UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

LA MOLINA

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA

CURSO: QUÍMICA AMBIENTAL - LABORATORIO

INFORME DE LABORATORIO N°8

TÍTULO: ‘‘Determinación de fosfato’’

GRUPO N° 4
Apellidos y Nombres Código Firma

Gonzales Tarazona Valeria 20200174

Verenice

Palacios Pupuche, Paola Andrea 20191179

Paucar Leyva, Jeremy Alesandro 20191183

Roque Ponce, Jazmín Milagros 20200201

Facultad y especialidad: Ciencias - Ingeniería Ambiental

Profesor de laboratorio: Mg. Sc. Diego Enrique Suárez Ramos

Fecha de la práctica: Miércoles 14 de diciembre del 2022

Fecha de entrega del informe: Miércoles 21 de diciembre del 2022

LA MOLINA - LIMA – PERÚ

I. OBJETIVOS
 - Determinar la concentración de fósforo reactivo total de una muestra tomada en un
cuerpo de agua por colorimetría.
- Comparar los resultados obtenidos con diferentes estándares de calidad ambiental
para agua en función de la categoría de clasificación.

II. MARCO TEÓRICO

2.1 Fosfatos en el agua

−¿¿
Según Bolaños et, al. (2017) El ion fosfato ( PO 4 ) se forma a partir del fósforo inorgánico
que existe como mineral y contribuye directamente en el ciclo de este elemento en el
ambiente. También puede existir en solución como partículas, como fragmentos sueltos o
en los cuerpos de organismos acuáticos. El agua de lluvia puede contener distintas
cantidades de fosfatos que se filtran de los suelos agrícolas a los cursos de agua
próximos.

Los compuestos del fósforo son nutrientes de las plantas y conducen al crecimiento de
algas en las aguas superficiales. Dependiendo de la concentración de fosfato existente en
el agua, puede producirse la eutrofización. Tan sólo 1 g de fosfato-fósforo ( PO 4−P ¿
provoca el crecimiento de hasta 100 g de algas. Cuando estas algas mueren, los
procesos de descomposición dan como resultado una demanda de oxígeno de alrededor
de 150 g. (Putz, 2008).

Las especies de fósforo más comunes en aguas naturales incluyen compuestos

inorgánicos y orgánicos disueltos o suspendidos. Las especies inorgánicas incluyen
ortofosfatos, polímeros lineales o polifosfatos y polímeros cíclicos o metafosfatos. Los
compuestos orgánicos comprenden ésteres, fosfonatos, ácidos nucleicos, fosfolípidos,
azúcares, proteínas, ácido amino fosfórico, fosfoamidas y El fósforo total incluye distintos
compuestos como diversos ortofosfatos, polifosfatos y fósforo orgánico. La determinación
se hace convirtiendo todos ellos en ortofosfatos que son los que se determinan por
análisis químicos.

Los meta y polifosfatos, llamados fosfatos complejos o condensados, también están

presentes en aguas naturales bien sea porque son generados por los organismos
acuáticos o porque provienen de la descargas de aguas residuales domésticas e
industriales que contienen detergentes y productos químicos utilizados para el tratamiento
de las aguas. Los polifosfatos en aguas naturales son hidrolizados lentamente a
ortofosfato. Los compuestos orgánicos también pueden ser hidrolizados a través de
reacciones químicas o biológicas que se consideran factores claves en el ciclo normal del
fósforo. Entre las fuentes de fósforo de origen natural cabe mencionar los depósitos y
rocas fosfóricas las cuales desprenden fósforo, en forma de ortofosfato principalmente,
mediante erosión. Las fuentes antropogénicas puntuales incluyen las aguas servidas
domésticas e industriales; las fuentes no puntuales están asociadas con la escorrentía de
áreas agrícolas y domésticas. (Mercado, 2017)

