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    Cultivo de Tejidos Vegetales

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    Este documento describe el cultivo de tejidos vegetales, una biotecnología que permite multiplicar plantas o sus órganos a partir de pequeños trozos de tejido vegetal en un medio estéril. Explica los fundamentos teóricos como la disección de tejidos meristemáticos y su cultivo en medios de nutrientes y hormonas. También describe los procedimientos de micropropagación usando nudos aislados y de regeneración induciendo la formación de callo y brotes con hormonas. El objetivo es la obtención de plantas

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    Cultivo de Tejidos Vegetales

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    Este documento describe el cultivo de tejidos vegetales, una biotecnología que permite multiplicar plantas o sus órganos a partir de pequeños trozos de tejido vegetal en un medio estéril. Explica los fundamentos teóricos como la disección de tejidos meristemáticos y su cultivo en medios de nutrientes y hormonas. También describe los procedimientos de micropropagación usando nudos aislados y de regeneración induciendo la formación de callo y brotes con hormonas. El objetivo es la obtención de plantas

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    Este documento describe el cultivo de tejidos vegetales, una biotecnología que permite multiplicar plantas o sus órganos a partir de pequeños trozos de tejido vegetal en un medio estéril. Explica los fundamentos teóricos como la disección de tejidos meristemáticos y su cultivo en medios de nutrientes y hormonas. También describe los procedimientos de micropropagación usando nudos aislados y de regeneración induciendo la formación de callo y brotes con hormonas. El objetivo es la obtención de plantas

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    Este documento describe el cultivo de tejidos vegetales, una biotecnología que permite multiplicar plantas o sus órganos a partir de pequeños trozos de tejido vegetal en un medio estéril. Explica los fundamentos teóricos como la disección de tejidos meristemáticos y su cultivo en medios de nutrientes y hormonas. También describe los procedimientos de micropropagación usando nudos aislados y de regeneración induciendo la formación de callo y brotes con hormonas. El objetivo es la obtención de plantas

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    Ministerio de

    Ambiente, Vivienda
    y Desarrollo
    Territorial

    DIPLOMADO VIRTUAL
    FORMACIN AVANZADA EN BIODIVERSIDAD Y CONSERVACIN
    CON NFASIS EN BIOSEGURIDAD

    BOGOT, D. C. DICIEMBRE DE 2008

    CULTIVO DE TEJIDOS
    VEGETALES
    DIPLOMADO VIRTUAL FORMACIN
    AVANZADA EN BIODIVERSIDAD Y
    CONSERVACIN CON NFASIS EN
    BIOSEGURIDAD

    JENNIFER BLANCO

    BOGOT, D. C. DICIEMBRE DE 2008

    CULTIVO DE TEJIDOS
    VEGETALES
    Es una biotecnologa por la cual las plantas o
    sus rganos se pueden multiplicar en gran
    nmero o su crecimiento individual puede ser
    controlado, a partir de
    pequeos
    trozos de tejido
    vegetal sobre una
    combinacin precisa de
    nutrientes en un recipiente
    estril. (Morgan 1987).
    Tomado de Vanegas 2008

    FUNDAMENTO TERICO
    Debe su origen a la investigacin sobre
    hormonas que controlan el crecimiento y
    desarrollo vegetal combinado con tcnicas
    bsicas de microbiologa.

    FUNDAMENTO TERICO
    Requiere la diseccin de la planta con el
    propsito de transferir su punto de crecimiento
    o tejido que crece activamente (los tejidos
    meristemticos) con seguridad y limpieza
    dentro de un recipiente estril sin introducir
    microorganismos contaminantes.

    FUNDAMENTO TERICO

    En algunos casos las clulas conformarn una


    masa aparentemente desorganizada, conocida
    como callo, en otros estarn presentes otras
    estructuras reconocibles como tallos, rganos,
    races, bulbos u otros rganos.

