T 2.

COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA Y EL CICLO

DEL ÁCIDO CÍTRICO

1.- COMPLEJO PDH: PRODUCCIÓN DE ACETIL-CoA

1.1.- Enzimas componentes de la PDH
1.2.- Coenzimas de la PDH
1.3.- Mecanismo de acción de la PDH

2.-REACCIONES DEL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO

2.1.- Formación del citrato
2.2.- Formación de isocitrato vía cis-aconitato
2.3.- Oxidación del isocitrato a α-cetoglutarato y CO2
2.4.- Oxidación del α-cetoglutarato a succinil-CoA y CO2
2.5.- Conversión de succinil-CoA en succinato
2.6.- Oxidación del succinato a fumarato
2.7.- Hidratación del fumarato a malato
2.8.- Oxidación del malato a oxalacetato

3.- BALANCE ENERGÉTICO DEL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO

4.- EL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO CONSTITUYE EL CENTRO DEL METABOLISMO INTERMEDIARIO
4.1.- Reacciones anapleróticas

5.- REGULACIÓN DEL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO

5.1.- Regulación a nivel del complejo de la piruvato deshidrogenasa
5.2.- Regulación a nivel de las tres etapas exergónicas del ciclo
5.3.- Canalización de sustratos a través de complejos multienzimáticos

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 T 2. COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA Y EL CICLO
DEL ÁCIDO CÍTRICO
Para la mayor parte de las células eucariotas, la glucólisis es la primera etapa de la oxidación completa
de la glucosa. El piruvato formado en la glucólisis, en vez de ser reducido a un producto de
fermentación, sufre una oxidación mayor hasta H2O y CO2. Esta fase aeróbica del catabolismo se
denomina respiración celular.
La respiración celular tiene lugar en tres fases
principales:

1. En la primera, las moléculas de combustible

orgánico – glucosa, ácidos grasos y algunos
aminoácidos – se oxidan para dar lugar a
fragmentos de dos átomos de carbono en forma
del grupo acetilo del acetil-coenzima A.

2. En la segunda fase, los grupos acetilo se

incorporan al ciclo del ácido cítrico, donde son
oxidados enzimáticamente hasta CO2. La energía
liberada en esta oxidación se conserva en los
transportadores de electrones reducidos NADH y
FADH2.

3. En la tercera fase de la respiración, estas

coenzimas reducidas son oxidadas liberando
protones (H+) y electrones. Los electrones son
transferidos a lo largo de una cadena de
moléculas transportadoras (cadena respiratoria)
al O2. Durante este proceso se libera una gran
cantidad de energía, que se conserva en forma de
ATP gracias al proceso llamado fosforilación
oxidativa.

1.- COMPLEJO PDH: PRODUCCIÓN DE ACETIL-CoA

Antes de entrar en el ciclo del ácido cítrico, los esqueletos carbonados de azúcares y ácidos grasos
deben ser degradados al grupo acetilo del acetil-CoA, la forma en que el ciclo del ácido cítrico acepta
la mayor parte del combustible aportado.

El piruvato, producto final de la glucolisis, debe transportarse desde el citosol a la mitocondria. Ello se
consigue con un transportador específico que facilita el movimiento de piruvato a través de la
membrana interna de la mitocondria. Una vez en la matriz mitocondrial, el piruvato es convertido en

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acetil-CoA por medio del complejo piruvato deshidrogenasa (complejo PDH). El complejo PDH no
forma parte del ciclo del ácido cítrico, proporciona el sustrato para el ciclo.
La reacción global catalizada por el
complejo PDH es una descarboxilación
oxidativa, un proceso de oxidación
irreversible en el que el piruvato pierde
un grupo carboxilo en forma de
molécula de CO2, mientras que los dos
carbonos restantes se transforman en el
grupo acetilo del acetil-CoA.

1.1.- Enzimas componentes de la PDH

El complejo PDH es un agregado de múltiples copias de tres - E1.- piruvato descarboxilasa, a

enzimas. Cada una cataliza una parte de la reacción total. Su veces llamada piruvato
asociación física enlaza las reacciones en la secuencia deshidrogenasa.
- E2.- dihidrolipoil transacetilasa.
adecuada sin la liberación de productos intermedios. Es un
- E3.- dihidrolipoil deshidrogenasa.
ejemplo de canalización de sustratos.

