Manual de Quimica Clinica

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS

DE QUIMICA CLINICA
INDICE
CONTENIDO PAGINA.
INTRODUCCION ………………………………………………………………………………………………………………… ….2
REGLAMENTO INTERNO EN EL AREA TECNICA DEL LABORATORIO CLINICO ……………………… …3
NORMAS DE BIOSEGURIDAD ………………………………………………………………………………………………… 4
MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD ……………………………………………………………………………………………. …..5
OBJETIVOS GENERALES………………………………………………………………………………………………………… .6
OBJETIVOS ESPECIFICOS……………………………………………………………………………………………………….. 6
PROCEDIMIENTO OPERATIVO DE:
1.0 TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA PARA EXAMENES DE QUIMICA CLINICA
…………………………………….………………………………………………………………………………………………….7
2.0 DETERMINACION DE GLUCOSA……………………………………………………………………………….……. 8
3.0 DETERMINACION DE COLESTEROL…………………………………………………………..……………………12
4.0 DETERMINACION DE TRIGLICERIDOS………………………………………………………………………………15
5.0 DETERMINACION DE ACIDO URICO…………………………………………………………………………………18
6.0 DETERMINACION DE CREATININA…..………………………………………………………………………………21
7.0 BIBLIOGRAFIA …………………………………………………………………………………………………………………24

1
INTRODUCCION.
La química clínica se ocupa del estudio de los aspectos químicos de la vida humana. Con la
aplicación de los métodos de laboratorio para el diagnóstico, el seguimiento, el control de
tratamiento y la investigación de la enfermedad.
El presente manual contiene los procedimientos de rutina en el laboratorio de Química Clínica,
se ha elaborado con el fin de conocer el procedimiento adecuado para determinar las
diferentes sustancias químicas presentes en el cuerpo humano. Así como orientar sobre los
requisitos que deben reunir el usuario antes de realizarse análisis de química sanguínea.
Por otra parte se darán a conocer métodos y técnicas adecuadas para el análisis de los
diferentes anabolitos y metabolitos y su respectivo reporte.
Asimismo, se mencionan las normas de bioseguridad útiles para mantener la seguridad del
personal de laboratorio dentro del laboratorio, normas generales de toma, manejo y envió de
muestras para los diferentes análisis y su respectivo control de calidad.

2
REGLAMENTO INTERNO EN EL AREA TECNICA DEL LABORATORIO CLINICO.
1. El equipo del laboratorio no puede ser extraído de su lugar de origen.
2. Todo equipo, material y reactivo deberá encontrarse buenas condiciones.
3. Queda prohibido el ingreso a personas no autorizadas a las instalaciones del laboratorio
técnico.
4. El personal regente y de labor técnica debe de presentarse en el laboratorio con su
respectiva gabacha blanca hasta la rodilla y manga larga con elástico en los puños, la
cual siempre debe de mantenerse bien abotonada, ropa formal o uniforme, zapatos de
cuero (cubriendo todo el pie).
5. Es obligación del personal de regencia y labor técnica utilizar protección personal que
estos cumplan con las normas de bioseguridad establecidas. ( mascarillas, guantes,
lentes protectores y gorro)
6. El personal regente y de labor técnica deberán comportarse de manera responsable
durante la realización de las pruebas, dedicándose exclusivamente al procesamiento de
los exámenes clínicos dentro del laboratorio.
7. El personal regente y de labor técnica deberán respetar la hora de entrada y de salida
programada según su horario laboral.
8. Es obligación de las personas que laboran en el laboratorio que estos cumplan con las
normas de bioseguridad establecidas.

