Clase 1y 2 .

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UNIVERSIDAD DE CARABOBO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


EDEPARTAMENTO DE CIENCIAS MORFOLÓGICAS MICROPSCOPICAS
HISTOLOGÍA Y EMBRIOLOGIA

UNIDAD No I: INTRODUCCIÓN AL ESTUDIO DE LA HISTOLOGIA Y


MORFOLOGIA CELULAR.
Clase 1: HISTOLOGIA: TECNICAS Y MICROSCOPIA

Prof. Alcira Argüello


CONTENIDO CLASE 1:

•Histología: Concepto y aplicaciones

•Técnica histológica: Etapas de la preparación de tejidos para


su estudio al microscopio óptico y electrónico.

•Histoquímica y Citoquímica: Aplicación, Tipos, fundamentos


químicos de la coloración.

•Microscopía: Tipos de microscopios y aplicación. Microscopio


óptico: partes y funcionamiento. Microscopio electrónico:
Barrido y de transmisión
HISTOLOGÍA: CONCEPTO Y APLICACIONES

Anatomía: estudio de la forma y la


estructura de los organismos vivos
organizados.

Anatomía Macroscópica: estudio de


las estructuras observables
a simple vista.
Anatomía Microscópica: aquella
que requiere auxiliares ópticos.
TEORIAS

Estudios como los que hicieron Virchow sobre la


estructura de los organismos vivos, que proponían a la
célula como la unidad básica estructural y funcional de
los seres vivos. “Las células se originan por división de
otras células”, proceso que se realiza en el núcleo.

❖ Las células se nutren, excretan, proliferan y cumplen


funciones básicas para su mantenimiento, por lo tanto
adquieren propiedades diferenciales que las
caracterizan como distintos tipos celulares, que
sintetizan, segregan y organizan componentes
extracelulares específicos.
CITOLOGIA: ESTUDIO DE LA CÉLULA

Tejido: agrupación de células con la misma función.

Órgano: unidad funcional mayor compuesto por distintos tipos


de tejido.

Sistemas de órganos: varios órganos con funciones relacionadas.

Sistemas difusos: grupos celulares con funciones relacionadas


localizadas en varios órganos distintos.

“La Histología representa el nexo de unión entre la bioquímica, la


fisiología y la genética, por un lado y los procesos patológicos y la clínica
por el otro”
HISTOLOGÍA
“Rama de la Anatomía que estudia los
Tejidos de animales y plantas”

FUNDAMENTO

El conocimiento del aspecto histológico normal es esencial


para poder identificar las estructuras normales y
comprender como la existencia de procesos bioquímicos y
fisiológicos normales determinan la estructura de células,
tejidos y órganos y los procesos anormales determinan la
enfermedad.
El estudio de la Histología en el año 1600
ORIGEN comenzó con el desarrollo del Microscopio
óptico y con técnicas sencillas para
preparar el material biológico para poder
examinarlo después

Las primeras investigaciones histológicas


se hicieron en el siglo XVII gracias a la
invención del microscopio óptico por
Anton Van Leeuwenhoek

❖Márcelo Malpighi es reconocido como


el fundador de la Histología

Año 1665: Hooke inventó Microscopio compuesto y descubre que


el tejido vegetal se constituye de pequeñas cámaras (células).
TÉCNICA HISTOLÓGICA:
ETAPAS DE LA PREPARACIÓN DE TEJIDOS PARA SU ESTUDIO AL
MICROSCOPIO ÓPTICO Y ELECTRÓNICO.

Preparación de Tejidos para Microscopía Óptica

Toma de Muestra:
Extirpación de pequeños fragmentos de tejido
(humano o animal). Puede obtenerse de
individuos vivos (biopsia) o muertos (necropsia)

Fijación: Es el primer paso en la preparación de una muestra y


su función es, Interrumpir los procesos de degradación que
aparecen tras la muerte celular (autolisis). Conservar la
arquitectura y composición tisular más próxima posible a como era
en el organismo vivo, destruir los microorganismos como las
bacterias, virus. Endurecer el tejido
Se utiliza Formalina (Formol 10% ) y/o congelación.
Deshidratación:
Se elimina completamente el agua del
tejido para poder embeberlo
adecuadamente en medios de inclusión (no
hidrosolubles). Se suele utilizar alcohol
etílico en concentraciones crecientes.
(70, 80, 95 y 100%)

Aclaramiento
En esta etapa intermedia se elimina el
alcohol del tejido y éste se impregna con
un solvente de la parafina. Usualmente se
realiza con el xileno (xilol). Le otorga
transparencia al tejido.
Infiltración o Inclusión en Parafina:
La parafina penetra en los tejidos y desplaza al
agente aclarante, durante 5 a 20 horas según la
naturaleza y las dimensiones de la muestra, luego
la muestra se deposita en pequeños recipientes y
se deja solidificar

Preparación del Taco o bloque de


tejido:

El bloque de parafina con la muestra incluida se


pega en un soporte de madera o plástico para
poder fijarlo al micrótomo
Obtención de un bloque sólido de tejido incluido,
por enfriamiento lento a 10-15°C.
Corte y Montaje:
Se realiza con un instrumento de precisión
llamado micrótomo, a fin de obtener cortes muy
delgados ( 8-10 µm) y uniformes que permitan
visualizar estructuras muy pequeñas.
Los tejidos fijados por congelación se seccionan
mediante un micrótomo de congelación o un
criostato, instrumentos adecuados para
mantener la muestra por debajo de -20°C
Desparafinación e Hidratación:
Este paso intermedio es necesario para
permitir la penetración del alcohol del paso
subsiguiente, ya que los solventes usados son
miscibles tanto en parafina como en alcohol
Hidratación: para permitir la penetración de
los colorantes, que en su mayoría están en
solución acuosa, la muestra se debe hidratar
en soluciones de etanol diluidas
progresivamente (100% > 95% > 80% > 70%)