La presencia de fosfatos en aguas potables indica la posibilidad de contaminación del

acuífero por aguas contaminadas o aguas residuales. Debido a que el fósforo se
encuentra presente en cantidades relativamente altas en aguas residuales y aguas de
riego agrícola, su presencia en valores mayores a los valores normales, puede deberse a
una contaminación o infiltración de aguas residuales al yacimiento de agua potable. Los
herbicidas o pesticidas organofosforados que también están presentes en las aguas de
 riego agrícola son una advertencia de la calidad del agua ya que la presencia de fósforo
en el agua puede ser debida a los agroquímicos fosforados. Si se debe a la infiltración de
aguas residuales sin tratamiento previo, también son un riesgo al consumidor de estas
fuentes de agua natural. (Rodríguez et, al. 2016)

2.1.1. Clasificación del fósforo:

● Fósforo orgánico o particulado

Según Hanna Instruments (2022), los fosfatos orgánicos son grupos ortofosfatos que
están unidos a moléculas orgánicas. Uno de los ejemplos más comunes es la
molécula de adenosina trifosfato o ATP. Los fosfatos orgánicos surgen debido a
procesos biológicos, por lo que la medición de la fracción de fosfato orgánico
proporciona una aproximación de la actividad biológica. Para determinar la
concentración total de fósforo, la muestra requiere digestión a 150 ° C con ácido
sulfúrico y persulfato de potasio durante 30 minutos para convertir todas las formas
de fósforo (orgánico y condensado) en ortofosfato. Para los medidores que miden el
fósforo total, el método del ácido ascórbico es la base para la medición de rango bajo
y el vandomolybdovanadate para el rango alto. La cantidad real de fosfato orgánico
presente en una muestra se puede calcular restando la cantidad de fósforo
determinada por el método de fósforo hidrolizable en ácido del resultado obtenido por
una prueba de fósforo total. La diferencia entre los dos resultados es la cantidad de
fósforo que está unido orgánicamente.

● Ortofosfato o fósforo reactivo

El ortofosfato (uno de los fosfatos más comunes) está formado por un átomo de
fósforo unido a cuatro átomos de oxígeno. El ortofosfato se denomina a veces
"fósforo reactivo", ya que se une fácilmente con otros elementos y compuestos
deficientes en electrones. Esto se debe a que los tres electrones "adicionales" de los
átomos de oxígeno son muy propensos a unirse a los protones del mismo modo
(Hach, s.f.).

● Fósforo condensado o inorgánico

Los fosfatos condensados son varias moléculas de ortofosfato "condensadas" que

comparten un enlace covalente entre los átomos de fósforo (P) y oxígeno (O)
adyacentes. Este grupo incluye los metafosfatos, los pirofosfatos y los polifosfatos,
que suelen utilizarse para controlar la corrosión en los sistemas de distribución de
agua potable (Hach, s.f.).

2.2 Métodos analíticos para la determinación de fosfatos

2.2.1 Método del ácido ascórbico

Según Gómez (2019), el Método Del Ácido Ascórbico es un método

espectrofotométrico que se basa en la determinación de fósforo en forma de
Ortofosfatos (fósforo soluble) en muestras de agua mediante la formación del complejo
de Azul de Molibdeno, este método considera dos pasos generales, la conversión de la
forma de fósforo de interés a Ortofosfatos disuelto, y determinación colorimétrica del
 Ortofosfatos disuelto. El molibdato de amonio y el tartrato de antimonio y potasio
reaccionan en medio ácido con el Ortofosfatos para formar un heteropoliácido -ácido
fosfomolíbdico- que es reducido por ácido ascórbico a un complejo azul de molibdeno
intensamente coloreado; sólo las formas de Ortofosfatos forman dicho color azul en
esta prueba.

★ Interferencias del método

- Concentraciones de arseniato tan bajas como 0.1 mg As/L interfieren en la
determinación de fosfato.
- El cromo hexavalente y NO2- interfieren en el proceso de determinación y dan
resultados un 3 % más bajos a concentraciones de 1 mg/L, y del 10 - 15 % más
bajos a la de 10 mg/L.
- Sulfuro (Na2S) y silicato no interfiere en el método a concentraciones de 1.0 y 10
mg/L
- La presencia de turbidez y color en la muestra debe corregirse elaborando un blanco.
- Las muestras con bajas concentraciones de fósforo no se deben almacenar en
botellas plásticas a menos que se congelen, debido a que los fosfatos se pueden
absorber en las paredes plásticas.