Además de las enzimas que participan en la conversión del

- Piruvato deshidrogenasa quinasa
piruvato a acetil-CoA, el complejo también contiene dos (PDH quinasa)
enzimas reguladoras fuertemente unidas. - Piruvato deshidrogenasa fosfatasa
(PDH fosfatasa)
1.2.- Coenzimas de la PDH

El complejo PDH contiene 5 coenzimas que actúan como portadores u oxidantes de los productos
intermedios de la reacción. Todas ellas, excepto el ácido lipoico, proceden de vitaminas (indicadas en
los bocadillos).
Tiamina
/ / B1 TPP, ácido lipoico y FAD
- E1 necesita pirofosfato de tiamina (TPP) son realmente grupos
- E2 necesita ácido lipoico y CoA. Ácido prostéticos al estar
- E3 necesita FAD y NAD+. pantoténico
unidos estrechamente a
Riboflavina las enzimas.
Niacina

● La coenzima A contiene un grupo tiol reactivo (–SH), de importancia fundamental en su papel como
transportador de grupos acilo en diversas reacciones metabólicas.

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Los grupos acilo se unen covalentemente al grupo tiol, formando tioésteres. A consecuencia de su
relativamente elevada energía libre de hidrólisis, los tioésteres tienen un elevado potencial de
transferencia de grupos acilo que les permite ceder estos grupos a diversas moléculas aceptoras. Así,
puede considerarse que el grupo acilo unido a la coenzima A, está “activado” para la transferencia del
grupo.

● El ácido lipoico tiene dos grupos tiol que pueden experimentar una oxidación reversible hasta formar
un enlace disulfuro (–S–S–). Gracias a esta capacidad de experimentar reacciones de oxidación-
reducción, el lipoato puede actuar a la vez como transportador de electrones y de acilos.

Lipoato unido por enlace amida a un

residuo de Lys.
La porción lipoil-lisilo es el grupo
prostético de la dihidrolipoil
transacetilasa. El grupo lipoilo
puede hallarse oxidado (disulfuro) o
bien reducido (ditiol) y actúa como
un transportador de hidrógeno y de
un grupo acetilo (u otro acilo).

● La tiamina pirofosfato (TPP) se requiere como coenzima en complejos enzimáticos asociados con el
metabolismo de carbohidratos y cadenas ramificadas de aminoácidos. Juega un papel importante en
la rotura de enlaces adyacentes a un grupo carbonilo y en la transferencia de grupos aldehído.

La parte funcional del TPP tiene un

protón en C2 relativamente ácido. La
pérdida de este protón produce la
especia activa, pues se adiciona
fácilmente a grupos carbonilo facilitando
la descarboxilación catalizada por la
piruvato descarboxilasa (E1).

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 1.3.- Mecanismo de acción de la PDH

En la figura se muestra esquemáticamente de qué modo el complejo de la piruvato

deshidrogenasa lleva a cabo las cinco reacciones consecutivas en la descarboxilación y
deshidrogenación del piruvato.

Las reacciones catalizadas por E3 en los pasos 4 y 5 son transferencias electrónicas necesarias para la
regeneración de la forma oxidada del grupo lipoilo de E2, preparando así el complejo enzimático para
otro ciclo oxidativo. Los dos brazos basculantes de lipoil-lisilo de E2 desempeñan un papel central en
este proceso al traspasar los dos electrones y el grupo acetilo derivados del piruvato desde E1 a E3.

https://twitter.com/i/status/
1127311082127753222

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Carencia del complejo piruvato deshidrogenasa. -
Una carencia parcial en la actividad del complejo PDH, aunque poco frecuente, es la causa
más común de acidosis láctica congénita. Esto genera problemas especialmente en el
encéfalo, que depende de la oxidación de la glucosa, ya que es incapaz de oxidar la mayoría
de los demás compuestos y es particularmente sensible a la acidosis.
¿Por qué un déficit de la actividad de la PDH desencadena una acidosis láctica?

Envenenamiento por arsénico. -

El arsénico (en forma de arseniato) puede interferir en la glucolisis en la etapa del
gliceraldehido 3-fosfato al competir con el fosfato, reduciendo por tanto la producción de
ATP. Sin embargo, el envenenamiento por arsénico se debe principalmente a su acción sobre
la PDH.
¿Cuál es el mecanismo de acción del arsénico (en forma de arsenito) sobre la PDH?

