Cuestionario de Examen 3

CUESTIONARIO DE EXAMEN
LABORATORIO CLÍNICO N° III
1. ¿En qué consiste el control de calidad en microbiología?
El control de calidad de los métodos tintoriales es importante, ya que así se

asegura que la preparación de la muestra haya sido adecuada, por lo que se
recomienda realizar al mismo tiempo de la evaluación de la muestra clínica, la
tinción de un agente infeccioso ya identificado mediante esa tinción, el cual
funcionará como un control positivo.
Algunas técnicas tintoriales como Gram o Ziehl-Neelsen requieren antes de su
proceso la fijación de las muestras, con la finalidad de preservar la arquitectura
estructural y química de las células.
Existen dos tipos de fijadores: físicos y químicos. Entre los procesos de fijación
físicos se tienen los siguientes: desecación, calor seco, calor húmedo,
ultrasonido y microondas, mientras que los procesos de fijación químicos se
pueden clasificar como oxidantes y reductores, de acuerdo con sus
propiedades químicas.
Entre los agentes químicos oxidantes se encuentran: óxido crómico, ácido
acético, ácido pícrico, acetona, dicromato de potasio. Los agentes químicos
reductores son: formaldehído, glutaraldehído, etanol, metanol, paraldehído,
etcétera.
Quizá el método físico con mayor utilización en microbiología es el calor seco,

que consiste en exponer directamente la laminilla a la flama del mechero, con
esto se logra detener los procesos vitales de las células y los microorganismos.
Sin embargo, la sobreexposición, o la exposición en una zona incorrecta de la
flama (zona fría, zona caliente y zona de fusión) repercutirán en el efecto
deseado; es muy común provocar alteraciones morfológicas y destrucción
celular.
2. ¿En qué consiste la técnica de tinción de Gram?

La tinción de Gram se basa en colocar como colorante primario cristal violeta,
el cual tiene afinidad con el peptidoglicano de la pared bacteriana.
Posteriormente, se coloca lugol, el cual sirve como mordiente e impide la salida
del cristal violeta por la formación de un complejo cristal violetayodo que
satura los espacios del peptidoglicano de la pared bacteriana. En seguida, se
coloca una mezcla de alcohol-acetona, la cual deshidrata la pared bacteriana y
cierra los poros de la misma, también destruye la membrana externa de las
bacterias Gram negativas debido a que ésta es soluble a la acción de solventes
orgánicos, como la mezcla de alcoholacetona.
Las bacterias Gram positivas, al contener una gran cantidad de peptidoglicano,

retienen con mayor fuerza este complejo, mientras que las Gram negativas no
lo pueden retener por tener menos cantidad de peptidoglicano. Por último, se
coloca safranina, la cual funciona como un colorante secundario o de
contratinción y sirve para teñir las bacterias que no pudieron retener el
complejo cristal violeta-yodo.
3. Explique la técnica de tinción de Ziehl-Neelsen.
La tinción se basa en colocar carbol-fucsina y calentar la preparación

ligeramente para solubilizar las ceras, lípidos y otros ácidos grasos de la pared
celular para que permita el paso libre del colorante, el cual tiene una enorme
afinidad por los ácidos micólicos presentes en la pared. Al enfriar con agua, los
componentes de la pared vuelven a solidificar, resistiendo la acción abrasiva
del alcohol-ácido, y el azul de metileno se utiliza como contratinción. Las
muestras clínicas útiles para su uso son múltiples, como el líquido
cefalorraquídeo, líquido pleural, líquido sinovial, líquido pericárdico, biopsias
para cultivo, abscesos, aspirados, crecimiento de colonias aisladas en medios
de cultivo, expectoraciones, aspirados endotraqueales y lavados
bronquioalveolares. Una tinción positiva es aquélla en la que se observan
bacilos ácido-alcohol resistentes, los cuales son de color rojo fucsia.
4. ¿En qué condiciones resulta adecuado el uso de la técnica de tinción de azul

algodón de lactofenol?
El examen microscópico es de gran importancia en micología para la

observación de las diferentes especies de hongos de interés clínico. Se deben
utilizar tinciones que logren preservar la integridad de las estructuras fúngicas.
Para la correcta identificación de hongos de interés clínico, ya sea con fines de
diagnóstico o estudios taxonómicos, es necesario observar las estructuras
fúngicas con una alta calidad y contraste; para ello se utilizan diversos
compuestos químicos que permitan la tinción entre la pared y el citoplasma de
las células fúngicas. La tinción de azul algodón de lactofenol no es considerada
una tinción diferencial, sin embargo, posee características tintoriales que
permiten observar cada uno de los componentes fúngicos y apreciar fácilmente
las estructuras para una adecuada identificación.
El fenol inactiva las enzimas líticas de la célula e impide que ésta se rompa; de
igual forma, destruye la flora acompañante e inactiva a la célula, quitándole el
grado de patogenicidad; además, actúa como mordiente cuando se usa en
combinación con colorantes. El ácido láctico preserva las estructuras fúngicas al
provocar un cambio de gradiente osmótico con relación al interior fúngico, lo
que genera una película protectora. El azul de algodón es un colorante ácido, que
tiñe el citoplasma y la quitina presente en las células fúngicas, mientras que el
glicerol mantiene húmeda la preparación.
5. ¿Cómo se realiza el recuento de plaquetas?
El recuento de plaquetas se realiza directamente en un microscopio de

contraste de fases, previa lisis de los hematíes, o también se puede observar en
un microscopio convencional.
RECUENTO EN CÁMARA
MATERIALES
• Hemocitómetro o cámara de Neubauer
• Solución de procaína
• Pipetas automáticas de 100 a 1000 mL y 0 a 100 mL.
• Cámara húmeda.
• Tubos de plástico de 12 x 75.
• Microscopio convencional.
MÉTODO:
• Mezclar bien la muestra de sangre obtenida con EDTA.