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NORMAS DE BIOSEGURIDAD
1. Todo el personal que ingrese al laboratorio deberá usar gabacha blanca hasta la rodilla,
manga larga y elástico en los puños; con el fin de proteger la ropa con posible material
toxico y/o contaminante.
2. No se puede fumar, maquillarse, peinarse, beber, comer ni guardar alimentos dentro del
laboratorio.
3. Las mesas de trabajo debes de desinfectarse antes y después de cada jornada laboral.
4. Todo material contaminado y no contaminado debes de ser descartados en su
respectivo recipiente. Nota: bolsa roja material contaminado, bolsa negra material no
contaminado.
5. Todo material cortopunzante se debe descartar en garrafones con hipoclorito de sodio
al 10% y estos deben de estar debidamente rotulados.
6. La cristalería utilizada se debe de descartar en recipientes con hipoclorito de sodio y
estos deben estar debidamente rotulados para cada cristalería.
7. En caso de derrame de una muestra contaminante en el piso o la mesa de trabajo, de
bebe de aplicar la solución desinfectante alrededor y encima del derrame cubrirlo con
papel periódico o similar, dejarlo por 30 minutos para después limpiar el área.
8. Durante el desarrollo de los procedimientos operativos debe de evitarse el contacto con
los ojos, nariz, boca y cabello, porque este es uno de los principales riesgos de
contaminación.
9. No se debe de tener las uñas largas, para evitar acumulación de suciedad o
contaminación; así también evitar el uso de prendas como anillos, pulseras, relojes u
otras prendas que pueden contribuir con la contaminación.
10. Al procesar toda muestra biológica, siempre deben usarse guantes de látex, por
considerarse estas potencialmente con contaminantes.
11. Debe hacerse uso de mascarilla, lentes protectores, gorro al procesar muestras que
produzcan esporas, aerosoles contaminantes o sustancias que produzcan emanaciones
toxicas.
12. Para hacer uso de pipetas serológicas, volumétricas, etc. Se debe utilizar propipetas y
nunca debe hacerse directamente con la boca.
13. No debe de levantarse la tapa de las centrifugas, mientras este funcionando, ni tratar de
detenerla con las manos.
14. Debe de realizarse el aseo de manos después de tocar material contaminante, antes y
después de usar guantes de látex y antes de retirarse del laboratorio.

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MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD
1. Tanto el personal regente y de labor técnica deberán portar la gabacha blanca hasta las
rodillas, manga larga y con elástico en el puño, así se evitara cualquier accidente.
2. Todo el personal regente y de labor técnica deberá desinfectar la mesa de trabajo antes
y después de sus procedimientos operativos.
3. El personal a cargo de regencia y de labor técnica debe de limpiar la mesa de trabajo
descartando todo lo que no utilice en sus respectivos descartes y basureros.
4. El personal que labora dentro de la labor técnica nunca deberá de abrir la tapa de la
centrifuga mientras esta aun se encuentre funcionando ni destapar tubos
inmediatamente después de centrifugar y agitar.
5. En caso de derrame de una muestra en el piso o la mesa de trabajo, aplicar la solución
desinfectante, cubrir con papel periódico, dejarlo por 30 minutos antes de limpiar el
área.
6. Todo el personal del laboratorio no podrá retirarse del laboratorio sin antes realizarse el
aseo de manos por haber manipulado material contaminante.
7. Todo el personal que labora en el área técnica, no podrá beber, fumar, comer,
maquillarse, peinarse, comer ni guardar alimentos dentro del área técnica.
8. En el laboratorio esta prohibida la practica de pipetear con la boca.
9. Toda muestra biológica se considera potencialmente peligrosa e infecciosa, por lo que
debe de tratarse con las medidas del caso.
10. Todo objeto cortopunzante deberá de manejarse con el extremo cuidado evitando así
accidentes por pinchazo o cortaduras.
11. Si se nota alguna vibración o ruido anormal de la centrifuga hay que detener su
funcionamiento inmediatamente, revisar si esta correctamente calibrada.

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OBJETIVOS
El manual de Procedimientos Operativos de Química Clínica se ha programado con los
siguientes objetivos.
OBJETIVO GENERAL
- Conocer las técnicas, procedimientos y análisis que se desarrollan en el área de Química
Clínica, dentro del Laboratorio Clínico.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

- Conocer las técnicas mas usadas para el análisis clínico de las diferentes sustancias
químicas presentes en el cuerpo humano.