Puedes explicar por qué su cuantificación en el pelo se utiliza como técnica forense en caso
de sospecha de intoxicación por arsénico.

http://www.rtve.es/alacarta/audios/bioquimica-de-andar-por-casa/bioquimica-andar-casa-arsenico-16-01-
13/1688052/# T

Beriberi. -
¿Por qué en los pacientes con beriberi las concentraciones sanguíneas de piruvato, lactato y
alanina están elevadas después de una comida rica en hidratos de carbono? ¿Por qué esta
enfermedad es un importante problema de salud en el Extremo Oriente?

http://www.rtve.es/alacarta/audios/bioquimica-de-andar-por-casa/bioquimica-andar-casa-beriberi-11-03-13/1768738/#

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 2.-REACCIONES DEL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO

También llamado ciclo de los ácidos tricarboxílicos (ciclo TCA) o ciclo de Krebs. Proceso mediante el
cual se oxida el acetil-CoA .

Resumen .- Para iniciar una vuelta del ciclo, el acetil-CoA cede su grupo acetilo al oxalacetato, un compuesto de
cuatro átomos de carbono, formando una molécula de citrato, de seis carbonos. El citrato es entonces
transformado en isocitrato, otra molécula de seis carbonos, que al deshidrogenarse perdiendo CO2 genera α-
cetoglutarato, un compuesto de cinco átomos de carbono también llamado oxoglutarato. Este último compuesto
sufre la pérdida de una segunda molécula de CO2, produciendo finalmente succinato de cuatro carbonos. A
continuación, el succinato es convertido, mediante una secuencia de tres reacciones enzimáticas, en el compuesto
de cuatro carbonos oxalacetato, listo para reaccionar con otra molécula de acetil-CoA.

En cada vuelta del ciclo:

 Se produce la entrada de un grupo acetilo (dos carbonos) en forma de acetil-CoA y la salida de
dos moléculas de CO2.
 Se utiliza una molécula de oxalacetato para formar citrato y se regenera una molécula de
oxalacetato, no se produce una pérdida neta de este compuesto. En teoría, una sola molécula
sería suficiente para promover la oxidación de un número infinito de grupos acetilo; de hecho,
el oxalacetato se encuentra en las células en concentraciones muy bajas.
 Cuatro de los ocho pasos son oxidaciones en las que la energía de oxidación se conserva en
forma de coenzimas reducidas NADH y FADH2.

Todas las reacciones del ciclo del ácido cítrico tienen lugar en la mitocondria.

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 2.1.- Formación del citrato
La primera reacción del ciclo es la condensación del acetil-CoA con oxalacetato para dar lugar a citrato,
una reacción catalizada por la citrato sintasa.

En esta reacción, el carbono metílico

del grupo acetilo se une al grupo
carbonílico (C-2) del oxalacetato. La gran
variación de energía libre estándar resulta
esencial para el funcionamiento del ciclo a
consecuencia de la baja concentración de
oxalacetato presente. El CoA liberado en
esta reacción se recicla para participar en la
descarboxilación oxidativa de otra
molécula de piruvato.

2.2.- Formación de isocitrato vía cis-aconitato

La enzima aconitasa (aconitato hidratasa) cataliza la transformación reversible del citrato en isocitrato
a través de la formación intermedia del ácido tricarboxílico cis-aconitato, que normalmente no se
disocia del centro activo.
La aconitasa puede promover la adición
reversible de H2O al doble enlace del cis-
aconitato unido al enzima mediante dos
caminos diferentes, de los que uno conduce al
citrato y el otro al isocitrato.

En la célula la reacción transcurre hacia la

derecha gracias a la rapidez del consumo de
isocitrato en el siguiente paso del ciclo.

2.3.- Oxidación del isocitrato a α-cetoglutarato y CO2.

En el paso siguiente, la isocitrato deshidrogenasa cataliza la descarboxilación oxidativa del isocitrato
dando lugar a la formación de α-cetoglutarato.

Hay dos formas diferentes (isozimas) de isocitrato deshidrogenasa en todas las células, una de las
cuales requiere NAD+ como aceptor electrones (se encuentra en la matriz mitocondrial y actúa en el
ciclo del ácido cítrico), mientras que la otra requiere NADP+ (se encuentra tanto en la matriz
mitocondrial como en el citosol).