2.2.2 Método colorimétrico del ácido vanadomolibdofosfórico

Según López (2019), con este método se busca determinar el contenido de fosfatos
solubles en una muestra de agua por medio de espectrofotometría ultravioleta-visible.
Este procedimiento se basa en la reacción del ortofosfato con el reactivo
vanadomolíbdico formando un heteropoliácido de color amarillo cuya absorción de luz
se mide a 420 nm. La intensidad del color amarillo es proporcional a la concentración
de fosfatos.

La formación de este heteropoliácido tiene lugar según la reacción:

(PO4)3- + (VO3)- + 11(MoO4)2- + 22H+ = P(VMo11O40) 3- + 11H2O

★ Interferencias del método

En este procedimiento interfieren concentraciones de sílice y arseniatos pero solo

causan interferencias positivas si la muestra se calienta por lo que es importante que
en el momento de realizar el análisis, la muestra se encuentre a temperatura ambiente.
En cuanto a la presencia de iones fluoruros, sulfuros, tiosulfatos o exceso de
molibdato, todos estos producen interferencias negativas. Por otra parte, el hierro da
lugar a un color azul pero no interfiere en los resultados si su concentración es menor
de 100 mg/L. (Sanchez, 2011)

2.2.3 Método de cloruro estañoso

Principio: Se forma ácido molibdofosfórico que se reduce con el cloruro estañoso a

azul de molibdeno de color intenso. Este método es más sensible que el Método
colorimétrico del ácido vanadomolibdofosfórico y posibilita la determinación de hasta 7
µg P/L utilizando un recorrido de luz más largo. Por debajo de 100 µg P/L se puede
aumentar la fiabilidad y reducir las interferencias con un paso de extracción. (Escobar,
2015)

2.3 Estándares de Calidad Ambiental: Fosfatos

Cuadro N°1. Estándar de calidad ambiental (ECA) para la Categoría 1: Poblacional y

recreacional.

Parámetros Unidad de A1 A2 A3
 Aguas que pueden Aguas que pueden ser
Aguas que pueden
ser potabilizadas potabilizadas con
medida ser potabilizadas con
con tratamiento
tratamiento avanzado
desinfección convencional
Fósforo Total mg/L 0.1 0.15 0.15
(Fuente:Decreto Supremo N° 004-2017-MINAM)

Cuadro N°2. Estándar de calidad ambiental (ECA) para la Categoría 2: Extracción,

cultivo y otras actividades marino costeras y continentales

C1 C2 C3 C4
Extracción y
Extracción y Actividades marino
Unidad cultivo de
cultivos de otras portuarias, Extracción y cultivo
Parámetros de moluscos,
especies industriales o de de especies
medida equinodermos
hidrobiológicas en saneamiento en hidrobiológicas en
y tunicados en
aguas marino aguas marino lagos o lagunas
aguas marino
costeras costeras
costeras
Fósforo
Total mg/L 0.062 0.062 – 0.025
(Fuente:Decreto Supremo N° 004-2017-MINAM)

Cuadro N°3. Estándar de calidad ambiental (ECA) para la Categoría 4: Conservación

del ambiente acuático

E3: Ecosistemas costeros y

Unidad E1 E2: Ríos marinos
Parámet
de
ros
medida Lagunas y
Costa y sierra Selva Estuarios Marinos
lagos

Fósforo
Total mg/L 0.035 0.05 0.05 0.124 0.062
(Fuente:Decreto Supremo N° 004-2017-MINAM)

III. MATERIALES Y MÉTODOS

3.1 Materiales
- Fiolas de 25 y 100 mL
- Pipetas de 5 y 10 mL
- Vasos de precipitado de 100 mL
- Matraces de 250 ml
- Pliego de papel filtro

3.2 Equipos
- Espectrofotómetro

3.3 Reactivos
- Solución de molibdato de amonio al 4%
- Solución de ácido ascórbico
- Solución de tartrato doble de potasio y antimonio
 - Reactivo combinado (molibdato amónico, ácido sulfúrico, ácido ascórbico y tartrato
de antimonio y potasio)
- Solución de agua con detergente ‘’Patito’’ (1g/25 mL)
- Solución stock de 1000 mg/L de fósforo (solución madre)