Coloración:
Proporciona Contraste al tejido para ser estudiado al microscopio óptico.
El método de tinción de rutina es la Hematoxilina-Eosina (H.E.)
Preparación final del corte histológico procesado:
Aclaramiento: los reactivos utilizados (xilol) además de eliminar el alcohol, facilitan la
penetración de la resina del medio de montaje y otorga transparencia al corte de tejido

Montaje del cubreobjeto: a fin de obtener una preparación permanente, el corte se cubre
con un vidrio delgado, adherido con un medio de montaje natural (Bálsamo de Canadá) o
sintético

El xilol ayuda a otorgar más transparencia al


tejido facilita su visualización al microscopio
óptico.
Consideraciones Finales:

•La formalina no preserva todos los componentes celulares y


tisulares
NO ES ESPECÍFICO

•Durante la preparación (deshidratación, aclaramiento) de la


muestra se pierden muchos componentes estructurales:

•Dilución de los lípidos neutros (células adiposas) Fijación normal +


congelación y uso de colorantes liposolubles.

•No se conserva la estructura de la membrana celular Fijación con


Metales pesados.

•Algunas macromoléculas se pierden: Glucógeno, Proteoglucanos


Consideraciones Finales:
•Artefactos: Alteraciones visibles del tejido por fallas en alguna
de las etapas de la técnica:

•Desgarros y retracciones de elementos del tejido. Aparición de


espacios sin existencia real

•Fijador muy ácido: Aparición de gránulos coloreados pigmento


de formalina.

•Melladuras de la cuchilla del micrótomo Rayas en el tejido.

•Si el corte no se extiende bien sobre la lámina portaobjetos


Pliegues y arrugas.
Preparación de Tejidos para Microscopía
Electrónica de transmisión:

En la microscopía electrónica de transmisión se utilizan cortes


mucho más delgados y los tejidos son teñidos por técnicas de
precipitado de metales pesado.

1.-Toma de Muestra: piezas de no más de 1 mm3

2. Fijación: Glutaraldehído (Proteínas), paraformaldehido,


Tetróxido de ósmio (Lípidos), permanganato de potasio.

3. Deshidratación: Etanol y/o acetona en concentraciones


crecientes (Igual a M. óptica)

4. Aclaramiento: óxido de propileno (1-2 epoxipropano).


5. Inclusión: plástico (resinas). Epoxirresinas (araldite, resina epon y resina de
Spurr)

6. Confección de los bloques y cortes: Ultramicrotomo con cuchilla de vidrio o


diamante (20-100 nm). El corte se controla con un microscopio y se aumenta el
contrasta mediante el pasaje rápido por una solución de acetato de uranilo.
No es necesario eliminar el plástico de inclusión.

7. Montaje:
Los cortes ultrafinos se montan sobre un reticulado de cobre (“grilla”)
cubierto por una película plástica de sostén delgada.

8. Coloración:
Es necesario para aumentar el contraste mejora la visualización de los
detalles de la estructura celular.
Se utilizan materiales de gran densidad metales pesados Comienza añadiendo
en los pasos de la fijación, y deshidratación los colorantes (Osmio, Nitrato de
Uranilo) Inmersión secuencial en acetato de uranilo y citrato de Plomo.

Mayor Contraste y Mejor Resolución


Método de
Preparación
para Microscopía
Electrónica
INTERPRETACIÓN DE LOS CORTES HISTOLÓGICOS:

•Una vez que se obtiene el corte de tejido en una lámina, el estudiante debe
imaginarse lo que verá al microscopio

•Primero debe conocer el órgano que va a estudiar y visualizarlo en tres


dimensiones

•Entender sus características macroscópicas y tener nociones sobre su


estructura interna

•Recordando que los órganos son estructuras tridimensionales y cuando se


realiza un corte, lo que veremos en la lámina estará en dos dimensiones.
HISTOQUÍMICA Y CITOQUÍMICA

“Procedimientos químicos específicos que proporcionan información


detallada sobre sustancias químicas y componentes en las células
y tejidos.”

No son coloraciones sino reacciones fisicoquímicas cuyo producto


final es coloreado, con lo cual se identifica y localiza una molécula o
su actividad en la célula o tejido observado

Se fundamentan en: La unión específica a un colorante


HISTOQUÍMICA Y CITOQUÍMICA

Las técnicas histoquímicas también se utilizan para identificar y


localizar enzimas en células y tejidos, se demuestra la presencia y la
localización de un compuesto químico mediante su acción enzimática

La actividad enzimática inherente de un elemento constitutivo de las


células:

Digestión enzimática, localización de enzimas

Inmunohistoquímica Consisten en la visualización de un componente


celular (organoide, macromolécula) mediante una reacción antígeno-
anticuerpo

Radioautografía : Localiza material radioactivo en tejidos

Historradiografía : Imagen de rayos x de un corte histológico


FUNDAMENTOS QUÍMICOS DE LA COLORACIÓN

El fundamento de cualquier método de tinción radica en la propiedad que


tienen todos los tejidos para incorporar y fijar de modo variable
diversas sustancias coloreadas llamadas colorantes.

