TEMA:

Antibiograma
Generalidades:
Método de susceptibilidad in vitro, consiste en enfrentar un inóculo bacteriano a concentraciones de
antibiótico.
● Sensible

● Intermedio

● Resistente
Objetivos
Sirve para la orientación y elección de tratamiento de acuerdo al agente etiológico.
Monitorizar la evolución de la resistencia bacteriana, evaluando el espectro antimicrobiano.
Métodos de
sensibilidad
antibiótica

Difusión y
Difusión Dilución
dilución

Disco Difusión
o KYBBY Tubo o placa E-test
BAUER

Agar

Antibiograma Disco Difusión o KYBBY BAUER

CRITERIOS PARA EL CONTENIDO Y USO DE BATERÍAS DE ANTIMICROBIANOS
Identificación del microorganismo o grupo: los antimicrobianos a los que el
microorganismo es intrínsecamente resistente se excluyen de la rutina de la batería.

Por ejemplo, la vancomicina no se usa para bacilos gramnegativos.

Patrones de resistencia adquiridos frecuentes en la microbiota local: si la resistencia
a un agente determinado es frecuente, la utilidad del agente puede presentar limitaciones
suficientes como para que no se justifique la realización de pruebas de rutina y solo los
antimicrobianos más potentes se incluyen en la batería de prueba.

A la inversa, puede que no sea necesario que los agentes más potentes integren la
batería de prueba si la sensibilidad a agentes menos potentes es frecuente.
Método de prueba de sensibilidad a antimicrobianos usados: en función del método
de prueba, algunos agentes no detectan la resistencia de forma confiable, y no deben
incluirse en la batería. Por ejemplo, la resistencia de Streptococcus Pneumoniae a la
cefotaxima no puede detectarse por difusión con discos, por lo que no debe formar parte
de una batería de prueba con discos.
Localización de la infección: los agentes antimicrobianos, como nitrofurantoína, que
solo alcanzan niveles efectivos en el aparato urinario, no deben incluirse en baterías
probadas contra aislamientos bacterianos provenientes de otros sitios del cuerpo (es
decir, deben ser capaces de lograr la aproximación anatómica).
 Disponibilidad de los agentes antimicrobianos: las baterías de prueba de agentes
antimicrobianos se seleccionan por su capacidad de detectar resistencia bacteriana a
agentes utilizados por el personal médico al que presta servicios el laboratorio.

Los antibioticos han sido distribuidos para este efecto en dos grupos:
Grupo 1:
En este grupo se encuentran los antibioticos de base indispensables para orientar el tratamiento de las diferentes infe

Grupo 2:
Este grupo reune antibioticos complementarios cuya inclusion en el antibiograma y reporte es de caracter OPCIONA

INOCULACION
Procedimento:
Metodo directo de inoculacion a partir de colonias aisladas
1.
De una placa de cultivo con agar no selectivo e incubada por 18 - 24 h, seleccionar colonias aisladas y preparar una sus
2. La suspension debe ser inmediatamente ajustada a la escala 0,5 de Mc. Farland.
Inoculacion de las Placas

Dentro de los 15 minutos siguientes al ajuste de la turbidez del inoculo, sumergir un hisopo esteril en la suspension, rotar el his

Inocular la superficie seca de la placa de Mueller Hinton, estriando con el hisopo en tres direcciones para asegurar una distribu

APLICACION DE LOS DISCOS

Colocar los discos individuales o multidiscos sobre la superficie del agar con la ayuda de una pinza esteril o la punta de una ag

Distribuir los discos uniformemente, de modo que esten a una distancia minima de 25 mm uno del otro (el diametro de los disc

INCUBACION
Incubar lar placas en posicion invertida a 35°C dentro de los 15 minutos posteriores a la aplicacion de los discos.
Las placas de Haemophilus spp y Streptococcus spp, deben ser incubadas en atmosfera del 5% de CO 2.

