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    Agar Triptonada

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    Jerry Ivan Ponce Lanchipa
    Este documento describe un medio selectivo para la detección y enumeración de Escherichia coli en alimentos llamado Agar TBX Cromogénico. El medio contiene un agente cromogénico que permite identificar fácilmente las colonias de E. coli de color azul verdoso, gracias a la enzima glucuronidasa que poseen. El medio cumple con las regulaciones ISO 11133 e ISO 16649 para el recuento de E. coli en productos alimenticios.

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    Este documento describe un medio selectivo para la detección y enumeración de Escherichia coli en alimentos llamado Agar TBX Cromogénico. El medio contiene un agente cromogénico que permite identificar fácilmente las colonias de E. coli de color azul verdoso, gracias a la enzima glucuronidasa que poseen. El medio cumple con las regulaciones ISO 11133 e ISO 16649 para el recuento de E. coli en productos alimenticios.

    Descripción original:

    undac

    Título original

    agar triptonada

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    Agar TBX Cromogénico (Triptona Bilis X-Glucurónido) ISO Cat.

    1151
    Medio selectivo para la detección y enumeración de Escherichia coli en alimentos.

    Información práctica
    Aplicaciones Categorias
    Recuento selectivo Escherichia coli
    Detección Escherichia coli

    Industria: Alimentación

    Regulaciones: ISO 11133 / ISO 16649


     

    Principios y usos
    Agar TBX Cromogénico (Triptona Bilis X-Glucurónido) se basa en el medio Agar Triptona Sales Biliares, utilizado para detectar y enumerar E. coli en
    alimentos, con la adición de un agente cromogénico, x-ß-D-Glucuronide, para detectar la presencia de la enzima glucuronidasa, que es altamente
    específico para E. coli.

    El cromóforo liberado en TBX Agar está coloreado y las colonias diana se identifican fácilmente. E. coli absorbe el agente cromogénico
    x-ß-D-glucurónido, y la actividad de la enzima glucuronidasa intracelular rompe el enlace entre el cromóforo y el glucurónido. El cromóforo liberado se
    colorea y se acumula dentro de las células, lo que hace que las colonias de E. coli sean de color azul verdoso.

    La peptona de caseína proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. Las sales biliares son inhibidores de
    otros organismos Gram-positivos y suprimen las bacterias coliformes. El agar bacteriológico es el agente solidificante.

    ISO 16649 especifica un método horizontal para la enumeración de E. coli ß-glucuronidasa positiva en productos destinados al consumo humano o para
    la alimentación de animales.

    Las colonias negativas de b-ß-glucuronidasa de E. coli son incoloras, p.ej. E. coli O157: H7. Las altas temperaturas (44 ° C) inhiben el crecimiento de E.
    coli O157: H7.
     

    Fórmula en g/L
    Digerido enzimático de caseína 20 Agar bacteriológico 15
    Sales biliares N° 3 1,5 Ácido 5-bromo-4-cloro-3-indolil-ß-D-glucurónico 0,075
    Dimetil sulfóxido 0,003
     

    Preparación
    Suspender 36,6 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta
    disolver por completo. Esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 45-50ºC, mezclar bien y dispensar en placas.
     

    Instrucciones de uso
    Enumeración de Escherichia coli beta-glucuronidasa positivo de acuerdo a ISO 16649:
    - Inocular el agar TBX ya sea por el método de siembra en profundidad, siembra en superficie o bien por el método de filtración por membrana.
    - El método de filtración por membrana y la enumeración por el método más probable necesita una etapa previa de resucitación en Agar o Caldo
    Minerales Glutamato Modificado MMGA o MMGB (Cat. 1365).
    - Incubar las placas de agar TBX 21 horas a la temperatura de 44 ºC.
    - Calcular el número de colonias de Escherichia coli ß-glucuronidasa positivas a partir del número de colonias azúles típicas.
     

    Control de calidad
    Solubilidad Apariencia Color del medio deshidratado Color del medio preparado Final pH (25ºC)
    Sin restos Polvo fino Beige Ámbar ligeramente opalescente 7,2 ± 0,2

    Inspired by knowledge Página 1 de 2 - Nº revisión 1 - Fecha 05/06/2019 www.condalab.com


     

    Test microbiológico
    De acuerdo a ISO 11133:
    Condiciones de incubación: (44±1 ºC / 21±3 h).
    Condiciones de inoculación: Productividad cuantitativa (100± Min. 50 CFU) / Productividad cualitativa (10^3-10^4 CFU) / Selectividad (10^4-10^6 CFU) /
    Especificidad (10^3-10^4 CFU).
    Medio de referencia: TSA.

    Microrganismos Especificación Reacción característica


    Enterococcus faecalis ATCC 19433 Inhibición total (0)
    Escherichia coli ATCC 25922 Buen crecimiento (2) >50% Colonias azules
    Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Colonias blancas a beige verdosas
    Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inhibición total (0)
    Citrobacter freundii ATCC 43864 Colonias blancas a beige verdosas
    Escherichia coli ATCC 8739 Buen crecimiento (2) >50% Colonias azules
    Escherichia coli CECT 9153 Buen crecimiento (2) >50% Colonias azules
     

    Almacenamiento
    Temp. Min.:2 ºC
    Temp. Max.:25 ºC
     

    Bibliografía
    International standard ISO 16649: Microbiology of food animal feeding stuffs. Horizontal method for the enumeration of presumptive ß-glucuronidase
    –positive.

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