Según su afinidad tisular:


Colorantes Básicos o Catiónicos: (+)
Poseen una carga global positiva, por lo que reaccionan con los componentes aniónicos
de las células y los tejidos. Ej.: Hematoxilina, fucsina básica, verde de metilo,
pironina.

Colorantes Ácidos o Aniónicos: (-)


Poseen una carga global negativa, por lo que reaccionan con los componentes catiónicos
de las células y los tejidos. Ej: Eosina, fucsina ácida, azul de anilina, Naranja G.
HEMATOXILINA - EOSINA
 Hematoxilina- Eosina (H-E)
 Es una coloración que utiliza dos tipos
de colorantes.
 Fundamento:
 La hematoxilina es un colorante
básico, colorea los componentes
ácidos de la célula (núcleo) de color
azul o morado

La eosina: es un colorante ácido que


se une a estructuras básicas de la
célula (citoplasma) otorgándole una
tonalidad rosada.

Es decir, que ocurre una reacción


química entre una base y un ácido
para formar una sal coloreada
Colorantes neutros:
Su carga global es neutra por lo que conservan la
propiedad de colorear conjunta o separadamente
diversas estructuras.
Ej.: tinción de Giemsa. (Frotis de sangre)

Colorantes metacromático:
Colorantes básicos que reaccionan con algunas
estructuras tisulares y producen tonos de color
totalmente distintos al que se espera. Ej.: azul de
metileno o de toluidina

Colorantes indiferentes:

No poseen carácter ácido, básico o salino definido.


Colorean mediante impregnación. Ej.: Impregnación
de Plata.
Conceptos básicos: Propiedades de los tejidos

Acidofilia: capacidad de los grupos catiónicos de reaccionar con un colorante


ácido
Basofilia: capacidad de los grupos aniónicos de reaccionar con colorantes
básicos
Metacromasia. Capacidad de ciertos colorantes de cambiar su propio color en
contacto con otra sustancia
Ortocromasia: de color normal o que se tiñe normalmente

Ejemplos de Reacciones Histo/Citoquímicas

Reacción de Feulgen: Demuestra selectivamente el ADN (Rojo magneta)

Reacción de PAS (periodic acid-Schiff): Demuestra azúcares (glucógeno, moco,


membrana basal, glucoproteinas, fibras reticulares)

Van Gieson: fibras colágenas y elásticas

Orceína, Fucsina-Resorcina: Fibras y membranas elásticas (elastina)

Sudán Rojo: Lípidos

Azán
PAS o del ácido peryódico de Schiff

Se basa en la rotura de los enlaces -C-C- presentes en los carbohidratos


por la acción del ácido peryódico, potente agente oxidante, liberándose
grupos aldehído que al combinarse con el reactivo de Schiff dan un
compuesto de color rojo púrpura intenso. (fucsia) Se usa para determinar la
presencia de macromoléculas ricas en glúcidos como glucógeno,
glicoproteínas y glucosaminoglucanos.

Cuerpo Epidídimo de Conejo. PAS 400X


Cabeza del Epidídimo de Conejo. PAS 400X

color rosa-magenta: carbohidratos, mucoproteínas, proteoglicanos


VAN GIESON

Elástica de Van Gieson

Es una técnica Citoquímica para la


demostración de fibras colágenas y elásticas.

Núcleos celulares: Color marrón a negro.


Colágeno (tejido conectivo fibroso): Color rosa
o rojo.
Músculo y citoplasma: Color amarillo.
Bronquio secundario, Van Gieson.
Orceína (Fibras elásticas)
fibras elásticas de negro

Arteria
LIPIDOS

SUDÁN ROJO PARA TEÑIR LÍPIDOS SIMPLES

1º.- Cortes obtenidos por congelación (La


inclusión en parafina disuelve las grasas).

2º.- Introducir los cortes en la mezcla a


partes iguales de Sudan III y Rojo
Escarlata (filtrado). 24 horas.

3º.- Lavar en agua destilada.

4º.- Teñir los núcleos con Hematoxilina


de Groat-2 minutos.
Sudan Rojo . Arteria muscular (Grasas neutras
5º.- Lavar y secar con papel de filtro. rojo anaranjado)

6º.- Montar.
Azán (Azocarmin + Aniline blue)
Color Rojo
Esófago

Núcleos celulares

Color Rosa

Citoplasma celular(color rojo-naranja:


fibras musculares y hematíes)

Color Azul

Mucinógeno
Fibras de colágeno
INMUNOHISTOQUIMICOS
 Consisten en la visualización de un componente
celular (organoide, macromolécula) mediante
una reacción antígeno-anticuerpo.

 El elemento en estudio funciona como


antígeno (Ag), mientras que el anticuerpo (Ac)
específico se agrega a la preparación donde
se une con al Ag

 El Ac debe estar unido a un marcador que


permita su visualización mediante algún
sistema óptico

 En el laboratorio los Ac pueden purificarse de


la sangre y conjugarse con un colorante
fluorescente
MÉTODOS INMUNOHISTOQUIMICOS

 DIRECTO
 Esta técnica se vale de un Ac primario
marcado con Fluorocromo que reacciona con
el Ag dentro de la muestra
 Es un procedimiento de un solo paso y
comprende un solo Ac marcado.