Despues del tiempo recomendado de incubacion (Anexo B) examinar cada placa y medir los diametros de los halos de inhibici
 ANTIBIOGRAMA PARA Staphylococcus spp
MEDIO DE CULTIVO
Agar Mueller Hinton
INOCULO

Suspension directa de la colonia en caldo Mueller Hinton o solucion salina al 0.9 % a partir de un cultivo en agar no se

DISCOS DE SENSIBILIDAD ANTIBIOTICA A INCLUIR EN EL ANTIBIOGRAMA

Grupo I:
1. 4.3.1.1 Oxacilina
2. 4.3.1.2 Penicilina
3. 4.3.1.3 Eritromicina
4. 4.3.1.4 Clindamicina
5. 4.3.1.5 Trimetoprim/Sulfametoxazol
6. 4.3.1.6 Vancomicina
7. 4.3.1.7 Gentamicina
8. 4.3.1.8 Ciprofloxacina
4.3.2 Grupo II:
1. 4.3.2.1 Cloramfenicol.
2. 4.3.2.2 Rifampicina.
3. 4.3.2.3 Tetraciclina.
4. 4.3.2.4 Teicoplanina
5. 4.3.2.5 Nitrofurantoina (1)
6. 4.3.2.6 Norfloxacina(1)
(1)
Disco utilizado exclusivamente en cepas provenientes de infecciones de las vias urinarias
4.3.3 Resistencias Naturales
1.
Los estafilococos son resistentes a Acido Nalidixico, Acido Pipemidico y Aztreonam
2. Staphylococcus saprophyticus es resistente a Fosfomicina y
Novobiocina
3. Staphylococcus cohnii y Staphylococcus xylosus son resistentes a Novobiocina y a Lincomicina
 ANTIBIOGRAMA DE Streptococcus spp
1. MEDIO DE CULTIVO
Agar Mueller Hinton con 5% sangre de carnero.
NOTA: No aplicar mas de 9 discos en las placas de 150 mm, ni mas de 5 en las placas de 100 mm.
2. INOCULO
Suspension directa de la colonia (a partir de una placa de agar sangre de carnero incubada 16 – 18 horas). Ajustar a la t

DISCOS DE SENSIBILIDAD ANTIBIOTICA A INCLUIR EN EL ANTIBIOGRAMA

Grupo I:
● Ampicilina o Penicilina G (solo para Estreptococos betahemoliticos)

● Eritromicina
● Clindamicina

● Cefotaxima o Ceftriaxona

● Cloramfenicol
Grupo II:
● Levofloxacina (solo para estreptococos betahemoliticos)

● Ofloxacina (solo para estreptococos betahemoliticos)

● Cefepime

● Vancomicina

● Teicoplanina
Resistencias Naturales:
● Los Estreptococos son resistentes a Aztreonam y Pefloxacina.

● Los Estreptococos presentan una resistencia de bajo nivel a los Aminoglucosidos.

.
 ANTIBIOGRAMA DE Enterococcus spp.
MEDIO DE CULTIVO
Agar Mueller Hinton
INOCULO

Suspension directa de la colonia en caldo Mueller Hinton o solucion salina al 0.9 % a partir de un cultivo en agar no se

Grupo I:
1. 5.3.2.1 Ampicilina
2. 5.3.2.2 Gentamicina (disco con contenido de 120 mg)
3. 5.3.2.3 Estreptomicina (disco con contenido de 300 mg)
4. 5.3.2.4 Vancomicina
Grupo II:
1. 5.3.2.1 Teicoplanina
2. 5.3.2.2 Rifampicina
3. 5.3.2.3 Cloramfenicol
4. 5.3.2.4 Tetraciclina
5. 5.3.2.5 Eritromicina
6. 5.3.2.6 Nitrofurantoina (1)
7. 5.3.2.7 Norfloxacina(1)
8. 5.3.2.8 Ciprofloxacina(1)
9. 5.3.2.9 Levofloxacina(1)
(1)
Disco utilizado exclusivamente en cepas provenientes de infecciones de las vias urinarias
Resistencias Naturales
1. Los enterococos son resistentes a oxacilina, cefalosporinas,
Clindamicina, y Cotrimoxazol.
2.

Los enterococos presentan una resistencia de bajo nivel a los aminoglucosidos, lo cual no suprime la sinergia con los b

que si elimina el efecto sinergico.