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 2.4.- Oxidación del α-cetoglutarato a succinil-CoA y CO2.
El paso siguiente es otra descarboxilación oxidativa por la que el α-cetoglutarato se convierte en
succinil-CoA y CO2 por acción del complejo de la α-cetoglutarato deshidrogenasa.

El NAD+ actúa como aceptor de

electrones y el CoA es el
transportador del grupo succinilo. La
energía de oxidación se conserva
gracias a la formación del enlace
tioéster del succinil-CoA.

Esta reacción es virtualmente idéntica a la reacción de la piruvato deshidrogenasa y el complejo de la

α-cetoglutarato deshidrogenasa es muy parecido al complejo de la piruvato deshidrogenasa. tanto en
estructura como en función. Posee tres enzimas homólogas a E1, E2 y E3, así como TPP, lipoato, FAD,
NAD y coenzima A.

2.5.- Conversión de succinil-CoA en succinato.

El succinil-CoA tienen un enlace tioéster con una energía libre estándar de hidrólisis altamente
negativa (ΔG’º≈ -36 kj/mol). En esta reacción la energía liberada en la rotura de este enlace se utiliza
para la síntesis de un enlace fosfoanhídrido del GTP o del ATP, con un ΔG’o neta de sólo -2,9 kj/mol.

La enzima que cataliza esta

reacción reversible se conoce como
succinil-CoA sintetasa o succínico
tioquinasa.

La formación de ATP (o GTP) a expensas de la energía liberada por la descarboxilación oxidativa del α-
cetoglutarato es una fosforilación a nivel de sustrato. El GTP formado por la succinil-CoA sintetasa
puede donar su grupo fosfato terminal a ADP para formar ATP, es una reacción reversible catalizada
por la nucleósido bifosfato quinasa:

GTP + ADP GDP + ATP ΔG’º = 0 kj/mol

Así, el resultado neto de la actividad de las dos isozimas es la conversión de la energía en forma de
ATP. No hay ninguna variación de energía libre en la reacción de la nucleósido bifosfato quinasa; el
ATP y el GTP son energéticamente equivalentes.

2.6.- Oxidación del succinato a fumarato.

El succinato es oxidado a fumarato por la flavoproteína succinato deshidrogenasa.
En eucariotas, la succinato deshidrogenasa se encuentra unida fuertemente a la membrana
mitocondrial interna; en procariotas, a la membrana plasmática.

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El malonato, un análogo del succinato, es un fuerte inhibidor competitivo de la succinato
deshidrogenasa y por lo tanto su adición a la mitocondria bloquea el ciclo del ácido cítrico.

2.7.- Hidratación del fumarato a malato

La hidratación reversible del fumarato a L-malato está catalizada por la fumarasa.
.

Esta enzima es altamente esteroespecífica; cataliza la

hidratación del doble enlace en trans del fumarato, pero
no el doble enlace en cis del maleato (el isómero cis del
fumarato). En la dirección inversa es igualmente
específica, el D-malato no es un sustrato.

2.8.- Oxidación del malato a oxalacetato.

En la última reacción, la L-malato deshidrogenasa ligada a NAD+ cataliza la oxidación del L-malato a
oxalacetato.

En condiciones termodinámicas
estándar, el equilibrio de esta reacción
se encuentra muy desplazado hacia la
izquierda pero, en las células, el
oxalacetato es eliminado
continuamente por la reacción
altamente exergónica de la citrato
sintasa, lo que empuja la reacción hacia
la formación de oxalacetato.

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 3.- BALANCE ENERGÉTICO DEL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO.

En cada vuelta del ciclo entra un grupo acetilo, de dos átomos de carbono, combinándose con el
oxalacetato y salen dos carbonos en forma de CO2, debido a la oxidación del isocitrato y el α-
cetoglutarato. La energía liberada en estas oxidaciones se ha conservado reduciendo tres NAD+ y un
FAD y produciendo un ATP. Al final del ciclo se ha regenerado una molécula de oxalacetato.

El ciclo no implica el consumo ni la producción netos de oxalacetato ni de ningún otro producto

intermediario. A pesar de que el ciclo en sí genera directamente sólo un ATP por vuelta, los cuatro
pasos de oxidación proporcionan un gran flujo de electrones hacia la cadena respiratoria vía NADH y
FADH2 y posibilitan de esta forma la formación de un gran número de moléculas de ATP durante la
fosforilación oxidativa.

