Scribd Logo
Cargar

¡Te damos la bienvenida a Scribd!

  • 140 vistas

    Unidad 4-Separaciones Cromatograficas Part 2

    Cargado por

    Jair Oñate
    Este documento describe los principios básicos de la cromatografía, un método para separar los componentes de una mezcla compleja. Explica que la cromatografía involucra una fase móvil y una fase estacionaria, y que los componentes se separan según su interacción diferencial con estas fases. También clasifica los diferentes tipos de cromatografía, como la cromatografía de columna y de placa, y discute conceptos clave como los tiempos de retención, la eficiencia de la columna y la resolución.

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd

    Unidad 4-Separaciones Cromatograficas Part 2

    Cargado por

    Jair Oñate
    140 vistas30 páginas
    Este documento describe los principios básicos de la cromatografía, un método para separar los componentes de una mezcla compleja. Explica que la cromatografía involucra una fase móvil y una fase estacionaria, y que los componentes se separan según su interacción diferencial con estas fases. También clasifica los diferentes tipos de cromatografía, como la cromatografía de columna y de placa, y discute conceptos clave como los tiempos de retención, la eficiencia de la columna y la resolución.

    Título original

    UNIDAD 4-SEPARACIONES CROMATOGRAFICAS PART 2

    Derechos de autor

    © © All Rights Reserved

    Formatos disponibles

    PDF, TXT o lea en línea desde Scribd

    ¿Le pareció útil este documento?

    ¿Este contenido es inapropiado?

    Este documento describe los principios básicos de la cromatografía, un método para separar los componentes de una mezcla compleja. Explica que la cromatografía involucra una fase móvil y una fase estacionaria, y que los componentes se separan según su interacción diferencial con estas fases. También clasifica los diferentes tipos de cromatografía, como la cromatografía de columna y de placa, y discute conceptos clave como los tiempos de retención, la eficiencia de la columna y la resolución.

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
    Descargar como pdf o txt
    140 vistas30 páginas

    Unidad 4-Separaciones Cromatograficas Part 2

    Cargado por

    Jair Oñate
    Este documento describe los principios básicos de la cromatografía, un método para separar los componentes de una mezcla compleja. Explica que la cromatografía involucra una fase móvil y una fase estacionaria, y que los componentes se separan según su interacción diferencial con estas fases. También clasifica los diferentes tipos de cromatografía, como la cromatografía de columna y de placa, y discute conceptos clave como los tiempos de retención, la eficiencia de la columna y la resolución.

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
    Descargar como pdf o txt
    Está en la página 1de 30

    SEPARACIONES

    CROMATOGRÁFICAS
    UNIDAD 4: MÉTODOS DE SEPARACIÓN
    Métodos de separación
    CROMATOGRAFÍA
    oSeparación, identificación y determinación de los componentes químicos de
    mezclas complejas
    oMétodo más poderoso y aplicable para la separación
    oExisten muchas variantes al método, pero todas coinciden en el uso de una fase
    móvil y una fase estacionaria.
    oLos componentes de una mezcla son llevados a través de la fase estacionaria
    por la fase móvil.
    oLa separación se basa en la diferencia de velocidades de migración entre los
    componentes de la fase móvil
    Clasificación
    •Cromatografía en columna
    • Fase estacionaria dentro de un tubo delgado

    • Fase móvil es forzada a través de un tubo por presión o gravedad

    •Cromatografía plana
    • Fase estacionaria sostenida sobre una placa

    • La fase móvil se mueve por la estacionaria por capilaridad o influencia de la gravedad


    Clasificación
    Cromatografías de columna
    Cromatografía de elusión de columna

    La disolución de la
    En el tiempo t0 los
    mezcla con los Movimiento del
    componentes se Elución – adición de una
    componentes A y B se eluyente hacia debajo
    distribuyen en la fase nueva fase móvil
    introduce por la cabeza de la columna
    móvil y estacionaria
    de la columna

    Mayor partición de la Partición simultanea de Separación de los


    fase móvil y estacionaria las fases en el sitio componentes en bandas
    ene l tiempo t1 original de la muestra o zonas
    Cromatografía
    de elusión de
    columna

    a) Diagrama que muestra la separación por


    cromatografía de elución en columna de una
    mezcla de los componentes A y B.
    b) La señal del detector en las diferentes etapas
    de la elución se muestra en a).
    Cromatogramas

