I N ST I T U TO P O L I T ÉC N I C O N AC I O N A L

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA
ACADEMIA DE BIOQUÍMICA MICROBIANA

FISIOLOGÍA Y BIOQUÍMICA MICROBIANA

QUÍMICO BACTERIÓLOGO PARASITÓLOGO
(QBP) – PLAN 2002

“A N F I B O L I S M O E N M I C R O O R G A N I S M O S”

CIUDAD DE MÉXICO FEBRERO – JUNIO 2021

GENERALIDADES DEL CICLO DE LOS
ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS (CAT)
C URS O D E T EORÍA D E B I OQUÍMICA Y ME TABOLISMO MI CROBIANO
F E BRERO – J U NI O 2 0 2 1

E L ABORADO P OR MI GUEL A N G EL H ER NÁND EZ MA RÍN

 CICLO DE LOS ÁCIDOS
TRICARBOXÍLICOS (CAT)

❖ Ciclo de los ácidos tricarboxílicos (CAT), Ciclo

del ácido cítrico y/o Ciclo de Krebs.
 CICLO DE KREBS / CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS

❖ Esta vía metabólica es indispensable en todas

las células y fue descubierto en tejidos
animales por el alemán Hans Adolf Krebs,
quien obtuvo el Premio Nobel de Fisiología o
Medicina en 1953, junto con Fritz Lipmann.
 CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS EN EUCARIOTES
❖ El Complejo Piruvato deshidrogenasa (PDHasa) y 7 (de las 8) enzimas del Ciclo de Krebs (CAT) se encuentran inmersas
en la matriz mitocondrial. La enzima Succinato deshidrogenasa (SDHasa) se encuentra anclada a la membrana interna
de la mitocondria y forma parte de la Cadena transportadora de electrones (CTE) en eucariotes.
 CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS Y PRODUCCIÓN DE ENERGÍA

❖ En el catabolismo de proteínas, grasas y carbohidratos (Respiración aerobia) todos los electrones son canalizados a la
mitocondria (eucariontes) o a la membrana citoplasmática en procariontes.

❖ El flujo de los electrones se dirige hacia la producción de ATP mediante Fosforilación oxidativa.
COMPLEJO ENZIMÁTICO
PIRUVATO DESHIDROGENASA
(PDHasa)
C URS O D E T EORÍA D E B I OQUÍMICA Y ME TABOLISMO MI CROBIANO
F E BRERO – J U NI O 2 0 2 1

E L ABORADO P OR MI GUEL A N G EL H ER NÁND EZ MA RÍN

 CATABOLISMO AERÓBICO DE CARBOHIDRATOS
RELACIÓN ENTRE GLICÓLISIS Y CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS
❖ El Complejo Piruvato deshidrogenasa
(PDHasa) es un sistema
multienzimático localizado en matriz
mitocondrial en eucariotes y en
citoplasma en muchos procariotes.

❖ El Piruvato producido en el Citosol

por la Glucólisis es transportado a la
Matriz mitocondrial (en células
eucariotes) para producir Acetil–CoA.
 COMPLEJO ENZIMÁTICO PIRUVATO DESHIDROGENASA (PDHasa)
❖ El sistema multienzimático
Piruvato deshidrogenasa
(PDHasa) oxida al Piruvato
para formar NADH, CO2 y
Acetil–CoA, en donde este
último también puede ser
obtenido del catabolismo
de lípidos y aminoácidos.
 ACTIVIDAD DEL COMPLEJO ENZIMÁTICO PIRUVATO DESHIDROGENASA
❖ El Acetil–CoA (molécula de alta energía) es
producido por el Complejo Piruvato
deshidrogenasa (PDHasa) a partir de la
descarboxilación oxidativa del Piruvato
(producción de CO2), y al mismo tiempo
reduciendo una coenzima NAD+.

❖ La Coenzima A (CoA) es químicamente un Tiol,

puede reaccionar con los Ácidos carboxílicos
para formar Tioésteres, de modo que actúa
como un portador del Grupo Acilo.