2 C entran en el ciclo

Se liberan 2
moléculas de CO2

4 coenzimas reducidas
por cada acetil-CoA
oxidado a CO2

Se produce fosforilación
a nivel de sustrato

Estequiometría de la reducción de coenzimas y formación de ATP en la oxidación aeróbica de la glucosa

(glucólisis + piruvato deshidrogenasa + ciclo del ácido cítrico + fosforilación oxidativa):

Depende de
la lanzadera
utilizada
para su
transporte al
interior de la
mitocondria

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 4.- EL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO CONSTITUYE EL CENTRO DEL METABOLISMO INTERMEDIARIO.

El ciclo del ácido cítrico es una vía anfibólica, es decir, que participa tanto en procesos anabólicos como
catabólicos:

 Productos finales de cuatro y cinco átomos de carbono procedentes de muchos procesos

catabólicos alimentan el ciclo y sirven como combustibles. Tiene un papel clave en el catabolismo
oxidativo de glúcidos, ácidos grasos y aminoácidos (el oxalacetato y el α-cetoglutarato, por
ejemplo, se producen a partir de aspartato y glutamato, respectivamente, durante la degradación
de las proteínas).

 El ciclo proporciona precursores para muchas vías biosintéticas. Bajo ciertas circunstancias
metabólicas, los intermediarios son retirados del ciclo para ser utilizados como precursores en
multitud de vías biosintéticas.

El oxalacetato se
convierte en
glucosa mediante la
gluconeogénesis

El α-cetoglutarato
como precursor de
aminoácidos y
nucleótidos de
El oxalacetato
purina
como precursor de
aminoácidos y
nucleótidos de
pirimidina

En rojo se muestran cuatro

reacciones anapleróticas que El succinil-CoA, intermediario en
rellenan precursores agotados la síntesis del anillo de porfirina
(grupos hemo y citocromos)

4.1.- Reacciones anapleróticas

A medida que los intermediarios del ciclo del ácido cítrico son retirados para servir como precursores
biosintéticos, son repuestos mediante reacciones anapleróticas. En circunstancias normales, las
reacciones por las que los intermediarios del ciclo se dirigen hacia otras vías y aquellas que permiten
reponerlos se encuentran en equilibrio dinámico. Así, las concentraciones de los intermediarios del
ciclo del ácido cítrico permanecen prácticamente constantes.

La tabla siguiente muestra las reacciones anapleróticas más comunes; todas ellas convierten piruvato
o fosfoenolpiruvato en oxalacetato o malato en diversos tejidos y organismos.

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● La piruvato carboxilasa cataliza la reacción anaplerótica más importante en hígado y riñón, además
de proporcionar sustrato para la gluconeogénesis (Tema 1c).

Cuando el ciclo del ácido cítrico carece de

oxalacetato o de algún otro intermediario, se
carboxila piruvato para producir más
oxalacetato.

La piruvato carboxilasa es una enzima

reguladora y se encuentra prácticamente
inactiva en ausencia de acetil-CoA, su
modulador alostérico positivo. Siempre que el
acetil-CoA, el combustible del ciclo, esté
presente en exceso, se estimula la reacción de
la piruvato carboxilasa para producir más
oxalacetato, lo que permite que el ciclo utilice
más acetil-CoA en la reacción de la citrato
sintasa.

La reacción de la piruvato carboxilasa requiere la presencia de la

vitamina biotina, que actúa como grupo prostético del enzima. La
biotina juega un papel clave en muchas reacciones de carboxilación.
Es transportador especializado de grupos monocarbonados en su
forma más oxidada: CO2. Los grupos carboxilo son activados en una
reacción que rompe el ATP y une CO2 a la biotina ligada al enzima.
Este CO2 “activado” se transfiere entonces al aceptor en una
reacción de carboxilación.

La piruvato carboxilasa se compone de cuatro subunidades

idénticas, cada una de ellas contiene una molécula de biotina unida
covalentemente a través de un enlace amida al grupo ε-amino de un
residuo específico de Lys en el sitio activo de la enzima. La
carboxilación del piruvato tiene lugar en dos pasos:

 Un grupo carboxilo proveniente del HCO3- se une a la

biotina
 El grupo carboxilo se transfiere al piruvato para formar
oxalacetato

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Estos dos pasos tienen lugar en sitios activos diferentes; el brazo largo y flexible de la biotina transfiere
grupos carboxilo activados desde el primer sitio activo al segundo, actuando de un modo muy similar
al del largo brazo lipoil-lisina de E2 en el complejo de la piruvato deshidrogenasa y al largo brazo de la
porción tipo CoA de la proteína portadora de acilos que interviene en la síntesis de ácidos grasos.