 INDIRECTO
 Tiene mayor sensibilidad, el fluorocromo en
vez de conjugarse con un Ac primario, el
fluorocromo se conjuga con un Ac
secundario dirigido contra un Ac primario

 El método indirecto aumenta en forma


considerable la señal fluorescente emitida
por el tejido.
Detección de antígenos (biomoléculas) en células/tejidos
mediante anticuerpos marcados “in situ”.
TÉCNICAS INMUNOCITOQUÍMICAS
INMUNOFLURECESCENCIA

Fluoresceína

Vimentina
Rodamina

GFAP
INMUNOENZIMATICAS

Islotes de Langerhans (Páncreas)

Insulina

Glucagon
MICROSCOPIA

¿Qué es un Microscopio?
•Es un Instrumento que aumenta el tamaño de una imagen y
permite ver mayores detalles.

•La naturaleza de la imagen depende del tipo de luz o del


microscopio electrónico utilizado y de la forma de preparación
del tejido.

• Instrumento esencial en histología.


TIPOS DE MICROSCOPIOS
Microcopio Óptico compuesto
Campo claro
Campo oscuro
Contraste de fases
Fluorescencia
Con focal
Luz U.V.
Luz Polarizada
PARTES DE UN MICROSCOPIO ÓPTICO
COMPUESTO DE CAMPO CLARO
Mecánicas

•Cabezal
•Brazo
•Revolver
•Platina

•Carro (desplazamiento de la platina)

•Tornillos macrométrico y micrométrico

•Base
Ópticas e iluminación

•Lámpara (Foco)
•Condensador/Diafragma
•Objetivos
•Oculares
PODER DE RESOLUCIÓN
Es la capacidad de una lente o sistema
óptico del microscopio de producir
imágenes separadas de objetos que están
muy cerca uno de otro
Equivale a la distancia mínima en la cual
se distinguen dos objetos

PODER DE PENETRACIÓN
es el que permite observar diferentes
planos en una misma posición del enfoque.
❑ Poder de definición: es la capacidad de dar
imágenes claras de contornos nítidos.

❑ Distancia focal: es la distancia entre el


centro óptico de una lente y el foco donde se
reúnen todos los rayos luminosos que la
atraviesan.

❑ Distancia frontal: es la distancia entre la


preparación microscópica y la lente inferior
del objetivo.

❑ Objetivos secos: son objetivos que se utilizan


con interposición de aire entre la preparación
y el objetivo ( 4x. 10x, 20x, 40x) ¡No usar
aceite de inmersión!.

❑ Objetivos de Inmersión: son objetivos que se


utilizan interponiendo una delgada capa de
aceite entre la preparación y el objetivo.
(100x)
NIVELES MICROSCÓPICOS EN BIOLOGIA

Unidad de medida Valor de Método de estudio Estructura visualizada


la unidad
Milímetro (mm) 10 -3 Ojo Órganos, Tejidos
Lupa Células grandes
Micrómetro (µm) 10-6 Microscópios ópticos Tejidos, células
Organoide grandes
Nanómetro (nm) 10-9 Microscopia electrónica Componentes subcelulares
Microscopia de polarización Virus
Macromoléculas
Angstrom (Å) 10-10 Microscopia electrónica Estructura molecular
Difracción de rayos X Estructura atómica
Microscopia de efecto túnel
Ojo humano 0,2 mm
MO 0,2 µm Ovocitos de peces
MEB 2,5 nm

Ojo humano
MICROSCOPIO ÓPTICO DE CAMPO CLARO:
La luz atraviesa el objeto examinado y el objetivo capta la luz directa
proveniente de la fuente luminosa.

Uso: Académico, Diagnostico clínico (Bioanalisis, Citológico,


Anatomopatólogo), Investigación y Académico.
Se pueden observar: preparados al fresco, frotis o extendidos, cortes
histológicos.
Ejemplos Imágenes obtenidos con el Microscopio
Óptico de campo claro:

Imágenes: Dpto. Cs. Morfológicas y Forenses-FCS-UC


MICROSCOPIO ÓPTICO DE CAMPO OSCURO:

Sólo los rayos de luz refractados por las estructuras de la muestras son los
que penetran en el objetivo:
Gracias a un condensador especial que ilumina el preparado con mucha
intensidad pero en forma oblicua.
Se ve el campo oscuro y sobre el se destacan pequeñas partículas brillantes.
Proporciona mayor contraste.

Uso: Examinar preparados auto radiográficos. Examinar muestras no coloreadas:


Detectar cristales en la orina. Identificar Espiroquetas (Treponema pallidum)
M. ÓPTICO CONTRASTE DE FASE:

Aprovecha pequeñas diferencias en el índice de refracción existentes en las


diversas estructuras de la muestra examinada.
Las partes oscuras de la imagen corresponden a las regiones más densas.

Uso: Visualización de organismos vivos (parasitología) sin


colorantes.
MICROSCOPIO ÓPTICO DE FLUORESCENCIA:

Aprovecha la capacidad de algunas moléculas de Fluorescer bajo la luz UV


(emiten luz de una long de onda diferente a la luz que la hizo fluorescer)
Autofluorescencia (Vit A, algunos neurotransmisores)
Fluorescencia secundaria.
Se detectan moléculas mas pequeñas que el poder de resolución del microscopio.

Uso: Localización de estructuras específicas en células y tejidos


MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE
TRANSMISIÓN

Se utilizan electrones en vez de rayos de luz,


y como lentes funcionan unos electroimanes.

Tienen un poder de resolución muy elevado.

La longitud de onda de los rayos de


electrones es de 0,005 - 0,0003 nm, muy
corta comparada con la de la luz visible (426
- 750 nm; violeta - rojo).

Es posible resolver objetos separados por


una distancia de 0,003 µm, comparado con los
0,25 µm de uno óptico.
Los aumentos pueden llegar a ser de un millón
de veces.
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE TRANSMISIÓN

• Un filamento de tungsteno (cátodo) que


emite electrones.