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1.0 TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA PARA EXAMENES DE QUIMICA CLINICA

PROPÓSITO:
Obtener sangre venosa para realizar pruebas de química sanguínea.

MUESTRA REQUERIDA:

de 5 a 10 Ml. De sangre venosa sin anticoagulante.

MATERIALES:

- Jeringa estéril para extraer 5 – 10 Ml. Con aguja 21 X 1 ½ o sistema de extracción al vacío.
- Torundas de algodón.
- Alcohol etílico (70%).
- Marcador de vidrio.
- Torniquete.
- Tubos sin anticoagulante 13 x 100 mm y tapón de hule o tubos del sistema de extracción al
vacío.
- Gradilla para tubos.
- Guantes descartables.

PROCEDIMIENTO:

- Lavar y secar las manos y colocarse los guantes.


- Identificar el tubo de acuerdo a la solicitud.
- Explicar al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.
- Sentar cómodamente al paciente para la extracción tomando en cuenta que el área de sangría
debe contar con suficiente iluminación.
- Seleccionar la vena apropiada para la punción.
- Realizar asepsia con torunda de algodón humedecida con alcohol etílico al 70% de adentro
hacia fuera.
- Colocar el torniquete firmemente alrededor del brazo, y pedir al paciente que abra y cierre la
mano varias veces para favorecer la dilatación de las venas.
- Proceder a puncionar la vena seleccionada.

- Colocar la aguja con el bisel hacia arriba sobre la vena a puncionar.


- Introducir la aguja en el centro de la vena y penetrar a lo largo de la vena de 1 a 1.5 cm.
- Tirar hacia atrás el émbolo de la jeringa muy lentamente para que penetre la sangre en la
jeringa hasta llenar con la cantidad de sangre necesaria. Si utiliza sistema de sangrado al vacío

7
introducir el tubo en el dispositivo (holder) de manera que al ejercer presión se atraviese el
extremo inferior de la aguja, para que la sangre fluya hacia el tubo por efecto del vacío.
- Retirar torniquete tirando del extremo doblado y colocar una torunda de algodón sobre la piel
donde se encuentra oculta la punta de la aguja.
- Extraer la aguja con un movimiento rápido por debajo de la pieza de algodón, pedir al
paciente que presione firmemente la torunda durante 3 minutos con el brazo extendido.
- Separar la aguja de la jeringa o del holder cuidadosamente, llenar los tubos deslizando la
sangre por las paredes del mismo.
- Esperar que la muestra se coagule a temperatura ambiente.
- Centrifugar la muestra a 3000 rpm por 10 minutos.
- Separar el suero del paquete globular.
- Verificar nuevamente la identificación del paciente.

FUENTES DE ERROR:

- Prolongada aplicación del torniquete.


- Extracción violenta de la sangre, que puede provocar hemólisis.
- Empleo de tubos mal lavados.
- Depositar la sangre en el tubo en forma violenta.
- Dejar los tubos con muestras destapados.
- Que el paciente no cumpla con las indicaciones de acuerdo al análisis químico a realizar.
- Separación inadecuada del coágulo antes de centrifugar (no poner en baño de María).
- Centrifugación inadecuada de la muestra.

RESPONSABLE:

Profesional en Laboratorio Clínico o Laboratorista.

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2.0 GLUCOSA SANGUÍNEA
MÉTODO ENZIMÁTICO – COLORIMÉTRICO SIN DESPROTEINIZACIÓN

PRINCIPIO:

La glucosa se determina después de la oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa. El


peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo catálisis de la peroxidasa con fenol y 4-
aminofenazona
produciendo un complejo rojo violeta usando la quinoneimina como indicador.

MUESTRAS REQUERIDA:

Para valor de glucosa en ayunas: Suero Tomado completamente en ayunas de 12 horas.


