Resumen de Micros
Resumen de Micros
Resumen de Micros
1. Sistema mecánico
2. Sistema óptico
3. Sistema de Iluminación
4. Accesorios
Sistema óptico
Objetivo
Ocular
Sistema iluminación
Condensador: Concentra el haz de luz sobre el plano del espécimen que se encuentra
en la platina.
Fuente de Luz
Diafragma o iris
Pie
Vástago o brazo
Tornillo de ajuste macro y micrométrico
Tubo ocular
Platina
Vernier
Subplatina
El revólver
Aumento total: Se debe notar que el ocular también tiene un aumento, por lo tanto el
aumento total de la imagen que se observa es el producto entre el aumento del
objetivo y el ocular. Ejemplo: si se tiene colocado el objetivo cuya escala de
reproducción es 40:1 y el ocular tiene un aumento de 10X, entonces el aumento total
será 40 x 10 = 400X.
MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA
La técnica más versátil y poderosa para la localización de proteínas dentro de una célula por
microscopía óptica es la emisión fluorescente de las células
Los fluorocromos:
Son sustancias que tienen la propiedad de emitir un fotón de una longitud de onda
determinada, son excitados y emiten luz (fluorescente) a una longitud de onda específica más
larga.
Las moléculas fluorescentes absorben luz de una dada longitud de onda y emiten luz de otra
longitud de onda, más larga.
Fluorescencia
1. Primer filtro de corte o filtro de excitación. Es el filtro que selecciona la luz de la longitud
de onda incidente que se va utilizar para excitar la muestra. En el esquema está seleccionando
la luz de longitud de onda entre 450 y 490 nm (azul).
3. Segundo filtro de barrera o filtro de emisión. Es el filtro que selecciona la luz de longitud de
onda fluorescente. En este caso deja pasar la luz de longitud de onda de 520 a 560 nm y
elimina la parte del espectro reflejado y permite visualizar el espectro de emisión
correspondiente al fluorocromo.
Inmunofluorescencia
Técnicas de Inmunofluorescencia
Microscopia Electrónica
El objeto de esta de técnica es la interacción de los electrones con la materia y la forma de
obtener información tanto estructural como de caracterización de defectos. Con el ME se
pueden obtener electrones acelerados con λ asociada bastante menor de 1 Å, las lentes
adecuadas se puede transformar los electrones difractados en la imagen real.
Un microscopio electrónico utiliza electrones en lugar de fotones o luz visible para formar
imágenes de objetos diminutos. Los microscopios electrónicos permiten alcanzar una
capacidad de aumento muy superior a los microscopios convencionales debido a que la
longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones "visibles". Para un
voltaje de 100 kV, la longitud de onda asociada a los electrones es 0.037 Å (0.01 Å para 1 MV)
FUNCIONAMIENTO
Partes y Funcionamiento
1. Cañón de electrones, que emite los electrones que chocan o atraviesan el espécimen
(dependiendo del microscopio electrónico), creando una imagen aumentada.
2. Lentes magnéticas para crear campos que dirigen y enfocan el haz de electrones, ya que las
lentes convencionales utilizadas en los microscopios ópticos no funcionan con los electrones.
3. Sistema de vacío es una parte muy importante del microscopio electrónico. Debido a que
los electrones pueden ser desviados por las moléculas del aire, se debe hacer un vacío casi
total en el interior de un microscopio de estas características.
- La necesidad de esto se debe a dos razones: primero, permitir una diferencia de voltaje
entre el cátodo y tierra sin que se produzca Voltaje de Aceleración (kV) un arco voltaico.
Segundo, reducir la frecuencia de las colisiones de los electrones con los átomos del aire a
niveles despreciables.
4. Placa fotográfica o pantalla fluorescente que se coloca detrás del objeto a visualizar para
registrar la imagen aumentada.
5. Sistema de registro que muestra la imagen que producen los electrones, que suele ser una
computadora.
1. Fijación primaria: Busca preservar la estructura del tejido vivo, evitando los procesos
autolíticos. Se realiza con glutaraldehido, cuya penetración es lenta, específicamente 1 mm
de tejido es atravesado en una hora por el glutaraldehido.