• Condensador o lente electromagnética,


que concentra el haz de electrones.

• Objetivo o lente electromagnética, que


amplía el cono de proyección del haz de
luz.

• Ocular o lente electromagnética, que


aumenta la imagen.

• Proyector o lente proyectora. que amplía


la imagen.

• Pantalla fluorescente, que recoge la


imagen para hacerla visible al ojo humano.
Ejemplo de imágenes obtenidas con
Microscopio Electrónico de transmisión
M. ELECTRÓNICO DE BARRIDO
El haz de electrones no atraviesa la muestra sino que explora su superficie
(barre)
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO

•La principal ventaja es que muestra la superficie en tres dimensiones.

•La Mx debe ser preparada especialmente, bien fijada, deshidratada para


evitar distorsiones, luego montada y recubierta con metal pesado (oro o
platino) que dispersa electrones.

•El haz de electrones rastrea la superficie en vez de pasar a través de ella.


UNIVERSIDAD DE CARABOBO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS MORFOLÓGICAS MICROSCOPICAS
HISTOLOGÍA Y EMBRIOLOGIA
MEDICINA

UNIDAD I. INTRODUCCIÓN AL ESTUDIO DE LA

HISTOLOGÍA Y MORFOLOGÍA CELULAR

CLASE 2: MORFOLOGÍA CELULAR

Prof. Alcira Argüello


CONTENIDO CLASE 2: MORFOLOGÍA CELULAR

•La célula:
•Concepto.
•Tipos: Eucariotas y Procariotas.
•Función.
•Forma, Tamaño y Organización.

•Compartimentación celular:
•Citoplasma y núcleo.

•Citoplasma:
•Citosol
•Inclusiones
•Organelas citoplasmáticas:
•Membranosas
BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA CLASE 2:

Histología Texto y atlas color con Biología Celular.


Ross. 5ta Ed. Editorial Panamericana.

Biología celular y Molecular. Lodish. 4ta Edición


Editorial Panamericana.

 Histología de Genesser. Editorial panamericana



Texto atlas de Histología. Gartner. 3ra Edición. Ms
Graw Hill

 Histología de Ross. Texto y Atlas.


LA CELULA
Concepto: es la unidad estructural y funcional
básica de todos los organismos multicelulares y
esta dividida en dos compartimientos principales: el
citoplasma y el núcleo.

COMPONENTES QUIMICOS DE LAS CELULAS

Entre 70 – 80% de las células esta compuesto


por agua.

❑ El peso seco restante esta compuesto de


las siguientes moléculas:

➢ Componentes Inorgánicos: iones como


sodio, potasio y calcio.

➢ Componentes Orgánicos: Proteínas,


Hidratos de carbono, Lípidos y Ácidos
Nucleídos.
TIPOS DE CÉLULA

◼Procariotas: Células cuyo ADN se


encuentra disperso en el Citosol, son
menos complejas. No poseen núcleo.
Ej: Bacterias

◼Eucariotas: Células cuyo ADN se


encuentra limitado por membrana.
Poseen Núcleo. Ej: células animales y
vegetales
CÉLULA PROCARIOTAS

❑Es muy sencilla y se caracteriza por carecer de


membrana nuclear, por lo que el núcleo es difuso y el
material genético se encuentra libre en el
citoplasma.

▪ Su citoplasma no presenta prácticamente ningún


organelo y la membrana plasmática posee unos
pliegues hacia el interior.

▪En la parte externa se origina una envoltura


protectora y resistente, la pared celular, de
composición variada rígida y responsable de la forma
de la célula.
CELULA EUCARIOTA

❑ Son características de organismos mas evolucionados, posee


dos compartimientos principales núcleo y citoplasma,
delimitados por estructuras membranosas al igual que las
numerosas estructuras (Organoide) localizadas en el
compartimiento citoplasmático
CARACTERISTICAS FISIOLÓGICAS
DE LA CELULA:
Absorción: capacidad celular de captar sustancias del medio
circundante.

Secreción: capacidad de transformar moléculas absorbidas en un


producto específico que luego es transportado hacia el espacio
extracelular.

Excreción: capacidad de descartar los productos de desecho


formados por sus procesos metabólicos.

Respiración: capacidad de producir energía mediante la


utilización del oxígeno absorbido en la oxidación de los nutrientes.
CARACTERISTICAS FISIOLÓGICAS
DE LA CELULA:

Irritabilidad: capacidad de la célula de reaccionar ante un


estímulo.

Conductibilidad: capacidad de transmitir los efectos de la


estimulación hacia otras partes de la célula y hacia otras
células.

Contractibilidad: capacidad de la célula de acortarse en una


dirección determinada, como reacción a un estímulo.

Reproducción: capacidad de generar células nuevas por


partición de las ya existentes (división celular)
LA CÉLULA: TAMAÑOS, FORMAS Y
ORGANIZACIONES
La forma de las células está condicionada principalmente
por su función, aunque también influyen en algunos casos
factores mecánicos (disposición en masas).

◼El tamaño celular es muy variable. En general varía entre


10-60 µm (1 µm=1/1000 mm)
Capas, Epitelios, Folículos, Túbulos, Hileras
LA CÉLULA: COMPARTIMENTACIÓN
El Citoplasma
• Es la parte de la célula que está ubicada fuera del núcleo, contiene
organelos e inclusiones en un gel acuoso llamado Matriz
citoplasmática.

