencia de ácidos minerales fuertes, como el acido sulfúrico.
Después de haber deshidratado el carbohidrato se forma el complejo coloreado,
porque el grupo carbonilo del carbohidrato, se polariza produciendo un carbonocatión
que se estabiliza con los pares electrónicos libres del oxigeno del α-naftanol. Todos
los glúcidos por acción del ácido sulfúrico concentrado se deshidratan formando
compuestos fusfúricos. Estos furfurales se condensan con el reactivo de Molish,
dando un producto violeta. (3)
- Reacción de Fehling: El reactivo de Fehling, es una solución que se utiliza como
reactivo para la determinación de azúcares reductores. El licor de Fehling consiste en
dos soluciones acuosas: Sulfato de cobre cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta
1.000 ml. Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 150 g; solución de
hidróxido de sodio al 40%, 3 g; agua, hasta 1.000 ml. Ambas se guardan separadas
hasta el momento de su uso para evitar la precipitación del hidróxido de cobre (II).El
ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo
de un aldehído. Éste se oxida a ácido y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino
a óxido de cobre (I), que forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante
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de esta reacción es que la forma aldehído puede detectarse fácilmente, aunque exista
en muy pequeña cantidad. Si un azúcar reduce el licor de Fehling a óxido de cobre
(I) rojo, se dice que es un azúcar reductor. Esta reacción se produce en medio alcalino
fuerte, por lo que algunos compuestos no reductores como la fructosa (que contiene
un grupo cetona) puede enolizarse a la forma aldehído dando lugar a un falso positivo.
Al reaccionar con monosacáridos, se torna verdoso; si lo hace con disacáridos, toma
el color del ladrillo. (4)
LIPIDOS:
Los lípidos son biomoléculas orgánicas formadas siempre por C, H y O aunque muchos
poseen fósforo y nitrógeno, y en menor proporción azufre. Constituyen un grupo muy
heterogéneo en cuanto a su composición química y suelen incluirse en este grupo aquellas
sustancias que presentan unas características físicas determinadas, que son: ser insolubles
en agua (disolvente polar) y solubles en disolventes orgánicos (apolares) como el
benceno, el éter, el alcohol, la acetona, la gasolina, etc., suelen ser untuosos al tacto y
menos densos que el agua. Sus funciones son también variadas, destacando entre ellas la
energética, la estructural, la hormonal y vitamínica. Se clasifican en saponificables
(aquellos lípidos que pueden descomponerse en ácidos grasos y en alcohol, además
pueden hacerse jabón con ellos), los principales grupos de lípidos saponificables son:
triglicéridos o grasas, ceras¸ fosfolípidos. Y insaponificables (No poseen ácidos grasos y
por ello no se puede obtener jabón). Destacamos dos tipos: Isoprenoides o terpenos y
Esteroides. (5)
- Por su insolubilidad en agua: Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan
fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas gotas formando una emulsión de
aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupación de
las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua.