2. Lavado: normalmente se hace con un buffer que mantiene el pH fisiológico (7,2 a 7,4). Los
sistemas buffer más comunes son: fosfatos-collidine, tris-maleato y cacodylato.
3. Fijación secundaria: es llevada a cabo por la acción del tetróxido de osmio, el cual reacciona
principalmente con los lípidos. El tetróxido de osmio generalmente no penetra más de 0,5 mm
en una hora.
9. Inclusión de las muestras para TEM: las muestras se marcan con un trozo de papel
indicando algún tipo de convención que ilustre posteriormente su contenido.
10. Microtomía: los tejidos debidamente incluidos son cortados con el micrótomo,
dependiendo del tipo de micrótomo utiliza cuchillas de diamante o vidrio (la más común)
Un campo magnético permite enfocar los rayos catódicos (electrones) y obtener una imagen
tridimensional, para el examen de la superficie de las estructuras, permitiendo la observación
y la caracterización de materiales orgánicos e inorgánicos.
Resolución del Equipo: El SEM tiene un aumento de 20.000X y una resolución que puede
llegar a los 5nm 10nm y una profundidad de foco de 10 μm, mucho menor que el MET.
4. Corte: Algunos especímenes no ameritan ser rebanados, pues se observará la superficie del
mismo
7. contraste o recubrimiento con oro (sputter) o grafito: se utiliza oro, paladio o carbono para
permitir que el Caz de electrones primarios choquen contra la muestra recubierta con un
material conductor para que estas sean eléctricamente conductivas.
NIVELES DE ORGANIZACION
NIVEL ESTRUCTURAS
1. Sub-atómico Protones, electrones, neutrones
2. Atómico Átomos de importancia biológica, materia
inerte, materia viva
3. Molecular Monosacáridos, Aminoácidos, Nucleótidos,
etc…
4. Macromolecular Polisacáridos, proteínas, Ácidos Nucleicos,
Lípidos complejos, etc…
5. Prebiótico o Supramolecular Virus
6. Sub-celular Organelas: Mitocondrias, R. endoplasmatico,
Aparato de Golgi
7. Celular Células procariotas y eucariotas, individuos
unicelulares: (Bacterias, Algas, Levaduras,
Protozoos, etc…)
8. Tisular Tejidos: Conectivo, epitelial, Muscular, etc…
9. Órganos Corazón, pulmones, estomago, etc…
10. Sistema y Aparatos Sistema digestivo, Aparato circulatorio
11. Organismo o Individuo Individuos pluricelulares, Animales y
Vegetales Superiores
12. Población
13. Especie
14. Comunidad
15. Ecosistema
16. Biosfera
17. Universo
Prion
Son partículas no celulares, son proteínas que sin ser virus, tienen también características
patógenas e infecciosas. Los priones no son organismos vivos, son solo proteínas sin ácido
nucleico.
PLÁSMIDOS
Son pequeños fragmentos circulares de ADN, están presentes prácticamente en todas las células
bacterianas. Contienen de 2 a 30 genes. Algunos tienen la capacidad para incorporarse o salir del
cromosoma bacteriano.
VIRUS
Los virus son moléculas de ácidos nucleicos, ADN o ARN, que están envueltas por una estructura
protectora formada por proteínas.
El proceso de formación de nuevos virus se llama replicación viral. El virus invade a la célula e
introduce su ADN o ARN en su núcleo, anulando la información genética celular contenido en el
mismo y la célula infectada comienza a producir copias no de ella sino del virus.
VIROIDES
Los viroides son formas acelulares aún más pequeños que los virus. Solo están formados por una
molécula simple y corta de ARN, sin envoltura de proteínas. Afectan a las células vegetales
causándoles enfermedades y usan las enzimas de esas células para obtener copias de sí mismas.
Características comunes entre Procariotas y Eucariotas
TEORÍA CELULAR
El término célula fue acuñado en 1665 por el científico inglés Robert Hooke al observar
bajo las lentes de un microscopio rudimentario las «celdillas» constituyentes del corcho y
otros tejidos vegetales (que correspondían, en realidad, a restos celulares y no a células
vivas).