3. Enterococcus gallinarum y Enterococcus casseliflavus son resistentes a los glicopeptidos.
 ANTIBIOGRAMA PARA Enterobacteriaceae
1. 8.1 MEDIO DE CULTIVO
Agar Mueller Hinton
2. 8.2 INOCULO
Metodo de crecimiento o suspension directa de la colonia. Ajustar a la turbidez equivalente al estandar 0,5 de la escala
8.3 DISCOS DE SENSIBILIDAD ANTIBIOTICA A INCLUIR EN EL ANTIBIOGRAMA
Grupo I:
1. 8.3.1.1 Ampicilina
2. 8.3.1.2 Cefalotina
3. 8.3.1.3 Ampicilina / Sulbactam o Amoxicilina / Acido Clavulanico.
4. 8.3.1.4 Cefuroxima
5. 8.3.1.5 Cefotaxima o Ceftriaxona
6. 8.3.1.6 Gentamicina
7. 8.3.1.7 Amikacina
8. 8.3.1.8 Acido Nalidixico (1)
9. 8.3.1.9 Norfloxacina(1)
10. 8.3.1.10 Ciprofloxacina
11. 8.3.1.11 Cotrimoxazol (Trimetoprim/Sulfametoxazol)
12. 8.3.1.12 Nitrofurantoina (1)
Grupo II:
1. 8.3.2.1 Cefoxitina
2. 8.3.2.2 Aztreonam
3. 8.3.2.3 Ceftazidima
4. 8.3.2.4 Cefixima
5. 8.3.2.5 Cefoperazona/Sulbactam
6. 8.3.2.6 Cefepime o Cefpirome
7. 8.3.2.7 Imipenem o Meropenem
8. 8.3.2.8 Cloramfenicol
9. 8.3.2.9 Ofloxacina (1)
(1)
Disco utilizado exclusivamente para infecciones de las vias urinarias.
Antibioticos a utilizar en el antibiograma de Salmonella spp y Shigella spp aisladas de coprocultivos:
1. 8.3.3.1 Ampicilina
2. 8.3.3.2 Cloramfenicol
3. 8.3.3.3 Cotrimoxazol (Trimetoprim/Sulfametoxazol)
4. 8.3.3.4 Ciprofloxacina
5. 8.3.3.5 Cefotaxima
8.3.4 Resistencias Naturales:
1.
Las enterobacterias son resistentes a Penicilina, Oxacilina, Macrolidos, Clindamicina y Glicopeptidos.
2. Klebsiella spp es resistente a las Aminopenicilinas.
3.
Citrobacter freundii, Enterobacter cloacae y Enterobacter aerogenes son resistentes a las Aminopenicilinas, Aminopeni

4.
Serratia marcescens es resistente a las Aminopenicilinas, Aminopenicilinas/Inhibidores de betalactamasas, Cefalospori
5. Proteus mirabilis es resistente a Nitrofurantoina.
6.
Proteus vulgaris es resistente a las Aminopenicilinas, Cefalosporinas de primera generacion, Cefuroxima y Nitrofurant
7.
Morganella morganii es resistente a las Aminopenicilinas, Aminopenicilinas/Inhibidores de betalactamasas, Cefalospo
8.
Providentia stuartii es resistente a las Aminopenicilinas, Aminopenicilinas/Inhibidores de betalactamasas, Cefalosporin

DETECCION DE LAS ENTEROBACTERIAS PRODUCTORAS DE “BETALACTAMASAS DE ESPECTRO EXTEN

Resistencia o sensibilidad intermedia ⇒ C1, C2, C3 y C4

Fox ⇒sensible
Test confirmatorio de la presencia de “betalactamasas de espectro extendido”
Este test requiere el uso de discos habituales de:
● Ceftazidima

● Cefotaxima
Asi como de:
● Ceftazidima/Acido Clavulanico

● Cefotaxima/Acido Clavulanico

Con los que se realiza un test de disco difusion sin ninguna variante.
Si los discos de Ceftazidima/Acido Clavulanico y Cefotaxima/Acido Clavulanico presentan
zonas de inhibicion superiores 5 mm
a aquellos producidos por los discos de Ceftazidima y Cefotaxima,
respectivamente, se considera el test como positivo.
Test confirmatorio de la presencia de “betalactamasas de espectro extendido” (segun el Comite de Antibiograma de la S
Este test requiere el uso de discos habituales de
● Amoxicilina/Acido Clavulanico

● Ceftazidima

● y/o Cefotaxima, Aztreonam, Ceftriaxona,

con los que se realiza un test de disco difusion sin ninguna variante.

Los discos de Ceftazidima, Aztreonam, Cefotaxima y Ceftriaxona se disponen a 30 mm del disco de Amoxicilina/Acido Clavu

Si una imagen de sinergia aparece entre el disco

Amoxicilina/Acido Clavulanico
y los discos de Ceftazidima y/o Aztreonam y/o Cefotaxima
y/o Ceftriaxona, se considera el test como positivo.
Reporte de antibiograma de las enterobacterias productoras de “betalactamasas de espectro extendido”:

Una vez detectadas las cepas productoras de estas “betalactamasas de espectro extendido” deben ser reportadas como resistente
ERITO INDUCE A CLINDA