(6)
PROTEÍNAS: Las proteínas son biomoléculas grandes que se encuentran en todo
organismo viviente. Existen muchos tipos y tienen funciones biológicas diferentes. La
queratina de la piel y las uñas, la fibroína de la seda, las telas de la araña y la mayor parte
de las enzimas que catalizan los millares de reacciones biológicas dentro de las células
son proteínas. Sin importar su función, todas las proteínas están constituidas de muchas
unidades de aminoácidos enlazados en una cadena larga. Los aminoácidos, como su
nombre lo indica, son bifuncionales, contienen un grupo amino básico, y un grupo
carboxilo ácido. Su valor como bloques biológicos de construcción proviene del hecho
de que pueden asociarse en grandes cadenas formando enlaces amida entre el grupo -NH2
de un aminoácido y el grupo -COOH de otro. Son más complejas desde el punto de vista
estructural que el resto de las biomoléculas. Mientras que los hidratos de carbono y las
grasas están compuestas de C, H y O, las proteínas tienen en su mayoría N, S y P. Una
forma de clasificarlas es en fibrosas o globulares, según su forma tridimensional. Las
proteínas fibrosas (colágeno y queratina) consisten en cadenas de polipéptidos, arregladas
lado a lado en largos filamentos. Sirven para construir materiales estructurales como
tendones, pezuñas, cuernos y músculos. Las proteínas globulares (hemoglobina, albúmina
de huevo x ej.), en cambio, suelen estar enrolladas en formas semiesféricas y compactas;
son solubles en agua (a diferencia de las anteriores) y se mueven dentro de la célula. La
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mayor parte de los varios millares de enzimas conocidas son proteínas globulares. El
enrollamiento de estas proteínas se debe a las débiles atracciones intermoleculares
existentes. Con frecuencia, un ligero cambio en la temperatura o en el pH altera la
estructura terciaria (enrollamiento) y causa que la proteína se desnaturalice. La
desnaturalización es un proceso irreversible y se efectúa en condiciones tan suaves que la
estructura primaria permanece intacta (secuencia de aminoácidos), pero la terciaria se
desdobla de una forma globular específica a una cadena enrollada al azar. Esta
desnaturalización produce cambios en las propiedades físicas y biológicas, como la
disminución de la solubilidad (coagulación). La mayor parte de las enzimas pierden su
actividad catalítica cuando se desnaturalizan, debido a que para su acción se necesita una
estructura terciaria definida con precisión. (7)
- Reacción de Biuret
Es un método que detecta la presencia de compuestos de tres o más enlaces peptídicos
y, por tanto, sirve para todas las proteínas y péptidos cortos. El reactivo de Biuret
consiste en una solución acuosa de sulfato cúprico (CuSO4) en medio alcalino
(NaOH). Este reactivo da un ensayo positivo con los enlaces peptídicos entre
aminoácidos, cuando la solución queda de color violeta. Esto se debe a que el cobre
tiene la propiedad de formar iones complejos, especialmente entre los enlaces
peptídicos (8).
El reactivo de Biuret será positiva en la clara de huevo, la leche y la milanesa,
estos tres alimentos se encuentran formados por proteínas de gran complejidad,
como la albúmina y la caseína.
- Reacción Xantoproteica: Es un método que se puede utilizar para determinar la
presencia de proteínas solubles en una solución, empleando ácido
nítrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con
aminoácidos portadores de grupos aromáticos, especialmente en presencia
de tirosina. Es una prueba de tipo cualitativa que indica la presencia de proteínas. Al
agregar ácido nítrico concentrado a la caseína se neutraliza con un álcali se observa
coloración amarilla. Esta reacción se explica por la nutrición de los grupos cíclicos
de la familia del benceno; tales como fenol, indoles presentes en la tirosina y
triptófano. La reacción xantoproteica se puede considerar como una sustitución
electrofílica aromática de los residuos de tirosina de las proteínas por el ácido nítrico
dando un compuesto coloreado amarillo a pH ácido. Según las guías químicas es una
reacción cualitativa, mas no cuantitativa. Por ende, determina la presencia o no de
proteínas. Para cuantificar se usa otra reacción, como la de Biuret, y se hace un
análisis espectro fotométrico. El ácido nítrico reacciona con los núcleos aromáticos
sustituyendo hidrógenos por radicales nitros (dióxido de nitrógeno) con lo que se
forma nitroderivados aromáticos de color amarillo, en la reacción estos anillos se
nitran, por lo que aparece el color amarillo intenso de sus derivados nitrados. (9)
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IV. METODOLOGÍA:
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Fuente: Obtenida por el equipo 1 de laboratorio de Biología, turno tarde.