Para valor de glucosa posprandial: primera muestra completamente en ayunas de 12 horas y
segunda muestra 2 horas después de haber ingerido un desayuno completo.

MATERIALES Y REACTIVOS:

- Pipetas automáticas.
- Puntas plásticas.
- Tubos.
- Gradilla para tubos.
- Marcador para vidrio.
- Reactivo enzimático.
- Estándar de glucosa (concentración 100 mg/dL).
- Sueros controles comerciales.
- Papel toalla.
- Papel para film.
- Guantes descartables.

. EQUIPO:

- Espectrofotómetro.
- Baño de María con termómetro.
- Reloj marcador.

- Centrífuga.
- Refrigeradora.

9
PROCEDIMIENTO:

- Llevar los reactivos a temperatura ambiente.


- Los reactivos se preparan de acuerdo a las instrucciones del fabricante en el cual estará
indicado la estabilidad del reactivo.
- Rotular 4 tubos de la siguiente manera: blanco, estándar, muestra y control normal.

BLANCO ESTANDAR MUESTRA CONTROL


Agua destilada 10 ul
Estándar 10 ul
Muestra 10 ul
Suero control 10 ul
Reactivo 1000 ul 1000 ul 1000 ul 1000 ul

En caso que los Espectrofotómetros no lean la cantidad de 1 Ml, duplicar las cantidades.

- Mezclar e incubar de acuerdo a las indicaciones del fabricante.


- Leer a la longitud de onda indicada por el fabricante generalmente de 500 a 546 nm y de
acuerdo al equipo utilizado.

FUENTES DE ERROR:

- No llevar los reactivos a temperatura ambiente.


- Pipetas mal calibradas.
- Puntas en mal estado.
- No leer en la longitud de onda recomendada.
- Tubos sucios.
- Agua destilada de mala calidad.
- Reactivos vencidos o en mal estado.
- Pipeteado inadecuado.
- Separar el suero después de los 30 minutos de la recolección.

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FORMA DE REPORTE

Los valores de glucosa se reportan en mg/dL.

Cálculo:

Se puede calcular usando factor de calibración:


Lectura de la muestra
Concentración = Lectura del estandar X 100 mg/dl
Se puede calcular usando factor de calibración
Concentración del estándar
Factor de calibración =
Lectura del estandar
Glucosa en mg/dl = Factor de calibración x Lectura de la muestra

La prueba es lineal hasta la concentración de 1000 mg/dL (Revisar inserto incluido en el Set a
utilizar) .

Si la concentración de glucosa en la muestra es superior a estos límites diluir la muestra 1+2 con
agua destilada y repetir la determinación.

Multiplicar el resultado por 3.

Valor de referencia:

60 -115 mg/dL

RESPONSABLE:

Profesional en Laboratorio Clínico o Laboratorista

11
3.0 COLESTEROL

MÉTODO ENZIMÁTICO COLORIMÉTRICO PARA COLESTEROL CON


FACTOR ACLARANTE DE LÍPIDOS

PRINCIPIO:

El colesterol se determina después de la hidrólisis enzimática y la oxidación. En presencia de un


indicador el cual desarrolla el color de acuerdo a la concentración del colesterol presente en la
muestra.

MUESTRA REQUERIDA:

Suero tomado con 12 horas de ayuno.

MATERIALES Y REACTIVOS:

- Pipetas automáticas.
- Puntas plásticas.
- Tubos.
- Gradilla para tubos.
- Marcador para vidrio.
- Reactivo enzimático.
- Estándar de colesterol (concentración 200 mg/dL).
- Sueros controles comerciales.
- Papel toalla.
- Papel para film.
-Guantes descartables.

EQUIPO:

- Espectrofotómetro.
- Baño de María. con termómetro.
- Reloj marcador.
- Centrífuga.

- Refrigeradora con termómetro.

12
PROCEDIMIENTO:

- Llevar los reactivos a temperatura ambiente.


- Los reactivos se preparan de acuerdo a las instrucciones del fabricante en el cual estará
indicado la estabilidad del reactivo.
- Rotular 4 tubos de la siguiente manera: blanco, estándar, muestra y control normal.