3.4 Método

- Tomar alícuotas de o mL (blanco), 1,2,4,5 y 25 mL a partir de la solución de la

solución madre. Estas se depositarán en fiolas de 25 mL y deberán ser enrasadas
con agua destilada para generar concentraciones de 0, 0.2, 0.4, 0.8, 1 y 5 ppm;
respectivamente.
- Posteriormente el volumen de cada fiola deberá ser trasvasado a un matraz de 125
mL rotulado con la misma concentración de fiola.
- Seguidamente se debe agregar 10 mL de reactivo combinado a cada uno de los
matraces, agitar y esperar entre 5 a 10 minutos que se desarrolle el color azul.
- Finalmente se efectuarán las lecturas de absorbancia en el espectrofotómetro a una
longitud de onda de 880 nm y usando el blanco como solución referente.

Para las muestras a analizar, se repite el mismo procedimiento de preparación

mencionado anteriormente. No obstante en algunos casos se deberá diluir la muestra de
tal forma que la concentración de fósforo esté dentro del rango de la curva preparada.

IV. RESULTADOS

Cuadro N° 4: Preparación de diluciones

Mesa Concentración de diluciones a Volumen de la Volumen de alícuota a
partir de la solución estándar fiola (mL) sacar de la solución
(ppm) estándar (mL)

1 Blanco 25 0

2 0.2 25 0.5

3 0.4 25 1

4 0.8 25 2.5

5 1 25 5

6 5 25 25
(Fuente: Elaboración propia)

Cuadro N° 5: Absorbancia a 880 nm por dilución

Mesa Concentración de diluciones a partir Absorbancia
de la solución estándar (ppm)

1 Blanco -

2 0.2 0.095

3 0.4 0.174

4 0.8 0.354
 5 1 0.438

6 5 1.717

Muestra 2.289 0.642

(Fuente: Elaboración propia)

Gráfico N° 1: Curva de calibración y Muestra

(Fuente: Elaboración propia)

Cuadro N° 6: Concentración de fósforo reactivo total en la muestra.

mg P
2.289 × 0.025 L=0.057227 mgP
L
3−¿
PO 4
0.057227 mgP × 1 g P ×94.9714 g −4
=1.7546 x 1 0 g P ¿
1000 mgP 30.9738 g P
−4
1.7546 x 1 0 g P
x 100 %=0.01755 %
1 g detergente
(Fuente: Elaboración propia)

V. DISCUSIONES

En la presente práctica de laboratorio se determinó la concentración de fósforo reactivo total

en una muestra de agua, sintetizada a partir de 1 gramo de detergente ‘’Patito’’ disuelto en
25 mL de agua destilada. En el cuadro N°4 se observa las concentraciones de diluciones
preparadas a partir de la solución estándar, que varía desde 0.2 hasta 5 ppm, incluyendo la
muestra en blanco.

En el cuadro N°5 se observa los resultados de absorbancia una vez que las muestras fueron
colocadas en el espectrofotómetro, según menciona Gómez (2019), en ella se determina la
cantidad de fósforo en forma de ortofosfatos a través de la formación del complejo azul de
molibdeno cuyo color resultante es azul y su intensidad varía conforme la concentración de
fósforo. Del mismo modo en el presente cuadro, se observa que la absorbancia varía
directamente proporcional a la concentración de ortofosfatos. Antes de determinar la
concentración y absorbancia de la muestra de interés a través del espectrofotómetro, se
 apreció que dicha muestra se encontraba en el rango de 1 a 5 ppm, puesto que, su color azul
intenso brindó indicios de ellos [ver anexo figura imagen N° 4] . Una vez con los resultados,
se confirmó que dicha muestra presentaba 2.289 de concentración y una absorbancia de
0.642. En el gráfico N°1 se aprecia que las concentraciones en ppm y la absorbancia
presentan un grado de correlación de 0.9841, siendo esta considerada ‘’muy alta y positiva’’
según Pearson. El punto de color rojo representa la muestra analizada.

