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    Base de Caldo para la Utilización de Carbohidratos ISO Cat.

    1342
    Para la confirmación de Listeria monocytogenes basada en la utilización de hidratos de carbono.

    Información práctica
    Aplicaciones Categorias
    Confirmación Listeria

    Industria: Clínica / Alimentación

    Regulaciones: ISO 11290

    Principios y usos
    La Base de Caldo para la Utilización de Carbohidratos es un medio recomendado para la confirmación de L. monocytogenes mediante las pruebas de
    fermentación de carbohidratos.

    El extracto de carne y la proteosa peptona proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El cloruro de
    sodio mantiene el equilibrio osmótico. El púrpura de bromocresol es el indicador de pH.

    El test de utilización de carbohidratos y otros métodos de confirmación de L. monocytogenes están recomendados por la ISO 11290. Las presuntas
    colonias son previamente inoculadas en agares no selectivos como el Agar Sangre Nº2 (Cat. 1328), donde se observa la beta hemólisis. Posibles
    reacciones positivas cambiarán el color de los tubos a amarillo. Los resultados negativos mantendrán el medio en color morado.

    Fórmula en g/L
    Extracto de carne 1 Púrpura de bromocresol 0,02
    Cloruro sódico 5 Proteosa peptona 10
    Fórmula típica g / L * Ajustada y/o suplementada según sea necesario para cumplir con los criterios de rendimiento.

    Preparación
    Suspender 16,02 gramos de medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver por calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un
    minuto hasta su completa disolución. Enfriar a 45-50 ºC, dispensar en tubos de 9 ml y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a
    45-50 ºC y agregar 1 ml de una solución filtrada al 5% de L-ramnosa o D-xilosa.

    Instrucciones de uso
    » Para el diagnóstico clínico, el tipo de muestra es sangre, líquido cefalorraquídeo (LCR), líquido amniótico.
    - Inocular cada colonia seleccionada en el Caldo de Utilización de Carbohidratos.
    - Incubar a 37 ºC durante 24-48 horas.
    - Lectura e interpretación de los resultados.

    » Para otros usos no cubiertos por el marcado CE:

    Confirmación de Listeria monocytogenes o Listeria spp. según la norma ISO 11290:


    - Inocular las colonias seleccionadas sobre la superficie de un agar no selectivo como el Agar Sangre Nº 2.
    - Incubar a 37 ºC durante 18-24 horas.
    - Utilizando un asa de siembra estéril, inocular cada uno de los Caldos para la Utilización de Carbohidratos con los cultivos obtenidos del agar no
    selectivo.
    - Incubar a 37 ºC durante 24-48 horas.

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    - Observar la formación de ácido (color amarillo del medio).

    Control de calidad
    Solubilidad Apariencia Color del medio deshidratado Color del medio preparado Final pH (25ºC)
    Sin restos Polvo fino Beige Morado 6,8±0,2

    Test microbiológico
    Condiciones de incubación: (35-37 ºC / 24-48 h)
    Condicionesde inoculación: Confirmación (colonia aislada)

    Microrganismos Especificación Reacción característica


    Listeria monocytogenes 4b ATCC 13932 Buen crecimiento L-Ramnosa (+), D-Xilosa (-)
    Listeria innocua ATCC 33090 Buen crecimiento L-Ramnosa (Variable), D-Xilosa (-)

    Almacenamiento
    Temp. Min.:2 ºC
    Temp. Max.:25 ºC

    Bibliografía
    Alonso, J.L. Soriano, K., Amoros I., Ferrus, M.A. 1998 Cevartitatine determination of E. coli and fecal coliforms in water using a
    chromogenic medium.
    UNE-EN ISO 11290-2 : 2002 Microbiology of Food and animal feeding. Horizontal Method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes.
    Part 2. Enumeration method.
    J.M. Farber and P.I. Peterkin 1991. Listeria monocytogenes, a Food-Borne pathogen.

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