•La matriz está compuesta por una gran variedad de solutos(iones


inorgánico como Na+, K+ y Ca2+) y moléculas orgánicas como
metabolitos intermedios, carbohidratos, los lípidos, las proteínas y
ácidos ribonucleicos (ARN)

El Núcleo
• Es un compartimiento limitado por membrana que contiene el
genoma junto con las enzimas necesarias para la duplicación del ADN
y su transcripción en ARN.
INCLUSIONES CITOPLASMÁTICAS

•Son componentes celulares NO indispensables:

•Pueden ser sintetizados por la célula.


•Pueden ser captados del medio extracelular.
•Permanecen en la célula sólo por un tiempo limitado.

•Consisten principalmente en:


•Depósitos de nutrientes
•Pigmentos
•Depósitos de nutrientes:
•Hidratos de carbono (Glucógeno): Se encuentran libres en la
matriz citoplasmática. Ej.: hepatocitos y células musculares
estriadas.
•Gotas de lípidos: Son extraídos por los solventes orgánicos en la
preparación del tejido, por lo que se observan como espacios vacíos.

Hígado. H-E Hígado. Carmín de Best 400X Mesenterio. Rojo Sudan 50X
•Pigmentos:
•Pueden ser exógenos o endógenos.
•Exógenos:
•Carotenos → Piel (dermis, epidermis), Adipocitos.
•Polvo de carbón → Macrófagos alveolares (Pulmón)
•Endógenos:
•Hemoglobina: Hemosiderina, Bilirrubina
•Lipofuscina.

Pulmón. Células de Polvo Frotis Sangre periférica. Hemosiderina


MEMBRANA CELULAR O PLASMALEMA

• FUNCIONES
• Barrera permeable selectiva entre el
citoplasma y el medio extracelular

• Conserva la integridad estructural de la


célula

• Controla los movimientos de sustancias


hacia y desde el interior celular

• Regula interacciones entre células

• Reconoce, partículas extrañas y células


dañadas.
 La membrana plasmática es una
estructura dinámica que
participa activamente en
muchos procesos bioquímicos y
fisiológicos indispensables para
el funcionamiento y la
supervivencia de la célula

 La membrana está compuesta


por moléculas de fosfolípidos,
colesterol y dos tipos de
proteínas
COMPOSICIÓN MOLECULAR
Cabeza polar
hidrofílicas

 Las moléculas de lípidos forman un


estrato doble (bicapa lipídica) de
carácter anfipático (que tiene una
parte hidrófoba y otra parte
hidrófila) Colas aciloadiposas
hidrófobas

 La bicapa lipídica se compone de


una cabeza polar hidrofílicas (que
tiene afinidad por el agua) ,
localizada en la superficie de la
membrana y dos colas
aciloadiposas hidrófobas (sin
afinidad por el agua)
P. Periféricas
Integrales
PROTEINAS INTEGRALES
La mayoría de las proteínas integrales están incluidas dentro
de la bicapa lipidica o la atraviesan por completo. Las
proteínas integrales pueden verse mediante el uso de la
criofractura (MET),cuando se prepara el tejido por esta
técnica, es típico que las membranas se partan o dividan en Cara E (mas cerca del espacio extracelular)
dos caras internas, cara E y cara P

Cara P (se encuentra en el citoplasma,


más cerca del protoplasma)
Cada Hojuela o Cara
Compuesta por lípidos anfipáticos (Fosfolípidos y colesterol) y
proteínas.

Fosfolípidos: anfipáticos

Cabeza Polar (Hidrofílicas)


Dos colas No polares (Hidrofóbicas)

•Colesterol: Estabiliza la fluidez de la


membrana

•Proteínas: facilitan el paso de iones a


través de la membrana:

•Integrales o transmembranales:
abarcan la totalidad de la bicapa
lipidica

•Periféricas: están unidas a la


superficie citoplásmica de la bicapa y
se vincula con el sistema mensajero Modelo del Mosaico Fluido Modificado
secundario
PROTEINAS INTEGRALES
 Las proteínas integrales de la
membrana desempeñan funciones
importantes en el metabolismo, la
regulación y la integración de las células

 Existen seis categorías de acuerdo a su


función:
 Las bombas, sirven para transportar
activamente ciertos iones, como el Na+
 Los canales permiten el paso de iones y
moléculas pequeñas . (Difusión pasiva)
 Las proteínas receptoras permiten el
reconocimiento y la fijación localizada de
ligandos (moléculas que se unen la
superficie externa de la membrana)
 Las proteínas ligadoras fijan el
Citoesqueleto a la matriz
 Las enzimas desempeñan una gran
variedad de funciones
 Las proteínas estructurales se ven
mediante métodos especiales
LAS PROTEÍNAS PERIFÉRICAS

Las proteínas periféricas no


están insertados en la bicapa
lipídica, sino que se asocian con
la membrana plasmática por
medio de interacciones iónicas
fuertes, por lo que no forman
casi nunca uniones covalentes con
proteínas integrales o los
componentes fofolipídicos de la
membrana celular
En la superficie extracelular se pueden unir carbohidratos a
las proteínas, para formar glucoproteinas, o a los lípidos de la
bicapa para formar glucolípidos.

Estas moléculas asociadas forman una capa en la superficie de


la célula que se conoce como cubierta celular o glucocáliz
ALMADÍAS LIPÍDICAS

 Son regiones focalizadas de la


membrana plasmática que
contienen concentraciones
elevadas de colesterol y
glucoesfingolípidos

 Las almadías lipídicas contienen


una variedad de proteínas
integrales y periféricas de la
membrana que participan en los
procesos de señalización celular
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE TRANSMISIÓN

No se observa al Microscopio óptico con técnicas de rutina;


Puede verse con el Microscopio Electrónico de Transmisión.