Carencia de biotina.
La biotina es una vitamina necesaria en la dieta humana, es abundante en muchos alimentos y
es sintetizada por bacterias intestinales. La deficiencia en biotina es rara, pero puede aparecer
a veces cuando se consumen grandes cantidades de huevos crudos, ¿cuál es la razón?

Carencia de piruvato carboxilasa. -

La carencia de piruvato carboxilasa es una infrecuente enfermedad hereditaria con un patrón
recesivo que se caracteriza por elevación de la concentración sanguínea de piruvato, lactato y
alanina, acidosis metabólica, hipoglucemia y disfunción neuronal.
Explica el porqué de estos síntomas.

Interconexión entre el metabolismo de glúcidos y de lípidos. -

Normalmente los triglicéridos se metabolizan hasta acetil-CoA y posteriormente se procesan en
el ciclo del ácido cítrico. Si la glucosa puede ser sintetizada a partir de oxalacetato, un
intermediario del ciclo del ácido cítrico, ¿por qué motivo, tras un ejercicio intenso que agota las
reservas de carbohidratos, debemos regenerarlas comiendo carbohidratos? ¿Por qué no las
regeneramos simplemente convirtiendo las grasas en carbohidratos?

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 5.- REGULACIÓN DEL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO

El flujo de átomos de carbono desde el piruvato hacia el ciclo del ácido cítrico y a través de él está
sujeto a una estrecha regulación a varios niveles:

La conversión del piruvato en acetil-

CoA, el material de partida del ciclo.
La reacción del complejo de la
piruvato deshidrogenasa.

La entrada de acetil-CoA en el ciclo.

La reacción de la citrato sintasa.

NADH
El ciclo está regulado a nivel de las
reacciones de la isocitrato
deshidrogenasa

y de la α-cetoglutarato
deshidrogenasa.

5.1.- Regulación a nivel del complejo de la piruvato deshidrogenasa

● Regulación alostérica.-
El complejo de la piruvato deshidrogenasa es fuertemente inhibido por el ATP, así como por el
acetil-CoA y el NADH, los productos de la reacción catalizada por el complejo. La inhibición
alostérica de la oxidación del piruvato se incrementa enormemente cuando se hallan disponibles
ácidos grasos de cadena larga.
AMP, CoA y NAD+, todos ellos se acumulan cuando fluye poco acetil-CoA hacia el ciclo del ácido
cítrico, activan alostéricamente el complejo de la piruvato deshidrogenasa.

Así, esta actividad enzimática es anulada cuando se dispone de una gran cantidad de combustible en
forma de ácidos grasos y de acetil-CoA y cuando las razones [ATP]/[ADP] y [NADH]/[NAD+] de las células
son altas y es activada cuando las demandas energéticas son grandes y se necesita un flujo mayor de
acetil-CoA hacia el ciclo.

● Regulación mediante modificación covalente (fosforilación/desfosforilación). -

En mamíferos, estos mecanismos de regulación alostérica están complementados por un segundo
nivel de regulación mediante dos proteínas reguladoras asociadas al complejo.

Bioquímica II – Dpto. Medicina - UEM Página 15

 La PDH quinasa fosforila y, por consiguiente,
inactiva la E1. La quinasa es activada
alostéricamente por ATP, acetil-CoA y NADH:
en presencia de estas señales de alta energía
se desactiva el complejo PDH. El piruvato es
un potente inhibidor de la PDH quinasa, por
tanto, si las concentraciones de piruvato son
elevadas, la actividad de la E1 será máxima.

La PDH fosfatasa elimina el grupo fosforilo por

hidrólisis y activa E1. El Ca2+ es un potente
activador de la PDH fosfatasa y estimula la
actividad de la E1. Es particularmente
importante en el músculo esquelético.

Carencia del complejo piruvato deshidrogenasa. -

Se puede intentar el tratamiento haciendo que el paciente consuma una dieta pobre en hidratos
de carbono, que reduce la acidosis láctica. Sin embargo, el tratamiento más eficaz es el
dicloroacetato.
¿Cómo actúa el dicloroacetato?