BLANCO ESTANDAR MUESTRA CONTROL


Agua destilada 10 ul
Estándar 10 ul
Muestra 10 ul
Suero control 10 ul
Reactivo 1000 ul 1000 ul 1000 ul 1000 ul

En caso que los Espectrofotómetros no lean la cantidad de 1 mL, duplicar las cantidades.

- Mezclar e incubar de acuerdo a las indicaciones del fabricante.


- Leer a la longitud de onda indicada por el fabricante generalmente de 500 a 546 nm y de
acuerdo al equipo utilizado.

FUENTES DE ERROR:

- No llevar los reactivos a temperatura ambiente.


- Pipetas mal calibradas.
- Puntas en mal estado.
- No leer en la longitud de onda recomendada.
- Tubos sucios.
- Agua destilada de mala calidad.
- Reactivos vencidos o en mal estado.
- Pipeteado inadecuado.
BLANCO ESTANDAR MUESTRA CONTROL
Los valores de colesterol se reportan en mg/dL.

Lectura de la muestra
Concentración = Lectura del estandar X 200 mg/dl

Se puede calcular usando factor de calibración

Concentración del estándar


Factor de calibración =
Lectura del estandar
13
Colesterol en mg/dl = Factor de calibración x Lectura de la muestra
La prueba es lineal hasta la concentración de 750 mg/dL (Revisar técnica ya que depende de la
casa comercial).

Si la concentración del colesterol en la muestra es superior a estos limites diluir la muestra 1+2
con solución fisiológica y repetir la determinación.

Multiplicar el resultado por 3.

Valor de referencia:

Hasta 200 mg/dL

RESPONSABLE:

Profesional en Laboratorio Clínico o Laboratorista.

4.0 TRIGLICÉRIDOS
METODO ENZIMÁTICO COLORIMÉTRICO PARA
TRIGLICÉRIDOS ACLARANTES DE LÍPIDOS

PRINCIPIO:

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El triglicérido se determina después de la hidrólisis enzimática con lipasa. En presencia de un
indicador que desarrolla color de acuerdo a la concentración del triglicérido presente en la
muestra.

MUESTRA REQUERIDA:

Suero tomado con 12 horas de ayuno.

MATERIALES Y REACTIVOS:

- Pipetas automáticas.
- Puntas plásticas.
- Tubos.
- Gradilla para tubos.
- Marcador para vidrio
- Reactivo enzimático.
- Estándar de triglicéridos (concentración 200 mg/dL).
- Sueros controles comerciales.
- Papel toalla.
- Papel para film.
- Guantes descartables.

EQUIPO:

- Espectrofotómetro.
- Baño de María. con termómetro.
- Reloj marcador.
- Centrífuga.
- Refrigeradora con termómetro.

PROCEDIMIENTO:

- Llevar los reactivos a temperatura ambiente.


- Los reactivos se preparan de acuerdo a las instrucciones del fabricante en el cual estará
indicado la estabilidad del reactivo.
- Rotular 4 tubos de la siguiente manera: blanco, estándar ,muestra y control normal.

BLANCO ESTANDAR MUESTRA CONTROL


Agua destilada 10 ul
Estándar 10 ul
Muestra 10 ul
Suero control 10 ul
Reactivo 1000 ul 1000 ul 1000 ul 1000 ul

15
En caso que los Espectrofotómetros no lean la cantidad de 1 mL, duplicar las cantidades.
- Mezclar e incubar de acuerdo a las indicaciones del fabricante.
- Leer a la longitud de onda indicada por el fabricante generalmente de 500 a 546 nm y de
acuerdo al equipo utilizado.

7.4.6. FUENTES DE ERROR


- No llevar los reactivos a temperatura ambiente.
- Pipetas mal calibradas.
- Puntas en mal estado.
- No leer en la longitud de onda recomendada.
- Tubos sucios.
- Agua destilada de mala calidad.
- Reactivos vencidos o en mal estado.
- Pipeteado inadecuado.