La membrana está compuesta por


moléculas de fosfolípidos, colesterol y
proteínas

•El espesor total es de


aproximadamente 8-10 nm

•Estructura Trilaminar: → Bicapa


Lipidica

•Hojuela interna
•Hojuela externa
•Zona clara entre las hojuelas
RESUMEN

Cabeza polar
hidrofílicas

Colas aciloadiposas
hidrófobas
TRANSPORTE DE MEMBRANA
 Las sustancias que entran o salen de la célula tienen que atravesar la membrana
plasmática.
 Algunas sustancias (moléculas liposolubles o pequeñas sin carga), atraviesan la
membrana por difusión simple a favor de un gradiente de concentración
 Las demás moléculas requieren la participación de proteínas de transporte para poder
atravesar la membrana
TRANSPORTE DE MEMBRANA
 Proteínas transportadoras:
 Las moléculas hidrosolubles pequeñas requieren
proteínas transportadoras muy selectivas que
puedan hacerlas pasar la membrana, después de
fijar una molécula la proteína transportadora
sufre una serie de cambios de conformación y
libera la molécula del otro lado de la membrana

 Son muy selectivas.


 Pueden requerir energía (transporte
 activo) o no (transporte pasivo).

 Proteínas canal: transfieren moléculas


hidrosolubles pequeñas. Y crean canales
hidrófilos a través de la membrana plasmática
que regulan el transporte de la molécula
 Son selectivas para los iones y están reguladas de
acuerdo a las necesidades de la célula Ej. Las
neuronas
TRANSPORTE DE MEMBRANA
TRANSPORTE VESICULAR

Proceso que comprende cambios


conformacionales de la membrana
plasmática en sitios específicos y la
ulterior formación de vesículas desde la
membrana o la fusión de vesículas con
ésta.

Mantiene la integridad de la membrana


plasmática y contribuye a la
transferencia de moléculas entre los
diferentes compartimientos celulares

El mecanismo principal por el cual las


moléculas entran, salen o se mueven
dentro de la célula se llama Brotación
vesicular
TRANSPORTE VESICULAR

 El transporte vesicular en el que


participa la membrana celular se
denomina:

 Endocitosis: proceso de
transporte vesicular en el cual la
sustancia entra en la célula.

 Exocitosis: proceso inverso, es


decir, el transporte vesicular en
el cual las sustancias abandonan
la célula
ENDOCITOSIS
 La Endocitosis depende de tres  2) La Fagocitosis: es la incorporación
mecanismos: de partículas grandes como bacterias,
 La proteína que interacciona con la detritos celulares y otros materiales
membrana plasmática en la formación de extraños. Este proceso no requiere
vesículas se conoce como Clatrina clatrina, pero dado el gran tamaño de la
 1) La Pinocitosis: es la incorporación de vesícula, el Citoesqueleto tiene que
liquido y pequeñas moléculas proteicas a reorganizarse en un proceso que
requiere la despolimerización y la
través de vesículas de tamaño reducido y
es constitutiva, es decir que comprende repolimerización de los filamentos de
la formación dinámica continua de actina.
vesículas pequeñas en la superficie
celular, es una Endocitosis clatrina-  Endocitosis Clatrina-independiente
independiente pero actina-dependiente
ENDOCITOSIS
 3) Endocitosis Mediada por Receptores

 Permite la entrada de moléculas especificas


llamados receptores de carga, que se
acumulan en regiones bien definidas de la
membrana celular.

 Los receptores de carga reconocen y fijan


moléculas especificas que entran en
contacto con la membrana plasmática.

 Luego las moléculas de clatrina se agrupan y


forman una jaula similar a un cesto que
contribuye a cambiar la forma de la
membrana plasmática para que se produzca
una invaginación
 Endocitosis clatrina-dependiente
EXOCITOSIS

 Es el proceso por el cual una vesícula se


mueve desde el citoplasma hacia la
membrana plasmática, desde donde vierte
su contenido en el espacio extracelular

 Existen dos mecanismos:


 Mecanismo constitutivo las sustancias
destinadas a la exportación son enviadas en
forma continua hacia la membrana
plasmática en vesículas de transporte

 Mecanismo de secreción regulada células


especializadas como las células endocrinas,
exocrinas y las neuronas concentran las
proteínas de secreción y las almacenan
temporalmente en vesículas secretoras
dentro del citoplasma
RESUMEN
TRANSPORTE DE MEMBRANA
Proteínas por
Proteínas Proteínas
difusión
transportadoras canal
simple
RESUMEN
TRANSPORTE DE MEMBRANA
Proteínas por
Proteínas Proteínas
difusión
transportadoras canal
simple
TRANSPORTE DE VESICULAR ENDOCITOSIS

La Pinocitosis Endocitosis Clatrina-independiente

Endocitosis Clatrina-independiente
La Fagocitosis pero actina-dependiente

Endocitosis
Mediada Endocitosis Clatrina-dependiente
por Receptores

EXOCITOSIS
TRANSPORTE DE VESICULAR

Mecanismo constitutivo

Mecanismo de secreción regulada


ORGANELOS DEL CITOPLASMA

MEMBRANOSOS NO MEMBRANOSOS
( Presenta membrana plasmática que separan (Que carecen de membrana
el medio interno del organelo del citoplasma plasmática.) Responsables de la
circundante) Responsables de nutrición, forma, movimiento, reproducción
síntesis, respiración, metabolismo. celular.)