    Perfiles de concentración
    de las bandas de los
    solutos A y B a dos
    diferentes tiempos en su
    migración hacia debajo de
    la columna
    Velocidades de migración de los solutos
    Depende de la velocidad a la que ambas especies son eluidas, que tan bien son determinadas por la
    concentración del soluto en cada fase
    Grado en que los solutos se distribuyen en las dos fases. Él equilibrio químico para una especie A está
    dado por:
    𝐴(𝑀ó𝑣𝑖𝑙) ↔ 𝐴(𝐸𝑠𝑡𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛𝑎𝑟𝑖𝑎)
    Donde la constante de equilibrio Kc:
    𝜎𝐴(𝑒𝑠𝑡𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛𝑎𝑟𝑖𝑎)
    𝐾𝑐 =
    𝜎𝐴(𝑚ó𝑣𝑖𝑙)
    𝜎𝐴(𝑒𝑠𝑡𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛𝑎𝑟𝑖𝑎) y 𝜎𝐴(𝑚𝑜𝑣𝑖𝑙) representa las actividades del soluto en cada fase.
    Normalmente se sustituye las actividades por las concentraciones analíticas:
    𝑐𝑠
    𝐾𝑐 =
    𝑐𝑚
    K constante de distribución
    Tiempos de retención
    •Tiempo muerto: tiempo que transcurre después de haber inyectado al muestra hasta la aparición de un pico.
    Proporciona una medida de la velocidad de migración promedio de la fase móvil y permite identificar los
    picos del analito
    Todos los componentes pasan por los menos por un tiempo muerto
    •Tiempo de retención: tiempo requerido para que la zona alcance el detector después de la inyección de la
    muestra
    •Ts: Tiempo de retención del analito en la fase estacionaria.
    •Los tiempos se relacionan de la siguiente manera:
    𝑡𝑅 = 𝑡𝑆 + 𝑡𝑀
    𝑡𝑅 es el tiempo de retención
    𝑡𝑆 es el tiempo de retención del analito en la fase estacionaria
    𝑡𝑀 es el tiempo muerto
    Velocidades de migración de los solutos
    •La velocidad lineal promedio de migración del soluto (cm/s):
    𝐿
    𝑣ҧ =
    𝑡𝑅
    L es la longitud de empacamiento de la columna

    •La velocidad lineal promedio u, de las moléculas de la fase móvil:


    𝐿
    𝑢=
    𝑡𝑀
    Velocidades de migración de los solutos
    Relación entre el flujo volumétrico y la velocidad del flujo lineal:
    El flujo de la fase móvil suele estar caracterizado por la velocidad del flujo volumétrico F.
    F está relacionada a la velocidad lineal en la salida de la columna uo por medio de la
    ecuación:
    𝐹 = 𝐴 ∙ 𝑢0 = 𝑢0 ∙ 𝜋𝑟 2
    A es el área transversal del tubo.
    Para una columna empacada:
    𝐹 = 𝑢0 ∙ 𝜋𝑟 2 ∙ 𝜀
    Donde 𝜀 es la fracción del volumen total de la columna que está disponible al líquido
    Velocidades de migración y constantes de
    distribución
    Para relacionar la velocidad de migración de un soluto con su constante de distribución, se
    expresa la velocidad como la fracción de la velocidad en la fase móvil:

    𝑣ҧ = 𝑢 × 𝑓𝑟𝑎𝑐𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒 𝑡𝑖𝑒𝑚𝑝𝑜 𝑞𝑢𝑒 𝑝𝑎𝑠𝑎𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 𝑝𝑜𝑟 𝑙𝑎 𝑓𝑎𝑠𝑒 𝑚ó𝑣𝑖𝑙

    𝑛𝑢𝑚. 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 𝑒𝑛 𝑙𝑎 𝑓𝑎𝑠𝑒 𝑚ó𝑣𝑖𝑙


    𝑣ҧ = 𝑢 ×
    𝑛𝑢𝑚. 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 𝑒𝑛 𝑙𝑎 𝑐𝑜𝑙𝑢𝑚𝑛𝑎
    El número de moles se obtiene de multiplicar la concentración molar por el volumen, por lo
    tanto:
    𝑐𝑀 𝑉𝑀 1
    𝑣ҧ = 𝑢 × =𝑢×
    𝑐𝑀 𝑉𝑀 + 𝑐𝑆 𝑉𝑠 1 + 𝑐𝑆 𝑉𝑠 /𝑐𝑀 𝑉𝑀
    Si sustituimos con la expresión de la constante de distribución:
    1
    𝑣ҧ = 𝑢 ×
    1 + 𝐾𝑐 𝑉𝑠 /𝑉𝑀
    Factor de retención k
    Permite comparar las velocidades de migración de los solutos en la columna. Por ejemplo, para el
    soluto A:
    𝑉𝑠
    𝑘𝐴 = 𝐾𝐴
    𝑉𝑀
    𝐾𝐴 es la constante de distribución del soluto A.