7.4.7. FORMA DE REPORTE:

Los valores de triglicéridos se reportan en mg/dL.

Cálculo:

Lectura de la muestra
Concentración = Lectura del estandar X 200 mg/dl

Se puede calcular usando factor de calibración


Concentración del estándar
Factor de calibración =
Lectura del estandar
Trigliceridos en mg/dl = Factor de calibración x Lectura de la muestra

La prueba es lineal hasta la concentración de 1000 mg/dL (Revisar técnica ya que depende de la
casa comercial).

Si la concentración de triglicéridos en la muestra es superior a estos límites diluir la muestra


1+4 consolución salina fisiológica y repetir la determinación.

Multiplicar el resultado por 5.

Valor de referencia:

16
Sospechosos > 150 mg/dL.
Elevado > 200 mg/dL.

RESPONSABLE:

Profesional en Laboratorio Clínico o Laboratorista.


Factor de calibrac

5.0 ÁCIDO ÚRICO


MÉTODO ENZIMÁTICO COLORIMÉTRICO PARA ÁCIDO
ÚRICO ACLARANTES DE LÍPIDOS

PRINCIPIO:

El Ácido Úrico se determina después de la hidrólisis enzimática de la uricasa, que en presencia


de un indicador que desarrolla color rojo-violeta que es proporcional a la concentración de
Ácido Úrico presente en la muestra.

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MUESTRA REQUERIDA:

Suero (dentro de las 24 horas no ingerir embutidos, mariscos y carnes rojas).

MATERIALES Y REACTIVOS:

- Pipetas automáticas.
- Puntas plásticas.
- Tubos.
- Gradilla para tubos.
- Marcador para vidrio.
- Reactivo enzimático.
- Estándar de Ácido Úrico (concentración según lo indica el fabricante).
- Sueros controles comerciales.
- Papel toalla.
- Papel para film.
- Guantes descartables.

EQUIPO:

- Espectrofotómetro.
- Baño de María. Con termómetro.
- Reloj marcador.
- Centrífuga.
- Refrigeradora con termómetro.

PROCEDIMIENTO

- Llevar los reactivos a temperatura ambiente.


- Los reactivos se preparan de acuerdo a las instrucciones del fabri cante en el cual
estará indicado la estabilidad del reactivo.
- Rotular 4 tubos de la siguiente manera: blanco, estándar, muestra y control normal.

BLANCO ESTANDAR MUESTRA CONTROL


Agua destilada 20 ul
Estándar 20 ul
Muestra 20 ul
Suero control 20 ul
Reactivo 1000 ul 1000 ul 1000 ul 1000 ul

En caso que los Espectrofotómetros no lean la cantidad de 1 mL, duplicar las cantidades.

18
- Mezclar e incubar de acuerdo a las indicaciones del fabricante.
- Leer a la longitud de onda indicada por el fabricante generalmente de 500 a 546 nm y de
acuerdo al equipo utilizado.

FUENTES DE ERROR

- No llevar los reactivos a temperatura ambiente.


- Pipetas mal calibradas.
- Puntas en mal estado.
- No leer en la longitud de onda recomendada.
- Tubos sucios.
- Agua destilada de mala calidad.
- Reactivos vencidos o en mal estado.
- Pipeteado inadecuado.

FORMA DE REPORTE

Los valores de Ácido Úrico se reportan en mg/dL (Anexo 4).

Cálculo:

Lectura de la muestra
Concentración = Lectura del estandar X concentración de estándar
/(mg/dl)
Se puede calcular usando factor de calibración
Concentración del estándar
Factor de calibración =
Lectura del estandar
Acido Urico en mg/dl = Factor de calibración x Lectura de la muestra

La prueba es lineal hasta la concentración de 20 mg/dL.

Si la concentración de Ácido Úrico en la muestra es superior a estos límites, diluir la muestra


1+1con solución salina fisiológica y repetir la determinación.