Síndrome metabólico. -
A los pacientes con síndrome metabólico se les aconseja que eviten una alimentación rica en
grasas porque reduce la capacidad de oxidar glucosa. Explica cómo el metabolismo de las grasas
puede influir en el metabolismo de la glucosa.

¿Sería el dicloroacetato un tratamiento adecuado en estos pacientes?

Bioquímica II – Dpto. Medicina - UEM Página 16

5.2.- Regulación a nivel de las tres etapas exergónicas del ciclo

El flujo de metabolitos a través del ciclo del ácido cítrico está sometido a una regulación estricta. Tres
factores gobiernan la velocidad de flujo a través del ciclo:

 La disponibilidad de sustrato.
 La inhibición por los productos acumulados.
 La retroinhibición alostérica de las enzimas que catalizan etapas tempranas del ciclo.

Cada una de las tres etapas altamente exergónicas (ΔG0 muy negativo) en el ciclo – las catalizadas por
la citrato sintasa, la isocitrato deshidrogenasa y la α-cetoglutarato deshidrogenasa – pueden llegar a
ser la etapa limitante de la velocidad bajo determinadas circunstancias:

La disponibilidad de los sustratos para la citrato sintasa (acetil-CoA y oxalacetato) varía con el estado
metabólico de la célula y limita en ocasiones la velocidad de formación de citrato.

La acumulación de productos inhibe los tres pasos limitantes del ciclo:

o El NADH, un producto de la oxidación del

isocitrato y el α-cetoglutarato, se
acumula bajo ciertas condiciones y a
elevada [NADH]/[NAD+] ambas
reacciones de deshidrogenación son
inhibidas.
o El succinil-CoA inhibe la α-cetoglutarato
deshidrogenasa y la citrato sintasa.
o El citrato bloquea la citrato sintasa.
o El ATP, el producto final, inhibe tanto la
citrato sintasa como la isocitrato
deshidrogenasa. La inhibición de la
citrato sintasa por ATP es mitigada por
ADP, un activador alostérico de esta
enzima.

En el músculo, el Ca2+ (señal para la contracción y para un aumento en la demanda de ATP), activa
tanto la isocitrato deshidrogenasa como la α-cetoglutarato deshidrogenasa, así como el complejo
de la piruvato deshidrogenasa.

En resumen, las concentraciones de sustratos e intermediarios del ciclo del ácido cítrico hacen que el
flujo a través de esta vía se mantenga a una velocidad que permite mantener concentraciones óptimas
de ATP y NADH.

En condiciones normales, la velocidad de la glucólisis y del ciclo del ácido cítrico están integradas de
manera que sólo se metaboliza a piruvato la glucosa necesaria para suministrar al ciclo del ácido cítrico
su combustible, los grupos acetilo del acetil-CoA. Piruvato, lactato y acetil-CoA se mantienen
normalmente a concentraciones de estado estacionario. La velocidad de la glucólisis está adaptada a

Bioquímica II – Dpto. Medicina - UEM Página 17

la del ciclo del ácido cítrico, no sólo a través de su inhibición por niveles elevados de ATP y NADH, sino
también por la concentración de citrato. El citrato, producto del primer paso del ciclo, es un inhibidor
alostérico importante de la fosfofructoquinasa-1 en la vía glucolítica.

5.3.- Canalización de sustratos a través de complejos multienzimáticos

Aunque normalmente se describen las enzimas del ciclo

del ácido cítrico como solubles en la mitocondria
(excepto la succinato deshidrogenasa, que está ligada a
la membrana), aumentan las pruebas de que estas
enzimas se encuentran dentro de la mitocondria en
forma de complejos multienzimáticos. Los complejos
multienzimáticos aseguran el paso eficiente del producto
de una reacción enzimática a la siguiente enzima de la
ruta. Estos complejos se denominan metabolones.

Relación entre respiración y el ciclo del ácido cítrico. -

Aunque el oxígeno no participa directamente en el ciclo del ácido cítrico, el ciclo opera
únicamente cuando hay O2 presente. ¿Por qué?

El manuscrito en el que se proponía el ciclo del

ácido cítrico fue enviado para su publicación a
Nature pero fue rechazado. Por tanto, fue
publicado en Enzymología. A lo largo de su carrera
el Dr. Krebs exhibió con orgullo la carta de
rechazo para animar a los científicos jóvenes.

Bioquímica II – Dpto. Medicina - UEM Página 18