Retículo endoplasmático rugoso Microtúbulos


Retículo endoplasmático liso Microfilamentos
Aparato de Golgi Filamentos intermedios
Endosomas Centriolos
Lisosomas Ribosomas
Vesículas de transporte
Mitocondrias
Peroxisomas
ORGANELOS MEMBRANOSOS

• Retículo endoplasmático rugoso


•Retículo endoplasmático liso
•Aparato de Golgi
•Endosomas
•Lisosomas
•Vesículas de transporte
•Mitocondrias
•Peroxisomas
Retículo Endoplasmático
Sistema de sacos limitados por membrana
que forman una red anastomosada de
túbulos o bolsas aplanadas ramificados
llamados cisternas que tienen una
disposición en paralelo.

Se distinguen dos: REr y REl

RETICULO ENDOPLASMATICO FUNCIÓN


RUGOSO

▪Está formado por estructuras tubulares que


❑Se encuentra ubicado alrededor del núcleo. forman una red de canales con ribosomas adheridos
a la cara citoplasmática de los canales, es el sitio
donde se produce la síntesis de proteínas y
❑ Síntesis de Proteínas también condicionan su destino: hacia el espacio
extracelular como producto de secreción o como
componente de la membrana plasmática. Ej. células
acinares pancreáticas, serosas de las glándulas
salivales, glándula mamaria.
RETICULO ENDOPLASMATICO
RUGOSO

En microscopía óptica:

Se identifica el REr como una


región citoplasmática
intensamente basófila

Corresponde al ergastoplasma

La tinción basófila se debe a la


presencia de RNA. (componente
ácido)
RETICULO ENDOPLASMATICO ▪FUNCIÓN
LISO
▪Esta formado por una red de sacos membranosos
tubulares de superficie exterior lisa, sin
❑ Desintoxicación ribosomas. Es más abundante en poblaciones
❑ Metabolismo de lípidos y los esteroides celulares que sintetizan hormonas esteroideas,
❑ Metabolismo del glucógeno como la corteza suprarrenal y las células
❑ Formación y reciclaje de membranas intersticiales del testículo.

▪Es el principal organelo que interviene en la


desintoxicación y la conjugación de sustancias
nocivas

El Retículo endoplasmático liso (REl) es la


región del retículo endoplasmático
compuesta por cortos túbulos
anastomosados que no está asociada
con ribosomas.

La mayoría de las células No posee REl en


Abundancia.
Retículo endoplasmático Liso (REl)

Es una organela limitada a células activas


en:

• Producción de esteroides,
colesterol y triglicéridos

• Destoxificación de materiales o
sustancias tóxicas como el
alcohol, drogas

• Control de la contracción
muscular (células músculo
esquelético)

En microscopía óptica:

Se evidencia por su Acidofilia por lo


que se tiñe con la eosina.
Está polarizado morfológica y
funcionalmente:

Una cara formadora (Cis) ubicada más


Aparato de Golgi cerca del rER

Una cara madurativa (trans) más


alejada del rER

En microscopía óptica:
no se tiñe con H-E (zona paranuclear no
teñida).

Compuesta de múltiples cisternas


aplanadas

Se encargan de modificar el final,


clasificar y
empaquetar proteínas y lípidos para su
transporte intracelular y extracelular

Íntimamente relacionada con el Retículo


endoplasmático (casi siempre)

Esta bien desarrollado en las células


activamente secretoras.
Lisosomas:

Organelas citoplasmáticas
membranosas digestivas ricas en
enzimas hidrolíticas

Se encargan de la degradación
de macromoléculas derivadas de
los mecanismos endocíticos, así
como de la célula misma
(autofagia)
Endosomas:

Organelas citoplasmáticas estables o


estructuras temporarias formadas
como consecuencia de la endocitosis.

E. tempranos (precoces, iniciales):


encargados de clasificar y
reciclar las proteínas
incorporadas por endocitosis.

E. tardíos (avanzados, finales,


prelisosomas): destinados a
convertirse en lisosomas,
reciben enzimas lisosómicas
neosintetizadas.
MITOCONDRIA
Poseen ADN propio.

Llevan a cabo:
La Fosforilación oxidativa (respiración celular) → Formación ATP
(Energía)

Síntesis de lípidos

Microscopía electrónica

Poseen una doble membrana:

Membrana mitocondrial externa → Lisa

Membrana mitocondrial interna → Crestas


Tienen forma de grano,
filamento (1-10 µm).
bastón o
Mitocondria

Presentan una distribución uniforme


dentro del citoplasma, pero pueden
cambiar de ubicación y sufrir
modificaciones temporales en su
forma.

Se encuentran en todas las células


excepto en los glóbulos rojos y los
queratinocitos terminales.

En microscopía óptica

Se evidencia por coloranciones


diferenciales→ Hematoxilina Férrica
PEROXISOMA (MICROCUERPOS)
El peróxido de hidrógeno es una sustancia tóxica, por lo tanto la
catalasa que siempre esta presente en los peroxisomas, regula el
contenido celular de peróxido de hidrogeno y lo degrada para
proteger a la célula.

Características

Organelas limitadas por membrana simple que


contienen enzimas oxidativas y participan
en la producción y degradación del
peróxido de hidrógeno (H2O2) y en la
degradación de los ácidos grasos.

Son esféricos pequeños (0,5 µm de diámetro).

Se encuentran en la mayor parte de los tipos


celulares (aunque predominan en las
células hepáticas y renales)

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