    Si reemplazamos esta ecuación en la anterior:


    1
    𝑣ҧ = 𝑢 ×
    1 + 𝑘𝐴
    Para calcular 𝑘𝐴 reemplazamos v y u:
    𝑡𝑅 − 𝑡𝑀 𝑡𝑆
    𝑘𝐴 = =
    𝑡𝑀 𝑡𝑀
    Factor de selectividad
    El factor de selectividad de una columna para los solutos A y B se define como:
    𝐾𝐵
    𝛼=
    𝐾𝐴
    𝐾𝐵 y 𝐾𝐴 son las constantes de distribución de las especies B y A respectivamente.
    𝛼 siempre es mayor que 1 porque la retención de la especie B es mayor que la de la especie A.
    Esta ecuación también puede escribirse:
    𝑘𝐵
    𝛼=
    𝑘𝐴
    Sustituyendo con la ecuación que relaciona los tiempos de retención:
    𝑡𝑅 𝐵 − 𝑡𝑀
    𝛼=
    𝑡𝑅 𝐴 − 𝑡𝑀
    Ejercicios
    •Una columna tubular abierta utilizada para cromatografía de gases tenía un diámetro interno de
    0.25 mm. Se utilizó una velocidad de flujo volumétrico de 0.95 mL/min. Encuentre la velocidad
    lineal del flujo en cm/s en la salida de la columna. R=32.31CM/S
    •Una columna empacada para cromatografía de gases tenía un diámetro interno de 5.0 mm. La
    velocidad del flujo volumétrico medida en la salida de la columna fue de 48.0 mL/min. Si la
    porosidad de la columna era de 0.43, ¿cuál era la velocidad lineal del flujo en cm/s? R=9.5cm/s
    •A partir de los siguientes datos, calcule para A, B, C y D: a) el factor de retención y b) la
    constante de distribución.
    Descripción cuantitativa de la eficiencia
    de una columna
    1. La altura del plato H
    2. El número de platos N
    Relacionados a través de la ecuación:
    𝐿
    𝑁=
    𝐻
    •Donde L es la longitud (generalmente en cm) del empacamiento de la columna
    •La eficiencia de las columnas aumenta a medida que el número de platos
    aumenta y la altura del plato se reduce
    Determinación del número de platos

    𝑡𝑅 2
    𝑁 = 16
    𝑊
    Variables que afectan la eficiencia
    Teoría del ensanchamiento de bandas
    La eficiencia de las columnas de la cromatografía capilar y de las columnas empacadas
    para cromatografía a bajas velocidades de flujo se puede aproximar por medio de la
    expresión:
    𝐵
    𝐻 = + 𝐶𝑠 𝑢 + 𝐶𝑀 𝑢
    𝑢
    Donde:
    H es la altura del plato en cm
    u es la velocidad lineal de la fase móvil en cm/s
    B es el coeficiente de difusión longitudinal
    𝐶𝑠 y 𝐶𝑀 son los coeficientes de transferencia de masa para las fases estacionaria y móvil
    Resolución de la columna
    Nos indica cuán separadas están dos bandas en
    relación con su anchura.
    La resolución proporciona una medida
    cuantitativa de la capacidad de la columna para
    separar dos analitos.

    ∆𝑍 2∆𝑍 2 𝑡𝑅 𝐵 − 𝑡𝑅 𝐴
    𝑅𝑆 = 𝑊𝐴 𝑊𝐵 =𝑊 =
    + 𝐴 +𝑊𝐵 𝑊𝐴 +𝑊𝐵
    2 𝐵
    Resolución de la columna
    Efecto del factor de retención y del factor de selectividad en la resolución

    𝑁 𝛼−1 𝑘𝐵
    𝑅𝑆 =
    4 𝛼 1 + 𝑘𝐵
    La ecuación anterior puede ser reordenada para encontrar el número de platos que se necesita para
    conseguir una resolución específica:
    2 1+𝑘 2
    𝛼 𝐵
    𝑁 = 16𝑅𝑆 2
    𝛼−1 𝑘𝐵
    Efecto de la resolución sobre el tiempo de retención

    16𝑅𝑆 2 𝐻 𝛼 2 1 + 𝑘𝐵 3
    𝑡𝑅 𝐵 =
    𝑢 𝛼−1 𝑘𝐵 2
    Ejemplo
    Las sustancias A y B tiene tiempos de retención de 16.40 y 17.63 min, respectivamente, en una
    columna de 30.0 cm. Una especie química no retenida pasa a través de la columna en 1.30 min.
    Los anchos de los picos (en la base) para A y B son de 1.11 y 1.21 min, respectivamente. Calcule
    a) la resolución de la columna
    b) el número de platos promedio en la columna
    c) la altura de plato
    d) la longitud de la columna necesaria para conseguir una resolución de 1.5
    e) el tiempo requerido para eluir la sustancia B en la columna que tiene un valor de Rs de 1.5

