Histología Introductorio

Histología
Microscopio
Es una herramienta que permite observar elementos que no pueden observarse o son
invisibles a simple vista, a través de lentes, visores y rayos de luz, que acercan o agrandan la
imagen en escalas convenientes para su examinación y análisis.
 Óptico: microscopio basado en lentes ópticas. También se le conoce como microscopio de luz (que
utiliza luz o «fotones») o microscopio de campo claro.
 Electrónico :usa electrones en lugar de fotones o luz visible para formar imágenes de objetos diminutos.
Técnicas histologícas
Pasos de la técnica histológica[editar]
 Obtención del material histológico para estudiar

 Proceso de fijación
 Lavados
 Deshidratación
 Aclaramiento
 Infiltración
 Inclusión
 Microtomía
 Tinción
 Observación (Este último no es considerado como un paso de la técnica histológica por varios autores)
Obtención del material histológico[editar]
Los tejidos se pueden obtener de diferentes formas:
 Biopsia
- Biopsia excisional - Biopsia incisional - Biopsía endoscópica - Biopsia colposcópica - Punción aspiración con
aguja fina (PAAF) - Biopsia por punción con aguja gruesa (Tru-cut)
 Necropsia/autopsia
Fijación[editar]
En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora, generalmente líquida, para evitar los
cambios post-mortem y para lograr conservar la forma original del tejido. Uno de los fijadores más usado es el
formol al 10% (formaldehído). En el caso de que realicemos estudios mediante el microscopio electrónico,
deberemos usar otros fijadores más específicos como paraformaldehído, glutaraldehído y tetróxido de osmio.
Lavados[editar]
Se debe lavar el tejido para quitar el exceso de fijador (químico). El exceso de fijador durante el posterior
proceso de infiltración, incluso en la microtomía, podría afectar los cortes histológicos, y por ello se debe lavar
con agua destilada.
Deshidratación[editar]
La deshidratación se realiza empleando diferentes soluciones de alcohol a concentraciones crecientes hasta
llegar a alcohol puro. La técnica de la parafina, para cortar fácilmente.
Aclaramiento[editar]
En este paso se sustituye el alcohol por una sustancia que haga de intermediario entre el agua y la parafina que
se usará posteriormente para la infiltración. La sustancia comúnmente utilizada es el xilol (xileno) aunque
también pueden usarse otros disolventes orgánicos como benceno. Tras varios baños, se consigue eliminar el
alcohol puro y todo el tejido queda impregnado del xilol, el cual habrá entrado hasta lo más profundo del tejido.
Durante este proceso el tejido pierde color dando lugar al término de aclaramiento.
Infiltración[editar]
La muestra se coloca en parafina histológica en estado líquido, lo cual se consigue calentando la parafina por
encima de su punto de fusión. Como se ha dicho en el paso anterior el tejido está completamente impregnado
de xilol que es un disolvente de la parafina, por lo que tras varios baños con concentración creciente de parafina
se consigue embeber todo el tejido en parafina pura.
La deshidratación, aclaramiento e infiltración pueden ser realizadas manualmente pero hoy en día se realizan
de modo automático en máquinas específicas.
Inclusión[editar]
Tiene como finalidad proporcionarle al tejido un soporte sólido que posibilite realizar un corte muy fino, por lo
que es de suma importancia que el medio utilizado para la inclusión penetre al interior del tejido. Aquí se forman
bloques de parafina dentro de los cuales están las muestras a estudiar. También hay máquinas especializadas
para la inclusión en parafina de tejidos. Después de su inclusión y posterior secado, estos se deben poner a
enfriar en un congelador para su posterior corte. Puede llevarse a cabo en Parafina
Microtomía[editar]
Se realizan cortes histológicos muy delgados según lo requerido o la costumbre del laboratorio donde se realice
la técnica. Los cortes van desde 0,5 micras hasta 8 u 10 micras. Los cortes se echan al baño de flotación y se
´pescan´ con un portaobjetos, se marcan con la fecha, el tipo de tejido y la tinción con que se van a procesar. El
ángulo de corte entre el cuchillo del microtomo y el bloque ha de estar entre 10° y 15º. Una vez realizado el
corte se da un baño de agua destilada, para que la parafina se estire. Un buen corte histológico debe tener un
grosor aproximado de 3-5 micras para que sea fácilmente atravesado por la luz del sol y atraviese los poros
celulares.
Tinción
Las células, por sí mismas, no poseen coloración. Por tanto, para poder observar la morfología tisular deben
"teñirse". Existen muchos tipos de tinciones para diferenciar las distintas estructuras o sustancias en los tejidos..
La tinción más usada o también llamada "de rutina" es la de hematoxilina y eosina (H&E). Se usa un colorante
llamado hematoxilina que tiñe las sustancias ácidas o que las contengan, como el núcleo que contiene ácido
desoxirribonucleico (ADN) La eosina amarillenta tiñe las estructuras básicas como el citoplasma y demás
orgánulos eosinofílicos de la célula.
Como se mencionó anteriormente hay muchas tinciones . Otros ejemplos son:
 Masson
 PAS
 Perls
 Plata metenamina
 Warthin-Starry
 Ziehl-Neelsen
 Van Gieson
 Azul alcian
 Sudán III
 Rojo Congo
Observación
Como se mencionó al principio algunos autores no consideran la observación como un paso de la técnica
histológica sino el objetivo final de la misma. Como se puede deducir, se observa la laminilla al microscopio y se
busca lo que se necesite ver para llegar a un diagnóstico.
La técnica histológica es muy empleada en laboratorios y hospitales. Permite hacer diagnósticos de distintas
enfermedades, como para saber si un tumor es maligno o benigno, etc.
Célula
Son los bloques estructurales básicos de los seres vivos. Todas las células se pueden clasificar
en dos grupos: eucariotas y procariotas.
Organelos citoplasmático
Los organoides u orgánulos citoplasmáticos presentes en el citoplasma cumplen diversos papeles
que responden a la función de nutrición de la célula, principalmente, además de contribuir con la
membrana plasmática en su función de relación, y con el núcleo en su función de reproducción.
Epitelio
Los epitelios se pueden clasificar segúna la morfología de sus células en plano, cúbico y
cilíndrico, y/o en base al número de capas en simples, cuando solo tienen una capa de células o
estratificados cuando se disponen en varias capas.
Los epitelios se pueden clasificar segúna la morfología de sus células en plano, cúbico y cilíndrico, y/o en
base al número de capas en simples, cuando solo tienen una capa de células o estratificados cuando se
disponen en varias capas

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Como se mencionó anteriormente hay muchas tinciones . Otros ejemplos son:

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