BIURET:
Materiales:
- Clara de huevo (1ml)
- 1 tubo de ensayo
- Puntas desechables de plástico para micropipetas
- Agua destilada
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- Sulfato de cobre (CuSO4) 0.05%
- Vaso de precipitado
- Hidróxido de sodio al 10% (0.5 ml)
Procedimiento:
Paso 1: Empezaremos por preparar nuestra disolución con agua destilada y clara de
huevo, para ello, nos vamos a quedar con la clara de un huevo, y la vamos a disolver con
2ml de agua destilada; separamos la clara de la yema por decantación sobre un vaso de
precipitado.
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Imagen 6: Agregamos gota a gota solución de CuSO4 0.05 %.
Fuente: Obtenida por el equipo 1 de laboratorio de Biología, turno tarde.
FEHLING:
Materiales:
- Glucosa
- Tubo de ensayo
- Micropipetas desechables
- Gradilla
- Mechero
- Fehling A compuesto de sulfato cúprico
- Fehling B solución de potasio
Procedimiento:
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Imagen 8: Agregamos cantidades iguales de solución Fehling A y B.
Fuente: Obtenida por el equipo 1 de laboratorio de Biología, turno tarde.
Paso 3: Ahora se debe llevar a baño María durante 2 min a una temperatura de unos 60°C,
pasado los 2 min si el azúcar era reductor pasara de azul a rojizo similar a el color de un
ladrillo.
Paso 4: Se sacan todas las soluciones del baño María y se colocan de nuevo en la gradilla.
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XANTOPROTEICA:
Materiales:
- Mechero (baño María)
- Gradillas con tubos de ensayo
- Clara de huevo (2ml)
- Ácido nítrico 0.5 ml
- Puntas desechables de plástico para micropipetas
- Solución de hidróxido sodio al 40%
- Mechero
- Agua destilada
- Vaso de precipitado
Procedimiento:
Paso 1: Empezaremos por preparar nuestra disolución con agua destilada y clara de
huevo, para ello, nos vamos a quedar con la clara de un huevo (2ml) y después mezclamos
el agua destilada (2ml) en el vaso de precipitado.
Paso 2: Después de realizar la mezcla en el vaso de precipitado, sacamos el extracto
celular con la micropipeta desechable y colocamos en el tubo de ensayo 2ml del extracto.
Paso 3: Agitamos con suavidad en el tubo de ensaño, luego adicionamos 0.5 ml de ácido
nítrico concentrado. Seguidamente observaremos un precipitado lechoso
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Imagen 12: Calentamiento del tubo de ensayo.
Fuente: Obtenida por el equipo 1 de laboratorio de Biología, turno tarde.
Procedimiento:
Paso 1: Empezamos poniendo el aceite 1ml en el tubo de ensayo con ayuda de la
micropipeta desechable, luego agregamos agua destilada 5ml en el mismo tubo de ensayo.
Paso 2: Después con bolsa hacemos un tapón para tapar el tubo de ensayo y luego
procedemos a agitar fuertemente.
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V. RESULTADOS:
RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS:
POR BIURET:
Para lograr el reconocimiento por Biuret se necesitó utilizar 0.5 ml de
NaOH (hidróxido de sodio) al 10% y CuSO4(sulfato de cobre) 0.05% para
así añadirlos a la clara de huevo que estaba en el tubo de ensayo,
obteniendo así que el compuesto se volviera de un color rojo violeta.
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RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS:
POR MOLICH:
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RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS:
Por Insolubilidad:
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VI. CONCLUSIONES:
Según los resultados, logramos reconocer los carbohidratos, lípidos y proteínas, en
las muestras de origen vegetal y animal. Lo cual se cumplió los objetivos requeridos
ya que fue posible observar en las siguientes reacciones:
- Biuret que utilizamos la clara de huevo diluida con el agua destilada, que detectó
la presencia de proteínas.
- La reacción de Xantoproteica que también se detectó las proteínas y se hizo un
color anaranjado.
- Para reconocimiento de carbohidratos realizamos la reacción de Molich que
colocamos en el tubo de ensayo jugo de naranja, 3 gotitas de solución de alcohol
a-naftol, 1ml de H2SO4 y por último se hizo un rojo violeta oscuro.