    𝑡𝑅𝐴 = 16.4 𝑚𝑖𝑛 𝐿 = 30 𝑐𝑚 𝑊𝐴 = 1.11 𝑚𝑖𝑛

    𝑡𝑅𝐵 = 17.63 𝑚𝑖𝑛 𝑡𝑀 = 1.3 𝑚𝑖𝑛 𝑊𝐵 = 1.21 𝑚𝑖𝑛


    a) la resolución de la columna

    2 𝑡𝑅 𝐵 − 𝑡𝑅 𝐴 2(17.63 − 16.4)
    𝑅𝑆 = = = 1.06
    𝑊𝐴 + 𝑊𝐵 1.11 + 1.21

    b) el número de platos promedio en la columna


    2 2
    𝑡𝑅 17.63
    𝑁 = 16 𝑁𝐵 = 16 = 3397
    𝑊 1.21
    2
    16.4 3493 + 3397
    𝑁𝐴 = 16 = 3493 𝑁𝑃𝑅𝑂𝑀𝐸𝐷𝐼𝑂 = = 3445
    1.11 2
    c) la altura de plato

    𝐿 𝐿 30 𝑐𝑚
    𝑁= →𝐻= = = 8.7 × 10−3 𝑐𝑚
    𝐻 𝑁 3445

    d) la longitud de la columna necesaria para conseguir una resolución de 1.5


    𝑁1 𝛼 − 1 𝑘𝐵
    𝑅𝑆−1 = 𝑅𝑆−1 = 𝑁1 1.06 = 3445
    4 𝛼 1 + 𝑘𝐵
    =
    𝑁2 𝛼 − 1 𝑘𝐵 𝑅𝑆−2 = 𝑁2 1.5 = 𝑁2
    𝑅𝑆−2 = 4 𝛼 1 + 𝑘𝐵
    2 𝐿
    𝑁2 = 3445 ∗
    1.5
    = 6899 𝑁 = → 𝐿 = 6899 ∗ 8.7 × 10−3 𝑐𝑚 = 60.02𝑐𝑚
    1.06 𝐻
    e) el tiempo requerido para eluir la sustancia B en la columna que tiene
    un valor de Rs de 1.5

    𝑡𝑅 𝐵−1 𝑅𝑆1 2 17.63 1.062


    = → =
    𝑡𝑅 𝐵−2 𝑅𝑆2 2 𝑡𝑅 𝐵−2 1.52

    2
    1.5
    𝑡𝑅 𝐵−2 = 17.63 ∗ = 35.3 𝑚𝑖𝑛
    1.06
    Técnicas de optimización
    Las ecuaciones están formadas por tres partes:
    • Ecuación que describen la eficiencia en términos de 𝑁 o H.

    • Término de selectividad α que depende de las propiedades de los solutos

    • Término de retención, que depende de las propiedades del soluto y la columna.

    La optimización se puede dar interviniendo en cualquiera de los tres factores de


    la ecuación.
    Técnicas de optimización
    1. Variación en la altura del plato
    La resolución de una columna mejora a media que la raíz cuadrada del número
    de platos aumenta.

    𝑁 𝛼−1 𝑘𝐵
    𝑅𝑆 =
    4 𝛼 1 + 𝑘𝐵

    **Reduciendo la altura del plato y no aumentando la altura de la columna


    Técnicas de optimización
    2. Variación en el factor de retención k
    El aumento de 𝑘𝐵 mejora la resolución de la
    columna. Paras encontrar intervalo optimo de
    𝑘𝐵 :
    𝑘𝐵 1 + 𝑘𝐵 3
    𝑅𝑆 = 𝑄 𝑡𝑅 𝐵 = 𝑄′
    1 + 𝑘𝐵 𝑘𝐵 2

    Donde Q y Q’ representan al resto de términos de


    las ecuaciones.
    Técnicas de optimización
    3. Variación en el factor de selectividad α

    Opciones disponibles para mejorar la selectividad

    a) Cambia la composición de la fase móvil

    b) Modificar la temperatura de la columna

    c) Variar la composición de la fase estacionaria

    d) Utilizar efectos químicos especiales


    Problema general de la elución
    Cambiar las condiciones de k mientras se da la
    separación

    • En cromatografía liquida se varia k cambiando la fase


    móvil (elución por gradiente o programación del
    disolvente)
    • La elución en condiciones en las que la composición de
    la fase móvil se mantiene constante se denomina
    elución isocrática.
    • Para la cromatografía de gases, se modifica la
    temperatura para producir cambios en k (programación
    de temperatura)

    También podría gustarte