❖ El Acetil–CoA, es una importante encrucijada

en el metabolismo de todas las células.
 ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DEL
COMPLEJO ENZIMÁTICO PIRUVATO DESHIDROGENASA

❖ Componentes:
E1: Piruvato deshidrogenasa
E2: Dihidrolipoil trans acetilasa
E3: Dihidrolipoil deshidrogenasa–FAD
 COMPOSICIÓN Y FUNCIÓN DEL
COMPLEJO ENZIMÁTICO PIRUVATO DESHIDROGENASA
 GRUPOS PROSTÉTICOS DE LOS COMPONENTES DEL
COMPLEJO ENZIMÁTICO PIRUVATO DESHIDROGENASA
E1 E2

E3
COMPONENTE E1 DEL COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA –
MECANISMO DE REACCIÓN

E1
 COMPONENTES E2 Y E3 DEL COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA –
MECANISMOS DE REACCIÓN
E2 E3
 REACCIONES SECUENCIALES DE LOS COMPONENTES E1, E2 Y E3 DEL
COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA – MECANISMOS DE REACCIÓN
 REACCIONES SECUENCIALES EN EL
COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA
– MECANISMOS DE REACCIÓN
E1
REGULACIÓN DE LA ACTIVIDAD DEL COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA
– SUSTRATO, PRODUCTO, ESTATUS DE ENERGÍA Y MODIFICACIÓN COVALENTE
❖ La regulación de la actividad del Complejo PDHasa es controlada por su Sustrato: Piruvato como Efector positivo;
Productos: Acetil–CoA y NADH como Efectores negativos; y Estatus de energía: ATP y ADP (o AMP) como Efector positivo y
Efector negativo respectivamente.

❖ En células animales un mecanismo adicional de

regulación de la actividad del Complejo PDHasa se
da por modificación covalente (Fosforilación).
INHIBICIÓN DEL COMPLEJO PIRUVATO
DESHIDROGENASA POR ARSENITO Y
REVERSIÓN DE LA INHIBICIÓN
SECUENCIA DE REACCIONES
DEL CICLO DE LOS ÁCIDOS
TRICARBOXÍLICOS
C URS O D E T EORÍA D E B I OQUÍMICA Y ME TABOLISMO MI CROBIANO
F E BRERO – J U NI O 2 0 2 1

E L ABORADO P OR MI GUEL A N G EL H ER NÁND EZ MA RÍN

RELACIÓN ENTRE ACTIVIDAD DEL COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA Y
CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS (CAT)
❖ El Acetil–CoA producido por Complejo Piruvato
deshidrogenasa (PDHasa) es oxidado a 2 moléculas
de CO2, reduciendo 3 NAD+ y 1 FAD.
 ❖ El sustrato que alimenta al CAT es el Acetil–CoA,
proveniente del catabolismo heterotrófico.
REACCIONES DEL CICLO DE LOS
ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS (CAT)

❖ La vía se considera en base a sus intermediarios

formados y las reacciones químicas que les dan lugar:

1ª Acetil–CoA se condensa con el α–cetoácido de 4

carbonos Oxaloacetato y genera Citrato
2ª Citrato (Alcohol terciario) se reorganiza para dar
Isocitrato (Alcohol secundario).
3ª Isocitrato sufre la 1ª descarboxilación oxidativa
de la vía y genera NADH y α–cetoglutarato.
4ª α–cetoglutarato (α–cetoácido de 5 carbonos)
sufre una descarboxilación oxidativa y genera NADH
y Succinil–CoA (molécula de alta energía).
❖ De forma global se da la completa mineralización del
Acetil–CoA que alimenta la vía (2 moléculas de CO2).

REACCIONES DEL CICLO DE LOS

ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS (CAT)
❖ En las reacciones de la siguiente etapa del CAT solo
existen ácidos dicarboxílicos de 4 átomos de carbono:
5ª A partir de Succinil-CoA se genera una molécula
de ATP por Fosforilación a nivel sustrato y también
se produce Succinato (donador de electrones CTE).
6ª Succinato se oxida para dar Fumarato y se
reduce el grupo prostético de la enzima a FADH2.
7ª Fumarato (estereoisómero trans) sufre una
reacción de hidratación en la doble ligadura y se
forma el enantiómero L–Malato.
8ª L–Malato se oxida en el carbono del alcohol
secundario y produce Oxaloacetato y NADH.
SECUENCIA DE REACCIONES – CITRATO SINTASA

Conformación abierta

Conformación cerrada: unión con el sustrato

 SECUENCIA DE REACCIONES – ACONITASA

❖ El Fluoruro inhibe a la Aconitasa, añadiéndolo como Fluoroacetato.