    FUNDAMENTO TERICO

    Multiplicacin

    de brotes de yemas
    terminales, axilares o laterales.
    Organognesis Directa
    Organognesis Indirecta
    Embriognesis Somtica

    FUNDAMENTO TERICO
    Gel acuoso solidificado con agar o medio lquido
    Macro y micronutrientes
    Vitaminas
    Azcares
    Cocktail de hormonas vegetales
    pH
    Esterilizacin

    Cultivo de Tejidos

    Tomado de Vanegas 2008

    FUNDAMENTO TERICO
    Micropropagacin
    Se obtienen poblaciones clonales de material
    introducido a condiciones in vitro o de
    regenerantes potencialmente transgnicos.
    Los explantes ms comnmente utilizados en
    los procesos de micropropagacin son los
    nudos.

    FUNDAMENTO TERICO
    Regeneracin
    Se utilizan entrenudos aislados de plntulas in
    vitro en los que se inducen procesos de
    organognesis adicionando hormonas vegetales
    que incluyen auxinas y citoquininas las cuales
    provocan la formacin de callo y posteriormente
    la formacin de brotes. Se agrega cefatoxina
    para eliminar el exceso de bacteria.

    OBJETIVO
    Obtencin de plantas transgnicas
    Obtencin del material fuente que
    posteriormente va a ser transformado
    Procesos de regeneracin y propagacin del
    material potencialmente transgnico
    obtenido despus del proceso de
    transformacin.

    PROCEDIMIENTO
    Medios de Cultivo
    Medio de micropropagacin MS
    complementado con AG3 0.1 mg/L. Los
    diferentes macro y microelementos se
    disponen en forma de nueve soluciones.
    pH 5,6

    PROCEDIMIENTO
    Medios de Cultivo

    Soluciones MS
    Sacarosa
    Agar
    Phytagel
    gua destilada
    Soluciones de NaOH 1N y HCl 1N

    PROCEDIMIENTO
    Micropropagacin
    Tomar cuidadosamente una plntula,
    ubicarla en la caja de petri.
    Cortar y aislar segmentos nodales
    (segmentos de 0.5-1 cm).

    PROCEDIMIENTO
    Micropropagacin
    Ubicar en el medio de cultivo de manera
    vertical.
    Tapar con vinilpel y llevar a cuarto de
    crecimiento (17-20C, fotoperodo 12/12 o
    16/8).

    PROCEDIMIENTO

    Tomado de Vanegas 2008

    PROCEDIMIENTO
    Regeneracin
    Preparar medio MS bsico slido (sin adicin
    de hormonas). Esterilizar en autoclave.
    Adicionar los siguientes componentes segn
    necesidad: AG3, ANA, AIA, ZR y cefatoxina.
    Servir

    en cajas de petri plsticas y


    almacenar en nevera hasta su uso.

    PROCEDIMIENTO
    Regeneracin
    Despus de realizar la transformacin ubicar entre
    10-15 explantes por caja.
    Mantener en cuarto de crecimiento (18C,
    fotoperodo 16/8 y HR 60%). Cambiar los explantes
    de medio cada tres semanas.
    Aislar los regenerantes cuando estn lo
    suficientemente grandes y micropropagar en medio
    MS con adicin de 0.1 mg/L de AG 3.

    RESULTADOS ESPERADOS
    Micropropagar

    nudos de plntulas in vitro de


    papa manteniendo su verticalidad, polaridad
    y la esterilidad del medio de cultivo.

    Sembrar

    entrenudos transformados de papa


    evitando la contaminacin del material con
    hongos y bacterias.

    CASO PAPA

    Tomado de Yaya y Chaparro 2006

    CASO ARROZ

    Tomado de Perafan 2008

    REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
    Roca, W. Mroginski, L. 1993. Cultivo de Tejidos en la
    Agricultura. Fundamentos y Aplicaciones. CIAT. Cal,
    Colombia.
    Morgan, W. 1987. In Vitro Cellular & Developmental Biology
    Plant. Springer Berlin / Heidelberg. Vol. 23 (3).

    GRACIAS POR SU
    ATENCIN !!

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