• Hacer una dilución de 20 uL de sangre total con 380 uL de solución de
procaína en un tubo de plástico de 12 x 75 (dilución 1/20).
• Dejar en reposo por 15 minutos en una gradilla.
• De esta dilución, llenar en cámara de Neubauer.
• Dejar en reposo por 15 minutos en cámara húmeda
• Enfocar con objetivo de 45x y contar las plaquetas en el retículo central de
1mm2 cuadrado.
• Calcular el número total de plaquetas según la fórmula que se lee a
continuación:
6. ¿Qué es un leucograma y cuáles son los criterios para su desarrollo?
El leucograma es una parte del examen de sangre que consiste en evaluar los
leucocitos, también conocidos como glóbulos blancos, los cuales son las células
responsables por la defensa del organismo. Este examen indica el número de
neutrófilos, en banda o segmentados, linfocitos, monocitos, eosinófilos y
basófilos presentes en la sangre.
CRITERIOS PARA EL DESARROLLO DE UN LEUCOGRAMA
• Se considera leucocitosis cuando la cifra de glóbulos blancos excede de 10

000.
• Se considera leucopenia cuando la cifra de glóbulos blancos es inferior a

5 000.
• No olvidar que el ejercicio produce leucocitosis fisiológica de

consideración, de allí que el recuento debe hacerse en condiciones
basales.
• En los granulocitos debe informarse el número de lobulaciones del

núcleo. A mayor edad de la célula mayor el número de lóbulos y lo
contrario.
7. Mencione las principales alteraciones eritrocitarias.
• PRONORMOBLASTO
• NORMOBLASTO BASÓFILO
• NORMOBLASTO POLICROMATÓFILO
• NORMOBLASTO ORTOCROMÁTICO
• RETICULOCITOS
• NORMOCITOS O HEMATÍES
8. ¿Qué tipo de inclusiones se consideran anormales?
Punteado basófilo: Son gránulos basófilos presentes en el citoplasma de los

hematíes. Puede tratarse de un reticulocito por su elevado contenido de ARN.
Se encuentra en una intoxicación por plomo llamada saturnismo.
Cuerpos de Heinz: Son formaciones redondeadas de hasta 3m de diámetro
localizadas habitualmente en la periferia de la célula. Se observan con
colorantes para reticulocitos. Estos cuerpos son abundantes en sujetos
esplenectomizados.
Anillos de Cabot: Se cree que sean restos de membrana nuclear eritroblástica o
restos después de una mitosis anormal. Se observan en forma de anillo u ocho
invertido. Pueden ser precipitados de ARN o proteína carente de importancia
diagnóstica.
Cuerpos de Howel-Jolly : Son restos de cromatina nuclear, resultados de la
pérdida del núcleo por parte del normoblasto ortocromático hasta la
conversión del hematíe. Se les considera signos de regeneración celular.
Se observan en pacientes esplenectomizados.
Siderocitos : Son hematíes con contenido de hierro libre no hemoglobínico de

color verde azulado.
Gránulos de Shuffner: Son gránulos que presentan algunos hematíes en caso de
parasitismo por plasmodium vivax.
Gránulos de Maurer: Son gránulos de color violeta oscuro que se encuentran en
pacientes con parasitismo por plasmodium falciparum.
Granulacion azurófila: Son pequeñas granulaciones eritrocitarias color violeta
púrpura y corresponden a restos de normoblastos ortocromáticos producto de
la cariorrexis y del paso de un elemento inmaduro a otro maduro. Se observa
tanto en síndromes diseritropoyéticos congénitos o adquiridos.

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1. ¿En qué consiste el control de calidad en microbiología?

El control de calidad de los métodos tintoriales es importante, ya que así se

Quizá el método físico con mayor utilización en microbiología es el calor seco,

2. ¿En qué consiste la técnica de tinción de Gram?

Las bacterias Gram positivas, al contener una gran cantidad de peptidoglicano,

3. Explique la técnica de tinción de Ziehl-Neelsen.

La tinción se basa en colocar carbol-fucsina y calentar la preparación

4. ¿En qué condiciones resulta adecuado el uso de la técnica de tinción de azul

El examen microscópico es de gran importancia en micología para la

5. ¿Cómo se realiza el recuento de plaquetas?

El recuento de plaquetas se realiza directamente en un microscopio de

• Mezclar bien la muestra de sangre obtenida con EDTA.

CRITERIOS PARA EL DESARROLLO DE UN LEUCOGRAMA

• Se considera leucocitosis cuando la cifra de glóbulos blancos excede de 10

• Se considera leucopenia cuando la cifra de glóbulos blancos es inferior a

• No olvidar que el ejercicio produce leucocitosis fisiológica de

• En los granulocitos debe informarse el número de lobulaciones del

7. Mencione las principales alteraciones eritrocitarias.

8. ¿Qué tipo de inclusiones se consideran anormales?

Punteado basófilo: Son gránulos basófilos presentes en el citoplasma de los

Siderocitos : Son hematíes con contenido de hierro libre no hemoglobínico de

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