❖ El ((2R, 3S)–Fluorocitrato) no es sustrato para la Aconitasa.
 SECUENCIA DE REACCIONES – ISOCITRATO DESHIDROGENASA
❖ Lleva a cabo la primera descarboxilación
oxidativa del CAT. En muchas bacterias la
enzima es dependiente de NADP+. Requiere de
Mn2+ como cofactor metálico.

❖ En bacterias su actividad es regulada por

producto (NADPH) y en eucariotes por
❖ La Km e la enzima bacteriana por el Isocitrato es de 1 a 2 μM.
Fosforilación.

❖ En bacterias compite
por su sustrato,
Isocitrato, con la
Isocitrato liasa del
Ciclo del Glioxilato.
 SECUENCIA DE REACCIONES – α-CETOGLUTARATO DESHIDROGENASA
❖ Componentes:
E1: α–cetoglutarato deshidrogenasa
E2: Dihidrolipoil trans succinilasa
E3: Dihidrolipoil deshidrogenasa–FAD

❖ Es un complejo enzimático similar en su mecanismo al de la PDHasa.

Utiliza cinco cofactores (coenzimas y grupos prostéticos): TPP, CoA,
Ácido lipoico, NAD+ y FAD.

❖ Lleva a cabo la segunda descarboxilación oxidativa del CAT y

produce Succinil-CoA (precursor de anillos de Porfirina → Grupos
Hemo de Citocromos y Clorofilas) y también NADH.
SECUENCIA DE REACCIONES – SUCCINIL-CoA SINTETASA
❖ El Succinil-CoA es una molécula de alta energía lo cual
permite llevar la formación de un enlace fosfoanhídro,
en otras palabras dar paso, en el CAT, a la única
síntesis de ATP en bacterias, (GTP en eucariotes) por
Fosforilación a nivel sustrato a través de la actividad
de la Succinil–CoA sintetasa y al mismo tiempo darse
la producción de Succinato.

❖ La Succinil–CoA sintetasa requiere en su sitio activo

de un residuo de His que le permita llevar a cabo la
transferencia del grupo fosforilo del intermediario
Succinil–fosfato al ADP, a través de la generación de
la Fosfoenzima.
 SECUENCIA DE REACCIONES – SUCCINATO DESHIDROGENASA (SDHasa),
DESHIDROGENASA SUCCÍNICA O SUCCINATO-COENZIMA Q REDUCTASA (SQR)

FAD FADH2
❖ La Succinato deshidrogenasa (SDHasa) es una enzima embebida en la membrana
interna mitocondrial en células eucariotes y en membrana citoplásmica de bacterias
aerobias estrictas y facultatiavas que usan Ciclo de Krebs completo.

❖ Produce FADH2 y la liberación de energía debido a su reoxidación y de la transferencia

de esos electrones a través de la Cadena Transportadora de Electrones (CTE) contribuye
en generar Fuerza Protón motriz → Síntesis de ATP por Fosforilación oxidativa.
 SECUENCIA DE REACCIONES – SUCCINATO DESHIDROGENASA (SDHasa),
DESHIDROGENASA SUCCÍNICA O SUCCINATO-COENZIMA Q REDUCTASA (SQR)
❖ La Succinato deshidrogenasa es una enzima estereoespecifíca
ya que en la oxidación del Succinato da como producto
Fumarato el cual posee un doble enlace con configuración trans.
❖ Reduce al Acarreador de electrones lipídico
de la Cadena transportadora de electrones (CTE): Ubiquinona (Q) a Ubiquinol (QH2).

❖ Forma parte de 2 vías metabolícas tanto del Ciclo de los ácidos tricarboxílicos (CAT) como
de la Cadena transportadora de electrones (CTE) en eucariotes y en microorganismos
aerobios estrictos y en facultativos (cuando están en presencia de oxígeno) y microaerófilos.

❖ No se produce en condiciones de anaerobiosis en bacterias facultativas y fermentativas (usan

Ciclo incompleto de Krebs), o en aquellas bacterias, como las bacterias oxidantes del H2 que
emplean el Ciclo de Evans. En ambos es reemplazada esta enzima por Fumarato reductasa.
 SECUENCIA DE REACCIONES – SUCCINATO DESHIDROGENASA (SDHasa),
DESHIDROGENASA SUCCÍNICA O SUCCINATO-COENZIMA Q REDUCTASA (SQR)