En 1674, Antony van Leeuwenhoek, un comerciante de telas holandés aficionado a pulir
lentes, describió que la sangre estaba compuesta por diminutos glóbulos que fluían a lo
largo de delgados capilares y realizó numerosas observaciones de diversos «animalículos»
u organismos microscópicos, a menudo unicelulares, que hoy conocemos como
microorganismos.
El siglo XIX constituyó, sin embargo, el verdadero punto de partida para el estudio de la
célula y su función. En 1831, el botánico escocés Robert Brown introdujo la noción de
núcleo celular y en 1838, el botánico Matthias Schleiden y el zoólogo Theodor Schwann
enunciaron el postulado básico de la teoría celular, según el cual todos los seres vivos,
vegetales y animales, están formados por células, a las que consideraron las unidades
vitales fundamentales. En 1839 Purkinje denominó «protoplasma» al contenido celular.
En 1855, el patólogo Rudolf Virchow estableció que todas las células proceden de otras
preexistentes y, ya a principios del siglo XX, las investigaciones sobre la estructura del
sistema nervioso del histólogo español Santiago Ramón y Cajal, Premio Nobel de Fisiología
y Medicina en 1906, demostraron la individualidad de las neuronas y pusieron de
manifiesto la universalidad de la teoría celular al aplicarla también al tejido nervioso.
La teoría celular postula que la célula es la unidad fundamental de los seres vivos, desde los más
sencillos (microorganismos) hasta los organismos superiores más complejos (animales y
vegetales), tanto en lo que se refiere a su estructura como a su función.
EL AGUA
Uno de los Elementos que tiene mayor presencia en nuestro planeta es el Hidrógeno, siendo parte
fundamental de una gran cantidad de compuestos como los Hidrocarburos como también en los
Carbohidratos, la base de la alimentación y la principal fuente de obtención energética de los
Seres Vivos, aunque el elemento más conocido que conforman es el más necesario.
El Agua es una sustancia compuesta por dos moléculas de Hidrógeno y una de Oxígeno y que
interviene en todos los procesos vitales del organismo, al punto de que nuestro planeta está
compuesto por un 70% de Agua, teniendo estas grandes masas la conformación de Océanos y
Mares, mientras que el restante se encuentra en estado sólido en los Polos y Glaciares de las zonas
más frías del planeta.
En el análisis Biológico del Agua, notamos que es de extrema importancia para garantizar las
condiciones de vida, permitiendo que los Compuestos Orgánicos efectúen reacciones para poder
realizar un Intercambio y Almacenamiento de energía, además de poder mantener sus estructuras
moleculares en pie, dependiendo de su presencia en la Alimentación y Reproducción Celular.
En las Especies Vegetales, es necesaria para que se pueda realizar el proceso de Fotosíntesis
mediante el cual permiten fabricar su propio alimento, como también en el proceso de
Respiración en el que se absorbe Dióxido de Carbono para poder conformar junto al Agua la base
de lo que será la Glucosa, liberando hacia el medio ambiente el Oxígeno que utilizamos para vivir.
En lo que respecta a nuestro cuerpo, los Seres Humanos están conformados en hasta un 78% de
Agua, por lo que diariamente se nos recomienda cumplimentar con la necesidad de hasta Siete
Litros de Agua, incorporándose no solo mediante las comidas, sino también con la necesidad de
Ingerir Bebidas, teniendo como recomendación la ingesta diaria de al menos Dos Litros de Agua.
PROPIEDADES FISICO-QUÍMICAS
ACCIÓN DISOLVENTE
El agua es el líquido que más sustancias disuelve (disolvente universal), debido a su característica
polar, su capacidad para formar puentes de hidrógeno con otras sustancias polares y iónicas, y por
su alto valor de constante dieléctrica (a temperatura ambiente vale 80). La capacidad disolvente
es la responsable de dos funciones importantes para los seres vivos: es el medio en el que ocurren
la mayoría de reacciones del metabolismo, el aporte de nutrientes y la eliminación de desechos se
realizan a través de sistemas de transporte acuosos.
CONDUCCIÓN ELÉCTRICA
El agua pura es un mal conductor de la electricidad, pero cuando contiene sales se convierte en un
buen conductor porque hay presencia de iones con cargas eléctricas.