De acuerdo a los cálculos establecidos en el cuadro N°6 se obtiene que la muestra (de agua
con detergente), cuya concentración es de 2.289 ppm (valor hallado en el
espectrofotómetro), presenta 1.7546 x 10 -4 gramos de fosforo reactivo total por cada gramo
de detergente de la marca “Patito”, que en valores porcentuales data un total de 0.01755%.

Por otro lado, evaluando el ECA para agua, según la normativa nacional, dicha concentración
(2.289 mg/L) sobrepasa los valores fijados en la Categoría 1: Poblacional y recreacional, por
tanto la muestra no puede ser potabilizada con desinfección. De esta misma manera,
analizando otras categorías de los ECA, como la Categoría 2: Extracción, cultivo y otras
actividades marino costeras y continentales y Categoría 4: Conservación del ambiente
acuático (presentes en el cuadros N°2 y N°3 respectivamente), los valores de la muestra
hallados en el laboratorio de Química Ambiental tiene un exceso de fósforo total, superando
así dichos parámetros. A lo que, si la muestra se tratara de un agua proveniente a un cuerpo
natural; Putz (2008) advierte que dentro de ella se estaría provocando un desmedido
crecimiento de algas, que a la larga traen consecuencias como la eutrofización.

VI. CONCLUSIONES
● De acuerdo a la curva de calibración, se determinó a simple vista que la muestra se
encontraba dentro del rango de 1 y 5 ppm. Ello fue corroborado luego con el
espectrofotómetro, dándonos un valor de 2.289 ppm.
● Con la presente práctica se concluye que, por cada gramo de detergente “Patito” se
tiene 0.01755% de fósforo reactivo total dentro de ella.
● Se compararon los resultados con los estándares de calidad ambientales
provenientes del MINAM, con la Categoría 1, 2 y 4, donde se determinó que la
muestra problema supera los valores de fósforo total fijados en esta normativa
nacional.

VII. BIBLIOGRAFÍA

Bolaños, J. D., Cordero, G., & Segura, G. (2017). Determinación de nitritos, nitratos,
sulfatos y fosfatos en agua potable como indicadores de contaminación ocasionada por
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Escobar, S. (2015). Determinación de la causa de la inadecuada coloración del blanco en la

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de calidad del agua de aguas y aguas de Pereira. Universidad de Pereira, Colombia. pp
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fósforo total y ortofosfato en agua potable, natural y residual en el LICAM SENA-CCIT.
Trabajo para obtener el título de Químico. Universidad de Córdoba, España. pp. 13.
 Hach. s.f. Fósforo. https://es.hach.com/parameters/phosphorus

Hanna Instruments. 25 marzo 2022. Fósforo: comprender los diferentes tipos de fósforo y
los métodos utilizados para medirlo (en línea, blog). Consultado 25 junio 2022.
Disponible en https://www.hannainst.es/blog/1504/F%C3%B3sforo--Comprender-los-
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Trabajo para obtener el grado en Ingeniería Química. Universidad Politécnica de Madrid,
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Mercado, J. E. (2017). Validación de la metodología analítica para la determinación de

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Putz, P. (2008). Eliminación y determinación de fosfato. Informe práctico. Analítica de

laboratorio y sistema de control de proceso. Productos de aplicación de laboratorio,
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Rodríguez, S. C., De Asmundis, C. L., & Martínez, G. C. (2016). Variaciones estacionales

de las concentraciones de fosfatos y nitratos en distintas fuentes de aguas de pequeños
productores hortícolas. Agrotecnia, (24), 30-34.

Sánchez, A. (2011). Validación de las técnicas hierro total y fosfatos en agua en el

laboratorio ALISCCA LTDA. Universidad Tecnológica de Pereira, Colombia. pp 21.

VIII. ANEXOS

Figura N° 1. Toma de alícuota de 0 a 5 ppm prove- Figura N° 2. Trasvase de alícuotas a matraz.

niente de solución estándar.
Figura N° 3. Formación del complejo azul de molibdeno Figura N° 4. Coloración de las muestras según
concentración de fósforo reactivo.

Figura N° 5. Uso del espectrofotómetro.