❖ La SDHasa puede ser inhibida por la presencia de Malonato

(Inhibidor competitivo – análogo estructural del Succinato).
❖ En Escherichia coli la síntesis de la enzima es inducida por la
presencia de Succinato (Inductor) y reprimida por la presencia
de Glucosa (da lugar a eventos de Represión) cuando estos
compuestos se emplean como fuentes de carbono en el medio.
 SECUENCIA DE REACCIONES – SUCCINATO DESHIDROGENASA (SDHasa),
DESHIDROGENASA SUCCÍNICA O SUCCINATO-COENZIMA Q REDUCTASA (SQR)
❖ La actividad la Succinato deshidrogenasa puede ser evidenciada
mediante una detección cualitativa/cuantitativa, por la
transferencia de los electrones que son dirigidos desde el FADH2
a un indicador de oxido–reducción como el azul de metileno,
metosulfonato de fenazina o 2,6-diclorofenol indofenol
(Acarreadores de electrones y últimos aceptores de electrones
artificiales). Estas sustancias son empleadas para los ensayos de
Actividad enzimática debido a sus valores de Potenciales redox
(E°’).

SDH–FADH2 + Azul de metileno → SDH–FAD + Azul de metileno (Incoloro o forma Leuco)

Oxidado Reducido
 SECUENCIA DE REACCIONES – FUMARASA O FUMARATO HIDRATASA
❖ El agua se aproxima al doble enlace entre Carbono y Carbono
(C=C) por uno de los lados para dar el enantiómero L–Malato.

❖ La enzima Fumarasa es altamente estereoespecífica; cataliza la

hidratación del doble enlace en trans del Fumarato, pero no en
el doble enlace en cis del Maleato (el isómero cis del fumarato).

<

❖ En la dirección inversa (de L–Malato a

Fumarato), la Fumarasa es igualmente
estereoespecífica: el D–Malato no es un
sustrato de la enzima.
 SECUENCIA DE REACCIONES – MALATO DESHIDROGENASA

❖ La Malato deshidrogenasa oxida el carbono correspondiente al alcohol secundario del L–Malato y produce Oxaloacetato
y NADH (el 3° producido en el CAT por cada Acetil–CoA que alimenta al inicio la vía). Reacción es muy endergónica: Keq.<1

❖ En células intactas el Oxaloacetato es consumido continuamente por la Citrato sintasa (reacción muy exergónica), lo que
favorece el desplazamiento de la reacción hacia la formación del α–cetoácido.
COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA Y
CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS:
OXIDACIÓN COMPLETA DE ACETIL–CoA
 CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS (CAT) – BALANCE GLOBAL,
ENZIMAS, GRUPOS PROSTÉTICOS Y RELACIONES ENERGÉTICAS
2(Acetil–CoA + ADP + Pi + 3 NAD+ + FAD + 2 H2O → 2 CO2 + ATP + 3 NADH + 2 H+ + FADH2 + CoA)
 INTEGRACIÓN DE ESTRATEGIAS
METABÓLICAS EN EL CATABOLISMO
AEROBIO DE GLUCOSA: GLUCOLISIS +
COMP. PDHasa + CICLO DE KREBS
INTEGRACIÓN DE ESTRATEGIAS METABÓLICAS EN EL CATABOLISMO AEROBIO
DE GLUCOSA: EQUIVALENTES REDUCTORES Y RENDIMIENTO ENERGÉTICO

NADH: 3 ATPs
FADH2: 2 ATPs
 INTEGRACIÓN DE ESTRATEGIAS METABÓLICAS EN EL CATABOLISMO AEROBIO
DE GLUCOSA: SÍNTESIS DE ATP (FOSFORILACIÓN: NIVEL SUSTRATO Y OXIDATIVA)
 CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS
(CAT) – REGULACIÓN
❖ El flujo de carbono a través del Ciclo de Krebs puede ser
limitado por la disponibilidad de NADH o de los sustratos de la
Citrato sintasa (Acetil–CoA y Oxaloacetato).

❖ El Complejo Piruvato deshidrogenasa es alostéricamente

regulado su actividad y responde a las proporciones de
[ATP]/[ADP], [NADH]/[NAD+] y [Acetil–CoA]/[CoA], que son
indicativos de disponibilidad de energía.

❖ La inhibición por retroalimentación por Succinil–CoA, Citrato y

ATP hace que disminuya la velocidad con la que se está dando el
Ciclo de Krebs.
 CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS – REGULACIÓN EN BACTERIAS
❖ El CAT es un vía anfibólica, sirve tanto para cubrir necesidades de producción de ATP (a partir de su carácter catabólico) y
de proporcionar precursores para la biosíntesis (esto dentro de su carácter anabólico).

