Agar Cistina Lactosa Deficitario en Electrólitos

C.L.E.D.
63794
64364
AGAR CISTINA LACTOSA DEFICITARIO EN ELECTRÓLITOS PARA EL AISLAMIENTO
Y LA DIFERENCIACIÓN DE MICRORGANISMOS AISLADOS EN LA ORINA
2014/04
1- USO PREVISTO
El agar cistina lactosa deficitario en electrólitos (C.L.E.D.) es un medio que permite el aislamiento, la enumeración y la
diferenciación de microrganismos aislados de la orina.
2- PRINCIPIO
La diferenciación de las bacterias se basa en su capacidad de fermentar la lactosa. La fermentación de la lactosa induce
acidificación, produciendo la formación de colonias amarillas en presencia de azul bromotimol (indicador de pH).
El bajo contenido en electrólitos inhibe la invasión por Proteus.
3- CÓMO SE SUMINISTRA
 Medio listo para usar:
- caja de 20 placas de Petri (90 mm) (CLED) código 63794
 Medio deshidratado
- frasco de 500 g código 64364
4- COMPOSICIÓN TEÓRICA (g/l de agua destilada)

El medio C.L.E.D. se elabora de acuerdo con la fórmula descrita por Sandys G.H. (1) y modificada por Mackey J.P. y cols. (2)
Peptona 4
Extracto de carne 3
Producto digerido péptico de carne 4
L. cistina 0,128
Lactosa 10
Azul bromotimol 0,02
Agar 13
pH final 7,3  0.2
Preparación del medio:

Homogeneice el polvo contenido en el frasco.
Mezcle 34,2 gramos de medio deshidratado en un litro de agua destilada estéril hasta obtener una suspensión homogénea.
Caliente suavemente, agitando con frecuencia y luego caliente hasta hervir y que se consiga la disolución completa.
Esterilice a 121°C durante 15 minutos. Dispense en placas de Petri o frascos.
5- CONSERVACIÓN
 Medio listo para usar: a +2-8°C.
 Medio deshidratado: frasco cerrado herméticamente en un lugar seco a +15-25°C.
La fecha de caducidad y el número de lote están indicados en el envasado.
6- INSTRUCCIONES
Material:
 Material suministrado: Medio C.L.E.D.
Inoculación:
Inocule tomando directamente de la muestra a examinar (orina). Consúltense las recomendaciones actuales para la
conservación de muestras biológicas (2).
Incubación:
Incube durante 24 horas a 37°C.
1
Lectura:
 Lactosa (+): Colonias amarillas.
 Lactosa (-): colonias azul-verde.
El aspecto esperado de las colonias es el siguiente:

 E. coli: colonias amarillas, opacas, con un centro ligeramente más oscuro.
 Klebsiella: colonias amarillas, muy mucoides.
 Proteus: colonias azules, translúcidas, generalmente menores que las de E. coli.
 Pseudomonas aeruginosa: colonias verdes, con una superficie mate y contornos irregulares.
 Enterococcus faecalis: Colonias amarillas (0,5 mm).
 Staphylococcus aureus: Colonias amarillas oscuras.
 Staphylococci coagulasa negativos: colonias amarillo pálido, casi blancas.
 Lactobacillus: colonias grises muy pequeñas, con una superficie rugosa.
7- RENDIMIENTO / CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA

 Aspecto del medio: agar transparente verde
 Aspecto del medio deshidratado: polvo beige.
 Los rendimientos de crecimiento del medio C.L.E.D. se verifican con las siguientes cepas:
RESULTADO DEL CULTIVO DESPUÉS DE

CEPAS
24 horas a 37 °C
Escherichia coli ATCC 25922 Colonias amarillas
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Colonias amarillas
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 Colonias amarillas
Enterococcus faecalis var.zymogenes ATCC 29212 Colonias amarillas
Shigella sonnei ATCC 25931 Colonias azules
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Colonias azul-verde
8- CONTROL DE CALIDAD DEL FABRICANTE

Todos los reactivos fabricados se elaboran según nuestro sistema de calidad, que va desde la recepción de las materias
primas hasta la comercialización final del producto. Cada lote se somete a valoraciones de control de calidad y sale al mercado
sólo cuando está de acuerdo con los criterios de aceptación predefinidos. Los registros relativos a la producción y al control de
cada lote se conservan en Bio-Rad.
9- LÍMITES DE USO
 Deben realizarse pruebas complementarias para identificar la especie de la cepa aislada.
 El medio C.L.E.D. es un medio no selectivo. Sin embargo, el crecimiento de Shigella puede inhibirse debido al bajo
contenido en electrólitos.
10- BIBLIOGRAFÍA
1. SANDYS G.H. 1960. A new method of preventing swarming of Proteus spp. with a description of a new medium suitable
for use in routine laboratory practice. J. Med. Lab. Technol. 17 : 224.
2. MACKEY, J.P., SANDYS, G.H. 1965. Diagnosis of of urinary tract. Br. Med J. 1 : 1173.
3. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
Bio-Rad
3, boulevard Raymond Poincare
92430 Marnes-la-Coquette - France
Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00
Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33 2014/04
www.bio-rad.com

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Preparación del medio:

El aspecto esperado de las colonias es el siguiente:

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