FUERZA DE COHESIÓN
Los puentes de hidrógeno mantienen a las moléculas fuertemente unidas, formando una
estructura compacta que la convierte en un líquido casi incompresible. Esto significa que no es
fácil reducir su volumen mediante presión, pues las moléculas de agua están enlazadas entre sí
manteniendo unas distancias intermoleculares más o menos fijas.
FUERZA DE ADHESIÓN
De nuevo los puentes de hidrógeno del agua son los responsables, al establecerse entre estos y
otras moléculas polares, y es responsable junto con la cohesión, de la capilaridad.
CAPILARIDAD
Fenómeno que depende de la capacidad de adhesión de las moléculas de agua a las paredes de los
conductos capilares y de la cohesión de las moléculas de agua entre si. Consiste en el ascenso de la
columna de agua a través de tubos de diámetro capilar. Las plantas utilizan esta propiedad para la
ascensión de la sabia bruta desde las raíces hasta las hojas.
TENSIÓN SUPERFICIAL
Por la diferencia que existe entre las fuerzas de atracción que hay en el interior del líquido y en la
superficie, lo que provoca una acumulación de moléculas en la superficie, formando una delgada
película que opone gran resistencia a romperse, y permite que muchos organismos
puedan “andar” sobre el agua y vivan asociados a esta película superficial.
CALOR ESPECÍFICO
Se necesita mucha energía para elevar su temperatura, lo cual convierte al agua en un buen
aislante térmico. Esta propiedad permite al citoplasma acuoso servir de protección frente a
cambios bruscos de temperatura. Por esta característica actúa como termorregulador; amortigua
y regula los cambios térmicos ambientales y corporales. Por sus altos valores de calor específico
(1 cal/g °C) y calor de vaporización (539.6 cal/g a temperatura de ebullición) almacena y absorbe
gran cantidad de calor, que tardar en perder.
CALOR DE VAPORIZACIÓN DEL AGUA
El agua tiene un calor de vaporización alto ya que, para romper los puentes de hidrógeno que
enlazan las moléculas, es necesario suministrar mucha energía; también tiene un calor de
fusión alto.
El agua tiene una estructura molecular simple. Está compuesta por un átomo de oxígeno y dos de
hidrógeno. Cada átomo de hidrógeno se encuentra unido covalentemente al oxígeno por medio
de un par de electrones de enlace.
El oxígeno tiene además dos pares de electrones no enlazantes. De esta manera existen
cuatro pares de electrones rodeando al átomo de oxígeno: dos pares formando parte de
los enlaces covalentes con los átomos de hidrógeno y dos pares no compartidos en el lado
opuesto. El oxígeno es un átomo electronegativo o "amante" de los electrones, a
diferencia del hidrógeno.
El agua es una molécula "polar"; es decir, existe en ella una distribución irregular de la densidad
electrónica. Por esta razón, el agua posee una carga parcial negativa ( ) cerca del átomo de
Muchas otras propiedades únicas del agua son debidas a los puentes de hidrógeno. Por ejemplo,
el hielo flota porque los puentes de hidrógeno mantienen a las moléculas de agua más separadas
en el agua sólida que en el agua líquida, donde hay un enlace de hidrógeno menos por cada
molécula.
Con este nombre conocemos una extensa familia de lípidos que se caracterizan por tener, en la
misma molécula, una zona polar, que interacciona fácilmente con el agua, y una zona hidrofóbica,
de la cual el agua, y otros compuestos polares, quedan excluidos.
Las fuerzas de Van der Waals: Son fuerzas de estabilización molecular; forman un enlace químico
no covalente en el que participan dos tipos de fuerzas o interacciones, las fuerzas de dispersión
(que son fuerzas de atracción) y las fuerzas de repulsión entre las capas electrónicas de 2 átomos
contiguos.
CARBOHIDRATOS
Los carbohidratos son uno de los principales nutrientes en nuestra alimentación. Estos ayudan a
proporcionar energía al cuerpo. Se pueden encontrar tres principales tipos de carbohidratos en los
alimentos: azúcares, almidones y fibra.