❖ La ruta debe ser regulada tanto por estatus de energía (cantidad de ATP) y por disponibilidad de precursores biosintéticos.

❖ El O2 controla la expresión de genes dar lugar a las enzimas del CAT.

Ejemplo: Anaerobios facultativos no sintetizan α–cetoglutarato deshidrogenasa bajo condiciones de ausencia de
oxígeno y de algún otro aceptor de electrones alternativo, como el NO3– (Fermentación).

❖ En bacterias Gram–, incluyendo Escherichia coli, hay dos proteínas (FNR y Arc), que regulan la transcripción de genes del
metabolismo aeróbico y anaeróbico.

❖ Una proteínas FNR con función similar es conocida en la Bacillus subtilis (Gram+).
ANFIBOLISMO
Y ANAPLEROSIS
C URS O D E T EORÍA D E B I OQUÍMICA Y ME TABOLISMO MI CROBIANO
F E BRERO – J U NI O 2 0 2 1

E L ABORADO P OR MI GUEL A N G EL H ER NÁND EZ MA RÍN

 ANFIBOLISMO Y
ANAPLEROSIS
❖ Anfibolismo:
El Ciclo de Krebs no solo proporciona
Coenzimas reducidas (Equivalentes
reductores) para la obtención de ATP
sino también la generación de
Precursores para biosíntesis.

❖ Anaplerosis:
Los intermediarios del Ciclo de Krebs
que son retirados con el propósito de
consumirse en procesos anabólicos,
deben ser reemplazados mediante
Reacciones anapleróticas.
 ANFIBOLISMO
❖ En organismos aerobios el Ciclo de
Krebs es una vía Anfibólica, tanto
puede ser utilizado para fines
Catabólicos (Generación de energía
metabólica por la oxidación de
compuestos reducidos) y/o para
procesos Anabólicos (Biosíntesis de
material celular y crecimiento).

❖ El metabolismo anfibólico es
regulado por el Estatus de energía
(Relación de [ATP]/[ADP]) y la
❖ Intermediarios y Productos metabólicos obtenidos a partir de disponibilidad de precursores
la entrada de una molécula de Acetil–CoA en el Ciclo de Krebs. biosintéticos.
 REACCIONES ANAPLERÓTICAS
❖ El término anaplerótico tiene su origen en el griego antiguo y significa rellenar. Algunos de los intermediarios del Ciclo
de Krebs son “retirados” de la vía para hacer uso de ellos como precursores biosintéticos. Los intermediarios del CAT
retirados son repuestos mediante Reacciones anapleróticas, donde destacan 4 las cuales se presentan en la tabla,
aunque la producción de Oxalacetato a partir de Piruvato es probablemente la más importante fisiológicamente.

❖ En circunstancias normales, las reacciones por las que intermediarios del CAT se dirigen a otras vías y aquellas que
permiten reponerlas, se encuentran en equilibrio dinámico. Constantes concentraciones intermediarios del CAT.
 REACCIONES ANAPLERÓTICAS
A partir de Intermediario CAT Reacción Nota
Esta reacción es reversible pudiendo formar
Aspartato + α–cetoglutarato → Oxaloacetato a partir de Aspartato en una reacción de
Aspartato Oxaloacetato
Oxaloacetato + Glutamato transaminación, vía Aspartato transaminasa.

Esta reacción es catalizada por la Piruvato

Piruvato + HCO3 + ATP →
–
carboxilasa, una enzima activada por Acetil–CoA,
Oxaloacetato + ADP + Pi indicando una falta de Oxalacetato.
Piruvato Oxaloacetato
El Piruvato puede también ser convertido en L–Malato,
Piruvato + NAD(P)H + HCO3– → otro intermediario, mediante una vía similar
L–Malato + NAD(P)+ empleando a la Enzima málica.

Glutamato + NAD+ + H2O → Reacción catalizada por Glutamato deshidrogenasa.

Glutamato α–cetoglutarato +
α–cetoglutarato + NADH + NH4
Cuando se oxidan ácidos grasos de cadena impar, se
β–oxidación forma una molécula de Succinil–CoA por cada ácido
Propionil–CoA + CO2 +ATP →
de ácidos Succinil–CoA graso (Proveniente de Propionil–CoA). Se da la acción
Succinil–CoA + ADP + Pi
grasos de la Propionil–CoA carboxilasa. La enzima final es la
Metilmalonil-CoA mutasa.
 REACCIONES ANAPLERÓTICAS EN BACTERIAS
❖ Los intermediarios del CAT sirven como precursores biosintéticos
tienen que ser suplidos de inmediato para que no se detenga el ciclo.