- Reacción de Fehling para el reconocimiento de carbohidratos, añadimos en
cantidades iguales la solución de Fehling A y B que fue 2ml, lo llevamos a calor
hasta la ebullición y añadimos 1ml de glucosa gota a gota hasta observar que se
hizo un color rojo ladrillo.
- La saponificación lo utilizamos para reconocimiento de lípidos, gracias a las grasas
formando jabón a base de aceite vegetal más NaOH.
Habiendo llevado a cabo esta práctica se pudo determinar que la prueba de Molish al
reaccionar con glucosa da positivo, puesto que la misma sirve para la identificación
de todo carbohidrato en general, y se lo verifica con la formación de un anillo violeta
en la interfase.
Si no se tiene el debido cuidado con los materiales y reactivos a utilizar los resultados
obtenidos en la práctica no serán los deseados y los cálculos saldrán erróneos.
Da positiva esta reacción en todos los compuestos que tengan dos o más enlaces
peptídicos consecutivos en sus moléculas y este es el caso nuestro puesto que presenta
un cambio de coloración característico violeta.
Las cadenas de proteínas presentes en la clara de huevo, cuando fueron sometidas al
reactivo de Biuret, que en su composición tiene NaOH al 10% (el cual no participa de
la reacción, pero es de fundamental importancia su presencia ya que proporciona el
medio básico necesario) junto con el CuSO4, reaccionan con el sulfato cúprico y se
tornan de color violeta lo que nos indica que la reacción fue positiva.
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VII. CUESTIONARIO:
Colocar en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo, leche y
un trozo de carne cruda.
Colocar en cada tubo de ensayo 10 gotas del reactivo de vierte.
Observar la coloración de la muestra.
5. ¿Qué es proteinuria?
La proteinuria está definida por la presencia de proteínas en la orina. En los adultos se
refiere a una excreción urinaria de estas superior a 150 mg en 24 horas. Se ha utilizado
como un marcador de lesión renal, constituyéndose en uno de los datos más importantes
para el nefrólogo.
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VIII. BIBLIOGRAFÍA:
2. Trudy McKee JRM. Bioquímica. Las bases moleculares de la vida, 5e. [Online]; 2016.
Acceso 24 de setiembrede 2022. Disponible en:
https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1960§ionid=1480952
55#:~:text=Los%20carbohidratos%2C%20las%20biomol%C3%A9culas%20con,forman%20
durante%20la%20fotos%C3%ADntesis%20(cap.
5. Diane María Díaz Velásquez ATUMJAANALVM. Los lípidos y sus generalidades. [Online].;
2021. Acceso 24 de setiembre de 2022. Disponible en:
https://libros.usc.edu.co/index.php/usc/catalog/download/195/199/3441?inline=1.
8. Cuadra VS. Reactivo de Molisch, Biuret y Lugol. [Online] Acceso 24 de Setiembrede 2022.
Disponible en: https://www.udocz.com/apuntes/257443/reactivo-de-molisch-biuret-
lugol.
10. Hart H. CLyHD. Química Orgánica. Novena edición ed. España; 1997.
11. Juana Cruz Esiquio. Centro Banamex. [Online].; 2022.. Disponible en:
https://www.centrobanamex.com.mx/que-es-un-azucar-reductor-y-ejemplos.
21
12. América Valenzuela. rtve. [Online].; 2010. Acceso 24 de setiembre de 2022. Disponible
en: https://www.rtve.es/noticias/20100422/agua-aceite-no-se-pueden-
mezclar/328679.shtml.
13. Jorge E. Ramírez Luna ARL. Manual de prácticas de laboratorio de biología México:
Pearson Educación; 2003.
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IX. ANEXOS:
Grupo 3:
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Figura 3: Resultado de reacción de Fehling, utilizando orina.
Fuente: Obtenida por el equipo 3 de laboratorio de Biología, turno tarde.
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