Funciones
Monosacáridos
Es la unidad básica de los carbohidratos. Son aquellos que no pueden ser hidrolizados. Su fórmula
empírica es (CH2O)n en donde n ≥ 3. Tienen la terminación OSA. Estos azucares simples están
constituidos por una unidad de polihidroxialdehído o cetona. Los monosacáridos se agrupan en
dos clases generales aldosas y cetosas. Se clasifican según el número de sus carbonos y la
naturaleza química de su grupo carbonilo. Su cadena no está ramificada y todos los átomos
contienen por lo menos un grupo alcohol (-OH), el átomo de carbono restante tiene unido un
grupo carbonilo (C=O). Si este grupo carbonilo este el extremo de la cadena se trata de un grupo
aldehído (CHO), si el carbono está en cualquier otra posición se trata de una cetona (-CO-).
Estos pueden subdividirse según el número de átomos de carbono que posean como:
Triosas (CH2O) 3
Tetrosas (CH2O) 4
Pentosas (CH2O) 5
Hexosas (CH2O) 6
Heptosas (CH2O) 7
Octosas (CH2O) 8
Aldosas y Cetosas
Oligosacárido
Son compuestos que estan conformados por un número pequeño de monosacáridos que va de
dos a 10, estos se encuentran unidos entre sí por medio de enlaces glucosídicos (enlaces acéticos
que es un enlace de tipo covalente entro los grupos alcohol de dos monosacáridos desprendiendo
una molecula de agua). Son solubles en agua y poseen un grupo hemiacetálico libre. Son
importantes componentes de las glicoproteínas (Contienen una o varias unidades de
oligosacáridos unidos a cadenas laterales de asparraguina mediante enlaces N-glicosídicos),
constituyentes de los líquidos corporales y de los tejidos.
Polisacáridos
Formadas por una gran cantidad de monosacáridos, cumplen diversas funciones principalmente
energía de reserva y funciones estructurales. Estos se unen mediante enlaces glucosídicos. Las
hidrolasas son enzimas encargadas de la digestión de los polisacáridos y estas son específicas para
cada uno sobre todo para determinado grupo de enlace glucosídico, estas enzimas rompen en
general uno de cada dos enlaces liberando disacáridos y permitiendo que las enzimas completen
el trabajo posteriormente. Existen tres grupos de polisacáridos Polisacáridos de estructura: Estos
dan soporte mecánico a las células, órganos y a los organismos. Los que estan conformados por un
solo tipo de monosacáridos reciben el nombre de homoglucanos mientras que los que se
conforman de diferentes monosacáridos se llaman hereglucanos. Polisacáridos Hidrófilos: Estos
hidratados y su función es impedir la pérdida de agua de las células o tejidos. Polisacáridos de
Reserva: Forma de almacenar la glucosa como polímero para no ocasionar un problema osmótico.
En las plantas se almacena en forma de almidón y en los animales en forma de glucógeno.
LÍPIDOS
Son un conjunto de moléculas orgánicas (la mayoría biomoléculas), que están constituidas
principalmente por carbono e hidrógeno y en menor medida por oxígeno. También pueden
contener fósforo, azufre y nitrógeno.
Debido a su estructura, son moléculas hidrófobas (insolubles en agua), pero son solubles
en disolventes orgánicos no polares como la bencina, el benceno y el cloroformo lo que permite su
extracción mediante este tipo de disolventes. A los lípidos se les llama incorrectamente grasas, ya
que las grasas son solo un tipo de lípidos procedentes de animales y son los más ampliamente
distribuidos en la naturaleza.
Los lípidos cumplen funciones diversas en los organismos vivientes, entre ellas la de
reserva energética (como los triglicéridos), estructural (como los fosfolípidos de las bicapas)
y reguladora (como las hormonas esteroides).
