Lab 5 Células Sanguineas

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LABORATORIO 5 FISIOLOGÍA ANIMAL

OSMOSIS Y CÉLULAS SANGUINEAS


MILEIDY BETANCOURTH-CUNDAR

Las células sanguíneas son componentes vitales de la sangre que desempeñan funciones cruciales en el
transporte de oxígeno, eliminación de desechos, defensa inmunológica y coagulación. La sangre está
compuesta por diferentes tipos de células sanguíneas, cada una con características estructurales y funciones
específicas. En esta práctica, exploraremos los distintos tipos de células sanguíneas y sus características
morfológicas, así como sus roles funcionales en el organismo. Adicionalmente, exploraremos el fenómeno de
la osmosis en las células sanguíneas, investigando cómo se ve afectada la función celular en diferentes
condiciones osmóticas.
Objetivos:

• Explorar los efectos de las soluciones hipotónicas, hipertónicas e isotónicas en las células sanguíneas.
• Identificar y describir los principales tipos de células sanguíneas presentes en la sangre humana,
incluyendo los eritrocitos, leucocitos y plaquetas.
• Comprender la estructura y función de los eritrocitos, las células sanguíneas responsables del
transporte de oxígeno y dióxido de carbono.
• Explorar los diferentes tipos de leucocitos y su papel en el sistema inmunológico, incluyendo los
neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos.
• Investigar la función de las plaquetas en la coagulación sanguínea y la formación de coágulos.
• Observar muestras de sangre en microscopio para identificar y diferenciar los distintos tipos de células
sanguíneas.
• Analizar las características morfológicas de cada tipo de célula sanguínea y su relevancia fisiológica
en el organismo.
Parte I: Osmosis en células sanguíneas
Materiales:

• Solución hipotónica (por ejemplo, 0,3% de cloruro de sodio)


• Solución isotónica (por ejemplo, 0,9% de cloruro de sodio)
• Solución hipertónica (por ejemplo, 20% de cloruro de sodio)
• Células sanguíneas (preparadas previamente)
• Microscopio
• Pipetas
• Portaobjetos y cubreobjetos
Pasos:
1. Preparación de las soluciones osmóticas:
• Prepare las soluciones hipotónica, isotónica e hipertónica utilizando las concentraciones mencionadas
anteriormente. Solución hipertónica (20% de cloruro de sodio): Disuelva 20 gr de cloruro de sodio en
100ml de agua o 10 gr en 50 ml de agua.
• Solución isotónica (0,9% de cloruro de sodio)
• Solución hipotónica (0,3% de cloruro de sodio)
2. Obtención de una muestra de sangre:
• Lava tus manos y coloca un par de guantes de látex estériles.
• Realiza una punción en la yema del dedo utilizando una lanceta estéril.
• Transfiere una gota de la muestra de sangre al centro de un portaobjetos limpio
• Coloca un cubreobjetos con cuidado sobre la gota de sangre, evitando la formación de burbujas de
aire.
3. Observación microscópica inicial:

• Coloca el portaobjetos bajo el microscopio y ajusta el enfoque primero a 10X y luego a 40X
• Observa y registra la apariencia de los glóbulos rojos en su estado natural.
4. Aplicación de las soluciones osmóticas:

• Con una pipeta, añade una pequeña cantidad de solución hipotónica cerca de un borde del cubreobjetos,
asegurándote de que se extienda debajo del mismo.
• Realiza el mismo procedimiento con la solución isotónica y la solución hipertónica, utilizando áreas
diferentes del portaobjetos para cada solución.
5. Observación y registro de los cambios:

• Coloca nuevamente el portaobjetos bajo el microscopio y ajusta el enfoque.


• Observa y registra cualquier cambio en la forma, tamaño o apariencia de los glóbulos rojos en cada solución
osmótica.
• Repita el proceso de observación para cada muestra en un objetivo de 100x para obtener una imagen más
detallada.
Cuestionario
1. Realice un dibujo biológico de los montajes a 40X indicando el aumento total (3 dibujos) (1 punto)
2. Soporte sus observaciones a 10X, 40X y 100X con fotografías de las células para cada montaje (9
fotografías) (1 punto)
Responda brevemente (máximo 300 palabras) las siguientes preguntas: (1 punto)
3. ¿Qué función tiene la membrana celular? (0.2 puntos)
4. ¿Cómo afecta la concentración de una solución externa a las células? (0.2 puntos)
5. ¿Cuál fue el efecto de la solución hipotónica en las células de cebolla? (0.2 puntos)
6. ¿Cuál fue el efecto de la solución isotónica en las células de cebolla? (0.2 puntos)
7. ¿Cuál fue el efecto de la solución hipertónica en las células de cebolla? (0.2 puntos)

Parte II: Células sanguíneas de vertebrados


Dentro de la extraordinaria complejidad que presenta la estructura y funcionalidad en los animales nos
encontraremos con elevados niveles de especialización asociados a una gran diversidad celular y de tejidos.
Podemos clasificar cinco tipos de tejidos animales: epitelial, sanguíneo, muscular, nervioso, conectivo, etc. El
tejido conectivo está formado por células de diferente tipo (fibroblastos, adipocitos, macrófagos, fibras de
colágeno, etc.) inmersas en una abundante matriz en donde predominan los compuestos sulfatados. Forma
parte de huesos, cartílagos, tendones, ligamentos, de las cubiertas de la mayor parte de los órganos internos y
de la sangre. La sangre humana está compuesta de plasma (55%) y elementos celulares (45%). El plasma está
constituido por agua, iones, proteínas plasmáticas y sustancias transportadas por la sangre, y los elementos
celulares son los eritrocitos, leucocitos y las plaquetas.
• Eritrocitos (glóbulos rojos): su principal función es transportar oxígeno y dióxido de carbono, en
mamíferos son anucleados.