Multiplicar el resultado por 2.

Valor de referencia:

19
Hombre: 3.4 – 7.0 mg/dL.
Mujer: 2.4 – 5.7 mg/dL.

RESPONSABLE:

Profesional en Laboratorio Clínico o Laboratorista.

6.0 DETERMINACION DE CREATININA EN SANGRE


FUNDAMENTO:
El ensayo de ña creatinina esta basado en la reacción de la creatinina con el picrato de sodio
descrito por jaffe.
La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo. El intervalo de
tiempo escogido para las lecturas permite gran parte de las interferencias del método.
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra
ensayada.
Especificaciones de desempeño del procedimiento:

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-limite de detección : o.ooo mg/dl
-linealidad: 35 mg/dl
Muestra requerida:
Suero libre de hemolisis plasma heparinizado.
Reactivo:
RT 1: Reactivo picrico, acido picrico
RT2: Reactivo alcalinizante, hidroxido de sodio
CREATINE CAL: Patron primario acuosos de creatinina 2 mg/dl
Preparación del reactivo:
Reactivo de trabajo: mezclar volúmenes iguales de R1 reactivo pícrico y de R2 reactivo
alcalinizante.
Almacenamiento y estabilidad:
-los frascos de reactivos deben de estar correctamente cerrados.

-La estabilidad del reactivo de trabajo es de 15 dias almacenando a una temperatura de 2 a 8 °c


o 7 dias a temperatura ambiente ( 15-25°c)
-Evitar la exposición del reactivo a la luz solar directa
-Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de caducidad.
Materiales:
-Equipo de protección personal.
-Cubeta de 1 cm de paso de luz
-Frascos lavadores
-Agua destilada
-Puntas
-Papel toalla, gradilla, plumón.
-Tubos tapon rojo
Equipos:

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-Equipo analizador
-Centrifuga
-Pipetas automáticas de volúmenes variables
-Cronometro
-Calculadora
Procedimiento:
-Encender el espectofotometro 15 min antes de iniciar su uso para estabilizar la lámpara.
-Seleccionar la longitud de onda a 492 nm (490-510)
-Calibrar el equipo

-Pipetear en los tubos 1 al 4 1000 ul de reactivo de trabajo previamente preparado.


-Colocar en la cubeta de lectura el reactivo de trabajo del tubo 1 y llevar a cero la lectura
-En el tubo 2 con RT colocar 100 ul de patrón mezclar y poner en marcha el cronometro.
-Leer la absorbancia al cabo de 30 segundos y al cabo de 90 segundos.
-Repetir este procedimiento con el control interno y luego con la muestra
Interferencias :
-Hemoglobina (1 g/l)
-Bilirrubina (155g/dl) interfiere
-Lipidos menor de 4 g/l no interfiere
Calculo de resultado:
Δ Abs Muestra – Δ Abs de Blanco
Δ Abs Patrón - Δ Abs Blanco x 2 (concentración del patrón )= mg/dl de
creatinina
Factor de conversión mg/dl x 88.4 = nmol/l
Intervalos de referencia:
Hombres: 0.7 a 1.4 mg]/dl = 61.8 – 123.7 nmol/l suero o plasma
Mujeres : 0.6 a 1.1 mg/dl = 53.0 – 97.2 nmol/l suero o plasma

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Orina: 15 a 25 mg/kg/24 horas

7.0 BIBLIOGRAFIA:

- MINISTERIO DE SALUD PÚBLICA Y ASISTENCIA SOCIAL. MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE LOS


LABORATORIOS CLÍNICOS, SEGUNDA EDICIÓN, EL SALVADOR, 2005
- ANGEL G. Y ANGEL M. INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LABORATORIOS, QUINTA EDICIÓN,
COLOMBIA, 1996.
- MANUAL DE PROCEDIMIENTOS TÉCNICOS OPERATIVOS DEL PRIMER NIVEL DE ATENCIÓN,
MINSAL.

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