❖ El Oxaloacetato es un intermediario catalítico y precursor de

Aspartato. ¡¡¡Nunca debe de faltar!!! De lo contrario, el ciclo se
detiene.

❖ Las bacterias que crecen en carbohidratos sintetizan

Oxaloacetato a partir de Piruvato y de PEP.
Las Secuencias anapleróticas en bacterias emplean
las siguientes enzimas:

* Enzima málica
* Piruvato carboxilasa
* Fosfoenolpiruvato carboxilasa (PEP carboxilasa)
 REACCIONES ANAPLERÓTICAS –
PIRUVATO CARBOXILASA
❖ En muchos organismos, desde bacterias hasta mamíferos, la
carboxilación de Piruvato a Oxalacetato es catalizada por la
Piruvato carboxilasa (con un grupo prostético de Biotina
unido a un residuo de Lys en el sitio activo), consumiendo ATP.

❖ Cuando en el Ciclo de Krebs hay deficiencia de Oxaloacetato, ❖ Mecanismo de reacción

o de algún otro intermediario, el Piruvato es carboxilado a de Piruvato carboxilasa.
expensas de uso de ATP para compensar a estos compuestos.

❖ La Acetil–CoA activa la enzima, pero algunas bacterias como

Pseudomonas aeruginosa poseen una Piruvato carboxilasa
que no es activada por Acetil–CoA.
 REACCIONES ANAPLERÓTICAS – FOSFOENOLPIRUVATO CARBOXILASA
❖ La enzima Fosfoenolpiruvato carboxilasa (PEP carboxilasa), produce Oxaloacetato a partir de la condensación entre
Fosfoenolpiruvato y bicarbonato. En comparación con la Piruvato carboxilasa esta no requiere Biotina como cofactor.

❖ Células mutantes de Escherichia coli son

incapaces de crecer en un medio mínimo
con Glucosa pero pueden crecer en
medios suplementados con Citrato o con
algún intermediario del CAT.

❖ Esto se debe a que tienen PEP

carboxilasa como secuencia anaplerótica
pero no expresa Piruvato carboxilasa.
 REACCIONES ANAPLERÓTICAS – ENZIMA MÁLICA
❖ La Enzima málica también puede ser conocida como Malato deshidrogenasa descarboxilante dependiente de NADP+.

❖ Esta enzima aparece cuando las vías biosintéticas se activan y se requiere NADPH.

❖ Las bacterias y las mitocondrias poseen 2 enzimas málicas:

* Una especial para NADH.
* Otra dependiente de NADP+ para producir NADPH y aparece durante la biosíntesis de ácidos grasos.
REACCIONES ANAPLERÓTICAS – PRODUCCIÓN DE PEP Y GLUCONEOGÉNESIS
❖ Las vías anapleróticas permiten invertir la vía EMP (Gluconeogénesis) lo que significa invertir la reacción llevada por la
PFK y Piruvato cinasa. La actividad de la PFK se invierte por la acción de la Fructosa 1,6–Bifosfatasa (FBPasa–1).
La síntesis de Glucosa 6–P se requiere para cubrir necesidades gluconeogénicas (producción de pared celular, Glucógeno,
etc.), por tanto se requiere sintetizar PEP a partir de intermediarios como Piruvato, Oxaloacetato y L–Malato:

* Utilizando Piruvato: PEP sintetasa

Piruvato + ATP → PEP + AMP + Pi
(se encuentra en todos los organismos)
Piruvato + ATP + Pi ↔ PEP + AMP + PPi + 2H+
y Piruvato fosfato dikinasa (PPDK).

* Utilizando Oxaloacetato:
Oxaloacetato + ATP ↔ PEP + CO2 + ADP
PEP carboxicinasa.

* Utilizando L–Malato: L–Malato + NAD+ ↔ Oxaloacetato + NADH+H+

Malato deshidrogenasa y Oxaloacetato + ATP ↔ PEP + CO2 + ADP
PEP carboxicinasa y la Enzima málica. L–Malato + NADP+ ↔ Piruvato + NADPH+H+