Clasificación
- Céridos
- Saturados
- Ácidos grasos
Simples - insaturados
- Terpenoides
- Esteroides
- Acilgliceridos
Compuestos - Fosfogliceridos
- Esfingofosfolipidos
- Esfingolipidos
- esfingoglicolipidos
PROTEÍNAS
Las proteínas son las macromoléculas que llevan a cabo virtualmente todas las actividades de la
célula; son las herramientas moleculares y las máquinas que hacen que sucedan las cosas. Se
estima que una célula de mamífero tiene en general tanto como 10 000 proteínas diferentes con
diversas funciones. Como enzimas, las proteínas de manera notoria aceleran la velocidad de las
reacciones metabólicas; como cables estructurales, las proteínas proveen apoyo mecánico tanto
dentro de las células como fuera de sus perímetros; como hormonas, factores de crecimiento y
activadores de genes, las proteínas realizan una amplia variedad de funciones reguladoras; como
receptores de membranas y transportadores, las proteínas determinan el tipo de célula a la que
reaccionan y qué sustancias entran o salen de la célula; como fi lamentos contráctiles y motores
moleculares, las proteínas constituyen la maquinaria para los movimientos biológicos. Entre sus
múltiples funciones restantes, las proteínas actúan como anticuerpos, sirven como toxinas, forman
los coágulos sanguíneos, absorben o refractan la luz y transportan sustancias de una parte del
cuerpo a otra.
La estructura de las proteínas En ninguna otra parte de la biología se observa mejor la relación
íntima entre la forma y función que en las proteínas. Éstas son moléculas enormes y complejas,
pero su estructura en cualquier ambiente es por completo definida y predecible. Cada aminoácido
de una proteína se localiza en un sitio específico dentro de estas moléculas gigantes y le confi ere a
la proteína la estructura y reactividad necesarias para la función que debe desempeñar. La
estructura de la proteína se puede describir en diferentes niveles de organización; cada uno
remarca un aspecto diferente y a su vez cada uno es dependiente de diferentes tipos de
interacciones. Por lo general se describen cuatro niveles en la proteína: primario, secundario,
terciario y cuaternario. El primero, la estructura primaria, se refi ere a la secuencia de aminoácidos
de una proteína, en tanto que los otros tres niveles se relacionan con la organización de la
molécula en el espacio. Para entender el mecanismo de acción y la función biológica de una
proteína es importante conocer cómo se constituye dicha proteína.
Estructura secundaria:
Toda la materia existe en el espacio y por lo tanto tiene una estructura tridimensional. Las
proteínas se forman mediante uniones entre un gran número de átomos; por consiguiente, su
forma es compleja. El término conformación se refiere a la disposición tridimensional de los
átomos de una molécula, es decir, su organización espacial. La estructura secundaria describe la
conformación de partes de la cadena de polipéptidos. Se propusieron dos conformaciones.
En una de ellas, el esqueleto del polipéptido tomaba la forma de un cilindro, una espiral
denominada hélice alfa (𝛂). La estructura permanece en el lado interno de la hélice y las
cadenas laterales se proyectan hacia fuera. La estructura helicoidal se estabiliza por medio
de la unión de puentes de hidrógeno entre los átomos de un péptido enlazado y los
situados justo arriba y abajo a lo largo de la espiral. Las superfi cies opuestas de una hélice
alfa pueden tener propiedades contrastantes. En las proteínas hidrosolubles, la superfi cie
externa de una hélice alfa contiene con frecuencia residuos polares en contacto con el
solvente, en tanto que la superficie enfrentada con el interior posee cadenas laterales no
polares.
La segunda conformación que propusieron Pauling y Corey fue la estructura de hoja beta
(𝛃) plegada, la cual consiste en varios segmentos de un polipéptido que permanecen lado
con lado. A diferencia de la estructura de la hélice alfa, el esqueleto de cada segmento de
polipéptido (o cadena beta) en una hoja beta toma una conformación con. Al igual que la
hélice alfa, la lámina beta también se caracteriza por un gran número de puentes de
hidrógeno, pero estas uniones son perpendiculares al eje principal de la cadena de
polipéptidos y se proyectan de manera transversal desde un lado de la cadena hacia el
otro. Del mismo modo que la hélice alfa, la lámina beta también se encuentra en muchas
proteínas diferentes. Puesto que la cadena de aminoácidos está casi por completo
extendida, la lámina beta resiste las fuerzas de tensión (estrés). La seda es una proteína
integrada sobre todo por láminas beta;