• Leucocitos (glóbulos blancos): constituyen la principal defensa del organismo. Se dividen en:
- Granulocitos: con núcleo multilobulado o segmentado e incluyen:
a) Neutrófilos: principal sistema de defensa del organismo que participan en la destrucción de
agentes infecciosos, mediante la producción de toxinas y/o fagocitosis. Aproximadamente
son el 70 % de los leucocitos.
b) Basófilos: secretan sustancias como la heparina con propiedades anticoagulantes y la
histamina que estimula el proceso de inflamación.
c) Eusinófilos: se activan y aumenta su número en infecciones y alergias.
- Agranulocitos: Núcleo redondo u oval no segmentado. Son mononucleares. Los dos están asociados
con el sistema inmunológico. Son producidos en el tejido linfoide del bazo, el timo y los ganglios
linfáticos.
a) Monocitos: Núcleo de mayor tamaño, en forma de herradura, de riñón o de fríjol, son los
leucocitos más grandes, y aumentan en caso de infección
b) Linfocitos: Son células destructoras, principalmente cuando ocurren infecciones agudas.

• Plaquetas (trombocitos): su función principal es la coagulación de la sangre. Las plaquetas tienen un


tamaño mucho más pequeño que el resto de las células sanguíneas. Se aglutinan en el orificio de un vaso
sanguíneo formando un coágulo, o trombo, que detiene la hemorragia.
Algunas claves para identificación (Figura 1):
- Neutrófilos (60-70 %): tienen un diámetro de 12 a 15 μm y un núcleo dividido en 3 o 5 lóbulos
- Linfocitos (25- 30%): tienen un diámetro de 5 a 8 μm y el núcleo ocupa la mayor parte de la célula.
- Monocitos (5-10%): tienen un diámetro de 12 a 18 μm y el núcleo tiene forma arriñonada y abundante
citoplasma.
- Eusinófilos (1-4%): tienen un diámetro de 12 a 15 μm y un núcleo con dos lóbulos unidos por cromatina
- Basófilos (0.5 %): tienen un diámetro de 12 a 15 μm y un núcleo bilobulado en forma de “S”

Figura 1: A. Esquema de los tipos de células sanguíneas. B. Montaje de células sanguíneas observadas al
microscopio. Fuente: A. Burbano et al 2020. Manual de laboratorio de biología celular y molecular. Universidad
de Nariño. B. Alendes et al. 2013. Guía de Prácticas de Laboratorio Biología General. Universidad Peruana de
Ciencias Aplicadas (UPC) https://repositorioacademico.upc.edu.pe/handle/10757/271704
Procedimiento:
• Con una lanceta estéril pinchó el dedo pulgar de un estudiante para extraer una gota de sangre.
• Colocar una gota de sangre en el tercio externo de una lámina portaobjetos limpia y seca siguiendo el
método de cuña (Figura 2)
• Con otra lámina portaobjeto y en posición adecuada (ángulo de 45°) hacer contacto con la gota de sangre,
tratando de que ésta se extienda a lo largo de la arista de contacto.
• Realizar un frotis rápido y uniforme
• Fijar a temperatura ambiente por 10 minutos
• Cubrir el preparado con el colorante Giemsa, agregando seguidamente el doble volumen de agua destilada.
• Colorear 15 minutos
• Lavar al chorro, secar y observar a 40 X y 100 X. No olvide usar el aceite de inmersión.
• A partir del montaje realizado diferencie los tipos de glóbulos blancos y demás células sanguíneas
observadas en la muestra. Emplee la información proporcionada en las imágenes de la guía de laboratorio.

Figura 2. Técnica en cuña para realizar el frotis de sangre periférica. A. Ángulo correcto al sostener el frotis
extensor. B. La sangre se extiende en toda la super cie de contacto entre los portaobjetos. C. Frotis en cuña
completado. Fuente: Carr and Rodak, 2014. Atlas de Hematología Clínica. Cuarta edición. Editorial Médica
Panamericana.
1. Realice los dibujos 40X de las diferentes muestras, señalando las células que los conforman y los
componentes celulares que alcance a diferenciar en cada célula. Acompañe sus ilustraciones de
fotografías. (1 punto).
2. Elabore un cuadro sinóptico de los diferentes tipos de células sanguíneas y de los tipos de glóbulos blancos
describiendo su función. Consulte información adicional, no sólo la incluida en la guía (1 punto).

Responder el cuestionario y enviar hasta el viernes 19 de mayo a las 6:00 pm por MTeams

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